Boldine สารอัลคาลอยด์จาก Peumus Boldus Molina กระตุ้นการขยายตัวของหลอดเลือดที่ขึ้นกับ endothelium ในไตของหนูที่ถูกกระตุ้น: การมีส่วนร่วมของไนตริกออกไซด์และตัวนำไฟฟ้าขนาดเล็ก Ca2 บวก - เปิดใช้งาน K บวกช่อง
Jul 05, 2023
เชิงนามธรรม
Boldine, 2,9-dihydroxy-1,10-dimethoxyaporphine เป็นอัลคาลอยด์หลักที่พบในใบและเปลือกของ Peumus boldus Molina ในช่วงไม่กี่ปีที่ผ่านมา เบลลีนได้แสดงคุณสมบัติทางเภสัชวิทยาหลายอย่างที่เป็นประโยชน์ต่อการทำงานของเยื่อบุผนังหลอดเลือด ควบคุมความดันโลหิต และลดความเสียหายในโรคไต อย่างไรก็ตาม ยังไม่ทราบกลไกและผลกระทบของยาขยายหลอดเลือดไต ในที่นี้ ไตของหนูที่ถูกทำให้บริสุทธิ์ถูกนำมาใช้เพื่อศึกษาความสามารถของตัวหนาในการกระตุ้นให้เกิดการขยายตัวของหลอดเลือดแดงในไต ด้วยเหตุนี้ การเตรียมไตข้างซ้ายที่มีและไม่มี endothelium ที่ทำงานได้จึงทำสัญญากับ phenylephrine และได้รับการฉีดสารตัวหนา 10–300 nmol (จากนั้นการเตรียม e จะถูกทำให้บริสุทธิ์เป็นเวลา 15 นาทีด้วย phenylephrine ร่วมกับ L-NAME, indomethacin, KCl, tetraethylammonium, glibenclamide, apamin, charybdotoxin หรือ iberiotoxin ในปริมาณ 30, 100 และ 300 nmol, boldine เหนี่ยวนำให้เกิดขนาดและขึ้นอยู่กับ endothelium ผลผ่อนคลายบนเตียงหลอดเลือดไต ไม่พบผล vasodilator ในการเตรียมการที่ขาด endothelium การทำงาน ในขณะที่การยับยั้งเอนไซม์ cyclooxygenase โดยการเพิ่ม indomethacin ไม่ทำให้เกิดการเปลี่ยนแปลงใด ๆ ในการขยายหลอดเลือดของ boldine แต่สารยับยั้ง nitric oxide synthase L ที่ไม่เลือก -NAME ได้ตัดฤทธิ์ขยายหลอดเลือดของ boldine ออกทั้งหมดในทุกขนาดที่ทดสอบ (e Perfusion ด้วย KCl หรือ tetraethylammonium (ตัวบล็อก K บวกช่องแบบไม่เลือก) ยังยกเลิกผลขยายหลอดเลือดของ boldine ซึ่งบ่งชี้ถึงการมีส่วนร่วมของ K บวกช่องในการทำงานของไตของ boldine (การไหลเวียนของเลือดด้วย glibenclamide (ตัวบล็อกช่องสัญญาณที่ไวต่อ ATP ที่ไวต่อ ATP แบบเลือก), iberiotoxin (ตัวบล็อกช่องสัญญาณที่มีความนำไฟฟ้าสูงแบบเลือกได้ Ca2 บวก - เปิดใช้งาน K บวก) และ charybdotoxin (เลือกตัวนำไฟฟ้าสูงและปานกลาง Ca2 บวก -เปิดใช้งาน K บวกตัวบล็อกช่องสัญญาณ ) ไม่ได้แก้ไขการออกฤทธิ์ขยายหลอดเลือดของ boldine ในทางกลับกัน การเติมเลือดด้วย apamin (ตัวนำไฟฟ้าขนาดเล็กที่เลือกได้ Ca2 บวก -กระตุ้น K บวกตัวบล็อกช่องสัญญาณ) ป้องกันการออกฤทธิ์ขยายหลอดเลือดของตัวหนาในทุกขนาดที่ทดสอบ การศึกษาร่วมกันนี้แสดงให้เห็นถึงคุณสมบัติการขยายหลอดเลือดของไตของ boldine ซึ่งมีผลขึ้นอยู่กับการสร้างไนตริกออกไซด์และการเปิดช่อง Ca2 บวกตัวนำไฟฟ้าขนาดเล็กที่เปิดใช้งาน K บวก
คลิกที่นี่เพื่อรับประโยชน์ของ Cistanche
การแนะนำ
Peumus boldus Molina หรือที่นิยมเรียกว่า "boldo" หรือ "bold" เป็นพันธุ์ไม้ที่อยู่ในตระกูล Monimiaceae และมีถิ่นกำเนิดในภาคกลางและภาคใต้ของชิลี ซึ่งเกิดขึ้นอย่างมากมาย นอกเหนือจากการใช้อย่างแพร่หลายในการรักษาโรคภัยไข้เจ็บต่างๆ ซึ่งรู้จักกันอย่างกว้างขวางในเรื่องความผิดปกติของกระเพาะอาหารและตับแล้ว การเตรียมที่มีตัวหนาเป็นส่วนประกอบมีการอธิบายไว้ในตำราเภสัชวินิจฉัยที่เป็นทางการหลายฉบับ เช่น เภสัชตำรับอย่างเป็นทางการในบราซิล ชิลี เยอรมนี โปรตุเกส โรมาเนีย สเปน และ สวิตเซอร์แลนด์ [1, 2].
หลักการออกฤทธิ์ของ Boldo ได้รับการอธิบายไว้ในน้ำมันหอมระเหย (แอสคาริดอล ซีนีออล เอสเทอร์ อัลดีไฮด์ คีโตน และไฮโดรคาร์บอน) อัลคาลอยด์ (โบลดีน ไอโซโบลดีน และอื่นๆ) ไกลโคไซด์ และอื่นๆ (ฟลาโวนอยด์ กรดซิตริก หมากฝรั่ง น้ำตาล แทนนิน , แร่ธาตุ , ลิพิด เป็นต้น) (เปลือก e อุดมไปด้วยอัลคาลอยด์ [3] การศึกษาทางเภสัชวิทยาส่วนใหญ่ของ boldo อธิบายถึงกิจกรรมที่สังเกตได้จากอัลคาลอยด์ boldine ซึ่งถูกกำหนดให้เป็นองค์ประกอบหลักของชา boldo [4] (e ความเข้มข้นของอัลคาลอยด์ในใบ boldo มีค่าประมาณที่ 0.4 เปอร์เซ็นต์ และความเข้มข้นของตัวหนาสามารถเข้าถึงมากกว่า 12 เปอร์เซ็นต์ [5]
แท้จริงแล้ว ผลกระทบทางชีวภาพที่หลากหลายมาจากตัวหนา แสดงให้เห็นว่า Boldine มีฤทธิ์ต้านอนุมูลอิสระและต้านการอักเสบ ซึ่งเป็นเหตุผลว่าทำไมจึงมักมีการศึกษาเกี่ยวกับโรคที่เกี่ยวข้องกับความเครียดจากปฏิกิริยาออกซิเดชัน ตัวอย่างเช่น มีการอธิบายถึงผลการป้องกันของ boldine ต่อความเสียหายของไมโทคอนเดรียจากปฏิกิริยาออกซิเดชันในหนูที่เป็นเบาหวานที่เกิดจากสเตรปโตโซโตซิน [6] และการลดลงของความเครียดจากปฏิกิริยาออกซิเดชันทำให้เกิดคุณสมบัติในการป้องกันระบบทางเดินอาหารของมัน [7] สำหรับการออกฤทธิ์ทางเภสัชวิทยาต่อระบบหัวใจและหลอดเลือดและไตเพื่อควบคุมความดันโลหิตสูงและโรคต่างๆ เช่น โรคเบาหวาน การศึกษาได้แสดงฤทธิ์ของ boldine ในการปรับปรุงการทำงานของ endothelial ในหนูที่เป็นเบาหวานผ่านการยับยั้งความเครียดจากปฏิกิริยาออกซิเดชันของหลอดเลือดและความผิดปกติของ endothelial [8] นอกจากนี้ การศึกษายังแสดงให้เห็นว่าการรักษาด้วย boldine มีผลในการป้องกันบุผนังหลอดเลือดในหนูที่มีความดันโลหิตสูงโดยธรรมชาติผ่านการยับยั้งการผลิตซูเปอร์ออกไซด์ที่อาศัย NADPH [9] Boldine ปรับปรุงความเสียหายของไตใน renovascular hypertension ที่เกิดจาก Goldblatt two-kidney one-clip model [10] และแสดงฤทธิ์ renoprotective ในเบาหวานที่เกิดจาก streptozotocin ในหนู [11]
แม้จะมีการใช้ alkaloid boldine อย่างแพร่หลาย แต่กลไกการออกฤทธิ์ต่อการทำงานของไตยังไม่ชัดเจน เมื่อพิจารณาถึงความจำเป็นของวิธีการใหม่ๆ ในการรักษาความดันโลหิตสูงหรือมีส่วนในการป้องกันการเกิดใหม่ต่อความดันโลหิตสูง การศึกษานี้จึงมีวัตถุประสงค์เพื่อตรวจสอบการออกฤทธิ์ขยายหลอดเลือดของ boldine โดยใช้แบบจำลองไตของหนูที่แยกได้และมีเลือดออก เพื่อยืนยันสมมติฐานที่ว่า boldine ทำให้เกิดการผ่อนคลายโดยตรงของหลอดเลือดแดงไต . (e กลไกที่รับผิดชอบในการดำเนินการขยายหลอดเลือดของไตก็ถูกสำรวจด้วย
ผลกระทบของ Cistanche
วัสดุและวิธีการ
1. ยาเสพติด
Boldine (ความบริสุทธิ์มากกว่าหรือเท่ากับ 98 เปอร์เซ็นต์) ถูกซื้อจาก Sigma-Aldrich (เซนต์หลุยส์ มิสซูรี่ สหรัฐอเมริกา) เฮพารินได้มาจาก Crist´alia (เซาเปาโล, SP, บราซิล) ได้ Xylazine และ ketamine hydrochloride จาก Vetec (Vetec, Duque de Caxias, RJ, Brazil) อะเซทิลโคลีนคลอไรด์, อะพามิน, ชาริบโดท็อกซิน, เดกซ์โทรส, ไกลเบนคลาไมด์, ไอบีริโอทอกซิน, อินโดเมธาซิน, เตตระเอธิลแอมโมเนียมคลอไรด์ (TEA), Nω- ไนโตร-แอล-อาร์จินีน เมทิลเอสเทอร์ (L-NAME), ฟีนิลเอฟริน, โซเดียมดีออกซีโคเลต, NaCl, NaHCO3, KCl, CaCl2, MgSO4 ซื้อ , KH2PO4 และ ethylenediaminetetraacetic acid (EDTA) จาก Sigma-Aldrich (เซนต์หลุยส์ มิสซูรี่ สหรัฐอเมริกา)
2. สัตว์
หนู Wistar เพศผู้อายุ 3 เดือน ได้มาจากศูนย์เลี้ยงสัตว์แห่งมหาวิทยาลัย Vale do Itaja´ı (UNIVALI) (e สัตว์ถูกเลี้ยงไว้ที่อุณหภูมิห้องควบคุม (22 ± 2 องศา) 12-รอบแสง/มืดทุกชั่วโมง พร้อมการเข้าถึงน้ำและอาหารฟรี วิธีการและขั้นตอนทั้งหมดที่ใช้ในที่นี้ถูกส่งและอนุมัติโดยคณะกรรมการจริยธรรมเรื่อง การใช้สัตว์ของ UNIVALI ภายใต้การอนุญาตหมายเลข 022/19p และปฏิบัติตามคำแนะนำของ National Control Council of Animal Experimentation
3. การแยกตัวและการไหลเวียนของไตหนู
เพื่อหลีกเลี่ยงการเกิดลิ่มเลือดในหลอดเลือดไตระหว่างขั้นตอนการแยกไตและการกระจายเลือด ก่อนหน้านี้ สัตว์ได้รับการรักษาด้วยเฮปาริน (30 UI, โดยทางช่องท้อง) 5 ถึง 10 นาทีก่อน การบริหารยาชา (e หนูถูกทำให้สลบด้วยคีตามีน 80 มก./กก. บวกไซลาซีน 10 มก./กก. โดยทางช่องท้อง หลังจากได้รับยาสลบลึกแล้ว การผ่าตัดผ่านกล้องทำให้สามารถเข้าถึงอวัยวะภายในของสัตว์ได้ทั้งหมด (ลำไส้ e ถูกย้ายไปทางด้านขวา ช่วยให้มองเห็นไตด้านซ้ายและการผ่าของหลอดเลือดแดงใหญ่ในช่องท้อง ในระหว่างขั้นตอนเหล่านี้ อวัยวะภายใน โดยเฉพาะไตด้านซ้ายจะถูกชุบด้วยผ้าก๊อซสำหรับผ่าตัดที่แช่ในน้ำเกลือทางสรีรวิทยา ท่อไตด้านซ้ายถูกผูกไว้ด้วยความช่วยเหลือของด้ายผ่าตัด ขัดขวางการไหลเวียนของปัสสาวะและเป็นผลให้ไตผลิตปัสสาวะ สายผ่าตัดอีก 1 เส้นวางอยู่ในหลอดเลือดแดงเอออร์ตาในช่องท้องระหว่างหลอดเลือดแดงไตขวาและซ้ายเพื่อควบคุมการไหลเวียนของเลือดไปทางด้านซ้ายเท่านั้น หลอดเลือดแดงถูกขัดจังหวะใต้หลอดเลือดแดงไตด้านขวา (en, แผลเล็ก ๆ ถูกสร้างขึ้นในหลอดเลือดแดงเอออร์ตา, ทำให้สามารถสอดสายสวนไปที่หลอดเลือดแดงไตด้านซ้ายและตรึงไว้กับหลอดเลือดแดงเอออร์ตาด้วยด้ายผ่าตัด (e ด้ายผ่าตัดที่อยู่เหนือหลอดเลือดแดงใหญ่ในช่องท้องถูกมัด ขัดขวางการไหลเวียนของไต และเปิดใช้งานปั๊ม peristaltic perfusion เพื่อเริ่มกระบวนการกระจายเลือด ในกระบวนการไหลเวียนเลือดอย่างต่อเนื่อง ไตจะถูกเอาออกจากช่องท้องและวางในจานเพื่อ กำจัดไขมันและต่อมหมวกไตที่อยู่ติดกันออกเพื่อหลีกเลี่ยงอิทธิพลของต่อมหมวกไตต่อหลอดเลือดไตในระหว่างช่วงการทดลอง (en ไตถูกวางไว้ในห้องที่มีน้ำเกลือทางสรีรวิทยา 100 มล. (PSS; 119 mM NaCl, 4.7 mM KCl, 2.4 mM CaCl2, 1.2 mM MgSO4, 25.0 mM NaHCO3, 1.2 mM KH2PO4, เดกซ์โทรส 11.1 mM และ EDTA 0.03 mM) และควบคู่กับระบบกำซาบซึ่งเก็บไว้ที่อุณหภูมิ 37 องศา เติมอากาศอย่างต่อเนื่องด้วย 95 เปอร์เซ็นต์ O2 และ CO2 ร้อยละ 5 โดยมีการไหลคงที่ 4 มล./นาที ใช้ระยะเวลา 30 นาทีก่อนเริ่มการประเมินการทดลอง (e การบันทึกความดันเลือดผ่านตัวแปลงความดันควบคู่กับระบบกระจายเลือดที่เชื่อมต่อกับโพลีกราฟคอมพิวเตอร์ ด้วยซอฟต์แวร์บูรณาการเฉพาะ (ระบบ PowerLab และซอฟต์แวร์ Chart 7.1, ADInstruments, Castle Hill, ออสเตรเลีย) ไดอะแกรมของการตั้งค่าการทดลองของไตที่ถูกแยกออกมาแสดงในรูปที่ 1
4. การประเมินผลและกลไกของ Boldine ต่อหลอดเลือดแดงไต
หลังจากเวลาคงตัว 30 นาที ตรวจสอบความสมบูรณ์ของเนื้อเยื่อด้วยการฉีด KCl 120 มิลลิโมล (e ความสมบูรณ์ของ endothelium ได้รับการตรวจสอบในอีก 20 นาทีต่อมาด้วยการเติม phenylephrine (300 nmol) ตามด้วย acetylcholine (300 nmol) รออีก 20 นาที จากนั้นการเตรียมการจะถูกทำให้บริสุทธิ์อย่างต่อเนื่องด้วย PSS ที่มี phenylephrine (3 µM) ซึ่งเพียงพอที่จะกระตุ้นให้ความดันเลือดไปเลี้ยงไตเพิ่มขึ้นอย่างต่อเนื่อง หลังจากการรักษาเสถียรภาพของความดันเลือดไปเลี้ยงที่เพิ่มขึ้น ยาเตรียมจะได้รับการฉีดยาลูกกลอนที่มีตัวหนา 10, 30, 100 และ 300 นาโนโมล และประเมินการลดลงของความดันเลือดไปเลี้ยง (การฉีดสารทดสอบในปริมาณ 10 หรือ 30 ul ในปริมาณสุดท้ายผ่านการเข้าถึงใกล้กับยา โดยมีช่วงเวลาน้อยที่สุดคือ 3 นาทีระหว่างโดส ยาเตรียมไตบางชนิดถูกเติมด้วย PSS ที่มีโซเดียมดีออกซีโคเลต (1.8 มก./มล.) เป็นเวลา 30 วินาทีเพื่อกำจัด endothelium ของหลอดเลือดแดงในไต หลังจากฉีด sodium deoxycholate เข้าไป PSS ปกติจะถูกทำให้เสถียรเป็นเวลา 40 นาที (e การขาดการขยายหลอดเลือดยืนยันการกำจัด endothelium หลังจากฉีด acetylcholine แบบลูกกลอน เส้นกราฟการตอบสนองต่อขนาดยา (30, 100 และ 300 nmol) ของ boldine ถูกสร้างขึ้นสำหรับการเตรียมการโดยไม่มี endothelium การตอบสนองถูกบันทึก 10 วินาทีหลังการให้ยา บันทึกการเปลี่ยนแปลงของความดันเลือดไปเลี้ยง (เป็น mmHg) และเปรียบเทียบระหว่างกลุ่ม
ในชุดการทดลองอื่น โดยใช้สารเตรียมที่มี endothelium ที่ไม่บุบสลาย สารเตรียมถูกผสมกับ PSS ที่มี phenylephrine 3 μM บวกกับสารต่อไปนี้: 100 μML-NAME (สารยับยั้งการสังเคราะห์ไนตริกออกไซด์แบบเลือกไม่ได้), 1 μM indomethacin (สารยับยั้ง cyclooxygenase แบบไม่เลือก), 40 mM KCl (การดีโพลาไรเซชันของ K บวกด้วยสื่อกลาง), 10 มิลลิโมลาร์ TEA (ตัวบล็อกช่องสัญญาณโพแทสเซียมแบบไม่จำเพาะเจาะจง), 10 μM glibenclamide (ตัวบล็อกช่องสัญญาณ K บวกที่ไวต่อ ATP แบบเลือก), apamin 10 nM (ตัวนำไฟฟ้าขนาดเล็กที่เลือกได้ Ca2 บวก - เปิดใช้งาน K บวกตัวบล็อกช่องสัญญาณ ), อิเบริออทอกซิน (Ca2 ที่มีความนำไฟฟ้าสูงแบบเลือกสรร บวก -แอกทิเวเต็ด K พลัส แชนเนลบล็อกเกอร์), 1 นาโนโมลาร์ แชริบโดทอกซิน (แคแนกเชียลที่มีความนำไฟฟ้าสูงและระดับกลางที่เลือก บวกกับ -แอกติเวต K บวกแชนเนลบล็อกเกอร์) หลังจากผ่านไป 15 นาที สารตัวหนา (30, 100 และ 300 nmol) ถูกฉีด ความสามารถของมันในการลดความดันเลือดไปเลี้ยงถูกเปรียบเทียบกับผลลัพธ์ที่ได้รับจากสารเตรียมควบคุมที่กระจายไปกับกระสายยาเท่านั้น
5. การวิเคราะห์ทางสถิติ
ผลลัพธ์จะแสดงเป็นค่าเฉลี่ย ± ข้อผิดพลาดมาตรฐานของค่าเฉลี่ยจากการเตรียมการ 6 รายการในแต่ละกลุ่ม (e การวิเคราะห์ทางสถิติดำเนินการโดยใช้การวิเคราะห์ความแปรปรวนทางเดียว (ANOVA) ตามด้วยการทดสอบภายหลังการทดสอบของ Bonferroni ค่าของ p < 0.05 ถือว่ามีนัยสำคัญทางสถิติ (e การวิเคราะห์ทางสถิติดำเนินการโดยใช้ GraphPad Prism ซอฟต์แวร์เวอร์ชัน 6.00 สำหรับ Windows (GraphPad, La Jolla, CA, USA)
ผงซิสแตนช์
ผลลัพธ์และการอภิปราย
ผลของยาขยายหลอดเลือดต่อหลอดเลือดแดงของไตโดยใช้ไตของหนูที่แยกได้และถูกทำให้สมบูรณ์เป็นกลยุทธ์ที่ใช้กันอย่างมากในการประเมินการทำงานของ hemodynamic ของสารประกอบที่แยกได้ โดยมีความใกล้เคียงกับกลไกของการกระทำมากขึ้น ทำให้สามารถประเมินเป้าหมายระดับโมเลกุลที่แตกต่างกันได้ [12] ในการศึกษาปัจจุบัน การให้ boldine (30, 100 และ 300 nmol) ในหลอดเลือดของไตทำให้เกิดผลการขยายขนาดขึ้นกับขนาดยา (รูปที่ 2(c)) จึงเป็นการตอบสมมติฐานเบื้องต้นของงานที่กล่าวถึง ความเป็นไปได้ที่ตัวหนาจะมีฤทธิ์ขยายหลอดเลือดในหลอดเลือดไต (เป็นการศึกษาครั้งแรกที่แสดงให้เห็นถึงผลการผ่อนคลายของ boldine ต่อหลอดเลือดของไต อย่างไรก็ตาม ผลการผ่อนคลายของ boldine ต่อเนื้อเยื่อของหลอดเลือดอื่น ๆ ได้รับการอธิบายครั้งแรกในปี 1996 เมื่อ Chen และคณะ แสดงให้เห็นถึงฤทธิ์ขยายหลอดเลือดของ alkaloid นี้ในหนูที่แยกได้ หลอดเลือดแดงใหญ่ทรวงอก [13]
รูปที่ 2: vasorelaxation ที่เกิดจากขนาดของ Boldine ในไตที่แยกได้และไตที่แยกตัว (a) โครงสร้างโมเลกุลของตัวหนา (b) การติดตามบันทึกความดันเลือดไปเลี้ยงไตแสดงผลของ acetylcholine (ACh) และ boldine (c) ผลของ boldine ต่อความดันเลือดไปเลี้ยงในไตที่แยก endothelium ที่ไม่บุบสลาย (d) ผลของ boldine ต่อการเตรียม endothelium-intact (End plus ) และ endothelium-denuded (End-) (e ข้อมูลแสดงเป็นค่าเฉลี่ย ± SEM จากการทดลอง 6 ครั้ง ∗p < 0.05 เปรียบเทียบกับความดันเลือดไปเลี้ยงหลังการบริหาร PSS (ระบุเป็นหมายเลข 0); # p < 0.05 เมื่อเทียบกับขนาดยาตัวหนา (a) หรือการเตรียม endothelium-denuded ก่อนหน้านี้ (b)
จากผลในเชิงบวกนี้ ได้มีการตรวจสอบเกี่ยวกับการมีส่วนร่วมของ endothelium และกลไกพื้นฐานที่เกี่ยวข้องกับการกระทำที่ผ่อนคลาย ดังที่แสดงในรูปที่ 2(d) ผลของ boldine ในยาเตรียมที่บริหารร่วมกับโซเดียมดีออกซีโคเลตก่อนหน้านี้ (กล่าวคือ เพื่อเอา endothelium) หายไปโดยสิ้นเชิง (รูปที่ 2(d)) ซึ่งบ่งชี้ว่า endothelium ที่ใช้งานได้มีความจำเป็นต่อการขยายหลอดเลือดของมัน การกระทำ. ในทำนองเดียวกัน ผลกระทบของ boldine ในปริมาณทั้งหมดถูกป้องกันในการเตรียมการที่ได้รับการรักษาด้วยสารยับยั้งเอนไซม์ไนตริกออกไซด์ซินเทสแบบไม่เลือก L-NAME (รูปที่ 3 (a)) ในขณะที่การเตรียมการผสมกับสารยับยั้งเอนไซม์ cyclooxygenase ของตัวหนายังคงไม่เปลี่ยนแปลง (รูปที่ 3(b)) ซึ่งบ่งชี้ว่าคุณสมบัติการผ่อนคลายที่ขึ้นกับเอ็นโดทีเลียมของตัวหนานั้นขึ้นอยู่กับการสร้างไนตริกออกไซด์ (NO) และไม่ขึ้นกับการผลิตโพรสแตนอยด์
รูปที่ 3: บทบาทของไนตริกออกไซด์และโปรสแตนอยด์ในผลขยายหลอดเลือดของ boldine ผลของ boldine ต่อการเตรียมไตที่ไม่บุบสลายของ endothelium ที่ผสมกับ (a) L-NAME หรือ (b) indomethacin ข้อมูลแสดงเป็นค่าเฉลี่ย ± SEM จากการทดลอง 6 ครั้ง #p < 0.05 เปรียบเทียบกับสารเตรียมที่ผสมเฉพาะยานพาหนะ
ซิสแทนเช ตูบูโลซา
ปัจจัยหลักที่ทำให้ผ่อนคลายจาก endothelium คือ NO ซึ่งถือว่าเป็นหนึ่งในตัวกลางหลักของกระบวนการเซลล์ ในหลอดเลือด NO ถูกผลิตขึ้นในเซลล์บุผนังหลอดเลือดจาก L-arginine ซึ่งมีฤทธิ์ขยายหลอดเลือด มันแพร่กระจายไปยังเซลล์กล้ามเนื้อเรียบซึ่งมีปฏิสัมพันธ์กับเอนไซม์ guanylate cyclase ที่ละลายน้ำได้ทำให้มันทำงาน ทำให้เกิดการก่อตัวของ cyclic guanosine monophosphate ซึ่งส่งผลให้เซลล์กล้ามเนื้อเรียบของหลอดเลือดคลายตัว [14, 15] เมื่อพิจารณาว่าการกำจัด endothelial หรือการยับยั้งการผลิต NO ผ่านการบริหารของ L-NAME ป้องกันผลกระทบของหลอดเลือดของ boldine ได้อย่างสมบูรณ์ การค้นพบของเราชี้ให้เห็นว่า endothelium ทำหน้าที่สำคัญในการลดความดันเลือดไปเลี้ยงที่เกิดจาก boldine แท้จริงแล้ว การกระทำของ boldine ต่อ endothelium ของหลอดเลือดได้รับการอธิบายไว้ในเอกสารแล้ว การรักษาด้วย Boldine ช่วยเพิ่มการผ่อนคลายสูงสุดให้กับ acetylcholine ในหลอดเลือดแดงใหญ่ของหนูที่มีความดันโลหิตสูงตามธรรมชาติ [9] ปรับปรุงการผ่อนคลายที่ขึ้นกับ endothelium ในหลอดเลือดแดงใหญ่ของหนูเบาหวานที่ได้รับ streptozotocin [16] และปรับปรุงการผ่อนคลายที่ขึ้นกับ endothelium ในหลอดเลือดแดงใหญ่ของหนูที่เป็นเบาหวาน [17 ].
รูปที่ 4: ผลของโพแทสเซียมแชนเนลต่อผลขยายหลอดเลือดของตัวหนา ผลของ boldine ต่อการเตรียมไตที่ไม่บุบสลายของ endothelium ที่ผสมกับ (a) KCl หรือ (b) TEA (e ข้อมูลแสดงเป็นค่าเฉลี่ย ± SEM จากการทดลองหกครั้ง #p < 0.05 เปรียบเทียบกับสารเตรียมที่ผสมเพอร์ฟิวชันเท่านั้น
ในการตรวจสอบการดำเนินการที่เกี่ยวข้องกับช่อง K บวก การเตรียมการถูกผสมด้วยสารละลายธาตุอาหารซึ่งเพิ่ม KCl 40 มิลลิโมลาร์ ซึ่งก่อให้เกิดการสลับขั้วของ K บวก -mediated และ TEA ซึ่งเป็นตัวบล็อกช่อง K บวกแบบไม่เลือก (รูปที่ 4(a) และ 4(b) ตามลำดับ) พบว่าการรักษาทั้งสองวิธีสกัดกั้นผลกระทบของยาคลายหลอดเลือดที่เกิดจาก boldine ซึ่งบ่งชี้ถึงบทบาทที่โดดเด่นของ K plus channel ในผลขยายหลอดเลือดของสารนี้ ช่อง K plus เป็นโครงสร้างโปรตีนที่มีอยู่ในเซลล์ประเภทต่างๆ และทำหน้าที่เป็นรูพรุนในเยื่อหุ้มที่ช่วยให้ K plus ผ่านเข้าไปได้ (ey แบ่งออกเป็น 4 คลาสหลัก: ช่อง K plus ที่ขึ้นกับแรงดันไฟฟ้า, ช่อง K plus ที่ไวต่อ ATP, ช่อง K plus วงจรเรียงกระแสขาเข้า, และช่อง K plus ที่เปิดใช้งาน Ca2 plus [18–20] (e การรักษาด้วย glibenclamide, K plus channel blocker ที่ไวต่อ ATP รักษาการทำงานของ vasorelaxant ของ boldine ไม่เปลี่ยนแปลงในทุกขนาดที่ใช้ (รูปที่ 5 (a)) ในทำนองเดียวกันการไหลเวียนของเลือดด้วย charybdotoxin ซึ่งเป็น Ca2 ที่มีความเป็นตัวนำสูงและปานกลางที่เลือกได้ ตัวปิดกั้น (รูปที่ 6(a)) และ iberiotoxin ซึ่งเป็นตัวนำไฟฟ้าสูงแบบเลือกได้ Ca2 บวกกับ K ที่เปิดใช้งาน K และตัวปิดกั้นช่องสัญญาณ (รูปที่ 6(b)) ไม่ได้แก้ไขการออกฤทธิ์ขยายหลอดเลือดของ boldine ในทางกลับกัน การกระจายของเลือดด้วย apamin ซึ่งเป็นตัวนำไฟฟ้าขนาดเล็กแบบคัดเลือก Ca2 บวก - กระตุ้น K บวกช่องสัญญาณป้องกันการทำงานของหลอดเลือดของตัวหนาอย่างสมบูรณ์ในทุกขนาดที่ทดสอบ (รูปที่ 5 (b)) ซึ่งบ่งชี้ว่าชนิดย่อยของ K บวกช่องนี้ดูเหมือนจะมีความสำคัญต่อการกระทำที่ผ่อนคลาย เกิดขึ้นโดย boldine โดยสรุป เมื่อพิจารณาว่าเป้าหมายปลายน้ำของทางเดินไนตริกออกไซด์ในเรือรวมถึงการเปิดของ K plus channel [21, 22] ผลลัพธ์ชุดนี้ชี้ให้เห็นว่าการขยายตัวของหลอดเลือดที่ขึ้นอยู่กับ endothelium ของ boldine-mediated ในหลอดเลือดแดงไตขึ้นอยู่กับ การเปิดช่องนำไฟฟ้าขนาดเล็ก Ca2 บวก - เปิดใช้งาน K บวกช่องที่เหนี่ยวนำโดยไนตริกออกไซด์ในเซลล์กล้ามเนื้อเรียบ
รูปที่ 5: ผลกระทบของโพแทสเซียมแชนเนลซับไทป์อัพต่อผลขยายหลอดเลือดของตัวหนา ผลของ boldine ต่อการเตรียมไตที่ไม่บุบสลายของ endothelium ที่ผสมกับ (a) glibenclamide หรือ (b) apamin (e ข้อมูลแสดงเป็นค่าเฉลี่ย ± SEM จากการทดลองหกครั้ง #p < 0.05 เปรียบเทียบกับสารเตรียมที่ผสมเพอร์ฟิวชันเท่านั้น
รูปที่ 6: ผลกระทบของโพแทสเซียมแชนเนลซับไทป์อัพต่อผลขยายหลอดเลือดของตัวหนา ผลของ boldine ต่อการเตรียมไตที่ไม่บุบสลายของ endothelium ที่ผสมกับ (a) charybdotoxin หรือ (b) iberiotoxin (ข้อมูล e แสดงเป็นค่าเฉลี่ย ± SEM จากการทดลองหกครั้ง
เป็นที่น่าสังเกตว่าในช่วงไม่กี่ปีที่ผ่านมา มีการศึกษาสารประกอบหลายชนิดที่แยกได้จากพืชสมุนไพรสำหรับการทำงานของไต เผยให้เห็นถึงฤทธิ์ขยายหลอดเลือดที่สำคัญ ขับปัสสาวะ ต้านการเกิดนิ่วในท่อปัสสาวะ และป้องกันความเสียหายจากความดันโลหิตสูง Nothofagin ซึ่งเป็น mono-C-glycoside ของ 4,2′,4′,6′-tetrahydroxy-dihydrochalcone ที่พบในใบ Leandra dasytricha แสดงให้เห็นถึงความสามารถในการกระตุ้น diuresis [23], renoprotection [24], การขยายตัวของหลอดเลือด [12] และ ผลลดความดันโลหิต [25]. สารประกอบต่างๆ จากกลุ่มแซนโทนที่แยกได้จากกิ่งส้มแขกเผยให้เห็นการออกฤทธิ์ขับปัสสาวะแบบเฉียบพลัน [26, 27] ฤทธิ์ขับปัสสาวะและการป้องกันต่ออายุที่ยาวนาน [28] และคุณสมบัติต้านการไหลเวียนของเลือด [29] นอกจากนี้ ไกลโคซิเลตฟลาโวนอยด์ที่ได้รับจากใบของ Bauhinia forficata ยังช่วยขยายหลอดเลือด [30] ขับปัสสาวะ และฤทธิ์ป้องกันไต [31]
ยา Cistanche
อย่างไรก็ตาม แม้ว่าผลลัพธ์ที่อธิบายไว้ในที่นี้ชี้ไปที่การมีส่วนร่วมของ Ca2 บวก -กระตุ้น K บวกช่องอย่างไม่ต้องสงสัยในผลกระทบของไตที่เกิดจากตัวหนา จำเป็นต้องมีการศึกษาเพิ่มเติมเพื่อตรวจสอบเป้าหมายระดับโมเลกุลอื่น ๆ และชนิดย่อยของช่องโดยใช้วิธีการรวมสารยับยั้งที่แตกต่างกัน นอกจากนี้ ข้อจำกัดที่สำคัญอีกประการหนึ่งของการศึกษาคือเราไม่สามารถสำรวจตัวรับที่เกี่ยวข้องกับผลขยายหลอดเลือดของ boldine ซึ่งยังคงต้องศึกษาต่อไปในอนาคต เมื่อพิจารณาถึงการกระทำที่อธิบายไว้แล้วในวรรณกรรมสำหรับสารอัลคาลอยด์นี้ การศึกษานี้เพิ่มเติมเกี่ยวกับผลของยาขยายหลอดเลือดของไต ซึ่งช่วยให้เข้าใจถึงศักยภาพของกล้าดีนในการใช้เป็นเภสัชบำบัดหรือผลิตภัณฑ์เสริมอาหารได้ดียิ่งขึ้น
อ้างอิง
[1] ม.ด. F. อักกรา, PF d. Freitas และ JM Barbosa-Filho, "เรื่องย่อของพืชที่รู้จักกันว่าเป็นยาและมีพิษในภาคตะวันออกเฉียงเหนือของบราซิล" Revista Brasileira de Farmacognosia, vol. 17 ไม่ 1, หน้า 114–140, 2007.
[2] MGL Brandão, GP Cosenza, RA Moreira และ RLM Monte-Mor, "พืชสมุนไพรและผลิตภัณฑ์พฤกษศาสตร์อื่นๆ จากเภสัชตำรับทางการของบราซิล" Rev Bras Farmacogn, vol. 16 หน้า 408–420, 2549
[3] C. Viegas, VS Bolzani, J. Eliezer และ EJ Barreiro, "(e ผลิตภัณฑ์จากธรรมชาติและเคมีทางการแพทย์สมัยใหม่," Quimica Nova, vol. 29, no. 2, 2006.
[4] ALTG Ruiz, D. Tafarello, VHS Souza และ JE Carvalho, "เภสัชวิทยาและพิษวิทยาของ Peumus boldus และ Baccharis genistelloides," Rev. bras ฟาร์มาโคโนเซีย. ฉบับ 18 ไม่ 2, 2008.
[5] P. O'Brien, C. Carrasco-Pozo และ H. Speisky, "Boldine และสารต้านอนุมูลอิสระหรือคุณสมบัติส่งเสริมสุขภาพ" Chemico-Biological Interactions, vol. 159 หน้า 1–17 พ.ศ. 2549
[6] YY Jang, JH Song, YK Shin, ES Han และ CS Lee, "ผลการป้องกันของ boldine ต่อความเสียหายของไมโทคอนเดรียออกซิเดชันในหนูเบาหวานที่เกิดจากสเตรปโตโซโทซิน" การวิจัยทางเภสัชวิทยา ฉบับที่ 42 ไม่ 4 หน้า 361–371, 2000
[7] T. Boeing, LNB Mariano, AC Dos Santos, et al., "ผลการป้องกันระบบทางเดินอาหารของ alkaloid boldine: การมีส่วนร่วมของกลุ่ม sulfhydryl ที่ไม่ใช่โปรตีน, prostanoids และการลดลงของความเครียดจากปฏิกิริยาออกซิเดชัน," Chemico-Biological Interactions, vol. 327, รหัสบทความ 109166, 2020.
[8] YS Lau, WC Ling, D. Murugan และ MR Mustafa, "Boldine ameliorates vascular oxidative stress and endothelial dysfunction," Journal of Cardiovascular Pharmacology, vol. 65 ไม่ 6, หน้า 522–531, 2015.
[9] ย.-ส. Lau, A. Machha, FI Achike, D. Murugan และ MR Mustafa, "(e aporphine alkaloid boldine ช่วยเพิ่มการทำงานของ endothelial ในหนูที่มีความดันโลหิตสูงตามธรรมชาติ," Experimental Biology and Medicine, vol. 237, no. 1, pp. 93–98 , 2555.
[10] GI G´omez และ V. Velarde, "Boldine ปรับปรุงความเสียหายของไตในแบบจำลอง Goldblatt 2K1C โดยหลีกเลี่ยงการเพิ่มขึ้นของ TGF- ," International Journal of Molecular Sciences, vol. 19 ไม่ 7 หน้า พ.ศ. 2407, 2561.
[11] R. Hern´andez-Salinas, AZ Vielma, MN Arismendi, MP Boric, JC S´aez และ V. Velarde, "Boldine ป้องกันการเปลี่ยนแปลงของไตในหนูที่เป็นเบาหวาน" Journal of Diabetes Research, vol. 2013, รหัสบทความ 593672, 2013.
[12] AAM Marques, CHF da Silva, P. de Souza, et al., "ไนตริกออกไซด์และ Ca2 บวก - กระตุ้น K ที่มีความนำไฟฟ้าสูงและช่องสัญญาณเป็นสื่อกลางการขยายตัวของหลอดเลือดที่ขึ้นกับ endothelium ของ nothofagin ในไตของหนูที่ถูกดูดเลือด" Chemico- ปฏิสัมพันธ์ทางชีวภาพ ฉบับ 327, รหัสบทความ 109182, 2020.
[13] KS Chen, FN Ko, CM Teng และ YC Wu, "การกระทำของยาต้านเกล็ดเลือดและ vasorelaxant ของ aporphinoids บางชนิด" Planta Medica, vol. 62 ไม่ 2, หน้า 133–136, 1996.
[14] GA Shiekh, T. Ayub, SN Khan, R. Dar และ KI Andrabi, "ระดับไนเตรตที่ลดลงในบุคคลที่เป็นโรคความดันโลหิตสูงและโรคเบาหวาน" Journal of Cardiovascular Disease Research, vol. 2 ไม่ 3, หน้า 172–176, 2011.
[15] ES Underbakke, AT Iavarone, MJ Chalmers, et al., "การเปลี่ยนแปลงโครงสร้างที่เกิดจากไนตริกออกไซด์ใน guanylate cyclase ที่ละลายน้ำได้" โครงสร้าง ฉบับที่ 22 ไม่ 4, หน้า 602–611, 2014.
[16] YS Lau, XY Tian, Y. Huang, D. Murugan, FI Achike และ MR Mustafa, "Boldine ปกป้องการทำงานของ endothelial ในความเครียดออกซิเดชั่นที่เกิดจากน้ำตาลในเลือดสูงผ่านกลไกการต้านอนุมูลอิสระ" เภสัชวิทยาทางชีวเคมี ฉบับที่ 85 ไม่ 3, หน้า 367–375, 2013ก.
[17] YS Lau, XY Tian, MR Mustafa, et al., "Boldine ปรับปรุงการทำงานของ endothelial ในผู้ป่วยเบาหวานโดยผ่านการยับยั้ง angiotensin II-mediated BMP4-น้ำตกความเครียดจากปฏิกิริยาออกซิเดชัน" British Journal of Pharmacology, vol . 170 ไม่ 6, หน้า 1190– 1198, 2013b.
[18] M. Baranowska, H. Kozłowska, A. Korbut และ B. Malinowska, "ช่องโพแทสเซียมในหลอดเลือด: บทบาทในสุขภาพและโรค" Postepy Higieny I Medycyny Doswladczalnej, vol. 61, หน้า 596–605, 2007.
[19] WF Jackson, "Potassium channel in the peripheral microcirculation," Microcirculation, vol. 12 ไม่ 1, หน้า 113–127, 2005.
[20] BF Palmer และ DJ Clegg, "สรีรวิทยาและพยาธิสรีรวิทยาของโพแทสเซียมในสภาวะสมดุล" ความก้าวหน้าในการศึกษาสรีรวิทยา ฉบับที่ 40 ไม่ 4, หน้า 480–490, 2016.
[21] SL Archer, JM Huang, V. Hampl, DP Nelson, PJ Shultz และ EK Weir, "ไนตริกออกไซด์และ cGMP ทำให้เกิดการผ่อนคลายของหลอดเลือดโดยการเปิดใช้งานช่อง K ที่ไวต่อ charybdotoxin โดยไคเนสโปรตีนที่ขึ้นกับ cGMP" การดำเนินการของ สถาบันวิทยาศาสตร์แห่งชาติ ฉบับที่ 91 เลขที่ 16 หน้า 7583–7587, 1994
[22] VM Bolotina, S. Najibi, JJ Palacio, PJ Pagano และ RA Cohen, "ไนตริกออกไซด์กระตุ้นช่องโพแทสเซียมที่ขึ้นกับแคลเซียมโดยตรงในกล้ามเนื้อเรียบของหลอดเลือด" Nature, vol. 368 เลขที่ 6474 หน้า 850–853, 1994
[23] CLB de Almeida, T. Boeing, LB Somensi, et al., "ผลขับปัสสาวะ, natriuretic และโพแทสเซียมของ nothofagin ที่แยกได้จาก Leandra dasytricha (A. Grey) Cogn. ออกจากหนูที่มีภาวะปกติและความดันโลหิตสูง" Chemico- ปฏิสัมพันธ์ทางชีวภาพ ฉบับ 268, หน้า 103–110, 2017.
[24] CLB de Almeida, V. Cechinel-Filho, T. Boeing et al., "ผลขับปัสสาวะและ saluretic เป็นเวลานานของ nothofagin ที่แยกได้จาก Leandra dasytricha (A. Grey) Cogn. leaf in normotensive and hypertensive rats: บทบาทของระบบต้านอนุมูลอิสระ และการปกป้องไต" Chemico-Biological Interactions, vol. 279, น. 227–233, 2018.
[25] CH da Silva, RA Palozi, P. de Souza, et al., "เส้นทางการส่งสัญญาณไนตริกออกไซด์/ cGMP และช่องโพแทสเซียมมีส่วนทำให้เกิดความดันโลหิตตกของโนโทฟากิน" Minerva Cardioangiologica, vol. 68 ไม่ 6, หน้า 602–608, 2020.
[26] LN Bolda Mariano, T. Boeing, R. d. ซีเอ็มวี ง. AF da Silva et al., "1,3,5,6-Tetrahydroxyxanthone ซึ่งเป็นแซนโทนตามธรรมชาติ กระตุ้นการขับปัสสาวะและทักทายในหนูที่มีความดันปกติและความดันโลหิตสูง" Chemico-Biological Interactions, vol. 311, รหัสบทความ 108778, 2019.
[27] LN Bolda Mariano, T. Boeing, V. Cechinel-Filho, R. Niero, L. Mota da Silva และ P. de Souza, "(e ฤทธิ์ขับปัสสาวะเฉียบพลันด้วยปริมาณแซนโทน prenylated ธรรมชาติในปริมาณต่ำในหนู " European Journal of Pharmacology, vol. 884, Article ID 173432, 2020.
[28] LN Bolda Mariano, T. Boeing, V. Cechinel Filho, et al., "ผลขับปัสสาวะและการป้องกันต่ออายุที่ยาวนานของแซนโทนที่ได้รับจาก Garcinia achachairu rusby ในหนูที่มีความดันปกติและความดันโลหิตสูง" Evid-based Complement Alternative Medicine, vol. 2021, Article ID 5510053, 9 หน้า, 2021
[29] LNB Mariano, T. Boeing, V. Cechinel Filho, R. Niero, L. Mota da Silva และ P. de Souza, "1,3,5,6-tetrahydroxyxanthone ส่งเสริมการขับปัสสาวะ การปกป้องไต และ คุณสมบัติต่อต้าน urolithic ในหนู normotensive และ hypertensive," Journal of Pharmacy and Pharmacology, vol. 73 เลขที่ 5 หน้า 700–708 2021
[30] CC Cechinel-Zanchett, R. d. ซีเอ็มวี ง. AF da Silva, A. Tenfen, et al., "Bauhinia forficata link ซึ่งเป็นพืชสมุนไพรของบราซิลที่ใช้กันทั่วไปในการรักษาความผิดปกติของหัวใจและหลอดเลือด ออกแรงขยายหลอดเลือดที่ขึ้นกับ endothelium และเป็นอิสระในหลอดเลือดแดงใหญ่ทรวงอกของหนูที่มีภาวะปกติและความดันโลหิตสูง" Journal of Ethnopharmacology, vol . 243, น. 112118, 2019.
[31] CC Cechinel-Zanchett, LN Bolda Mariano, T. Boeing et al., "ผลขับปัสสาวะและป้องกันไตของ kaempferol 3- O-Alpha-l-rhamnoside (afzelin) ในหนูที่มีภาวะปกติและความดันโลหิตสูง" วารสาร ของเนเชอรัลโปรดักส์ เล่มที่ 83 ไม่ 6 หน้า 1980–1989, 2020
Priscila de Souza, 1 Rita de C´assia Vilhena da Silva,1 Luisa Mota da Silva,1 Viviane Miranda Bispo Steimbach,1 Karyne Garcia Tafarelo Moreno,2 และ Arquimedes Gasparotto Junior 2
1 Graduate Program in Pharmaceutical Sciences, Nucleus of Chemical-Pharmaceutical Investigations (NIQFAR), University of Vale do Itaja´ı, Itaja´ı, เซาท์แคโรไลนา, บราซิล
2 ห้องปฏิบัติการ Electrophysiology และ Cardiovascular Pharmacology คณะวิทยาศาสตร์สุขภาพ Universidade Federal da Grande Dourados, Dourados, Mato Grosso do Sul ประเทศบราซิล
