Acteoside: การวิจัยเกี่ยวกับสารต้านอนุมูลอิสระและฤทธิ์ลดความดันโลหิต

ติดต่อ:joanna.jia@wecistanche.com

กิจกรรมต้านอนุมูลอิสระและการลดความดันโลหิตของ Acteoside และแอนะล็อกของมัน

Chao-Hsiang CHEN1,2, Yin-Shiou LIN3, Mei-Yin CHIEN2,4, Wen-Chi HOU5,6,* และ Miao-Lin HU1*

เชิงนามธรรม. แอคทีโอไซด์(พระราชบัญญัติ) ฟีนิลทานอยด์ไกลโคไซด์เป็นสารประกอบออกฤทธิ์ในพืชหลายชนิดและยาสมุนไพรแผนโบราณ ทำหน้าที่ร่วมกับไอโซเมอร์โครงสร้างไอโซแอคทีโอไซด์(Isoact) และแอนะล็อก 6-O-อะซิตี้-แลคเตโอไซด์ (6-O-acetylact) ถูกนำมาใช้ในการศึกษาเพื่อศึกษาสารต้านอนุมูลอิสระ, เอ็นไซม์ต้านการสร้างแองจิโอเทนซิน (ACE) และกิจกรรมการยับยั้งการแตกของเม็ดเลือดใน หลอดแก้วและกิจกรรมลดความดันโลหิตต่อหนูที่มีความดันโลหิตสูงตามธรรมชาติ (SHR)ใน ร่างกาย. เราแสดงให้เห็นว่าพระราชบัญญัติ Isoact และ 6-O-อะซิติแลคกำจัด 1,1-ไดฟีนิล-2-พิคริล-ไฮดราซิล เรดิคัลอย่างมีประสิทธิภาพ (ด้วย IC50 ที่ 11.4, 9.48 และ 9.55 ไมโครโมลาร์ ตามลำดับ) และซูเปอร์ออกไซด์ เรดิคัล (ที่มี IC50 ที่ 66.0, 38.5 , และ 39.1 ไมโครโมลาร์ ตามลำดับ) อย่างไอโซแอคและ 6-O-acetylact มีกิจกรรมการกำจัดอนุมูลที่คล้ายกัน มีเพียง Act และ Isoact เท่านั้นที่ใช้สำหรับการศึกษาต่อไปนี้ ทั้ง Act และ Isoact ยับยั้งการทำงานของแซนทีนออกซิเดสด้วย IC50 ที่ 53.3 และ 62.2 ไมโครโมลาร์ตามลำดับ ทั้ง Act และ Isoact ยังยับยั้งการทำงานของ ACE อย่างมีนัยสำคัญและการแตกของเม็ดเลือดแดงที่เกิดจาก 2,2'-azo-bis(2-amidinopropane)dihydrochloride แต่ผลของ Act นั้นแข็งแกร่งกว่า Isoact จากนั้นเราให้ยา Act หรือ Isoact (10 มก./กก. ของน้ำหนักตัว) แบบรับประทานครั้งเดียวกับ SHR และวัดการเปลี่ยนแปลงของความดันโลหิตซิสโตลิก (SBP) และความดันโลหิตช่วงไดแอสโตลิก (DBP) ตลอด 24 ชั่วโมง Act แต่ไม่ใช่ Isoact แสดงฤทธิ์ลดความดันโลหิตในการลด SBP และ DBP ผลการวิจัยชี้ให้เห็นถึงประโยชน์ที่เป็นไปได้ของ พ.ร.บ. ในฐานะผลิตภัณฑ์อาหารเพื่อสุขภาพสำหรับสารต้านอนุมูลอิสระการป้องกันและการควบคุมความดันโลหิต

คำสำคัญ: แอคทีโอไซด์; กิจกรรมลดความดันโลหิต เอ็นไซม์แปลงแองจิโอเทนซิน (ACE); สารต้านอนุมูลอิสระ; ภาวะเม็ดเลือดแดงแตก

สารออกฤทธิ์แอกทีโอไซด์ในซิสแทนเช

การแนะนำ

แอคทีโอไซด์แยกได้จากดอกSyringa วัล- garis(Birkofer et al., 1968) และร่วมกับโครงสร้างไอโซเมอร์ของไอโซแอคทีโอไซด์(Isoact) และอนุพันธ์ของ6-O-อะซิติแลคติโอไซด์(6-O-acetylact) พบในพืชและยาสมุนไพรหลายชนิด เช่นLigstrum purpurascens(วงศ์ et al., 2001),Callicarpa ไดโคโทมา(Koo et al., 2006; Lee et al., 2006),Cistanche ทะเลทรายและBoschniakia rossica(Wu et al., 2006),Scrophularia หนิงโปนิส(Huang et al., 2008),เรห์มานเนีย กลูติโนซ่า(Li et al., 2006). มีรายงานว่าการกระทำดังกล่าวแสดงฤทธิ์ต้านการเกิดมะเร็งในเซลล์มะเร็งผิวหนัง B16 ในแบบจำลองหนูเมาส์ C57BL/6 (Ohno et al., 2002) พระราชบัญญัติ Isoact และ 6-Oเมื่อเร็ว ๆ นี้ -acetylact แสดงให้เห็นว่ายับยั้ง IL-1 -การแสดงออกที่กระตุ้นของ CAM-1 และ CAM ของหลอดเลือด-1 ของ IL ในเซลล์บุผนังหลอดเลือดที่สะดือของมนุษย์ (Chen et al., 2009) พระราชบัญญัติยังช่วยปกป้องเซลล์บุผนังหลอดเลือดปอดในปอดจากความเครียดออกซิเดชันที่เกิดจากไฮดรอกซิล (Chiou et al., 2004) และยับยั้งการผลิตไนตริกออกไซด์และ TNF ผ่านการปิดกั้นการกระตุ้น AP-1 ในมาโครฟาจที่กระตุ้นด้วยไลโปโพลีแซคคาไรด์ (Rao et al. , 2552). Act และ Isoact จัดแสดงกิจกรรมป้องกันระบบประสาทใน หลอดแก้ว(คูและคณะ, 2005). Koo และคณะ (2006) รายงานว่าพระราชบัญญัติและ aglycones ของมันกำจัด 1,1-diphenyl-2-picryl-hydrazyl (DPPH) และไนตริกออกไซด์ได้อย่างมีประสิทธิภาพใน หลอดแก้ว. อย่างไรก็ตาม มีการศึกษาเพียงไม่กี่ชิ้นที่เปรียบเทียบใน หลอดแก้ว สารต้านอนุมูลอิสระกิจกรรมของพระราชบัญญัติและสารประกอบที่เกี่ยวข้องกับโครงสร้าง เช่น Isoact และ 6-O- อะซิติแลค

เภสัชวิทยาหลายชนิดถูกนำมาใช้ในการรักษาความดันโลหิตสูง (Mark and Davis, 2000) ยาลดความดันโลหิตประเภทหนึ่งที่เรียกว่า angiotensin I converting enzyme (ACE) inhibitors (เช่น peptidase inhibitors) มีอุบัติการณ์ผลข้างเคียงที่ไม่พึงประสงค์ต่ำ และเป็นยากลุ่มที่แนะนำให้ใช้ยาลดความดันโลหิต

ตัวแทนในการรักษาผู้ป่วยโรครองพร้อมกัน (Fotherby และ Panayiotou, 1999) ACE (peptidyl-dipeptide hydrolase EC 3.4.15.1) เป็น exopeptidase ที่ปลดปล่อยไดเปปไทด์ซึ่งกำจัดไดเปปไทด์ออกจากปลาย C ของ angiotensin I เพื่อสร้าง angiotensin II ซึ่งเป็นสารประกอบที่มีความดันโลหิตสูงมาก หลายสารต้านอนุมูลอิสระเปปไทด์ (กลูตาไธโอนลดลงและเปปไทด์ที่เกี่ยวข้องกับไอโอดีน) แสดงกิจกรรมการยับยั้ง ACE (Hou et al., 2003) ตัวยับยั้ง ACE ที่ออกฤทธิ์ทางปากตัวแรกที่มีอยู่ทางคลินิก captopril ได้รับการพัฒนาสำหรับการรักษาความดันโลหิตสูง (Ondetti et al., 1977; Borer, 2007) มีรายงานว่าการกระทำดังกล่าวก่อให้เกิดผลการผ่อนคลายที่อาศัยไนตริกออกไซด์เป็นสื่อกลางต่อวงแหวนหลอดเลือดเอออร์ติกที่บุผนังหลอดเลือดที่บุผนังหลอดเลือดบุผนังบุผนังหลอดเลือดที่ยังไม่บุบสลายของหนูแรท SD (Wong et al., 2001) อาห์หมัดและคณะ (1995) ได้รายงานว่าพระราชบัญญัติก่อให้เกิดการลดลงของความดันโลหิตซิสโตลิก (SBP) และความดันโลหิตไดแอสโตลิก (DBP) ขึ้นอยู่กับขนาดยาหลังจากการฉีดเข้าเส้นเลือดดำในหนู Wistar ที่ดมยาสลบตามเกณฑ์ปกติ อย่างไรก็ตาม ยังไม่มีความชัดเจนว่าพระราชบัญญัติที่ให้ทางปากและ/หรือไอโซเมอร์ที่เกี่ยวข้องกันนั้นมีฤทธิ์ลดความดันโลหิตหรือไม่ใน ร่างกาย. ในการศึกษานี้ เราได้ตรวจสอบใน หลอดแก้ว สารต้านอนุมูลอิสระความสามารถและกิจกรรมการยับยั้ง ACE เช่นเดียวกับใน ร่างกายกิจกรรมลดความดันโลหิตของ Act, Isoact และ/หรือ 6-O-acetylact โดยใช้หนูที่มีความดันโลหิตสูงที่เกิดขึ้นเอง (SHRs) การศึกษาเหล่านี้คาดว่าจะให้ข้อมูลที่เป็นประโยชน์สำหรับการพัฒนาพระราชบัญญัติเป็นผลิตภัณฑ์อาหารเพื่อสุขภาพ

วัสดุและวิธีการ

วัสดุ

2,2'-azo-bis(2-amidinopropane)dihydrochloride (AAPH), ACE (I unit, ปอดของกระต่าย), บิวทิเลตไฮดรอกซีโทลูอีน (BHT), DPPH, N-(3-[{{7 }}furyl]acryloyl)-Phe-Gly- Gly (FAPGG), NADH, phenazine methosulfate (PMS), xanthine และ xanthine oxidase ซื้อมาจาก Sigma Chemical Co. (St. Louis, MO, USA) Captopril ซื้อมาจาก Calbiochem Co. (CA, USA) พระราชบัญญัติ Isoact และ 6-O-acetylact (รูปที่ 1) ถูกซื้อจาก Equal Corp. (ความบริสุทธิ์ > 98 เปอร์เซ็นต์ เซี่ยงไฮ้ ประเทศจีน) สารเคมีและรีเอเจนต์อื่นๆ มาจาก Sigma Chemical Co. (St. Louis, MO, USA)

การกวาดล้าง กิจกรรม ของ กระทำ, ไอโซแอค และ 6-O- acetylact ขัดต่อ dPPH อนุมูล โดย สเปกโตรโฟโตเมตรี

ปริมาตร (0.3 มล.) ของ Act, Isoact และ 6-O-อะซิติแลค (ความเข้มข้นสุดท้ายคือ 1.56 ถึง 50 ไมโครโมลาร์), BHT และกรดแอสคอร์บิก (ความเข้มข้นสุดท้ายคือ 2.4 ถึง 60 ไมโครโมลาร์) ถูกเติมลงใน 0.1 มิลลิลิตรของบัฟเฟอร์ Tris-HCl 1 โมลาร์ (pH 7.9 ) จากนั้นผสมกับ 0.6 มิลลิลิตรของ DPPH 100 ไมโครโมลาร์ในเมทานอลจนถึงความเข้มข้นสุดท้ายที่ 60 ไมโครโมลาร์ เป็นเวลา 20 นาทีภายใต้การป้องกันแสงที่อุณหภูมิห้อง (Liu et al., 2004; Lin et al., 2008) วัดการลดลงของการดูดกลืนแสงที่ 517 นาโนเมตรและแสดงเป็น ΔA517 นาโนเมตร น้ำปราศจากไอออนถูกใช้เป็นการทดลองเปล่า กิจกรรมการกำจัดของอนุมูล DPPH ( เปอร์เซ็นต์ ) คำนวณด้วยสมการ: (ΔA517blank − ΔA517sample) ÷ ΔA517blank × 100 IC50 หมายถึงความเข้มข้นของการยับยั้งครึ่งหนึ่ง

ยับยั้ง กิจกรรม ของ กระทำ และ ไอโซแอค ขัดต่อ แซนทีน ออกซิเดส

กิจกรรมของแซนทีนออกซิเดสถูกวัดโดยการกำหนดหาการก่อรูปกรดยูริกที่ 295 นาโนเมตรโดยใช้แซนทีนเป็นสารตั้งต้น (Kalckar, 1947) ปริมาณ Act และ Isoact ที่แตกต่างกัน (ความเข้มข้นสุดท้ายคือ 25, 50 และ 75 µM) ถูกผสมล่วงหน้าด้วย 50 ไมโครลิตรของ 1 mU/mL xanthine oxidase ที่ 4 องศาเป็นเวลา 1 ชั่วโมง และจากนั้น 300 ไมโครลิตรของ 1 mM xanthine ถูกเพิ่มเข้ามา การเปลี่ยนแปลงการดูดกลืนแสงที่ 295 นาโนเมตร ถูกบันทึกในระยะเวลา 2 นาที และแสดงเป็น ΔA295 นาโนเมตร/ นาที กิจกรรมการยับยั้งแซนทีนออกซิเดส ( เปอร์เซ็นต์ ) คำนวณได้ดังนี้: (ΔA295 nm/min black − ΔA295 nm/ min sample) ÷ ΔA295 nm/min black × 100 ใช้น้ำปราศจากไอออนแทนสารละลายตัวอย่างเป็นการทดลองเปล่า IC50 ย่อมาจากความเข้มข้นของการยับยั้งครึ่งหนึ่ง

การกวาดล้าง กิจกรรม ของ กระทำ, ไอโซแอค และ 6-O- acetylact ขัดต่อ ซูเปอร์ออกไซด์ อนุมูล โดย สเปกโตรโฟโตเมตรี

ซูเปอร์ออกไซด์เรดิคัลถูกสร้างขึ้นโดยระบบ PMS-NA- DH (Liu et al., 2004; Lin et al., 2008) ตัวอย่างทั้งหมด 0.2 มล. ที่มีปริมาณ Act, Isoact และ 6- ต่างกันO-อะซีติเลต (ความเข้มข้นสุดท้ายคือ 15.6, 31.3, 62.5, 125 และ 250 ไมโครโมลาร์) ถูกเติมตามลำดับไปยัง 0.2 มล. ที่ 630 ไมโครโมลาร์ ไนโตรบลู เตตทราโซเลียม, 0.2 มล. 33 µM PMS และ 0.2 มล. NADH 156 µM ในบัฟเฟอร์ฟอสเฟต 100 มิลลิโมลาร์ (pH 7.4) ใช้น้ำปราศจากไอออนแทนสารละลายตัวอย่างในการทดลองเปล่า กรดแอสคอร์บิก (ความเข้มข้นสุดท้ายคือ 6, 9, 12 และ 24 ไมโครโมลาร์) ถูกใช้เป็นกลุ่มควบคุมเชิงบวก การเปลี่ยนแปลงการดูดกลืนแสงที่ 560 นาโนเมตรถูกบันทึกในช่วง 2 นาทีและแสดงเป็น ΔA560 นาโนเมตร/นาที กิจกรรมการขจัดของอนุมูลซูเปอร์ออกไซด์ ( เปอร์เซ็นต์ ) คำนวณได้ดังนี้: (ΔA560 nm/min black − ΔA560 nm/min sample) ÷ ΔA560 nm/min black × 100 IC50 หมายถึงความเข้มข้นของการยับยั้งครึ่งหนึ่ง

การกำหนด ของ Ace ตัวยับยั้ง กิจกรรม ของ กระทำ และ ไอโซแอค โดย HPLC

แต่ละ 50 µL ของ Act (0.2, 0.4, 0.5 และ 2.0 µmole) และ Isoact ({{ 11}}.1, 0.2, 0.5, 1.0, และ 2.0 ไมโครโมล) ถูกผสมล่วงหน้าด้วย 15 ไมโครลิตรของ 1U/mL ACE เป็นเวลา 5 นาที และจากนั้น 200 µL ของ 0.5 mM FAPGG ถูกเติมและทำปฏิกิริยาที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 10 นาที (Anzenbacherova et al., 2001) เมทานอล 800 ไมโครลิตรถูกเติมเพื่อหยุดปฏิกิริยา การทดลองเปล่าคือ FAPGG เท่านั้น ในการทดลองควบคุม ACE ทำปฏิกิริยากับ FAPGG ภายใต้เงื่อนไขเดียวกัน การแยกโครมาโตกราฟีของ FAPGG และ FAP ดำเนินการบนระบบโครมาโตกราฟีของฮิตาชิ (ญี่ปุ่น) ด้วยลูป 10 ไมโครลิตร การวิเคราะห์ HPLC ถูกดำเนินการบนคอลัมน์ Biosil Aqua-ODS-W 5 µ (Biotic Chemical Co., Ltd., ไต้หวัน, 250 × 4.6 มม. id), ขนาดอนุภาค 5 µm ของผสมที่ทำปฏิกิริยาถูกแยกออกเป็นไอโซเครตด้วยเฟสเคลื่อนที่ซึ่งประกอบด้วย 0.02 โมลาร์โนนิลามีน (ปรับ pH 2.4 ด้วยกรดฟอสฟอริก) และอะซิโตไนไตรล์ในอัตราส่วน 67.5:32.5 (V/V) (Anzenbacherova et al., 2001) อัตราการไหลคือ 1 มล./นาที; ปริมาตรของการฉีดคือ 10 ไมโครลิตร; เครื่องตรวจจับถูกตั้งไว้ที่ 345 นาโนเมตร การยับยั้ง ACE ( เปอร์เซ็นต์ ) ของ Act และ Isoact คำนวณได้ดังนี้: [(พื้นที่ของ FAPGGblank − พื้นที่ของการควบคุม FAPGG) − (พื้นที่ของ FAPGGblank − พื้นที่ของตัวอย่าง FAPGG) ÷ (พื้นที่ของ FAPGGblank − พื้นที่ของการควบคุม FAPGG) × 100

ยับยั้ง กิจกรรม ของ กระทำ และ ไอโซแอค ขัดต่อ AAPH เป็นสื่อกลาง ภาวะเม็ดเลือดแดงแตก

การเกิดออกซิเดชันของลูกโซ่อนุมูลอิสระของเซลล์เม็ดเลือดแดงของหนู (RBC) ผ่านการสลายของเม็ดเลือดแดงโดย AAPH (Miki et al., 1987) วางเลือดหนูในหลอดเฮปาริไนซ์และหมุนเหวี่ยงที่ 1,000 ×gเป็นเวลา 10 นาที หลังจากล้างด้วย 0.15 M NaCl สามครั้ง จะได้ RBC ที่บรรจุแล้วโดยการปั่นเหวี่ยงที่ 1,000 ×gเป็นเวลา 10 นาที ปริมาณของ Act และ Isoact ต่างกัน (ความเข้มข้นสุดท้ายคือ 2, 5 และ 10 µM) ถูกผสม 25 ไมโครลิตรของสารแขวนลอย RBC 20 เปอร์เซ็นต์ (V/V, ใน 10 mM PBS) และ 25 ไมโครลิตรของสารละลาย AAPH 500 mM ที่ 37 องศาสำหรับ 0 , 1, 1.5, 2, 2.5, 3 และ 3.5 ชม. โดยเขย่าเบาๆ ส่วนผสมแต่ละอย่างถูกหมุนเหวี่ยงที่ 1,000 ×gเป็นเวลา 10 นาที และวัดส่วนเหนือตะกอนที่ 536 นาโนเมตร น้ำปราศจากไอออนถูกใช้แทนสารละลาย AAPH หรือสารละลายตัวอย่าง ตามลำดับ เป็นกลุ่มเปล่าหรือเป็นกลุ่มควบคุม การยับยั้งการแตกของเม็ดเลือด ( เปอร์เซ็นต์ ) ของ Act และ Isoact ที่ 3 ชั่วโมงหรือ 3.5 ชั่วโมงคำนวณได้ดังนี้: (ΔA536 nmcontrol − ΔA536 nmsample) ÷ ΔA536 nmcontrol × 100

ยาลดความดันโลหิต เอฟเฟกต์ ของ กระทำ และ ไอโซแอค บน SHr

ผลของ Act, Isoact และ captopril ที่ให้ทางปากโดยการให้อาหารทางสายยาง (2.0 × 80 มม.) ต่อ SBP ที่ลดลงและ DBP ที่ลดลงถูกกำหนดตามวิธีการของรายงานก่อนหน้านี้ (Lin และคณะ, 2006; Lin et al., 2008; Han et al., 2011) ขั้นตอนการทดลองกับสัตว์ทั้งหมดเป็นไปตามแนวทางที่เผยแพร่ (National Science Council, 1994) SHRs เพศผู้ (อายุ 8 สัปดาห์, ศูนย์สัตว์ทดลองแห่งชาติ, ไทเป) ถูกจัดเก็บไว้ในกรงเหล็กที่ 24 องศาโดยมีวัฏจักรแสง-มืด 12-ชม. และสามารถเข้าถึงหนู/หนูเชามาตรฐานได้ฟรี ( Prolab RMH2500, 5P14 Diet, PMI Nutrition International, Brentwood, MO) และน้ำ SHRs ถูกสุ่มแบ่งออกเป็นกลุ่มควบคุมและการรักษาตัวอย่างสำหรับการกำหนด SBP และ DBP (หนูหกตัวต่อกลุ่ม) สำหรับการทดลองลดความดันโลหิตระยะสั้น 0.5 มล. ของพระราชบัญญัติ 10 มก. หรือ Iso-act/กก. ของ SHR หรือแคปโตพริล 5 มก./กก. ของ SHR รับประทานครั้งเดียว และวัดความดันโลหิตหางที่ 2, 4, 6 และ 24 ชั่วโมงหลังจากการบริหารช่องปากเพียงครั้งเดียว น้ำกลั่น 0.5 มล. ถูกใช้สำหรับการทดลองเปล่า เครื่องวัดความดันโลหิตทางอ้อม (BP-98A, Softron Co. Ltd. โตเกียว ประเทศญี่ปุ่น) ถูกใช้เพื่อวัด SBP และ DBP สี่ครั้งในแต่ละครั้งสำหรับการรักษาแต่ละครั้ง

ข้อมูล การวิเคราะห์

ค่าจะแสดงเป็นค่าเฉลี่ย ± SD และวิเคราะห์โดยใช้ ANOVA ทางเดียว ตามด้วยการทดสอบ post hoc Tukey สำหรับการเปรียบเทียบค่าเฉลี่ยหลายรายการ นักเรียนt- ทำการทดสอบเมื่อเปรียบเทียบข้อมูลเพียงสองกลุ่ม (เช่น ระหว่าง Act และ Isoact ที่ความเข้มข้นเท่ากัน) ค่า p < 0.05="" ถือว่ามีนัยสำคัญทางสถิติ="" การวิเคราะห์ทางสถิติดำเนินการโดยใช้="" spss="" สำหรับ="" windows="" เวอร์ชัน="" 10="" (spss,="" inc.,="" chicago,="" il,="">

แอคทีโอไซด์ใน cistanche เพื่อเพิ่มหน่วยความจำ

ผลลัพธ์

การกวาดล้าง กิจกรรม ของ PPH และ ซูเปอร์ออกไซด์ อนุมูล

พระราชบัญญัติ Isoact และ 6-O-อะซิติแลคแสดงกิจกรรมการกำจัด DPPH ที่ขึ้นกับขนาดยาที่ pH 7.9 (รูปที่ 2) ค่า IC50 คือ 11.4, 9.48 และ 9.55 µM ตามลำดับสำหรับ Act, Isoact และ 6-O-อะซิติแลค ค่า IC50 ของการควบคุมเชิงบวกของกรดแอสคอร์บิกและ BHT เท่ากับ 13.1 และ 18.5 ไมโครโมลาร์ตามลำดับ

ยับยั้ง ของ แซนทีน ออกซิเดส กิจกรรม

Act และ Isoact แสดงการยับยั้งที่ขึ้นกับขนาดยาของ xanthine oxidase (รูปที่ 3) IC50 ถูกคำนวณเป็น 53.3 และ 62.2 ไมโครโมลาร์ ตามลำดับ สำหรับ Act และ Isoact

ยับยั้ง ของ ซูเปอร์ออกไซด์ dismutase กิจกรรม

เนื่องจากทั้ง Act และ Isoact ยับยั้งการทำงานของแซนทีนออกซิเดส เราจึงใช้ระบบ PMS-NADH เพื่อสร้างอนุมูลซุปเปอร์ออกไซด์ (Liu et al., 2004; Lin et al., 2008) กระทำ,

ไอโซแอค และ 6-O-อะซิติแลคแสดงฤทธิ์การขับอนุมูลซุปเปอร์ออกไซด์ที่ขึ้นกับขนาดยา (รูปที่ 4) ค่า IC50 คือ 66.0, 38.5 และ 39.1 µM ตามลำดับสำหรับ Act, Isoact และ 6-O-อะซิติแลค ค่า IC50 ของกลุ่มควบคุมเชิงบวกของกรดแอสคอร์บิกคือ 9.0 ไมโครโมลาร์ จากผลลัพธ์ของรูปที่ 2 และ 4 เห็นได้ชัดว่า Isoact และ 6-O-อะซิติเลตมีฤทธิ์ในการขจัดอนุมูลอิสระที่ต้าน DPPH และซูเปอร์ออกไซด์ เรดิคัล ดังนั้นเฉพาะ Act และ Isoact เท่านั้นที่ถูกเลือกสำหรับการคัดกรองกิจกรรมทางชีวภาพเพิ่มเติม

Ace ตัวยับยั้ง กิจกรรม ของ กระทำ และ ไอโซแอค

ในการทดสอบเบื้องต้น เราพบว่า Act และ Isoact ขัดขวางการดูดกลืนแสงของสารตั้งต้น ACE FAPGG และ FAP ของผลิตภัณฑ์ที่ถูกไฮโดรไลซ์ของมันที่ 345 นาโนเมตร ซึ่งใช้สำหรับการทดสอบด้วยสเปกโตรโฟโตเมตริกอย่างต่อเนื่อง (Holmquist et al., 1979) ดังนั้น การแยกร่วมกับการตรวจจับ Act หรือ Isoact และ FAPGG โดย HPLC จึงถูกใช้เพื่อตรวจสอบกิจกรรมการยับยั้ง ACE รูปที่ 5A ถึงรูปที่ 5D คือโครมาโตแกรมของ HPLC โดยทั่วไปจากของผสมปฏิกิริยา 10 µl ของการทดสอบเปล่า (เฉพาะ FAPGG, รูปที่ 5A); การทดสอบการควบคุม (ACE ทำซ้ำกับ FAPGG เพื่อสร้าง FAP, รูปที่ 5B); 0.5 µmole ofAct (312.5 µg), ACE และ FAPGG (รูปที่ 5C); และ 0.5 ไมโครโมลของไอโซแอค (312.5 ไมโครกรัม), ACE และ FAPGG (รูปที่ 5D) พื้นที่ของ FAPGG ในรูปที่ 5B นั้นต่ำที่สุดและในรูปที่ 5A เป็นโครมาโตแกรมทั่วไปสูงสุดสี่โครมาโตแกรม พื้นที่ของ FAPGG ในรูปที่ 5C และ 5D ขึ้นอยู่กับกิจกรรมการยับยั้ง ACE ที่มีความเข้มข้นต่างกันของ Act และ Isoact การยับยั้ง ACE ที่คำนวณได้ของ Act และ Isoact แสดงไว้ในรูปที่ 5E การกระทำดังกล่าวแสดงฤทธิ์การยับยั้ง ACE ที่สูงกว่า Isoact และ IC50 ของสารแรกถูกคำนวณเป็น 472 ไมโครโมลาร์ตามพื้นที่ในโครมาโตแกรมของ HPLC

ยับยั้ง กิจกรรม ของ กระทำ และ ไอโซแอค ขัดต่อ AAPH เป็นสื่อกลาง ภาวะเม็ดเลือดแดงแตก

กิจกรรมการยับยั้งของ Act และ Isoact ต่อภาวะเม็ดเลือดแดงแตกที่เป็นสื่อกลาง AAPH ที่ความเข้มข้น 2, 5 และ 10 µM ถูกประเมินตลอด 3.5 ชั่วโมง (Miki et al., 1987) ผลลัพธ์ของรูปที่ 6A แสดงให้เห็นว่าการแตกของเม็ดเลือดแดงในหนู RBC เพิ่มขึ้นอย่างมาก (แสดงเป็น ΔA536 nm) หลังจากปฏิกิริยา 3-h หรือ 35-h ต่อหน้าอนุมูล AAPH (ในฐานะกลุ่มควบคุม สัญลักษณ์วัฏจักรสีขาว ). มีการสังเกตการแตกของเม็ดเลือดแดงเพียงเล็กน้อยหรือไม่มีเลยในกรณีที่ไม่มีอนุมูล AAPH ระหว่างปฏิกิริยา 3.5-ชม. (เป็นกลุ่มว่าง สัญลักษณ์วัฏจักรสีดำ) ดังนั้นการยับยั้งการเกิดเม็ดเลือดของ Act และ Isoact ที่ 3 ชั่วโมงหรือ 3.5 ชั่วโมงจึงคำนวณได้ดังนี้: (ΔA536 nmcontrol − ΔA536 nmsample) ÷ ΔA536 nmcontrol × 100 รูปที่ 6B

แสดงว่าทั้ง Act และ Isoact ที่ 2, 5 และ 10 µM แสดงการยับยั้งที่ขึ้นกับความเข้มข้นในการสลายของเม็ดเลือดแดงที่เกิดจาก AAPH โดยมีผลการยับยั้งของ Act แข็งแกร่งกว่า Isoact อย่างมีนัยสำคัญที่ความเข้มข้นแต่ละครั้งที่ใช้

ยาลดความดันโลหิต เอฟเฟกต์ ของ กระทำ และ ไอโซแอค บน SHr

SHRs ได้รับยา Act และ Isoact (10 มก./กก. SHR) ทางปากเพียงครั้งเดียว และการเปลี่ยนแปลงใน SBP และ DBP ถูกบันทึกไว้ตลอด 24 ชั่วโมง ก่อนหน้านี้เรารายงานว่าความดันโลหิต (SBP และ DBP) ของ SHR เปลี่ยนแปลงได้ในช่วง 24-h (Lin et al., 2006; Han et al., 2011) ดังนั้น การเปรียบเทียบในช่วงเวลาที่แน่นอน (เช่น 2, 4, 6, 8 และ 24 ชั่วโมง) ระหว่างตัวอย่างเปล่ากับตัวอย่าง แทนที่จะใช้ก่อนและหลังการให้ยารับประทานเอง พบว่า Act แต่ไม่ใช่ Isoact ลด SBP และ DBP ของ SHR ได้อย่างมีประสิทธิภาพเมื่อเทียบกับกลุ่มเปล่า (น้ำกลั่น) SBP ลดลงอย่างมีนัยสำคัญในกลุ่ม Act ที่ 2, 4 และ 6 ชั่วโมง โดย 18.8, 16.5 และ 14.9 mmHg ตามลำดับ แต่การลด SBP (3.3 mmHg) ที่ 24 ชั่วโมงหลังการรักษา Act ไม่เป็น

มีนัยสำคัญทางศิลปะ (รูปที่ 7A) ดังที่แสดงในรูปที่ 7B DBP ลดลงในกลุ่ม Act ที่ 2, 4 และ 6 ชั่วโมง (โดย 8.5, 7.6 และ 12.0 mmHg ตามลำดับ) แม้ว่าผลลัพธ์ที่ได้รับในเวลา 6 ชั่วโมงจะมีนัยสำคัญทางสถิติเท่านั้น (P< 0.05)="" มีข้อสังเกตว่า="" act="" และ="" captopril="" (ในฐานะกลุ่มควบคุมเชิงบวก)="" มีผลคล้ายกันต่อ="" sbp="" ในระยะแรก="" (2,="" 4="" และ="" 6="" ชั่วโมง)="">

แอคทีโอไซด์ใน cistanche มีผลดีต่อสารต้านอนุมูลอิสระ

อภิปรายผล

ออกซิเจนชนิดแอคทีฟและปฏิกิริยาที่เกิดจากอนุมูลอิสระเกี่ยวข้องกับกระบวนการเสื่อมหรือกระบวนการทางพยาธิวิทยา เช่น การแก่ชรา มะเร็ง โรคหลอดเลือดหัวใจ และโรคอัลไซเมอร์ (Ames, 1983; Gey, 1990; Smith et al., 1996) รายงานหลายฉบับมุ่งเน้นไปที่การคัดกรองสารต้านอนุมูลอิสระกิจกรรมจากทรัพยากรธรรมชาติ ในการศึกษานี้ ก่อนอื่นเราเปรียบเทียบสารต้านอนุมูลอิสระกิจกรรมของ Act, Isoact และ 6-O-อะซิติเลต Act และ Isoact เป็นไอโซเมอร์เชิงโครงสร้างซึ่งส่วนประกอบของมอยอิตีกรดคาเฟอีนถูกพันธะกับกลุ่มไฮดรอกซิล C-4 ของกลูโคสในอดีตและกับกลุ่มไฮดรอกซิล C-6 ของกลูโคสในระยะหลัง ในขณะที่องค์ประกอบของแรมโนสและ 3',4'- ไดไฮดรอกซีฟีนิลเอธานอลตามลำดับถูกผูกมัดกับกลุ่มไฮดรอกซิล C-3 และ C-1 ของมอยอิตีกลูโคสในพระราชบัญญัติเดียวกันและโมเลกุลไอโซแอค { {8}}O-acetylact เป็นอนุพันธ์ของ Act ซึ่งกรดอะซิติกถูกยึดติดกับกลุ่มไฮดรอกซิล C-6 ในกลุ่มกลูโคส (รูปที่ 1) Koo และคณะ (2006) รายงานว่า Act และ aglycones ของมันแสดงกิจกรรมการกำจัด DPPH และลำดับของกิจกรรมเหล่านี้ (แสดงเป็น IC50) คือ Act (1.28 µM) > กรด caffeic (2.22 µM) > 3',4'-dihydroxy phenyl ethanol ( 7.72 ไมโครโมลาร์) > -โทโคฟีรอล (15.1 ไมโครโมลาร์) ในรายงานปัจจุบัน (รูปที่ 2) ลำดับของกิจกรรมการกำจัด DPPH (แสดงเป็น IC50) คือ 6-O-อะซิติเลต (9.55 µM) ≈ Isoact (9.48 µM) > พระราชบัญญัติ (11.4 µM) ค่าเหล่านี้เทียบได้กับหรือดีกว่าของกรดแอสคอร์บิก (IC50 เท่ากับ 13.1 ไมโครโมลาร์) และ BHT (IC50 ที่ 18.5 ไมโครโมลาร์) สำหรับการขจัดอนุมูล DPPH IC50 ของ Act ที่สูงขึ้นในรายงานปัจจุบันอาจมาจากความเข้มข้นสุดท้ายที่ 60 µM DPPH แทนที่จะเป็น 30 µM ที่ใช้ Koo et al รายงาน (2549) เนื่องจากการทดสอบระดับรากของ DPPH เป็นของปฏิกิริยาการถ่ายเทอิเล็กตรอน (Huang et al., 2005) จึงสันนิษฐานว่าอนุพันธ์ในกลุ่มไฮดรอกซิล C-6 ของมอยอิตีกลูโคส เช่น หมู่อะเซทิลใน {{21 }}O- อะซิติเลตและมอยอิตีของกรดคาเฟอีนใน Isoact อาจจัดให้มีปฏิกิริยาการถ่ายเทอิเล็กตรอนได้ง่ายกว่าปฏิกิริยาของหมู่ไฮดรอกซิลอิสระ C-6 ในกลุ่มกลูโคสของ Act สำหรับการสอบวิเคราะห์การกำจัด DPPH

พระราชบัญญัติ 6-O-acetylate และ Isoact ได้รับรายงานว่ามีฤทธิ์ในการขับซูเปอร์ออกไซด์ ในหลอดทดลอง โดยใช้ระบบ xanthine/xanthine oxidase เพื่อสร้าง superoxide radicals (Wang et al., 1996; Gao et al., 1999) อย่างไรก็ตาม การศึกษาในปัจจุบันของเราระบุว่าพระราชบัญญัติแสดงฤทธิ์ยับยั้งแซนทีนออกซิเดส (รูปที่ 3) ดังนั้น ซูเปอร์ออกไซด์เรดิคัลจึงถูกสร้างขึ้นโดยใช้ระบบ PMS-NADH ในรายงานปัจจุบัน (Liu et al., 2004; Lin et al., 2008) แทนระบบ xanthine/xanthine oxidase Wang et al. ใช้ระบบ xanthine/xanthine oxidase เพื่อสร้าง superoxide radicals (1996) ได้รับ IC50 ของพระราชบัญญัติ 63 µM ที่ต่อต้านอนุมูลซูเปอร์ออกไซด์ และค่านี้ใกล้เคียงกับค่าสำหรับการยับยั้งการออกฤทธิ์ของแซนทีนออกซิเดสโดยพระราชบัญญัติ ตามที่รายงานในการศึกษานี้ (53.3 µM) มีรายงานว่ากรดคาเฟอีนมีฤทธิ์ยับยั้งแซนทีนออกซิเดส (Chiang et al., 1994) อาจมีการคาดเดาว่ากิจกรรมการกำจัดซูเปอร์ออกไซด์โดยใช้ระบบการสร้างแซนทีน/แซนทีนออกซิเดสของไฟโตเคมิคอลบางชนิดที่มีโครงสร้างที่เกี่ยวข้องกับกรดคาเฟอีน เช่น Act หรือ Isoact (Wang et al., 1996; Gao et al., 1999) อาจมี มีส่วนในการยับยั้ง xanthine oxidase อย่างน้อยบางส่วน ที่น่าสนใจคือวังและคณะ (1996) พบว่า Act (0.5 และ 2.5 mM) ไม่ยับยั้งการทำงานของ xanthine oxidase ซึ่งกำหนดโดยขั้วไฟฟ้าออกซิเจนสำหรับการใช้ออกซิเจนในระหว่างการออกซิเดชันของแซนทีน ดังนั้น จึงเป็นสิ่งสำคัญที่ต้องจำไว้ว่าวิธีการต่างๆ สำหรับการทดสอบกิจกรรมการกำจัดสารซูเปอร์ออกไซด์อาจสร้างข้อมูลที่ขัดแย้งกัน

หลี่และคณะ (1993) ได้รายงานถึงขอบเขตที่คล้ายคลึงกันของการยับยั้ง Act และ Isoact กับ AAPH-mediated hemolysis ใน RBC ของหนูเมาส์ อย่างไรก็ตาม เราแสดงให้เห็นในที่นี้ว่าพระราชบัญญัติแสดงฤทธิ์การยับยั้งการแตกของเม็ดเลือดแดงที่เกิดจาก AAPH ใน RBC ของหนูที่สูงกว่ามากเมื่อเทียบกับ Isoact (รูปที่ 6) ไม่ชัดเจนว่าความไม่สอดคล้องกันดังกล่าวอาจเกิดจากความแตกต่างของชนิดของหนูหรือไม่

คัง et al. (2003) รายงานว่าพระราชบัญญัติแสดงฤทธิ์ในการยับยั้ง ACE และ IC50 คือ 373.3 ไมโครกรัม/มิลลิลิตรซึ่งคำนวณเป็น 598 ไมโครโมลาร์โดยใช้ Hip-His-Leu เป็นซับสเตรต ในรายงานปัจจุบัน พระราชบัญญัติแสดงกิจกรรมการยับยั้ง ACE ที่สูงกว่า Isoact และ IC50 ของอดีตถูกคำนวณเป็น 472 µM ตามพื้นที่ในโครมาโตแกรมของ HPLC (รูปที่ 5) มีรายงานว่าการกระทำดังกล่าวก่อให้เกิดผลการผ่อนคลายโดยใช้ไนตริกออกไซด์เป็นสื่อกลางต่อวงแหวนหลอดเลือดเอออร์ตาที่ไม่บุบสลายของ endothelium-intact ของหนูแรท SD (Wong et al., 2001) แม้ว่า Act จะแสดงว่าลดความดันโลหิตในหนู Wistar

การศึกษานี้ใช้การฉีด Act เข้าเส้นเลือดดำในหนูที่ดมยาสลบเพื่อแยกแยะปัจจัยการดูดซับ (Ahmad et al., 1995) ในที่นี้ เราดูแลพระราชบัญญัติโดยวาจาต่อ SHR และกำหนดการเปลี่ยนแปลงของความดันโลหิต เราพบว่าข้อเท็จจริงเกี่ยวกับการบริหารช่องปาก แต่ไม่ใช่ของ Isoact แสดงผลลดความดันโลหิตโดยการลด SBP และ DBP มากกว่า 24 ชั่วโมงหลังการให้ยาครั้งเดียว (รูปที่ 7) การกระทำที่ขนาด 10 มก./กก. ของน้ำหนักตัวมีผลใกล้เคียงกับแคปโตพริลในขนาด 5 มก./กก. SHR ในการลด SBP และดีกว่าแคปโตพริลเมื่อลด DBP

โดยสรุป พรบ. ได้แสดงสารต้านอนุมูลอิสระกิจกรรม, กิจกรรมการยับยั้ง ACE และผลลดความดันโลหิตต่อ SHRs ผลลัพธ์ที่นำเสนอนี้จะเป็นประโยชน์ต่อความพยายามในการพัฒนายาสมุนไพรหรือผลิตภัณฑ์ที่เกี่ยวข้องโดยใช้พระราชบัญญัติซึ่งพบในพืชและยาสมุนไพรหลายชนิด เพื่อป้องกันสารต่อต้านอนุมูลอิสระและผลการรักษาในอนาคต

Cistancheแอคทีโอไซด์เพื่อต้านอนุมูลอิสระและชะลอวัย

1ภาควิชาวิทยาศาสตร์และเทคโนโลยีชีวภาพอาหาร มหาวิทยาลัยแห่งชาติ Chung Hsing เมืองไถจง ประเทศไต้หวัน

2Ko Da Pharmaceutical Co., Ltd, Tao-Yuan, Taiwan

3School of Pharmacy, Taipei Medical University, ไทเป, ไต้หวัน

4Graduate Institute of Biomedical Materials and Engineering, Taipei Medical University, ไทเป, ไต้หวัน

5ศูนย์วิจัยยาสมุนไพรแผนโบราณ โรงพยาบาลมหาวิทยาลัยการแพทย์ไทเป ไทเป ไต้หวัน

6Graduate Institute of pharmacognosy, Taipei Medical University, ไทเป, ไต้หวัน

(ได้รับเมื่อ 12 มีนาคม 2555; รับเมื่อ 20 เมษายน 2555)

วรรณกรรมที่อ้างถึง

Ahmad, M. , GH Rizwani, K. Aftab, VU Ahmad, AH Gilani และ SP Ahmad 1995.แอคทีโอไซด์: ยาลดความดันโลหิตชนิดใหม่ ไฟโตเธอร์. ความละเอียด 9: 525-527.

Ames, BN 1983 สารก่อมะเร็งในอาหารและสารต้านมะเร็ง: อนุมูลออกซิเจนและโรคความเสื่อม วิทยาศาสตร์ 221:1256-1264.

Anzenbacherova, E. , P. Anzenbacher, K. Macek และ J. Kvetina 2544. การหาค่าสารยับยั้งเอนไซม์ (angiotensin convertase) ตามปฏิกิริยาของเอนไซม์ตามด้วย HPLC.J. เภสัช. ไบโอเมด ก้น 24: 1151-1156.

Birkofer, L., C. Kaiser และ U. Thomas พ.ศ. 2511แอคทีโอไซด์และ neoacteoside: Zuckerester aus Syringa vulgaris Naturforsc- แขวน 23B: 1051-1058.

Borer, JS 2007. การยับยั้งเอนไซม์ที่ทำให้เกิด angiotensin: ความก้าวหน้าครั้งสำคัญในการรักษาโรคหัวใจและหลอดเลือด ยูโร ฮาร์ท เจ. ศุภ. 9(เสริม E): E2-E9.

Chen, CH, TY Song, YC Liang และ ML Hu 2552.แอคทีโอไซด์และ 6-O-acetylacteoside ปรับลดโมเลกุลการยึดเกาะของเซลล์ที่เหนี่ยวนำโดย IL-1 ผ่านการยับยั้งของ ERK และ JNK ในเซลล์บุผนังหลอดเลือดของมนุษย์ เจ. อากริก. อาหาร

เคมี. 57: 8852-8859.

เชียง, HC, YJ Lo และ FJ Lu พ.ศ. 2537 สารยับยั้ง Xanthine oxidase จากใบของ Alsophila spinulosa (Hook) Tryon เจ. เอนไซม์ยับยั้ง. 8: 61-71.

Chiou, WF, LC Lin และ CF Chen 2547.แอคทีโอไซด์ปกป้องเซลล์บุผนังหลอดเลือดจากความเครียดออกซิเดชันที่เกิดจากอนุมูลอิสระ เจ. ฟาร์ม. ฟา. 56: 743-748.

Fotherby, MD และ B. Panayiotou พ.ศ. 2542 การรักษาด้วยยาลดความดันโลหิตเพื่อป้องกันโรคหลอดเลือดสมอง: อะไร เมื่อไหร่ และเพื่อใคร? ยา 58: 663-674.

Gao, JJ, K. Igalashi และ M. Nukina พ.ศ. 2542. กิจกรรมการกวาดล้างที่รุนแรงของฟีนิลโพรพานอยด์ไกลโคไซด์ในคาริปเทอริสอินคานา ไบโอสกี้. เทคโนโลยีชีวภาพ ไบโอเคมี. 63: 983-988.

Gey, KF 1990. Theสารต้านอนุมูลอิสระสมมติฐานของโรคหัวใจและหลอดเลือด: ระบาดวิทยาและกลไก. ไบโอเคมี. ซ. ทรานส์ 18: 1041-1045.428 พฤกษศาสตร์ศึกษา ฉบับที่ 53, 2012

Han, CH, JC Liu, KH Chen, YS Lin, CT Chen, พัดลม CT, HL Lee, DZ Liu และ WC Hou พ.ศ. 2554 กิจกรรมลดความดันโลหิตของกระเทียมแปรรูปในหนูที่เป็นโรคความดันโลหิตสูงตามธรรมชาติและในคนเป็นโรคความดันโลหิตสูง บอท. สตั๊ด. 52: 277-283.

Holmquist, B., P. Bunning และ JF Riordan พ.ศ. 2522 การทดสอบสเปกโตรโฟโตเมตรีแบบต่อเนื่องสำหรับเอ็นไซม์แปลงแองจิโอเทนซิน ก้น ไบโอเคมี. 95: 540-548.

Hou, WC, HJ Chen และ YH Lin พ.ศ. 2546 เปปไทด์ต่อต้านอนุมูลอิสระที่มีกิจกรรมการยับยั้งเอ็นไซม์ที่เปลี่ยนแอนจิโอเทนซินและการประยุกต์ใช้สำหรับการทำให้บริสุทธิ์ด้วยเอ็นไซม์ที่เปลี่ยนแอนจิโอเทนซิน เจ. อากริก. เคมีอาหาร. 51: 1706-1709.

Huang, D. , B. Ou และ RL Prior 2005. เคมีที่อยู่เบื้องหลังสารต้านอนุมูลอิสระการทดสอบความจุ เจ. อากริก. เคมีอาหาร. 53: 1841-1856.

Huang, CG, YJ Shang, J. Zhang, JR Zhang, WJ Li และ BH Jiao 2551. ฤทธิ์ลดกรดของฟีนิลโพรพานอยด์ไกลโคไซด์แอคทีโอไซด์ของ Scrophularia ningpoenis ต่อระดับกรดยูริกในเลือดในหนูที่ได้รับการบำบัดด้วยโพแทสเซียม oxonate อาเมอร์. เจ

คาง. เมดิ. 36: 149-157.

Lee, KY, EJ Jeong, HS Lee และ YC Kim 2549.แอคทีโอไซด์ของ Callicarpa dichotoma ช่วยลดความบกพร่องของหน่วยความจำที่เกิดจาก scopolamine ไบโอล. เภสัช. วัว. 29: 71-74.

Li, J. , P. Wang, R. Zheng, Z. Liu และ Z. Jia พ.ศ. 2536 การปกป้องฟีนิลโพรพานอยด์ไกลโคไซด์จาก Pedicularis ต่อการเกิดภาวะเม็ดเลือดแดงแตกออกซิเดชันในหลอดทดลอง แพลนตา เมด. 59: 315-317.

Li, H. , GX Chou, ZT Wang และ ZB Hu 2549. การสิ้นสุด HPLC ของแอคทีโอไซด์ใน Radix Rehmanniae Zhongguo Zhong Yao Za Zhi 31: 822-824.

Lin, SY, CC Wang, YL Lu, WC Wu และ WC Hou 2551.สารต้านอนุมูลอิสระ, amine oxidase ที่ไวต่อสารต้านเซมิคาร์บาไซด์ และฤทธิ์ต้านความดันโลหิตสูงของ geraniin ที่แยกได้จาก Phyllanthus urinaria เคมีอาหาร. ท็อกซิคอล 46: 2485-2492.

Liu, DZ, YS Lin และ WC Hou พ.ศ. 2547 นิทรรศการโมโนไฮดรอกซาเมตของกรดแอสปาร์ติกและกรดกลูตามิกสารต้านอนุมูลอิสระและกิจกรรมการยับยั้งเอนไซม์ที่ทำให้เกิด angiotensin เจ Agric.Food เคมี. 52: 2386-2390.

Kalckar, HM 1947. ดิฟเฟอเรนเชียลสเปกโตรโฟโตเมตรีของสารประกอบพิวรีนโดยใช้เอนไซม์จำเพาะ เจ. ไบโอล. เคมี.167: 429-443.

Kang, DG, YS Lee, HJ Kim, YM Lee และ HS Lee พ.ศ. 2546 ฟีนิลโพรพานอยด์ไกลโคไซด์ที่ยับยั้งเอนไซม์ที่เปลี่ยนแอนจิโอเทนซินจาก Clerodenron trichotomum เจ. เอธโนฟาร์มาคอล. 89: 151-154.

Koo, KA, SH Sung, JH Park, SH Kim, KY Lee และ YC Kim พ.ศ. 2548 กิจกรรมป้องกันระบบประสาทในหลอดทดลองของฟีนิลทานอยด์ไกลโคไซด์จาก Callicarpa dichotoma แพลนตา Med.71: 778-780

Koo, KA, SH Kim, TH Oh และ YC Kim 2549.แอคทีโอไซด์และ aglycones ของมันปกป้องวัฒนธรรมเบื้องต้นของเซลล์เยื่อหุ้มสมองของหนูจาก excitotoxicity ที่เกิดจากกลูตาเมต วิทย์ชีวิต. 79:709-716.

Lin, CL, SY Lin, YH Lin และ WC Hou พ.ศ. 2549 ผลของโปรตีนที่เก็บหัวของมันเทศ (Dioscorea alata cv. Tainong No.1) และกรดในกระเพาะอาหารของมันถูกย่อยในหนูที่มีภาวะความดันโลหิตสูงตามธรรมชาติ เจ. วิทย์. อาหารเกษตร. 86: 1489-1494.

มาร์ค แคนซัส และทีพี เดวิส พ.ศ. 2543 โรคหลอดเลือดสมอง: การพัฒนา การป้องกัน และการบำบัดด้วยสารยับยั้งเปปไทเดส เปปไทด์ 21:1965-1973.

Miki, M., H. Tamai, M. Mino, Y. Yamamoto และ E. Niki พ.ศ. 2530 การเกิดออกซิเดชันของลูกโซ่อนุมูลอิสระของเซลล์เม็ดเลือดแดงของหนูโดยโมเลกุลออกซิเจนและการยับยั้งโดย -โทโคฟีรอล อาร์ค ไบโอเคม. ชีวฟิสิกส์ 258: 373-380.

สภาวิทยาศาสตร์แห่งชาติ. พ.ศ. 2537 คู่มือการดูแลและการใช้สัตว์ทดลอง สภาวิทยาศาสตร์แห่งชาติไต้หวัน

Ohno, T. , M. Inoue, Y. Ogihara และ I. Saracoglu พ.ศ. 2545 ฤทธิ์ต้านการแพร่กระจายของเชื้อแอคทีโอไซด์, ฟีนิลทานอยด์ไกลโคไซด์. เภสัช. วัว. 25: 666-668.

Vendetti, แมสซาชูเซตส์, บี. รูบิน, DW Cushman พ.ศ. 2520 การออกแบบตัวยับยั้งจำเพาะของเอนไซม์ที่เปลี่ยนแองจิโอเทนซิน: ยาลดความดันโลหิตชนิดออกฤทธิ์ทางปากชนิดใหม่ วิทยาศาสตร์ 196: 441-444.

เรา, YK, SH Fang, SC Hsieh, TH Yeh และ YM Tzeng พ.ศ. 2552 ส่วนประกอบของ Anisomeles India และกิจกรรมต้านการอักเสบ เจ. เอธโนฟาร์มาคอล. 121: 292-296.

Smith, MA, G. Perry, PL Richey, LM Sayre, VE Anderson, MF Beal และ N. Kowal 1996 ความเสียหายจากปฏิกิริยาออกซิเดชันในโรคอัลไซเมอร์ ธรรมชาติ 382: 120-121.Wang, P., J. Kang, R. Zheng, Z. Yang, J. Lu, J. Gao และ Z. Jia

พ.ศ. 2539 การกำจัดผลของฟีนิลโพรพานอยด์ไกลโคไซด์จาก Pedicularis ต่อซูเปอร์ออกไซด์แอนไอออนและไฮดรอกซิลเรดิคัลโดยวิธีการดักจับสปิน ไบโอเคมี. ฟา. 51: 687- 691.

Wong, IYF, Y. Huang, ZD He, CW Lau และ ZY Chen 2544. ผลการผ่อนคลายของสารสกัด Ligstrum purpurascens และการทำให้บริสุทธิ์แอคทีโอไซด์ในวงแหวนหลอดเลือดของหนู แพลนตา เมด. 67:317-321.

Wu, YT, LC Lin, JS Sung และ TH Tsai 2549. ความมุ่งมั่นของแอคทีโอไซด์ใน Cistanche deserticola และ Boschniakia rossica และเภสัชจลนศาสตร์ในหนูที่เคลื่อนไหวอย่างอิสระโดยใช้ LC-MS/MS เจ. โครมาโตกร์. ข 844: 89-95