สารต้านอนุมูลอิสระและสารต้านความเมื่อยล้าของกระเจี๊ยบ

Mar 21, 2022

Fangbo Xia, Yu Zhong, Mengqiu Li, Qi Chang, Yonghong Liao, Xinmin Liu * และ Ruile Pan *


สถาบันพัฒนาสมุนไพร วิทยาลัยการแพทย์สหพันธ์ปักกิ่ง สถาบันการแพทย์จีนSciences, No 151, North Road Malianwa, Haidian District, Beijing 100193


สำหรับข้อมูลเพิ่มเติม:ali.ma@wecistanche.com




เชิงนามธรรม


กระเจี๊ยบเขียว (Abelmoschus esculentus (L.) Moench) เป็นผักเพื่อสุขภาพ มีการแพร่กระจายอย่างกว้างขวางในเขตร้อนและกึ่งเขตร้อน การศึกษาก่อนหน้านี้ได้พิสูจน์แล้วว่าฝักกระเจี๊ยบมีกิจกรรมต่อต้านความเมื่อยล้า,และจุดมุ่งหมายของการวิจัยครั้งนี้คือเพื่อชี้แจงป้องกันความเมื่อยล้าองค์ประกอบ เพื่อให้บรรลุสิ่งนี้ เราแบ่งฝักกระเจี๊ยบเขียว (OPD) เป็นเมล็ดพืช (OSD) และเปลือก (OSK) และเปรียบเทียบเนื้อหาของพอลิแซ็กคาไรด์ทั้งหมด โพลีฟีนอลทั้งหมด ฟลาโวนอยด์รวม ไอโซเควอซิทริน และเควอซิติน-3-O-gentiobiose และสารต้านอนุมูลอิสระ กิจกรรมในหลอดทดลองและกิจกรรมต่อต้านความเมื่อยล้าในร่างกายระหว่าง OSD และ OSK ปริมาณโพลีฟีนอลทั้งหมดและโพลีแซ็กคาไรด์รวมเท่ากับ 29.5 เปอร์เซ็นต์และ 14.8 เปอร์เซ็นต์ใน OSD และ 1.25 เปอร์เซ็นต์และ 43.1 เปอร์เซ็นต์ใน OSK ตามลำดับ ตรวจพบ flavonoids, isoquercitrin และ quercetin-3-O-gentiobiose (5.35 เปอร์เซ็นต์, 2.067 เปอร์เซ็นต์ และ 2.741 เปอร์เซ็นต์ ตามลำดับ) เฉพาะใน OSD เท่านั้น การทดสอบสารต้านอนุมูลอิสระ ซึ่งรวมถึง 1-diphenyl-2-picrylhydrazyl (DPPH) scavenging, สารต้านอนุมูลอิสระในการลดเฟอริก (FRAP) และการทดสอบกำลังรีดิวซ์ และการทดสอบว่ายนํ้าด้วยน้ำหนักแสดงให้เห็นว่า OSD มีสารต้านอนุมูลอิสระที่มีนัยสำคัญและฤทธิ์ต้านความเหนื่อยล้า. นอกจากนี้ การวิเคราะห์ทางชีวเคมีพบว่ากิจกรรมต่อต้านความเมื่อยล้าของ OSD เกิดจากการลดระดับกรดแลคติกในเลือด (BLA) และยูเรียไนโตรเจน (BUN) เพิ่มการจัดเก็บไกลโคเจนในตับและส่งเสริมความสามารถในการต้านอนุมูลอิสระโดยการลดระดับมาลอนไดอัลดีไฮด์ (MDA) และเพิ่มซูเปอร์ออกไซด์ดิสมิวเตส (SOD) และกลูตาไธโอนเปอร์ออกซิเดส (GSH- Px) ระดับ ผลลัพธ์เหล่านี้พิสูจน์ได้ว่าเมล็ดกระเจี๊ยบเขียวคือป้องกันความเมื่อยล้าส่วนหนึ่งของฝักกระเจี๊ยบเขียวและโพลีฟีนอลและฟลาโวนอยด์เป็นส่วนประกอบที่ออกฤทธิ์


คำสำคัญ: กระเจี๊ยบเขียว; ป้องกันความเมื่อยล้า; สารต้านอนุมูลอิสระ โพลีฟีนอล




Cistanche

1. บทนำ


ความเหนื่อยล้าเป็นปรากฏการณ์ทางสรีรวิทยาที่ซับซ้อน ซึ่งหมายถึงความยากลำบากในการเริ่มต้นหรือคงไว้ซึ่งกิจกรรมโดยสมัครใจ [1] นอกเหนือจากการเพิ่มขึ้นตามอายุและพบได้ในโรคมะเร็ง โรคซึมเศร้า การติดเชื้อเอชไอวี โรคปลอกประสาทเสื่อมแข็ง และผู้ป่วยโรคพาร์กินสัน ความเหนื่อยล้ากลายเป็นอาการทั่วไปมากขึ้นเรื่อยๆ ในมนุษย์ปกติตามจังหวะชีวิตสมัยใหม่ที่เพิ่มขึ้น [2–4] การสำรวจชุมชนขนาดใหญ่แสดงให้เห็นว่าผู้ใหญ่มากกว่าครึ่งบ่นเกี่ยวกับความเหนื่อยล้า [5,6] ความเหนื่อยล้าสะสมในระยะยาวหรือเรื้อรังไม่เพียงแต่ทำให้คุณภาพชีวิตลดลง แต่ยังนำไปสู่อาการเหนื่อยล้าเรื้อรังและโรคทางอินทรีย์อื่นๆ และนำไปสู่โรคคะโรชิ (การเสียชีวิตอย่างผิดปกติจากโรคหลอดเลือดหัวใจเฉียบพลันที่เกิดจากการทำงานหนักเกินไป [7]) มีหลายทฤษฎีเกี่ยวกับสาเหตุของความเหนื่อยล้า เช่น ทฤษฎีความอ่อนล้า ซึ่งระบุว่าความเหนื่อยล้าเกิดจากการขาด ATP ที่มีอยู่สำหรับการมีเพศสัมพันธ์ของแอกติน-ไมโอซิน การสูบฉีด Na`/K และการดูดซึม Ca2' โดย sarcoplasmic reticulum [8–11 ]; ทฤษฎีการรบกวนสภาวะสมดุลซึ่งบ่งชี้ว่าความเหนื่อยล้าเกิดจากการสะสมของผลพลอยได้จากการเผาผลาญต่างๆ [10,12]; และทฤษฎีภัยพิบัติที่บ่งชี้ว่าความเหนื่อยล้าอาจเกิดขึ้นเนื่องจากความล้มเหลวที่จุดหนึ่งหรือหลายแห่งตลอดเส้นทางการผลิตกำลัง [13] ในหมู่คนเหล่านี้ ความเครียดจากปฏิกิริยาออกซิเดชันได้รับการพิจารณาอย่างกว้างขวางว่ามีบทบาทสำคัญในสาเหตุของความเหนื่อยล้า [10,13–16] สารต้านอนุมูลอิสระจากสมุนไพรบางชนิดได้รับการแสดงว่ามีฤทธิ์ต้านอาการเมื่อยล้าอย่างมาก ซึ่งบ่งชี้ว่าการรักษาด้วยสารต้านอนุมูลอิสระอาจเป็นวิธีการรักษาเมื่อยล้าที่มีคุณค่า [17–20] ดังนั้น ผู้บริโภคจึงมองหาส่วนประกอบต้านอนุมูลอิสระจากธรรมชาติมากขึ้นในอาหาร เพื่อลดความเสียหายจากปฏิกิริยาออกซิเดชันและต่อสู้กับความเหนื่อยล้า กระเจี๊ยบเขียว (Abelmoschus esculentus (L.) Moench, Family: Malvaceae) หรือที่รู้จักในชื่อ lady's finger, bhindi และ gumbo เป็นพืชประจำปีที่มีถิ่นกำเนิดในแอฟริกาและมีการปลูกในประเทศต่างๆ ทั่วโลก โดยส่วนใหญ่อยู่ในเขตร้อน กึ่งเขตร้อน และเขตอบอุ่น


ฝักกระเจี๊ยบเขียวถูกใช้เป็นผักและเป็นแหล่งของยารักษาโรคมานานแล้ว ในการแพทย์แผนโบราณของเอเชียและแอฟริกา กระเจี๊ยบเขียวใช้เป็นอาหารเมือกเพื่อต่อสู้กับโรคกระเพาะ [21] การศึกษาทางเภสัชวิทยาเปิดเผยว่ากระเจี๊ยบเขียวมีสารต้านอนุมูลอิสระ ป้องกันระบบประสาท ต้านเบาหวาน ลดไขมันในเลือดสูง และต้านความเมื่อยล้า [22-26] แม้ว่าการต้านอาการเมื่อยล้าของกระเจี๊ยบเขียวจะได้รับการพิสูจน์มาก่อน [26] แต่ไม่ค่อยมีใครรู้จักเกี่ยวกับกิจกรรมต้านความเมื่อยล้าและองค์ประกอบต่างๆ วรรณกรรมก่อนหน้านี้รายงานว่าฝักกระเจี๊ยบเขียวมีพอลิแซ็กคาไรด์ โพลีฟีนอล และฟลาโวนอยด์สูง [27–34] นอกจากนี้ยังแสดงให้เห็นว่าโพลีฟีนอลและฟลาโวนอยด์มีฤทธิ์ต้านอนุมูลอิสระและต้านความเมื่อยล้าในการศึกษาก่อนหน้านี้ [15,18,20,35,36] ยิ่งไปกว่านั้น การทดลองเชิงคุณภาพเบื้องต้นของเรา ซึ่งเราใช้สารละลายคลอไรด์เฟอริกเป็นรีเอเจนต์การพัฒนาสี เปิดเผยว่าสารสกัดจากเมล็ดกระเจี๊ยบเขียวแสดงปฏิกิริยาฟีนอลิกที่รุนแรง อย่างไรก็ตาม สารสกัดจากผิวของมันแทบไม่แสดงปฏิกิริยาดังกล่าว (วัสดุเสริม) ซึ่งแสดงให้เห็นว่าเมล็ดกระเจี๊ยบมีปริมาณโพลีฟีนอลและฟลาโวนอยด์สูงกว่าเปลือกกระเจี๊ยบเขียว ดังนั้นจึงสามารถคาดการณ์ได้ว่าเมล็ดกระเจี๊ยบเขียวอาจเป็นส่วนต้านความเหนื่อยล้าของฝักกระเจี๊ยบเขียว และโพลีฟีนอลและฟลาโวนอยด์อาจเป็นองค์ประกอบที่ออกฤทธิ์ จุดมุ่งหมายของการศึกษาคือเพื่อชี้แจงองค์ประกอบต้านความเมื่อยล้าของกระเจี๊ยบเขียว เพื่อให้บรรลุสิ่งนี้ เราแบ่งฝักกระเจี๊ยบเขียวออกเป็นเมล็ดและผิวหนัง และเปรียบเทียบเนื้อหาทางเคมีของพอลิแซ็กคาไรด์ทั้งหมด โพลีฟีนอลทั้งหมด ฟลาโวนอยด์รวม ไอโซเคอซิทริน และเควอซิติน-3-O-gentiobiose และกิจกรรมต้านอนุมูลอิสระในหลอดทดลองและต่อต้าน กิจกรรมความเมื่อยล้าในร่างกายระหว่างเมล็ดกระเจี๊ยบเขียวและผิวหนัง ผลลัพธ์ทั้งหมดเหล่านี้เปิดเผยว่าเมล็ดกระเจี๊ยบเขียวเป็นส่วนต่อต้านความเหนื่อยล้าของฝักกระเจี๊ยบเขียว และโพลีฟีนอลและฟลาโวนอยด์เป็นส่วนประกอบที่ออกฤทธิ์ ยังได้ศึกษากลไกที่เป็นไปได้ของฤทธิ์ต้านอาการอ่อนล้าในกระเจี๊ยบเขียวอีกด้วย


2. ส่วนทดลอง


2.1. วัสดุพืชและการสกัด


ฝักกระเจี๊ยบเขียวซื้อมาจากตลาด (ซานย่า มณฑลไห่หนาน ประเทศจีน) ในเดือนกรกฎาคม พ.ศ. 2556 พืชได้รับการตรวจสอบโดยศาสตราจารย์เบงกัง จาง สถาบันพืชสมุนไพร สถาบันวิทยาศาสตร์การแพทย์แห่งประเทศจีน และวิทยาลัยการแพทย์ปักกิ่ง ประเทศจีนซึ่งตัวอย่างบัตรกำนัล (หมายเลข 20130705) ได้ถูกนำไปฝากไว้ในหอสมุนไพรของสถาบัน เตรียมฝักกระเจี๊ยบสด 2.5 กก. จำนวน 2 ส่วน ส่วนหนึ่งถูกทำแห้งเยือกแข็งโดยตรงเพื่อให้ได้ฝักกระเจี๊ยบเขียวแห้ง (251.3 กรัม) ส่วนอื่น ๆ ถูกแบ่งออกเป็นเมล็ดกระเจี๊ยบเขียวและเปลือกกระเจี๊ยบเขียว แช่เยือกแข็งเพื่อให้ได้เมล็ดกระเจี๊ยบแห้ง (50.1 กรัม) และเปลือกกระเจี๊ยบแห้ง (200.5 กรัม) ตามลำดับ ฝัก เมล็ดพืช และหนังกระเจี๊ยบเขียวบดอย่างดีและสกัดแยกด้วยน้ำเดือด 1500 มล. เป็นเวลา 1 ชั่วโมง (3 ครั้ง) ของเหลวที่กรองแล้วแต่ละชนิดถูกรวมและทำให้เข้มข้นภายใต้สุญญากาศ เพื่อให้ได้ฝักกระเจี๊ยบเขียว (OPD, 105.4 ก.), เมล็ดกระเจี๊ยบเขียว (OSD, 20.5 ก.) และเปลือกกระเจี๊ยบเขียว (OSK, 84.1 ก.) ตามลำดับ ดังนั้นอัตราส่วนของสารสกัด OPD:OSK: OSD อยู่ที่ประมาณ 5:4:1 ตัวอย่างทั้งหมดถูกเก็บไว้ที่ ´20 ˝C จนกว่าจะมีการวิเคราะห์ทางเคมีและการทดลองในสัตว์


Acteoside of Cistanche

2.2. เคมีภัณฑ์และรีเอเจนต์


Isoquercitrin และ quercetin-3-O-gentiobiose ถูกแยกได้จากกระเจี๊ยบเขียวโดยห้องปฏิบัติการของเรา ที่ความบริสุทธิ์มากกว่า 98 เปอร์เซ็นต์ โดยการวิเคราะห์โครมาโตกราฟีของเหลวสมรรถนะสูง (HPLC) มาตรฐาน Rutin, Gallic acid และ D-glucose ซื้อมาจากสถาบันแห่งชาติเพื่อการควบคุมอาหารและยา (ปักกิ่ง ประเทศจีน) รีเอเจนต์ฟีนอลของ Folin–Ciocalteu (1N, Coolaber Science & Technology, ปักกิ่ง, จีน) ถูกใช้เพื่อกำหนดฟีนอล ซื้อชุด Ferric Reduction Rexidant Power (FRAP) จาก Beyotime Biotechnology (ปักกิ่ง ประเทศจีน) 1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl (DPPH) และ Trolox ถูกซื้อมาจาก Sigma-Aldrich Inc. (St. Louis, MO, USA) ซื้อบัฟเฟอร์ฟอสเฟต (PBS, Gibco) จาก Thermo Fisher (Waltham, MA, USA) ตัวทำละลาย ซึ่งรวมถึงอะซีโตไนไตรล์ (Thermo Fisher, MA, USA) และกรดฟอร์มิก (CNW, ดุสเซลดอร์ฟ, เยอรมนี) เป็นเกรด HPLC และได้น้ำจากระบบทำน้ำให้บริสุทธิ์ Milli-Q (Millipore, MA, USA) ซื้อชุดทดสอบสำหรับการตรวจวัดแลคเตทในเลือด (BLA) ยูเรียไนโตรเจนในซีรัม (BUN) ไกลโคเจนในตับ (HG) กลูตาไธโอนเปอร์ออกซิเดส (GSH-Px) กรดไธโอบาร์บิทูริก (TBA) และซูเปอร์ออกไซด์ดิสมิวเตส (SOD) จาก Nanjing Jiancheng Biotechnology สถาบัน (หนานจิง ประเทศจีน). รีเอเจนต์และสารเคมีอื่นๆ ทั้งหมดที่ใช้ในการศึกษานี้เป็นระดับการวิเคราะห์


2.3. สัตว์


หนู ICR เพศผู้ (20–22 ก.) ถูกซื้อจาก Vital River Laboratories (หมายเลขที่ผ่านการรับรอง: SCXK 2012-0001, ปักกิ่ง, จีน) หนูถูกเลี้ยงไว้ในกลุ่มสัตว์ 6 ตัวต่อกรงภายใต้อุณหภูมิคงที่ (23 ˝C ˘ 2 ˝C) และความชื้น (50 เปอร์เซ็นต์ ˘ 10 เปอร์เซ็นต์ ) ในรอบแสง/ความมืด 12/12-ชม. (เปิดไฟ ตั้งแต่ 8:00 น. ถึง 8:00 น.) สัตว์เหล่านี้มีสิทธิ์เข้าถึงอาหารเชาเชามาตรฐานและน้ำดื่มปลอดเชื้อในบ้านสัตว์ SPF (ปลอดเชื้อก่อโรคเฉพาะ) ได้ฟรี ขั้นตอนการทดลองทั้งหมดดำเนินการภายใต้การดูแลและอนุมัติของ Academy of Experimental Animal Center ของ Institute of Medicinal Plant Development และเป็นไปตาม NIH Guide for the Care and Use of Laboratory Animal (ฉบับที่แปด) อย่างเคร่งครัด



2.4. การวิเคราะห์ทางเคมีของ OSD และ OSK


2.4.1. การกำหนดปริมาณสารฟลาโวนอยด์ทั้งหมด (TF)


เนื้อหา TF ถูกวัดโดย NaNO{0}}Al(NO)3 colorimetric assay ตามมาตรฐานทางเทคนิคสำหรับการทดสอบและการประเมินของ Functional Food ซึ่งออกโดย National Health and Family Planning Commission of the PRC ใน 2{0}}03 โดยมีการปรับเปลี่ยนเล็กน้อย โดยย่อ ตัวอย่าง 50 มก. ถูกละลายในน้ำกลั่น 40 มล. และสารละลายตัวอย่างถูกสกัดโดยคลอโรฟอร์ม 50 มล. สามครั้ง จากนั้น สารละลายน้ำถูกเจือจางเป็น 50 มล. และ 2 มล. ของสารละลายที่เจือจางถูกดูดซับโดยพอลิเอไมด์เรซิน 5 กรัมและถูกชะด้วยเอทานอล 70 เปอร์เซ็นต์ 20 มล. การชะเอทานอล 70 เปอร์เซ็นต์ถูกทำให้เข้มข้นถึง 10 มล. ภายใต้สุญญากาศ สารชะแบบเข้มข้นสามมิลลิลิตรถูกใส่ในขวดปริมาตร 10 มล., และจากนั้นเอทานอล 70 เปอร์เซ็นต์ 2 มล., 0.3 มล. NaNO2 (5 เปอร์เซ็นต์ ) และ 0.3 มล. Al(NO)3 ถูกเติม หลังจากผ่านไป 5 นาที สารละลาย 2 มิลลิลิตรของ NaOH (1.0 โมลาร์) ถูกเติมลงในสารละลายของผสมและปล่อยให้ยืนเป็นเวลา 6 นาที สุดท้าย 2.4 มล. เอทานอล 30 เปอร์เซ็นต์ถูกเติม การดูดกลืนแสงถูกวัดเทียบกับช่องว่างที่ 510 นาโนเมตรด้วยเครื่องสเปกโตรโฟโตมิเตอร์ UV-VIS ของ UNICO-2012 (เซี่ยงไฮ้ ประเทศจีน) ปริมาณฟลาโวนอยด์ทั้งหมดคำนวณจากกราฟการปรับเทียบโดยใช้รูตินเป็นมาตรฐาน (20–100 มก./ลิตร) รายงานผลลัพธ์เป็นมิลลิกรัมเทียบเท่ารูตินต่อมิลลิกรัมของตัวอย่าง


Echinacoside of Cistanche

2.4.2. การกำหนดปริมาณโพลีฟีนอลทั้งหมด (TP)


เนื้อหา TP ถูกกำหนดโดยใช้วิธี Folin–the Ciocaiteu โดยมีการปรับเปลี่ยนเล็กน้อย [38] โดยสรุป ตัวอย่าง 50 มก. ถูกผสมกับ 25 มล. ของสารละลายเมทานอล 50 เปอร์เซ็นต์ จากนั้นสารละลายตัวอย่าง 0.5 มล., รีเอเจนต์ของ Folin–Ciocaiteu 0.3 มล. และโซเดียม คาร์บอเนต 10 มล. (10 เปอร์เซ็นต์) เพียงพอ ผสม แล้วปริมาตรถูกปรับเป็น 25 มล. ด้วยน้ำกลั่น ของผสมถูกปล่อยให้ยืนที่ 50 ˝C ในความมืดเป็นเวลา 1 ชั่วโมง วัดค่าการดูดกลืนแสงที่ 765 นาโนเมตร เตรียมกราฟเทียบมาตรฐานของกรดแกลลิก ผลลัพธ์แสดงเป็นมิลลิกรัมเทียบเท่ากรดแกลลิกต่อมิลลิกรัมของตัวอย่าง


2.4.3. การกำหนด Isoquercitrin และ Quercetin-3-O-Gentiobiose


การหาปริมาณของ isoquercitrin และ quercetin{{0}}O-gentiobiose ถูกดำเนินการโดย HPLC-UV โดยใช้กราฟการปรับเทียบห้าจุด (r2=0.999) ในช่วง 5–5{{23 }}0 ไมโครกรัม/มิลลิลิตร Isoquercitrin และ quercetin-3-O-gentiobiose (5 มก. ตามลำดับ) และตัวอย่าง (10 มก.) ถูกละลายในเมทานอล 10 มล. ตามลำดับ สารละลายทั้งหมดถูกกรองผ่านตัวกรองพอลิเตตระฟลูออโรเอทิลีน 045-µm ก่อนการวิเคราะห์ HPLC ปั๊ม Waters 600 HPLC ที่มีเครื่องตรวจจับ UV/Visible ของ Waters 2489 ถูกใช้เพื่อแยกสารประกอบผ่านทางคอลัมน์ที่มีเฟสที่กลับกัน (Thermo synchronize aQ, 4.6 mm ˆ 250 mm, 5 µm) ที่อัตราร่วมที่ 1 มล./นาที เฟสเคลื่อนที่ประกอบด้วยอะซิโตไนไทรล์ (A) และกรดอะซิติก 0.1 เปอร์เซ็นต์ในน้ำ (B) โปรแกรมการชะเกรเดียนต์เป็นดังนี้: 10 เปอร์เซ็นต์ A ที่ 0 นาทีและเชิงเส้นสูงถึง 40 เปอร์เซ็นต์ใน 40 นาที 90 เปอร์เซ็นต์ที่ 41 ถึง 50 นาที และ 10 เปอร์เซ็นต์ที่ 51–65 นาที ความยาวคลื่นสำหรับการตรวจจับรังสียูวีคือ 354 นาโนเมตร และอุณหภูมิคอลัมน์ถูกตั้งไว้ที่ 25 ˝C ระบุสารประกอบโดยเปรียบเทียบกับเวลาการคงอยู่ของมาตรฐานและหาปริมาณโดยการคำนวณพื้นที่ใต้เส้นโค้งด้วยมาตรฐานภายนอก


2.4.4. การหาปริมาณพอลิแซ็กคาไรด์ทั้งหมด (TPS)


ปริมาณ TPS ถูกกำหนดหาด้วยวิธีกรดฟีนอล–ซัลฟิวริก [39,40] โดยสรุป ตัวอย่าง 80 มก. ถูกละลายในน้ำกลั่น 50 มล. จากนั้นโปรตีนถูกกำจัดออกด้วยวิธีการป่าเถื่อน (สารละลายตัวอย่าง:คลอโรฟอร์ม:N-บิวทิล แอลกอฮอล์=20:4:1) จากนั้น เอทานอลจำนวนสี่เท่าถูกเติมลงในสารละลายที่มีความหนืดที่เป็นผลลัพธ์เพื่อตกตะกอนสารสกัดพอลิแซ็กคาไรด์แบบหยาบ สารละลายเอทานอลถูกหมุนเหวี่ยงที่ 617.4 ˆ กรัม เป็นเวลา 30 นาทีเพื่อให้ได้ตะกอน ตะกอนถูกล้างอย่างต่อเนื่องด้วยเอทานอล อะซีโตน และอีเทอร์ และละลายในน้ำกลั่น 250 มล. จากนั้น สารละลายโพลีแซคคาไรด์ 0.1 มล. ถูกผสมกับน้ำกลั่น 0.9 มล., สารละลายฟีนอล 5 เปอร์เซ็นต์ 1 มล. และกรดซัลฟิวริก 5 มล. ในหลอดทดลอง และเก็บไว้ที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 30 นาที วัดค่าการดูดกลืนแสงที่ 490 นาโนเมตรด้วยเครื่องสเปกโตรโฟโตมิเตอร์ UV-VIS ของ UNICO-2012 (เซี่ยงไฮ้ ประเทศจีน) กำหนดเส้นโค้งการสอบเทียบของกลูโคส และเนื้อหา TPS ถูกกำหนดจากสมการถดถอยของเส้นโค้งการสอบเทียบ ผลลัพธ์แสดงเป็นมิลลิกรัมเทียบเท่ากลูโคสต่อมิลลิกรัมของตัวอย่าง


2.5. การทดสอบสารต้านอนุมูลอิสระในหลอดทดลอง


ความสามารถในการต้านอนุมูลอิสระของ OPD, OSK และ OSD ถูกตรวจพบโดยสามวิธี ซึ่งรวมถึง {{0}}diphenyl-2-picrylhydrazyl (DPPH) scavenging, พลังต้านอนุมูลอิสระรีดิวซ์รีดิวซ์ (FRAP) และกำลังรีดิวซ์ ตามวรรณคดี [19,41] ที่มีการดัดแปลงเล็กน้อย Trolox ถูกใช้เป็นตัวควบคุมเชิงบวก และผลลัพธ์ถูกแสดงเป็นความสามารถในการต้านอนุมูลอิสระที่เทียบเท่ากับ Trolox เนื่องจาก OPD ประกอบด้วย OSK และ OSD เพื่อให้แสงสว่างแก่องค์ประกอบที่ใช้งานของกระเจี๊ยบเขียว ความเข้มข้นของ OSK และ OSD จึงถูกใช้เป็น OPD ที่เทียบเท่ากัน จากการทดสอบเบื้องต้น ช่วงความเข้มข้นของ OPD, ODS, OSK คือ 0.0{{10}}4–0.8, {{17 }}.0{{0}}32–0.64 และ 0.0008 –{{40}}.16 มก./มล. สำหรับการสอบวิเคราะห์ DPPH; 1.0–4.0, 0.8–3.2 และ {{50}}.2–0.8 มก./มล. สำหรับการทดสอบ FRAP; และ 0.1–4, 0.08–3.2 และ 0.02–0.8 มก./มล. สำหรับการทดสอบกำลังรีดิวซ์ ตามลำดับ สำหรับการทดสอบ DPPH สารละลายตัวอย่าง (50 ไมโครลิตร) ที่มีช่วงสัดส่วน (0.004–0.8 มก. OPD/มล., 0.0032–0.64 มก. OSK/ มล. และ 0.0008–0.16 มก. OSD/มล.) ถูกผสมกับสารละลาย DPPH (100 ไมโครลิตร, 1.28 ˆ 10´4 โมล/ลิตร) สำหรับการวัดการออกฤทธิ์กำจัดอนุมูลอิสระ (A1) และเอทานอล 95 เปอร์เซ็นต์ (100 ไมโครลิตร) สำหรับกลุ่มควบคุม (A2). น้ำกลั่น (50 ไมโครลิตร) ถูกผสมกับสารละลาย DPPH (100 ไมโครลิตร) สำหรับสารเปล่า (A0) วัดค่าการดูดกลืนแสงที่ 517 นาโนเมตรหลังจากผสมสารละลายและเก็บไว้ที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 30 นาที ความสามารถในการกำจัดอนุมูล DPPH คำนวณโดยใช้สมการต่อไปนี้:


Flavonoids of Cistanche

กิจกรรมการกวาดล้าง ( เปอร์เซ็นต์ ){{0}}[ 1-(A1-A2/{A0]* 100 เปอร์เซ็นต์ . (1)


FRAP ของสารละลายตัวอย่างสามตัว (1.0–4.0 มก. OPD/มล., 0.8–3.2 มก. OSK/มล. และ 0.2– ตรวจพบ {{10}}.8 มก. OSD/มล.) ตามคำแนะนำของสถาบันเทคโนโลยีชีวภาพ Beyotime สารละลายตัวอย่างที่เจือจาง (5 ไมโครลิตร) ถูกผสมกับสารละลายทำงานแบบ FRAP (180 ไมโครลิตร) และเก็บไว้เป็นเวลา 5 นาทีที่ 37 ˝ซ จากนั้นการดูดกลืนแสงของของผสมปฏิกิริยาถูกบันทึกที่ 593 นาโนเมตร เส้นโค้งมาตรฐานเตรียมโดยใช้ FeSO4 ซึ่งมีตั้งแต่ 0.15 ถึง 1.5 มม. ในการกำหนดกำลังรีดิวซ์ สารละลายตัวอย่าง (0.5 มล. สำหรับ 0.1–4 มก. OPD/มล. 0.08–3.2 มก. OSK/มล. และ 0.02–{{50}}.8 มก. OSD/มล.) ถูกผสมกับปริมาตรเดียวกันของ PBS (0.2 โมล/ลิตร , pH 6.6) และสารละลายโพแทสเซียมเฟอริไซยาไนด์ (1 เปอร์เซ็นต์ , w/v) และทำการบ่มเป็นเวลา 20 นาทีที่ 50 ˝C กรดไตรคลอโรอะซิติก (0.5 มล., 10 เปอร์เซ็นต์, น้ำหนักปริมาตร) ถูกเติมไปยังของผสม, ซึ่งถูกหมุนเหวี่ยงที่ 201.6 ˆ กรัม เป็นเวลา 10 นาที หลังจากนี้ ชั้นบนของสารละลาย (0.5 มล.) ถูกเจือจางด้วยน้ำกลั่น (0.5 มล.) และจากนั้นเฟอริก คลอไรด์ (0.1 มล., 0.1 เปอร์เซ็นต์, น้ำหนัก/ปริมาตร) ถูกเติมลงไป วัดค่าการดูดกลืนแสงที่ 700 นาโนเมตร



2.6. ผลการต้านความเมื่อยล้าของ OPD, OSK และ OSD และการวิเคราะห์ทางชีวเคมี


ด้วยเหตุผลเดียวกันกับการทดสอบสารต้านอนุมูลอิสระในหลอดทดลอง ปริมาณของยาต้านการล้าของ OPD, OSK และ OSD ได้รับการออกแบบให้เป็นกลุ่ม OPD (0.75, 1.50 และ 3.{{ 6}} ก./กก. น้ำหนักตัว), กลุ่ม OSD (0.60, 1.20 และ 2.40 ก./กก. น้ำหนักตัว) และกลุ่ม OSD (0.15, 0.30 และ 0.60 กรัม/กก. น้ำหนักตัว). หนูได้รับอาหารพื้นฐานในสภาพแวดล้อมการทดลองก่อนการทดลอง หลังจากปรับตัวได้ 3 วัน หนู 120 ตัวถูกสุ่มแบ่งออกเป็นสิบกลุ่ม: กลุ่มควบคุม (CG), 3 OPD, OSK และ OSD แต่ละกลุ่ม แต่ละกลุ่มมีหนู 12 ตัว กลุ่มควบคุม (CG) ถูกบำบัดด้วยน้ำปราศจากเชื้อ ในขณะที่กลุ่มอื่นๆ ได้รับการบำบัดด้วยสารสกัดที่สอดคล้องกัน น้ำ/สารสกัดถูกบริหารให้ทางปาก (8:{24}} น.) แก่หนูทดลองวันละครั้งเป็นเวลา 21 วัน และดำเนินการทดสอบภาคสนามและการทดสอบว่ายน้ำโดยน้ำหนัก (WLST) ในวันที่ 20 และ 21 ตามลำดับ หลังจาก WLST หนูถูกนำออกจากสระ เช็ดให้แห้งด้วยกระดาษชำระ และใส่กลับเข้าไปในกรงเดิม ผู้ทดลองของ WLST และการทดสอบในสนามเปิดปิดบังสภาพการทดลอง และสุ่มให้สัตว์ทดลองก่อนเข้าร่วมในการทดลอง เพื่อชี้แจงผลการต้านความเมื่อยล้าของ OSD ระหว่างการกู้คืน หนูเมาส์ถูกทำให้หมดความรู้สึกด้วยอีเทอร์และเก็บตัวอย่างเลือดจากแต่ละกลุ่มหลังจาก WLST 24 ชั่วโมง ตัวอย่างซีรัมได้มาจากการหมุนเหวี่ยง (896 ˆ ก., 15 นาที, 4 ˝C) ตับถูกผ่าอย่างรวดเร็วและล้างด้วยน้ำเกลือเย็นจัด ตัวอย่างทั้งหมดถูกแช่แข็งในไนโตรเจนเหลวและเก็บไว้ที่ ´80 ˝C สำหรับการวิเคราะห์เพิ่มเติม


2.6.1. การทดสอบภาคสนาม


เพื่อตรวจสอบผลกระทบของ OPD, OSK และ OSD ต่อกิจกรรมของหัวรถจักร หนูได้รับการประเมินโดยอัตโนมัติโดยใช้ระบบควบคุมโดยใช้คอมพิวเตอร์ช่วยแบบเปิดโล่งที่พัฒนาโดยเรา [42,43] อุปกรณ์ประกอบด้วยถังโลหะสี่ถัง (เส้นผ่านศูนย์กลาง 30 ซม. สูง 40 ซม.) โดยมีกล้องวิดีโอติดอยู่ด้านบน ทำการทดลองในห้องที่เงียบสงบ และอุปกรณ์ได้รับแสงสว่างจากแหล่งกำเนิดแสง 120 Lux บนเพดาน หนึ่งชั่วโมงหลังการให้ยา เมาส์แต่ละตัวถูกวางไว้ที่กึ่งกลางของถังโลหะ และอนุญาตให้สำรวจได้อย่างอิสระเป็นเวลา 2 นาที และระยะทางที่เดินทางใน 4 นาที ซึ่งเป็นดัชนีของกิจกรรมของหัวรถจักร คำนวณโดยใช้ซอฟต์แวร์ หนูสี่ตัวได้รับการทดสอบพร้อมกัน


Cistanche can relieve chronic fatigue syndrome symptoms

2.6.2. การทดสอบการว่ายน้ำด้วยน้ำหนัก (WLST)


WLST ถูกดำเนินการเพื่อกระตุ้นความเหนื่อยล้าตามวิธีการที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้โดยมีการดัดแปลงเล็กน้อย [19,44,45] หนึ่งชั่วโมงหลังจากให้ยา หนูถูกโหลดด้วยแผ่นตะกั่วที่ติดอยู่ที่ตำแหน่งเดียวกันของหางและมีน้ำหนักประมาณ 3 เปอร์เซ็นต์ของน้ำหนักตัว จากนั้นหนูที่รับน้ำหนักจะถูกบังคับให้ว่ายน้ำในหนูที่เป็นทรงกระบอก (เส้นผ่านศูนย์กลาง 40 ซม.) ซึ่งเต็มไปด้วยน้ำ (25 ˘ 1 ˝C) ถึงความลึก 30 ซม. ความอ่อนล้าจัดเป็นการสูญเสียการเคลื่อนไหวที่ประสานกันและความล้มเหลวในการลอยขึ้นสู่ผิวน้ำภายใน 10 วินาที และเวลาว่ายน้ำจะถูกบันทึกทันที น้ำในสระถูกแทนที่หลังจากแต่ละครั้ง



2.6.3. การวิเคราะห์พารามิเตอร์ทางชีวเคมีที่เกี่ยวข้องกับความล้า


เซรั่มถูกเตรียมสำหรับการหายูเรียไนโตรเจนในเลือด (BUN) และกรดแลคติกในเลือด (BLA) ตับถูกเตรียมสำหรับการหาค่าเทียบเท่ามาลอนไดอัลดีไฮด์ (MDA), โททัล ซูเปอร์ออกไซด์ ดิสมิวเตส (SOD), กลูตาไธโอนเปอร์ออกซิเดส (GSH-Px) และไกลโคเจนในตับ (HG) พารามิเตอร์ทางชีวเคมีทั้งหมดถูกกำหนดโดยใช้ชุดเครื่องมือที่มีจำหน่ายทั่วไป และขั้นตอนทั้งหมดเป็นไปตามคำแนะนำของผู้ผลิต โดยย่อ เนื้อหาของ HG ถูกกำหนดหาโดยใช้รีเอเจนต์แอนโธรนที่ 620 นาโนเมตร ในขณะที่ BLA ถูกกำหนดหาโดยใช้รีเอเจนต์ไนโตรเตทราโซเลียมบลูคลอไรด์ที่ 530 นาโนเมตร BUN ถูกประเมินโดย urease ด้วยวิธีเอนไซม์ที่ควบคู่กับกลูตาเมตดีไฮโดรจีเนสที่ 640 นาโนเมตร กิจกรรม GSH-PX ถูกวัดในระบบคู่โดยการวัดการลดลงของนิวคลีโอไทด์ไตรฟอสโฟไพริดีน (NADPH) ที่ 340 นาโนเมตร การทดสอบกิจกรรม SOD ขึ้นอยู่กับความสามารถในการยับยั้งการเกิดออกซิเดชันโดย O2 ที่ผลิตจากระบบ xanthine–xanthine oxidase กิจกรรม SOD หนึ่งหน่วยถูกกำหนดให้เป็นปริมาณที่ลดค่าการดูดกลืนแสงที่ 450 นาโนเมตรลง 50 เปอร์เซ็นต์ เนื้อหาของสิ่งที่เทียบเท่า MDA ถูกกำหนดหาที่ 532 นาโนเมตรโดยทำปฏิกิริยากับ TBA เพื่อสร้างผลิตภัณฑ์โครโมฟอร์ที่เสถียร


2.7. การวิเคราะห์ทางสถิติ


การวัดค่าทางเคมีดำเนินการเป็นสามเท่าและผลลัพธ์จะแสดงเป็นค่าเฉลี่ย การทดสอบสารต้านอนุมูลอิสระดำเนินการเป็นสามเท่า และผลลัพธ์ถูกแสดงเป็นค่าเฉลี่ย ˘ ส่วนเบี่ยงเบนมาตรฐาน ข้อมูลพฤติกรรมและชีวเคมีวิเคราะห์โดยซอฟต์แวร์สถิติ SPSS (SPSS 19.0 Inc., Chicago, IL, USA) การวิเคราะห์ความแปรปรวนทางเดียว (One-way ANOVA) กับการทดสอบความแตกต่างที่มีนัยสำคัญน้อยที่สุด (LSD) ใช้สำหรับการเปรียบเทียบระหว่างกลุ่ม ค่า P ที่น้อยกว่า 0.05 ถือว่ามีนัยสำคัญทางสถิติ ผลลัพธ์แสดงเป็นค่าเฉลี่ย ˘ ความคลาดเคลื่อนมาตรฐานของค่าเฉลี่ย (SEM)


3. ผลลัพธ์


3.1. การวิเคราะห์ทางเคมีของ OSK และ OSD


ดังแสดงในตารางที่ 1 เนื้อหาของ TF และ TP ใน OSD นั้นสูงกว่าใน OSK มาก ในขณะที่เนื้อหาของ TPS ใน OSD นั้นต่ำกว่าใน OSK มาก สารประกอบของไอโซเคอร์ซิทรินและเควอซิติน-3-O-เจนติโอไบโอสถูกตรวจพบใน OSD โดยใช้ HPLC เท่านั้น (แสดงไว้ในรูปที่ 1)


image

image

3.2. ฤทธิ์ต้านอนุมูลอิสระในหลอดทดลองของ OPD, OSK และ OSD


ตามที่แสดงในตารางที่ 2 ฤทธิ์ต้านอนุมูลอิสระของ OPD และ OSD ได้รับการพิสูจน์โดย DPPH, FRAP และการทดสอบกำลังที่ลดลง และ OSD แสดงฤทธิ์ต้านอนุมูลอิสระได้ดีกว่า OPD มาก อย่างไรก็ตาม OSK แสดงผลที่อ่อนแอในการลดการทดสอบกำลัง และไม่มีผลในการทดสอบ DPPH และ FRAP ดังนั้น OSD จึงเป็นส่วนสำคัญของฝักกระเจี๊ยบเขียวในการต้านอนุมูลอิสระ



image


3.3. ผลกระทบต่อการทำงานของหัวรถจักรของ OPD, OSK และ OSD


กิจกรรมของหัวรถจักรของหนูเมาส์ได้รับการทดสอบในวันที่ 20 หลังจากได้รับการบำบัดด้วย OSD ดังที่แสดงไว้ในรูปที่ 2 ปริมาณสูงของกลุ่ม OSD (0.6 ก./กก.) ลดระยะห่างทั้งหมดของหนูเมาส์ในสภาพแวดล้อมใหม่อย่างมีนัยสำคัญเมื่อเปรียบเทียบกับกลุ่มควบคุม (p=0 04). อย่างไรก็ตาม ไม่พบผลกระทบที่มีนัยสำคัญสำหรับกลุ่มอื่นในระยะทางทั้งหมด ผลลัพธ์เหล่านี้แสดงให้เห็นว่าฝักและเมล็ดกระเจี๊ยบเขียวไม่มีผลต่อระบบประสาทส่วนกลาง นอกจากนี้ ยังสามารถสรุปได้ว่า OSD อาจมีผลกดประสาทเล็กน้อยที่ขนานยาสูง (0.6 กรัม/กก.)



image


3.4. ผลกระทบต่อเวลาที่หมดไฟในการว่ายน้ำของ OPD, OSK และ OSD (WLST)


ดังแสดงในรูปที่ 3 หลังจากเสริม OPD, OSK และ OSD เป็นเวลา 21 วัน การรักษา OPD (3 ก./กก.) และ OSD (0.3 และ 0.6 ก./กก.) สามารถ ยืดเวลาว่ายน้ำของหนูอย่างเห็นได้ชัด ซึ่งขยายได้ถึง 57.84 ˘ 12.37, 46.51 ˘ 5.82 และ 70.05 ˘ 12.07 นาที (p < 0="" .05,="" p="">< 0.05="" and="" p="">< 0.{{70}}1)="" ตามลำดับ="" นานกว่านั้นมาก="" ในกลุ่มควบคุม="" (15.20="" ˘="" 1.49="" นาที)="" ในขณะเดียวกัน="" การรักษา="" opd="" (0.75="" และ="" 1.5="" ก./กก.),="" osd="" (0.15="" ก./กก.)="" และ="" osk="" (0.6,="" 1.2="" และ="" 2.4="" ก./กก.)="" ไม่แสดงเวลาว่ายน้ำที่เพิ่มขึ้นอย่างมีนัยสำคัญในหนู="" (="" 14.73="" ˘="" 1.28,="" 23.96="" ˘="" 3.70="" และ="" 27.34="" ˘="" 5.72="" นาที="" ตามลำดับ)="" เมื่อเปรียบเทียบกับกลุ่มควบคุม="" (p="0.897," p="0.398" และ="" p="0.268" ตามลำดับ="" )="" แต่="" osd="" (0.15="" ก./กก.)="" มีแนวโน้มว่าจะมีเวลาในการว่ายเพิ่มขึ้น="" แต่ไม่พบความแตกต่างที่มีนัยสำคัญ="" (p="0.225)" นอกจากนี้="" การวิเคราะห์ความแปรปรวนทางเดียวยังแสดงความแตกต่างที่มีนัยสำคัญเกี่ยวกับเวลาที่ละเอียดถี่ถ้วนในการว่ายน้ำของหนูระหว่างกลุ่มต่างๆ="" (f="" (3,="" 40)="12.839," p="">< 0.001)="" เวลาว่ายน้ำของกลุ่ม="" osd="" ปริมาณสูง="" (0.6="" กรัม/กิโลกรัม)="" แสดงให้เห็นความแตกต่างอย่างชัดเจนเมื่อเปรียบเทียบกับกลุ่มที่ได้รับยาระดับกลาง="" (0.3="" กรัม/กิโลกรัม)="" (p="0.019)" และพบผลลัพธ์ที่เหมือนกัน="" ระหว่าง="" 0.3-ก./กก.="" และ="" 0.15-ก./กก.="" กลุ่ม="" (p="0.034)" การแสดง="" osd="">

image

3.5. ผลของ OSD ต่อพารามิเตอร์ทางชีวเคมีในหนูทดลองหลังการทดสอบว่ายน้ำด้วยน้ำหนัก


จากผลการทดสอบการว่ายน้ำด้วยน้ำหนักแสดงให้เห็นว่า OSD สามารถยืดเวลาการว่ายน้ำของหนูได้อย่างชัดเจน อย่างไรก็ตาม การรักษาด้วย OSK ไม่ได้แสดงเวลาว่ายน้ำในหนูเพิ่มขึ้นอย่างมีนัยสำคัญ ดังนั้น พารามิเตอร์ทางชีวเคมีจึงถูกกำหนดในหนูที่ได้รับการบำบัดด้วย OSD เท่านั้น


3.5.1. ผลกระทบของ OSD ต่อ BLA, BUN และ HG


ความแตกต่างของเนื้อหา BLA, BUN และ HG ระหว่างกลุ่มมีนัยสำคัญ (BLA: F (3, 40)=8.257, p < {{10}}}{{="" 20}}01;="" บุญ:="" f="" (3,="" 40)="8.596," p="">< 0.{{3{{32="" }}}}01;="" hg:="" f="" (3,="" 36)="6.960," p="">< 0.{{40}}="" 01).="" ดังแสดงในตารางที่="" 3="" ระดับของ="" bla="" และ="" bun="" ในกลุ่ม="" osd="" ต่ำกว่าในกลุ่มควบคุมอย่างมีนัยสำคัญ="" 24="" ชั่วโมงหลังการทดสอบว่ายด้วยน้ำหนัก="" (bla:="" p="">< 0.05,="" p="">< 0.05="" และ="" p="">< 0.01="" สำหรับ="" 0.15,="" 0.3="" และ="" 0.6="" g/kg="" ตามลำดับ="" bun:="" p="">< 0.01="" สำหรับ="" 0.15,="" 0.3="" และ="" 0.6="" g/kg)="" ระดับของ="" hg="" ในกลุ่ม="" osd="" สูงขึ้นอย่างมีนัยสำคัญเมื่อเทียบกับกลุ่มควบคุม="" (p="">< 0.05,="" p="">< 0.01="" และ="" p="">< 0.01="" สำหรับ="" 0.15,="" 0.3="" และ="" 0.6="" g/kg="">


image


3.5.2. ผลกระทบของ OSD ต่อ GSH-PX, MDA และ SOD


ความแตกต่างของกิจกรรม SOD, GSH-PX และ MDA ที่เทียบเท่ากันระหว่างกลุ่มต่างๆ มีนัยสำคัญ (MDA: F (3, 40)=8.355, p < 0.{{18}="" }01;="" sod:="" f="" (3,="" 42)="9.876," p="">< 0.001;="" gsh-px:="" f="" (="" 3,="" 40)="7.959," p="">< 0.001).="" ตามที่แสดงในตารางที่="" 4="" ค่า="" mda="" ที่เทียบเท่าในกลุ่ม="" osd="" ต่ำกว่าของกลุ่มควบคุมอย่างมีนัยสำคัญหลังจากการทดสอบว่ายด้วยน้ำหนัก="" (p="">< 0}.01,="" p="">< 0.{="" {45}}1="" และ="" p="">< 0.01="" สำหรับ="" 0.15,="" 0.3="" และ="" 0.6="" g/kg="" ตามลำดับ)="" นอกจากนี้="" ระดับของ="" sod="" และ="" gsh-px="" ในกลุ่ม="" osd="" ยังสูงกว่าอย่างมีนัยสำคัญเมื่อเทียบกับกลุ่มควบคุม="" (sod:="" p="">< 0.01,="" p="">< 0.01="" และ="" p="">< 0.01;="" gsh-px:="" p="">< 0.05,="" p="">< 0.01="" และ="" p="">< 0.01="" สำหรับ="" 0.15,="" 0.3="" และ="" 0.6="" กรัม/กก.="">


image



4. การอภิปราย


กระเจี๊ยบเขียวอ่อนเป็นผักเพื่อสุขภาพที่มีการบริโภคในพื้นที่ส่วนใหญ่ของโลก การศึกษาก่อนหน้านี้ได้รายงานว่ากระเจี๊ยบเขียวที่ยังไม่บรรลุนิติภาวะมีฤทธิ์ต้านอนุมูลอิสระและต้านความเมื่อยล้า [25,46] แต่องค์ประกอบที่ใช้งานและกลไกที่เป็นไปได้ไม่ชัดเจน เพื่อตรวจสอบสารต้านอนุมูลอิสระและฤทธิ์ต้านความเหนื่อยล้าของกระเจี๊ยบเขียว เราแบ่งฝักกระเจี๊ยบเขียวสดออกเป็นเมล็ดและผิวหนัง และได้รับ OSD, OSK และ OPD ผ่านกระบวนการสกัด จากนั้นจึงทำการต้านอนุมูลอิสระในหลอดทดลองของ OSD, OSK และ ตรวจพบ OPD ด้วย DPPH, FRAP และกำลังรีดิวซ์ และศึกษาฤทธิ์ต้านความเมื่อยล้าในร่างกายของ OSD, OSK และ OPD โดยใช้การทดสอบว่ายด้วยน้ำหนัก ผลลัพธ์ของเราแสดงให้เห็นว่า OSD ไม่เพียงแต่มีฤทธิ์ต้านอนุมูลอิสระที่ดีในหลอดทดลองเท่านั้น แต่ยังช่วยยืดเวลาการว่ายน้ำของหนูอย่างมีนัยสำคัญเมื่อเทียบกับกลุ่มควบคุม ในขณะที่ OSK ไม่มีผลต่อทั้งสองอย่าง เวลาที่ครบถ้วนสมบูรณ์ของการว่ายน้ำเป็นการวัดโดยตรงที่สะท้อนถึงความอดทนในการออกกำลังกายของร่างกาย [47] และการส่งเสริมความอดทนในการออกกำลังกายมีความสัมพันธ์กับเวลาว่ายน้ำที่นานขึ้น ดังนั้นควรอนุมานสารต้านอนุมูลอิสระและส่วนป้องกันความเมื่อยล้าของ OPD เป็นเมล็ดของมัน นอกจากนี้ ในการศึกษานี้ OSD (0.3{{10}}, 0.60 ก./กก.) สามารถยืดเวลาว่ายน้ำของหนูได้อย่างเห็นได้ชัด และปริมาณเมล็ดกระเจี๊ยบเขียวในมนุษย์อาจเท่ากับ 0.9 ~1.8 ก./กก. (4.5 ~ 8.9 ก./กก. สำหรับฝักกระเจี๊ยบเขียว) ตามพื้นที่ผิวกาย [48] ปริมาณเหล่านี้สามารถเข้าถึงได้โดยคนเสิร์ฟผัก อย่างไรก็ตาม องค์ประกอบที่ใช้งานของกระเจี๊ยบเขียวยังไม่ชัดเจน ผลการวิเคราะห์ทางเคมีในการศึกษาครั้งนี้แสดงให้เห็นว่าเนื้อหาของโพลีฟีนอลใน OSD นั้นมากว่าใน OSD ประมาณ 24 เท่า แต่เนื้อหาของโพลีแซคคาไรด์ใน OSD นั้นต่ำกว่าใน OSD มาก (ตารางที่ 1)


Moreover, total flavonoids content and two compounds of isoquercitrin and quercetin-3-O-gentiobiose were only detected in OSD and were not detected in OSK (Table 1). It has been proven that okra seeds contained epigallocatechin oligomers, catechin, and its oligomers, isoquercitrin, quercetin-3-O-gentiobiose, and other catechin and quercetin derivatives [27–29]. Furthermore, previous studies have reported that polyphenols like catechin and flavonoids like quercetin possess anti-fatigue activity due to their antioxidant activity [35,36,49–51]. Therefore, we deduced that polyphenols and flavonoids of OSD might be the antioxidant and anti-fatigue constituents. As for the reason that the effect of OPD was less than the effect of OSD, it might be that the high content of mucilaginous polysaccharides can affect the assimilation of polyphenols and flavonoids in OPD, which needs to be researched in the future. When it comes to the anti-fatigue mechanism of OSD, an open-field test showed that OSD had no central nerve stimulation in mice, which proved that the anti-fatigue of OSD was not through central excitation. Apart from this, it was likely that OSD possessed a slight sedative effect in high doses (>0.6 กรัม/กก.) จำเป็นต้องมีข้อมูลเพิ่มเติมเพื่อพิสูจน์สิ่งนี้ เนื่องจากการเคลื่อนไหวที่ลดลงเล็กน้อยอาจเป็นผลมาจากแรงจูงใจที่ลดลงในการสำรวจหรือผลกระทบจากความวิตกกังวลที่อาจเกิดขึ้น อย่างไรก็ตาม ในงานวิจัยนี้ การทดสอบแบบเปิดโล่งใช้เพื่อแยกความเป็นไปได้ที่ OSD จะออกฤทธิ์ต้านอาการเมื่อยล้าจากการกระตุ้นระบบประสาทส่วนกลาง และไม่มีข้อมูลเพิ่มเติมเพื่อแสดงให้เห็นถึงผลกดประสาทของ OSD นอกจากนี้ ปฏิกิริยาออกไซด์ที่มากเกินไป (ROS) ที่เกิดขึ้นระหว่างการออกกำลังกายอย่างละเอียดถี่ถ้วนได้รับการพิสูจน์แล้วว่าเป็นองค์ประกอบหลักของความเหนื่อยล้าทางร่างกาย ROS ที่มากเกินไปอาจส่งผลต่อกระบวนการเผาผลาญและเอนไซม์ต่างๆ โดยโจมตีกรดไขมันไม่อิ่มตัวเชิงซ้อนเพื่อผลิต MDA และนำไปสู่ความผิดปกติของแผ่นชีวะ [13,52]


ด้วยเหตุนี้ ROS จึงไม่เพียงแค่ส่งผลต่อการทำงานของเอนไซม์ในระหว่างกระบวนการจ่ายพลังงานและกระบวนการ coupling แบบกระตุ้น-หดตัวโดยตรง แต่ยังเร่งการสะสมของของเสียรวมถึง BLA และ BUN นอกจากนี้ ระดับ BLA ที่เพิ่มขึ้นยังเป็นสาเหตุสำคัญของความเหนื่อยล้า เนื่องจากค่า pH ในเนื้อเยื่อลดลง และ BUN เนื้อหาที่สูงขึ้นบ่งชี้ว่าความอดทนในการออกกำลังกายลดลง ดังนั้นจึงไม่เพียงแต่เพิ่มความทนทานในการออกกำลังกายเท่านั้น แต่ยังบรรเทาความเหนื่อยล้าของร่างกายและส่งเสริมการฟื้นตัวด้วยการส่งเสริมการทำงานของระบบต้านอนุมูลอิสระด้วยเอนไซม์ เช่น SOD และ GSH-PX หรือเสริมสารต้านอนุมูลอิสระโดยตรง ในการศึกษานี้ การกำหนดพารามิเตอร์ทางชีวเคมีที่ดำเนินการ 24 ชั่วโมงหลังการทดสอบว่ายน้ำ บ่งชี้ว่าการรักษา OSD ลดระดับ BLA และ BUN ในเลือด, MDA ในตับ และเพิ่มระดับของ HG, SOD และ GSH ใน ตับระหว่างพักฟื้นเมื่อยล้า ซึ่งพิสูจน์ว่า OSD สามารถบรรเทาความเมื่อยล้าทางร่างกายและส่งเสริมการฟื้นตัวได้ เมื่อพิจารณาถึงผลการตรวจสารต้านอนุมูลอิสระในหลอดทดลองในการวิจัยของเรา เราสามารถสรุปได้ว่า OSD มีฤทธิ์ต้านความเหนื่อยล้า ไม่เพียงแต่ผ่านการกำจัดอนุมูลอิสระโดยตรงเท่านั้น แต่ยังส่งเสริมกิจกรรมของเอนไซม์ต้านอนุมูลอิสระ เช่น SOD และ GSH-PX


23

คลิกรูปภาพเพื่อ Cistanche Uk เพื่อต่อต้านความเมื่อยล้า

5. สรุปผลการวิจัย


โดยสรุป การศึกษาในปัจจุบันระบุว่า OSD เป็นส่วนต้านความเมื่อยล้าของกระเจี๊ยบเขียว และโพลีฟีนอลและฟลาโวนอยด์น่าจะเป็นส่วนประกอบสำคัญของ OSD เนื่องจากมีฤทธิ์ต้านอนุมูลอิสระ อย่างไรก็ตาม ความเหนื่อยล้าเป็นปรากฏการณ์ที่ซับซ้อน และการศึกษาในปัจจุบันเกี่ยวกับกลไกป้องกันความเมื่อยล้าของกระเจี๊ยบเขียวนั้นเป็นการศึกษาเบื้องต้น รายละเอียดเพิ่มเติมยังคงต้องได้รับการส่องสว่างในอนาคต




อ้างอิง


1. เชาว์ธุรี, อ.; Behan, PO ความเมื่อยล้าในความผิดปกติของระบบประสาท มีดหมอ 2004, 363, 978–988. [ข้ามอ้างอิง]

2. Belluardo, N.; Westerblad, H.; มูโด, จี.; คาซาโบนา, A.; บรูตัน เจ.; Caniglia, G.; Pastoris, O.; Grassi, F.; Ibáñez, CF การถอดแยกชิ้นส่วนประสาทและกล้ามเนื้อและความล้าของกล้ามเนื้อในหนูที่ไม่มีนิวโรโทรฟิน-4 มล. เซลล์. ประสาทวิทยา 2001, 18, 56–67. [CrossRef] [PubMed]

3. ธาราการ บ.; ธนเศกการันต์, ม.; บราวน์-บอร์ก, HM; Manyam, BV Trichopus zeylanicus ต่อสู้กับความเหนื่อยล้าโดยไม่มีกิจกรรมเลียนแบบแอมเฟตามีน ไฟโตเธอร์. ความละเอียด ปตท. 2549, 20, 165–168. [CrossRef] [PubMed]

4. หวาง L.-Z.; Huang, B.-K.; ครับ Q.; ฉิน, แอล.-พี. การแยกส่วนด้วยปฏิกิริยาทางชีวภาพสำหรับคุณสมบัติต้านอาการเมื่อยล้าของ acanthopanax senticosus เจ. เอธโนฟาร์มาคอล. 2011, 133, 213–219. [CrossRef] [PubMed]

5. Pawlikowska, T.; ชาลเดอร์, ต.; เฮิร์ช อาร์เอส; วอลเลซ, พี.; ไรท์ ดีเจ; เวสลีย์ การศึกษาเกี่ยวกับความเหนื่อยล้าและความทุกข์ทางจิตใจโดยอิงตามประชากร BMJ 1994, 308, 763–766. [CrossRef] [PubMed]

6. Li, G. สถานการณ์ความเหนื่อยล้าของ 2823 คนสุขภาพดีที่ต้องตรวจและสัมพันธ์กับตัวชี้วัดทางกายภาพ; มหาวิทยาลัยแพทยศาสตร์จีนปักกิ่ง: ปักกิ่ง ประเทศจีน 2013

7. อุเอฮาตะ ต. คาโรชิ เสียชีวิตจากการทำงานหนักเกินไป นิปปอน รินโช เจ. คลิน. เมดิ. 2548, 63, 1249–1253.

8. Layzer, RB การเผาผลาญของกล้ามเนื้อระหว่างทำงานเมื่อยล้า คลินิกของ Bailliere เอ็นโดครินอล เมตาบ 1990, 4, 441–459. [ข้ามอ้างอิง]

9. Hultman, E.; เบิร์กสตรอม, ม.; สปรีต์, LL; Söderlund, K. การเผาผลาญพลังงานและความเหนื่อยล้า; จลนพลศาสตร์ของมนุษย์: Champaign, IL, USA, 1990

10. Glaister, M. Multiple sprint work: การตอบสนองทางสรีรวิทยา กลไกของความเหนื่อยล้า และอิทธิพลของการออกกำลังกายแบบแอโรบิก กีฬาเมด 2548, 35, 757–777. [CrossRef] [PubMed]

11. Nozaki, S.; มิซูมะ, เอช.; ทานากะ, ม.; จิน, จี.; ทาฮาร่า, ต.; มิซูโนะ เค.; ยามาโตะ, ม.; โอคุยามะ, K.; Eguchi, A.; อากิโมโตะ, K.; และคณะ Thiamine tetrahydrofuran disulfide ช่วยเพิ่มการเผาผลาญพลังงานและสมรรถภาพทางกายในระหว่างการโหลดเมื่อยล้าทางกายภาพในหนู Nutr. ความละเอียด 2009, 29, 867–872. [CrossRef] [PubMed]

12. แมคคัลลี KK; Authier, B.; โอลีฟ เจ.; คลาร์ก บีเจ ที่ 3 ความเหนื่อยล้าของกล้ามเนื้อ: บทบาทของการเผาผลาญ สามารถ. เจ. แอพพ์. ฟิสิออล 2545, 27, 70–82. [CrossRef] [PubMed]

13. คาร์เตอร์, GT ความเมื่อยล้า ในสารานุกรมวิทยาศาสตร์ประสาท 2nd ed.; Aminoff, MJ, Daroff, RB, Eds.; สื่อวิชาการ: Oxford, UK, 2014; หน้า 276–280

14. ฟิลเลอร์, K.; ลียง, D.; เบนเน็ตต์ เจ.; แมคเคน, น.; เอลส์วิค, อาร์.; ลูกาหทัย, น.; Saligan, LN Association of mitochondrial dysfunction and fatigue: การทบทวนวรรณกรรม บีบีเอ คลินิก 2014, 1, 12–23. [CrossRef] [PubMed]

15. หลิน วาย.; หลิว H.-L.; ฝาง เจ.; Yu, C.-H.; Xiong, Y.-K.; Yuan, K. Anti-fatigue และ vasoprotective effects ของ quercetin-3-O-gentiobiose ต่อความเครียดจากปฏิกิริยาออกซิเดชันและความผิดปกติของบุผนังหลอดเลือดที่เกิดจากการว่ายน้ำความอดทนในหนู เคมีอาหาร. ท็อกซิคอล 2014, 68, 290–296. [CrossRef] [PubMed]

16. Edwards, RH การทำงานของกล้ามเนื้อและความเหนื่อยล้าของมนุษย์ ซิบาพบ อาการ 2524, 82, 1–18. [ผับเมด]

17. Gupta, A.; วิจ, จี.; ชาร์, เอส.; Tirkey, N.; Rishi, P.; Chopra, K. Curcumin สารต้านอนุมูลอิสระโพลีฟีนอลช่วยลดอาการอ่อนเพลียเรื้อรังในแบบจำลองความเครียดจากการแช่น้ำในหนู ภูมิคุ้มกันวิทยา 2552, 214, 33–39 [CrossRef] [PubMed]

18. วู CY; เฉิน, ร.; วัง XS; เชน, บี.; Yue, W. ; Wu, Q. ฤทธิ์ต้านอนุมูลอิสระและต้านความเหนื่อยล้าของสารสกัดฟีนอลิกจากเปลือกหุ้มเมล็ดของ Euryale Ferox salisb และการระบุสารประกอบฟีนอลิกสามชนิดด้วย lc-esi-ms/ms โมเลกุล 2013, 18, 11003–11021. [CrossRef] [PubMed]

19. เจียง ดี.-คิว.; Guo, Y.; Xu, D.-H.; Huang, Y.-S.; หยวน, ก.; Lv, Z.-Q. ฤทธิ์ต้านอนุมูลอิสระและต้านความเหนื่อยล้าของแอนโธไซยานินของการทำน้ำมัลเบอร์รี่ให้บริสุทธิ์ (MJP) และการทำให้บริสุทธิ์ด้วยมัลเบอร์รี่มาร์ค (MMP) จากผลหม่อนหลากหลายชนิดในประเทศจีน เคมีอาหาร. ท็อกซิคอล 2013, 59, 1–7. [CrossRef] [PubMed]

20. สวามี MSL; นาวีน, S.; สิงสิต, ด.; ไนก้า, ม.; Khanum, F. ฤทธิ์ต้านความเหนื่อยล้าของโพลีฟีนอลที่สกัดจากเปลือกทับทิม อินเตอร์ เจ อินทิกร์ ไบโอล. 2011, 11, 69–72.

21. ล้อเล่น เจ.; Thole, C.; Niehues, ม.; Shevtsova, A.; กล็อคเกอร์ อี.; บอร์น, ต.; Hensel, A. คุณสมบัติต้านการยึดเกาะของสารสกัดจากผลไม้ Abelmoschus esculentus (Okra) ที่ยังไม่บรรลุนิติภาวะต่อการยึดเกาะของ helicobacter pylori โปรดหนึ่ง 2014, 9, e84836. [CrossRef] [PubMed]

22. ทองเจริญบัวงาม, ว.; รักษี, น.; จันทิราติกุล, ป.; พักดีณรงค์, น.; กองบุญตา, ว.; Govitrapong, P. ผลกระทบต่อระบบประสาทของ quercetin, rutin และ okra (Abelmoschus esculentus Linn.) ในหนูที่ได้รับการรักษาด้วย dexamethasone นิวโรเคม. อินเตอร์ 2011, 59, 677–685. [CrossRef] [PubMed]

23. แฟนเอส.; จาง, วาย.; ซัน, คิว; Yu, L.; หลี่, ม.; เจิ้ง, บี.; วู X .; ยางบี.; หลี่, วาย.; Huang, C. สารสกัดจากกระเจี๊ยบเขียวช่วยลดระดับน้ำตาลในเลือดและไขมันในเลือดในหนูทดลอง C57Bl/6 ที่เป็นโรคอ้วนที่มีไขมันสูง เจ. นุ. ไบโอเคมี. 2014, 25, 702–709. [CrossRef] [PubMed]

24. วัง H.; เฉิน, จี.; เร็น, ดี.; Yang, ST กิจกรรม Hypolipidemic ของกระเจี๊ยบเขียวเป็นสื่อกลางผ่านการยับยั้งการสร้างไขมันและ upregulation ของการย่อยสลายคอเลสเตอรอล ไฟโตเธอร์. ความละเอียด PTR 2014, 28, 268–273. [CrossRef] [PubMed]

25. หูแอล.; ยู, ว.; หลี่, วาย.; Prasad, N.; Tang, Z. ฤทธิ์ต้านอนุมูลอิสระของสารสกัดและส่วนประกอบหลักจากเมล็ดกระเจี๊ยบเขียวในตับของหนูที่ได้รับบาดเจ็บจากคาร์บอนเตตระคลอไรด์ ความละเอียด BioMed อินเตอร์ 2014, 2014, 341291. [CrossRef] [PubMed]

26. หยาง วาย.; จิน Z.; เหมา, ป.; จิน เจ.; หวางเจ .; Yang, M. ศึกษาฤทธิ์ต้านความเหนื่อยล้าของสารสกัดจากกระเจี๊ยบเขียว คาง. เจ. มด. แอปพลิเค เภสัช. 2012, 29, 4. [ข้ามอ้างอิง]

27. Arapitasa, P. การจำแนกและการหาปริมาณสารประกอบโพลีฟีนอลจากเมล็ดและเปลือกกระเจี๊ยบเขียว เคมีอาหาร. 2551, 110, 1041–1045. [CrossRef] [PubMed].

28. แสงคำปาน น.; ซากิส แอลเอ็มซี; เดอ Vries, R.; สโคลส์ HA; สัจจะอนันตกุล, ต.; Voragen, AGJ คุณสมบัติทางเคมีกายภาพของเพคตินจากกระเจี๊ยบเขียว (Abelmoschus esculentus (L. ) Moench) อาหารไฮโดรคอล. 2010, 24, 35–41. [ข้ามอ้างอิง]

29. คาราโคลต์ซิดิส เพนซิลเวเนีย; Constantinides, SM เมล็ดกระเจี๊ยบ: แหล่งโปรตีนใหม่ เจ. อากริก. เคมีอาหาร. 2518, 23, 1204–1207. [CrossRef] [PubMed]

30. โจว วาย.; เจีย, X.; ชิ เจ.; Xu, Y.; จิง L.; Jia, L. Pentacyclic triterpenes ใหม่สองตัวจาก Abelmoschus esculentus เฮลฟ์ ชิม. แอคตา 2013, 96, 533–537. [ข้ามอ้างอิง]

31. เจีย, แอล.; จง, แอลเจ; หลี่ HF; Jing, LL องค์ประกอบทางเคมีในส่วนของน้ำของ Abelmoschus esculentus คาง. ตราด. สมุนไพร. ยาเสพติด 2011, 42, 2186–2188.

32. เจียแอล.; Guo, ม.; หลี่, ดี.; Jing, L. องค์ประกอบทางเคมีจากส่วนปิโตรเลียมอีเทอร์ของ Abelmoschus esculentus II จงกั๋ว จงเหยา ซาจื่อ 2011, 36, 891–895. [CrossRef] [PubMed]

33. เจียแอล.; หลี่ HF; Jing, LL องค์ประกอบทางเคมีในสารสกัด N-butanol ของ Abelmoschus esculentus L. Chin. ตราด. สมุนไพร. ยาเสพติด 2010, 41, 1771–1773

34. เจียแอล.; หลี่, ดี.; จิง LL; Guo, MM การศึกษาองค์ประกอบทางเคมีจากส่วนปิโตรเลียมอีเทอร์ของ Abelmoschus esculentus เจ. ชิน. เมดิ. มาเตอร์ 2010, 33, 1262–1265.

35. โคโบริ, ม.; ทากาฮาชิ วาย.; อากิโมโตะ วาย.; ซากุระอิ, ม.; มัตสึนางะ ฉัน; นิชิมูระ, เอช.; อิปโปชิ เค.; โออิเกะ, เอช.; Ohnishi-Kameyama, M. การรับประทานเควอซิตินในปริมาณมากแบบเรื้อรังจะช่วยลดความเครียดจากปฏิกิริยาออกซิเดชันและกระตุ้นการแสดงออกของเอนไซม์ต้านอนุมูลอิสระในตับและเนื้อเยื่อไขมันในอวัยวะภายในในหนูทดลอง เจ. ฟังก์. อาหาร 2015, 15, 551–560. [ข้ามอ้างอิง]

36. Nogueira, L.; รามิเรซ-ซานเชซ, I.; เพอร์กินส์ จอร์เจีย; เมอร์ฟี่, A.; ทอบ ประชาสัมพันธ์; Ceballos, G.; บียาร์เรอัล, เอฟเจ; โฮแกน เอ็มซี; Malek, MH (-)-epicatechin ช่วยเพิ่มความต้านทานเมื่อยล้าและความสามารถในการออกซิเดชั่นในกล้ามเนื้อของเมาส์ เจ. ฟิสิออล. 2011, 589, 4615–4631. [CrossRef] [PubMed] .

37. คณะกรรมการปรับปรุงคู่มือการดูแลและการใช้สัตว์ทดลอง คู่มือการดูแลและการใช้สัตว์ทดลอง ฉบับที่ 8; The National Academies Press: Washington, DC, USA, 2011.

38. Liao, H.; ดง, ว.; ชิ, X.; หลิวเอช.; Yuan, K. การวิเคราะห์และเปรียบเทียบส่วนประกอบที่ใช้งานและกิจกรรมต้านอนุมูลอิสระของสารสกัดจาก Abelmoschus esculentus L. Pharmacogn แม็ก 2012, 8, 156–161. [ผับเมด]

39. Zhu, Z.; Li, N. ศึกษาวิธีการกำหนดเนื้อหาของกระเจี๊ยบเขียว เจียงซู เกษตร. วิทย์. 2012, 40, 2. [ข้ามอ้างอิง]

40. DuBois, M.; กิลส์, แคลิฟอร์เนีย; แฮมิลตัน เจเค; รีเบอร์ส เพนซิลเวเนีย; Smith, F. วิธี Colorimetric สำหรับการกำหนดน้ำตาลและสารที่เกี่ยวข้อง ก้น เคมี. 2499, 28, 350–356. [ข้ามอ้างอิง]

41. หลัว เจ.; หลี่, แอล.; Kong, L. การเตรียมการแยกกลีเซอไรด์ฟีนิลโพรพานอยด์ออกจากหลอดไฟของ Lilium lancifolium โดยโครมาโตกราฟีแบบกระแสตรงความเร็วสูงและการประเมินกิจกรรมต้านอนุมูลอิสระ เคมีอาหาร. 2555, 131, 1056–1062. [ข้ามอ้างอิง]

42. แดง H.; เฉิน Y.; หลิว X .; วังคิว; วังแอล.; เจีย W.; Wang, Y. นิวเคลียสเบดของ stria terminalis: กายวิภาคศาสตร์สรีรวิทยาการทำงานของนิวเคลียสของเตียง โปรแกรม ประสาท-จิตเวช. ไบโอล. จิตเวชศาสตร์ 2552, 33, 1417–1424 [CrossRef] [PubMed]

43. วังคิว; เชียงใหม่ WL; หลี่ YH; เฉิน SG; วัง LW; เฟิง ZQ; จู้ วายเอฟ; Liu, XM ก่อตั้งระบบประมวลผลภาพด้วยคอมพิวเตอร์สำหรับกิจกรรมของสัตว์ในการเคลื่อนที่ของสัตว์และการตรวจสอบยากล่อมประสาทด้วยผงไคซิน คาง. ตราด. สมุนไพร. ยาเสพติด 2552, 40, 1773–1779

44. ฉี บี.; หลิวแอล.; จางเอช.; โจว, G.-X.; วังเอส.; ด้วน, X.-Z.; ไป่, X.-Y.; วัง, S.-M.; จ้าว, D.-Q. ฤทธิ์ต้านความเหนื่อยล้าของโปรตีนที่แยกได้จาก Panax quinquefolium เจ. เอธโนฟาร์มาคอล. 2014, 153, 430–434. [CrossRef] [PubMed]

45. ตาล W.; ยู KQ; หลิว YY; โอหยาง MZ; ยาน MH; หลัวอาร์.; Zhao, XS ฤทธิ์ต้านความอ่อนล้าของพอลิแซ็กคาไรด์ที่สกัดจาก Radix Rehmannia preparata อินเตอร์ เจ. ไบโอล. แมคโครโมล 2555, 50, 59–62. [CrossRef] [PubMed]

46. ​​วังเจ.; โจวเจ.; Tang, G. การศึกษาฤทธิ์ต้านความเมื่อยล้าของกระเจี๊ยบเขียว. คาง. เจ. มด. แอปพลิเค เภสัช. 2546, 20, 2. [ข้ามอ้างอิง]

47. Contarteze, RV; Manchado Fde, B.; โกบัตโต แคลิฟอร์เนีย; de Mello, MA Stress biomarkers ในหนูที่ส่งไปว่ายน้ำและออกกำลังกายบนลู่วิ่ง คอมพ์ ไบโอเคมี. ฟิสิออล มอล. อินทิกรัล ฟิสิออล 2551, 151, 415–422. [CrossRef] [PubMed]

48. Xu, SY วิธีการทดลองทางเภสัชวิทยา; สำนักพิมพ์การแพทย์ของประชาชน: ปักกิ่ง ประเทศจีน พ.ศ. 2545

49. แซนวาร์ เอเอ; Badole, SL; เชนเด PS; เฮกด์, เอ็มวี; Bodhankar, SL บทบาทของสารต้านอนุมูลอิสระ catechin ต่อสุขภาพและโรค ในโพลีฟีนอลในสุขภาพและโรคของมนุษย์; วัตสัน, RR, Preedy, VR, Eds.; สื่อวิชาการ: ซานดิเอโก, แคลิฟอร์เนีย, สหรัฐอเมริกา, 2014; น. 267–271.

50. Jadhav, SB; Singhal, RS Laccase–gum Arabic conjugate สำหรับการเตรียมโอลิโกเมอร์ที่ละลายน้ำได้ของคาเทชินพร้อมฤทธิ์ต้านอนุมูลอิสระที่เพิ่มขึ้น เคมีอาหาร. 2014, 150, 9–16. [CrossRef] [PubMed]

51. Liudong, F.; เฟิง Z.; Daoxing, S.; Xiufang, Q.; เสี่ยวหลง F.; Haipeng, L. การประเมินคุณสมบัติต้านอนุมูลอิสระและฤทธิ์ต้านความเหนื่อยล้าของโพลีฟีนอลชาเขียว วิทย์. ความละเอียด บทความ 2011, 6, 2624–2629.

52. คุณแอล.; จ้าว, ม.; เรเกนสไตน์ เจเอ็ม; Ren, J. ฤทธิ์ต้านอนุมูลอิสระในหลอดทดลองและฤทธิ์ต้านความเมื่อยล้าในร่างกายของเปปไทด์ loach (misgurnus anguillicaudatus) ที่เตรียมโดยการย่อยอาหารปาเปน เคมีอาหาร. 2554, 124, 188–194. [ข้ามอ้างอิง]


คุณอาจชอบ