องค์ประกอบออกฤทธิ์ทางชีวภาพจากยาธรรมชาติของจีน XXXVI.1) สี่ใหม่ Acylated Phenylethanoid Oligoglycosides, Kankanosides J1, J2, K1 และ K2 จากลำต้นของ Cistanche Tubulosa

Yingni PAN, Toshio MORIKAWA, Kiyofumi NINOMIYA, Katsuya IMURA, Dan YUAN, Masayuki YOSHIKAWA และ Osamu MURAOKA

สถาบันวิจัยและเทคโนโลยีเภสัชศาสตร์ มหาวิทยาลัย Kinki; 3–4–1 Kowakae, Higashi-Osaka, โอซาก้า 577–8502, ญี่ปุ่น: School of Traditional Chinese Medicine, Shenyang Pharmaceutical University; 103 Wenhua Rd., Shenyang 110016, สาธารณรัฐประชาชนจีน: และ Kyoto Pharmaceutical University; มิซาซากิ, ยามาชินะ-คุ, เกียวโต 607–8412, ญี่ปุ่น ได้รับ 28 พฤศจิกายน 2552; ยอมรับ 2 กุมภาพันธ์ 2010; เผยแพร่ออนไลน์ 4 กุมภาพันธ์ 2010

ติดต่อ:joanna.jia@wecistanche.com

เชิงนามธรรม

อะซิเลต phenylethanoid aminoglycosides ใหม่สี่ชนิด kankanosides J1 (1), J2 (2), K1 (3) และ K2 (4) ถูกแยกออกจากลำต้นของCistanchetubulosa(Orobanchaceae) ร่วมกับ isocampneoside I (5). โครงสร้างของพวกเขาได้รับการอธิบายโดยอาศัยหลักฐานทางเคมีและฟิสิกส์เคมี ในหมู่พวกเขา พบว่า 3-5 ตัวยับยั้งความเป็นพิษต่อเซลล์ที่เกิดจาก D-galactosamine ในเซลล์ตับของหนูเมาส์ที่เพาะเลี้ยงขั้นต้น

Cistanchetubulosa มีเอฟเฟกต์มากมาย คลิกที่นี่เพื่อทราบข้อมูลเพิ่มเติม

คำสำคัญ:Cistanchetubulosa; ฝั่งลังกา ฟีนิลทานอยด์ไกลโคไซด์; วงศ์โอโรบานเช่; กิจกรรมป้องกันตับ

ในระหว่างการศึกษาเกี่ยวกับองค์ประกอบออกฤทธิ์ทางชีวภาพจากยาธรรมชาติของจีน 1-3) เราพบว่าสารสกัดเมทานอลจากลำต้นแห้งของCistanchetubulosa(SCHRENK) R. WIGHT (Orobanchaceae) แสดง vasorelaxant4) และกิจกรรม hepatoprotective 1) จากลำต้นแห้งของ C.tubulosaไอริดอยด์ห้าชนิด แคนคาโนไซด์ A—D และแคนคานอล โมโนเทอร์ปีนไกลโคไซด์ แคนคาโนไซด์อี ฟีนิลธานอยด์อะมิโนไกลโคไซด์สองชนิด แคนคาโนไซด์ F และ G และน้ำตาลโอลิโกอะซิเลต แคนคาโนส ถูกแยกรวมกับองค์ประกอบที่รู้จัก 30 รายการ 4,5) เมื่อเร็วๆ นี้ ฟีนิลทานอยด์ อะมิโนไกลโคไซด์ 19 ตัวที่แยกได้เพิ่มเติม รวมทั้งแคนคาโนไซด์ H1, H2 และ I 1) และโอลิโกชูการ์ที่มีอะซิเลตสองชนิดจากลำต้นสดของซี. 1) นอกจากนี้ พบว่า phenylethanoid glycosides, echinacoside, acteoside และ isoacteoside หลักสามารถยับยั้งการเพิ่มขึ้นของระดับ serum aspartate aminotransferase (sAST) และ alanine aminotransferase (sALT) ในหนูที่ได้รับบาดเจ็บที่ตับที่เกิดจาก D-galactosamine (D-GalN) / ไลโปโพลีแซคคาไรด์ในขนาด 25—100 มก./กก. ต่อ os (po) และความต้องการโครงสร้างของฟีนิลทานอยด์ไกลโคไซด์สำหรับกิจกรรมป้องกันตับได้รับการอธิบาย 1) จากการศึกษาต่อเนื่องเกี่ยวกับองค์ประกอบจากลำต้นสดของซีtubulosaเรายังแยกโอลิโกไกลโคไซด์ phenylethanoid ใหม่สี่ชนิด kankanosides J1 (1), J2 (2), K1 (3) และ K2 (4) ออก บทความนี้กล่าวถึงการแยกและการอธิบายโครงสร้างของ 1-4

ลำต้นสดของซีtubulosa(ปลูกในอุรุมชี มณฑลซินเจียง ประเทศจีน) สกัดด้วยเมทานอลภายใต้กรดไหลย้อนเพื่อให้ได้สารสกัดเมทานอล (ร้อยละ 8.36 จากลำต้นสด) จากสารสกัดเมทานอล เศษส่วนที่ถูกชะ H2O และ MeOH (5.63 เปอร์เซ็นต์ และ 2.73 เปอร์เซ็นต์ ตามลำดับ) ได้มาจาก Diaion HP-20 column chromatography (H2O→MeOH) ดังที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้1) โดยโครมาโตกราฟีแบบเข้มข้นบน เศษส่วนของ MeOH-eluted, สี่ phenylethanoid oligoglycosides ใหม่, kankanosides J1 (1, 0.0002 เปอร์เซ็นต์ ), J2 (2, 0 .0002 เปอร์เซ็นต์ ), K1 (3, 0.0002 เปอร์เซ็นต์ ) และ K2 (4, 0.0005 เปอร์เซ็นต์ ) ร่วมกับ isocampneoside I6) (5, 0.0006 เปอร์เซ็นต์ ) ถูกแยกออกมา

โครงสร้างของ Kankanosides J1 (1) และ J2 (2) Kankanoside J1 (1) ได้มาเป็นผงสีขาวที่มีการหมุนด้วยแสงเป็นลบ ([a]D 25 - 6.5 องศาใน MeOH) สเปกตรัมอินฟราเรดของ 1 แสดงแถบดูดกลืนที่ 3414, 1734, 1719, 1701, 1638, 1508, 1159, 1067 และ 1046 ซม.- 1 ที่สามารถระบุเป็นไฮดรอกซิล เอสเทอร์ คาร์บอนิล ฟังก์ชันอีเทอร์ และวงแหวนอะโรมาติก สเปกตรัม FAB-MS ที่เป็นบวกและลบของ 1 แสดงพีคไอออนควอซิโมเลกุลที่ m/z 719 (M- Na) และ m/z 695 (MH) และสูตรโมเลกุลถูกกำหนดหาเป็น C32H40O17 โดยค่าบวก- การวัดค่าไอออน FAB-MS สเปกตรัม 1 H- และ 13C-NMR ของ 1 (CD3OD, ตารางที่ 1, 2) ซึ่งถูกกำหนดโดยการทดลอง NMR ต่างๆ7) แสดงสัญญาณที่กำหนดให้กับกลุ่มเมทอกซี [d 3.21 (3H, s, 7- OCH3)], เมทิลีนและเมทีนที่มีฟังก์ชันออกซิเจน [d 3.58, 4.00 (แต่ละ H, ทั้งสอง m, 8-H2), 4.18 (1H, dd-like, J ca. 4, 8 Hz, 7-H)], โปรตอนอะโรมาติกประเภท ABC แบบออร์โธและคู่เมตา [d 6.63 (1H, dd, J 1.8, 8.2 Hz, 6-H), 6.74 (1H) , d, J 1.8 Hz, 2-H), 6.74 (1H, d, J 8.2 Hz, 5- H)], bD-glucopyranosyl moiety [d 4.54 (1H, d, J 7.8 Hz) , Glc-1-H)], และ aL-rhamnopyranosyl moiety [d 1.07 (3H, d, J 6.4 Hz, Rha-6-H3), 4.80 (1H, br s, Rha{{103} }H)] ร่วมกับหมู่อะซีติล [d 2.00 (3H, s)] และหมู่ทรานส์คาเฟอีน {ทรานส์-โอเลฟิฟิน [d 6.26, 7.59 (แต่ละหมู่ 1H, ทั้งคู่ d, J{{ 114}}.0 Hz, 8-, 7-H)] และโปรตอนอะโรมาติกประเภท ABC แบบออร์โธและคู่เมตา [d 6.77 (1H, d, J 8.2 Hz, 5- H), 6.95 (1H, dd, J- 1.8, 8.2 Hz, 6-H), 7.04 (1H, d, J 1.8 Hz, 2-H)]} สเปกตรัม 1 H- และ 13C-NMR ของ 1 สามารถซ้อนทับกันได้บนสเปกตรัมเหล่านั้นของแคมป์นีโอไซด์ I1,8-10) (6) ยกเว้นสัญญาณเนื่องจากหมู่อะซีติล ความเชื่อมโยงของอะมิโนไกลโคไซด์และอะซิลมอยอิตีใน 1 ได้รับการยืนยันโดยการทดลองเฮเทอโรนิวเคลียร์หลายพันธะ (HMBC) ซึ่งแสดงความสัมพันธ์ระยะยาวระหว่างคู่โปรตอนและคาร์บอนต่อไปนี้: 7-OCH3 และ 7-C ( ดีซี 83.3); Glc-1-H และ 8-C (dC 74.1); Glc-2-H [d 4.91 (1H, dd, J- 7.8, 9.2 Hz)] และอะซิติลคาร์บอนิลคาร์บอน (dC 171.4); Glc-4-H [d 4.99 (1H, dd, J 9.2, 9.6 Hz)] และทรานส์คาฟเฟโออิลคาร์บอนิลคาร์บอน (dC 168.1); และ Rha-1-H และ Glc-3-C (dC 80.5) (รูปที่ 1) สุดท้าย การไฮโดรไลซิสแบบอัลคาไลน์ 1 ที่มีโพแทสเซียมไฮดรอกไซด์ (KOH) 5 เปอร์เซ็นต์ที่ปลดปล่อยกรดทรานส์-คาเฟอีนซึ่งถูกระบุโดยการวิเคราะห์ด้วย HPLC ร่วมกับผลิตภัณฑ์ที่ไม่ผ่านการสลายตัว ผลิตภัณฑ์ที่ถูกดีอะซิเลตถูกบำบัดอย่างต่อเนื่องด้วยกรดไฮโดรคลอริก 1.0 โมลาร์ (HCl) เพื่อปลดปล่อยแอล-แรมโนสและดี-กลูโคส ซึ่งถูกระบุโดยการวิเคราะห์ HPLC โดยใช้ตัวตรวจวัดการหมุนด้วยแสง 1–5) ดังนั้น โครงสร้างของแคนคาโนไซด์ J1 ได้รับการอธิบายเพื่อ เป็น 2-เมทอกซี-2-(3,4-ไดไฮดรอกซี ฟีนิล)เอทิล OaL-rhamnopyranosyl-(1→3)-2-O-อะซีติล-4-O-ทรานส์- caffeoyl-bD-glucopyranoside (1).

Kankanoside J2 (2) ถูกแยกออกมาเป็นผงสีขาวที่มีการหมุนของแสงเป็นลบ ([a]D 25 - 18.1 องศาใน MeOH) โดยการวัดค่า FAB-MS ที่มีประจุบวกที่มีประจุบวกสูง พบว่าสูตรโมเลกุลของ 2 เหมือนกับของ 1 ข้อมูล 1 H- และ 13C-NMR ของ 2 (CD3OD, ตารางที่ 1, 2) มีค่ามาก คล้ายกับของ 1 ยกเว้นสัญญาณเนื่องจากเอทิลบริดจ์ของอะไกลโคนมอยอิตี {กลุ่มเมทอกซี [d 3.24 (3H, s, 7-OCH3)], เมทิลีน [d 3.63 (1H, m) , 3.83 (1H, dd, J- 3.2, 11.0 Hz), 8-H2] และเมไทน์ที่มีฟังก์ชันออกซิเจน [d 4.22 (1H, dd, J{ {38}}.2, 8.2 Hz, 7-H)]}. การไฮโดรไลซิสแบบอัลคาไลน์ 2 ด้วยกรดทรานส์คาเฟอีนที่ปลดปล่อย KOH 5 เปอร์เซ็นต์ร่วมกับผลิตภัณฑ์ดีไซเลต และผลิตภัณฑ์ที่ถูกดีอะซิเลตได้รับการรักษาอย่างต่อเนื่องด้วย 1.0 M HCl เพื่อปลดปล่อย L-rhamnose และ D-glucose ดังที่แสดงไว้ในรูปที่ 1 ความสัมพันธ์ระยะยาวที่เหมือนกันกับในกรณีของ 1 ถูกสังเกตพบในการทดลอง HMBC ดังนั้น โครงสร้างระนาบของ kankanoside J2 (2) ถูกเปิดเผยว่าเหมือนกับของ 1 และอธิบายเป็น 7-isomer ของ 1. 11)

โครงสร้างของ Kankanosides K1 (3) และ K2 (4) Kankanosides K1 (3) และ K2 (4), C36H48O21 ยังได้รับเป็นผงสีขาวที่มีการหมุนด้วยแสงเชิงลบ (3: [a]D 25 - 75.3 องศา ; 4: [a]D 25 - 7.4 องศาทั้งใน MeOH) สเปกตรัม 1 H- และ 13C-NMR ของ 3 และ 4 (CD3OD, ตารางที่ 1, 2) แสดงสัญญาณที่กำหนดให้กับกลุ่มเมทอกซี [3: d 3.23 (3H, s, {{30}} OCH3) ; 4: d 3.25 (3H, s, 7-OCH3)] เมทิลีนและเมไทน์ที่มีฟังก์ชันออกซิเจน {3: d [3.62 (1H, dd, J- 3.4,11.{{ 52}} Hz), 4.{{70}}2 (1H, dd, J- 8.1, 11.0 Hz), 8-H2] , 4.34 (1H, dd, J- 3.4, 8.1 Hz, 7-H); 4: d [3.72 (1H, dd, J- 9.1, 11.{{110}} Hz), 3.84 (1H, dd, J- 3.1, 11.0 Hz), 8-H2], 4.37 (1H, dd, J- 3.1, 9.1 Hz, 7-H)}, โปรตอนอะโรมาติกชนิด ABC แบบออร์โธและคู่เมตา [ 3: d 6.68 (1H, dd, J- 2.0, 8.1 Hz, 6-H), 6.76 (1H, d, J- 8.1 Hz, 5- H), 6.80 (1H, d, J- 2.0 Hz, 2-H); 4: d 6.67 (1H, dd, J- 1.9, 8.2 Hz, 6-H), 6.76 (1H, d, J- 8.2 Hz, 5- H), 6.78 (1H, d, J- 1.9 Hz, 2-H)], มอยอิตี bD-glucopyranosyl สองตัว [3: d 4.31 (1H, d, J- 7 9 Hz, ขั้ว-Glc-1-H), 4.40 (1H, d, J- 7.9 Hz, inner-Glc-1-H); 4: d 4.26 (1H, d, J- 7.7 Hz, terminal-Glc-1-H), 4.44 (1H, d, J- 7.9 Hz, inner-Glc{ {164}}H)] และ aL-rhamnopyranosyl moiety [3: d 1.08 (3H, d, J 6.4 Hz, Rha-6-H3), 5.19 (1H, d, J- 1 7 Hz, Rha-1-H); 4: d 1.08 (3H, d, J- 6.2 Hz, Rha-6-H3), 5.20 (1H, d, J- 1.6 Hz, Rha-1- H)] ร่วมกับหมู่ทรานส์-คาเฟอีน {ทรานส์-โอเลฟิฟิน [3: d 6.27, 7.60 (อย่างละ 1H, ทั้งสอง d, J- 15.8 Hz, 8-, 7- ชม); 4: d 6.28, 7.60 (แต่ละอัน 1H, ทั้ง d, J- 15.8 Hz, 8-, 7-H)] และโปรตอนอะโรมาติกประเภท ABC แบบออร์โธและเมตาคู่ [ 3: d 6.78 (1H, d, J- 8.3 Hz, 5-H), 6.96 (1H, dd, J- 1.9, 8.3 Hz, 6- H), 7.05 (1H, d, J- 1.9 Hz, 2-H)]; 4: d 6.78 (1H, d, J- 8.4 Hz, 5-H), 6.96 (1H, dd, J- 1.9, 8.4 Hz, 6- H), 7.05 (1H, d, J- 1.9 Hz, 2-H)} สัญญาณโปรตอนและคาร์บอนในสเปกตรัม 1 H- และ 13C-NMR ของ 3 และ 4 ซ้อนทับกันได้กับสัญญาณของอิชินาโคไซด์,1,4,12) ยกเว้นสัญญาณเนื่องจากกลุ่มเมทอกซี 7- ความเชื่อมโยงของกลุ่มทรานส์คาเฟอีนและไกลโคซิลมอยอิตีใน 3 และ 4 ถูกอธิบายโดยอาศัยพื้นฐานของการทดลอง HMBC ดังแสดงในรูปที่ 1 ในที่สุด อัลคาไลน์ไฮโดรไลซิสของ 3 และ 4 ที่มี KOH 5 เปอร์เซ็นต์ ให้ผลิตภัณฑ์ที่ถูกดีไซเลตร่วมกับทรานส์ - กรดคาเฟอีน ผลิตภัณฑ์ที่ไม่ผ่านการย่อยสลายเหล่านี้ได้รับการบำบัดอย่างต่อเนื่องด้วย 1.0 M HCl เพื่อปลดปล่อย L rhamnose และ D-glucose ตามลำดับ ดังนั้น, โครงสร้างของแคนคาโนไซด์ K1 และ K2 ถูกกำหนดหาเป็น 2-เมทอกซี-2-(3,4-ไดไฮดรอกซี ฟีนิล)เอทิล OaL-rhamnopy-ranosyl-(1→3)-[bD -glucopyranosyl-(1→6)]-4-O-trans-caf-feel-bD-glucopyranoside (3 และ 4).11,13)

แอคทีโอไซด์ในcistancheมีผลกับความจำมากมาย

ก่อนหน้านี้สารสกัดเมทานอลจากลำต้นของซี.tubulosaและองค์ประกอบฟีนิลทานอยด์หลายชนิด เช่น อิชินาโคไซด์แอคทีโอไซด์, และไอโซแอคทีโอไซด์พบว่าแสดงผล hepatoprotective ต่อ D-galactosamine (D-GalN) / ​​การบาดเจ็บของตับที่เกิดจาก lipopolysaccharide ในหนูทดลองและผลการยับยั้งต่อความเป็นพิษต่อเซลล์ที่เกิดจาก D-GalN ในเซลล์ตับของหนูเมาส์ที่เพาะเลี้ยงปฐมภูมิ 1) เราตรวจสอบผลการยับยั้งของ kankanosides K1 เพิ่มเติม ( 3) และ K2 (4) และไอโซแคมป์นีโอไซด์ I (5) ต่อความเป็นพิษต่อเซลล์ที่เกิดจาก D-GalN ในเซลล์ตับที่เพาะเลี้ยงขั้นต้น แม้ว่ากิจกรรมของพวกมันจะอ่อนแอกว่าของอิชินาโคไซด์ (IC50 10.2 mM)แอคทีโอไซด์(4.6 mM) และ isoacteoside (5.3 mM) ส่วนประกอบหลักของฟีนิลทานอยด์จากลำต้นของ C. tubulosa, 1) 3-5 แสดงฤทธิ์ปานกลาง14)

ทดลอง

เครื่องมือต่อไปนี้ถูกใช้เพื่อให้ได้ข้อมูลสเปกตรัมและทางกายภาพ: การหมุนจำเพาะ, Horiba SEPA-300 โพลาริมิเตอร์แบบดิจิตอล (l- 5 ซม.); ยูวีสเปกตรัม, Shimadzu UV-1600 สเปกโตรมิเตอร์; สเปกตรัมอินฟราเรด, สเปกโตรมิเตอร์ Shimadzu FTIR-8100; 1 สเปกตรัม H- และ 13C-NMR, JEOL JNM-ECA600 (600, 150 MHz) และ JEOL JNM-ECS400 (400, 100 MHz) สเปกโตรมิเตอร์ที่มีเตตราเมทิลไซเลนเป็นมาตรฐานภายใน FAB-MS และ FAB-MS ความละเอียดสูง, JEOL JMS-SX 102A แมสสเปกโตรมิเตอร์; เครื่องตรวจจับ HPLC, Shimadzu RID-10ดัชนีการหักเหของแสง, Shimadzu SPD-10A UV–VIS และเครื่องตรวจจับการหมุนด้วยแสง Shodex OR-2 คอลัมน์ HPLC, Cosmosil 5C18-MS-II และคอลัมน์ pNAP (Nacalai Tesque Inc., 250 4.6 มม. id) และ (250 20 มม. id) ถูกใช้เพื่อวัตถุประสงค์ในการวิเคราะห์และการเตรียมการตามลำดับ

แอคทีโอไซด์ในcistancheส่งผลดีต่อไต

เงื่อนไขการทดลองต่อไปนี้ถูกใช้สำหรับโครมาโตกราฟี: เฟสปกติซิลิกาเจลคอลัมน์โครมาโตกราฟี (CC), ซิลิกาเจล 60N (Kanto Chemical Co., Ltd., 63—210 mesh, spherical, เป็นกลาง); CC ซิลิกาเจลแบบย้อนกลับ, Diaion HP-20 (Nippon Rensui) และ Chromatorex ODS DM1020T (Fuji Silesia Chemical, Ltd., 100–200 mesh); TLC เฟสปกติ, แผ่น TLC ที่เคลือบไว้ล่วงหน้าด้วยซิลิกาเจล 60F254 (เมอร์ค, 0.25 มม.); TLC แบบย้อนกลับ, แผ่น TLC ที่เคลือบไว้ล่วงหน้าด้วยซิลิกาเจล RP-18 F254S (Merck, 0.25 มม.); HPTLC แบบย้อนกลับเฟส, แผ่น TLC ที่เคลือบไว้ล่วงหน้าด้วยซิลิกาเจล RP-18 WF254S (Merck, 0.25 มม.) การตรวจจับทำได้โดยการฉีดพ่นด้วย H2SO4 ในน้ำ 1 เปอร์เซ็นต์ (SO4) 2–10 เปอร์เซ็นต์ H2SO4 ตามด้วยการให้ความร้อน .

วัสดุจากพืช

รายการนี้อธิบายไว้ในรายงานที่แล้ว1)

การสกัดและการแยกตัว

ลำต้นสดของซีtubulosa(2.98 กก.) ถูกตัดอย่างประณีตและสกัดสามครั้งด้วยเมทานอลภายใต้การไหลย้อนเป็นเวลา 3 ชั่วโมง การระเหยของตัวทำละลายภายใต้แรงดันที่ลดลงทำให้มีสารสกัดจากเมทานอล (249.1 ก., 8.36 เปอร์เซ็นต์) สารสกัดเมทานอลอยู่ภายใต้ Diaion HP- 20 CC (5.0 kg, H2O→MeOH) เพื่อให้เศษส่วนที่ชะ H2O- และ MeOH (167.84 ก., 5.63 เปอร์เซ็นต์ และ 81.21 ก., 2.73 เปอร์เซ็นต์ ตามลำดับ) เศษส่วนของ MeOH-eluted (61.00 ก.) ถูกนำเข้าสู่สภาวะปกติของซิลิกาเจล CC [1.8 กก., CHCl3– MeOH–H2O (15 : 3 : 0.4→1{{36 }} : 3 : 0.5→6 : 4 : 1, v/v/v)→MeOH] เพื่อให้เศษส่วนเจ็ด [Fr. 1 (1.12 ก.), 2 (9.56 ก.), 3 ({{1{{109}}4}}.89 ก.), 4 (1{{12{{130 }}}}.69 ก.), 5 (8.84 ก.), 6 (12.52 ก.) และ 7 (4.60 ก.)] ตามที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้ 1) เศษส่วน 4 (1{{167} }.69 ก.) ถูกแยกโดย CC ซิลิกาเจลแบบรีเวอร์สเฟส [500 ก., MeOH–H2O (30 : 70, v/v) →MeOH→acetone] ให้สี่เศษส่วน [คุณพ่อ. 4-1 (878.2 มก.), 4-2 (7.06 ก.), 4-3 (1.57 ก.) และ {{8{{2{{2{{251} }}7}}2}}}} (792.8 มก.)] เศษส่วน 4-3 (1.57 ก.) ถูกทำให้บริสุทธิ์โดย HPLC [Cosmosil 5C18-MS-II, CH3CN–1 เปอร์เซ็นต์ในน้ำ AcOH (20 : 80, v/ v)] ให้ 11 เศษส่วน {คุณพ่อ. 4-3-1 (30.4 มก.), 4-3-2 (55.2 มก.), 4-3- 3 [ แคมนีโอไซด์ I (6, 22.1 มก., 0.0010 เปอร์เซ็นต์ )], 4-3-4 [ แอกเตโอไซด์ (224.6 มก., 0.010 เปอร์เซ็นต์ )] 4-3-5 (27.4 มก.) 4-3-6 (43.6 มก.) 4-3-7 [ isoacteoside (825.0 มก. 0.037 เปอร์เซ็นต์ )] 4-3-8 [ ไซริงกาไลด์ A 3 -OaL-rhamnopyranoside (37.6 มก., 0.0017 เปอร์เซ็นต์ )], 4-3-9 (39.8 มก.), 4-3-10 [ 2 -acetylacteoside (85.4 มก., 0.0038 เปอร์เซ็นต์ )] และ 4-3-11 (64.6 มก.)} ดังที่ได้อธิบายไว้ก่อนหน้านี้1) เศษส่วน 4-3-5 (27.4 มก.) ถูกทำให้บริสุทธิ์เพิ่มเติมโดย HPLC [Cosmosil pNAP, CH3CN–1 เปอร์เซ็นต์ในน้ำ AcOH (18 : 82, v/v)] ถึง ให้ isocampneoside I (5, 8.5 มก., 0.0004 เปอร์เซ็นต์ ) เศษส่วน 4-3-6 (43.6 มก.) ถูกทำให้บริสุทธิ์เพิ่มเติมโดย HPLC [Cosmosil pNAP, CH3CN–1 เปอร์เซ็นต์ในน้ำ AcOH (18 : 82, v/v)] เพื่อให้ 5 (3.7 มก., 0.0002 เปอร์เซ็นต์ ) ร่วมกับ kankanosides H 1 1) (17.0 มก., 0.0008 เปอร์เซ็นต์ ) และ H2 1) (3.3 มก., 0.0001 เปอร์เซ็นต์ ) เศษส่วน 4-3-9 (39.8 มก.) ถูกทำให้บริสุทธิ์เพิ่มเติมโดย HPLC [Cosmosil pNAP, CH3CN–1 เปอร์เซ็นต์ที่เป็นน้ำ AcOH (18 : 82, v/v)] เพื่อให้ kankanosides J1 (1, 3.7 มก., 0.0002 เปอร์เซ็นต์ ) และ J2 (2, 3.5 มก., 0.0002 เปอร์เซ็นต์ ) ร่วมกับ kankanoside I1) (15.4 มก., 0.0007 เปอร์เซ็นต์ ) และ isoacteoside1) (3.1 มก., 0.0001 เปอร์เซ็นต์) เศษส่วน 5 (8.84 ก.) ถูกแยกด้วยซิลิกาเจลแบบรีเวอร์สเฟส CC [400 ก., MeOH–H2O (20 : 80→30 : 70, v/v)→MeOH→อะซิโตน] เพื่อให้เศษส่วนเจ็ด [Fr. 5-1 (870.2 มก.), 5-2 (478.9 มก.), 5-3 (3.72 ก.), 5-4 (979.9 มก.), 5-5 (1.19 ก.), 5-6 (1.27 ก.) และ 5-7 (130.1 มก.)] เศษส่วน 5-3- 4 (72.3 มก.) ถูกทำให้บริสุทธิ์เพิ่มเติมโดย HPLC [Cosmosil pNAP, CH3CN–1 เปอร์เซ็นต์ในน้ำ AcOH (10 : 90, v/v)] เพื่อให้แคนคาโนไซด์ K1 (3, 5.1 มก., 0.0002 เปอร์เซ็นต์) และ K2 (4, 10.6 มก., 0.0005 เปอร์เซ็นต์) ร่วมกับ campneoside II1) (7, 10.6 มก., 0.0005 เปอร์เซ็นต์)

แอคทีโอไซด์ในcistancheรักษาได้ไตโรคดีขึ้นไตการทำงาน

ไฮโดรไลซิสอัลคาไลน์และกรดของ Kankanosides J1 (1), J2 (2), K1 (3) และ K2 (4)

สารละลาย 1—4 (แต่ละ 1.0 มก.) ในโพแทสเซียมไฮดรอกไซด์ที่มีน้ำ 5 เปอร์เซ็นต์ (KOH, 0.5 มล.) ถูกกวนผสมที่ 40 องศา เป็นเวลา 1 ชั่วโมง สารละลายแต่ละชนิดถูกทำให้เป็นกลางด้วย Dowex HCR W2 (รูปแบบ H) และเรซินถูกกำจัดออกโดยการกรอง การระเหยของตัวทำละลายจากตัวกรองภายใต้แรงดันที่ลดลงทำให้เกิดผลิตภัณฑ์ที่ถูกกำจัดออกซึ่งสอดคล้องกัน ซึ่งอยู่ภายใต้การวิเคราะห์ด้วย HPLC [คอลัมน์: Cosmosil pNAP, 250-4.6 มม. id; เฟสเคลื่อนที่: CH3CN–1 เปอร์เซ็นต์ที่เป็นน้ำ AcOH (15: 85, v/v); การตรวจจับ: UV (254 นาโนเมตร); อัตราเพื่อน: 1.0 มล./นาที] เพื่อให้กรดทรานส์คาเฟอีน (tR 9.9 นาทีจาก 1—4) จากนั้นแต่ละอันถูกละลายใน 1.0 M HCl (1.0 มล.) และให้ความร้อนที่ 80 องศาเป็นเวลา 3 ชั่วโมง หลังจากถูกทำให้เย็นลง ของผสมของปฏิกิริยาถูกทำให้เป็นกลางด้วย Amberlite IRA-400 (รูปแบบ OH) และเรซินถูกกำจัดออกโดยการกรอง หลังจากการขจัดตัวทำละลายออกภายใต้แรงดันที่ลดลง เรซิดิวถูกแยกโดยคอลัมน์คาร์ทริดจ์ Sep-Pak C18 (H2O→MeOH) เศษส่วนที่ชะ H2O ถูกนำไปวิเคราะห์ด้วย HPLC ภายใต้เงื่อนไขต่อไปนี้: คอลัมน์ HPLC, Kaseisorb LC NH2-60-5, 4.6 มม. id- 250 มม. (Tokyo Kasei Co., Ltd., โตเกียว, ญี่ปุ่น); การตรวจจับการหมุนด้วยแสง [Shodex OR-2 (Showa Denko Co., Ltd., Tokyo, Japan); เฟสเคลื่อนที่, CH3CN–H2O (85: 15, v/v); อัตราการเป็นเพื่อน 0.8 มล./นาที]. การระบุ L-rhamnose (i) และ D-glucose (ii) จาก 1-4 ที่มีอยู่ในเศษส่วนที่ถูกชะ H2O ดำเนินการโดยการเปรียบเทียบเวลาการคงอยู่และการหมุนด้วยแสงกับตัวอย่างที่แท้จริง [i, tR 9.9 นาที ( ลบ)] และ [ii, tR 17.9 นาที (บวก)]

รับทราบ

TM, KN และ OM ได้รับการสนับสนุนจากโครงการ 'ศูนย์วิจัยเทคโนโลยีขั้นสูง' สำหรับมหาวิทยาลัยเอกชน: เงินอุดหนุนกองทุนจับคู่จากกระทรวงศึกษาธิการ วัฒนธรรม กีฬา วิทยาศาสตร์ และเทคโนโลยี (MEXT) ของญี่ปุ่น พ.ศ. 2550-2554 และยังได้รับการสนับสนุนจาก เงินช่วยเหลือสำหรับการวิจัยทางวิทยาศาสตร์จาก MEXT MY และ HM ได้รับการสนับสนุนจากโครงการ COE ครั้งที่ 21 โครงการ Academic Frontier Project และ Grant-in-Aid for Scientific Research จาก MEXT

ข้อมูลอ้างอิงและหมายเหตุ

1) ตอนที่ XXXV: Morikawa T. , Pan Y. , Ninomiya K. , Imura K. , Matsuda H. , Yoshikawa M. , Yuan D. , Muraoka O. , Bioorg. เมดิ. เคมี., 18, 1882-1890 (2010).

2) Morikawa T. , Xie H. , Wang T. , Matsuda H. , Yoshikawa M. , Chem. ไบโอดิฟ., 6, 411—420 (2009).

3) Muraoka O. , Morikawa T. , Zhang Y. , Ninomiya K. , Nakamura S. , Ma tsuda H. , Yoshikawa M. , Tetrahedron, 65, 4142-4148 (2009)

4) Yoshikawa M. , Matsuda H. , Morikawa T. , Xie H. , Nakamura S. , Mu raoka O. , Bioorg. เมดิ. เคมี., 14, 7468—7475 (2006).

5) Xie H. , Morikawa T. , Matsuda H. , Nakamura S. , Muraoka O. , Yoshikawa M. , เคมี เภสัช. บูล., 54, 669-675 (2549).

6) Si C.-L. , Liu Z. , Kim J.-K. , Bae Y.-S. , Holzforschung, 62, 197–200 (2008)

7) สเปกตรัม 1 H- และ 13C-NMR ของ 1-4 ถูกกำหนดด้วยความช่วยเหลือของการเพิ่มประสิทธิภาพที่ไม่มีการบิดเบือนโดยการถ่ายโอนโพลาไรซ์ (DEPT), สเปกโตรสโกปีสหสัมพันธ์ตัวกรองควอนตัมคู่ (DQF COSY), เฮเทอโรนิวเคลียร์หลายควอนตัมเชื่อมโยงกัน (HMQC) และเฮเทอโรนิวเคลียร์ การทดลองหลายพันธะ (HMBC)

8) Imakura Y. , Kobayashi S. , Mima A. , Phytochemistry, 24, 139—146 (1985)

9) Wu J. , Huang J. , Xiao Q. , Zhang S. , Xiao Z. , Li Q. , Long L. , Huang L. , Magn. ความละเอียด เคมี., 42, 659-662 (2547).

10) Kitagawa S. , Tsukamoto H. , Hisada S. , Nishibe S. , Chem. เภสัช. กระทิง., 32, 1209–1213 (1984).

11) Stereochemistries ของ 7-ตำแหน่งใน 1-4 ยังไม่ได้กำหนด

12) Kobayashi H. , Oguchi H. , Takizawa N. , Miyase T. , Ueno A. , Usmanghani K. , Ahmad M. , Chem. เภสัช. บูล., 35, 3309—3314 (1987).