ผลการต่อต้านริ้วรอยของ Ribes Meyeri Anthocyanins ต่อเซลล์ต้นกำเนิดประสาทและหนูที่มีอายุมากขึ้น ตอนที่ 1

โปรดติดต่อoscar.xiao@wecistanche.comสำหรับข้อมูลเพิ่มเติม

เชิงนามธรรม:การแก่ชรามีความเกี่ยวข้องกับความบกพร่องทางระบบประสาทและการลดลงของความรู้ความเข้าใจ สารฟลาโวนอยด์มีแนวโน้มที่ดีในการวิจัยการต่อต้านวัยในแบบจำลองเมาส์ Ribes Meyer anthocyanins อุดมไปด้วย flavonoids มากมาย แต่ยังไม่ทราบถึงกิจกรรมทางชีวภาพในการต่อต้านวัย ในการศึกษานี้ เราเตรียมสารสกัด R. Meyer anthocyanin และวิเคราะห์ผลกระทบต่อความชราของ Neural Stem Cell (NSC) ในร่างกายและในหลอดทดลอง เราแยก NSC ของหนูเมาส์และใช้ชุดตรวจนับเซลล์-8(CCK-8) วัฏจักรเซลล์ ชนิดของออกซิเจนที่เกิดปฏิกิริยา (ROS) และวิธีการอิมมูโนฟลูออเรสเซนส์เพื่อวิเคราะห์ผลการต่อต้านวัยของอาร์ เมเยอร์ แอนโธไซยานินด้วย เป็น naringenin (Nar) ซึ่งการวิเคราะห์เมตาบอลิซึมพบว่ามีสารฟลาโวนอยด์ที่สำคัญในอาร์เมเยอร์ แอนโธไซยานิน นอกจากนี้ยังใช้วิธีการหาลำดับอาร์เอ็นเอ (RNA-seq) และการทดสอบอิมมูโนดูดซับที่เชื่อมโยงกับเอนไซม์ (ELISA) เพื่อตรวจสอบกลไกการต่อต้านริ้วรอยเฉพาะของนาร์ หลังการบำบัดด้วย R. Meyer anthocyanin การเพิ่มจำนวน NSC เร่งขึ้น และ NSCs ได้ลดเครื่องหมายการเสื่อมสภาพและการแสดงออกของ P16ink4 ลดลง การรักษาด้วย R. Meyer anthocyanin ยังช่วยย้อนกลับการสูญเสียเส้นประสาทตามอายุ ในร่างกาย และ ในหลอดทดลอง Nar บล็อกการแก่ของ mNSC ในหลอดทดลอง และปรับปรุงหน่วยความจำเชิงพื้นที่และความสามารถทางปัญญาในหนูที่มีอายุมากขึ้นผ่านการปรับลด TNF- โปรตีนในพลาสมาไบโอฟลาโวนอยด์ส้มการค้นพบนี้ชี้ให้เห็นว่า R. Meyer anthocyanins ช่วยเพิ่มการงอกของ NSC และปรับปรุงการสร้างเซลล์ประสาทเมื่ออายุมากขึ้นผ่านการลดระดับโปรตีน TNF-protein ในร่างกายที่เกิดจาก Nar

การแนะนำ

Ribes Meyer (เรียกอีกอย่างว่า R. Meyer Maxim) อยู่ในตระกูล Saxifragaceae [1, 2] รากและใบของ R. Meyer อุดมไปด้วยสารกลุ่มฟลาโวนอยด์รองจากพืช [1-6] ซึ่งมีหน้าที่หลายอย่าง รวมทั้งฤทธิ์ต้านการอักเสบและต้านมะเร็ง [7-9] โจวและคณะ naringenin ที่แยกได้ตัวแรก(Nar)จาก R. Meyer anthocyanins [1]. Nar เป็นองค์ประกอบหลักของ R. sativum; อย่างไรก็ตาม ฤทธิ์ทางชีวภาพในการต่อต้านริ้วรอยของ Nar และ R. Meyer anthocyanins ยังไม่ทราบ ความอ่อนล้าของสเต็มเซลล์เป็นเครื่องหมายรับรองความชราที่สำคัญ [10] การสูญเสียเซลล์ต้นกำเนิดจากประสาท (NSC) ขึ้นกับอายุสัมพันธ์กับการลดลงของความรู้ความเข้าใจ และ NSC เกี่ยวข้องกับโรคที่เกี่ยวข้องกับการสูญเสียความจำ [11, 12] มีการลดลงอย่างเห็นได้ชัดใน NSC และจำนวนเซลล์ประสาทในสมองของหนูที่มีอายุมากขึ้น [13]ประโยชน์ของไซโนโมเรียมสาเหตุของการแก่ชราในสเต็มเซลล์รวมถึงเทโลเมียร์ที่สั้นลง ระดับออกซิเจนที่เกิดปฏิกิริยา (ROS) ที่เพิ่มขึ้น) การกระตุ้นเครื่องหมายความชราภาพ P16ink4a และการหยุดวงจรของเซลล์ [14-16] ปัจจัยเหล่านี้ในที่สุดนำไปสู่ความเสียหายของระบบประสาท ความผิดปกติของการเผาผลาญ และความผิดปกติทางสติปัญญา [17]

กรุณาคลิกที่นี่เพื่อทราบข้อมูลเพิ่มเติม

เนื่องจากการเปลี่ยนแปลงเหล่านี้เกี่ยวข้องกับอายุ หน้าที่ของ R. Meyer anthocyanins ยังไม่ได้รับการศึกษาเป็นอย่างดี ดังนั้น เราจึงตรวจสอบผลกระทบของ R. Meyer anthocyanins ต่อ NSCs ในหนูอายุมาก ผลลัพธ์ของเราแสดงให้เห็นว่า R. Meyer anthocyanins ปรับปรุงฟีโนไทป์ของวัยโดยการย้อนความชราของ NPC ในหลอดทดลอง ตลอดจนโดยการปรับปรุงระดับความรู้ความเข้าใจและการเพิ่มจำนวน NSC และจำนวนเซลล์ประสาทในหนูที่มีอายุมากขึ้น นอกจากนี้เรายังเปิดเผยว่าฟลาโวนอยด์ Nar ซึ่งอุดมไปด้วย R. Meyer anthocyanins ช่วยย้อนวัยใน NSCs และปรับปรุงระดับความรู้ความเข้าใจในหนูที่มีอายุมากขึ้นโดยการยับยั้งเส้นทางการส่งสัญญาณของ tumor necrosis factor (TNF)

ผลลัพธ์

ผลของ R. Meyer anthocyanins ต่อการเปลี่ยนแปลงที่เกี่ยวข้องกับอายุในบรรษัทข้ามชาติ

เพื่อตรวจสอบผลของ R.Meyer anthocyanins ต่อการเสื่อมของเซลล์ เราใช้ NSC จาก 23-หนูอายุเดือน (23M-mNSC) เมื่อพิจารณาว่า R. Meyer anthocyanins อาจก่อให้เกิดพิษต่อเซลล์หรือมีผลในการป้องกันโดยขึ้นอยู่กับความเข้มข้นของพวกมัน อันดับแรก เราต้องตรวจสอบความเข้มข้นที่ปลอดภัยของ R. Meyer anthocyanins เพื่อรักษา 23M-mNSCs ความมีชีวิตของเซลล์ที่บำบัดด้วย R. Meyer anthocyanins ตรวจพบโดยใช้ชุดตรวจนับเซลล์-8 (CCK-8) ที่ความเข้มข้นสูงถึง 100 pg/mL,R การบำบัดด้วยเมเยอร์แอนโธไซยานินเป็นเวลา 48 หรือ 72 ชั่วโมงเพิ่มความมีชีวิตของเซลล์ 23M-NSC (รูปที่ 1A เสริม) การสะสมของ ROS ในช่วงอายุมากขึ้นมีบทบาทสำคัญในความเสียหายของไมโตคอนเดรีย [16,18] เพื่อตรวจสอบว่า R. Meyer anthocyanins สามารถยับยั้งความเสียหายจากปฏิกิริยาออกซิเดชันได้หรือไม่ เราทำการทดสอบ ROS R. Meyer anthocyanins ยับยั้งความเสียหายจากปฏิกิริยาออกซิเดชันที่ความเข้มข้น 100 pg/mL (รูปที่ 1B เสริม) เมื่อเทียบกับกลุ่มควบคุม เราสังเกตเห็นการเปลี่ยนแปลงที่ชัดเจนในการเพิ่มจำนวนและระดับ ROS ในเซลล์ที่ได้รับการรักษาด้วย R. Meyer anthocyanin ซึ่งแสดงให้เห็นว่า 100 pg/mL ของ R. Meyer anthocyanins กระตุ้นการเพิ่มจำนวน 23M-NSC และยับยั้งความเสียหายจากปฏิกิริยาออกซิเดชัน เพื่อตรวจสอบผลกระทบของ R. Meyer anthocyanins ต่อการสร้างเซลล์ประสาท เราแยก NSCs ออกจากสมองของหนูอายุ 3-สัปดาห์(3W-mNSC) และ 23-เดือน (23M-mNSC) NSCs ถูกเพาะเลี้ยงย่อยและบำบัดด้วย R. Meyer anthocyanins 100 pg/mL(รูปที่ 1A) เมื่อเปรียบเทียบกับ 23M-mNSC จำนวนนิวโรสเฟียร์ในกลุ่ม 3W-NYC เพิ่มขึ้น และรูปร่างของนิวโรสเฟียร์มีความสม่ำเสมอและกลมมากขึ้น โดยมีเส้นผ่านศูนย์กลางเพิ่มขึ้น 20-50 ไมโครเมตร (รูปที่ 1B{{38}) }ง) นอกจากนี้ neurospheres ที่ได้จาก 23M-mNSC หลังจาก 5 วันมีขนาดเล็กกว่า (20 um) และการค้นพบนี้สอดคล้องกับผลลัพธ์จากการศึกษาก่อนหน้านี้ [19,20] เมื่อบำบัดด้วยอาร์. เมเยอร์ แอนโธไซยานิน การก่อรูปของนิวโรสเฟียร์เพิ่มขึ้นอย่างมีนัยสำคัญทั้งใน 3W-mNSC และ 23M-mNSC (รูปที่ 1E) ความชราภาพมีความสัมพันธ์อย่างใกล้ชิดกับการหยุดวงจรของเซลล์ เทโลเมียร์สั้นลง และการแสดงออกที่เพิ่มขึ้นของยีน pl6mk4a ที่เพิ่มขึ้น 23M-NSC ที่บำบัดด้วย R. Meyer แอนโธไซยานินลดการแสดงออกของยีน p16mk4a อย่างมีนัยสำคัญ จำนวนเซลล์ที่มากขึ้นในระยะ S และเทโลเมียร์ที่ยาวขึ้นเมื่อเปรียบเทียบกับเซลล์ที่ไม่ได้รับการรักษา (รูปที่ 1F-1H) นอกจากนี้ เราทราบดีว่าการแก่ชราช่วยลดการแพร่กระจายของ NSC และลดความสามารถในการสร้างความแตกต่างของ NSC สำหรับการผลิตเซลล์ประสาท [13,21] เมื่อแยกความแตกต่างของ 23M-mNSCs มีจำนวนเพิ่มขึ้นอย่างมีนัยสำคัญในจำนวนของเซลล์ประสาทที่เป็นบวก TuJ1-หลังการบำบัดด้วย R. Meyer anthocyanin (รูปที่ lI-1J) ซึ่งบ่งชี้ว่าการรักษาด้วย R. Meyer anthocyanin ส่งเสริม การแยก NSCs ออกเป็นเซลล์ประสาท ผลลัพธ์เหล่านี้แสดงให้เห็นว่า R. Meyer anthocyanins มีผลในเชิงบวกต่อ NSCs ที่มีอายุมากในหลอดทดลอง

Cistanche สามารถต่อต้านริ้วรอย

การรักษาด้วย R. Meyer anthocyanin ช่วยเพิ่มความสามารถในการเรียนรู้และความจำของหนูที่มีอายุมากขึ้น

ความชราสัมพันธ์กับความเสื่อมทางปัญญา [22,23] ดังนั้นเราจึงประเมินผลของ R. Meyer anthocyanins ต่อความสามารถในการเรียนรู้และความจำของหนู การทดสอบ Morris water maze (MWM) เปิดเผยว่าเมื่อหนู C57BL/6 ตัวเต็มวัย (อายุ 12 เดือน) ได้รับ R. Meyer anthocyanins 100 มก./กก. เป็นเวลา 2 เดือน เวลาเฉลี่ยในการเข้าถึงแพลตฟอร์มลดลงเมื่อเทียบกับกลุ่มควบคุม (รูปที่ 2A). นอกจากนี้เรายังตรวจสอบเวลาที่ใช้ในการเข้าถึงแพลตฟอร์มเป็นครั้งแรก (รูปที่ 2B) กลุ่มที่ได้รับการรักษาด้วย R. Meyer anthocyanin ใช้เวลาน้อยกว่ากลุ่มควบคุมอย่างมีนัยสำคัญ แม้ว่าความเร็วเฉลี่ยจะไม่แตกต่างกันอย่างมีนัยสำคัญระหว่างทั้งสองกลุ่ม (ภาพที่ 2C) ซึ่งบ่งชี้ว่า R. Meyer anthocyanins มีผลเพียงเล็กน้อยต่อความสามารถของมอเตอร์ของหนูเมาส์ นอกจากนี้ ในกลุ่มที่บำบัดแล้ว หนูเมาส์นั้นว่ายในระยะทางที่สั้นกว่าอย่างมีนัยสำคัญก่อนจะไปถึงพื้นที่แท่นเมื่อเปรียบเทียบกับกลุ่มที่ไม่ได้รับการรักษา (รูปที่ 2D) ผลลัพธ์เหล่านี้แสดงให้เห็นว่า R. Meyer anthocyanins สามารถปรับปรุงความสามารถในการรับรู้และความจำเชิงพื้นที่ของหนูที่มีอายุมากขึ้นผักตบชวาทะเลทรายการลดลงของความรู้ความเข้าใจที่เกี่ยวข้องกับอายุเชื่อมโยงกับตัวเลข NSC ที่ลดลง [11, 24] ดังนั้น เราจึงแยกและเพาะ NSCs จากสมองของหนู e (SVZ) หลังจากการบริหาร subventricular z ZOne ในกระเพาะอาหารที่ 100 มก./กก. R. Meyer anthocyanins (รูปที่ 2E) จำนวนที่เป็นผลลัพธ์ของนิวโรสเฟียร์ถูกวัด และมีนิวโรสเฟียร์มากกว่าอย่างมีนัยสำคัญในกลุ่มที่ได้รับการบำบัดด้วยอาร์. เมเยอร์ แอนโธไซยานิน เมื่อเปรียบเทียบกับกลุ่มควบคุม (รูปที่ 2F) ต่อไป เราวิเคราะห์การกระจายขนาด neurosphere.R. นิวโรสเฟียร์ของเมาส์ที่บำบัดด้วยเมเยอร์ แอนโธไซยานิน ส่วนใหญ่อยู่ในช่วงขนาดส่วนบน (เส้นผ่านศูนย์กลาง 50-100 ไมโครเมตร)

รูปที่ 1 Ribes Meyer anthocyanins ช่วยชีวิตฟีโนไทป์ของความชราของเซลล์ต้นกำเนิดจากระบบประสาทของเมาส์ (MNCs) (A) Neurospheres โคลนที่ได้มาจากสมองของหนูอายุ 23-เดือน (23M-NSC) และ 3-สัปดาห์ (3W-NSC) ของหนูเมาส์ และได้รับการบำบัดด้วย R 100 pg/mL ทุก ๆ แอนโธไซยานิน (B) ความแตกต่างของจำนวนนิวโรสเฟียร์ระหว่าง 23M-NSC และ 3W-NSC.(C) รูปร่างของนิวโรสเฟียร์ 3W-NSC มีความสม่ำเสมอมากกว่า โดยมีจำนวนและขนาดเพิ่มขึ้น (20-50 um) เมื่อเทียบกับ 23M-NSC neurospheres . (D. E) การรักษาด้วย R. ทุก ๆ แอนโธไซยานินเพิ่มจำนวนของนิวโรสเฟียร์ที่ได้มาจาก 3W-NSC และ 23M-NSC เมื่อเทียบกับกลุ่มควบคุม (FH) ใน 23M-NSC ที่บำบัดด้วย R. Meyer anthocyanins 100 pg/mL เป็นเวลา 48 ชั่วโมง, การแสดงออกของ p16ink4a mRNA, วัฏจักรของเซลล์ และความยาวเทโลเมียร์สัมพัทธ์ถูกวัด (F) เครื่องหมายความชราของเซลล์ p16ink4a การแสดงออกของ mRNA ที่ตรวจพบโดย qRT-PCR (G) รอบเซลล์ถูกกำหนดหาโดยใช้โฟลว์ไซโตเมทรี (H) การตรวจหา qRT-PCR ของความยาวเทโลเมียร์สัมพัทธ์ (I) การย้อมสีอิมมูโนฟลูออเรสเซนส์ของ TuJ1 และ GFAP ใน 23M-NSC ที่บำบัดด้วย Rวิธีการสกัดฟลาโวนอยด์ pdfเมเยอร์ แอนโธไซยานินและสารควบคุม (J) การหาปริมาณของ (I) ข้อมูลถูกนำเสนอเป็นค่าเฉลี่ย± SD ของการทดลองอิสระสามการทดลอง *ป<0.05,><0.01, and="">< 0.0001="" compared="" with="" untreated="" cells.="" whereas="" control="" neurospheres="" were="" more="" common="" in="" the="" lower="" range="" （20-50="" μm="" diameter）（figure="">

เพื่อตรวจสอบเพิ่มเติมเกี่ยวกับอิทธิพลของการบำบัด R. Meyer anthocyanin ต่อ NSCs และเซลล์ประสาท ในร่างกาย ได้ทำการย้อม immunofluorescence ของ hippocampus และวิเคราะห์เปอร์เซ็นต์ของเซลล์ภูมิคุ้มกันบกพร่อง การใช้ Nestin และ Ki67 ซึ่งเป็นเครื่องหมาย NSC ที่รู้จักกันดี [25, 26] เราพบว่าเซลล์บวก nestin- และ Ki67- เพิ่มขึ้นในบริเวณ hippocampal (รูปที่ 2A, 2B) เสริมของ R. Meyer anthocyanin-treated หนู นอกจากนี้ จำนวนของเซลล์บวก TuJ1-บวก(เครื่องหมายของเซลล์ประสาทที่เจริญเต็มที่) ยังเพิ่มขึ้นในหนูเมาส์เหล่านี้ด้วย (รูปที่ 2C, 2D เสริม)ฟลาโวนอยด์เมื่อรวมกัน ผลลัพธ์เหล่านี้บ่งชี้ว่า 100 มก./กก. R. Meyer anthocyanins สามารถปรับปรุงความจำเชิงพื้นที่และความสามารถทางปัญญาในหนูที่มีอายุมากขึ้นโดยส่งเสริมการเพิ่มจำนวน NSC และเพิ่มจำนวนเซลล์ประสาท

บทความนี้คัดลอกมาจาก www.aging-us.com AGING 2020, Vol. 12, หมายเลข 17

www.aging-us.comวัยชรา 2020 ฉบับที่. 12, หมายเลข 17www.aging-us.comวัยชรา 2020 ฉบับที่. 12, หมายเลข 17