Cistanches Herba ช่วยลดการเพิ่มของน้ำหนักในหนูอ้วนที่เกิดจากอาหารที่มีไขมันสูงอาจเป็นไปได้ผ่านการคลายไมโตคอนเดรีย

ติดต่อ: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 อีเมล:audrey.hu@wecistanche.com

Hoi Shan Wong, Jihang Chen, Pou Kuan Leong, Hoi Yan Leung, Wing Man Chan, คัม หมิง โก

* แผนก Life Science, Hong Kong University of Science and Technology, ฮ่องกง, จีน

เชิงนามธรรม:

เศษส่วนกึ่งบริสุทธิ์ที่แยกได้จากCistanchesเฮอร์บาก่อนหน้านี้พบว่า (HCF1) กระตุ้นการแยกตัวของไมโตคอนเดรียในเซลล์ H9c2 และในหัวใจของหนู ดังนั้นเราจึงตั้งสมมติฐานว่า HCF1 จะมีผลในการลดน้ำหนักต่อโรคอ้วนที่เกิดจากอาหารที่มีไขมันสูง (HFD) เพื่อทดสอบสมมติฐานนี้ ได้มีการสร้างแบบจำลองหนูเมาส์ของโรคอ้วนที่เกิดจาก HFD และผลของ HCF1 ต่ออาหารปกติ (ND) ที่เลี้ยงและหนูที่เลี้ยงด้วย HFD ได้รับการตรวจสอบ ในการศึกษานี้ การรักษา HCF1 ในระยะยาวทำให้น้ำหนักลดลงต่อโรคอ้วนที่เกิดจาก HFD ในหนูเพศผู้และเพศเมีย การลดน้ำหนักที่เกิดจาก HCF1- มีความสัมพันธ์กับความไวของอินซูลินที่ดีขึ้นในสัตว์ที่ได้รับ HFD เพื่อให้เข้าใจกลไกการออกฤทธิ์ที่อยู่เบื้องหลังผลของการลดน้ำหนักที่ได้รับจาก HCF1 จึงมีการตรวจสอบผลกระทบของมันต่อการแยกตัวของไมโตคอนเดรีย ยังได้ดำเนินการศึกษาเปรียบเทียบกับ cholestyramine (CT) ซึ่งเป็นสารกักเก็บกรดน้ำดี ผลการวิจัยแสดงให้เห็นว่าการลดน้ำหนักที่เกิดจาก HCF1- น่าจะเป็นสื่อกลางโดยการเพิ่มขึ้นของการใช้พลังงาน อาจเป็นเพราะการเหนี่ยวนำการคลายไมโตคอนเดรียในกล้ามเนื้อโครงร่างของหนู ดังนั้น ผลการวิจัยของเราชี้ให้เห็นถึงศักยภาพของการใช้ HCF1 เพื่อป้องกันโรคอ้วนและผลกระทบด้านสุขภาพที่เกี่ยวข้อง เช่น โรคเบาหวาน โรคหัวใจและหลอดเลือด และกลุ่มอาการเมตาบอลิซึม

คำสำคัญ: ซิสตันเชส เฮอร์บา, การควบคุมน้ำหนัก,การแยกตัวของไมโตคอนเดรียโปรตีนคลายตัวของไมโตคอนเดรีย3

ซิสแทนเช่ ทูโบโลซ่า ประโยชน์ต่อสุขภาพ

เฉิงตู Wecistanche ส่วนใหญ่ผลิตผลิตภัณฑ์ Cistanche เพื่อสุขภาพชีวิต

บทนำ

โรคอ้วนเกิดจากการสะสมของไขมันอย่างผิดปกติในเนื้อเยื่อไขมันและอวัยวะอื่นๆ ที่ส่งผลเสียต่อสุขภาพ ผลการวิจัยในปัจจุบันชี้ว่ารูปแบบการใช้ชีวิตอยู่ประจำและการเปลี่ยนแปลงขององค์ประกอบด้านอาหารในสังคมที่ร่ำรวยทำให้เกิดการระบาดของโรคอ้วน โดยมีอุบัติการณ์ของโรคเรื้อรังที่เกี่ยวข้องกับโรคอ้วนไม่ติดต่อต่างๆ เพิ่มขึ้น เช่น กลุ่มอาการเมตาบอลิซึม (Shi et al., 2012) . การสำรวจการตรวจสุขภาพและโภชนาการแห่งชาติ (NHANES) ดำเนินการในปี 2550 แสดงให้เห็นว่าความชุกของโรคอ้วนทั่วโลกมีมากกว่า 30 เปอร์เซ็นต์ และคาดว่าจะเพิ่มขึ้นอีก 33 เปอร์เซ็นต์ในช่วงสองทศวรรษข้างหน้า (Finkelstein et al., 2012) การเริ่มเป็นโรคอ้วนจะเปลี่ยนไปเป็นประชากรวัยหนุ่มสาวด้วย ซึ่งสะท้อนจากแนวโน้มน้ำหนักเกินและโรคอ้วนในเด็กและวัยรุ่น (McTigue, Garrett, & Popkin, 2002) การค้นพบนี้คาดการณ์ถึงภาระที่อาจเกิดขึ้นกับการรักษาพยาบาลสำหรับโรคอ้วนและผลกระทบด้านสุขภาพที่เกี่ยวข้อง ซึ่งเกี่ยวข้องกับความจำเป็นในทันทีในการควบคุมขนาดของประชากรที่เป็นโรคอ้วน

การจัดการโรคอ้วนจำเป็นต้องมีการแทรกแซงระยะยาวและแนวทางสหสาขาวิชาชีพ จากการระบาดของโรคอ้วน การค้นหาการแทรกแซงที่ไม่ใช่การรักษาและ/หรือการรักษาที่เป็นไปได้จึงเป็นพื้นที่ที่มีการวิจัยอย่างเข้มข้น กลยุทธ์นี้เน้นไปที่การสร้างสมดุลพลังงานโดยการเพิ่มการใช้พลังงานหรือลดการบริโภคพลังงาน ในบรรดาวิธีการต่างๆ ซึ่งรวมถึงการเปลี่ยนอาหาร การออกกำลังกาย การยับยั้งการดูดซึมของลำไส้ และการกระตุ้นระบบประสาทขี้สงสาร การเหนี่ยวนำการคลายไมโตคอนเดรีย โดยการใช้สารเคมี uncoupler หรือโดยการเหนี่ยวนำของโปรตีนการคลายไมโตคอนเดรีย (Cerqueira, Laurindo, & Kowaltowski, 2011; Clapham et al., 2000) ได้รับการพิสูจน์แล้วว่าเป็นวิธีที่มีประสิทธิภาพในการลดน้ำหนัก (Clapham et al., 2000; Diehl & Hoek, 1999; Harper, Dickinson, & Brand, 2001; Li et al., 2000). การแยกตัวของไมโตคอนเดรียหมายถึงกระบวนการที่ทำให้เกิดการแยกตัวระหว่างกระบวนการขนส่งอิเล็กตรอนที่ให้พลังงานกับฟอสโฟรีเลชันของ ADP ในไมโตคอนเดรีย การแยกตัวของไมโตคอนเดรียทำให้เกิดการสลายตัวของโปรตอนเกรเดียนท์และอัตราการใช้ออกซิเจนที่เร็วขึ้นด้วยการนำเสนอเส้นทางการนำโปรตอนทางเลือก การแยกตัวของไมโตคอนเดรียทำให้เกิดการกระจายตัวของเกรเดียนท์ของโปรตอนและอัตราการใช้ออกซิเจนที่เร็วขึ้น (Brand et al., 2005) ภายใต้สภาวะการคลายตัว การสังเคราะห์ ATP ที่ลดลงสัมพันธ์กับการลดศักย์ของเยื่อหุ้มไมโตคอนเดรีย โดยพลังงานศักย์ที่เก็บไว้ในการไล่ระดับโปรตอนจะกระจายไปเป็นความร้อน วัฏจักรอันไร้ผลของการขนส่งโปรตอนนี้ใช้พลังงานเมแทบอลิซึมในสัดส่วนที่สูงในเนื้อเยื่อต่างๆ โดยเฉพาะอย่างยิ่งในกล้ามเนื้อโครงร่างซึ่งใช้พลังงานประมาณ 20 เปอร์เซ็นต์ของพลังงานทั้งหมดที่สร้างขึ้นในการเผาผลาญ (Chan, Wei, Chigurupati, & Tu, 2010; Korshunov, Skulachev และ Starkoc , 1997). การปรับการรั่วของโปรตอนในไมโทคอนเดรียเพิ่มอัตราการเผาผลาญพื้นฐาน ซึ่งมีส่วนสำคัญของการใช้พลังงานในแต่ละวัน ด้วยการใช้โมเลกุลเชื้อเพลิง (เช่น กรดไขมัน) ที่สูงขึ้น และทำให้น้ำหนักลดลง (Ricquier & Bouillaud, 2000) ).

Cistanches Herba ซึ่งเป็นพืชแห้งทั้งต้นของ Cistanche deserticola YC Ma เป็นสมุนไพรโทนิค 'Yang-invigorating' ในยาจีนโบราณ สมุนไพรยังถูกใช้เป็นอาหารเพื่อสุขภาพสำหรับการรักษาภาวะไตบกพร่องเป็นเวลาหลายร้อยปีในประเทศจีน การค้นพบล่าสุดของเราแสดงให้เห็นว่าเศษของกึ่งบริสุทธิ์ของ Cistanches Herba (HCF1) ทำให้เกิดการแยกตัวของไมโตคอนเดรียในเซลล์ H9c2 และในหัวใจของหนู (Wong & Ko, 2013) นอกจากนี้ยังแสดงให้เห็นว่าการรักษาด้วย HCF1 ในระยะยาว (ในขนาดรายวัน 1.14 และ 11.4 มก./กก. 14 วันติดต่อกัน) ให้ผลต่อเนื่องกันต่อไมโตคอนเดรียที่แยกได้จากไตและตับในหนูแรท โดยแสดงให้เห็นโดยอ้อมจากการลดลงของระดับเอทีพีในหนูเหล่านี้ เนื้อเยื่อ (ข้อมูลที่ไม่ได้เผยแพร่) เนื่องจากการเหนี่ยวนำการคลายไมโตคอนเดรียเป็นวิธีที่มีประสิทธิภาพสำหรับการลดน้ำหนัก (Clapham et al., 2000; Diehl & Hoek, 1999; Harper et al., 2001; Li et al., 2000) เราตั้งสมมติฐานว่า HCF1 ก็จะผลิตเช่นกัน การคลายไมโตคอนเดรียในกล้ามเนื้อโครงร่าง ส่งผลให้น้ำหนักลดลง เพื่อทดสอบสมมติฐาน ได้มีการสร้างแบบจำลองหนูเมาส์ของโรคอ้วนที่เกิดจากอาหารที่มีไขมันสูง (HFD) และผลของ HCF1 ต่ออาหารปกติ (ND) ที่เลี้ยงและหนูที่เลี้ยงด้วย HFD ได้รับการตรวจสอบ นอกจากนี้ ยังได้ดำเนินการศึกษาเปรียบเทียบระหว่างผลของ HCF1 และสารจับตัวกันกรดน้ำดี cholestyramine (CT) (Chen et al., 2010; Yamato et al., 2012) เพื่อแสดงลักษณะพิเศษของผลการลดน้ำหนักที่หาได้จาก HCF1

cistanche ก้าน

2. วัสดุและวิธีการ

2.1. สมุนไพรสกัด

Cistanches Herba ซึ่งเป็นพืชแห้งทั้งต้นของ Cistanches deserticola YC Ma (Orobanchaceae) ถูกซื้อมาจากพ่อค้าสมุนไพรในท้องถิ่น (Lee Hoong Kee) สมุนไพรได้รับการรับรองโดยซัพพลายเออร์และตัวอย่างใบสำคัญ (HKUST00301) ถูกฝากไว้ในแผนกชีววิทยาศาสตร์ มหาวิทยาลัยวิทยาศาสตร์และเทคโนโลยีแห่งฮ่องกง (HKUST) สารสกัดจากเอทานอล Cistanches Herba ได้มาจากการสกัดเอทานอลของวัสดุสมุนไพรบดโดยให้ความร้อนภายใต้การไหลย้อนที่ 78 องศาเป็นเวลา 2 ชั่วโมงตามที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้ (Leung & Ko, 2008) โดยให้ผลผลิตเท่ากับ 14 เปอร์เซ็นต์ (w/w) สารสกัดถูกแยกส่วนเพิ่มเติมโดยใช้โครมาโตกราฟีแบบซิลิกาเจล (Wong & Ko, 2013). ได้รับ HCF1 โดยให้ผลผลิตการสกัดเท่ากับ 1.14 เปอร์เซ็นต์ สารสกัดถูกทำให้แห้งโดยการระเหยตัวทำละลายภายใต้แรงดันที่ลดลงที่ 50 องศา และสารสกัดที่แห้งถูกเก็บไว้ที่ -20 องศาจนกว่าจะใช้

2.2. เคมีภัณฑ์

ซื้อน้ำยาทดสอบ Bio-Rad จาก Bio-Rad Laboratories (ริชมอนด์, แคลิฟอร์เนีย, สหรัฐอเมริกา) ซื้อชุดทดสอบ LabAssay™ Triglyceride (290-63701), LabAssay™ Cholesterol (294-65801) และ HDL-Cholesterol E (431-52501) จาก Wako (โอซาก้า ประเทศญี่ปุ่น) แอนติบอดีต้าน UCP3 (E-18) (แคตตาล็อก # sc-31387) ​​ถูกซื้อจากเทคโนโลยีชีวภาพซานตาครูซ (ซานตาครูซ แคลิฟอร์เนีย สหรัฐอเมริกา) ซื้อสารเคมีอื่นๆ ทั้งหมดจาก Sigma (St. Louis, MO, USA)

2.3. การดูแลสัตว์

หนูเมาส์ ICR (8 สัปดาห์; 30–35 กรัมสำหรับผู้ชายและ 25–30 กรัมสำหรับตัวเมีย) ได้รับการดูแลภายใต้วงจรความมืด/แสง 12-ชม. ในห้องควบคุมอากาศ/ความชื้นที่ประมาณ 22 องศา และอนุญาตให้อาหารและ น้ำ ad libitum ในสถานดูแลสัตว์และพืช (APCF) ที่ HKUST ขั้นตอนการทดลองทั้งหมดได้รับการอนุมัติจากคณะกรรมการปฏิบัติการวิจัย (HKUST) (การอนุมัติโปรโตคอลสำหรับสัตว์หมายเลข 2013049 วันที่อนุมัติ: 25 กันยายน 2013 ระยะเวลาการทดลอง: 3 ปี)

cistanche การยืดอายุ

2.4. โปรโตคอลการรักษา

เพื่อตรวจสอบผลของ HCF1 ต่อโรคอ้วนที่เกิดจาก HFD หนู ICR ตัวผู้หรือตัวเมียได้รับการสุ่มให้เป็นกลุ่มแปดกลุ่ม โดยมีหนู 10-15 ตัวในแต่ละกลุ่ม: (1) อาหารปกติ (ND, พลังงาน 13 เปอร์เซ็นต์ที่ได้จากไขมัน) การควบคุม; (2) ND บวก HCF1 ขนาดต่ำ (HCF1 L) (ในขนาดรายวัน 1.5 มก./กก.); (3) ND บวก HCF1 ขนาดปานกลาง (HCF1 M) (ในขนาดรายวัน 15 มก./กก.); (4) ND บวกกับปริมาณสูงของ HCF1 (HCF1 H) (ในขนาดรายวัน 45 มก./กก.); (5) HFD (พลังงาน 60 เปอร์เซ็นต์มาจากไขมัน ซื้อจาก Research Diet Inc. หมายเลขผลิตภัณฑ์ D12492) (6) HFD บวก HCF1 L; (7) HFD บวก HCF1 M; และ (8) HFD บวก HCF1 H. เนื่องจากมีการรายงานความแตกต่างทางเพศในการตอบสนองต่อการเปลี่ยนแปลงของน้ำหนักตัวที่ชักนำให้เกิดการเปลี่ยนแปลงของน้ำหนักตัวและการแทรกแซงการลดน้ำหนักในหนูและมนุษย์ (Rodriguez & Palou, 2004; Rodriguez, Quevedo-Coli, Roca, & Palou, 2001) เราสนใจที่จะตรวจสอบผลกระทบของ HCF1 ต่อหนูทั้งตัวผู้และตัวเมีย ปริมาณของ HCF1 ได้มาจากขนาดยาที่มีประสิทธิภาพในการกระตุ้นให้หัวใจของหนูที่มีไมโตคอนเดรียคลี่คลาย (Wong & Ko, 2013) ในกลุ่มที่ให้การรักษาร่วมกันของ HCF1 หนูเมาส์ถูกบริหารให้ในกระเพาะอาหารด้วย HCF1 5 วันต่อสัปดาห์เป็นเวลา 8 สัปดาห์ (กล่าวคือ 40 โดส) หนูควบคุมได้รับยานพาหนะ (น้ำมันมะกอก) เท่านั้น น้ำหนักตัวและการบริโภคอาหารของหนูได้รับการตรวจสอบทุกสัปดาห์ระหว่างการทดลอง การเปลี่ยนแปลงของน้ำหนักตัวคำนวณโดยการคำนวณพื้นที่ใต้เส้นโค้ง (AUC) ของกราฟที่แสดงเปอร์เซ็นต์น้ำหนักตัวเริ่มต้นเทียบกับเวลา (สัปดาห์ที่ 1–8) และแสดงเป็นหน่วยตามอำเภอใจ ตัวอย่างเลือดถูกดึงออกมา 24 ชั่วโมงหลังจากการให้ยาครั้งสุดท้ายด้วย HCF1 จากหนูเมาส์ที่ให้ยาสลบด้วยฟีโนบาร์บิทัลที่อดอาหารข้ามคืนโดยการเจาะหัวใจ หนูถูกสังเวยด้วยความคลาดเคลื่อนของปากมดลูก ตัวอย่างกล้ามเนื้อน่องถูกตัดออกเพื่อการวิเคราะห์ทางชีวเคมีเพิ่มเติม แผ่นไขมัน (อวัยวะสืบพันธุ์ ไขมันช่องท้อง และไขมันในช่องท้อง) ถูกผ่าและชั่งน้ำหนัก อัตราส่วนของน้ำหนักแผ่นไขมันเฉพาะต่อน้ำหนักตัวถูกประมาณและแสดงเป็นดัชนีของแผ่นไขมัน เพื่อตรวจสอบผลของ CT ต่อหนูตัวผู้อ้วนที่เลี้ยงด้วย HFD หนูตัวผู้ได้รับยาทางช่องท้องด้วย CT (แขวนลอยในน้ำ) ที่ขนาดยา 300 มก./กก. ต่อวัน

2.5. การเตรียมตัวอย่าง

ตัวอย่างพลาสมา homogenates ของกล้ามเนื้อโครงร่าง (ส่วนที่ปราศจากนิวเคลียส) และไมโตคอนเดรียของกล้ามเนื้อโครงร่างตามที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้ (Leong et al., 2013)

2.6. การวิเคราะห์ทางชีวเคมี

2.6.1. ปริมาณกลูโคสและไขมันในพลาสมา

ระดับกลูโคสในพลาสมาวัดโดยชุดตรวจกลูโคส (hexokinase) (Sigma, St. Louis, MO, USA) ปริมาณกลูโคสถูกประเมินโดยการเติมของผสมปฏิกิริยาที่มี 1.5 มิลลิโมลาร์ NAD, 1.0 มิลลิโมลาร์ ATP, 1.0 หน่วย/มิลลิลิตร เฮกโซไคเนส และ 1.0 หน่วย/ มล. กลูโคส-6-ฟอสเฟต ดีไฮโดรจีเนส การเปลี่ยนแปลงการดูดกลืนแสงที่ 340 นาโนเมตรได้รับการตรวจสอบด้วยสเปกโตรโฟโตเมตริกโดย Victor V3 Multi-Label Counter (Perkin Elmer, Santa Clara, CA, USA)

ตรวจวัดระดับไตรกลีเซอไรด์ในพลาสมา (TG) คอเลสเตอรอลรวม (TC) และระดับไลโปโปรตีนที่มีความหนาแน่นสูง (HDL) โดยใช้ชุดทดสอบ: TG: LabAssayTM Triglyceride, TC: LabAssayTM Cholesterol; HDL-C: ชุดทดสอบ HDL-Cholesterol E ปริมาณ TG, TC และ HDL ถูกประเมินโดยการเพิ่มสารทำปฏิกิริยาโครโมเจนที่จัดให้มีโดยชุดทดสอบที่สอดคล้องกัน ตรวจสอบการเปลี่ยนแปลงการดูดกลืนแสงที่ 600 นาโนเมตร (Siddiqua, Hamid, Ar-Rashid, Akther, & Choudhuri, 2010) ระดับไลโปโปรตีน-โคเลสเตอรอลความหนาแน่นต่ำ (LDL) ประเมินโดยสูตรของ Friedewald:

LDL= TC-( HDL บวก TG/5 )

2.6.2. กิจกรรมของฟอสโฟฟรุกโตไคเนส (PFK) ในกล้ามเนื้อโครงร่าง

การมีฤทธิ์ของ PFK ถูกประเมินโดยการผสมของผสมของปฏิกิริยาที่ประกอบด้วย 1 มิลลิโมลาร์ ฟรุกโตส-6-ฟอสเฟต, 1 มิลลิโมลาร์ ATP, 0.5 มิลลิโมลาร์ NADH, 2 mU/mL อัลโดเลส, 2 mU/mL ไตรโอสฟอสเฟต ไอโซเมอเรส, 2 mU /มล. กลีเซอโรฟอสเฟตดีไฮโดรจีเนสในบัฟเฟอร์สำหรับการสอบวิเคราะห์ (50 mM Tris-HCl, 5 mM MgCl2, 5 mM (NH4)2SO4, pH 7.4) ด้วยเศษส่วนที่ปราศจากนิวเคลียส (โปรตีน 50 ug/มล) ของกล้ามเนื้อโครงร่างในปริมาตรขั้นสุดท้าย 200 ไมโครลิตร จากนั้นจึงวัดการเกิดออกซิเดชันของ NADH โดยการเฝ้าติดตามการเปลี่ยนแปลงการดูดกลืนแสงที่ 340 นาโนเมตร (Coelho, Costa, & Sola-Penna, 2007)

2.6.3. กิจกรรมการสังเคราะห์ซิเตรตซินเทส (CS)

ของผสมของปฏิกิริยาสำหรับการวัดฤทธิ์ CS ถูกเตรียมโดยการผสม {{0}}.1 M Tris buffer (pH 8.0), 0.058 mM acetyl -CoA และ 0.1 มิลลิโมลาร์ 5,5'-ไดไทโอบิส-(2-กรดไนโตรเบนโซอิก) (DTNB) ปฏิกิริยาเริ่มต้นโดยการเติมออกซาโลอะซีเตต (ความเข้มข้นสุดท้าย: 0.5 มิลลิโมลาร์) การดูดกลืนแสงที่ 412 นาโนเมตร ถูกบันทึกทุกๆ 30 วินาทีที่ 30 องศาเป็นเวลา 3 นาที (Carter, Rennie, Hamilton, & Tarnopolsky, 2001; Holloway, Bonen, & Spriet, 2009)

ซิสแทนเช่ ทูโบโลซ่า ประโยชน์ต่อสุขภาพ

2.6.4. -กิจกรรมไฮดรอกซี เอซิล-โคเอ็นไซม์เอดีไฮโดรจีเนส ( -HAD)

-การมีฤทธิ์ของ HAD ถูกวัดโดยการผสมของผสมของปฏิกิริยาที่มี 100 ไมโครโมลาร์ อะซีโตอะซีติล-CoA และ 100 ไมโครโมลาร์ -NADH ในบัฟเฟอร์การสอบวิเคราะห์ (บัฟเฟอร์โพแทสเซียม ฟอสเฟต 100 มิลลิโมลาร์ที่มีกรดเอทิลีนไดเอมีนเตตระอะซิติก 2 มิลลิโมลาร์ (EDTA), pH 7.3) การเปลี่ยนแปลงการดูดกลืนแสงที่ 340 นาโนเมตรถูกเฝ้าติดตามที่ 30 องศาเป็นเวลา 2 นาที (Holloway et al., 2006)

2.6.5. กิจกรรมคาร์นิทีน พาลมิโตอิลทรานสเฟอเรส (CPT)

การประเมินกิจกรรม CPT ขึ้นอยู่กับการผลิต CoA-SH ที่เร่งปฏิกิริยาด้วย CPT จาก palmityl-CoA ปฏิกิริยาเริ่มต้นโดยการเติมแอล-คาร์นิทีน (ความเข้มข้นสุดท้าย 6 ไมโครโมลาร์) ให้กับของผสมปฏิกิริยา (ทริส 16 มิลลิโมลาร์, EDTA 2.5 มิลลิโมลาร์, DTNB 2 มิลลิโมลาร์ และ 50 ไมโครโมลาร์ พาลมิโตอิล-โคเอ, pH 8.0) การดูดกลืนแสงที่ 412 นาโนเมตรถูกเฝ้าติดตามที่ 30 องศาเป็นเวลา 180 วินาที ค่าสัมประสิทธิ์การสูญพันธุ์ของมิลลิโมลาร์ที่ 13.6 mM-1 cm-1 สำหรับ 5'-thio-2-nitrobenzoate (ผลิตภัณฑ์ขั้นสุดท้าย) ถูกใช้สำหรับการประมาณการกิจกรรมของเอนไซม์ กิจกรรม CPT หนึ่งหน่วยถูกกำหนดให้เป็นปริมาณของเอนไซม์ที่เร่งการปลดปล่อย 1 nmol CoA-SH ใน 1 นาที (Karlic, Lohninger, Koeck และ Lohninger, 2002)

2.6.6. การหายใจของไมโตคอนเดรีย

อัตราการหายใจในไมโตคอนเดรียที่แยกได้จากกล้ามเนื้อโครงร่างของหนูเมาส์ถูกกำหนดตามที่อธิบายโดย Wong และ Ko (2{13}}13) โดยสรุป การหายใจในยลถูกวัดแบบโพลาโรกราฟิกด้วยอิเล็กโทรดชนิดคลาร์ก (Hansatech Instruments, Norfolk) ที่ระดับ 30 องศา เศษส่วนของไมโตคอนเดรีย (โปรตีน 1 มก./มล.) ถูกบ่มในบัฟเฟอร์สำหรับการหายใจ (30 mM KCl, 6 mM MgCl2, 75 mM ซูโครส, 1 mM EDTA, 20 mM KH2PO4, pH 7.0) สารละลายของพื้นผิวที่มีโซเดียม ไพรูเวต 15 มิลลิโมลาร์และโซเดียม มาเลต 5 มิลลิโมลาร์ถูกเติมลงไป หลังจากการปรับสมดุล การหายใจในสภาวะที่ 3 เริ่มต้นขึ้นโดยการเพิ่ม ADP (ความเข้มข้นสุดท้าย 0.6 mM) เมื่อใช้ ADP ที่เพิ่มทั้งหมดสำหรับการสร้าง ATP จะมีการเติมโอลิโกมัยซินเพื่อกระตุ้นการหายใจในสถานะ 4 อัตราส่วนการควบคุมการหายใจ (RCR) ประเมินโดยการคำนวณอัตราส่วนของรัฐ 3 ต่อ 4 อัตราการหายใจ (Jiang et al., 2009)

2.6.7. นิพจน์ UCP3

ระดับ UCP3 ประเมินโดยการวิเคราะห์ Western blot โดยใช้แอนติบอดีต้าน UCP3 (E-18) ตามการวิเคราะห์ SDS-PAGE ของเศษส่วนไมโตคอนเดรีย โดยใช้เจลแยกสารอะคริลาไมด์ 10 เปอร์เซ็นต์ เศษส่วนของไมโตคอนเดรียที่แยกได้จากกล้ามเนื้อโครงร่างของหนูเมาส์ (100 กรัม) ถูกโหลดและไซโตโครม ซี ออกซิเดส (COX) ถูกใช้เป็นเครื่องหมายสำหรับการอ้างอิง แถบโปรตีนที่ย้อมภูมิคุ้มกันถูกวิเคราะห์โดย densitometry (Quantiscan, Biosoft, Cam bridge, GB, UK) และปริมาณ (หน่วยโดยพลการ) ของ UCP3 ถูกทำให้เป็นมาตรฐานโดยอ้างอิงถึงระดับ COX (หน่วยโดยพลการ) ในตัวอย่าง

2.7. การทดสอบโปรตีน

ความเข้มข้นของโปรตีนถูกกำหนดหาโดยใช้ชุดทดสอบโปรตีน Bio-Rad ความเข้มข้นของโปรตีนถูกกำหนดจากกราฟการปรับเทียบโดยใช้ bovine serum albumin (BSA) เป็นมาตรฐาน

2.8. การวิเคราะห์ทางสถิติ

ข้อมูลทั้งหมดแสดงเป็นค่าเฉลี่ย±ข้อผิดพลาดมาตรฐานของค่าเฉลี่ย (SEM) เว้นแต่จะระบุไว้เป็นอย่างอื่น ข้อมูลถูกวิเคราะห์โดยการวิเคราะห์ทางเดียวของความแปรปรวน (one-way ANOVA) และความแตกต่างระหว่างกลุ่มถูกตรวจพบโดยการทดสอบช่วง Tukey เมื่อ p <>

Cistanche herba

3. ผลลัพธ์

3.1. ผลของ HCF1 ต่อน้ำหนักตัวในหนูที่ได้รับ ND-fed และ HFD-fed

การให้อาหารแบบ ND ทำให้น้ำหนักตัวเพิ่มขึ้นเล็กน้อย (โดย 13 เปอร์เซ็นต์ และ 10 เปอร์เซ็นต์ ตามลำดับ) ในหนูเพศผู้และเพศเมียในระหว่างการทดลอง 8-สัปดาห์ (รูปที่ 1a) HFD เร่งการเพิ่มน้ำหนักตัว โดยมีขอบเขตของการกระตุ้นอยู่ที่ 269 เปอร์เซ็นต์ และ 320 เปอร์เซ็นต์ ตามลำดับ ในหนูตัวผู้และตัวเมีย เมื่อเทียบกับสัตว์ ND แต่ละตัว (รูปที่ 1a) การเปลี่ยนแปลงของน้ำหนักตัวในระหว่างการทดลอง 8-สัปดาห์ได้รับการหาปริมาณและแสดงเป็นหน่วยตามอำเภอใจ การรักษาด้วย HCF1 ช่วยยับยั้งการเพิ่มของน้ำหนักตัวในหนูเพศผู้ที่ได้รับ ND อย่างสมบูรณ์ (รูปที่ 1b) การรักษาด้วย HCF1 ยังยับยั้งการเพิ่มของน้ำหนักตัวโดยขึ้นกับขนาดยาในหนูที่ได้รับ HFD ด้วยระดับของการยับยั้งอยู่ที่ 100 เปอร์เซ็นต์ และ 61 เปอร์เซ็นต์ ตามลำดับ ที่ 45 มก./กก. ในหนูทั้งตัวผู้และตัวเมีย (รูปที่ 1b) ไม่พบการเปลี่ยนแปลงอย่างมีนัยสำคัญในการบริโภคอาหารเมื่อให้อาหาร HFD และ/หรือการรักษาร่วมกับ HCF1 เมื่อเปรียบเทียบกับหนูที่ได้รับ ND ที่ไม่ได้รับการรักษา (ไม่แสดงข้อมูล)

รูปที่ 1 – ผลกระทบของ HCF1 ต่อการเปลี่ยนแปลงน้ำหนักตัวในหนูที่ได้รับ ND-fed และ HFD-fed มีการตรวจสอบน้ำหนักตัวทุกสัปดาห์ในระหว่างการทดลอง 8-สัปดาห์ (a) ระยะเวลาของการเปลี่ยนแปลงน้ำหนักตัวได้รับการวิเคราะห์โดย ANOVA แบบผสมผสาน และการทดสอบช่วง Tukey ตรวจพบความแตกต่างระหว่างกลุ่ม ข้อมูลถูกแสดงเป็นเปอร์เซ็นต์กลุ่มควบคุมที่สัมพันธ์กับน้ำหนักตัวตั้งต้นตามลำดับ (b) การเปลี่ยนแปลงน้ำหนักตัวได้รับการวัดปริมาณตามที่อธิบายไว้ในวัสดุและวิธีการ ข้อมูลแสดงเป็นเปอร์เซ็นต์กลุ่มควบคุมที่สัมพันธ์กับกลุ่มควบคุม ND [ค่า AUC ควบคุม (หน่วยตามอำเภอใจ): เพศผู้=777.6 ± 10.4; หญิง {{10}}}.0 ± 8.0] ค่าที่กำหนดคือค่าเฉลี่ย ± SEM โดยมี n=15 * แตกต่างอย่างมากจากการควบคุม ND; # แตกต่างอย่างมากจากกลุ่มควบคุม HFD (p <>

3.2. ผลของ HCF1 ต่อดัชนีแผ่นไขมันในหนูที่ได้รับ ND-fed และ HFD-fed

ยังได้ตรวจสอบผลของ HCF1 ต่อการสะสมไขมันอีกด้วย HFD ทำให้เกิดการเพิ่มขึ้นอย่างมีนัยสำคัญในดัชนีไขมันใต้ผิวหนังและอวัยวะภายในในผู้ชาย (โดย 346 เปอร์เซ็นต์ และ 325 เปอร์เซ็นต์ ตามลำดับ) และเพศหญิง (โดย 248 เปอร์เซ็นต์ และ 257 เปอร์เซ็นต์ ตามลำดับ) หนู (รูปที่ 2) แม้ว่าการรักษาด้วย HCF1 จะไม่ส่งผลใดๆ ต่อไขมันใต้ผิวหนังและอวัยวะภายในในหนูที่ได้รับ ND ที่เลี้ยงด้วย ND แต่ความสามารถของ HCF1 ในการยับยั้งการเพิ่มน้ำหนักตัวที่เกิดจาก HFD นั้นสัมพันธ์กับการลดลงของมวลไขมันในร่างกายตามที่ระบุโดยการลดลงของทั้งสอง ไขมันใต้ผิวหนังและอวัยวะภายในในเพศชายที่ได้รับ HFD (ร้อยละ 42 และ 49 ตามลำดับ ที่ 45 มก./กก.) และไขมันในช่องท้องในหนูเพศเมียที่เลี้ยงด้วย HFD (ร้อยละ 53 ที่ 45 มก./กก.) (รูปที่ 2) .

รูปที่ 2 – ผลกระทบของ HCF1 ต่อดัชนีแผ่นไขมันในหนูที่ได้รับ ND-fed และ HFD-fed วัดมวลของไขมันใต้ผิวหนังและไขมันในช่องท้องตามที่อธิบายไว้ในวัสดุและวิธีการ ข้อมูลถูกแสดงเป็นเปอร์เซ็นต์กลุ่มควบคุมที่สัมพันธ์กับกลุ่มควบคุม ND ค่าที่กำหนดคือค่าเฉลี่ย ± SEM โดยมี n=15 * แตกต่างอย่างมากจากการควบคุม ND; # แตกต่างอย่างมากจากการควบคุม HFD (p <>

3.3. ผลของ HCF1 ต่อปริมาณกลูโคสและไขมันในพลาสมาในหนูที่ได้รับ ND-fed และ HFD-fed

การรักษาด้วย HCF1 ไม่ได้เปลี่ยนแปลงปริมาณกลูโคสและไขมันในพลาสมาในหนูตัวผู้และตัวเมียที่เลี้ยงด้วย ND (รูปที่ 3) การให้อาหาร HFD ทำให้ระดับน้ำตาลในเลือดสูงขึ้นอย่างมีนัยสำคัญ (เพิ่มขึ้น 39 เปอร์เซ็นต์และ 29 เปอร์เซ็นต์ ตามลำดับ) ในหนูเพศผู้และเพศเมียเมื่อเปรียบเทียบกับกลุ่มควบคุม ND ตามลำดับ (รูปที่ 3a) HCF1 H ย้อนกลับระดับความสูงที่เกิดจาก HFD ในระดับกลูโคสในพลาสมา (โดย 41 และ 64 เปอร์เซ็นต์ ตามลำดับ) ในหนูเพศผู้และเพศเมีย (รูปที่ 3a) HFD ยังเพิ่มระดับ TG ในพลาสมาอย่างมีนัยสำคัญ (เพิ่มขึ้น 38 และ 53 เปอร์เซ็นต์ ตามลำดับ) ในหนูเพศผู้และเพศเมีย เมื่อเปรียบเทียบกับกลุ่มควบคุม ND ตามลำดับ (รูปที่ 3b) HCF1 L และ HCF1 M ยับยั้งระดับ TG ในพลาสมาที่เกิดจาก HFD อย่างมีนัยสำคัญในหนูที่ได้รับ HFD เพศผู้ (โดย 135 และ 192 ตามลำดับ) และเพศเมีย (โดย 103 และ 146 เปอร์เซ็นต์ตามลำดับ) หนู (รูปที่ 3b) HCF1 H ทำให้เกิดการยกระดับอย่างมีนัยสำคัญในระดับ TG ในพลาสมา (โดย 21 เปอร์เซ็นต์) ในหนูเพศเมียที่เลี้ยงด้วย HFD เมื่อเปรียบเทียบกับกลุ่มควบคุม HFD ที่ไม่ได้รับการรักษา (รูปที่ 3b) นอกจาก TG ในพลาสมาแล้ว ยังสังเกตเห็นการเพิ่มขึ้นอย่างมีนัยสำคัญของระดับ TC ในพลาสมาหลังการให้อาหาร HFD โดยเพิ่มขึ้น 73 เปอร์เซ็นต์ และ 100 เปอร์เซ็นต์ ตามลำดับ ในหนูเพศผู้และเพศเมีย (รูปที่ 3c) การเพิ่มขึ้นของระดับ TC ในพลาสมาสัมพันธ์กับการลดลงอย่างมีนัยสำคัญในอัตราส่วน HDL/LDL ในพลาสมาในหนูที่เลี้ยงด้วย HFD (ร้อยละ 29) และเพศเมีย (ร้อยละ 49) (รูปที่ 3d) HCF1 M และ HCF1 H ลดการเพิ่มขึ้นของระดับ TC ในพลาสมาที่เกิดจาก HFD ในหนูเพศผู้ที่ได้รับ HFD โดยมีระดับความสูงร่วมกันในอัตราส่วน HDL/LDL ในพลาสมา (โดย 255 เปอร์เซ็นต์และ 212 เปอร์เซ็นต์ ตามลำดับ) เมื่อเปรียบเทียบกับ HFD ที่ไม่ได้รับการรักษา การควบคุม (รูปที่ 3c และ 3d) HCF1 L และ HCF1 M ยับยั้งระดับความสูงที่เกิดจาก HFD ในระดับ TC ในพลาสมา (โดย 22 เปอร์เซ็นต์และ 32 เปอร์เซ็นต์ตามลำดับ) ในหนูเพศเมีย โดยไม่มีการเปลี่ยนแปลงในอัตราส่วน HDL/ LDL ในพลาสมา (รูปที่ 3c และ 3d)

รูปที่ 3 – ผลของ HCF1 ต่อปริมาณกลูโคสและไขมันในพลาสมาในหนูที่ได้รับ ND-fed และ HFD-fed วัดระดับกลูโคสในพลาสมา TG และ TC ตามที่อธิบายไว้ในวัสดุและวิธีการ ข้อมูลถูกแสดงเป็นเปอร์เซ็นต์กลุ่มควบคุมที่สัมพันธ์กับกลุ่มควบคุม ND [ระดับกลูโคสในพลาสมากลุ่มควบคุม (มก./เดซิลิตร): เพศผู้=91.1 ± 3.3 เพศเมีย=86.0 ± 2.3; ควบคุมระดับ TG ในพลาสมา (mg/dL): เพศชาย=52.0 ± 1.7 เพศหญิง=95.8 ± 4.1; ควบคุมระดับ TC ในพลาสมา (mg/dL): เพศชาย {0}}.8 ± 4.3 เพศหญิง=118.6 ± 5.4] ค่าที่กำหนดคือค่าเฉลี่ย ± SEM โดยมี n=15 * แตกต่างอย่างมากจากการควบคุม ND; # แตกต่างอย่างมากจากกลุ่มควบคุม HFD (p <>

3.4. ผลของ HCF1 ต่อปริมาณไขมันในตับในหนูที่ได้รับ ND-fed และ HFD-fed

การรักษาด้วย HCF1 ไม่ได้เปลี่ยนระดับ TG และ TC ของตับในหนูที่เลี้ยงด้วย ND (รูปที่ 4) การบริโภค HFD เพิ่มระดับ TG ในตับอย่างมีนัยสำคัญ (เพิ่มขึ้น 108% และ 135 เปอร์เซ็นต์ ตามลำดับ) ในหนูเพศผู้และเพศเมีย เมื่อเทียบกับกลุ่มควบคุม ND ที่เกี่ยวข้อง (รูปที่ 4a) ด้านหนึ่ง HCF1 H ยับยั้งการยกระดับที่เกิดจาก HFD ในระดับ TG ตับ (ร้อยละ 54) ในหนูเพศผู้ เมื่อเทียบกับกลุ่มควบคุม HFD ที่ไม่ได้รับการรักษา (รูปที่ 4a) ในทางกลับกัน HCF1 H เพิ่มระดับ TG ของตับ (โดย 14 เปอร์เซ็นต์) ในหนูเพศเมียที่เลี้ยงด้วย HFD เมื่อเปรียบเทียบกับกลุ่มควบคุม HFD ที่ไม่ได้รับการรักษาตามลำดับ (รูปที่ 4a) HFD ยังทำให้ระดับ TC ของตับเพิ่มขึ้นอย่างมีนัยสำคัญ (โดย 48 เปอร์เซ็นต์ และ 26 เปอร์เซ็นต์ ตามลำดับ) ในหนูเพศผู้และเพศเมีย (รูปที่ 4b) ในขณะที่ HCF1 L และ HCF1 H ยับยั้งการยกระดับที่เกิดจาก HFD อย่างมีนัยสำคัญ (โดย 42 และ 44 เปอร์เซ็นต์ตามลำดับ) ในระดับ TC ตับในหนูเพศผู้ที่ได้รับ HFD มีเพียง HCF1 H เท่านั้นที่สามารถให้ผลที่คล้ายกันกับหนูเพศเมียที่เลี้ยงด้วย HFD ด้วย ระดับการยับยั้งอยู่ที่ 62 เปอร์เซ็นต์ (รูปที่ 4b)

รูปที่ 4 – ผลของ HCF1 ต่อปริมาณไขมันในตับในหนูที่ได้รับ ND-fed และ HFD-fed วัดระดับ TG และ TC ของตับตามที่อธิบายไว้ในวัสดุและวิธีการ ข้อมูลถูกแสดงออกเป็นเปอร์เซ็นต์กลุ่มควบคุมที่สัมพันธ์กับกลุ่มควบคุม ND [ระดับ TG ตับควบคุม ( โปรตีน g/mg): เพศผู้=31.7 ± 1.6, เพศเมีย=38.5 ± 1.7; ควบคุมระดับ TC ของตับ (โปรตีน g/mg): เพศผู้=12.8 ± 0.4 ตัวเมีย=17.9 ± 1.2] ค่าที่กำหนดคือค่าเฉลี่ย ± SEM โดยมี n {0}} * แตกต่างอย่างมากจากการควบคุม ND; # แตกต่างอย่างมากจากกลุ่มควบคุม HFD (p <>

3.5. ผลของ HCF1 ต่อกิจกรรมของเอนไซม์เผาผลาญในกล้ามเนื้อโครงร่างที่แยกได้จากหนูที่ได้รับ ND-fed และ HFD-fed

การรักษาด้วย HCF1 กระตุ้นการทำงานของ PFK ในกล้ามเนื้อโครงร่างของหนูตัวผู้หรือตัวเมียที่เลี้ยงด้วย ND โดยมีผลต่อหนูเพศผู้มากขึ้น (55 เปอร์เซ็นต์เทียบกับเพิ่มขึ้น 20 เปอร์เซ็นต์ที่ 45 มก./กก.) (รูปที่ 5a) การบริโภค HFD ทำให้เกิดการปราบปรามอย่างมีนัยสำคัญในกิจกรรม PFK (โดย 16 เปอร์เซ็นต์ และ 17 เปอร์เซ็นต์ ตามลำดับ) ในหนูเพศผู้และเพศเมีย (รูปที่ 5a) HCF1 H ย้อนกลับการปราบปรามที่เกิดจาก HFD ของกิจกรรม PFK (โดย 153 เปอร์เซ็นต์ และ 100 เปอร์เซ็นต์ ตามลำดับ) ในหนูตัวผู้และตัวเมียที่เลี้ยงด้วย HFD (รูปที่ 5a) ทั้งการรักษาด้วย HFD และ HCF1 ไม่มีผลต่อการทำงานของ CS ในกล้ามเนื้อโครงร่างของหนูตัวผู้หรือตัวเมียเมื่อเปรียบเทียบกับกลุ่มควบคุม ND ที่ไม่ได้รับการรักษาตามลำดับ (รูปที่ 5b) HCF1 ไม่ก่อให้เกิดผลกระทบใดๆ ต่อแอคติวิตี -HAD ของกล้ามเนื้อโครงร่างของหนูเมาส์เพศผู้หรือตัวเมียที่ป้อนด้วย ND (รูปที่ 5c) การให้อาหาร HFD กระตุ้นการทำงานของ -HAD (โดย 47 และ 21 เปอร์เซ็นต์ ตามลำดับ) ในหนูเพศผู้และเพศเมียเมื่อเปรียบเทียบกับกลุ่มควบคุม ND ที่ไม่ได้รับการรักษา (รูปที่ 5c) HCF1 ในทุกขนาดยาที่ทดสอบ ยับยั้งการกระตุ้นที่เกิดจาก HFD ในกิจกรรม -HAD ในหนูเพศผู้อย่างมีนัยสำคัญ โดยมีระดับการยับยั้งอยู่ที่ 62 เปอร์เซ็นต์ เมื่อเทียบกับกลุ่มควบคุม HFD ที่ไม่ได้รับการรักษา (รูปที่ 5c) การบำบัดด้วย HCF1 ไม่ทำให้เกิดการเปลี่ยนแปลงที่มีนัยสำคัญในการมีฤทธิ์ -HAD ในหนูเพศเมียที่เลี้ยงด้วย ND และ HFD (รูปที่ 5c) ในขณะที่ HCF1 H ทำให้เกิดการลดลงอย่างมีนัยสำคัญในกิจกรรม CPT (โดย 16 เปอร์เซ็นต์) ของกล้ามเนื้อโครงร่างในหนูเพศผู้ที่ได้รับ ND (รูปที่ 5d) HCF1 L และ HCF1 M เพิ่มกิจกรรม CPT อย่างมีนัยสำคัญโดย 24 เปอร์เซ็นต์และ 22 เปอร์เซ็นต์ใน ND fed หนูเพศเมียเมื่อเปรียบเทียบกับกลุ่มควบคุม ND (รูปที่ 5d) การให้อาหาร HFD ยังเพิ่มกิจกรรม CPT (โดย 13 เปอร์เซ็นต์และ 18 เปอร์เซ็นต์ตามลำดับ) ในหนูตัวผู้และตัวเมีย HCF1 กลับรายการการเพิ่มขึ้นของกิจกรรม CPT ที่เกิดจาก HFD โดยระดับการปราบปรามอยู่ที่ 72 เปอร์เซ็นต์ในหนูเพศผู้ (ในทุกขนาดยาที่ทดสอบ) และ 100 เปอร์เซ็นต์ในหนูเพศเมีย (HCF1 L) (รูปที่ 5d)

รูปที่ 5 – ผลของ HCF1 ต่อกิจกรรมของเอนไซม์เผาผลาญในกล้ามเนื้อโครงร่างที่แยกได้จากหนูที่ได้รับ ND-fed และ HFD-fed กิจกรรม PFK, CS, -HAD และ CPT ของกล้ามเนื้อโครงร่างถูกวัดตามที่อธิบายไว้ในวัสดุและวิธีการ ข้อมูลถูกแสดงเป็นเปอร์เซ็นต์กลุ่มควบคุมที่สัมพันธ์กับกลุ่มควบคุม ND [การออกฤทธิ์ของ PFK ควบคุม (โปรตีน mU/มก.): เพศผู้=19.5 ± 1.1 เพศเมีย=14.1 ± 0.7 ; ควบคุมการทำงานของ CS (โปรตีน mU/mg): เพศผู้=30.6 ± 1.3 ตัวเมีย=36.8 ± 3.6; กิจกรรมควบคุม -HAD (โปรตีน mU/mg): เพศผู้=13.5 ± 0.6 ตัวเมีย=16.8 ± 0.6; ควบคุมการทำงานของ CPT (โปรตีน mU/mg): เพศชาย {{30}}}.0 ± 0.3 เพศหญิง=3.0 ± { {39}}.1]. ค่าที่กำหนดคือค่าเฉลี่ย ± SEM โดยมี n=15 * แตกต่างอย่างมากจากการควบคุม ND; # แตกต่างอย่างมากจากกลุ่มควบคุม HFD (p <>

3.6. ผลของ HCF1 ต่อ mitochondrial RCR ในกล้ามเนื้อโครงร่างของหนูเมาส์

HFD ไม่มีผลที่ตรวจพบได้ต่อ mitochondrial RCR ในกล้ามเนื้อโครงร่างของหนูเมาส์ (รูปที่ 6) การคลายไมโตคอนเดรียที่เกิดจากการรักษาด้วย HCF1 ในกล้ามเนื้อโครงร่างของหนูเมาส์ ซึ่งเห็นได้จากการลดลงของ RCR ของไมโตคอนเดรียอย่างมีนัยสำคัญในทั้ง ND-fed (61–69 เปอร์เซ็นต์ในเพศชาย 66 เปอร์เซ็นต์ในเพศหญิง) และ HFD-fed (73–78 เปอร์เซ็นต์ในเพศชาย 67 –70 เปอร์เซ็นต์ในหนูเพศเมีย) เมื่อเปรียบเทียบกับสัตว์ที่ไม่ได้รับการรักษาตามลำดับ (รูปที่ 6)

รูปที่ 6 – ผลของ HCF1 ต่อ mitochondrial RCR ในกล้ามเนื้อโครงร่างของหนูตัวผู้และตัวเมียที่เลี้ยงด้วย ND และ HFD RCR ของไมโตคอนเดรียถูกวัดตามที่อธิบายไว้ในวัสดุและวิธีการ ข้อมูลถูกแสดงเป็นเปอร์เซ็นต์กลุ่มควบคุมที่สัมพันธ์กับกลุ่มควบคุม ND ค่าที่กำหนดคือค่าเฉลี่ย ± SEM โดยมี n=15 * แตกต่างอย่างมากจากการควบคุม ND; # แตกต่างอย่างมากจากการควบคุม HFD (p <>

3.7. ผลของ HCF1 ต่อการแสดงออกของ UCP3 ในไมโตคอนเดรียที่แยกได้จากกล้ามเนื้อโครงร่างของหนู

ผลกระทบของ HCF1 ต่อการแสดงออกของ UCP3 ยังได้รับการตรวจสอบเพื่อสำรวจการมีส่วนร่วมที่เป็นไปได้ของการแยกตัวของไมโตคอนเดรียในการลดน้ำหนักที่เกิดจาก HCF1- การรักษา 2-สัปดาห์ของ HCF1 H ยกระดับ UCP3 อย่างมีนัยสำคัญในไมโตคอนเดรียที่แยกได้จากกล้ามเนื้อโครงร่างของหนูเมาส์ในหนูเพศผู้ โดยมีขอบเขตของการกระตุ้นอยู่ที่ 67 เปอร์เซ็นต์เมื่อเปรียบเทียบกับกลุ่มควบคุมที่ไม่ได้รับการรักษา (รูปที่ 7)

รูปที่ 7 – ผลกระทบของ HCF1 ต่อการแสดงออกของ UCP3 ในไมโตคอนเดรียที่แยกได้จากกล้ามเนื้อโครงร่างของเมาส์ หนูเมาส์เพศผู้ถูกบริหารให้ในทางเดินอาหารด้วย HCF1 H เป็นเวลา 14 วันติดต่อกัน ไมโทคอนเดรียถูกแยกออกตามที่อธิบายไว้ในวัสดุและวิธีการ และนิพจน์ UCP3 ถูกวัดโดยการวิเคราะห์ Western blot ข้อมูลถูกหาปริมาณและแสดงเป็นเปอร์เซ็นต์กลุ่มควบคุมที่สัมพันธ์กับกลุ่มควบคุมที่ไม่ได้รับการรักษา ค่าที่กำหนดคือค่าเฉลี่ย ± SEM โดยมี n=4 * แตกต่างอย่างมากจากการควบคุมที่ไม่ได้รับการรักษา

3.8. การเปรียบเทียบระหว่าง HCF1 และ CT ต่อผลกระทบของพวกมันต่อหนูที่ได้รับ ND-fed และ HFD-fed

เพื่อให้เข้าใจกลไกที่เป็นสาเหตุของผลการลดน้ำหนักที่ได้รับจาก HCF1 ได้ดีขึ้น ยังได้ศึกษาผลกระทบของ CT ซึ่งเป็นสารกักเก็บกรดน้ำดี ต่อหนูเพศผู้ที่ได้รับ ND และ HFD ทั้ง CT และ HCF1 ยับยั้งการเพิ่มของน้ำหนักที่เกิดจาก ND อย่างสมบูรณ์ในระหว่างการทดลอง 8-สัปดาห์ของการทดลอง การรักษาทั้งสองยังก่อให้เกิดผลกดทับต่อการเพิ่มขึ้นของน้ำหนักตัวที่เกิดจาก HFD ดัชนีไขมันในช่องท้อง ระดับน้ำตาลในเลือด/TG/TC ในพลาสมา ตลอดจนระดับ TG/TC ของตับ โดยผลของ CT มีความชัดเจนมากขึ้น (ตารางที่ 1) ซึ่งแตกต่างจาก HCF1 ซึ่งเพิ่มอัตราส่วน HDL/LDL ในพลาสมาเฉพาะในหนูที่ได้รับ HFD เท่านั้น CT ช่วยเพิ่มอัตราส่วน HDL/LDL ในพลาสมาอย่างมีนัยสำคัญในหนูที่เลี้ยงด้วย ND และ HFD (ร้อยละ 58 และ 17 ตามลำดับ) เมื่อเปรียบเทียบกับ การควบคุม ND ที่ไม่ได้รับการรักษาตามลำดับ (ตารางที่ 1) นอกจากนี้ ในขณะที่ HCF1 เพิ่มกิจกรรม PFK ในกล้ามเนื้อโครงร่างของหนูตัวผู้ ND-fed (54 เปอร์เซ็นต์) และ HFD-fed (14 เปอร์เซ็นต์) เมื่อเทียบกับกลุ่มควบคุม ND ที่ไม่ได้รับการรักษา CT ไม่ได้ให้ผลที่ตรวจพบได้ในหนูที่ได้รับ ND และ สามารถคืนค่าการลดลงที่เกิดจาก HFD ในกิจกรรม PFK ให้เป็นค่าควบคุมของหนูที่เลี้ยงด้วย ND (ตารางที่ 1) ทั้งการรักษาด้วย CT และ HCF1 ย้อนกลับการเพิ่มขึ้นที่เกิดจาก HFD ใน -HAD (โดย 61 เปอร์เซ็นต์ และ 60 เปอร์เซ็นต์ ตามลำดับ) และ CPT (โดย 122 เปอร์เซ็นต์ และ 72 เปอร์เซ็นต์ ตามลำดับ) กิจกรรมในหนูเพศผู้ (ตารางที่ 1) ในขณะที่ HCF1 เหนี่ยวนำให้เกิดการแยกตัวของไมโตคอนเดรีย ดังที่เห็นได้จากการลดลงอย่างมีนัยสำคัญของค่า RCR ของไมโตคอนเดรียในหนูเพศผู้ที่ได้รับ ND และ HFD นั้น CT ไม่มีผลต่อการถอดแยกไมโตคอนเดรีย (ตารางที่ 1)

สำหรับข้อมูลเพิ่มเติม คลิกที่นี่เพื่อรับ Part II

จาก: 'Cistanches Herba ลดน้ำหนักในหนูอ้วนที่เกิดจากอาหารที่มีไขมันสูงซึ่งอาจเกิดจากการคลายไมโตคอนเดรีย' โดยHoi Shan Wong และคณะ

---วารสารอาหารเพื่อสุขภาพ 10 (2014) 292–304