การเปิดเผยสิ่งบ่งชี้ใหม่และเป้าหมายการแทรกแซงที่เป็นไปได้สำหรับโรคพอโดไซต์

การศึกษานี้แบ่งออกเป็นสองส่วน คือ การวิจัยทางคลินิก และการวิจัยในสัตว์ ส่วนการวิจัยทางคลินิกเป็นการศึกษาแบบหลายศูนย์ที่วิเคราะห์อัตราบวกของแอนติบอดีต่อต้าน Nephrin ในผู้ป่วยโรคไตในผู้ใหญ่ (รวมถึง MCD, FSGS, MN, โรคไตอักเสบจากอิมมูโนโกลบูลิน A [IgAN), แอนติบอดีนิวโทรฟิลไซโตพลาสมิก [ANCA] ที่เกี่ยวข้องกับไตอักเสบและลูปัส โรคไตอักเสบ (LN)) เด็กที่เป็นโรคไตไม่ทราบสาเหตุ (INS) และกลุ่มควบคุม เป็นที่น่าสังเกตว่าข้อมูลสำหรับผู้ป่วยผู้ใหญ่และเด็กส่วนใหญ่มาจากยุโรป (เยอรมนี อิตาลี ฝรั่งเศส)

คลิกเพื่อ Cistanche สำหรับโรคไต

ส่วนการวิจัยในสัตว์คือการสร้างแบบจำลองเมาส์ที่เกี่ยวข้อง โดยเฉพาะหนู BALB/c ชนิดป่าตัวผู้ที่ได้รับการฉีดวัคซีนใต้ผิวหนังด้วยเนฟรินของหนูชนิดรีคอมบิแนนท์ และสารเสริมของฟรอยด์ที่สมบูรณ์ หนูกลุ่มควบคุมได้รับสารเสริมของ Freund ที่สมบูรณ์ผสมกับน้ำเกลือบัฟเฟอร์ฟอสเฟต

แน่นอนว่า การศึกษาครั้งนี้ใช้การตกตะกอนของภูมิคุ้มกันอย่างสร้างสรรค์เพื่อตรวจหาสารต้านเนฟริน วิธีการตรวจก่อนหน้านี้ เช่น Blot, ELISA ฯลฯ ไม่สามารถวัดปริมาณหรือวัดปริมาณแอนติบอดีต่อต้าน Nephrin ได้อย่างแม่นยำ แต่วิธีการกระตุ้นภูมิคุ้มกันจะแตกต่างออกไป โดยเฉพาะอย่างยิ่ง สถานะออโตแอนติบอดีของแอนติ-เนฟรินถูกกำหนดโดยการตกตะกอนของภูมิคุ้มกันโดยใช้โดเมนภายนอกของเนฟรินของมนุษย์ชนิดรีคอมบิแนนท์ (กรดอะมิโน A36 ถึง L1052) โปรตีนถูกบ่มด้วยซีรัมหรือพลาสมาของมนุษย์ข้ามคืน และจากนั้นโปรตีน G ถูกเติมเข้าไป รวบรวมอิมมูโนตกตะกอนภายใต้อิเล็กโตรโฟเรซิส ลบรอย และวิเคราะห์เนฟรินโดยใช้แอนติบอดีต่อต้านเนฟริน (AF4269; ระบบ R&D) ตัวอย่างถูกวิเคราะห์ในลักษณะปกปิด และการวินิจฉัยโรคและข้อมูลทางคลินิกถูกเปิดเผยหลังจากพิจารณาสถานะออโตแอนติบอดีของแอนติ-เนฟรินแล้วเท่านั้น สำหรับการอ่านค่าเชิงปริมาณของออโตแอนติบอดีต้านเนฟริน การตรวจวิเคราะห์แบบลูกผสมได้ถูกสร้างขึ้นซึ่งรวมถึงการตรวจปริมาณอิมมูโนเพรซิพีเอชันและอิมมูโนพรีซิเพตเต็ดเนฟริน การสอบวิเคราะห์ดังกล่าวช่วยให้ตรวจพบแอนติบอดีต้านเนฟรินได้ชัดเจนที่สุดและชัดเจนที่สุด

1 ข้อมูลพื้นฐาน

มีผู้เข้าร่วมทั้งหมด 656 คนในการศึกษานี้ รวมถึงผู้ใหญ่ 357 คนที่เป็นโรคไต เด็ก 182 คนที่เป็นโรคไต และกลุ่มควบคุม 117 คน (ผู้ใหญ่ 67 คน และเด็ก 50 คน) โรคเฉพาะของผู้ป่วยที่เป็นโรคไต ได้แก่ MCD, FSGS, MN, โรคไตอักเสบจากอิมมูโนโกลบูลินเอ (IgAN), โรคไตอักเสบที่เกี่ยวข้องกับแอนติบอดีต่อไซโตพลาสซึมที่ต่อต้านนิวโทรฟิล (ANCA-GN), โรคไตอักเสบลูปัส (LN) และกลุ่มอาการไตอักเสบที่ไม่ทราบสาเหตุ

2 การแพร่กระจายของแอนติบอดีต่อต้าน Nephrin ในผู้ป่วยผู้ใหญ่

ในบรรดาผู้ป่วยผู้ใหญ่ พบว่าผู้ป่วย MCD 105 ราย 46 ราย (44%) และผู้ป่วย FSGS หลัก 74 ราย (9%) มีผลบวกต่อแอนติบอดีต่อต้าน Nephrin ในขณะที่แทบไม่มีผู้ป่วยเลย (n น้อยกว่าหรือเท่ากับ 1) ร่วมกับยาอื่น โรคไตเป็นผลบวกต่อแอนติบอดีต่อต้าน Nephrin หากผู้ป่วย MCD ไม่ได้รับการรักษาด้วยยากดภูมิคุ้มกัน อัตราบวกของ anti-Nephrin autoantibodies จะสูงถึง 69% (24/35) ซึ่งสูงกว่าผู้ป่วย MCD ที่ได้รับการรักษาด้วยยากดภูมิคุ้มกัน (36/59)

3 ผู้ป่วยเด็ก

ในเด็กที่เป็นโรคไตไม่ทราบสาเหตุ (INS) สัดส่วนโดยรวมของ autoantibodies anti-Nephrin ที่เป็นบวกคือ 52% ในกลุ่มย่อยที่ไม่ได้รับการบำบัดด้วยภูมิคุ้มกัน สัดส่วนโดยรวมของออโตแอนติบอดีที่ต้าน Nephrin ในเชิงบวกนั้นสูงถึง 90% ในขณะที่ในเด็กที่มีสุขภาพดี แอนติบอดีที่ต้าน Nephrin มีค่าเกือบเป็นลบ โดยมีผู้ป่วยเพียงรายเดียวที่แสดงผลลัพธ์ที่เป็นบวก เป็นที่น่าสังเกตว่าเนื่องจากเด็กไม่ค่อยได้รับการตรวจชิ้นเนื้อไต ข้อมูลนี้จึงมีนัยสำคัญทางคลินิกที่ชัดเจน

4 ความสัมพันธ์ระหว่างการตรวจเชิงบวกและลักษณะทางคลินิก

ไม่ว่าในผู้ใหญ่หรือเด็ก ผู้ป่วยที่มีแอนติบอดีต่อต้าน Nephrin เชิงบวกจะมีอัตราส่วนโปรตีนครีเอตินีนในปัสสาวะ (UPCR) หรืออัตราส่วนอัลบูมินครีเอตินีนในปัสสาวะสูงกว่า (UACR) ในขณะที่ผู้ป่วยที่มีแอนติบอดีต่อต้าน Nephrin เชิงลบมักจะมี UACR หรือ UPCR ของ<0.3.

นอกจากนี้ หากระดับของแอนติบอดีต่อต้าน Nephrin เปลี่ยนแปลงไปหลังจากที่ผู้ป่วยได้รับการบำบัดด้วยภูมิคุ้มกันที่มีประสิทธิผล ระดับ UACR ของผู้ป่วยก็จะเปลี่ยนไปเช่นกัน ตัวอย่างเช่น รายงานผู้ป่วยรายหนึ่งแสดงให้เห็นว่าระดับแอนติบอดีต่อต้านเนฟรินและโปรตีนในปัสสาวะของผู้ป่วยดีดตัวขึ้นหลังจากได้รับการรักษาด้วยกลูโคคอร์ติคอยด์และไซโคลสปอริน A ในขณะที่หลังจากได้รับริตูซิแมบ ระดับแอนติบอดีต่อต้านเนฟรินและ UACR ยังคงลดลงและใกล้เคียงกับ { {3}} แน่นอนว่านี่ไม่ใช่กรณีที่แยกได้ และผู้ป่วยจำนวนมากก็มีข้อค้นพบที่คล้ายกัน การวิเคราะห์ข้อมูลแสดงให้เห็นว่ามีความสัมพันธ์อย่างมากระหว่างระดับออโตแอนติบอดีของแอนติ-เนฟรินที่วัดได้ทั้งหมดและอัตราส่วนอัลบูมินในปัสสาวะต่อครีเอตินีน (r=0.64)

สรุปการศึกษาทางคลินิก

โดยทั่วไป ออโตแอนติบอดีที่ต้าน Nephrin มีอยู่อย่างกว้างขวางในผู้ใหญ่ MCD และเด็ก ISN และเป็นตัวชี้วัดทางชีวภาพที่มีประสิทธิภาพสำหรับการทำนายภาวะโปรตีนในปัสสาวะในผู้ป่วย และระดับของไทเทอร์ของแอนติบอดีต้าน Nephrin สามารถใช้เป็นแนวทางในการใช้ยาทางคลินิกได้ ดังนั้น ออโตแอนติบอดีที่ต้าน Nephrin จึงเป็นตัวบ่งชี้ทางชีวภาพสำหรับการจำแนกประเภทใหม่สำหรับโรคพอโดไซต์และเป็นมาตรฐานใหม่สำหรับการจำแนกทางพยาธิวิทยา ซึ่งสามารถใช้ในการติดตามติดตามกิจกรรมของโรค การพยากรณ์โรค และแนวทางการรักษา

1 ผลการตรวจชิ้นเนื้อไตและลักษณะทางคลินิก

หนู BALB/c ชนิดไวด์ตัวผู้ได้รับการสร้างภูมิคุ้มกันใต้ผิวหนังด้วยเนฟรินของเมาส์ชนิดรีคอมบิแนนท์และสารเสริมของฟรอยด์ที่สมบูรณ์ (กลุ่มการแทรกแซง) หนูกลุ่มควบคุมได้รับสารเสริมของ Freund ที่สมบูรณ์ผสมกับน้ำเกลือบัฟเฟอร์ฟอสเฟต หนูกลุ่มแทรกแซงจะพัฒนากลุ่มอาการไตอย่างรวดเร็วหลังจากผ่านไป 3 สัปดาห์

การตรวจชิ้นเนื้อไตของหนูทั้งสองกลุ่มแสดงให้เห็นว่าแม้ว่าจะไม่มีความแตกต่างที่มีนัยสำคัญระหว่างทั้งสองกลุ่มในการตรวจการย้อมสี PAS แต่กล้องจุลทรรศน์อิเล็กตรอนแสดงให้เห็นว่ากระบวนการของเท้าแบบโพโดไซท์หายไปอย่างกว้างขวาง และไม่มีการสะสมของอิเล็กตรอนหนาแน่นในหนูกลุ่มแทรกแซง ในขณะที่ไม่มี ปรากฏการณ์ที่คล้ายกันในกลุ่มควบคุม โดยเฉพาะอย่างยิ่ง การติดฉลากอิมมูโนโกลด์ของ IgG ของเมาส์ในหนูกลุ่มแทรกแซงแสดงให้เห็นว่ามันถูกแปลเป็นภาษาท้องถิ่นโดยเฉพาะไปที่ไดอะแฟรมกรีดระหว่างบริเวณที่มีการกำจัดกระบวนการของเท้าด้วยโพโทไซต์

นอกจากนี้ หนูกลุ่มแทรกแซงแสดงการกระจายตัวของเนฟรินจากเยื่อหุ้มเซลล์ไปยังไซโตพลาสซึม โดยมีค่าบวกของ IgG ของเมาส์ในรูปแบบ punctate ที่ละเอียด มีการรวมตัวกันบางส่วนกับเนฟริน และไม่มีการแทรกซึมของเซลล์ภูมิคุ้มกัน ลดจำนวนพอโดไซต์ หรือการสะสมส่วนเสริม

2 กลไกระดับโมเลกุล

เพื่อชี้แจงว่า autoantibodies ของ anti-nephrin มีผลโดยตรงต่อการส่งสัญญาณของ nephrin และเส้นทางปลายน้ำหรือไม่ นักวิจัยได้ทำการวิเคราะห์ proteomic และ phosphoproteomic ใน glomeruli ที่แยกได้จากหนูควบคุม ผลลัพธ์แสดงให้เห็นการเพิ่มขึ้นของฟอสโฟรีเลชั่นของ Nphs1 ซึ่งเป็นสารตกค้างของไทโรซีนซึ่งสอดคล้องกับ Y1176 ของเนฟรินของมนุษย์

เป็นที่ทราบกันว่าบริเวณฟอสโฟรีเลชั่นนี้เกี่ยวข้องกับการส่งสัญญาณของเนฟริน ซึ่งนำไปสู่การประกอบแอกติน การปรับโครงสร้างโครงร่างโครงร่างใหม่ของโครงร่างเซลล์ และเอ็นไซรินเอนโดไซโตซิส โปรตีโอมิกส์แสดงให้เห็นว่าในโกลเมอรูลีของหนูกลุ่มแทรกแซง ระดับของโปรตีนอะแดปเตอร์ เช่น ShcA (Shc1) และแคลทริน (Cltc) ที่เกี่ยวข้องกับการขนส่งเนฟรินจากเอนโดไซติกเพิ่มขึ้น ในขณะที่โปรตีนที่เกี่ยวข้องกับไดอะแฟรมกรีดแกนกลางลดลงอย่างมีนัยสำคัญ ซึ่งเป็น สาเหตุสำคัญของการเกิดรอยโรคโปโดไซต์ นั่นคือ แอนติบอดีต่อต้านเนฟรินทำให้เกิดกลุ่มอาการไตอักเสบ ฟอสโฟรีเลชันของเนฟริน และการจัดเรียงเซลล์ใหม่ในระดับโปรตีโอมิก ซึ่งนำไปสู่การเปลี่ยนแปลงโครงสร้างพิเศษตามแบบฉบับของ MCD

Cistanche รักษาโรคไตได้อย่างไร?

ซิสแตนเช่เป็นยาสมุนไพรจีนโบราณที่ใช้มานานหลายศตวรรษในการรักษาภาวะสุขภาพต่างๆ ได้แก่ไตโรค- ได้มาจากลำต้นแห้งของซิสแตนเช่ทะเลทรายซึ่งเป็นพืชพื้นเมืองในทะเลทรายของจีนและมองโกเลีย ส่วนประกอบหลักที่ใช้งานอยู่ของ cistanche คือฟีนิลธานอยด์ไกลโคไซด์, เอชินาโคไซด์, และแอกทีโอไซด์ซึ่งพบว่ามีผลประโยชน์ในเรื่องไตสุขภาพ.

โรคไตหรือที่เรียกว่าโรคไตหมายถึงภาวะที่ไตทำงานไม่ถูกต้อง ซึ่งอาจส่งผลให้เกิดการสะสมของของเสียและสารพิษในร่างกาย นำไปสู่อาการและภาวะแทรกซ้อนต่างๆ Cistanche อาจช่วยรักษาโรคไตได้หลายกลไก

ประการแรก พบว่า Cistanche มีคุณสมบัติขับปัสสาวะ ซึ่งหมายความว่าสามารถเพิ่มการผลิตปัสสาวะและช่วยกำจัดของเสียออกจากร่างกาย ซึ่งสามารถช่วยแบ่งเบาภาระของไตและป้องกันการสะสมของสารพิษได้ โดยการส่งเสริมการขับปัสสาวะ cistanche อาจช่วยลดความดันโลหิตสูง ซึ่งเป็นภาวะแทรกซ้อนที่พบบ่อยของโรคไต

นอกจากนี้ cistanche ยังแสดงให้เห็นว่ามีฤทธิ์ต้านอนุมูลอิสระอีกด้วย ความเครียดจากการเกิดออกซิเดชันซึ่งเกิดจากความไม่สมดุลระหว่างการผลิตอนุมูลอิสระและการป้องกันสารต้านอนุมูลอิสระของร่างกาย มีบทบาทสำคัญในการดำเนินของโรคไต ช่วยต่อต้านอนุมูลอิสระและลดความเครียดจากปฏิกิริยาออกซิเดชั่น จึงช่วยปกป้องไตจากความเสียหาย ฟีนิลทานอยด์ไกลโคไซด์ที่พบในซิสแทนชี่มีประสิทธิภาพอย่างยิ่งในการขจัดอนุมูลอิสระและยับยั้งการเกิดออกซิเดชันของไขมัน

นอกจากนี้ cistanche ยังพบว่ามีฤทธิ์ต้านการอักเสบอีกด้วย การอักเสบเป็นอีกปัจจัยสำคัญในการพัฒนาและการลุกลามของโรคไต คุณสมบัติต้านการอักเสบของ Cistanche ช่วยลดการผลิตไซโตไคน์ที่ทำให้เกิดการอักเสบ และยับยั้งการกระตุ้นวิถีทางบังคับสำหรับการอักเสบ ซึ่งช่วยบรรเทาอาการอักเสบในไต

นอกจากนี้ cistanche ยังแสดงให้เห็นว่ามีฤทธิ์กระตุ้นภูมิคุ้มกันอีกด้วย ในโรคไต ระบบภูมิคุ้มกันอาจถูกควบคุมผิดปกติ ทำให้เกิดการอักเสบมากเกินไปและความเสียหายของเนื้อเยื่อ Cistanche ช่วยควบคุมการตอบสนองของระบบภูมิคุ้มกันโดยการปรับการผลิตและกิจกรรมของเซลล์ภูมิคุ้มกัน เช่น ทีเซลล์และมาโครฟาจ การควบคุมภูมิคุ้มกันนี้จะช่วยลดการอักเสบและป้องกันความเสียหายต่อไตเพิ่มเติม

นอกจากนี้ ยังพบว่าซิสทานชี่ช่วยปรับปรุงการทำงานของไตโดยส่งเสริมการสร้างท่อไตใหม่พร้อมกับเซลล์ เซลล์เยื่อบุผิวท่อไตมีบทบาทสำคัญในการกรองและการดูดซึมกลับของเสียและอิเล็กโทรไลต์ ในโรคไต เซลล์เหล่านี้อาจได้รับความเสียหาย ส่งผลให้การทำงานของไตเสียหาย ความสามารถของ Cistanche ในการส่งเสริมการงอกใหม่ของเซลล์เหล่านี้ช่วยฟื้นฟูการทำงานของไตอย่างเหมาะสมและปรับปรุงสุขภาพไตโดยรวม

นอกจากผลโดยตรงต่อไตแล้ว ยังพบว่าน้ำซิสแทนชี่ยังมีผลดีต่ออวัยวะและระบบอื่นๆ ในร่างกายอีกด้วย แนวทางด้านสุขภาพแบบองค์รวมนี้มีความสำคัญอย่างยิ่งต่อโรคไต เนื่องจากภาวะนี้มักส่งผลกระทบต่ออวัยวะและระบบต่างๆ che ได้รับการพิสูจน์แล้วว่ามีผลในการป้องกันตับ หัวใจ และหลอดเลือด ซึ่งมักได้รับผลกระทบจากโรคไต ด้วยการส่งเสริมสุขภาพของอวัยวะเหล่านี้ cistanche ช่วยปรับปรุงการทำงานของไตโดยรวมและป้องกันภาวะแทรกซ้อนเพิ่มเติม

โดยสรุป cistanche เป็นยาสมุนไพรจีนโบราณที่ใช้รักษาโรคไตมานานหลายศตวรรษ ส่วนประกอบออกฤทธิ์มีฤทธิ์ในการขับปัสสาวะ สารต้านอนุมูลอิสระ ต้านการอักเสบ กระตุ้นภูมิคุ้มกัน และฟื้นฟู ซึ่งช่วยปรับปรุงการทำงานของไตและปกป้องไตจากความเสียหายเพิ่มเติม ซิสทานชี่มีผลดีต่ออวัยวะและระบบอื่นๆ ทำให้เป็นแนวทางการรักษาโรคไตแบบองค์รวม