ประโยชน์ของ Cistache ในการศึกษาการทดลองและห้องปฏิบัติการ
May 09, 2022
โปรดติดต่อjimmy.wu@wecistanche.comสำหรับข้อมูลเพิ่มเติม
พริกขี้หนูการตอบสนองต่อพฤติกรรมการบริโภค
สารสกัดจากซิสแทนเช่ตามที่อธิบายไว้ข้างต้น ใช้สัญญาณประสาทสัมผัสเพื่อนำทางไปยังสภาพแวดล้อมที่พวกเขามักจะหลีกเลี่ยงcistanche หย่อนสมรรถภาพทางเพศ. หาอาหารหรือหาคู่ เช่นเดียวกับ OMR การเคลื่อนไหวที่มุ่งเป้าหมายอย่างมีประสิทธิภาพต้องอาศัยการประสานงานระหว่างการเคลื่อนไหวของมอเตอร์และการรับรู้ทางประสาทสัมผัส ในระบบการมองเห็นของตัวอ่อนและตัวเต็มวัย zebrafish ทำได้โดยใช้โฟโตแทกซิสหรือการตอบสนองพฤติกรรมเชิงแสง ลักษณะการทำงานนี้ขับเคลื่อน zebrafifish ไปยังบริเวณที่มีแสงสว่างและมีการเดินสายในระบบภาพ zebrafish ที่ 5 pdf การทดสอบการตอบสนองเชิงพฤติกรรมด้วยแสงจะใช้แนวโน้มของปลาม้าลายเพื่อเคลื่อนที่ไปยังห้องที่มีแสงสว่าง
ในการทดสอบนี้ ตัวอ่อนหรือปลาเซบราฟิฟิชที่โตเต็มวัยจะถูกวางไว้ในกลองสีขาวที่หมุนได้โดยมีแถบสีดำเพียงเส้นเดียวที่จำลองนักล่าที่กำลังคุกคาม ปลาที่มีความบกพร่องทางสายตาจะว่ายน้ำในรูปแบบสุ่มและไม่แสดงการตอบสนองการหลีกเลี่ยงผู้ล่า .Cells 2021, 10, 633 11 จาก 33 42 การถ่ายภาพเรตินา เทคโนโลยีที่ออกแบบมาเพื่อถ่ายภาพเรตินาของผู้ป่วยในตำแหน่งทางคลินิก เพื่อวัตถุประสงค์ในการวินิจฉัยและการวิจัย ขณะนี้กำลังถูกดัดแปลงเพื่อใช้ในห้องปฏิบัติการ เทคโนโลยีที่ใช้บ่อยที่สุดคือ spectral-domain optical coherence tomography (SD-OCT) ซึ่งสามารถให้ภาพตัดขวางและใบหน้าของสัตว์ฟันแทะและตาปลา โดยปกติจะมีความละเอียดสูงกว่าที่สร้างขึ้นในสภาพแวดล้อมทางคลินิก Optical Coherence Tomography Spectral-domain optical coherence tomography (SD-OCT) การถ่ายภาพจอประสาทตาได้กลายเป็นวิธีการวินิจฉัยที่สำคัญในคลินิก การทดสอบนี้แสดงให้เห็นประโยชน์ต่อสุขภาพของผง cistancheแก่สัตว์และมนุษย์
นอกจากนี้ยังเป็นเครื่องมือสร้างภาพที่ไม่รุกรานที่มีคุณค่าสำหรับการวิจัยขั้นพื้นฐานพฤกษเคมีใช้ในการถ่ายภาพเรตินาของหนูได้ถูกดัดแปลงเพิ่มเติมเพื่อศึกษาเรตินาของม้าลายด้วยความละเอียดสูง เนื่องจากขนาดที่เล็กและคุณสมบัติทางแสงของตาม้าลาย จึงสามารถสร้างภาพด้านหน้าของเมทริกซ์รับแสงที่ความละเอียดเซลล์เดียวซึ่งไม่สามารถทำได้กับสัตว์ฟันแทะและตามนุษย์ การหาปริมาณและการติดตามกรวยแต่ละอันสามารถทำซ้ำได้สูงโดยใช้วิธีนี้ การวิเคราะห์โดเมน Voronoi ยังใช้เพื่อกำหนดความสม่ำเสมอในการบรรจุโดเมนโคนและวิธีที่สิ่งนี้ค่อยๆ ลดลงเมื่อปลาม้าลายมีอายุตั้งแต่ 3 ถึง 12 เดือน การศึกษาล่าสุดได้ใช้ SD-OCT ในแบบจำลองโรคความเสื่อมของปลาม้าลาย
ประโยชน์ของซิสแทนเช่
ใน neovascularization ของจอประสาทตาที่เกิดจากเลเซอร์ ซึ่งใช้ในการจำลองจุดภาพชัดที่เกี่ยวข้องกับอายุเปียกพริกขี้หนูใช้ร่วมกับการวิเคราะห์ทางเนื้อเยื่อวิทยาและภูมิคุ้มกันเพื่อประเมินการกระตุ้นเซลล์มุลเลอร์ ไฮเปอร์รีเฟล็กติวิตี้ของเรตินาชั้นนอกที่เกิดจากพริกขี้หนูSD-OCT สามารถตรวจจับได้และคล้ายกับรุ่นหนู วิธีการสร้างภาพภายในร่างกายแสดงให้เห็นว่าการตอบสนองต่อการบาดเจ็บที่เกิดขึ้นใหม่เกิดขึ้นในช่วง 14-วัน และสอดคล้องกับการแสดงออกของเซลล์ Müller ของ GFAP ที่ตรวจพบโดยอิมมูโนฮิสโตเคมี ซึ่งชี้ให้เห็นว่าการตอบสนองต่อการอักเสบของ macroglial มีบทบาทในการฟื้นตัวของบาดแผลและการสร้างใหม่ ในเรตินาของ zebrafish โดยการรับพริกขี้หนู.
ลักษณะที่ไม่ใช่ขั้วของการศึกษาเกี่ยวกับภาพภายในร่างกายสามารถใช้ร่วมกับการประเมินพฤติกรรมของฟังก์ชันการมองเห็นได้อย่างมีประสิทธิภาพ การศึกษาล่าสุดเกี่ยวกับพฤกษเคมี ใช้ SD-OCT เพื่อติดตามการตกเลือดที่จอประสาทตาและการซ่อมแซมหลังจากรอยโรคจอประสาทตาที่เกิดจากเข็ม และยังวัดการเปลี่ยนแปลงการทำงานภายในพื้นผิวเดียวกันโดยใช้กระบวนทัศน์ทางเลือก T-maze การศึกษาแสดงให้เห็นความสัมพันธ์อย่างใกล้ชิดระหว่างขอบเขตของการตกเลือดในจอประสาทตาและประสิทธิภาพของ T-maze ซึ่งบ่งชี้ว่าความเสียหายทางกลส่งผลกระทบต่อการทำงานของการมองเห็น และโครงสร้างและการทำงานของม่านตาทั้งสองสามารถฟื้นตัวได้ในช่วง 14–15- วันหลังจากนี้ ประเภทของการบาดเจ็บ แม้ว่าขณะนี้มีนักวิจัยเพียงไม่กี่คนที่ใช้ SD-OCT เพื่อศึกษาเรตินาของ zebrafish ดูเหมือนว่า zebrafish eye มีโอกาสสำหรับการถ่ายภาพในร่างกายที่มีความละเอียดสูง ซึ่งช่วยให้สามารถทำแผนที่โดยละเอียดของตัวรับกรวยเช่นเดียวกับการวัดที่สะดวกของ การบาดเจ็บและการฟื้นตัวของระบบประสาทในแบบที่ไม่มีในรุ่นหนู
การศึกษาของเราเกี่ยวกับ cistanche
ปลายทางการทำงาน Electroretinography นอกเหนือจากการใช้การทดสอบพฤติกรรมเพื่อศึกษาระบบการมองเห็นของ zebrafish แล้วยังสามารถศึกษาการทำงานของเรตินอลและสารสื่อประสาทได้โดยใช้คลื่นไฟฟ้า (ERG) ERG เป็นวิธีการทางไฟฟ้าฟิสิกส์ของการบันทึก Fifield ที่สามารถใช้วัดกิจกรรมทางไฟฟ้าของเซลล์ในเรตินาเพื่อตอบสนองต่อแสงวาบในช่วงสั้นๆ เมื่อเทียบกับกลุ่มที่ได้รับ พริกขี้หนูสำหรับผู้ที่ไม่ได้ เมื่อตรวจพบและประมวลผลการป้อนข้อมูลด้วยสายตาในเรตินา ศักย์ไฟฟ้าของสนามไฟฟ้าจะถูกสร้างขึ้นและถ่ายโอนไปยังพื้นผิวกระจกตา ซึ่งสามารถตรวจจับได้ ต่างจาก OMR ซึ่งจับฟังก์ชันการมองเห็นทั่วทั้ง CNS โดยรวม ERG จะประเมินการทำงานของระบบประสาทโดยเฉพาะในเรตินา
ERG ได้รับการพิจารณาว่าเป็นการทดสอบการทำงานของเรตินอลทั้งในทางคลินิกและทางการทดลองเป็นเวลาหลายปี ข้อได้เปรียบที่ยิ่งใหญ่ของ ERG คือการแปลระหว่างสปีชีส์ต่างๆ เนื่องจากรูปคลื่น ERG แบบคลาสสิกนั้นโดยทั่วไปแล้วจะเหมือนกันในมนุษย์สิ่งมีชีวิตไฟโตเคมิคอล และปลา แม้ว่าตาม้าลายที่มีขนาดเล็กทำให้การวัด ERG นั้นยากในทางเทคนิค แต่อิเล็กโทรดและแอมพลิฟายเออร์ที่ทันสมัยทำให้เซลล์สามารถรวบรวมการบันทึก ERG ได้เทียบเท่ากับสัตว์สายพันธุ์ใหญ่ ในปลาเซบราฟิช โดยทั่วไปจะใช้องค์ประกอบหลักสามอย่างในการทดสอบความบกพร่องทางสายตา: คลื่น a ซึ่งเป็นตัววัดการตอบสนองของแสงหรือกิจกรรมของตัวรับแสง การตอบสนอง b-wave หรือ ON ซึ่งเป็นตัววัดของพฤกษเคมี สู่ ON-bipolar cell neurotransmission
การตอบสนองของคลื่น d หรือ OFF ซึ่งวัดที่ออฟเซ็ตแสงด้วยการกระตุ้นแสงเป็นระยะเวลานาน ( มากกว่าหรือเท่ากับ 0.5 มิลลิวินาที) [133] สามารถบันทึกรูปคลื่นทั้งสามได้โดยใช้ปิเปตแก้วแบบบางที่มีอิเล็กโทรดลวดคลอไรด์/เงินและสารละลาย Ringers ซึ่งเสียบไว้ใกล้กับกระจกตาของปลาที่ดมยาสลบ ภายใต้สภาวะแสงและสโคโทปิก เป็นไปได้ที่จะบันทึกคลื่น ERG b จากตาปลาม้าลายที่แยกได้ และเทคนิคนี้ถูกใช้เพื่อตรวจสอบการมีส่วนร่วมของอะเซทิลโคลีนบนรูปคลื่น ERG โดยการอาบน้ำเอนทิตาในสารละลายนิโคติน. นวัตกรรมทางเทคโนโลยีล่าสุด ได้แก่ การใช้เครื่องกระตุ้น LED และการใช้อิเล็กโทรดปลายฟองน้ำแทนปิเปตแก้วมาตรฐาน ERG ปรากฏขึ้นครั้งแรกที่ 4 pdf ใน zebrafish ด้วยการวัดของ a-wave, b-wave และ d-wave อย่างไรก็ตาม มีเพียง cones เท่านั้นที่มีส่วนช่วยในการวัด ERG ของตัวอ่อนในระยะแรกที่มีฟังก์ชั่น rod ปรากฏขึ้นในระยะหลังของการพัฒนาใกล้กับ วัยผู้ใหญ่
ERG ถูกใช้ในแบบจำลองม้าลายเพื่อวัดระดับการเสื่อมของระบบประสาทของจอประสาทตาในรูปแบบต่างๆ ของโรคจอประสาทตาที่สืบทอดมา ในแบบจำลองของการตาบอดกลางคืน ซึ่งมีระดับความเสื่อมของส่วนนอกของแท่งเหล็กหลายระดับ แอมพลิจูดของคลื่น ERG มีความสัมพันธ์กับทั้งการสูญเสียฟังก์ชันการมองเห็นและพารามิเตอร์ทางเนื้อเยื่อ ซึ่งบ่งชี้ว่า ERG เป็นการวัดความเสื่อมของระบบประสาทในปลาม้าลายที่ถูกต้อง [ 138. myosin 7aa悆 / การกลายพันธุ์ใน zebrafish ถือเป็นแบบจำลองของ Usher syndrome ในมนุษย์และทำให้เซลล์ตายเพิ่มขึ้นในชั้นนิวเคลียร์ด้านนอกของเรตินาพร้อมกับการลดแอมพลิจูดของคลื่น a และ b ของ ERG . การกลายพันธุ์ Usher ยังขัดขวางการแปลของแท่งและกรวยสีน้ำเงิน opsins ซึ่งเป็นการยืนยันเพิ่มเติมว่านี่เป็นแบบจำลองที่ดีของ Usher syndrome [139] ในทำนองเดียวกัน การกลายพันธุ์ CRISPR ของ ush2a จะเพิ่มการตายของเซลล์ในชั้นนิวเคลียสชั้นนอก และไม่เหมือนกับการน็อกเอาต์ของหนู มีการลดลงอย่างมีนัยสำคัญในแอมพลิจูดของคลื่น a และ b ซึ่งแสดงให้เห็นประโยชน์ของเรตินาที่มีรูปกรวยของปลาม้าลายสำหรับการจำลองโรคในมนุษย์บางชนิด
แอมพลิจูดของ ERG ก็ลดลงเช่นกันในแบบจำลองการน็อคเอาท์ของช่องคลอไรด์ CLCC1 ซึ่งบันทึกไว้ในรูปแบบที่สืบทอดมาจากเม็ดสีเรตินอักเสบ ลดลงเช่นเดียวกันประโยชน์ cistancheแอมพลิจูดของตาปิดการกลายพันธุ์อีกรูปแบบหนึ่งของ retinitis pigmentosa มาพร้อมกับการสูญเสียการตอบสนองของหัวรถจักรต่อแสงและการ mislocalization ของทั้ง rhodopsin และ cone transducin ในเซลล์รับแสง นอกจากนี้ยังสามารถใช้ ERG เพื่อยืนยันการฟื้นตัวของการทำงานหลังจากการเปลี่ยนแปลงทางระบบประสาทอย่างเฉียบพลัน ตัวอย่างเช่น ERG กลับมาเป็นปกติประมาณ 50 วันหลังจากการฉีด ouabain ซึ่งในขั้นต้นทำให้เกิดความเสียหายเชิงโครงสร้างอย่างมากต่อเซลล์สองขั้ว การฟื้นตัวของการทำงานมาพร้อมกับความซับซ้อนที่เพิ่มขึ้นของ dendritic ของเซลล์สองขั้วและการเชื่อมต่อกับเซลล์รับแสง ซึ่งบ่งชี้ว่าการงอกใหม่ของจอประสาทตารวมถึงการสร้างการเชื่อมต่อของเซลล์ประสาทที่มีความหมายใน zebrafish
ประเด็นสำคัญประการหนึ่งของการศึกษาคือผลกระทบของโรคเบาหวานต่อการมองเห็นและการเสื่อมของจอประสาทตา การลดลงอย่างเห็นได้ชัดในพารามิเตอร์ ERG ต่างๆ รวมถึงแอมพลิจูดของคลื่น b นั้นเป็นที่ยอมรับในการวิจัยทางคลินิกตลอดจนการศึกษาขั้นพื้นฐานที่เกี่ยวข้องกับหนูและสัตว์เลี้ยงลูกด้วยนมชนิดอื่นๆ ในปลาเซบราฟิฟิชชนิดพันธุ์ป่า โรคเบาหวานสามารถจำลองได้โดยการสัมผัสระดับน้ำตาลกลูโคสที่สูงขึ้น 2 เปอร์เซ็นต์ในน้ำในตู้ปลาซ้ำๆ ซ้ำๆ ซึ่งอาจนำไปสู่การทำงานของเรตินาที่เปลี่ยนแปลงไปภายในเวลาประมาณ 1 เดือน โดยใช้วิธีนี้ พบว่าการรักษาระดับน้ำตาลในเลือดสูงช่วยลดพฤติกรรมที่เกิดจากการมองเห็นและส่งผลกระทบต่อกรวยสีน้ำเงินเป็นส่วนใหญ่ โดยมีความเสื่อมแบบเลือกอย่างเห็นได้ชัดเมื่อเทียบกับเซลล์รับแสงแบบแท่ง ซึ่งกำหนดโดยการวิเคราะห์ทางเนื้อเยื่อวิทยา การเสื่อมสภาพนั้นมาพร้อมกับการลดลงอย่างมีนัยสำคัญในแอมพลิจูดของคลื่น b-wave ซึ่งบ่งชี้ว่าการเสื่อมสภาพของกรวยในปลาม้าลายเป็นผลที่ตามมาของโรคเบาหวานในระยะแรก และกรวยนั้นส่วนใหญ่รับผิดชอบต่อคลื่น b ภายใต้สภาพแสง
การใช้วิธีนี้ทำให้การศึกษาอย่างกว้างขวางยิ่งขึ้นได้บันทึก ERG ที่สร้างขึ้นโดยยางรองตาที่แยกออกมา แอมพลิจูดของโฟโตปิก ERG ดั้งเดิมพบว่าในปลาที่มีน้ำตาลในเลือดสูงต่ำกว่าอย่างมีนัยสำคัญเมื่อเทียบกับปลาที่ได้รับการบำบัดด้วยแมนนิทอล ซึ่งทำหน้าที่เป็นตัวควบคุมการเปลี่ยนแปลงออสโมติก พารามิเตอร์คลื่น B ก็ลดลงเช่นกันเพื่อตอบสนองต่อ spectralCells 2021, 10, 633 13 จาก 33 สิ่งเร้า ERG ซึ่งบ่งชี้ถึงการขาดดุลของวิถีโคนประโยชน์ cistancheยังลดแอมพลิจูดของคลื่น d ลงอย่างมีนัยสำคัญ ซึ่งคาดว่าน่าจะมาจากเซลล์ OFF-bipolar เมื่อเร็ว ๆ นี้ การกลายพันธุ์ของปัจจัยการถอดรหัสของตับอ่อนแสดงให้เห็นว่ามีฟีโนไทป์ของเบาหวาน ซึ่งแสดงการขาดดุลการทำงาน รวมถึงการลดลงอย่างมีนัยสำคัญในแอมพลิจูดของคลื่น b ควบคู่ไปกับความผิดปกติของหลอดเลือดจอประสาทตาและการเสื่อมของแท่งและโคน RGB ข้อมูลล่าสุดชี้ให้เห็นว่าปลาม้าลายอาจเป็นรูปแบบใหม่ที่มีประโยชน์ของภาวะแทรกซ้อนของจอประสาทตาเนื่องจากโรคเบาหวานซึ่งรวมถึงลักษณะทางระบบประสาทบางอย่างที่ทำให้สูญเสียการมองเห็น เมื่อพิจารณาถึงความเหนือกว่าของการมองเห็นแบบกรวยกลางใน zebrafish มีแนวโน้มว่าแบบจำลองนี้จะมีส่วนช่วยในการวิจัยโรคจอประสาทตาในผู้ป่วยเบาหวานในรูปแบบที่ไม่สามารถทำได้ด้วยแบบจำลองหนูที่ใช้กันอย่างแพร่หลายมากขึ้น
บทความนี้คัดลอกมาจากhttps://doi.org/10.3390/cells10030633
