อะไรคือความแตกต่างระหว่าง Cistanche ที่เติบโตอย่างดุเดือดและ Cistanche ที่ปลูกแบบเทียมในกิจกรรมเสริมภูมิคุ้มกัน

ติดต่อ: Audrey Huaudrey.hu@wecistanche.com

จ้าวปิง; หยางซิ่วเหม่ย; หวู่เต้าเฉิง; ปา เสวี่ยหลี่; หลี่ฉวนเซียว; ตัน ยาเจ้า; จางอ้ายเหลียน

เชิงนามธรรม:

วัตถุประสงค์:เพื่อเปรียบเทียบผลการเสริมภูมิคุ้มกันของซิสแทนเช่ที่เติบโตอย่างดุเดือดและพอลิแซ็กคาไรด์ที่ปลูกแบบเทียมจากซิสทานช์ (หลังจากนั้น: WCDPS และ CCDPS ตามลำดับ)

วิธีการ:ขนาดยาที่แตกต่างกัน (ต่ำ ปานกลาง และสูง) ของ WCDPS และ CCDPS และโอวัลบูมิน (OVA) ถูกสร้างภูมิคุ้มกันใต้ผิวหนังด้วยหนูเมาส์ ICR, IgG แอนติบอดีจำเพาะต่อ OVA และชนิดย่อยของแอนติบอดี IgGl และ IgG2a ถูกตรวจพบโดย ELISA และโดยวิธี MTT กิจกรรมการเพิ่มจำนวนเซลล์ลิมโฟไซต์จำเพาะต่อ OVA, โฟลว์ไซโตเมตรีเพื่อตรวจจับระดับการแสดงออกของ CD4 บวกทีเซลล์ และ CD8 บวกทีเซลล์

ผลลัพธ์:ทั้ง WCDPS และ CCDPS สามารถเพิ่มระดับการแสดงออกของ IgG แอนติบอดีจำเพาะต่อ OVA และ IgG1 และ IgG2a ของแอนติบอดีที่จำเพาะต่อ OVA ได้อย่างมีนัยสำคัญ (P<0.05), and="" there="" is="" no="" statistically="" significant="" difference="" between="" the="" same="" doses="" of="" wcdps="" and="" ccdps="" (f="">0. 05); WCDPS and CCDPS can significantly promote OVA-specific lymphocyte proliferation, and the difference between the same dose is not statistically significant (P>0.05); WCDPS และ CCDPS ยังสามารถเพิ่มเปอร์เซ็นต์ของ CD4 บวก T และ CD8 บวก T เซลล์ เนื้อหาย่อย (P<0.05), and="" the="" difference="" between="" the="" same="" dose="" was="" not="" statistically="" significant="" (p="">0.05), WCDPS และ CCDPS ไม่มีผลต่อน้ำหนักของหนูเมาส์ที่สร้างภูมิคุ้มกัน

บทสรุป:ทั้ง WCDSP และ CCDPS สามารถปรับปรุงการตอบสนองทางภูมิคุ้มกันของร่างกายและภูมิคุ้มกันเฉพาะ OVA ได้อย่างมีนัยสำคัญ และไม่มีความแตกต่างที่มีนัยสำคัญทางสถิติระหว่างทั้งสอง และมีความปลอดภัยที่ดี

คำสำคัญ: cistanche; พอลิแซ็กคาไรด์จาก cistanche; โอวัลบูมิน; เสริม

Cistanche (C. deserticola. YC Ma),ยังเป็นที่รู้จักกันในนาม Cunyun และ Dayun เป็นไม้ล้มลุกที่เป็นกาฝากของ Lydanaceae เป็นเวลาหลายปี เป็นยาจีนที่หายากและมีค่า ส่วนผสมหลัก ได้แก่ พอลิแซ็กคาไรด์จาก cistanche สารประกอบ Cistanche phenylethanoid glycoside กรดอินทรีย์ อัลคาลอยด์ ฯลฯ ⑷ มีหน้าที่หลายอย่าง เช่น เอสเซ้นส์บำรุงและเลือด ช่วยบำรุงหยางและปรับสภาพไต และบรรเทาความชรา⑸ เนื่องจากคุณค่าทางยาที่สูงมากของ cistanche การใช้ประโยชน์มากเกินไปของสัตว์ป่าใกล้จะสูญพันธุ์ และ cistanche ที่ปลูกแบบเทียมก็ประสบความสำเร็จ นักวิจัยทั้งในประเทศและต่างประเทศได้ทำการวิจัยมากมายเกี่ยวกับส่วนประกอบทางเคมีและสารออกฤทธิ์ของผักชีฝรั่งที่เติบโตอย่างดุเดือดและผักชีฝรั่งที่ปลูกแบบเทียม แต่มีรายงานเพียงเล็กน้อยเกี่ยวกับการเปรียบเทียบโพลีแซ็กคาไรด์ในสีธรรมชาติและที่ปลูกจากกิจกรรมเสริม cistanche (WCDPS/CCDPS) . จากการศึกษาจำนวนมากแสดงให้เห็นว่าโพลีแซ็กคาไรด์จากพืชจาก cistanche เป็นสารเสริมสามารถควบคุมการตอบสนองทางภูมิคุ้มกันของร่างกายได้ นักวิจัยหลายคนใช้ยาสมุนไพรจีนเป็นวัคซีนเสริมและมีความก้าวหน้าดี”

การศึกษานี้อ้างอิงจากงานวิจัยก่อนหน้านี้ (6) เพื่อเปรียบเทียบเสริมภูมิคุ้มกันกิจกรรมของซินเจียง WCDPS และ CCDPS ส่วนใหญ่ผ่านการทดลองสร้างภูมิคุ้มกันในหนูเมาส์ ปริมาณ WCDPS และ CCDPS ที่แตกต่างกันได้รับภูมิคุ้มกันใต้ผิวหนังด้วย OVA ในหนูเมาส์ ICR และผลกระทบต่อระดับของอารมณ์ขันภูมิคุ้มกันและภูมิคุ้มกันของเซลล์ที่เกิดจาก OVA หลังจากทดสอบภูมิคุ้มกันแล้ว เปรียบเทียบcistanche เติบโตอย่างดุเดือดและcistanche ที่ปลูกเทียมpolysaccharides กิจกรรมเสริมสร้างภูมิคุ้มกันของ polysaccharides ในส้มสามารถให้ข้อมูลอ้างอิงสำหรับการพัฒนาที่ดีขึ้นและการใช้ cistanche ที่ปลูกในซินเจียง

วัสดุและวิธีการ

วัสดุทดลอง:

ปลูก cistanche อย่างดุเดือดและ cistanche ที่ปลูกอย่างดุเดือด (มีจำหน่ายในท้องตลาด) ซื้ออาหารเลี้ยงเชื้อ RPMI 1640 จาก GIBCO; ซื้อซีรั่มวัวในครรภ์จาก Israel Bioind; โฟลว์ไซโตเมทรีแอนติบอดี้: PE rat-anti mouse CD3, APC rat-anti mouse CD4, FITC rat-anti mouse CD8a ถูกซื้อจากบริษัท American BD, โปรตีนไข่ขาว (Ovalbumin, OVA) ผลิตภัณฑ์ซิกมา, มะรุมที่ติดฉลากเปอร์ออกไซด์ต่อต้านเมาส์ IgG, IgGl และ IgG2a ซื้อมาจาก Southbiotech สหรัฐอเมริกา สารเคมีทดลองอื่น ๆ เป็นน้ำยาวิเคราะห์ภายในประเทศทั้งหมด

สัตว์ทดลอง:

หนู ICR เพศเมียเกรดสะอาด (6-8 สัปดาห์ 18-22 กรัม) ถูกซื้อจากศูนย์สัตว์ทดลองของมหาวิทยาลัยการแพทย์ซินเจียง สัตว์ถูกเก็บไว้ในห้องเลี้ยงสัตว์ของห้องปฏิบัติการของเรา และเริ่มการทดลอง 7 วันหลังจากสัตว์ปรับตัวให้เข้ากับสภาพเดิม

การเตรียม WCDPS และ CCDPS:

อ้างอิง [17] ใช้วิธีการสกัดน้ำและการตกตะกอนของแอลกอฮอล์ ขั้นตอนสั้น ๆ มีดังนี้: ใช้ผงซินเจียงที่ปลูกและป่า cistanche แห้ง เพิ่มปริมาตรของวุ้นปิโตรเลียมและเอทานอลสัมบูรณ์ 10 เท่าในอัลตราโซนิกเป็นเวลา 1 ชั่วโมง; หลังจากการกรองแบบดูด ให้เก็บยาที่ตกค้างและแห้ง เติมปริมาตรของน้ำกลั่น 37T Ultrasound 10 เท่าสองครั้ง ปั่นแยกที่ 4 000 r/min เป็นเวลา 10 นาที รวม supernatants ระเหยแบบหมุนและเข้มข้น และตกตะกอนค้างคืนด้วย แอลกอฮอล์ หลังจากการกรองและการทำให้แห้งด้วยสุญญากาศจะได้ผงสารสกัดหยาบ วิธี Savage ⑻ กำจัดโปรตีนออกจาก WCDPS และ CCDPS ปริมาณพอลิแซ็กคาไรด์จากซิสแทนช์ใน WCDPS และ CCDPS ที่กำหนดโดยวิธีกรดหัวหอม-ซัลฟิวริกเท่ากับ 76.82 เปอร์เซ็นต์ และ 59.58 เปอร์เซ็นต์ ตามลำดับ

การฉีดวัคซีนเมาส์และการเก็บเซรั่ม:

หนูทดลอง ICR เพศเมียอายุ {{0}} สัปดาห์ถูกใช้เป็นแบบจำลองสัตว์ทดลอง การทดลองแบ่งออกเป็น 9 กลุ่ม โดยแต่ละกลุ่มมี 5 กลุ่ม: 0.9 เปอร์เซ็นต์ NaCl, OVA 10 จิ๊ก, OVA-Alum 200 |jLg, OVA-WCDPS 10 |xg, OVA -WCDPS 50 |xg, OVA- WCDPS 100 สุทธิ, OVA-CCDPS 10 |jLg, OVA-CCDPS 50 |xg, OVA-CCDPS 100 สุทธิ ละลายด้วย NaCl 0.9 เปอร์เซ็นต์ก่อนสร้างภูมิคุ้มกัน และสร้างภูมิคุ้มกันให้หนูทดลองฉีดเข้าใต้ผิวหนัง 2 ครั้ง โดยเว้นระยะห่าง 2 สัปดาห์ เลือดจะถูกเก็บรวบรวมก่อนการสร้างภูมิคุ้มกัน และซีรั่ม-80Y ถูกเตรียมและเก็บไว้เพื่อใช้ในภายหลัง

ผลกระทบของ WCDPS และ CCDPS ต่อการเติบโตของหนู:

ในการสังเกตผลของ WCDPS และ CCDPS ต่อการเจริญเติบโตของหนูเมาส์ น้ำหนักของหนูในแต่ละกลุ่มถูกชั่งน้ำหนักที่ 0 d ก่อนการสร้างภูมิคุ้มกันครั้งแรก 14 d และ 21 d หลังจากการก่อภูมิคุ้มกัน

การตรวจหา IgG แอนติบอดีในซีรัมของหนูเมาส์และการพิมพ์หลังการฉีดวัคซีน WCDPS และ CCDPS:

วิธี ELISA ทางอ้อมถูกใช้เพื่อตรวจหาแอนติบอดีในซีรัม เคลือบเพลท ELISA ด้วย OVA 2.5 จิ๊ก/มล., 4Y ค้างคืน; ล้างด้วย PBST 3 ครั้งแล้วเติมนมผงไม่มีไขมันร้อยละ 5 37 ลิตรเพื่อบล็อกเป็นเวลา 1 ชั่วโมง ล้าง 3 ครั้งด้วย PBST และเพิ่มแอนติบอดีหลักให้กับหนูหลังจากสร้างภูมิคุ้มกันในแต่ละกลุ่ม เซรั่มอัตราส่วนการเจือจางแอนติบอดีหลักคือ 1: 100, 100 เม็ดต่อหลุม 37Tl ชั่วโมง; หลังจากล้างด้วย PBST 3 ครั้ง ให้เพิ่มแอนติบอดีรอง: แพะต่อต้านเมาส์ IgG, IgGl, IgG2a (l: 5 000) ที่ติดฉลากด้วย HRP 37 ฟักมังกรเป็นเวลา 1 ชั่วโมง; หลังจากล้างด้วย PBST 4 ครั้ง ให้เติมสารละลายซับสเตรตเตตระเมทิลเบนซิดีน (TMB) เพื่อหลีกเลี่ยงแสงเป็นเวลา 15 นาที เพิ่ม 50 ในแต่ละหลุมเพื่อหยุดปฏิกิริยาด้วย 2 โมล/ลิตร H2SO4 และวัดค่า A45O/655 เปรียบเทียบระดับของแอนติบอดีในแต่ละกลุ่ม

การตรวจหาการเพิ่มจำนวนเซลล์เม็ดเลือดขาวม้ามของหนูเมาส์หลังการฉีดวัคซีน WCDPS และ CCDPS:

วิธี MTT ใช้เพื่อตรวจหาการเพิ่มจำนวนของเซลล์เม็ดเลือดขาวในม้ามของหนูที่ได้รับภูมิคุ้มกันด้วย CCDPS และ WCDPS ม้ามของหนูเมาส์ถูกแยกออกภายใต้สภาวะปลอดเชื้อ 21 วันหลังจากการสร้างภูมิคุ้มกันครั้งแรกและเซลล์ม้ามถูกเจือจางด้วยตัวกลาง RPMI 1640 ที่มี FBS 10 เปอร์เซ็นต์เพื่อทำให้เซลล์เดี่ยว ระงับ นับและปรับเซลล์ เซลล์/มล. กระจายลงใน 96-จานเพาะเลี้ยงเซลล์หลุม เพิ่ม 20 OVA (ความเข้มข้นสุดท้าย 10 |xg/มล.) และ ConA (ความเข้มข้นสุดท้าย 5 สุกร/มล.) ตามลำดับ กระตุ้น ตั้งค่าตัวควบคุมเซลล์ว่างและซีรั่มเปล่า ควบคุมในเวลาเดียวกัน ใส่ในตู้ฟักเซลล์ 37Y เป็นเวลา 48 ชั่วโมง เพิ่ม 20 MTT ในแต่ละหลุม 37^ และฟักต่อไป 4 ชั่วโมง เพิ่ม 100|±1 DMSO ในแต่ละหลุมเพื่อละลายและทดสอบหัวใจ 0 /63. คำนวณค่าดัชนีการกระตุ้น (SI) ของหนูแต่ละกลุ่ม

การแสดงออกของ CD4 และ CD8 บน CD3 บวก T เซลล์หลังการฉีดวัคซีน WCDPS และ CCDPS:

โฟลว์ไซโตเมทรีถูกใช้เพื่อตรวจจับการแสดงออกของเซลล์ CD4 บวก T และ CD8*T บนพื้นผิวของ CD3 บวกทีเซลล์ ม้ามของหนูเมาส์ถูกแยกออกภายใต้สภาวะปลอดเชื้อ 21 วันหลังจากการสร้างภูมิคุ้มกันขั้นต้น และม้ามถูกบำบัดด้วยอาหารเลี้ยงเชื้อ RPMI 1640 ที่มี FBS 10 เปอร์เซ็นต์ เตรียมสารแขวนลอยเซลล์เดียว นับ และปรับจำนวนเซลล์เป็น 1x106 เซลล์/ตัวอย่าง ทำการย้อมสี CD4 และ CD8 บนพื้นผิวของ CD3 บวก T เซลล์ ป้องกันแสงที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 25 นาที และใช้ 10 มล. สารละลายบัฟเฟอร์ฟอสเฟตที่มี FBS 0.5 เปอร์เซ็นต์ (สารละลายบัฟเฟอร์ฟอสเฟต) น้ำเกลือ, PBS) 1 200 รอบ/นาที ล้าง 7 นาที 1 ครั้ง, เพิ่ม 250 |jil PBS, ผ่านตาข่ายทองแดง 200 mesh, flow cytometry เพื่อตรวจจับการแสดงออกของ CD4 และ CD8 บนพื้นผิวของเซลล์ CD3*T

วิธีการทางสถิติ:

ซอฟต์แวร์ Flowjo 7.6 ประมวลผลผลการทดสอบโฟลว์ไซโตเมทรี GraphPad Prism 50 ใช้สำหรับการวิเคราะห์ข้อมูล และข้อมูลทั้งหมดขึ้นอยู่กับค่าเฉลี่ย ± ส่วนเบี่ยงเบนมาตรฐาน ใช้ Student and test เพื่อเปรียบเทียบข้อมูลระหว่างกลุ่มทดลอง พี<0.05 means="" that="" there="" is="" a="" difference.="" statistical="">

ผลลัพธ์

1. The effect of WCDPS and CCDPS on the growth of mice: After co-immunization with WCDPS and CCDPS and OVA, weigh the weight of the mice (Table 1). There was no statistically significant difference in the bodyweight of mice in each group during the same growth period ( P>0.05).

2. ผลของ WCDPS และ CCDPS ต่อ OVA-specific antibody IgG: WCDPS และ CCDPS ถูกสร้างภูมิคุ้มกันใต้ผิวหนังด้วย OVA เพื่อตรวจหาการแสดงออกของ IgG แอนติบอดีจำเพาะต่อ OVA ในซีรัมหลังจาก 14 วันและ 21 วันของการสร้างภูมิคุ้มกัน ผลลัพธ์ถูกแสดงไว้ในรูปที่ 1, WCDPS และ CCDPS ส่งเสริมการแสดงออกของแอนติบอดี IgG ในซีรัมในลักษณะที่ขึ้นกับขนาดยา; OVA บวก WCDPS 50 p,g เมื่อเปรียบเทียบกับ OVA บวก CCDPS 50 |xg สามารถส่งเสริมแอนติบอดีจำเพาะ OVA ได้อย่างมีนัยสำคัญเมื่อเปรียบเทียบกับ OVA บวก CCDPS 50 |xg การแสดงออกของ IgG (F<0.05), but="" the="" difference="" was="" not="" statistically="" significant="" compared="" with="" the="" aluminum="" adjuvant="" group="" (p="">0.05); the difference between WCDPS and CCDPS at the same dose was not statistically significant (P>0.05).

3. ผลของ WCDPS และ CCDPS ต่อการพิมพ์แอนติบอดีจำเพาะ OVA: 21 วันหลังการสร้างภูมิคุ้มกัน ตรวจพบการแสดงออกของแอนติบอดีจำเพาะต่อ OVA ที่พิมพ์ IgG1 และ IgG2a ในซีรัม ผลลัพธ์ถูกแสดงไว้ในรูปที่ 2 OVA-WCDPS 50 จิ๊กและ OVA-WCDPS 100 |xg Mumu ส่งเสริมการแสดงออกของแอนติบอดี IgG2a ในซีรัมอย่างมีนัยสำคัญมากกว่ากลุ่ม OVA เพียงอย่างเดียว (P<0.05); both="" ova-wcdps="" 50="" and="" ova-ccdps="" 50="" pigs="" could="" significantly="" promote="" the="" expression="" of="" ova-specific="" antibody="" iggl=""><0. 001);="" compared="" with="" ova-wcdps="" 50="" p,g,="" and="" ova-wcdps="" 100="" jig,="" the="" aluminum="" adjuvant="" group="" can="" significantly="" promote="" the="" expression="" of="" antibody="" igg2a=""><0.05); the="" expression="" of="" antibody="" typing="" is="" different="" between="" wcdps="" and="" ccdps="" at="" the="" same="" dose="" no="" statistical="" significance="" (p="">0.05).

4. ผลของ WCDPS และ CCDPS ต่อการเพิ่มจำนวนของเซลล์เม็ดเลือดขาวจำเพาะ OVA ของหนูเมาส์: เพื่อตรวจหาผลของ WCDPS และ CCDPS ต่อเซลล์เม็ดเลือดขาวม้าม โพลีแซคคาไรด์จาก cistanche ถูกสร้างภูมิคุ้มกันด้วย OVA ใต้ผิวหนัง และแยกเซลล์ของม้ามออกไป 21 วันหลังการให้วัคซีน และใช้วิธีการ MTT เพื่อตรวจจับพวกมัน ส่งเสริมการเพิ่มจำนวนเซลล์เม็ดเลือดขาวจำเพาะของ OVA ผลลัพธ์ถูกแสดงไว้ในรูปที่ 3 WCDPS และ CCDPS ปรับปรุงการเพิ่มจำนวนของเซลล์ลิมโฟไซต์ที่จำเพาะต่อ OVA ในลักษณะที่ขึ้นกับขนาดยา การรวมกันของ WCDPS และ CCDPS กับกลุ่ม OVA สามารถส่งเสริมการเพิ่มจำนวนเม็ดเลือดขาวเฉพาะของ OVA อย่างมีนัยสำคัญเมื่อเทียบกับกลุ่ม OVA เพียงอย่างเดียว การเพิ่มจำนวนเม็ดเลือดขาว (P<0.05); ova-wcdps="" 50="" jig="" and="" ova-ccdps="" 50="" |xg="" compared="" with="" an="" aluminum="" adjuvant="" group="" can="" significantly="" promote="" ova-specific="" lymphocyte="" proliferation=""><0.05); the="" same="" dose="" of="" wcdps="" there="" was="" no="" statistically="" significant="" difference="" between="" ccdps="" and="" ccdps="" (p="">0.05).

5. ผลของ WCDPS และ CCDPS ต่อ CD3 บวก CD4 บวก T และ CD3 บวก CD8 บวก T เซลล์: 21 วันหลังจาก WCDPS และ CCDPS ได้รับภูมิคุ้มกันใต้ผิวหนังด้วย OVA การแสดงออกของ CD4 และ CD8 ในเซลล์ CD3 บวก T ถูกตรวจพบโดยโฟลว์ไซโตเมทรี ดังแสดงในรูปที่ 4A แสดงให้เห็นว่า OVA-WCDPS 50, OVA-CCDPS 50 จิ๊ก และ OVA-WCDPS 100 สามารถส่งเสริมการเพิ่มจำนวน CD3 บวก CD4 บวก T เซลล์ได้อย่างมีนัยสำคัญ (P<0.05); as="" shown="" in="" figure="" 4b,="" ova-wcdps="" 10="" a,="" ova-wcdps="" 50="" zhao="" significantly="" promotes="" the="" proliferation="" of="" cd3+cd8+="" t="" cells=""><0.05), ova-wcdps="" 100="" |xg,="" ova-ccdps="" 100="" significantly="" promotes="" the="" proliferation="" of="" cd3+cd8+="" t="" cells=""><0.01); but="" the="" same="" dose="" there="" was="" no="" significant="" difference="" between="" wcdps="" and="" ccdps="" (p="">0.05); there was no significant difference between WCDPS and CCDPS and OVA compared with an aluminum adjuvant group (P>0.05).

การอภิปราย

การศึกษาจำนวนมากแสดงให้เห็นว่ายาสมุนไพรจีนมีฟังก์ชันภูมิคุ้มกัน "Da] และยังมีรายงานจำนวนมากที่พิสูจน์ว่ายาสมุนไพรจีน polysaccharides จาก cistanche สามารถใช้เป็นยาเสริมเพื่อเพิ่มผลภูมิคุ้มกันของวัคซีน"3] และ เนื้อทะเลทรายซินเจียงจาก Congrong ที่เลือกในการศึกษานี้เป็นวัสดุยาเฉพาะในซินเจียง และสัตว์ป่าใกล้จะสูญพันธุ์ เมื่อรวมกับคุณค่าทางยาที่สูงขึ้น การเพาะปลูกสายพันธุ์ที่เพาะปลูกมีความสำคัญอย่างยิ่งสำหรับการพัฒนาและการใช้ทรัพยากรพืชสมุนไพร . วัคซีนใหม่ในตลาดปัจจุบันมีความจำเพาะของแอนติเจนที่ดี แต่มีภูมิคุ้มกันต่ำ พอลิแซ็กคาไรด์จากพืชสามารถชดเชยการขาดนี้ได้ ประเทศของฉันมีความได้เปรียบอย่างมากในการวิจัยยาสมุนไพรจีน เราคัดกรองวัคซีนเสริมจากยาสมุนไพรจีนธรรมชาติ ความเป็นไปได้สูง จากการศึกษาพบว่าพอลิแซ็กคาไรด์จากสมุนไพรจีนมีระดับการควบคุมที่แตกต่างกันเกี่ยวกับภูมิคุ้มกันจำเพาะและภูมิคุ้มกันที่ไม่จำเพาะ เช่น เห็ดหลินจือพอลิแซ็กคาไรด์จากซิสทานช์, โพลีแซคคาไรด์ Radixisatidis จากซิสทานช์, Poria cocos พอลิแซ็กคาไรด์จากซิสทานช์โคจิ, อินนูลินโพลีแซคคาไรด์ 27] จากซี . สามารถเสริมฤทธิ์ภูมิคุ้มกันของวัคซีนได้

เนื่องจากความต้องการ cistanche เพิ่มขึ้นอย่างรวดเร็ว สายพันธุ์ป่าของมันจึงสูญพันธุ์ไปจากการขุดและขณะนี้ถูกระบุว่าเป็นพืชที่ใกล้สูญพันธุ์และได้รับการคุ้มครองในประเทศของฉัน จากความสำเร็จของการปลูกพืชเทียมในทะเลทราย Caulis Carlsbad คาดว่าสายพันธุ์ที่ปลูกจะเข้ามาแทนที่พันธุ์ป่า ในการทดลองนี้ cistanche ที่ปลูกอย่างดุเดือดและโพลีแซ็กคาไรด์ที่ปลูกโดยประดิษฐ์ที่เพาะปลูกแล้วถูกใช้เป็นสารเสริม OVA เพื่อทำการทดลองสร้างภูมิคุ้มกันในหนูทดลองในร่างกาย โดยการทดสอบตัวชี้วัดต่างๆ ประเมินผลภูมิคุ้มกันของผักชีฝรั่งป่าและที่ปลูกในขั้นต้น ซึ่งให้ข้อมูลอ้างอิงสำหรับการใช้น้ำมันดินที่ปลูกอย่างมีประสิทธิภาพในซินเจียง

เพื่อให้เข้าใจถึงความปลอดภัยในการปลูก cistanche อย่างดุเดือดและปลูกฝังการปลูกฝังเทียมcistanche แซ็กคาไรด์จาก cistanche การทดลองสร้างภูมิคุ้มกันให้กับสัตว์ในร่างกายได้สังเกตลักษณะที่ปรากฏของหนูและพบว่าหนูไม่มีอาการท้องร่วง มีขนแข็งขึ้น หรือน้ำตาหลังจากสร้างภูมิคุ้มกัน กิจกรรมและการหายใจของพวกมันเป็นเรื่องปกติ และไม่มีการกระตุกของกล้ามเนื้อ ไม่มีความแตกต่างอย่างมีนัยสำคัญในน้ำหนักตัวของหนูในแต่ละกลุ่มเนื่องจากปรากฏการณ์ความผิดปกติ ซึ่งบ่งชี้ว่าการสร้างภูมิคุ้มกันโรค WCDPS และ CCDPS ไม่ส่งผลต่อการเจริญเติบโตของหนูและมีระดับความปลอดภัยในระดับหนึ่ง ผลการทดสอบ IgG ของแอนติบอดีและการพิมพ์: WCDPS และ CCDPS สามารถเพิ่มการแสดงออกของ IgG แอนติบอดีจำเพาะต่อ OVA ได้อย่างมีนัยสำคัญหลังการสร้างภูมิคุ้มกันร่วมกับ OVA และผลจะเทียบเท่ากับสารเสริมอะลูมิเนียม มันสามารถปรับปรุงการแสดงออกของแอนติบอดีจำเพาะต่อ OVA ชนิด IgG2a และ IgGl ได้อย่างมีนัยสำคัญ โดยแสดงให้เห็นว่าพอลิแซ็กคาไรด์จากซิสแทนช์ช่วยเพิ่มการตอบสนองภูมิคุ้มกัน Th1 และ Th2 ในเวลาเดียวกัน และไม่มีความแตกต่างอย่างมีนัยสำคัญระหว่าง WCDPS และ CCDPS ผลลัพธ์ของการพิมพ์แอนติบอดี IgG2a พบว่ากลุ่มการสร้างภูมิคุ้มกันร่วม WCDPS และ CCDPS และ OVA สามารถเพิ่มการแสดงออกของ IgG2a อย่างมีนัยสำคัญเมื่อเปรียบเทียบกับกลุ่มเสริมอะลูมิเนียม สารเสริมอะลูมิเนียมนั้นอ่อนแอกว่าในการส่งเสริมการแสดงออกของทีเซลล์ ซึ่งพิสูจน์ว่ามีการใช้ WCDPS และ CCDPS เป็น adjuvants ความสามารถในการส่งเสริมภูมิคุ้มกันของเซลล์นั้นสูงกว่า adjuvants อะลูมิเนียมอย่างมีนัยสำคัญ

ผลการตรวจหาการเพิ่มจำนวนของเซลล์เม็ดเลือดขาวด้วยวิธี MTT พบว่าเซลล์ม้ามของหนูในแต่ละกลุ่มถูกกระตุ้นโดย OVA ดัชนีการกระตุ้น (SI) ของการเพิ่มจำนวนเม็ดเลือดขาวใน WCDPS และ CCDPS ร่วมกับ OVA นั้นสูงกว่าในกลุ่มที่สร้างภูมิคุ้มกันโรคด้วย OVA เพียงอย่างเดียวอย่างมีนัยสำคัญ OVA- ดัชนีการกระตุ้นของกลุ่มจิ๊ก WCDPS 50 Ah และ OVA-CCDPS 50 สูงกว่ากลุ่มเสริมอะลูมิเนียมอย่างมีนัยสำคัญ บ่งชี้ว่า WCDPS และ CCDPS ร่วมกับกลุ่ม OVA สามารถเพิ่มจำนวนเซลล์ลิมโฟไซต์จำเพาะต่อ OVA ได้อย่างมีนัยสำคัญ เมื่อเทียบกับกลุ่ม OVA และกลุ่มเสริมอะลูมิเนียม

มีกลุ่มย่อยที่แตกต่างกันของ T lymphocytes CD3 เป็นโมเลกุลพื้นผิวของ T ลิมโฟไซต์ทั้งหมด ตามฟีโนไทป์ที่แตกต่างกัน พวกมันสามารถแบ่งออกเป็น CD8 บวก T เซลล์ และ CD4 T เซลล์ โมเลกุล CD4 plus สามารถเกิดขึ้นได้ภายใต้การกระทำของโมเลกุล MHC fl ซึ่งส่วนใหญ่จะใช้เป็นเซลล์ตัวช่วย (Th) หลังจากการกระตุ้น โมเลกุล CD8 plus จำเป็นต้องก่อตัวขึ้นภายใต้การกระทำของโมเลกุล MHC I หลังจากเปิดใช้งาน พวกมันจะกลายเป็นเซลล์นักฆ่า (TC หรือ CTL) ซึ่งมีบทบาทสำคัญในการสร้างภูมิคุ้มกันต่อการติดเชื้อไวรัสและภูมิคุ้มกันของเนื้องอก 3" Flow cytometry ตรวจพบ CD3PD4 plus T และ CD3 plus CD8 plus T cell expression ผลลัพธ์แสดงว่า WCDPS และ CCDPS สามารถส่งเสริมการเพิ่มจำนวน CD4 plus T และ CD8 plus T เซลล์ภายในช่วงปริมาณที่กำหนด และไม่มีนัยสำคัญ ความแตกต่างระหว่าง WCDPS และ CCDPS ในขนาดเดียวกัน การรวมกันของ CCDPS และ OVA สามารถกระตุ้นการแสดงออกของ CD3 บวก CD4 บวก T และ CD3 บวก CD8 บวก T เซลล์ และเอฟเฟกต์ทั้งสองมีค่าเท่ากัน

โดยสรุป WCDPS และ CCDPS มีความปลอดภัยในฐานะผู้ช่วยเสริม หลังจากได้รับภูมิคุ้มกันด้วย OVA แล้ว พวกเขาสามารถเสริมสร้างภูมิคุ้มกันทางร่างกายและภูมิคุ้มกันของเซลล์ได้พร้อมกัน เมื่อเทียบกับสารเสริมอะลูมิเนียม WCDPS และ CCDPS มีผลดีกว่าในการเสริมสร้างภูมิคุ้มกันของเซลล์ และไม่มีความแตกต่างในผลของการเพิ่มประสิทธิภาพของพอลิแซ็กคาไรด์ทั้งสองจากซิสแทนช์ ผลการวิจัยเหล่านี้ให้ข้อมูลอ้างอิงสำหรับโพลีแซ็กคาไรด์ที่ปลูกในซินเจียงเทียมจากซิสแทนช์เป็นสารเสริม และยังให้พื้นฐานวัสดุสำหรับการตรวจคัดกรองสารเสริมภูมิคุ้มกันที่ปลอดภัยและมีประสิทธิภาพจากทะเลทรายซินเจียงcistanche.

อ้างอิง

[1] Zhao X, Sun W, Zhang S, และคณะ การตอบสนองทางภูมิคุ้มกันของพอลิแซ็กคาไรด์จาก Atractylodis macrocephalus Koidz ในไก่ที่ได้รับการฉีดวัคซีนป้องกันโรคนิวคาสเซิล (ND) [J] คาร์โบไฮเดรตโพลิม, 2016, 190-196. ดอย: 10. 1016/จ. คาร์โบไฮเดรตป๊อป 2559. 01.033.

[2]Li J, Wang X, Wang W และอื่น ๆ สารสกัดจากน้ำ Pleurotus ferulate ช่วยเพิ่มการเจริญเติบโตและการทำงานของเซลล์เดนไดรต์ที่ได้จากไขกระดูกจากไขกระดูกผ่านวิถีการส่งสัญญาณ TLR4 [J ] วัคซีน ปี 2558 33(16) : 1923-1933. ดอย: 10.1016/j. วัคซีน.2015.02. 063.

[3]Zhao H, Luo Y, Lu C และอื่น ๆ การตอบสนองของภูมิคุ้มกันของเยื่อเมือกในลำไส้อาจกระตุ้นการทำงานของภูมิคุ้มกันของเห็ดหลินจือพอลิแซ็กคาไรด์ในหนู [J] Planta Med, 2010, 76(3): 223-227. ดอย: 10. 1055/S-0029-1186055