การกำหนดเนื้อหาของสารประกอบห้าชนิดในน้ำอสุจิ Rehmanniae และการสร้างลายนิ้วมือ HPLC

ตารางที่ 3 ผลลัพธ์ของการทดสอบการฟื้นตัว (n=6)

2.4 การกำหนดตัวอย่าง

Rehmannia หกชุดที่รวบรวมได้จัดทำขึ้นตามวิธีการภายใต้ "2.2.2" และสุ่มตัวอย่างและกำหนดตามเงื่อนไขโครมาโตกราฟีภายใต้ "2.1" ผลลัพธ์ของการกำหนดเนื้อหาแสดงไว้ในตารางที่ 4 ผลลัพธ์แสดงให้เห็นว่าในบรรดาองค์ประกอบทั้งห้านั้น ปริมาณของ rehmannia glycoside D สูงที่สุด โดยอยู่ในช่วงตั้งแต่ 0.460% ถึง {{1 0}}.730%; ปริมาณของลีโอนูริไกลโคไซด์เป็นอันดับสอง โดยอยู่ระหว่าง 0.100% ถึง 0.270% และเนื้อหาของส่วนประกอบทั้งสองในตัวอย่างจากพื้นที่การผลิตที่แตกต่างกันไม่แตกต่างกันอย่างมีนัยสำคัญ ในตัวอย่าง SX1 ยกเว้นเอคินาโคไซด์ ปริมาณของส่วนประกอบอีกสี่องค์ประกอบจะสูงกว่าปริมาณของตัวอย่างชุดอื่นๆ อย่างมีนัยสำคัญ เนื้อหาของ echinacoside, cistancheside A และ verbascoside ใน Rehmannia glutinosa จากพื้นที่การผลิตที่แตกต่างกันค่อนข้างแตกต่างกันและไม่สม่ำเสมอ

สมุนไพร CISTANCHE ด้วยความสม่ำเสมอคุณภาพดี

2.5 การจัดตั้งและการประเมินความคล้ายคลึงของลายนิ้วมือ HPLC ของ Rehmannia glutinosa

โครมาโตกราฟีและข้อมูลของการกำหนดปริมาณองค์ประกอบหลายองค์ประกอบใน Rehmannia glutinosa ถูกนำเข้าสู่ซอฟต์แวร์ "ระบบการประเมินความคล้ายคลึงกันของลายนิ้วมือโครมาโทกราฟียาสมุนไพรจีน (20ฉบับ 12)" และเลือกโครมาโตแกรมของตัวอย่างทดสอบ SX1 เป็นสเปกตรัมอ้างอิง ความกว้างของหน้าต่างเวลาถูกตั้งค่าเป็น 0.10 นาที และใช้วิธีมัธยฐานเพื่อสร้างสเปกตรัมซ้อนทับและสเปกตรัมอ้างอิง มีการระบุพีคทั่วไปทั้งหมด 23 พีค (ดูรูปที่ 3) ความคล้ายคลึงกันระหว่างลายนิ้วมือของตัวอย่าง Rehmannia glutinosa และค่าอ้างอิงคือ 0.904~0.950 ซึ่งบ่งชี้ว่าตัวอย่างของ Rehmannia glutinosa จากพื้นที่การผลิตที่แตกต่างกัน และระหว่าง Rehmannia glutinosa ดิบกับ Rehmannia glutinosa ที่ปรุงสุกมีความคล้ายคลึงกันและมีความสม่ำเสมอในคุณภาพดี

ตารางที่ 4 ผลการตรวจวัดปริมาณส่วนประกอบ 5 ชนิดในน้ำอสุจิ Rehmanniae/%

13. เรห์มานนิโอไซด์ ดี; 17. ลีโอนูไรด์; 19. เอชินาโคไซด์; 20. แคสทาโนไซด์เอ; 21.แอคทีโอไซด์

รูปที่ 3 การซ้อนทับโครมาโตกราฟี HPLC ของ Semen Rehmanniae 6 ชุด (SX1-SX4, HN1, HN2) และการอ้างอิง (R)

3 การอภิปราย

3.1 การเลือกเงื่อนไขโครมาโตกราฟี

มีการตรวจสอบระบบเฟสเคลื่อนที่สี่ระบบ ได้แก่ อะซีโตไนไตรล์-น้ำ, อะซิโตไนไตรล์-0.1% สารละลายกรดฟอร์มิก, เมทานอล-น้ำ และเมทานอล-0.1% สารละลายกรดฟอร์มิก ได้รับการตรวจสอบในการศึกษานี้ ผลการวิจัยพบว่าส่วนประกอบทั้งห้ามีผลการแยกตัวที่ดีในระบบอะซิโตไนไตรล์ เมื่อเปรียบเทียบกับระบบเฟสเคลื่อนที่ของอะซิโตไนไตรล์-น้ำ ยอดของ rehmannia glutinosa และ motherwort glycosides ใน acetonitrile-0.1% เฟสเคลื่อนที่ของสารละลายกรดฟอร์มิกแคบกว่าและมีความสมมาตรสูงสุดที่ดี ในเวลาเดียวกัน เนื่องจากการดูดกลืนรังสีอัลตราไวโอเลตที่แตกต่างกันของส่วนประกอบทั้งห้า เนื้อหาของส่วนประกอบจึงแตกต่างกันอย่างมาก เพื่อให้ระบุเนื้อหาของแต่ละส่วนประกอบได้แม่นยำยิ่งขึ้น และเพื่อให้แน่ใจว่าความเข้มของการดูดกลืนแสงของส่วนประกอบทั้งห้ามีการกระจายเท่าๆ กันในโครมาโตกราฟีเดียวกัน การดูดกลืนแสงอัลตราไวโอเลตของเรห์มานเนียไกลโคไซด์ดี, มาเธอร์เวิร์ตไกลโคไซด์, เอคินาโคไซด์, ซิสแทนคีไซด์ A และเวอร์บาสโคไซด์ได้รับการวิเคราะห์ และเลือกการกำหนดความยาวคลื่นแบบแปรผันได้ นั่นคือ 0-24 นาที เรห์แมนเนียไกลโคไซด์ที่แยกครั้งแรกถูกกำหนดที่ 203 นาโนเมตร และ 24-40 นาที หาเอไคนาโคไซด์, ซิสแทนเชไซด์ A และเวอร์บาสโคไซด์ที่แยกออกจากกันที่ 330 นาโนเมตร นอกจากนี้ การศึกษานี้ยังศึกษาผลการสกัดของเมทานอล สารละลายเมทานอล 70% สารละลายเมทานอล 50% และสารละลายอะซิโตไนไตรล์ 50% เป็นตัวทำละลายในการสกัด ผลการวิจัยพบว่าสารละลายเมทานอล 70% เป็นตัวทำละลายในการสกัดสามารถละลายส่วนประกอบที่จะทดสอบได้ดีขึ้น และตัวอย่างที่สกัดได้มีสิ่งเจือปนน้อยลง ดังนั้น การศึกษานี้จึงเลือกเมธานอล 70% เป็นตัวทำละลายในการสกัด สารละลายกรดฟอร์มิกอะซิโตไนไตรล์-0.1% เป็นระบบเฟสเคลื่อนที่ และใช้ความยาวคลื่นแปรผันเพื่อกำหนดปริมาณของส่วนประกอบทั้งห้าใน Rehmannia

3.2 การวิเคราะห์ผลการตรวจวัดตัวอย่าง

จากผลการพิจารณา จะเห็นได้ว่าหลังจากการนึ่ง ยกเว้นปริมาณเอชินาโคไซด์ที่เพิ่มขึ้นเล็กน้อย ปริมาณของส่วนประกอบอีก 4 ชนิดลดลงอย่างมีนัยสำคัญ โดยเฉพาะปริมาณของลีโอนูริไซด์และซิสแทนชีไซด์ A; เนื้อหาของ rehmannia glycoside D และ cistancheside A ใน Rehmannia glutinosa จากพื้นที่การผลิตเดียวกันแตกต่างกันเล็กน้อย และเนื้อหาของ leonuriside, echinacoside และ verbascoside แตกต่างกันอย่างมีนัยสำคัญ ปริมาณเอไคนาโคไซด์ใน Rehmannia glutinosa จากพื้นที่การผลิตเหอหนานสูงกว่าปริมาณตัวอย่างจากพื้นที่การผลิตชานซีอย่างมีนัยสำคัญ และเนื้อหาของส่วนประกอบอีกสี่องค์ประกอบแตกต่างกันเล็กน้อย ในเวลาเดียวกัน ตามลายนิ้วมือ HPLC ที่สร้างขึ้นในการศึกษานี้ ความคล้ายคลึงกันระหว่างตัวอย่าง Rehmannia 6 ชุดและลายนิ้วมือควบคุมคือ 0.904~0.950 ซึ่งบ่งชี้ว่าสารเคมีหลัก ส่วนประกอบของตัวอย่าง Rehmannia ทั้ง 6 ชุดก่อนและหลังการประมวลผลมีความสอดคล้องกันสูง

โดยสรุป วิธีการกำหนดเนื้อหาและลายนิ้วมือ HPLC ที่สร้างขึ้นในการศึกษานี้มีความถูกต้อง เชื่อถือได้ และมีความจำเพาะที่ดี สามารถใช้เพื่อระบุลักษณะการเปลี่ยนแปลงในส่วนประกอบและระดับของการประมวลผล Rehmannia glutinosa ก่อนและหลังการประมวลผล และให้การสนับสนุนทางเทคนิคสำหรับการควบคุมคุณภาพของ Rehmannia glutinosa อย่างไรก็ตาม การศึกษานี้มีข้อเสียคือกลุ่มตัวอย่างจำนวนน้อยและพื้นที่การผลิตครอบคลุมไม่ครบถ้วน ซึ่งต้องมีการวิเคราะห์และตรวจสอบเพิ่มเติม

อ้างอิง

[1] คณะกรรมการเภสัชตำรับจีน เภสัชตำรับของสาธารณรัฐประชาชนจีน: เล่มที่ 1 [S] ปักกิ่ง: สำนักพิมพ์วิทยาศาสตร์การแพทย์และเทคโนโลยีของจีน, 2020: 129-130

[2] ซู จุน ฟู เจ๋อถง การวิจัยเกี่ยวกับวิวัฒนาการทางประวัติศาสตร์ของชื่อของ Rehmannia glutinosa ที่ผ่านการแปรรูป และการศึกษาประสิทธิภาพของมัน [J] แพทยศาสตร์สิทธิบัตรจีน, 2017, 39 (9): 1913-1916

[3] Zhu Jue, Zhu Xiangmei, Shi Yuhe และคณะ ความคืบหน้าการวิจัยเกี่ยวกับ Rehmannia glutinosa และการวิเคราะห์การทำนายของเครื่องหมายคุณภาพ [J] แพทยศาสตร์สิทธิบัตรจีน, 2022, 45 (2): 1273-1281

[4] Chen Jinpeng, Zhang Kexia, Liu Yi และคณะ ความคืบหน้าการวิจัยเกี่ยวกับองค์ประกอบทางเคมีและผลทางเภสัชวิทยาของ Rehmannia glutinosa [J] ยาสมุนไพรจีน, 2022, 52 (6): 1772-1784

(5) หลี่ หงเว่ย, เมิ่ง เซียงเล่อ ความคืบหน้าการวิจัยเกี่ยวกับส่วนประกอบทางเคมีและผลทางเภสัชวิทยาของ Rehmannia glutinosa［J］

การวิจัยประเมินยา, 2015, 38(2): 218-228

[6] Zhang Boyong, Jiang Zhenzuo, Wang Yuefei และคณะ การวิเคราะห์องค์ประกอบทางเคมีของ Rehmannia glutinosa สด Rehmannia glutinosa ดิบ และ Rehmannia glutinosa ที่ปรุงสุกโดย UPLC/ESI-Q-TOF MS［J］ แพทยศาสตร์สิทธิบัตรจีน, 2016, 38(5): 1104-1108

[7] Zhang Lixian, Wei Yue, Li Feifei และคณะ การจดจำรูปแบบลายนิ้วมือและการกำหนดเนื้อหาหลายองค์ประกอบของผลิตภัณฑ์ Rehmannia glutinosa ที่ผ่านการประมวลผลต่างๆ ［J］ วิทยาศาสตร์การเกษตรหูเป่ย, 2023, 62(9): 135-141

[8] Chen Jinpeng, Zhang Kexia, Liu Yi และคณะ ความคืบหน้าการวิจัยเกี่ยวกับส่วนประกอบทางเคมีและผลทางเภสัชวิทยาของ Rehmannia glutinosa［J］ ยาสมุนไพรจีน 2021, 52(6): 1772-1784

[9] เถายี่, เจียงหยานฮุย, ถังเค่อเจี้ยน และคณะ การศึกษาเปรียบเทียบองค์ประกอบทางเคมีของ Rehmannia glutinosa ก่อนและหลังการแปรรูปโดย UHPLC-Q-TOF/MS［J］ ยาจีนใหม่และเภสัชวิทยาคลินิก, 2016, 27(1): 102-106

［10］ ซู่โจว, ไต้ซินซิน, ซู ชูหลาน, และคณะ การสะสมแบบไดนามิกของส่วนประกอบของนิวคลีโอไซด์และกรดอะมิโนใน Rehmannia glutinosa โดยอาศัย UPLC-TQ-MS［J］ ยาสมุนไพรจีน 2021, 52(23): 7323-7330

［11］ หลี่ อวี้เจียว. การศึกษาเทคโนโลยีและกลไกการประมวลผลของ "การนึ่งเก้าครั้งและการสัมผัสเก้าครั้ง" ของ Rehmannia glutinosa［D］ จี่หนาน: มหาวิทยาลัยซานตง, 2023.

［12］ หวัง เย่ว์, โจว เฉียว, จาง เสวี่ยหลาน และคณะ HPLC การระบุปริมาณส่วนประกอบทั้ง 8 ชนิดใน Rehmannia glutinosa และผลิตภัณฑ์แปรรูปต่างๆ พร้อมกันโดยการวิเคราะห์ลายนิ้วมือ UPLC และการกำหนดปริมาณส่วนประกอบหลายดัชนี [J] วัสดุยาจีน, 2021, 44 (7): 64-68

(13) กัว เสี่ยวไค, เสวี่ย ชูจวน, เฉิน ซุยชิง การประเมินคุณภาพของ Rehmannia glutinosa โดยใช้ลายนิ้วมือ UPLC และการกำหนดเนื้อหาส่วนประกอบหลายดัชนี [J] วัสดุยาจีน, 2021, 44 (4): 917-923