Acteoside ในพืชธรรมชาติจีน-Cistanche เพื่อบรรเทาโรคไต--ตอนที่ II
Mar 02, 2022
ติดต่อ: emily.li@wecistanche.com
คลิกที่นี่เพื่อดูข้อมูลเกี่ยวกับส่วนที่ 1 (บทนำ วัสดุ และวิธีการ ) ของบทความนี้
Qinwen Wang|Xinxin Dai et.al
การศึกษานี้ได้รับการออกแบบมาเพื่อตรวจสอบผลการป้องกันและกลไกของแอคทีโอไซด์ต่อ DKD ในหนูเมาส์ db/db เพศผู้ที่เป็นเบาหวานและเซลล์ HK-2 ที่เหนี่ยวนำกลูโคสสูง หนูเมาส์ที่เป็นเบาหวาน db/db ถูกแบ่งแบบสุ่มเป็นกลุ่มแบบจำลอง กลุ่มเมตฟอร์มิน กลุ่มอิเบซาร์แทน และแอคทีโอไซด์กลุ่ม. เราสังเกตผลิตภัณฑ์จากธรรมชาติของแอคทีโอไซด์ส่งผลอย่างมากในการป้องกันไตผ่านการวิเคราะห์ตัวบ่งชี้ทางชีวเคมีและเมแทบอไลต์ภายในร่างกาย การสังเกตทางจุลพยาธิวิทยา และการซับแบบตะวันตก เซลล์ HK-2 ที่อยู่ภายใต้กลูโคสสูงถูกใช้ในการทดลองในหลอดทดลอง กลไกระดับโมเลกุลถูกตรวจสอบโดย RT-PCR และ western blotแอคทีโอไซด์ป้องกันเซลล์ HK-2 ที่เกิดจากกลูโคสสูงและหนูที่เป็นเบาหวาน db/db โดยการยับยั้งเส้นทางการส่งสัญญาณ NADPH/oxidase-TGF- /Smadแอคทีโอไซด์ควบคุมวิถีเมแทบอลิซึมที่ถูกรบกวนของเมแทบอลิซึมของไขมัน เมแทบอลิซึมของไกลออกซิเลตและไดคาร์บอกซิเลต และเมแทบอลิซึมของกรดอาราคิโดนิก เราค้นพบผลิตภัณฑ์จากธรรมชาติของแอคทีโอไซด์ส่งผลอย่างมากต่อการป้องกันไตการศึกษานี้ปูทางสำหรับการสำรวจเพิ่มเติมเกี่ยวกับการเกิดโรค การวินิจฉัยตั้งแต่เนิ่นๆ และการพัฒนายารักษาโรคใหม่สำหรับ DKD
คีย์เวิร์ดแอคทีโอไซด์, เบาหวานโรคไต, การทำโปรไฟล์เมแทบอลิซึม, NADPH/oxidase-TGF- /Smad signaling pathway, ROS
ส่วนที่II
3|ผลลัพธ์
3.1|Acteoside ยับยั้งเส้นทางการส่งสัญญาณ NADPH/oxidaseTGF- /Smad ในหนูเมาส์ db/db ที่เป็นเบาหวาน
3.1.1|Acteoside ปรับปรุงตัวชี้วัดทางชีวเคมี
ผลการวิเคราะห์ของตัวบ่งชี้ทางชีวเคมีแสดงไว้ในรูปที่ 1B เมื่อเทียบกับกลุ่มควบคุม ตัวชี้วัดทางชีวเคมีของกลุ่มแบบจำลองเพิ่มขึ้นอย่างมีนัยสำคัญ เช่น BUN (p < .05),="" fbg="" (p="">< .001),="" got="" (p="">< .01),="" gpt="" (p="">< .01)="" ,="" ins="" (p="">< .05),="" t-cho="" (p="">< .001),="" tg="" (p="">< .001),="" scr="" (p="">< .05)="" และ="" malb="" (p="">< .05)="" หลังการรักษา="" mrhtg="" ระดับ="" bun="" (p="">< .05),="" fbg="" (p="">< .001),="" got="" (p="">< .01),="" gpt="" (p="">< .01),="" ins="" (p="">< .05),="" t-="" cho="" (p="">< .05),="" tg="" (p="">< .01),="" scr="" (p="">< .05)="" ในซีรัม="" และ="" malb="" (p="">< .05)="" ในปัสสาวะเกือบกลับเป็นปกติ="" ใน="" mrhtg="" ระดับของ="" fbg,="" got,="" gpt="" และ="" ins="">
เมื่อเปรียบเทียบกับกลุ่มแบบจำลอง ระดับการแสดงออกของ BUN, GOT, INS, Scr ในซีรัม (p < .05) เกือบจะกลับเป็นปกติ และระดับการแสดงออกของ FBG, GPT, T-CHO, TG (p < .05) ) ในซีรัม และ mALB (p < .05) ในปัสสาวะลดลงหลังการรักษา EJSG (250 มก. กก.-1 d-1). เมื่อเทียบกับกลุ่มโมเดล ระดับการแสดงออกของ BUN (p < .05),="" got="" (p="">< .05),="" ins="" (p="">< .05),="" scr="" (p="">< .05)="" ในซีรัม="" และ="" malb="" ในปัสสาวะเกือบกลับคืนมา="" เป็นปกติ="" และระดับการแสดงออกของ="" fbg,="" gpt="" (p="">< .05),="" t-cho,="" tg="" (p="">< .05)="" ในซีรัมลดลงหลังการรักษา="" ebst="" (50="" มก.="">-1 d-1). โดยทั่วไป MRHTG มีผลดีกว่ายา EJSG และ EBST ที่เป็นบวก เมื่อเทียบกับกลุ่มยาที่ให้ผลบวก MRHTG มีผลดีกว่าตัวบ่งชี้ทางชีวเคมีเดียวกัน เช่น FBG (p < .001)="" และ="" ins="" (p="">< .5)="" ที่ระดับ="" tg,="" gpt,="" got,="" bun="" และ="" scr="" ผลลัพธ์ของ="" mrhtg="" จะเหมือนกับ="" ebst="" และ="">
รักษาโรคไต--Cistanche acteoside
3.1.2|Acteoside บรรเทาการเปลี่ยนแปลงทางพยาธิวิทยา
ผลการตรวจชิ้นเนื้อสอดคล้องกับการวิเคราะห์ทางชีวเคมี (ดูรูปที่ 1C) ผลลัพธ์ของ PAS แสดงให้เห็นว่าเมื่อเทียบกับกลุ่มควบคุม พื้นที่ไตเพิ่มขึ้น เมมเบรนชั้นใต้ดินหนาขึ้น และค่าความหนาแน่นของแสงเฉลี่ยเพิ่มขึ้นอย่างมีนัยสำคัญในกลุ่มแบบจำลอง (p < .05);="" การย้อมสี="" he="" แสดงให้เห็นว่าโครงสร้างของไตคั่นระหว่าง="" glomerulus="" และ="" tubule="" เป็นเรื่องปกติในกลุ่มควบคุม="" (cao="" et="" al.,="" 2019)="" อย่างไรก็ตาม="" กลุ่มแบบจำลองเผยให้เห็นเยื่อหุ้มชั้นใต้ดินของไตที่หนาขึ้นและ="" mesangial="" hyperplasia="" พื้นที่เล็ก="" ๆ="" ของเยื่อหุ้มสมองแสดงการลดลงของไซโตพลาสซึมของเซลล์เยื่อบุผิวท่อไต="" (xiang="" et="" al.,="">
3.1.3|การแสดงออกของโปรตีน -SMA, TGF- 1, Smad2, Smad3, P-Smad2/3, Smad4, NOX1, NOX2 และ NOX4 ในเนื้อเยื่อไตของหนูเมาส์ db/db
การวิเคราะห์ Western blotting (รูปที่ 1D) แสดงให้เห็นว่าระดับการแสดงออกของ NOX1, NOX2, NOX4, -SMA, TGF- 1, Smad2, Smad3, PSmad2/3, Smad4, NOX1, NOX2 และ NOX4 ในเนื้อเยื่อไตของ db /db หนูเมาส์เพิ่มขึ้นอย่างมีนัยสำคัญจากสิ่งนั้นในหนูเมาส์ db/m (p < .05)="" โดยทั่วไป="" ยาที่เป็นบวก="" ebst="" มีผลดีกว่า="" ejsg="" และ="" mrhtg="" แต่="" mrhtg="" มีข้อได้เปรียบในการควบคุมระดับของโปรตีน="" p-smad2/3="" หลังการบำบัด="" mrhtg="" ระดับการแสดงออกของ="" smad2,="" smad4="" และ="" nox4="" ลดลงอย่างมีนัยสำคัญเมื่อเทียบกับกลุ่มแบบจำลอง="" ระดับการแสดงออกของโปรตีน="" -sma,="" smad2,="" nox1="" และ="" nox2="" ใน="" ejsg="" ต่ำกว่าในกลุ่มแบบจำลองอย่างมีนัยสำคัญ="" ebst="" มีผลกระทบด้านกฎระเบียบอย่างมีนัยสำคัญต่อระดับของโปรตีน="" tgf-="" 1,="" smad3,="" smad4,="" nox4="" เมื่อเทียบกับกลุ่มแบบจำลอง="" เมื่อเปรียบเทียบกับกลุ่มแบบจำลอง="" ระดับการแสดงออกของโปรตีน="" -sma,="" tgf-="" 1,="" smad2,="" smad3,="" p-smad2/3,="" smad4,="" nox1,="" nox2="" และ="" nox4="" โปรตีนได้รับการฟื้นฟูให้เป็นปกติหลังการบำบัด="" ejsg="" (="" 250="" มก.="">-1 d-1), EBST (50 มก. กก.1 d1) และ MRHTG (70 มก. กก.-1 d-1). ระดับการแสดงออกของโปรตีน NOX1, NOX2 และ NOX4 ไม่แตกต่างกันอย่างมีนัยสำคัญระหว่างกลุ่ม
3.2|ข้อมูลเชิงลึกเกี่ยวกับเมตาบอลิซึม
3.2.1|ผลการวิเคราะห์ตัวอย่าง QC
การจัดกลุ่มสัมพัทธ์ของตัวอย่าง QC (รูปที่ 2A) และค่าเบี่ยงเบนมาตรฐานสัมพัทธ์ (เปอร์เซ็นต์ RSD) ของความเข้มไอออน (ตารางที่ 1) อธิบายและพิสูจน์คุณภาพของข้อมูล QC พล็อตแนวโน้มแสดงความผันแปรของการสังเกตโดยรวมของประเภท (รูปที่ 2B) พีคโครมาโตกราฟีไอออนที่สกัดได้ของ 10 ไอออน ถูกเลือกสำหรับการตรวจสอบความถูกต้องของวิธีการ ความสามารถในการทำซ้ำของวิธีการได้รับการประเมินโดยใช้ตัวอย่าง QC จำนวน 6 ชุด ผลลัพธ์ประเภทนี้แสดงให้เห็นว่าวิธีการนี้มีความสามารถในการทำซ้ำและความเสถียรที่ดีเยี่ยม
3.2.2|ในที่สุดสารเมแทบอไลต์ภายใน 13 ชนิดถูกระบุในที่สุดโดยการวิเคราะห์ข้อมูลหลายตัวแปร
ข้อมูลทั้งหมดที่มีเวลาเก็บรักษา ความเข้มข้นสูงสุด และมวลที่แน่นอนถูกนำเข้ามาในซอฟต์แวร์ Masslynx™ สำหรับการวิเคราะห์ทางสถิติหลายรายการ แบบจำลอง OPLS-DA ภายใต้การดูแล ซึ่งเป็นแนวทางการจดจำรูปแบบ ได้รับการจัดตั้งขึ้นเพื่อแยกตัวอย่างซีรัมออกเป็นสองช่วงตึกระหว่างกลุ่มแบบจำลองและกลุ่มควบคุม OPLS-DA ภายใต้การดูแลที่มีความไว 100 เปอร์เซ็นต์และความจำเพาะไม่น้อยกว่า 95 เปอร์เซ็นต์โดยใช้อัลกอริธึม Leave one out แสดงให้เห็นถึงการเลือกปฏิบัติที่ดีขึ้นระหว่างสองกลุ่ม (รูปที่ 2C1, C2) ซึ่งแสดงให้เห็นว่าโมเดล DKD ได้รับการสร้างสำเร็จแล้ว จากผลลัพธ์เหล่านี้ พล็อตคะแนน OPLS-DA (รูปที่ 2D1, D2) และพล็อตวีไอพี (รูปที่ 2E1, E2) ถูกใช้เพื่อค้นหาเครื่องหมายที่อาจเกี่ยวข้องกับความคืบหน้าของ DKD แบบจำลอง R2Y และ Q2 ของแบบจำลอง PLS-DA ในโหมดบวกและลบสำหรับตัวอย่างซีรั่มได้รับการแนะนำว่าแบบจำลอง PLS-DA นั้นดีสำหรับสมรรถภาพและการทำนาย
แพลตฟอร์มการวิเคราะห์ UPLC-QTOF/MS ให้เวลาการคงอยู่และมวลโมเลกุลที่แม่นยำภายในข้อผิดพลาดในการวัด (<5 ppm)="" as="" well="" as="" the="" fragments="" of="" the="" corresponding="" production="" for="" the="" structural="" identification="" of="" metabolites.="" according="" to="" the="" precise="" molecular="" mass,="" the="" predicted="" elemental="" composition="" was="" predicted="" and="" the="" potential="" molecular="" formula="" could="" be="" searched="" in="" human="" metabolome="" database="" (http://www.hmdb.ca/).="" thirteen="" endogenous="" metabolites="" were="" ultimately="" identified="" by="" comparing="" with="" authentic="" standards="" or="" based="" on="" the="" protocol="" detailed="" above="" method.="" the="" information="" about="" the="" detected="" endogenous="" metabolites="" is="" summarized="" in="" table="" 2.="">
3.2.3|Acteoside ควบคุมสารภายในที่ผิดปกติ
เพื่อที่จะศึกษาประสิทธิภาพและกลไกการออกฤทธิ์ของ MRHTG สำหรับการรักษาโรค DKD การวิเคราะห์แบบจำลอง PLS-DA ถูกสร้างขึ้นเพื่อรับการเปลี่ยนแปลงระหว่างกลุ่มควบคุม กลุ่มแบบจำลอง และกลุ่มการบริหารให้หนูเมาส์ (รูปที่ 2F1, F2) การเปลี่ยนแปลงของโปรไฟล์เมตาบอลิซึมในซีรัมสำหรับหนูกลุ่มบริหารมีแนวโน้มที่จะฟื้นฟูกลับคืนสู่ระดับของกลุ่มควบคุม (ตารางที่ 3) นอกจากนี้ ปริมาณสัมพัทธ์ของสารเมแทบอไลต์ภายใน 13 ชนิดถูกระบุในที่สุดโดยเปรียบเทียบกับมาตรฐานที่แท้จริงหรือตามโปรโตคอลที่มีรายละเอียดวิธีการข้างต้น เมแทบอไลต์ภายในร่างกายสิบสามชนิดในซีรัมที่ได้รับผลกระทบอย่างมีนัยสำคัญจาก MRHTG ถูกนำกลับคืนสู่กลุ่มควบคุม ในหมู่พวกเขา การปรับกลุ่มการรักษาสามกลุ่มสำหรับกรดซิซาโคนิติก, คอร์เทโคลน, เซราไมด์ (d18:1/12:0), PGH3 มีความชัดเจนมากกว่าสารเมตาโบไลต์ภายในตัวอื่นๆ สำหรับกลุ่ม MRHTG ผลการตัดของกรด cis-aconitic, เซราไมด์ (d18:1/12:0), มอร์ฟีน- 3-กลูคูโรไนด์, N1-(อัลฟา-D-ไรโบซิล) -5, 6-ไดเมทิล-เบนซิมิดาโซล และบทบาท PGH3 ค่อนข้างสูง และผลการเพิ่มที่ชัดเจนที่สุดคือกรดอะโคนิติก นอกจากนี้ยังแสดงให้เห็นว่าเนื้อหาของเมแทบอไลต์ที่หยิบขึ้นมาและความผิดปกติของวิถีเมแทบอลิซึมก็ดีขึ้นในกลุ่มการบริหารให้ของ MRHTG ข้อมูลรายละเอียดแสดงในรูปที่ 2G
3.2.4|การวิเคราะห์สหสัมพันธ์
เห็นได้จากแผนที่ความร้อนของการวิเคราะห์สหสัมพันธ์ในรูปที่ 2H FBG มีความสัมพันธ์เชิงลบกับ Sm2 และ Sm3 (r<-.65); blood="" lipid="" levels="" (t-cho,="" tg)="" and="" gpt="" were="" negatively="" correlated="" with="" sm3="" and="" sm11=""><-.65); scr="" was="" positively="" correlated="" with="" sm1="" and="" sm3="" (r="">- .65); mALB was positively correlated with Sm4 and Sm12 (r >-.65); INS was positively correlated with Sm6 (r >-.65) มีความสัมพันธ์เชิงลบกับ Sm7 (r<.65); bun="" and="" sm8="" were="" negative="" relevant=""><>
Cistanche รักษาโรคไต
3.2.5|Acteoside ควบคุมวิถีเมแทบอลิซึมที่ถูกรบกวนของเมแทบอลิซึมของไขมัน การเผาผลาญไกลออกซิเลต และการเผาผลาญไดคาร์บอกซิเลต และเมแทบอลิซึมของกรดอาราคิโดนิก
เส้นทางการเผาผลาญถูกสร้างขึ้นโดยการนำเข้าเมแทบอไลต์ที่เป็นไปได้ไปยังฐานข้อมูลบนเว็บ MetPA ค่าผลกระทบของเส้นทางที่คำนวณจากเส้นทางสู่การวิเคราะห์โทโพโลยีด้วย MetPA ที่สูงกว่า 0.1 ถูกคัดกรองเป็นเส้นทางเป้าหมายที่เป็นไปได้ ที่นี่ในรูปที่ 2I สำหรับเส้นทางทั้งสี่ เมแทบอลิซึมของไขมันอีเทอร์ด้วยค่าผลกระทบ 0.36; เมแทบอลิซึมของสฟิงโกลิปิดด้วยค่าผลกระทบ 0.28; เมแทบอลิซึมของไกลออกซิเลตและไดคาร์บอกซิเลตด้วยค่าผลกระทบ 0.13 และเมแทบอลิซึมของกรดอาราคิโดนิกด้วยค่าผลกระทบ 01 ถูกกรองออกเป็นวิธีการเผาผลาญที่สำคัญที่สุด
3.3|Acteoside ยับยั้งเส้นทางการส่งสัญญาณ NADPH/oxidaseTGF- /Smad บนเซลล์ HK-2
3.3.1|สัณฐานวิทยาของเซลล์
เซลล์ HK-2 ในกลุ่มควบคุม กลุ่มแบบจำลอง กลุ่มควบคุมแรงดันออสโมติก และกลุ่มการบริหารให้ 50 ไมโครโมล/ลิตร ถูกเพาะเลี้ยงเป็นเวลา 48 ชั่วโมง และสัณฐานวิทยาของเซลล์ถูกแสดงไว้ในรูปที่ 3A เซลล์ในกลุ่มควบคุมแสดงก้อนหินปูผิวทางและเซลล์ HK-2 ที่มีการกระตุ้นกลูโคสสูงในกลุ่มแบบจำลองมีความแตกต่างทางสัณฐานวิทยาที่สังเกตได้เมื่อเปรียบเทียบกับเซลล์กลุ่มควบคุม โดยมีการสูญเสียการยึดเกาะของเซลล์-เซลล์แน่นปกติและสังเกตได้ เซลล์ที่แสดงฟีโนไทป์ที่ยาวกว่าซึ่งบ่งชี้ถึงฟีโนไทป์ที่เหมือนไฟโบรบลาสต์ หลังจากการบริหารให้ MRHTG 50 ไมโครโมล/ลิตร ลักษณะทางสัณฐานวิทยาของเซลล์จะคล้ายกับของกลุ่มควบคุม
3.3.2|ผลของแอคทีโอไซด์ต่อการแสดงออกของโปรตีนของ TGF- 1, Smad2, Smad3, P-Smad2/3, Smad7, Smad4, -SMA, NOX1, NOX2, NOX4, NF-κB และ E-cadherin ในเซลล์
ดังที่แสดงในรูปที่ 3B ระดับการแสดงออกของโปรตีนของ NOX1, NOX2, NOX4, -SMA, NF-κB p65, TGF- 1, Smad2, Smad3, P-Smad2/3 และ Smad4 เพิ่มขึ้นและ E-cadherin และ Smad7 ลดลงอย่างมีนัยสำคัญในเซลล์ HK-2 ที่เกิดกลูโคสสูง (p < .05)="" ผลของ="" mrhtg="" มีความสำคัญ="" โดยเฉพาะอย่างยิ่งในการแสดงออกของโปรตีนของ="" smad3,="" smad7,="" p-smad2/3="" และยาที่เป็นบวก="" ebst="" มีผลดีกว่าใน="" smad2,="" smad4="" และ="" -sma="" เมื่อเทียบกับกลุ่มโมเดล="" ระดับการแสดงออกของ="" nox1,="" nox2,="" nox4,="" -sma,="" nf-κb="" p65,="" tgf-="" 1,="" smad2,="" smad3,="" smad4,="" smad7,="" p-smad2/3="" และ="" e-cadherin="" เกือบกลับคืนสู่สภาพปกติหลังการรักษา="" ebst="" และ="" mrhtg="" nox4,="" -sma,="" nf-κb="" p65,="" tgf-="" 1,="" smad2,="" smad3,="" smad4,="" smad7,="" p-smad2/3="" และ="" e-cadherin="">
3.3.4|ผลของแอกทีโอไซด์ต่อการแสดงออกของ MCP-1, IL-1 , TNF- และ IL-6 ในเซลล์
นอกจากนี้ ดังที่แสดงในรูปที่ 3D เมื่อเปรียบเทียบกับกลุ่มควบคุม การแสดงออกของ MCP-1, IL-1 , TNF- และ IL-6 เพิ่มขึ้นอย่างมีนัยสำคัญ (p < .05)="" ใน="" supernatant="" ของเซลล์="" hk-2="" ซึ่งเกิดจากกลูโคสสูง="" แนวโน้มการควบคุมยาในเชิงบวก="" ebst="" และ="" mrhtg="" มีความสอดคล้องกัน="" และ="" mrhtg="" สามารถควบคุมการแสดงออกของ="" mcp-1,="" il-1="" ,="" tnf-="" และ="" il-6="">
Cistanche สำหรับไต
4|อภิปรายผล
แบบจำลองหนูเมาส์ที่เป็นเบาหวาน db/db เป็นแบบจำลองสัตว์ที่เป็นโรคเบาหวานที่เป็นที่ยอมรับในระดับสากล และการเกิดโรคของ DKD ในหนูเมาส์ db/db นั้นคล้ายคลึงกับในมนุษย์ (Sharma, McCue, & Dunn, 2003) หลังจากการบริหารของ MRHTG แล้วไตบาดเจ็บระดับดัชนี (Scr, BUN และ mALB) ในหนูเมาส์ db/db ถูกปรับปรุงอย่างมีนัยสำคัญ ระดับไขมันในเลือด (T-CHO และ TG) และระดับน้ำตาลในเลือด (FBG และ INS) มีระดับการปรับปรุงที่แตกต่างกันในกลุ่มการบริหาร สรุปแล้ว,แอคทีโอไซด์สามารถบรรเทาระดับของการเกิดพังผืดคั่นระหว่างไตได้อย่างมีประสิทธิภาพและปรับปรุงการเผาผลาญไกลโคไลปิดผิดปกติ ระเบียบของแอคทีโอไซด์ในระดับ INS อาจผ่านการยับยั้งความเครียดออกซิเดชันและการตอบสนองต่อการอักเสบของเซลล์ ควบคุมการกระตุ้นการตอบสนองของโปรตีนพับ ส่งเสริมพลวัตของไมโตคอนเดรีย และด้วยเหตุนี้จึงเพิ่มกิจกรรมของเซลล์และปริมาณอินซูลิน
เส้นทางการส่งสัญญาณ TGF- /Smad มีบทบาทสำคัญในการควบคุมไตพังผืดในสภาวะ CKD (Trionfini & Benigni, 2017; Wang et al., 2016). การศึกษาพบว่า TGF- 1-เกิดพังผืดในไตที่เกิดจาก TGF- 1 และโปรตีนที่เกี่ยวข้องกับ Smad เป็นหลัก (Smad2, Smad3, P-Smad2/3, Smad4 และ Smad7) (Meng, Nikolic-Paterson , & ลาน, 2559). Smad2 และ Smad3 ซึ่งเป็นตัวกลางส่งสัญญาณดาวน์สตรีมที่สำคัญสองตัว ถูกฟอสโฟรีเลตและกระตุ้นโดยตัวรับ TGF หลังจากจับกับ TGF- Phosphorylated Smad2/3 จับกับโปรตีน Smad4 สร้างสารเชิงซ้อน heterooligomeric และย้ายเข้าไปในนิวเคลียส กระตุ้นการถอดรหัสของยีนไฟโบรติก สังเกตการเปิดใช้งาน Smad2 และ Smad3 ในเมาส์ที่มีสิ่งกีดขวางไต(Wang et al., 2013; Wang et al., 2014) ผู้ป่วยเบาหวานชนิดที่ 1 และผู้ป่วยโรคเบาหวาน
หนู (Wang, Lin, Ren, Liu, & Yang, 2015) Wei et al., 2010; (Wolf & Ziyadeh, 1999) ดังที่แสดงโดยการแสดงออกของฟอสโฟรีเลต Smad2 (p-Smad2) และฟอสโฟรีเลต Smad3 (p-Smad3) ที่เพิ่มขึ้น เมทริกซ์ metalloproteinase-mediated การหยุดชะงักของ E-cadherin นำไปสู่ไตเซลล์เยื่อบุผิวท่อ EMT ผ่านกระสุน (Zheng et al., 2009) การสูญเสียการแสดงออกของ E-cadherin เป็นจุดเด่นของ EMT ในฐานะที่เป็นโปรตีนสัญญาณดาวน์สตรีมของแฟมิลี TGF- 1 SMAD มีบทบาทสำคัญในกระบวนการของพังผืดคั่นระหว่างไตที่อาศัย -SMA ผลลัพธ์ของ Western blotting แสดงการแสดงออกของ TGF- 1 และโปรตีนการส่งสัญญาณ -SMA, Smad2, Smad3, Smad4 และ P-Smad2/3 โปรตีนในช่วงต้นเนื้อเยื่อไตลดลงอย่างมีนัยสำคัญ โดยเฉพาะภายหลังการให้ MRHTG ได้ผลลัพธ์ที่คล้ายกันในการทดลองเซลล์ HK-2 ดังนั้น MRHTG อาจมีบทบาทในการปรับปรุงในช่วงต้นไตบาดเจ็บผ่านการยับยั้งเส้นทางการส่งสัญญาณ TGF- /Smad
มีรายงานว่าระดับออกซิเจนในปฏิกิริยา (ROS) ที่เพิ่มขึ้นในเซลล์เป็นปัจจัยสำคัญที่นำไปสู่การเกิดพังผืดของท่อนำไข่และไตพังผืด ROS ที่เกิดจากน้ำตาลกลูโคสสูงส่วนใหญ่ได้มาจากเซลล์เยื่อบุผิวของไต NADPH oxidase (Chen, Chen, & Harris, 2012) NADPH oxidase ต้นแบบที่ระบุในเซลล์ฟาโกไซติกประกอบด้วยหน่วยย่อยที่จับกับเมมเบรน 2 หน่วย ได้แก่ NOX1, NOX2 และ NOX4 ในไตเซลล์ โดยที่ NOX4 มีปริมาณมากที่สุด (Sedeek et al., 2010) นอกจากนี้ ROS ที่เพิ่มขึ้นยังสัมพันธ์กับไตพังผืด; ส่งเสริมการผลิตคอลลาเจน, fibronectin และ -SMA (Kim, Seok, Jung, & Park, 2009); และมีบทบาทสำคัญในการอักเสบผ่านทางเดิน NF-κB การศึกษาในหลอดทดลองโดยเซลล์ HK-2 พบว่าการแสดงออกของ NOX1, NOX2, NOX4, -SMA, NF-κB p65 โปรตีนและ mRNA และปัจจัยการอักเสบ MCP มีการเพิ่มขึ้นของกลูโคสสูง{{11} }, IL-1 , TNF- และ IL-6 เพิ่มขึ้นอย่างมีนัยสำคัญ (p < .05)="" ผลลัพธ์แสดงให้เห็นการแสดงออกของโปรตีน="" nox1,="" nox2,="" nox4="" ในเซลล์="" hk-2="" ที่เหนี่ยวนำกลูโคสสูง="" โดยเฉพาะอย่างยิ่งหลังการบริหารให้="" mrhtg="" และ="" mrhtg="" สามารถควบคุมการแสดงออกของปัจจัยการอักเสบของ="" mcp-1,="" il-1="" ,="" tnf-="" และ="" il-6="" ได้อย่างมีนัยสำคัญ="" ได้ผลลัพธ์ที่คล้ายคลึงกันในการทดลองหนูเมาส์="" db/db="" อย่างไรก็ตาม="" ไม่มีความแตกต่างที่มีนัยสำคัญใน="" nox1="" และ="" nox2="" ในหนูเมาส์="" db/db="" เมื่อเปรียบเทียบกับกลุ่มปกติ="" และความแตกต่างของ="" nox4="" มีนัยสำคัญ="" กลูโคสสูงเพิ่มการแสดงออกของ="" nox4="" แต่ไม่ใช่="" noxes="" อื่นๆ="" การค้นพบบางอย่าง="" ซึ่งแสดงให้เห็นในทำนองเดียวกันในท่อใกล้เคียงที่แยกได้จากหนู="" db/db="" เสนอแนะว่าการปรับขึ้นของ="" nadph="" ออกซิเดสที่มีพื้นฐานจาก="" nox4-อาจถูกควบคุมโดยการปรับลด="" nox2/nadph="" ออกซิเดส="" (sedeek="" et="" al.,="" 2010)="" .="" ดังนั้น="" mrhtg="" อาจมีบทบาทในการปรับปรุง="" dkd="" ผ่านการยับยั้งวิถีการส่งสัญญาณ="">
โดยเฉพาะอย่างยิ่ง มีวิถีทางเมแทบอลิซึมที่แตกต่างกันหลายประการในระยะต่างๆ ของความก้าวหน้าของ DKD
Ceramide (d18:1/12:0) ถูกค้นพบและใช้เพื่ออธิบายเมแทบอลิซึมของสฟิงโกลิปิด และเซราไมด์มีบทบาทสำคัญในการทำงานของบุผนังหลอดเลือด เซราไมด์อาจทำให้ NAPDH oxidase subtype เพิ่มการแสดงออกของ NOX4 และลดกิจกรรม NO ภายในเซลล์ ซึ่งจะทำให้การทำงานของบุผนังหลอดเลือดผิดปกติ แนะนำว่าเส้นทางสัญญาณ NADPH/ออกซิเดสเกี่ยวข้องกับเซราไมด์ กิจกรรมการสังเคราะห์เซราไมด์ที่เพิ่มขึ้นมีส่วนรับผิดชอบต่อการสร้างเซราไมด์ที่เพิ่มขึ้น ซึ่งนำไปสู่การเปลี่ยนแปลงแบบอะพอพโทติกของไตเซลล์เยื่อบุผิว (Itoh et al., 2006; Yi, Zhang, Janscha, Li, & Zou, 2004) นอกจากนี้ การศึกษาเซลล์ที่ไวต่ออินซูลินได้แสดงให้เห็นว่าเซราไมด์และอนุพันธ์ของเซราไมด์ (เช่น ganglioside GM3 และ sphingosine เป็นต้น) สามารถขัดขวางเส้นทางการส่งสัญญาณอินซูลิน กระตุ้นความเครียดจากปฏิกิริยาออกซิเดชัน ยับยั้งการดูดซึมและการจัดเก็บกลูโคส และอาจทำให้เกิดการดื้อต่ออินซูลินได้หลายอย่าง (Summers & Nelson, 2005) แต่ความสัมพันธ์ระหว่างเซราไมด์กับการดื้อต่ออินซูลินในร่างกายยังเป็นที่ถกเถียงกันอยู่ (Gorska, Dobrzy n, Zendzian-Piotrowska, & Gorski; Holland et al., 2007; Straczkowski et al., 2004) ใน DKD เนื้อหาของเซราไมด์เพิ่มขึ้นอย่างมีนัยสำคัญเมื่อเทียบกับหนูปกติและฟื้นตัวเป็นปกติหลังการให้ยาแอคทีโอไซด์พบ PC (18:1[9Z] e/2:0) และ LysoPC (O-18:0) และใช้เพื่ออธิบายเมแทบอลิซึมของไขมันอีเทอร์ PC (18:1[9Z] e/2:0) เป็นการเชื่อมโยงระดับกลางในการเผาผลาญไขมันอีเทอร์และเป็นไขมันอีเทอร์ที่มีฟังก์ชันปัจจัยกระตุ้นเกล็ดเลือด เมแทบอลิซึมของไขมันอีเทอร์และเมแทบอลิซึมของสฟิงโกลิปิดเป็นวิถีเมแทบอลิซึมของไขมัน ซึ่งสอดคล้องกับผลลัพธ์ของตัวบ่งชี้ทางชีวเคมีของเมแทบอลิซึมของไขมัน นอกจากนี้ กรดซิส-อะโคนิติกยังสามารถใช้เพื่ออธิบายเมแทบอลิซึมของไกลออกซีเลตและไดคาร์บอกซิเลต ซึ่งสัมพันธ์กับวิถีการเผาผลาญกรดซิตริก (Serrano & Bonete, 2001) การตอบสนองต่อการอักเสบเรื้อรังมีบทบาทสำคัญในโรคไตจากเบาหวาน (Navarro-Gonzalez, Mora-Fern andez, De Fuentes, & GarcíaPérez, 2011) ROS และ cytokines ที่ทำให้เกิดการอักเสบส่งเสริมการกระตุ้นของ phospholipases และ phospholipase A2 (PLA2) กระตุ้นการปลดปล่อยกรด arachidonic (Gijon, Spencer, Siddiqi, Bonventre, & Leslie, 2000; Shin & Kim, 2009), กรด arachidonic สามารถเผาผลาญได้อีก prostaglandins ดังนั้นการควบคุม prostaglandin H3 (PGH3) จึงสามารถนำมาใช้อธิบายบทบาทของเมแทบอลิซึมของกรด arachidonic ในการตอบสนองต่อการอักเสบของโรคไตจากโรคเบาหวาน เส้นทางการส่งสัญญาณ TGF- /Smad เกี่ยวข้องกับการพัฒนาของพังผืด ซึ่งนำไปสู่การตอบสนองต่อการอักเสบ ร่วมกับการเผาผลาญกรดอาราคิโดนิกเพื่อพัฒนาโรคไตจากเบาหวาน ผลลัพธ์ชี้ให้เห็นว่าเส้นทางเป้าหมายเหล่านี้แสดงให้เห็นการรบกวนที่ชัดเจนในช่วงเวลาของการรักษา และอาจนำไปสู่การพัฒนาของ DKD
สรุปแล้ว,แอคทีโอไซด์สามารถปรับปรุงตัวบ่งชี้ทางชีวเคมีของหนูเมาส์ db/db เช่น BUN, FBG, GOT, GPT, INS, T-CHO, TG, Scr และ mALB ผลเมตาบอลิซึมแสดงให้เห็นว่าโรคไตจากเบาหวานอาจทำหน้าที่ในวิถีการเผาผลาญทั้งสี่นี้: เมแทบอลิซึมของไขมันอีเทอร์ เมแทบอลิซึมของสฟิงโกลิปิด กรดไกลออกซิลิก เมแทบอลิซึมของกรดไดคาร์บอกซิลิก และเมแทบอลิซึมของกรดอาราคิโดนิก และแอคทีโอไซด์อาจควบคุมระดับไกลโคไลปิดของหนู db/db เช่นเดียวกับ NADPH/oxidase-TGF- /Smad signaling pathway Regulation เพื่อปรับปรุงในช่วงต้นไตเสียหายเกิดจากโรคเบาหวาน การศึกษานี้ปูทางสำหรับการสำรวจเพิ่มเติมเกี่ยวกับการเกิดโรค การวินิจฉัยตั้งแต่เนิ่นๆ และการพัฒนายารักษาโรคใหม่สำหรับ DKD
Cistanche สำหรับการปรับปรุงการทำงานของไต
การรับทราบ
งานนี้ได้รับการสนับสนุนโดย National Natural Science Foundation of China (No. 81373889, 81373889; 81673533) และ Priority Academic Program Development of Jiangsu Higher Education Institutions (ysxk-2014)
ผลประโยชน์ทับซ้อน
ผู้เขียนประกาศว่าพวกเขาไม่มีผลประโยชน์ทางการเงินที่เป็นคู่แข่งกันหรือความสัมพันธ์ส่วนตัวที่อาจดูเหมือนจะมีอิทธิพลต่องานที่รายงานในบทความนี้
ผลงานของผู้เขียน
Qinwen Wang: แนวความคิด การเขียน—ฉบับร่างดั้งเดิม Xinxin Dai: การจัดการข้อมูล เซียงเซียง ฝ่ายบริหารโครงการ. Zhuo Xu: การสืบสวน ซูหลาน ซู: การนิเทศ ระเบียบวิธี. Dandan Wei: แหล่งข้อมูล Tianyao Zheng: ซอฟต์แวร์ Vali dation Er-Xin Shang: การสร้างภาพ Dawei Qian: การสร้างภาพ Jin-ao Duan: ระเบียบวิธี, การกำกับดูแล. ผู้เขียนทุกคนอ่านและอนุมัติต้นฉบับ
คำชี้แจงความพร้อมใช้งานของข้อมูล
ข้อมูลที่สนับสนุนการค้นพบของการศึกษานี้มีให้จากผู้เขียนที่เกี่ยวข้องเมื่อมีการร้องขอที่สมเหตุสมผล
ตัดตอนมาจาก: ' ผลิตภัณฑ์จากธรรมชาติของแอคทีโอไซด์ผดุงไตบาดเจ็บในหนู db/db ที่เป็นโรคเบาหวานและเซลล์ HK-2 ผ่านการควบคุม NADPH/ oxidase-TGF- /เส้นทางการส่งสัญญาณ Smad' -----โดย Qinwen Wang|Xinxin Dai et.al
----การวิจัยด้านกายภาพบำบัด 2021;35:5227–5240. wileyonlinelibrary.com/journal/ptr © 2021 John Wiley & Sons Ltd.
