Tubuloside B จาก Cistanche Salsa ช่วยเซลล์ประสาท PC12 จากการตายของเซลล์ที่เกิดจาก 1-เมทิล-4- ฟีนิลไพริดิเนียม และความเครียดจากปฏิกิริยาออกซิเดชัน

การแนะนำ

ในทางพยาธิวิทยา โรคพาร์กินสัน (PD) ประปรายมักมีลักษณะโดยการสูญเสียเซลล์ประสาท catecholaminergic โดยเฉพาะเซลล์ประสาทโดปามิเนอร์จิคของ substantia nigra pars Compacta (SNc) และการมีอยู่ของเซลล์ประสาทที่มีลักษณะเฉพาะ| การรวมที่เรียกว่า Lewy bodies ในบริเวณสมองที่ได้รับผลกระทบ แม้จะมีปัจจัยหลายประการที่เกี่ยวข้องในการเกิดโรคของ PD แต่กลไกที่เกี่ยวข้องในการเริ่มต้นและการลุกลามของ PD ยังคงไม่แน่นอน แม้ว่าสาเหตุของ PD จะยังคงได้รับคำตอบ แต่หลักฐานหลายบรรทัดชี้ให้เห็นอย่างชัดเจนถึงการมีส่วนร่วมของความเครียดจากปฏิกิริยาออกซิเดชัน ซึ่งในที่สุดก็นำไปสู่ ไปสู่การตายของเส้นประสาทหรือการตายของเซลล์โดยอนุมูลอิสระที่มากเกินไป ความจริงที่ว่าระบบโดปามิเนอร์จิคไนกราลสามารถผลิตอนุมูลอิสระในระดับสูง และมีระบบป้องกันออกซิเดชันในระดับที่ค่อนข้างต่ำสนับสนุนสมมติฐานนี้ต่อไป การศึกษาทั้งในร่างกายและในหลอดทดลองแสดงให้เห็นความเป็นพิษต่อระบบประสาทที่เกิดจากความเครียดออกซิเดชันของ MPP ＋ ซึ่งเป็นสารออกฤทธิ์ของ l-methyl-4-phenyl-l,2,3,6-tetrahydropyridine (MPTP) บนเซลล์ประสาทโดปามิเนอร์จิค การมีส่วนร่วมของอนุมูลอิสระที่เกิดจากความเครียดจากปฏิกิริยาออกซิเดชั่นมากเกินไปเป็นสาเหตุใกล้เคียงของความผิดปกติทางระบบประสาทเช่น PD ชี้ให้เห็นถึงบทบาทสำคัญของสารต้านอนุมูลอิสระ Tubuloside B (รูปที่ l) เป็นหนึ่งในสารประกอบฟีนิเลธานอยด์ที่แยกได้จากลำต้นของ Cistanche salsa การศึกษาก่อนหน้านี้พบว่าฟีนิลทานอยด์หลายชนิด รวมถึงทูบูโลไซด์ บี มีฤทธิ์ในการขจัดอนุมูลอิสระที่รุนแรง

เมื่อพิจารณาการค้นพบเหล่านี้ เราได้ตรวจสอบในการศึกษานี้ถึงผลของ tubu]nside B ต่อความเป็นพิษต่อระบบประสาทที่เกิดจาก MPP+- ในหลอดทดลอง โดยใช้เซลล์ไลน์ PC12 ของเส้นประสาทซิมพาเทติก ฟีโอโครโมไซโตมา ซึ่งถูกนำมาใช้อย่างประสบความสำเร็จตลอดหลายปีที่ผ่านมาเพื่อศึกษาการทำงานของเซลล์ประสาท

ถังเก็บน้ำธรรมชาติสำหรับป้องกันโรคพาร์กินสัน PHGS75% ECH 30% ACT 12%

วัสดุและวิธีการ

วัสดุ

Tubuloside B จาก Cistanche Salsa ได้รับความกรุณาจาก Dr. Li Lei (Department of Natural Products, School of Pharmaceutical Sciences, Peking University, Beijing, China) ความบริสุทธิ์ของสารประกอบมากกว่า 98% โดยการวิเคราะห์ HPLC อาหารเลี้ยงเชื้อ Eagle's (DMEM), เซรั่มม้า และเซรั่มลูกวัวดัดแปลงของ Dulbecco ถูกซื้อจาก GIBCO BRL, 1-เมทิล~-ฟีนิลไพริดี ออนเนียม ไอออน (MPP+ ), โพลี-L-ไลซีน, 3-(4,{ {8}}ไดเมทิล ไทอาโซล-2 -อิล)-2,5- ไดฟีนิลเตตระโซเลียม โบรไมด์ (MTT), โพรพิเดียม ไอโอไดด์ (PI), RNase A, โปรตีเอส K และ 2; 7'-ไดคลอโรฟลูออเรสซิน ไดอะซิเตต (DCFH-DA) ถูกซื้อจาก Sigma

การเพาะเลี้ยงเซลล์

เซลล์ PCI2 ได้รับการบำรุงรักษาใน DMEM โดยเสริมด้วยซีรั่มม้า 10%, ซีรั่มของทารกในครรภ์ 5%, เพนิซิลลิน 100U/มล. และสเตรปโตมัยซิน 100 มก./มล. เพาะเลี้ยงเซลล์ในตู้ฟักที่มีความชื้นซึ่งเติมอากาศด้วยอากาศ 95% และ CO2 5% ที่ 37 องศา การทดลองทั้งหมดดำเนินการ 24-48 ชั่วโมงหลังจากการเพาะเซลล์ เซลล์ถูกเก็บเกี่ยวเป็นประจำโดยทริปซิไนเซชัน 0.25 % เมื่อเซลล์เข้าใกล้ระยะการมาบรรจบกันและชุบในขวดเพาะเลี้ยงขนาด 25 ซม. โดยแยกที่ 1: 8

การวิเคราะห์ความมีชีวิตของเซลล์

ความมีชีวิตของเซลล์ถูกกำหนดหาโดยใช้การสอบวิเคราะห์ MTT ที่ดัดแปลงตามที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้ [10] โดยสรุป เซลล์ PC12 ถูกเพาะในเพลตหลุม 96- ที่ความหนาแน่น I × 104 เซลล์ต่อหลุม เพาะเลี้ยงเป็นเวลา 48 ชั่วโมง จากนั้นจึงเปลี่ยนอาหารเลี้ยงเชื้อให้เป็นอาหารที่มีความเข้มข้นต่างๆ ของเบิร์นไซด์ B หรือ MPP＋ หลังจากการบ่มนานถึง 48 ชั่วโมงและ 72 ชั่วโมง สารละลาย MTr (5 มก./มล. ใน DMEM) ถูกเติมไปยังเพลตหลุม 96- และเซลล์ได้รับอนุญาตให้บ่มเป็นเวลา 4 ชั่วโมงที่ 37 องศา หลังจากนำตัวกลางออกแล้ว เซลล์และผลึกสีย้อมจะถูกป้อนที่ละลายได้โดยการเติม DMSO 200μL และวัดการดูดกลืนแสงที่ 570 นาโนเมตร (540 นาโนเมตรเป็นข้อมูลอ้างอิง) ด้วยเครื่องอ่านไมโครเพลทรุ่น 550 (Bio-Rad) ความมีชีวิตของเซลล์ยังได้รับการวิเคราะห์โดยใช้วิธีการแยกทริแพนบลู เซลล์ถูกรวบรวม อัดเป็นก้อนเบาๆ และย้อมด้วยสารละลายทริแพนบลู 0.6% เป็นเวลา 3 ฝน ต่อมาประเมินเปอร์เซ็นต์ของเซลล์ที่ไม่มีสีในสิบช่องกล้องจุลทรรศน์ที่เลือกแบบสุ่ม เนื่องจากเป็นยาที่ให้ผลบวก จึงใช้ 100 นาโนกรัม／มิลลิลิตรของเอพิเดอร์มอลโกรทแฟคเตอร์ (EGF)

ถังเก็บน้ำธรรมชาติ TUBULOSA สำหรับกิจกรรมกำจัดอนุมูลอิสระ PHGS75% ECH 30% ACT 12%

การตรวจหาการตายของเซลล์โดยโฟลไซโตเมทรี

ตรวจพบเซลล์อะพอพโทซิสโดยโฟลไซโตเมทรีโดยใช้โพรพิเดียมไอโอไดด์ (PI) [11] โดยสรุป ประมาณ 1 × 10 6 เซลล์ที่ถูกบ่มด้วยสารทดสอบถูกเก็บเกี่ยวโดยการปั่นแยกและถูกล้างหนึ่งครั้งด้วย PBS เซลล์ได้รับการแก้ไขด้วยเอธานอล 70 % เป็นเวลา 24 ชั่วโมงที่ - 20 องศา และล้างหนึ่งครั้งด้วย PBS จากนั้นเซลล์ถูกแขวนลอยใหม่ใน 300ไมโครลิตรของ PBS ซึ่งมี RNaseA 0.5 มก./มล. และ PI 0.5 มก./มล. หลังจากการฟักตัวเพิ่มเติมเป็นเวลา 30 นาทีในความมืด โฟลว์ไซโตเมทรีถูกดำเนินการด้วย FACScan (เบคตัน ดิกคินสัน, ไฮเดลเบิร์ก, เยอรมนี)

การวิเคราะห์การกระจายตัวของดีเอ็นเอโดยอิเล็กโตรโฟรีซิส

เราใช้ระเบียบการของมัวร์ [12] ที่แยกเฉพาะ DNA ที่กระจัดกระจาย และการทดลองถูกทำให้เป็นมาตรฐานโดยใช้จำนวนการเพาะเลี้ยงที่เท่ากันจากกลุ่มทดสอบแต่ละกลุ่ม โดยสรุป เซลล์ประสาท 3 × 106 เซลล์จากตัวอย่างที่ได้รับการบำบัดแต่ละตัวอย่างถูกล้างในสารละลายเกลือที่สมดุลของแฮงค์ (1000กรัมเป็นเวลา 10 นาที) และเม็ดเล็กๆ ที่เกิดขึ้นที่ด้านล่างของหลอดถูกทำให้เป็นเนื้อเดียวกัน ด้วยบัฟเฟอร์ไลซิส 1 มิลลิลิตร (ทริส 10 มิลลิโมลาร์ ที่ pH 7.4. EDTA 5 มิลลิโมลาร์, 1% ไทรทัน X{-100) เป็นเวลา 20 นาทีบนน้ำแข็ง หลังจากการปั่นเหวี่ยงที่ 11,000 กรัม สำหรับฝน 20 องศา ที่ 4 องศา ส่วนลอยเหนือตะกอนที่มี DNA ที่กระจัดกระจายถูกกำจัดออกและย่อยด้วย RNase A 20 มก./มล. ที่ 37 องศา เป็นเวลา 1 ชั่วโมง และโปรตีเอส K 0.1 มก./มล. ที่ 56 องศา ต่อไปอีก 1 ชม. DNA ที่กระจัดกระจายถูกสกัดโดยใช้ฟีนอลและคลอโรฟอร์ม และปั่นเหวี่ยงที่ 1O000กรัม ต่อฝน 1 ครั้งที่อุณหภูมิ 4 C เฟสที่เป็นน้ำถูกถ่ายโอนไปยังหลอด Eppendorf ใหม่ ผสมกับเอธานอลเย็นน้ำแข็ง 2 ปริมาตร จากนั้น วางที่อุณหภูมิ 20 องศาเป็นเวลาอย่างน้อย 1 ชั่วโมงเพื่อให้ DNA เกิดการตกตะกอน หลังจากการปั่นเหวี่ยงที่ 15,000กรัม เป็นเวลา 20 นาที ที่ 4 องศา ส่วนลอยเหนือตะกอนจะถูกเอาออก และล้างเม็ด DNA ด้วยเอธานอล 80 % หนึ่งครั้ง (15,000 กรัม เป็นเวลา 15 นาที ที่ 4 องศา) ทำให้แห้งในอากาศ และละลายใน 20ไมโครลิตร บัฟเฟอร์ TE ที่ pH 7.6 จากนั้น ตัวอย่างทั้งหมดถูกอิเล็กโตรโฟเรสบนเจลอะกาโรส 1.5% เป็นเวลา 1 ชั่วโมงที่ 85 V เจลได้รับการตรวจสอบและถ่ายภาพโดย Ultra Violet Products Gel Documentation System (GELDOC-2000, Bio-Rad, USA)

การวัดการสร้าง ROS ภายในเซลล์

ตรวจพบการก่อตัวของเปอร์ออกไซด์ในเซลล์ด้วยกล้องจุลทรรศน์เลเซอร์แบบคอนโฟคอลสแกนโดยใช้สารประกอบที่ไม่เรืองแสง 2"7"-dichlorofluorescein diacetate (DCFH-DA) [13] ซึ่งถูกกำจัดเอสเทอเรสภายในเซลล์โดยเอสเทอเรสภายนอกจนกลายเป็นไอออนอิสระ กรด 2;7"-ไดคลอโรฟลูออเรสซิน 2",7-ไดคลอโรฟลูออเรสซีนสามารถถูกออกซิไดซ์เป็นฟลูออเรสเซนต์ 2"7"-ไดคลอโรฟลูออเรสซิน (DCF) โดยสารต้านอนุมูลอิสระแบบไฮโดรแอนติออกซิแดนท์ เซลล์ถูกบ่มด้วย 10 ไมโครโมลาร์ DCFH-DA เป็นเวลา 30 นาทีที่ 37 องศา ล้างวัฒนธรรมสองครั้งด้วยสารละลายเกลือที่สมดุลของแฮงค์และถ่ายภาพในตัวกลางเดียวกัน การถ่ายภาพเสร็จสิ้นโดยใช้กล้องจุลทรรศน์เลเซอร์แบบคอนโฟคอลสแกน DCF รู้สึกตื่นเต้นที่ 488 นาโนเมตร และตัวกรองการแผ่รังสีเป็นตัวกรองกั้น 510 นาโนเมตร เพื่อให้การเปรียบเทียบที่ถูกต้อง พารามิเตอร์การรับข้อมูลเดียวกันจึงถูกนำมาใช้สำหรับการสังเกตทั้งหมด ตำแหน่งแนวตั้งที่เหมาะสมที่สุดตรงกลางเซลล์ถูกกำหนดไว้ จากนั้นจึงสแกนฟิลด์อย่างรวดเร็ว เนื่องจากการส่องสว่างที่ความยาวคลื่นกระตุ้น 488 นาโนเมตรทำให้เกิดการเรืองแสงเพิ่มขึ้นเนื่องจากการเกิดออกซิเดชันของสีย้อมนี้ แต่ละฟิลด์จึงสัมผัสกับ Iight ในเวลาเดียวกัน ค่าพื้นฐานจากเซลล์ที่ไม่ถูกกระตุ้นถูกใช้เป็นค่าควบคุมเพื่อเปรียบเทียบกับเซลล์ที่บำบัดด้วย MPP＋ ในการมีอยู่หรือไม่มีทูบูโลไซด์ บี- หลังจากการสแกน ความเข้มของฟลูออเรสเซนซ์สัมพัทธ์โดยเฉลี่ยในตัวเซลล์ประสาท 15-20 ตัวต่อสนามกล้องจุลทรรศน์ถูกหาปริมาณในการเพาะเลี้ยงสี่แบบแยกกันต่อสภาวะการรักษา

การวิเคราะห์ทางสถิติ

ค่าทั้งหมดที่ได้รับแสดงเป็นค่าเฉลี่ย ±SD นัยสำคัญทางสถิติของความแตกต่างระหว่างกลุ่มถูกกำหนดโดยการทดสอบของนักเรียน ค่า p ที่คำนวณได้น้อยกว่า 0.05 ถือว่ามีนัยสำคัญทางสถิติ

ผลลัพธ์

ดังที่แสดงในรูปที่ 2 MPP+ สร้างการมีชีวิตของเซลล์ PCI2 ที่ลดลงขึ้นอยู่กับขนาดยา ในทางตรงกันข้าม EGF ซึ่งเป็นปัจจัยทางระบบประสาทที่รู้จักกันดี ได้สร้างการป้องกันที่สำคัญต่อความมีชีวิตของเซลล์ที่ผลกระทบต่อเซลล์พิษที่เกิดจาก MPP＋ 100 นาโนกรัม/มิลลิลิตร ก็ถูกทำให้อ่อนลงเช่นกันเมื่อมีทูบูโลไซด์ B (5, 10, 50 หรือ100 ug-ml{{12} }) แม้ว่าจะมีศักยภาพน้อยกว่าข้อมูลอ้างอิงก็ตาม

ยา (รูปที่ 3) Tubuloside B ที่ความเข้มข้นเหล่านี้แสดงผลในการป้องกันเซลล์ในลักษณะที่ขึ้นกับขนาดยา และสารประกอบเพียงอย่างเดียวไม่ก่อให้เกิดความเป็นพิษต่อเซลล์ที่ชัดเจน (ไม่ได้แสดงข้อมูล) เจลอิเล็กโตรโฟเรซิสของสารสกัด DNA จากเซลล์ PCI 2 ที่บำบัดด้วย 200 µM MPP+ เป็นเวลา 48 ชั่วโมงแสดงให้เห็นว่า DNA แลดเดอร์ ลักษณะคลาสสิกของการตายของเซลล์ tubuloside B ที่ขนาด 10 และ100μ g·ml-1 การศึกษาการก่อตัวของดีเอ็นเอแลดเดอร์ (รูปที่ 4) . รูปที่ 5 แสดงฮิสโทแกรมทั่วไปของการวิเคราะห์โฟลว์ไซโตเมทริกของการตายของเซลล์อะพอพโทติกที่เกิดจาก MPP＋ ในเซลล์ PC12 เมื่อมีหรือไม่มีทูบูโลไซด์ B. การหาปริมาณของโปรไฟล์วัฏจักรของเซลล์ด้วย PI เผยให้เห็นจำนวนเซลล์ที่มีลักษณะซับดิพลอยด์ (บริเวณ M1) บ่งบอกถึงการกระจายตัวของดีเอ็นเออะพอพโทติก ในเซลล์ที่ไม่ได้รับการรักษา เศษส่วนย่อยของอะพอพโทติกมีค่าน้อยที่สุดจนถึง 5.94% จากทั้งหมด 10,000 เซลล์ (รูปที่ 5 A) หลังจากการสัมผัสกับ MPP＋ เป็นเวลา 48 ชั่วโมง เปอร์เซ็นต์ของการตายของเซลล์เพิ่มขึ้นเป็น 43.02;j;(รูปที่ 5 B) เมื่อเพิ่มลงในการเพาะเลี้ยงเซลล์ tubuloside Bยับยั้ง MPP{0}} ที่เกิดจากการตายของเซลล์ในลักษณะขึ้นอยู่กับขนาดยา ที่ความเข้มข้น 10 ug·ml-1 การป้องกันโดย tubuloside B ไม่มีนัยสำคัญทางสถิติ แต่ที่ 50 และ 1 00ug·ml-1 ลดลง 45 ％ และ 63％ ตามลำดับ ถูกสังเกต. การเพิ่มเปอร์เซ็นต์ของเซลล์การอยู่รอด (รูปที่ 5D, E)

การสะสมของ ROS ในเซลล์สามารถตรวจพบได้โดยใช้เซลล์ DCFH-DA.PC12 ที่บำบัดด้วย 200 uM MPP＋ เป็นเวลา 48 ชั่วโมงจะแสดงการเรืองแสงที่รุนแรงภายในเซลล์หลังจากการย้อมด้วยสีย้อม DCFH-DA (รูปที่ 6) การรักษาด้วย tubuloside B พร้อมกัน (ที่ขนาด 10 และ 100 ไมโครกรัม·มล.) ยับยั้งการผลิต ROS ที่เกิดจาก MPP + 一 (เปอร์เซ็นต์ที่ลดลงคือ 24.52% และ 55.63% ตามลำดับ)

ถังเก็บน้ำธรรมชาติสำหรับรักษาโรคพาร์กินสัน PHGS75% ECH 30% ACT 12%

การอภิปราย

การเกิดโรคของ PD เกี่ยวข้องกับความเครียดจากปฏิกิริยาออกซิเดชั่นที่รุนแรง ระดับสารต้านอนุมูลอิสระที่ลดลง และข้อบกพร่องของไมโตคอนเดรีย เป็นที่รู้กันว่าทำให้เกิดการตายของเซลล์ในระบบเซลล์ต่างๆ โดยเฉพาะอย่างยิ่ง มีการแสดงอนุมูลอิสระเพื่อกระตุ้นการตายของเซลล์ที่ทำงานอยู่ในเซลล์ประสาท[14] MPTP ก่อให้เกิดกลุ่มอาการคล้ายพาร์กินโซเนียนที่ไม่สามารถรักษาให้หายได้และรุนแรง ซึ่งทำให้เกิดการเสื่อมแบบเลือกสรรของเซลล์ประสาทโดปามิเนอร์จิค nigrostriatal ในมนุษย์ นิวโรทอกซินนี้ถูกนำมาใช้เพื่อสร้าง. กินแบบจำลองสัตว์ของ PD [15] MPTP จะถูกแปลงโดย monoamine oxidase B เป็น Mpp + ซึ่งสะสมในไมโตคอนเดรีย โดยที่มันยับยั้งไมโตคอนเดรียคอมเพล็กซ์ I และความผิดปกติของไมโตคอนเดรีย การทำงานทำให้เกิดอะพอพโทซิส[16]. ดังนั้นพิษต่อระบบประสาทที่เกิดจาก MPP + 一ในเซลล์ประสาทโดปามิเนอร์จิคจึงถูกนำมาใช้อย่างกว้างขวางในฐานะแบบจำลองสาเหตุของ PD สำหรับการคัดกรองสารป้องกันระบบประสาท

ในการศึกษานี้ เราได้แสดงให้เห็นว่า MPP+-กระตุ้นการตายของเซลล์ผ่านความเครียดจากปฏิกิริยาออกซิเดชันในเซลล์ PC12 ลดลงด้วย tubuloside B นอกจากนี้ เรายังแสดงให้เห็นว่า tubuloside B ยังป้องกันในลักษณะที่ขึ้นกับปริมาณรังสีกับ MPP{{ 3}}เหนี่ยวนำให้เกิดลำดับขั้นของดีเอ็นเอและอะพอพโทซิส ตามที่วัดโดยใช้ดีเอ็นเอเจลอิเล็กโตรโฟรีซิสและการวิเคราะห์โฟลว์ไซโตเมทริก นอกจากนี้ การรักษาพร้อมกันด้วยความเข้มข้นของ tubuloside B ที่สูงขึ้นยังยับยั้งการผลิต ROS ที่เกิดจาก MPP ดังนั้น tubuloside B จึงแสดงผลการป้องกันระบบประสาทแบบมัลติฟังก์ชั่น กลไกหลายอย่าง อาจแยกจากกันหรือทำงานร่วมกัน อาจเกี่ยวข้องกับการออกฤทธิ์ของทูบูโลไซด์ บี ผลของสารต้านอนุมูลอิสระเป็นกลไกที่เป็นไปได้สำหรับการป้องกันระบบประสาทที่ใช้สื่อกลางทูบูโลไซด์ บี Xiong Q พบว่าทูบูโลไซด์ B มีฤทธิ์กำจัดอนุมูลอิสระที่รุนแรงในอนุมูลอิสระ 1,1-ไดฟีนิล-2-พิคริลไฮดราซิลและแซนทีน]แซนทีนออกซิเดสทำให้เกิดอนุมูลซูเปอร์ออกไซด์แอนไอออน

มีรายงานว่าฟีนิลทานอยด์หลายชนิดมีคุณสมบัติในการไล่อนุมูลอิสระและป้องกันการบาดเจ็บที่เป็นพิษที่เกิดจากความเครียดจากปฏิกิริยาออกซิเดชัน ROS ที่ผลิตโดย MPP+ เช่น ไฮโดรเจนเปอร์ออกไซด์ ซูเปอร์ออกไซด์แอนไอออน และอนุมูลไฮดรอกซิลจะสร้างความเสียหายให้กับโมเลกุลทางชีววิทยาทันที ซึ่งท้ายที่สุดสามารถนำไปสู่การตายของเซลล์อะพอพโทซิสหรือเซลล์ตายได้ ดังนั้น tubuloside B อาจมีผลโดยตรงต่อการกำจัด ROS แม้ว่าข้อมูลของเราไม่ได้ระบุตำแหน่งที่แน่นอนที่ tubuloside B ทำหน้าที่ระงับการสะสม ROS แต่ก็แนะนำว่ากลไกการป้องกันระบบประสาทเกี่ยวข้องกับการกระตุ้นเส้นทางการต้านอนุมูลอิสระ การศึกษาโครงสร้างโมเลกุลของ tubuloside B ยังบ่งชี้ด้วยว่ามีความสามารถที่มีศักยภาพในการกำจัดอนุมูลอิสระ(การสื่อสารส่วนตัว)

กลไกอื่นๆ ก็อาจเกี่ยวข้องได้เช่นกัน ตัวอย่างเช่น tubuloside B อาจมีความสามารถในการต่อต้านความเป็นพิษของ MPP＋ โดยการยับยั้งการเปิดรูขุมขนและความผิดปกติในการซึมผ่านของไมโตคอนเดรีย นอกจากนี้ ควรพิจารณาด้วยว่า tubuloside B มีผลส่งเสริมการเจริญเติบโตโดยตรงต่อเซลล์ประสาทหรือไม่ กลไกที่แน่นอนของฤทธิ์ป้องกันระบบประสาทของ tubuloside B ยังไม่ชัดเจน จำเป็นต้องมีการศึกษาเพิ่มเติมเพื่อชี้แจงภาพรวมของผลการป้องกันระบบประสาท

โดยสรุป tubuloside B จากสารสกัดซิสแทนเช่ซัลซ่ามีผลการป้องกันที่ชัดเจนต่อการตายของเซลล์และความเครียดจากปฏิกิริยาออกซิเดชัน MPP{0}} ผลการป้องกันระบบประสาทต่อความเป็นพิษของ MPP ＋ อาจมีความสำคัญและแนะนำว่าอาจมีศักยภาพในการรักษาในการป้องกันและรักษาโรค PD

ถังเก็บน้ำธรรมชาติสำหรับรักษาโรคพาร์กินสัน PHGS75% ECH 30% ACT 12%