แคลเซียมรักษาความเสียหายของไตที่เกิดจากลูออไรด์อย่างไร?

ติดต่อ: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 อีเมล:audrey.hu@wecistanche.com

คำสำคัญ: แคลเซียม, ไต, อะพอพโทซิส

บทคัดย่อ

การบริโภคฟลูออไรด์ (F) มากเกินไปในระยะยาวอาจทำให้เกิดความเสียหายต่อกระดูกและไม่ใช่กระดูกได้ ดิไตเป็นอวัยวะหลักในการขับฟลูออไรด์ของร่างกาย การศึกษานี้มีวัตถุประสงค์เพื่อศึกษาว่าการบริโภคอาหารแคลเซียมอาหารเสริมสามารถบรรเทาไตความเสียหายที่เกิดจากฟลูออโรซิสและเพื่อตรวจสอบผลกระทบของแคลเซียมเกี่ยวกับกลไกการบรรเทาผลกระทบของไตเซลล์อะพอพโทซิสถูกกระตุ้นโดยเอฟ เราประเมินโครงสร้างทางจุลพยาธิวิทยาไตตัวบ่งชี้การทำงาน และระดับการแสดงออกของยีนและโปรตีนของตัวรับความตายที่อาศัยตัวกลางอะพอพโทซิสวิถีทางในหนูแรท Sprague Dawley (SD) ที่บำบัดด้วยโซเดียมฟลูออไรด์ (NaF) และ/หรือแคลเซียมคาร์บอเนต (CaCO3) เป็นเวลา 120 วัน ผลการศึกษาพบว่า 100 มก./ลิตร ชักนำ NaFไตการบาดเจ็บทางเนื้อเยื่อและอะพอพโทซิสเพิ่มความเข้มข้นของ Creatinine (CRE), กรดยูริก (UA), ยูเรียไนโตรเจนในเลือด (BUN), โพแทสเซียม (K), ฟอสฟอรัส (P) และ F (p < {0}}.05)="" และลดระดับแมกนีเซียมในเลือด="" (mg)="" (p="">< 0.05)="" นอกจากนี้="" naf="" ยังเพิ่ม="" mrna="" และระดับการแสดงออกของโปรตีนของตัวรับการตายของเซลล์="" fas="" (fas),="" ปัจจัยเนื้อร้ายของเนื้องอก="" (tnf),="" ที่เกี่ยวข้องกับ="">อะพอพโทซิส- ลิแกนด์ที่เหนี่ยวนำ (TRAIL), แคสเปส 8, แคสเปส 3 และโพลี ADP-ไรโบส โพลีเมอเรส (PARP) (p < 0.01)="" ซึ่งกระตุ้นวิถีของตัวรับความตายในที่สุด="">แคลเซียมการเสริมกลับการลดลงของระดับ CRE, BUN, UA, F และ P ที่เกิดจาก F บรรเทาความเสียหายทางจุลพยาธิวิทยาและอะพอพโทซิสและลดระดับการแสดงออกของยีนและโปรตีนของเครื่องหมายที่สัมพันธ์กับทางเดินของตัวรับความตาย สรุป 1 เปอร์เซ็นต์แคลเซียมบรรเทาอาการที่เกิดจาก Fไตอะพอพโทซิสผ่านเส้นทางส่งสัญญาณ FAS/FASL, TNFR/TNF, DR5/TRAIL

ดิไตเป็นอวัยวะหลักในการขับฟลูออไรด์ของร่างกายcistancheสามารถปกป้องไตและปรับปรุงไตการทำงาน.

บทนำ

ฟลูออรีนมีอยู่ทั่วไปในดิน น้ำ และอาหาร อย่างไรก็ตาม ปัจจัยทางธรรมชาติบางประการ (การผุกร่อนของแร่ธาตุและหิน การก่อตัวของแคลเซียมและเกลือแมกนีเซียม การซึมของน้ำใต้ดิน ฯลฯ) และกิจกรรมของมนุษย์ (น้ำเสียอุตสาหกรรม เคมีเกษตร ผลิตภัณฑ์ในครัวเรือน ฯลฯ) ทำให้เกิดมลพิษฟลูออรีนในสิ่งแวดล้อม (Daiwile et al., 2019) ในปัจจุบัน ปัจจัยที่ใหญ่ที่สุดของการสัมผัสฟลูออไรด์ (F) คือน้ำดื่ม และความเข้มข้นของ F ในน้ำดื่มที่แนะนำโดยองค์การอนามัยโลกน้อยกว่า 1.5 มก./ลิตร (Guidelines for Drinking-Water Quality, 2017) หลักฐานทางระบาดวิทยาชี้ให้เห็นว่าความเข้มข้นที่สูงกว่านี้จะเพิ่มความเสี่ยงของการเกิดฟลูออโรทางทันตกรรม และความเข้มข้นที่เพิ่มขึ้นจะเพิ่มความเสี่ยงของการเกิดฟลูออโรของโครงร่าง (Guidelines for Drinking-Water Quality, 2017; National Research Council, 2006) การแสดงฟลูออไรด์ที่มีความเข้มข้นสูงในระยะยาวสามารถเพิ่มการดูดซึมฟลูออรีนของร่างกายผ่านทางระบบทางเดินหายใจ

และทางเดินอาหาร การบริโภค F มากเกินไปอาจทำให้เกิดความเสียหายต่อกระดูกและอวัยวะที่ไม่ใช่กระดูกของร่างกาย ความเสียหายของเนื้อเยื่ออ่อนภายนอกกระดูกมักเรียกว่าความเสียหายที่ไม่ใช่กระดูก ปัจจุบันพบว่าความเสียหายของเนื้อเยื่อที่ไม่ใช่กระดูกที่เกิดจาก F เกี่ยวข้องกับระบบย่อยอาหาร ตับไต, สมอง เป็นต้น (Jha et al., 2011; Perumal et al., 2013).

ดิไตซึ่งเป็นอวัยวะขับถ่ายหลักของร่างกาย มีหน้าที่ในการเผาผลาญสารพิษและสารพิษจากภายนอกในร่างกาย จากการศึกษาพบว่าประมาณ 50–80 เปอร์เซ็นต์ของฟลูออไรด์ที่ร่างกายกินเข้าไปจะถูกกรองและดูดซึมกลับโดยไตและฟลูออรีนที่เหลือสะสมในเนื้อเยื่อและอวัยวะอื่น (Chen et al., 2013; Dharmaratne, 2019). วรรณกรรมหลายประเภทแสดงให้เห็นว่าการได้รับ 50 และ 100 มก./LF อาจทำให้โพรงแคปซูลไตขยายตัว การฝ่อของไตหลอด, การจัดเรียงของเซลล์ papillary ไม่สม่ำเสมอ, การตีบของลูเมน, ส่งผลให้อะพอพโทซิสของไตเซลล์และการเสื่อมสภาพของหน้าที่ทางชีวเคมี เช่น ครีเอตินิน (CRE) กรดยูริก (UA)แคลเซียม(Ca) และฟอสฟอรัส (P) (Song et al., 2014; HW Wang et al., 2020; Wei et al., 2018a)

อะพอพโทซิสการตายของเซลล์ชนิดหนึ่งที่ควบคุมโดยยีน ซึ่งแบ่งออกเป็นภายนอกร่างกายอะพอพโทซิสและภายนอกอะพอพโทซิส. รายงานล่าสุดระบุว่าอะพอพโทซิสที่เกิดจาก F สูงส่วนใหญ่รวมถึง mitochondria-mediated, เอนโดพลาสมิก reticulum เป็นสื่อกลางกับความเครียดและเส้นทางที่รับความตายเป็นสื่อกลาง (Wei et al., 2018a) การทดลองก่อนหน้านี้ในกลุ่มของเราชี้ให้เห็นว่า NaF กระตุ้นกระดูกและตับอะพอพโทซิสผ่านวิถีเอนโดพลาสมิกเรติเคิล (ER) ภายในเซลล์และวิถียล (Li et al., 2021; J. Wang et al., 2020; Wang et al., 2019) นอกจากนี้ การศึกษายังแสดงให้เห็นว่าวิถีไมโตคอนเดรียเกี่ยวข้องกับการกระตุ้นด้วย NaFอะพอพโทซิสของหนูไต(Wei et al., 2018b). อย่างไรก็ตาม ไม่มีการศึกษาอย่างเป็นระบบเกี่ยวกับวิถีที่รับการตายจากตัวรับความตายในการเหนี่ยวนำโดย Fไตอะพอพโทซิส. เส้นทางการรับความตายครอบงำทุกขั้นตอนของภายนอกอะพอพโทซิสซึ่งรวมถึงเส้นทาง Fas cell surface death receptor (FAS) ทางเดินของ tumor necrosis factor (TNF) และที่เกี่ยวข้องกับ TNFอะพอพโทซิส-inducing ลิแกนด์ (TRAIL) ทางเดิน (Grunert et al., 2012; Lu et al., 2017; Wang and Su, 2018) ทางเดิน FAS เป็นระบบการส่งสัญญาณดั้งเดิมที่สื่อกลางอะพอพโทซิส. FAS มีลักษณะเฉพาะของตัวรับเมมเบรนและก่อตัวเป็นทริมเมอร์หลังจากจับกับลิแกนด์ FAS (FAS-L) จากนั้นโดเมนจำเพาะของ trimer จะจับกับโดเมนแห่งความตาย (DD) ของโมเลกุล connexin ที่สอดคล้องกัน FAS-associated death domain protein (FADD) เพื่อสร้างสารเชิงซ้อนของสัญญาณที่เหนี่ยวนำให้เกิดการตาย (DISC) (Wang and Su, 2018) ในกระบวนการถ่ายทอดสัญญาณทางชีวภาพต่อไปนี้ FADD สามารถกระตุ้น Caspase 8 และตระกูล Caspase ได้ในเวลาเดียวกัน และในที่สุดก็นำไปสู่อะพอพโทซิสผ่านการมีส่วนร่วมของเอฟเฟกต์ Caspase 3 และ poly ADP-ribose polymerase (PARP) (Kischkel et al., 2000; Meynier และ Rieux-Laucat, 2019) การศึกษาเมื่อเร็ว ๆ นี้แสดงให้เห็นว่าเส้นทางของ FAS เป็นตัวกลางอะพอพโทซิสในทีเซลล์และระหว่างไตความล้มเหลวที่เกิดจากซิสพลาติน (Djiadeu et al., 2017; Linkermann et al., 2011) นอกจากนี้ จากการศึกษายังได้รายงานว่า NaF ก่อให้เกิดอะพอพโทซิสในหนูผ่านทางเดิน FAS (Sun et al., 2017). TRAIL เป็นไซโตไคน์ที่ได้รับการยอมรับในตระกูล TNF มันจับกับรีเซพเตอร์ตัวเอกที่คล้ายคลึงกัน นั่นคือตัวรับความตาย (DR4 และ DR5) มี DD อยู่ในบริเวณเซลลูลาร์ DD จำเป็นสำหรับการจัดหาโปรตีนดัดแปลง FADD FADD จะกระตุ้นให้ปล่อย Caspases เข้าสู่ไซโตพลาสซึม เปิดใช้งาน Caspase 3 cleaves PARP และยับยั้งศักยภาพในการซ่อมแซม DNA ส่งผลให้อะพอพโทซิส(Bodmer et al., 2000; Micheau, 2018). มีการบอกเป็นนัยว่าเส้นทาง TRAIL/DR5 เกี่ยวข้องกับ NaF ที่เหนี่ยวนำให้เกิดอะพอพโทซิสในหนู (Song et al., 2021) Osteoprotegerin (OPG) เป็นตัวรับที่ละลายได้อิสระซึ่งไม่มีโดเมนของเมมเบรน สามารถยับยั้ง TRAIL-mediatedอะพอพโทซิสโดยการยับยั้งการผูกมัดของ TRAIL และตัวรับความตายอื่น ๆ (Duiker et al., 2006; Kiraz et al., 2016; Micheau, 2018) การจับของตัวรับ TNF และ TNF (TNF-R1) สามารถกระตุ้นการจัดหาโปรตีนที่เกี่ยวข้องกับ Death Domain (TRADD) ของ TNFR ผ่านทาง DD ของมัน หลังจากนั้น TRADD จะมีปฏิสัมพันธ์กับ FADD ซึ่งนำไปสู่การสรรหาโปรคาสเปส 8 ซึ่งแยกออกเป็นแคสเปส 8 ที่ใช้งานอยู่ด้วยเอนไซม์สลายโปรตีน Caspase 8 เปิดใช้งาน Caspase 3 ซึ่งมีหน้าที่ในเซลล์อะพอพโทซิส(Kiraz et al., 2016; Sedger และ McDermott, 2014). มีรายงานว่า NaF กระตุ้นเซลล์ตับอะพอพโทซิสในหนูผ่านเส้นทางสัญญาณ TNF-R1 (Lu et al., 2017)

แคลเซียมมีบทบาทที่หลากหลายในองค์ประกอบของกระดูกและฟัน และยังสามารถควบคุมการส่งผ่านเส้นประสาทและการปล่อยสาร (Cao et al., 2016) มีส่วนร่วมในระบบแคลเซียมสภาวะสมดุล (Carmeliet et al., 2003; Yang et al., 2016), เปลี่ยนการซึมผ่านของเมมเบรน (Lappe et al., 2017) กระตุ้นการหลั่งของเอนไซม์และฮอร์โมนต่างๆ (Kim et al., 2012) เป็นต้น การศึกษาก่อนหน้านี้จำนวนมากพบว่า F และ Ca มีผลเป็นปฏิปักษ์ในชีววิทยา (Dure-Smith et al., 1996; Nobrega et al., 2019) เมื่อ F ถูกดูดซึมโดยร่างกาย มันจะเข้าสู่กระแสเลือดเพื่อสร้างตะกอน CaF2 ที่ไม่ละลายน้ำ หากปริมาณ Ca ไม่เพียงพอและเลือด Ca ไม่ถึงระดับที่เหมาะสม จะมีการเปลี่ยนแปลงทางพยาธิวิทยา เช่น แคลเซียมในเลือดต่ำและการสลายตัวของกระดูก ดังนั้นอาหารเสริมของ Ca จึงมีบทบาทสำคัญในการป้องกันและปรับปรุงฟลูออโรซิส (Dure-Smith et คณะ, 1996; Li et al., 2021; Yang et al., 2021) กลุ่มของเราได้ยืนยันแล้วว่าการรับประทานอาหารแคลเซียมสามารถบรรเทาอะพอพโทซิสของกระดูกและตับผ่านเส้นทางสัญญาณ PI3K-AKT ทางเดิน ER และทางเดินไมโตคอนเดรีย (Li et al., 2021; J. Wang et al., 2020; Wang et al., 2019; Yang et al., 2021) เพื่อเป็นการพิสูจน์ต่อไปว่าแคลเซียมลดทอนความเป็นพิษต่อไตของ F ผ่านตัวรับความตายอะพอพโทซิสทางเราได้สร้างแบบจำลองหนูสำหรับอาหารที่มีฟลูออไรด์สูงแคลเซียมและประเมินค่าไตดัชนีการบาดเจ็บ ระดับของอะพอพโทซิสและการเปลี่ยนแปลงของยีนมาร์กเกอร์และการแสดงออกของโปรตีนในตัวรับความตายอะพอพโทซิสทางเดิน.

วัสดุและวิธีการ

เคมีภัณฑ์และเครื่องมือ

น้ำกลั่นเตรียมโดยระบบทำน้ำให้บริสุทธิ์ Heal Force (เซี่ยงไฮ้ ประเทศจีน) การทดสอบด้วยคลื่นวิทยุ immunoprecipitation assay (RIPA) ไลซิสบัฟเฟอร์และโซเดียมฟลูออไรด์ (NaF) จัดทำโดย Sigma-Aldrich (เซี่ยงไฮ้ ประเทศจีน) ฟอร์มาลิน 10 เปอร์เซ็นต์, ไกลซีน, โซเดียมโดเดซิลซัลเฟต (SDS), TRIS, Phenylmethylsulfonyl fluoride (PMSF), CaCO3, เมมเบรนไนโตรเซลลูโลส (NC), ชุด Bicinchoninic Acid (BCA) และชุดย้อมสี hematoxylin-eosin (H&E) จาก Solarbio Technology Co ., Ltd. (ปักกิ่ง ประเทศจีน). น้ำยา Trizol ได้มาจากบริษัท Takara Biological Engineering (เมืองต้าเหลียน ประเทศจีน) ซื้อชุด CRE, UA, ยูเรียไนโตรเจนในเลือด (BUN), แมกนีเซียม (Mg), P และโพแทสเซียม (K) จาก Nanjing Jiancheng Bioengineering Institute (Nanjing, China) ในสถานที่อะพอพโทซิสซื้อชุดตรวจ, FAS Rabbit Polyclonal antibody (BA0484) และ FAS-L Rabbit Polyclonal antibody (PB0042) จาก Boster Biotechnology (หวู่ฮั่น ประเทศจีน) -actin Rabbit Polyclonal antibody (20536-1-AP), FADD Rabbit Polyclonal antibody (14906-1-AP), Caspase 8 Rabbit Polyclonal antibody (13423-1-AP), Caspase 3 Rabbit Polyclonal แอนติบอดี ({{9 }}AP) และ HRPconjugated Affinipure Goat Anti-Rabbit IgG(H plus L) (SA00001–2) ได้มาจาก Proteintech Group (หวู่ฮั่น ประเทศจีน) TRAL Rabbit Polyclonal Antibody (bs-1214R), TNF alpha Rabbit Polyclonal antibody (bs2081R), PARP Rabbit Polyclonal Antibody (bs-55164R) ถูกซื้อมาจาก Bioss (ปักกิ่ง ประเทศจีน) Electrochemical luminescence (ECL) และ 3,3′-diaminobenzidine (DAB) ถูกซื้อจาก KeyGen Biotech (มณฑลเจียงซู ประเทศจีน) PrimeScript® RT Master Mix และ SYBR® Premix Ex Taq™ II Kit ให้บริการโดย Promega Biotechnology (ปักกิ่ง ประเทศจีน)

สัตว์และการรักษา

หนู Sprague-Dawley (SD) เพศผู้อายุสี่สิบสิบตัว (120 ± 20 ก.) แข็งแรงสมบูรณ์อายุหนึ่งสัปดาห์ (120 ± 20 ก.) ได้รับจากศูนย์สัตว์ทดลองของมหาวิทยาลัยการแพทย์ชานซี (ชานซี ประเทศจีน) หนูถูกปรับสภาพให้เคยชินเป็นเวลาหนึ่งสัปดาห์ โดยสุ่มแบ่งออกเป็นสี่กลุ่ม (หนู 10 ตัวต่อกลุ่ม): กลุ่มควบคุม (C), กลุ่ม NaF (F), NaF บวก 0.5 เปอร์เซ็นต์ กลุ่ม CaCO3 (F บวก 0.5 เปอร์เซ็นต์ Ca), NaF บวก 1 เปอร์เซ็นต์ กลุ่ม CaCO3 (F บวก 1 เปอร์เซ็นต์แคลเซียม) และได้รับการบำบัดตามตารางที่ 1 หนูทุกตัวถูกเลี้ยงในกรงพลาสติกที่อุณหภูมิ 22-25 ◦C (ความชื้น 55 ± 5 เปอร์เซ็นต์ รอบแสง/มืด 12 ชั่วโมง) อาหารและน้ำดื่มสามารถเข้าถึงได้ฟรี

หลังจากเลี้ยงได้ 17 สัปดาห์ หนูอดอาหารเป็นเวลา 24 ชั่วโมง และดื่มน้ำได้ฟรี จากนั้นหนูก็ถูกวางยาสลบด้วยโซเดียมเพนโทบาร์บิทัลและเสียสละโดยปากมดลูกเคลื่อนหลังจากเก็บเลือดจากลูกตา เก็บเลือดบางส่วนโดยหลอดที่มีสารกันเลือดแข็งเฮปารินโซเดียมสำหรับการทดสอบ BUN ส่วนหนึ่งของเลือดถูกใส่ลงในหลอดทดลองทั่วไป วางไว้ที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 2 ชั่วโมง จากนั้นปั่นเหวี่ยงที่ 3000 รอบต่อนาที/นาที เป็นเวลา 10 นาที เพื่อแยกซีรั่ม ซีรั่มถูกแยกออกจากการทดสอบ CRE, UA, Mg, P, K และ F แปดตัวอย่างของไตจากแต่ละกลุ่มถูกสุ่มเลือกและแช่แข็งอย่างรวดเร็วในไนโตรเจนเหลว และจากนั้นเก็บไว้ที่ − 80 ◦C สำหรับ qRT-PCR และการทดลองแบบ Western blotting ตัวอย่างอื่นๆ ของไตถูกตรึงในฟอร์มาลิน 10 เปอร์เซ็นต์สำหรับการตรวจทางจุลพยาธิวิทยาและการทดลอง dUTP nick end labeling (TUNEL) ที่อาศัยสื่อกลาง deoxynucleotidyl transferase การดำเนินการทดลองที่เกี่ยวข้องกับสัตว์ทั้งหมดได้รับการดำเนินการอย่างเคร่งครัดภายใต้ข้อบังคับของสถาบันการดูแลสัตว์และคณะกรรมการการใช้งานของมหาวิทยาลัยเกษตรซานซี ชานซี ประเทศจีน

ไตค่าสัมประสิทธิ์

หนูถูกชั่งน้ำหนักก่อน แล้วก็ไตเนื้อเยื่อถูกนำออกและชั่งน้ำหนัก ดิไตสัมประสิทธิ์ได้มาจากสูตรต่อไปนี้

ไตค่าสัมประสิทธิ์=[ไตน้ำหนักเปียก (g) / น้ำหนักตัว (g)] ×100 เปอร์เซ็นต์

การตรวจทางจุลพยาธิวิทยา

ไตตัวอย่างถูกฝังในพาราฟิน ส่วน (ความหนา 5 μm) ของไตถูกย้อมโดย H&E จากนั้น สังเกตภาพนิ่งโดยใช้กล้องจุลทรรศน์แบบใช้แสง (Olympus, Tokyo, Japan) ความรุนแรงของไตการบาดเจ็บตัดสินโดยคะแนนทางจุลพยาธิวิทยาไตการบาดเจ็บที่ท่อถูกกำหนดเป็นไตร่างกายเสื่อมโทรมและเสียรูปไตช่องแคปซูลกว้างขึ้น theไตท่อก่อตัวเป็นเฝือกและเซลล์เยื่อบุผิวหลุดออก เมื่อขยาย 200 เท่า เกณฑ์ต่อไปนี้ถูกใช้เพื่อประเมินระดับการบาดเจ็บของตับ 1: ความเสียหาย 0–25 เปอร์เซ็นต์; 2: ความเสียหาย 25–50 เปอร์เซ็นต์; 3: ความเสียหาย 50–75 เปอร์เซ็นต์; 4: ความเสียหาย 75–100 เปอร์เซ็นต์ (Baranova et al., 2016)

ความมุ่งมั่นของไต- ตัวชี้วัดที่เกี่ยวข้อง

ระดับของ F วัดโดยอิเล็กโทรดเฉพาะไอออน F (Quadri et al., 2018) ระดับของ CRE, UA, BUN, Mg, P และ K ถูกวัดโดยใช้ชุดเครื่องมือที่มีจำหน่ายทั่วไป ขั้นตอนที่เกี่ยวข้องทั้งหมดได้ดำเนินการตามคำแนะนำของผู้ผลิต

การตรวจจับของอะพอพโทซิสระดับโดย TUNEL

เพื่อที่จะหาปริมาณอะพอพโทซิสในไตเซลล์ วิเคราะห์เชิงทดลองโดยใช้ situอะพอพโทซิสชุดตรวจจับ ดิไตแยกส่วนออกจากพาราฟินแล้วนำไปย่อยโดยใช้ Proteinase K. Terminal Deoxynucleotidyl Transferase สามารถทำเครื่องหมาย dUTP ที่ติดฉลากด้วยดิจอกซิน (DIG-dUTP) ที่ปลาย 3′-OH และ DIG-dUTP จะจับกับเบรกพอยต์ของ DNA หลังจากทำปฏิกิริยากับสารต้านไบโอมาร์คเกอร์ -ขุด-ไบโอติน. รวมกับ DAB ถูกเพิ่มเพื่อแสดง สำหรับการมองเห็น

นิวเคลียสทั้งหมด ส่วนต่างๆ ถูกย้อมด้วย hematoxylin สัญญาณสีน้ำตาลเข้มบ่งบอกถึงเซลล์บวก และสีน้ำเงินหมายถึงเซลล์ที่ไม่ตอบสนอง ดิอะพอพโทซิสดัชนีคำนวณตามสูตรต่อไปนี้

สัดส่วนของเซลล์ apoptotic=(จำนวนเซลล์ apoptotic ต่อโหนด / จำนวนเซลล์ทั้งหมดต่อโหนด) ×100 เปอร์เซ็นต์

PCR แบบเรียลไทม์เชิงปริมาณ (qRT-PCR)

รวม RNA จากไตสกัดโดยใช้รีเอเจนต์ Trizol เราใช้สเปกโตรโฟโตมิเตอร์ ND{0}} สเปกโตรโฟโตมิเตอร์ (nano-drop, USA) และ agarose gel electrophoresis เพื่อตรวจสอบคุณภาพและปริมาณของ RNA การถอดรหัสย้อนกลับ (RT) ดำเนินการกับ RNA ทั้งหมด 500 ng โดยใช้ PrimeScript® RT Master Mix ไพรเมอร์เฉพาะสำหรับ -actin และ FAS, TRAIL, TNF และยีนอื่นๆ ได้รับการออกแบบโดยซอฟต์แวร์ Primer Premier 7.0 (ตารางที่ 2) และสังเคราะห์โดย Sangon Biotech (เซี่ยงไฮ้ ประเทศจีน) Quantstudio 7 ระบบ PCR แบบเรียลไทม์แบบยืดหยุ่น (thermo-fisher, USA) และ SYBR® Premix Ex Taq™ II Kit ใช้สำหรับ RT-PCR ปริมาตรของปฏิกิริยา PCR คือ 20 ไมโครลิตร และสภาวะ RT-PCR คือ: 95 ◦C 10

นาที 40 รอบ 95 ◦C 15 วินาที 55 ◦C 30 วินาที 72 ◦C 30 วินาที และสุดท้ายหนึ่งรอบ 95 ◦C 15 วินาที 60 ◦C 15 วินาที 95 ◦C 15 วินาที ปฏิกิริยาทั้งหมดถูกทำซ้ำสามครั้ง วิธีสัมพัทธ์ 2-ΔΔCt ใช้ในการคำนวณระดับการแสดงออกของ mRNA สัมพัทธ์ และ -actin ถูกใช้เป็นเครื่องมือสอบเทียบ ในกระบวนการนี้ ความแตกต่างด้านประสิทธิภาพน้อยกว่า 5 เปอร์เซ็นต์

การสกัดโปรตีนทั้งหมดและการวิเคราะห์ Western blotting

ดิไตล้างเนื้อเยื่อด้วย PBS ทำให้แห้งด้วยกระดาษกรอง และสลายตัวในการสลาย RIPA (มี PMSF) ที่ 12,000 รอบต่อนาที/นาที 4^◦C เป็นเวลา 10 นาที ความเข้มข้นของโปรตีนถูกกำหนดโดยใช้ชุด Bicinchoninic Acid (BCA) (Solarbio Science & Technology, Beijing, China) ตัวอย่างโปรตีน 35 ng ถูกสกัดสำเร็จและแยกบนเจล SDS-polyacrylamide 8 เปอร์เซ็นต์โดยอิเล็กโตรโฟรีซิส โปรตีนเป้าหมายถูกถ่ายโอนไปยังเมมเบรน NC และเมมเบรน NC ถูกบล็อกด้วยนมที่ไม่มีไขมัน 5 เปอร์เซ็นต์ที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 2 ชั่วโมง หลังจากนั้น เยื่อหุ้ม NC ถูกฟักด้วยแอนติบอดีปฐมภูมิของ -แอคติน (1:1000), TRAIL (1:500), FAS (1:500), FAS-L (1:100), TNF (1:500), FADD (1:500), Caspase 8 (1:500), Caspase 3 (1:500) และ PARP (1:1000) ที่ 4 องศาในชั่วข้ามคืน หลังจากล้าง 3 ครั้งด้วย PBST, เยื่อหุ้ม NC ถูกบ่มด้วยแอนติบอดี IgG ต้านกระต่ายของแพะรอง HRP ที่คอนจูเกต (1:2000) ที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 2 ชั่วโมง ECL ถูกใช้เพื่อแสดงภาพแถบโปรตีนเป้าหมาย ความหนาแน่นของแสงคำนวณโดยซอฟต์แวร์ AlphaView (เวอร์ชัน: 3.2.2.0) บนระบบ FluorChem Q (Alpha Innotech, CA, USA)

การวิเคราะห์ทางสถิติ

ซอฟต์แวร์ GraphPadPrism{{0}} ใช้เพื่อจัดระเบียบและวิเคราะห์ข้อมูลการทดลอง และแต่ละข้อมูลแสดงด้วยค่าเฉลี่ย± SEM ความสำคัญของความแตกต่างระหว่างค่าเฉลี่ยถูกกำหนดโดยการวิเคราะห์ความแปรปรวน (ANOVA) ตามด้วยการทดสอบของ Tukey โดยถือว่า P <0.05>

ผลลัพธ์

การเปลี่ยนแปลงในไตตัวบ่งชี้ค่าสัมประสิทธิ์และฟังก์ชันทางชีวเคมี

ดิไตค่าสัมประสิทธิ์และระดับของ F, CRE, BUN, UA, Mg, P, K แสดงในรูปที่ 1 เมื่อเปรียบเทียบกับกลุ่ม Cไตค่าสัมประสิทธิ์ลดลงอย่างมีนัยสำคัญในกลุ่ม F (p < 0.05)="" อย่างไรก็ตาม="" ค่าสัมประสิทธิ์ไตใน="" f="" บวก="" 1="">แคลเซียมกลุ่มแสดงให้เห็นการเพิ่มขึ้นอย่างมีนัยสำคัญเมื่อเทียบกับกลุ่ม F (p < {0}}}.05)="" ระดับ="" f="" ในกลุ่ม="" f="" สูงกว่ากลุ่ม="" c="" อย่างเห็นได้ชัด="" (p="">< 0.001)="" ที่น่าสนใจเมื่อเทียบกับกลุ่ม="" f="" ระดับ="" f="" ในกลุ่ม="" f="" บวก="" 1="" เปอร์เซ็นต์="" ca="" ลดลงอย่างมีนัยสำคัญ="" (p=""><>

CRE, BUN และ UA ได้รับการประเมินเพื่อสะท้อนถึงระดับของไตความเสียหายและการเปลี่ยนแปลงการทำงาน ระดับของ CRE, BUN และ UA เพิ่มขึ้นอย่างชัดเจนในกลุ่ม F เมื่อเทียบกับระดับในกลุ่ม C (p < 0.05)="" อย่างไรก็ตาม="" เมื่อเทียบกับกลุ่ม="" f="" ตัวบ่งชี้ทั้งสามข้างต้นมีความโดดเด่น="" ลดลงใน="" f="" บวก="" 1="">แคลเซียมกลุ่ม (p < 0.05)="" mg,="" p="" และ="" k="">ไตการทำงาน. เมื่อเปรียบเทียบกับกลุ่ม C ระดับของซีรั่ม Mg ลดลงอย่างมีนัยสำคัญ ระดับของ P และ K เพิ่มขึ้นอย่างมากในกลุ่ม F (p < 0.05)="" อย่างไรก็ตาม="" บวก="" 1="">แคลเซียมในการรับประทานอาหารทำให้ระดับ Mg ในซีรัมเพิ่มขึ้น 15.3 เปอร์เซ็นต์ (p < 0.05)="" และลดระดับ="" p="" ในซีรัมลงอย่างเห็นได้ชัด="" 16.9="" เปอร์เซ็นต์="" (p="">< 0.05)="" เนื้อหาของซีรั่ม="" k="" มีแนวโน้มลดลงโดยไม่มีนัยสำคัญหลังจากเสริม="" 1="" เปอร์เซ็นต์="" ca="">

การเปลี่ยนแปลงในไตสัณฐานวิทยา

การเปลี่ยนแปลงทางสัณฐานวิทยาของไตเนื้อเยื่อถูกตรวจสอบโดย H&E (รูปที่ 2I-Ⅳ, ⅰ-ⅳ) ในกลุ่มซีไตเซลล์รูปท่อถูกจัดเรียงอย่างแน่นหนา สัณฐานวิทยาเป็นปกติ และสัณฐานวิทยาของโกลเมอรูไลไม่บุบสลาย อย่างไรก็ตาม ขอบเขตระหว่างเซลล์ไม่ชัดเจนไตcorpuscles เสื่อมและพิการ, theไตช่องแคปซูลกว้างขึ้น theไตtubules ก่อตัวเป็น cast และเซลล์เยื่อบุผิวก็แยกออกจากกันในกลุ่ม F เมื่อเปรียบเทียบกับกลุ่ม F โดยมีการเพิ่มขึ้นของแคลเซียมความเข้มข้น การจัดเรียงของไตเซลล์ค่อยๆ เป็นระเบียบมากขึ้น สัณฐานวิทยาของไตเม็ดโลหิตค่อยๆ ฟื้นตัว และระดับของการบาดเจ็บก็ค่อยๆ บรรเทาลง นอกจากนี้เรายังประเมินความเสียหายโดยใช้ไตคะแนน (รูปที่ 2Ⅴ). คะแนนของกลุ่ม F สูงกว่ากลุ่ม C อย่างมีนัยสำคัญ (p < 0.01);="" อย่างไรก็ตาม="" คะแนน="" f="" บวก="" 1="">แคลเซียมกลุ่มลดลงอย่างเห็นได้ชัดเมื่อเทียบกับกลุ่ม F (p < 0.05)

TUNEL ตรวจจับไตเซลล์อะพอพโทซิส

เราทำการทดสอบ TUNEL เพื่อตรวจจับและวิเคราะห์ว่าไตเซลล์ได้ผ่านอะพอพโทซิสในการศึกษานี้ (รูปที่ 3I-Ⅳ, ⅰ-ⅳ)ไตเนื้อเยื่อในกลุ่ม C ถูกจัดเรียงอย่างเป็นระเบียบ โดยมีเซลล์ apoptotic น้อยลง (4.67 ± 1.15 เปอร์เซ็นต์ ) กลุ่ม F แสดง TUNEL-positive จำนวนมากไตเซลล์เยื่อบุผิวท่อ (48.17 ± 3.94 เปอร์เซ็นต์ ) ในทางตรงกันข้าม F บวก 1 เปอร์เซ็นต์แคลเซียมกลุ่มแสดงจำนวนเซลล์ที่เป็นบวกของ TUNEL ลดลงอย่างมาก (28.83 ± 4.81 เปอร์เซ็นต์ ) (รูปที่ 3Ⅴ)

ผลกระทบของแคลเซียมเกี่ยวกับการเปลี่ยนแปลงที่เกิดจาก F ในยีนที่เกี่ยวข้องกับทางเดินของตัวรับความตาย

ระดับการแสดงออกของ mRNA สัมพัทธ์ของปัจจัยต้นน้ำที่เกี่ยวข้องกับตัวรับความตายอะพอพโทซิสวิถี (TRAIL, DR5, TNF, TNFR1, TNF-R2, FAS, FAS-L, OPG) ถูกเปิดเผยในรูปที่ 4a เทียบกับกลุ่ม C ระดับการแสดงออก mRNA ของ TRAIL, DR5, TNF, TNF-R1, TNFR2, FAS และ FAS-L ถูกทำให้ดีขึ้นอย่างเด่นชัดในหนูที่ได้รับการบำบัดด้วย F (p < 0.01)="" ในทางตรงกันข้าม="" การแสดงออก="" mrna="" สัมพัทธ์ของ="" trail,="" tnf,="" tnf-r2,="" fas="" และ="" fas-l="" ลดลงอย่างเห็นได้ชัดใน="" f="" บวก="" 1="">แคลเซียมเทียบกับกลุ่ม F (p < {{0}}.05)="" เมื่อเปรียบเทียบกับกลุ่ม="" c="" พบว่าระดับการแสดงออกของ="" mrna="" ของ="" opg="" ในกลุ่ม="" f="" ลดลงอย่างเห็นได้ชัด="" (p="">< 0.01)="" อย่างไรก็ตาม="" สัมพันธ์กับกลุ่ม="" f="" opg="" ใน="" f="">แคลเซียมกลุ่มเพิ่มขึ้น ปัจจัยปลายทาง FADD, TRADD, Caspase 8, Caspase 3 และระดับการแสดงออกของ mRNA สัมพัทธ์ของ PARP ถูกแสดงในรูปที่ 4b การแสดงออกของโปรตีนของ FADD, TRADD, Caspase 8, Caspase 3 และ PARP เพิ่มขึ้นอย่างเห็นได้ชัดในกลุ่ม F เมื่อเทียบกับกลุ่ม C (p <{5}}.01) แต่ลดลงอย่างเห็นได้ชัดในกลุ่ม="" f="">แคลเซียมกลุ่ม เมื่อเปรียบเทียบกับกลุ่ม F (p < 0.05)

ผลกระทบของแคลเซียมเกี่ยวกับการเปลี่ยนแปลงที่เกิดจาก F ในอะพอพโทซิส- โปรตีนที่เกี่ยวข้อง

การแสดงออกของโปรตีนของ TRAIL, FAS, FAS-L, TNF, FADD, Caspase 8, Caspase 3 และ PARP ถูกตรวจพบโดย Western blotting (รูปที่ 5a, b) เมื่อเปรียบเทียบกับกลุ่ม C การแสดงออกของโปรตีนของ TRAIL, FAS, FAS-L, TNF, FADD, Caspase 8, Caspase 3 และ PARP ในกลุ่ม F ถูกยกระดับอย่างเห็นได้ชัด (p < 0.01)="" การแสดงออกของโปรตีนของปัจจัยทั้งหมดข้างต้นลดลงอย่างเห็นได้ชัดใน="" f="" บวก="" 1="">แคลเซียมกลุ่มเมื่อเปรียบเทียบกับกลุ่ม F (p < 0.05)

การอภิปราย

หลักฐานล่าสุดพิสูจน์ว่า F สามารถทำให้เกิดแผลที่เนื้อเยื่ออ่อน และระดับของความเสียหาย F ขึ้นอยู่กับความเข้มข้นของ F เวลาสัมผัส และประเภทของอวัยวะ (Wei et al., 2019) ในการศึกษานี้ NaF 100 มก./ลิตร ถูกใช้เป็นเวลา 17 สัปดาห์เพื่อสร้างแบบจำลองสัตว์ทดลองที่ได้รับสาร NaF ในระดับกึ่งเฉียบพลันในน้ำดื่ม ปริมาณของ NaF จะถูกเลือกตามระดับมลพิษของ F ในสิ่งแวดล้อมและปัจจัยที่ไม่แน่นอนของสายพันธุ์ต่างๆ เนื่องจากความเข้มข้นของ F- ตามธรรมชาติที่วัดได้ในน้ำใต้ดินในท้องถิ่นคือประมาณ 4.5 มก./ลิตร น้ำกลั่นที่มี NaF 100 มก./ลิตร ที่ใช้ในการศึกษานี้ (ความเข้มข้นของ F- อยู่ที่ประมาณ 45 มก./ลิตร) คำนวณตามปัจจัยที่ไม่แน่นอนสำหรับ การคาดการณ์จากสัตว์สู่มนุษย์ที่ 10 (แนวทางสำหรับคุณภาพน้ำดื่ม 2017; Mukherjee and Singh, 2021; Wen et al., 2013; Zhang et al., 2020) การศึกษาเบื้องต้นพบว่าการรับประทานอาหารแคลเซียมสามารถส่งผลต่อการดูดซึมฟลูออรีน ส่งเสริมการขับฟลูออรีนในร่างกาย ลดอัตราการดูดซึมฟลูออรีน และลดความเป็นพิษของ F (Harrison et al., 1984; Larsen et al., 1981) การศึกษาทดลองล่าสุดของเราแสดงให้เห็นว่า Ca บรรเทาการบาดเจ็บของกระดูกและตับที่เกิดจาก F โดยการยับยั้งเส้นทางภายในของอะพอพโทซิส(Li et al., 2021; J. Wang et al., 2020; Wang et al., 2019). อย่างไรก็ตาม จนถึงตอนนี้ การวิจัยเกี่ยวกับผลการป้องกันของ Ca ต่อความเป็นพิษต่อไตที่เกิดจาก F และกลไกที่เกี่ยวข้องนั้นไม่เคยมีมาก่อน ที่นี่ เรารายงานว่า Ca บรรเทา F-inducedไตความเสียหาย. นอกจากนี้ เรายังพบว่า Ca กลับตรงกันข้ามกับที่เหนี่ยวนำโดย Fไตเซลล์อะพอพโทซิสผ่านตัวรับความตายอะพอพโทซิสเส้นทาง (เส้นทาง FAS/FASL, TNFR/TNF, DR5/TRAIL) การสะสม F ในระยะยาวในไตสามารถนำไปสู่โครงสร้างเนื้อเยื่อและความเสียหายจากการทำงาน ในการศึกษานี้ เราพบว่าการได้รับสาร NaF ทำให้เกิดไตเซลล์อะพอพโทซิสในหนูพร้อมกับไตเสื่อมและการเสียรูปไตการขยายช่องแคปซูล,ไตท่อหล่อขึ้นรูปและเซลล์เยื่อบุผิวหลุดออก อย่างไรก็ตาม,ไตความเสียหายบรรเทาลงอย่างมีนัยสำคัญหลังการเสริม 1 เปอร์เซ็นต์ Ca ผลลัพธ์เหล่านี้คล้ายกับผลลัพธ์ที่ได้รับในรายงานก่อนหน้า (Cao et al., 2015; HW Wang et al., 2020)

CRE เป็นตัวเผาผลาญของกล้ามเนื้อ UA เป็นผลิตภัณฑ์สุดท้ายของการเผาผลาญ purine และ BUN เป็นผลิตภัณฑ์หลักในการเผาผลาญโปรตีนของร่างกาย ซึ่งถูกขับออกมาโดยการกรองของไตและมักใช้เพื่อตรวจจับไตฟังก์ชั่น (Myers et al., 2006; HW Wang et al., 2020) การสำรวจทางชีวเคมีของภูมิภาค F สูงแสดงให้เห็นว่าอัตราการกรองไตลดลงอย่างมีนัยสำคัญ และ F, UA และ BUN เปลี่ยนแปลงอย่างมีนัยสำคัญ (Malin et al., 2019) จากการทดสอบในสัตว์ทดลองพบว่าซีรั่ม CRE,แคลเซียมและความเข้มข้นของ P ลดลงอย่างมีนัยสำคัญในหนูทดลองที่ได้รับ NaF 100 มก./ลิตร ซึ่งบ่งชี้ว่า F รบกวนไตฟังก์ชั่นเช่นเดียวกับการเผาผลาญ Ca และ P (HW Wang et al., 2020) ความเป็นพิษต่อไตที่เกิดจาก F เกี่ยวข้องกับไตความผิดปกติ เมื่อไรไตการทำงานแย่ลง การขับถ่ายของ F ในร่างกายลดลง ทำให้เกิดการสะสมของฟลูออรีนมากเกินไปในไตและเพิ่มความเป็นพิษของ F (Kido et al., 2017). เมื่อไตมีความบกพร่องอย่างร้ายแรง

การขับถ่ายของ F ในปัสสาวะลดลงและความเข้มข้นของ F ในซีรัมเพิ่มขึ้นอีก (Dharmaratne, 2019). ในการศึกษานี้ เราสังเกตว่าระดับของ BUN และซีรั่ม CRE, UA, P, K ในหนูที่ได้รับการรักษาด้วย 100 มก./ลิตร NaF เพิ่มขึ้นอย่างมีนัยสำคัญ ซึ่งบ่งชี้ว่าการได้รับ F สูงทำให้เกิดการเปลี่ยนแปลงในไตตัวชี้วัดทางชีวเคมีในหนูและนำไปสู่ไตความไม่เพียงพอ นอกจากนี้ เรายังชี้ให้เห็นว่าตัวชี้วัดต่างๆ ของไตมักจะเป็นปกติหลังจากแคลเซียมอาหารเสริม แสดงว่า Ca (โดยเฉพาะ 1 เปอร์เซ็นต์แคลเซียม) มีผลบรรเทาอย่างมีนัยสำคัญต่อ F-inducedไตความเสียหายในหนู

Cistancheสามารถช่วยได้ไตความเสียหาย.

อะพอพโทซิสเป็นการตายของเซลล์อย่างอิสระและเป็นระเบียบซึ่งควบคุมโดยยีน ซึ่งมีลักษณะเฉพาะโดยการย่อยสลายของดีเอ็นเอโดยไม่มีการสลายเซลล์ที่ชัดเจน การศึกษานี้สังเกตว่าฟลูออโรซิสทำให้เกิดไตเซลล์อะพอพโทซิสในหนู FAS มีบทบาทสำคัญในการเกิดขึ้นของอะพอพโทซิสและโรคต่างๆ วรรณกรรมล่าสุดเปิดเผยว่า FAS ไกล่เกลี่ยอะพอพโทซิสในไตที่เกิดจากการขาดเลือดกลับคืนมาและเม็ดเลือดขาวของมนุษย์อะพอพโทซิสเกิดจาก N-nitrosodimethylamine (Iwaniuk et al., 2019; Xu

และคณะ, 2019). เมื่อ FAS และ FAS-L รวมกันเป็นทริมเมอร์ สัญญาณโปรอะพอพโทติคจะทำงาน ผลการศึกษาล่าสุดพบว่า F กระตุ้นเซลล์อะพอพโทซิสผ่านเส้นทาง FAS/FAS-L (Xu et al., 2011) ในการศึกษานี้ F เพิ่ม mRNA และการแสดงออกของโปรตีนของ FAS และ FAS-L อย่างมีนัยสำคัญในไต. การควบคุมระดับ FAS และ FAS-L ที่เพิ่มขึ้นแสดงให้เห็นว่าวิถีอะพอพโทติกที่เกี่ยวข้องกับ FAS/FAS-L อาจเกี่ยวข้องกับการเหนี่ยวนำโดย Fอะพอพโทซิส. การจัดหาตัวตัดแต่ง FAS/FAS-L ของ FADD นำไปสู่ความแตกแยกของ Pro-Capase 8 เพื่อผลิต Caspase 8 ที่ใช้งานอยู่ ซึ่งจะกระตุ้น Caspase 3 แล้วจึงนำไปสู่อะพอพโทซิส(Li et al., 2011; Xu et al., 2011). การศึกษานี้ยืนยันว่ามีการกระตุ้น NaF 100 มก./ลิตรอะพอพโทซิสในหนูไตผ่านเส้นทาง FAS/FAS-L ผลลัพธ์ที่สำคัญที่สุดคือการเสริม Ca ช่วยลดอะพอพโทซิส- การกระตุ้นเอฟเฟกต์ของ F ซึ่งเป็นผลมาจากการควบคุม FAS/FAS-L ที่ลดลงและการกระตุ้น Caspases ทุติยภูมิ

TNF คือ pleiotropic cytokine ที่มีส่วนร่วมในการตอบสนองของเซลล์ที่หลากหลาย รวมถึงการสร้างความแตกต่าง การเพิ่มจำนวน การอักเสบ และการตายของเซลล์ สัญญาณ TNF ทริกเกอร์ทั้งคู่อะพอพโทซิสและวิถีต้านอะพอพโทซิส วรรณกรรมหลายประเภทรายงานว่า TNF มีอิทธิพลเหนือไลโปโพลีแซ็กคาไรด์ไตความเสียหายและเฉียบพลันที่เกิดจากซิสพลาตินไตการบาดเจ็บ (Lee et al., 2016; Li et al., 2018). TNF เชื่อมโยงกับ TNF-R1 โดย DD ของมันรับสมัคร TRADD จากนั้น TRADD จะโต้ตอบกับ FADD ซึ่งนำไปสู่การก่อตัวของ DISC (Kiraz et al., 2016; Sun et al., 2003) จากการศึกษาพบว่า F สามารถกระตุ้นตับ เซลล์ประสาท และไตเม็ดเลือดขาวอะพอพโทซิสผ่านเส้นทางการส่งสัญญาณ TNF (Lu et al., 2017; Singh et al., 2017; Yan et al., 2016) คล้ายกับผลลัพธ์ของรายงานเหล่านี้ การแสดงออกสัมพัทธ์ของ TNF, TNF-R1, TNF-R2 และ TRADD ในกลุ่ม F เพิ่มขึ้นอย่างมีนัยสำคัญในการทดลองนี้ ในทางตรงกันข้าม การแสดงออกของยีนเหล่านี้ลดลงอย่างมากหลังจาก 1 เปอร์เซ็นต์แคลเซียมเสริมแนะนำการแทรกแซงของแคลเซียมในเส้นทาง TNF

TRAIL มีส่วนร่วมในกฎระเบียบของอะพอพโทซิสการแพร่กระจาย การตอบสนองของภูมิคุ้มกัน เป็นต้น ปัจจุบันเชื่อกันว่า TRAIL มีความเกี่ยวข้องอย่างใกล้ชิดกับการเกิดและการพยากรณ์โรคของไตโรค (Candido, 2014). วรรณกรรมจำนวนมากขึ้นได้ยืนยันว่า TRAIL ควบคุมอะพอพโทซิสของไตเซลล์เยื่อบุผิวท่อในไตอักเสบที่เกี่ยวข้องกับ HBV และไตอะพอพโทซิสใน Uromodulin ที่เกี่ยวข้องกับไตโรค (Johnson et al., 2017; Yang et al., 2018). นอกจากนี้ การศึกษารายงานว่าการแสดงออกของ TRAIL มีการเปลี่ยนแปลงโดยทั่วไปในระหว่างสภาวะสมดุลและต่างๆไตการบาดเจ็บ (Devarapu et al., 2017). TRAIL ยึดติดกับตัวรับความตาย DR5 และรับ FADD ผ่านการโต้ตอบของ DD จากนั้นผูกกับ pro-Caspase 8 ผ่านโดเมนเอฟเฟกต์การตายที่มีอยู่ใน FADD เพื่อสร้าง DISC (Yuan et al., 2018) การศึกษานี้แสดงให้เห็นว่าการแสดงออกของ TRAIL และ DR5 เพิ่มขึ้นอย่างมีนัยสำคัญในกลุ่ม F หลังจากเสริมด้วยแคลเซียมการแสดงออกของ TRAIL และ DR5 ถูกยับยั้ง ขอแนะนำว่าแคลเซียมยับยั้งเส้นทาง TRAIL เพื่อลด F-inducedอะพอพโทซิส.

บทสรุป

100 มก./ลิตร การได้รับสาร NaF กระตุ้นการตายโดยอาศัยตัวรับการตายอะพอพโทซิสวิถี (เส้นทาง FAS/FASL, TNFR/TNF, DR5/TRAIL) แล้วเหนี่ยวนำไตเซลล์อะพอพโทซิสในหนูทำให้เกิดไตความผิดปกติของการเผาผลาญและไตไม่เพียงพอส่งผลให้ไตcorpuscles เสื่อมและพิการ, theไตช่องแคปซูลกว้างขึ้น theไตtubules ก่อตัวเป็นเฝือก อย่างไรก็ตาม การบวก 1 เปอร์เซ็นต์แคลเซียมในการรับประทานอาหารลดปริมาณฟลูออไรด์ในเลือดและบรรเทาไตความผิดปกติของการเผาผลาญและไตความไม่เพียงพอผ่านเส้นทางที่รับความตายเป็นสื่อกลาง และลด . ลงอย่างมีนัยสำคัญไตการบาดเจ็บ (ส่วนประกอบ รูปที่ 6)

อ้างอิง

แหล่งที่มาคือ Haojie Li, College of Veterinary Medicine, Shanxi Agricultural University, Taigu 030801, Shanxi, PR China และอื่นๆ