ผลการรักษาและกลไกการสกัด Ligusticum Wallichii และการสั่งจ่ายฮอร์โมนเทสโทสเตอโรน 57 HairL/6 B Cin C

บทคัดย่อ:

วัตถุประสงค์ เพื่อสังเกตผลของการใช้สารสกัด Ligusticum wallichii และสารสกัดที่เป็นสารประกอบในท้องถิ่น (รวมถึง Ligusticum wallichii,Cistanche, Ginger, Platycladus orientalis, Ginseng, Salvia miltiorrhiza, Polygonum multiflor/6 บน C57Llorum) seborrheic alopecia model แล้วจึงสำรวจกลไกที่เกี่ยวข้องในนั้น

วิธีการ นำแบบจำลองภาวะผมร่วง seborrheic ของหนู C57BL/ 6 ตัวมาประยุกต์ใช้ฮอร์โมนเพศชายโลชั่นหลัง 21 วัน. หลังจากการรักษาแนวคิดที่แตกต่าง สารสกัด Ligusticum wallichii และสารสกัดที่หดตัวแล้ว ประเมินความยาวและความครอบคลุมของเส้นผมใหม่ในไมซ์ hair gtr Skin Moisture น้ำมันและการเปลี่ยนแปลงของอุณหภูมิถูกวัดโดยการทดสอบผิวหนัง การเปลี่ยนแปลงทางเนื้อเยื่อวิทยา เช่น ความหนาของผิวหนัง รูปร่างของรูขุมขน และขนาดของหนูในแต่ละกลุ่มวัดด้วยกล้องจุลทรรศน์ ระดับของ -MSN, TGF- 1 และ VEGF ในผิวหนังของหนูหลังจาก

ELISA ตรวจพบการบริหาร

ผลลัพธ์ สารสกัดแอลกอฮอล์ของ Ligusticum wallichii ส่งเสริมผมที่โตของหนูที่ร่วง และผลของกลุ่มที่ได้รับขนาดต่ำนั้นดีกว่าของกลุ่มที่ให้ขนาดสูงและกลุ่มสูตรผสม ผลลัพธ์ของค่าความชื้น น้ำมัน และอุณหภูมิแสดงให้เห็นว่าความชื้นในผิวหนังของหนูทดลองลดลง ปริมาณน้ำมันเพิ่มขึ้น วัดเพิ่มขึ้นเล็กน้อย หลังการบำบัด ปริมาณน้ำ ปริมาณน้ำมัน และอุณหภูมิของหนูจะกลับสู่ค่าปกติ ผลการตรวจเนื้อเยื่อพบว่า Ligusticum wallichii และรูปแบบสารประกอบสามารถเพิ่มความหนาและความชาของผิวหนังได้

รูขุมขนในระยะเจริญเติบโตของหนู นอกจากนี้ ปริมาณสูงและต่ำของ Ligusticum wallichii และสูตรสารประกอบสามารถส่งเสริมเนื้อหาของ -MSN, TGF- 1 และ VEGF ในผิวหนังของหนูในระดับที่ต่างกัน

บทสรุป การประยุกต์ใช้เฉพาะของยาจีนโบราณLigusticum wallichii สามารถส่งเสริมการเจริญเติบโตของเส้นขนในหนูเมาส์ที่มีภาวะผมร่วงจากฮอร์โมนแอนโดรเจเนติก l โดยฟื้นฟูมอยและอุณหภูมิในหนูทดลองที่มีผมร่วง และเพิ่ม VEGF, -MSN และ TGF- 1 ของผิวหนัง

คำสำคัญ: Ligusticum wallichii; C57BL/6หนู; ผมร่วง seborrheic;ฮอร์โมนเพศชาย

ยาจีนโบราณเชื่อว่าการก่อตัวของผมร่วงนั้นสัมพันธ์กับตับและไตบกพร่องและความอ่อนแอของเลือด qi. ยาจีนโบราณหลายชนิดมีหน้าที่ของบำรุงตับและไต, เอสเซ้นส์บำรุงและเลือด, เลือดเย็นและส่งเสริมการไหลเวียนโลหิตและมักใช้สำหรับผมร่วงและเม็ดเลือดขาว Chuanxiong มีลักษณะของธรรมชาติที่อบอุ่น รสฉุน และรสขมเล็กน้อย มันถูกบันทึกไว้ครั้งแรกใน "Shen Nong's Materia Medica" และสามารถใช้ร่วมกับยาอื่น ๆ เพื่อส่งเสริมการไหลเวียนโลหิต ส่งเสริมชี่ ขับลม และบรรเทาอาการปวด [7] ยาจีนโบราณอื่นๆ เช่น ขิง มีหน้าที่ในการบรรเทาภายนอกและขับความเย็น อุ่นตรงกลางและบรรเทาอาการอาเจียน ทำให้ปอดอบอุ่น และบรรเทาอาการไอ [8]; Polygonum multiflorum บำรุงเลือดและเติมเอสเซ้นส์ [9]

Arborvitae ทิ้งเลือดเย็นและขนสีดำ [9-10]; Salvia miltiorrhiza ส่งเสริมการไหลเวียนโลหิต ขับเลือดชะงักงัน และบรรเทาอาการปวด[11];

. การวิจัยสมัยใหม่พบว่ายาจีนโบราณสารประกอบหรือใบสั่งยาเดี่ยวสามารถส่งเสริมการเจริญเติบโตของรูขุมขนและเส้นผม และมีผลอย่างมากต่อการสูญเสียเส้นผม บางยาจีนโบราณสามารถยับยั้งการทำงานของ 5 -reductase มีฤทธิ์ต้านการอักเสบ ต้านแบคทีเรีย ต้านอนุมูลอิสระ และกิจกรรมทางสรีรวิทยาอื่นๆ ซึ่งทั้งหมดนี้ช่วยป้องกันผมร่วง เนื่องจากสารออกฤทธิ์ของยาจีนโบราณมีผลเล็กน้อยและมีผลทางโภชนาการและการรักษา จึงมีการใช้สารเหล่านี้ในเครื่องสำอางเพื่อการเจริญเติบโตของเส้นผมมากขึ้นเรื่อยๆ ในช่วงไม่กี่ปีที่ผ่านมา [13]

Cistanche ต่อต้านริ้วรอย

ในการทดลองนี้ ได้มีการสร้างแบบจำลอง AGA บนหนูเมาส์ C57BL/6 โดยใช้ฮอร์โมนเพศชายที่ด้านหลังและผลของสารสกัด Chuanxiong และสูตรผสม (รวมถึง Chuanxiong, ขิง, ใบโอเรียนเต็ลตะวันออก, โสม, Salvia miltiorrhiza, Polygonum multiflorum) และศึกษาผลของมัน กลไกเพื่อให้แนวคิดใหม่ในการพัฒนาการเตรียมการใหม่และสูตรใหม่ในการป้องกันการหลุดร่วงของเส้นผม

1 วัสดุ

1.1 น้ำยาและยา

ซื้อ Chuanxiong, Ginger, Cistanche, Arborvitae, Panax ginseng, Salvia miltiorrhiza และ Polygonum multiflorum จาก CHENGDU WECISTANCHE BIOTECH; ฮอร์โมนเพศชาย (ล็อต: 58-22-0) ถูกซื้อจากบริษัท Ron Reagent; Minoxidil Tincture (ล็อต: 20210615) ซื้อมาจาก Zhejiang Wansheng Pharmaceutical Co., Ltd.; เอทานอลปราศจากน้ำ (หมายเลขแบทช์: 2021-12-1) ถูกซื้อจาก Jindong Tianzheng Fine Chemical Reagent Factory; คลอรัลไฮเดรต (หมายเลขแบทช์: 302-17-0) ซื้อจาก McLean Reagent Company; - ซื้อชุดฮอร์โมนกระตุ้นเมลาโนไซต์ ( -MSH) จาก CUSABIO Reagent Company (หมายเลขแบทช์: N20016218); Transforming growth factor- 1 (TGF- 1) kit ถูกซื้อจาก Signalway Antibody Reagent Company (หมายเลขแบทช์: 211230); ซื้อชุด Vascular Endothelial Growth Factor (VEGF) จาก Signalway Anti-body Reagent Company (หมายเลขล็อต: 211230)

ซิสทานช์ สแน็ค

1.2 ตราสาร

เครื่องอ่านไมโครเพลท (Thermo Fisher Scientific), เครื่องฝัง EG1160 (Leica, เยอรมนี); Tissue-Tek® GlasTM 6410 เครื่องซีลปิดอัตโนมัติแบบปิด (Sakura, Japan); เครื่องกระจาย YD-AB (Jinhua Yidi Medical Equipment Co., Ltd.); เครื่องชั่งเชิงวิเคราะห์ที่ 1/100,000th (sartorius, MSX), เครื่องทำความสะอาดอัลตราโซนิก (ประเภท KQ-100), เครื่องทดสอบผิวหนัง (Fuxi), เครื่องทำความร้อน (PTHW HEAT-ER) , กล้องจุลทรรศน์แบบออปติคัล (BX53) , Olympus), เครื่องระเหยแบบหมุน, เครื่องทำให้เป็นเนื้อเดียวกัน (KFBIO), เครื่องหมุนเหวี่ยง (Cence, H1650R)

1.3 สัตว์

หนูเมาส์ C57BL/6 (คลาส SPF) เพศผู้ อายุ 5-6 สัปดาห์ สภาพร่างกาย

ปริมาณ 18-22 ก. จัดทำโดย Experimental Animal Center of Southern Medical University หมายเลขใบอนุญาต: SCXK (Guangdong) 2016-0041

2 วิธีทดลอง

2.1 การเตรียมสารละลายยา

สำหรับสารสกัด Chuanxiong (ยาตัวเดียว) ให้ชั่งน้ำหนักวัสดุยาของ Chuanxiong เติมเอทานอล 75 เปอร์เซ็นต์ (v/v) 4 เท่า และความร้อนภายใต้กรดไหลย้อนเพื่อสกัดเป็นเวลา 4 ชั่วโมง สำหรับสารสกัดผสม ชั่ง Chuanxiong ขิง ใบ arborvitae โสม ซัลเวีย และ Polygonum multiflorum (อัตราส่วน 1:1:1:1:1:1) และเพิ่มปริมาณเอทานอล 75 เปอร์เซ็นต์ 4 เท่า (v/v) เพื่อกรดไหลย้อนเพื่อสกัด 4 ชั่วโมง ยาตัวเดียวและสารสกัดผสมถูกกรองด้วยผ้ากอซเพื่อกำจัดยาตกค้างที่เหลือและทำให้เข้มข้นในเครื่องระเหยแบบหมุน สารสกัด Chuanxiong ถูกทำให้เข้มข้นถึง 1 g·mL-1 (รวมถึงยาที่ยังไม่ผ่านกระบวนการใดๆ) เป็นกลุ่มที่มีขนาดยาสูงของ Chuanxiong; ก่อนใช้ กลุ่มขนาดยาสูงถูกเจือจางเป็น 0.5 mg·mL-1 เป็นกลุ่มขนาดต่ำของ Chuanxiong สำหรับ Chuanxiong, Ginger, Arborvitae, Panax ginseng, Danshen และ Polygonum multiflorum compound group เข้มข้นถึง 1 g·mL

-1 (รวมถึงจำนวนยาดิบทั้งหมด) เก็บสารสกัดที่เตรียมไว้ในตู้เย็นที่อุณหภูมิ 4 องศา

Cistanche ปรับปรุงฮอร์โมนเพศชาย

2.2 การสร้างแบบจำลอง

ยกเว้นกลุ่มว่าง หนู C57BL/6 ในกลุ่มอื่น ๆ ถูกระงับความรู้สึกโดยการฉีดคลอรัลไฮเดรตในช่องท้อง (4 เปอร์เซ็นต์ น้ำหนัก/ปริมาตร) และขนด้านหลังถูกกำจัดออกด้วยครีมกำจัดขนที่ขนาดยา 10 มก.·กก.

-1 ขนาดยาของฮอร์โมนเพศชายถูกป้ายที่ด้านหลังของหนูเมาส์เป็นเวลา 21 วัน หลังจากผ่านไป 21 วัน เมื่อหลังของเมาส์เรียบและเป็นสีชมพูและขนไม่ขึ้นอีกต่อไป การสร้างแบบจำลองก็ถือว่าประสบความสำเร็จ

2.3 การจัดกลุ่มและการบริหารสัตว์

หนูเมาส์เพศผู้ C57BL/6 (เกรด SPF) ถูกสุ่มแบ่งเป็น 6 กลุ่ม โดยแต่ละกลุ่มมีหนู 6 ตัว ซึ่งถูกเก็บไว้ในกรงแยกกันและกำหนดหมายเลข [กลุ่มว่าง กลุ่มแบบจำลอง กลุ่มผลบวกของ minoxidil กลุ่มชวนเซียงขนาดต่ำ และสูง -dose chuanxiong กลุ่ม , กลุ่มสารประกอบ (ชวนซง: ขิง: Arborvitae: โสม: ซัลเวีย: Polygonum multiflorum=: 1: 1: 1: 1: 1)].

หลังจากสร้างแบบจำลองที่ประสบความสำเร็จ หนูในกลุ่มแบบจำลองไม่ได้รับการบริหาร หนูกลุ่มอื่น ๆ ถูกทาด้วย 0.3 มล. ของสารละลาย minoxidil (2 เปอร์เซ็นต์ ), ปริมาณสูงและต่ำของสารสกัด Chuanxiong และสูตรผสมที่ด้านหลัง ตามลำดับ เป็นเวลา 12 วัน วันละครั้ง หลังการให้ยา ด้านหลังของหนูถูกห่อด้วยพลาสติกห่อขนาดที่เหมาะสม เพื่อป้องกันการสูญเสียสารละลายยาจากด้านหลัง ในช่วงระยะเวลาการให้ยา มีการสังเกตและบันทึกการเจริญเติบโตของเส้นขนที่ด้านหลังของหนูในแต่ละกลุ่มทุกวัน

2.4 การกำหนดความยาวและความครอบคลุมของเส้นผมใหม่

ในวันที่ 8, 10 และ 12 ของการบริหาร ผม 10 เส้นจะถูกสุ่มออกจากหนูแต่ละตัว และวัดความยาวของผม (มม.) ด้วยไม้บรรทัด ผลการส่งเสริมการขาย EE1 (เอฟเฟกต์การเสริมประสิทธิภาพ) คำนวณตามสูตรต่อไปนี้:

เพิ่มเอฟเฟกต์ (ความยาวของผม) =

ความยาวผม (กลุ่มดูแล)

ความยาวผม (ชุดนางแบบ)

สูตร 1)

ในสูตร (1) ความยาวของเส้นผม (กลุ่มที่ให้การดูแล) คือค่าเฉลี่ยของความยาวผมเกิดใหม่ของหนูในแต่ละกลุ่มยา (n=6); ความยาวของเส้นผม (กลุ่มแบบจำลอง) คือค่าเฉลี่ยของความยาวผมที่เกิดใหม่ของหนูเมาส์ในกลุ่มควบคุม (แบบจำลอง) ( n=6)

ในวันที่ 4, 8 และ 12 ของการบริหาร พื้นที่ที่ปกคลุมโดยผมเกิดใหม่ที่ด้านหลังของหนูคำนวณโดยซอฟต์แวร์ imageJ และความคุ้มครองของเส้นผม ( เปอร์เซ็นต์ ) และผลการส่งเสริมการขาย EE2 คำนวณตามสูตรต่อไปนี้ :

ความครอบคลุมของเส้นผม ( เปอร์เซ็นต์ )=บริเวณขนบริเวณหลังการกำจัดขน

สูตร (2)

ผลการส่งเสริมการขาย (อัตราความครอบคลุมของเส้นผม)=อัตราความครอบคลุมของเส้นผม (กลุ่มบริหาร) อัตราความครอบคลุมของเส้นผม (กลุ่มรุ่น)

ในสูตร (3) พื้นที่ขนในสูตร (2) คือพื้นที่ที่เส้นผมเกิดใหม่ปกคลุมด้านหลังเมาส์ และพื้นที่กำจัดขนด้านหลังคือพื้นที่ของบริเวณที่โกนทั้งหมดด้านหลัง หนู; ในสูตร (3) ความครอบคลุมของเส้นผม (กลุ่มบริหาร) คือพื้นที่ของแต่ละ เปอร์เซ็นต์เฉลี่ยของความครอบคลุมของเส้นผมใหม่ในกลุ่มบริหาร (n=6) และความครอบคลุมของเส้นผม (กลุ่มควบคุม) คือค่าเฉลี่ย เปอร์เซ็นต์ของเส้นผมใหม่ในกลุ่มควบคุม (แบบจำลอง) (n=6)

2.5 การกำหนดความชื้น น้ำมัน และอุณหภูมิของผิวหนัง

หลังการรักษาหนู 12-วัน เครื่องทดสอบผิวหนัง (Fuxi) ถูกใช้เพื่อวัดและบันทึกค่าความชื้น น้ำมัน และอุณหภูมิของผิวหนังด้านหลังของหนู เพื่อตรวจสอบผลกระทบต่างๆ ของฮอร์โมนเทสโทสเตอโรนและยาเหล่านี้ ตัวชี้วัดทางผิวหนัง และเพื่อประเมินผลของยาต่อหนูรุ่น AGA ผลการรักษา

2.6 การสังเกตทางเนื้อเยื่อวิทยาของผิวหนังของหนู

หลังจากการรักษา 12 วัน หนูถูกสังเวย ผิวหนังด้านหลังจะถูกลบออกทันที แก้ไขด้วยสารละลายพาราฟอร์มัลดีไฮด์ 4 เปอร์เซ็นต์ อบแห้ง ฝังในพาราฟิน แบ่งส่วน ย้อมด้วยฮีมาทอกซิลิน-อีโอซิน (HE) และชิ้นที่เปื้อนถูกวางใน โดยอัตโนมัติ โครงสร้างผิวหนัง ความหนาเปลี่ยนแปลง และการเจริญเติบโตของรูขุมขนของหนูในกลุ่มต่างๆ สังเกตได้จากการสแกนด้วยเครื่องสแกนสไลด์ (KFBIO)

2.7 การกำหนดปัจจัย -MSH, TGF- 1 และ VEGF ในผิวหนังของเมาส์

ปัจจัย -MSH, TGF- 1 และ VEGF ถูกดำเนินการตามคำแนะนำที่เกี่ยวข้องของชุดเครื่องมือ -MSH ของเมาส์, ชุดอุปกรณ์ TGF- 1 ของเมาส์ และชุด VEGF ของเมาส์ ตามลำดับ

2.8 วิธีการประมวลผลทางสถิติ

SPSS 21.0 ซอฟต์แวร์ทางสถิติใช้สำหรับการวิเคราะห์ทางสถิติ และข้อมูลการทดลองแสดงเป็นค่าเฉลี่ย ± ส่วนเบี่ยงเบนมาตรฐาน (x ± s)

สนับสนุน:

wallence.suen@wecistanche.com