ผลการป้องกันของ echinacoside ต่อโรคไตจากเบาหวาน

สำหรับข้อมูลเพิ่มเติม:ali.ma@wecistanche.com

ผลการป้องกันของ echinacoside จาก cistanche ต่อการทำงานของไต เนื้อเยื่อไต และความเสียหายของเซลล์ mesangial ในหนูที่เป็นโรคไตจากเบาหวาน

He Qin, Liu Fan, Wang Hongli, Li Jianping, Duan Jun (แผนกการดูแลทางการแพทย์ Cadre, Caotang Ward, สถาบันวิทยาศาสตร์การแพทย์เสฉวน, โรงพยาบาลประชาชนมณฑลเสฉวน, เฉิงตู, เสฉวน)

คำสำคัญ: Cistanche; อิชินาโคไซด์;สารสกัดจากซิสแทนเช่โรคไตจากเบาหวาน; พังผืดคั่นระหว่างไต; อะพอพโทซิส; หนู

เบาหวานโรคไต(DN) เป็นเรื่องธรรมดาเบาหวานภาวะแทรกซ้อนของ microvascular ซึ่งไม่เพียง แต่ทำให้เกิดความเสียหายต่อไต แต่ยังส่งผลต่ออวัยวะอื่น ๆ โรคพังผืดของไตในท่อไตเป็นลักษณะทางพยาธิวิทยาหลักในทางคลินิก [1] พยาธิกำเนิดของโรคไตจากเบาหวานซับซ้อน. การศึกษาก่อนหน้านี้ [2-3] เชื่อว่าโรคนี้มีสาเหตุหลักมาจากภาวะน้ำตาลในเลือดสูงในเบาหวานผู้ป่วยซึ่งทำให้เกิดการเปลี่ยนแปลงของ hemodynamic ไตและการเผาผลาญผิดปกติ. อาการทางคลินิกคือโปรตีนในปัสสาวะและอัตราการกรองไตลดลง รอ. ปัจจุบันผู้ป่วยโรคโรคไตจากเบาหวานยังขาดวิธีการรักษาทางคลินิกที่มีประสิทธิภาพและการหายาที่มีประสิทธิภาพใหม่ ๆ เป็นกุญแจสำคัญในการรักษาโรคไตโรคเบาหวาน

เอ็กไคนาโคไซด์(ECH) เป็นหนึ่งในสารสกัดของCistancheทูบูโลซ่าซึ่งมีผลในการบำรุงไตและเสริมสร้างหยาง [4] การวิจัยทางเภสัชวิทยาสมัยใหม่ [5] แสดงให้เห็นว่าเอ็กไคนาโคไซด์จากcistancheมีฤทธิ์ต้านออกซิเดชัน ต้านอะพอพโทซิส ต้านการอักเสบ และฤทธิ์ทางเภสัชวิทยา เช่น ปรับปรุงการไหลเวียนของเลือดและจุลภาคEchinacosideจากcistancheยังสามารถควบคุมการเผาผลาญกลูโคสของร่างกายและปรับปรุงความทนทานต่อกลูโคส ในช่วงไม่กี่ปีที่ผ่านมา มีการศึกษา [6] แสดงให้เห็นว่าเอ็กไคนาโคไซด์จากcistancheอาจยับยั้งการเกิดพังผืดของไตของโรคไตจากเบาหวานหนูโดยการยับยั้งการเปลี่ยนเส้นทางการส่งสัญญาณของปัจจัยการเจริญเติบโต (TGF-) และปกป้องเนื้อเยื่อไตของหนู อย่างไรก็ตาม มีรายงานไม่กี่ฉบับในวรรณคดีเกี่ยวกับการรักษาโรคไตจากเบาหวานกับCistancheเอ็กไคนาโคไซด์และกลไกเฉพาะในการปกป้องโรคไตจากเบาหวานในหนูยังไม่ชัดเจน ดังนั้น การศึกษานี้จึงสำรวจเพิ่มเติมถึงผลกระทบและกลไกที่เป็นไปได้ของเอ็กไคนาโคไซด์จากCistancheเกี่ยวกับการเกิดพังผืดของไตและการตายของเซลล์เนื้อเยื่อไตในโรคไตจากเบาหวานหนูและมีวัตถุประสงค์เพื่อให้เป็นพื้นฐานทางทฤษฎีสำหรับการใช้งานทางคลินิกของเอ็กไคนาโคไซด์จากCistanche.

เอ็กไคนาโคไซด์ จาก Cistancheปกป้องโรคไตจากเบาหวาน

คลิกเพื่อดูประโยชน์และผลข้างเคียงของ Cistanche tubulosa

1 วัสดุและวิธีการ

1.1 สัตว์

หนู SD 60 ตัว เพศผู้ เกรด SPF อายุ 8 สัปดาห์ น้ำหนักตัว 240-280 ก. จัดหาโดย Beijing Weitong Lihua Laboratory Animal Technology Co., Ltd. หมายเลขใบอนุญาตสัตว์: SCXK (ปักกิ่ง) 2015-0001 สัตว์ ใบรับรองคุณภาพเลขที่: 11400700106210 เลี้ยงในห้องปฏิบัติการศูนย์เลี้ยงสัตว์ของโรงพยาบาล โดยรักษาอุณหภูมิห้องให้คงที่ที่ 25 องศา จำลองกลางวันและกลางคืน เปลี่ยนสภาพแสงทุกๆ 12 ชั่วโมง และให้สัตว์กินและดื่มได้ฟรี

1.2 ยาและรีเอเจนต์

เอ็กไคนาโคไซด์, สถาบันวิจัยการควบคุมอาหารและยาแห่งประเทศจีน หมายเลขล็อต: 111670-201706; Losartan Potassium, Hangzhou Merck Pharmaceutical Co., Ltd., มาตรฐานเวชศาสตร์แห่งชาติ: H20030654; Streptozotocin, บริษัท American Sigma, Lot Number: 040103; ชุดทดสอบปริมาณโปรตีนในปัสสาวะ Ningbo Meikang Biotechnology Co., Ltd. Science And Technology Co., Ltd., หมายเลขแบทช์: 20170612; ชุดตรวจจับ TUNEL, Amictech Technology Co., Ltd., หมายเลขแบทช์: 20180406; ชุดสกัด RNA, ชุดถอดรหัสย้อนกลับ, Shanghai Hengfei Biotechnology Co., Ltd., หมายเลขแบทช์: 20180705, 20180904; เซรั่มกรดไฮยาลูโรนิก (HA), ตัวยับยั้งเนื้อเยื่อเมทัลโลโปรตีเนส-1 (TIMP-1) ​​และชุดตรวจหาลามินิน (ลามินิน, LN), Shanghai Yuanmu Biotechnology Co., Ltd., หมายเลขแบทช์คือ: 20180612, 20180624, 20180706; โมเลกุลการยึดเกาะของเซลล์หลอดเลือด 1 (โมเลกุลการยึดเกาะของเซลล์หลอดเลือด- 1, VCAM- 1), การเปลี่ยนแปลงปัจจัยการเจริญเติบโต (ปัจจัยการเจริญเติบโตที่เปลี่ยนแปลง, TGF- ) และ - แอนติบอดีของแอคตินในกล้ามเนื้อเรียบ ( -SMA) บริษัทซานตาครูซ สหรัฐอเมริกา หมายเลขแบทช์: sc13160, sc130348, sc-324317; เอนไซม์เปอร์ออกไซด์มะรุม (มะรุมเปอร์ออกซิเดส, HRP) ที่ติดฉลากว่าต่อต้านกระต่าย IgG ของแพะ, บริษัท DAKO ของเดนมาร์ก, หมายเลขแบทช์: P0447

1.3 รุ่นเครื่องมือ

เครื่องวิเคราะห์ชีวเคมีอัตโนมัติ 7600 บริษัท Japan HITACHI; เครื่องวัดระดับน้ำตาลในเลือดแบบพกพา Beijing Yicheng Bioelectronics Technology Co., Ltd.; กล้องจุลทรรศน์แสง BX60 บริษัท OLYMPUS ของญี่ปุ่น; SN-695B radioimmunoassay analyser, Shanghai Rihuan Instruments Shenbei Co., Ltd.; เครื่องมือ PCR เชิงปริมาณเรืองแสง IQTM5 บริษัท American Bio-Rad; DYY-6C เครื่องมืออิเล็กโทรโฟเรซิส, โรงงานเครื่องมือ Liuyi ปักกิ่ง; AlphaImager ระบบวิเคราะห์ภาพเจล HP, American Alpha Innotech Company

1.4 การจัดกลุ่ม การจำลองแบบ และวิธีการบริหารจัดการ

หนูให้อาหารล่วงหน้า 60 ตัว เป็นเวลา 1 สัปดาห์ และสุ่มแบ่งเป็นกลุ่มควบคุม กลุ่มแบบจำลองเอ็กไคนาโคไซด์กลุ่มที่ให้ยาสูง ปานกลาง และต่ำ และกลุ่มโลซาร์แทนโพแทสเซียม 10 หนูในแต่ละกลุ่ม กลุ่มโมเดล,เอ็กไคนาโคไซด์และกลุ่มยาโลซาร์แทนโพแทสเซียมได้รับการรักษาด้วยอาหารที่มีไขมันสูงและน้ำตาลสูงร่วมกับสเตรปโตโซโทซินขนาดต่ำเพื่อกระตุ้นแบบจำลองของหนูโรคไตจากเบาหวาน[6]. ก่อนที่แบบจำลองจะจำลองขึ้น หนูได้อดอาหารด้วยน้ำเป็นเวลา 12 ชั่วโมง หนูในกลุ่มควบคุมได้รับอาหารธรรมดา และหนูกลุ่มอื่นได้รับอาหารที่มีไขมันสูงและน้ำตาลสูง หลังจากให้อาหารอย่างต่อเนื่อง 4 สัปดาห์ หนูในกลุ่มควบคุมได้รับการฉีดในช่องท้องเพียงครั้งเดียวด้วยปริมาตรที่เท่ากันของบัฟเฟอร์ซิเตรต และกลุ่มที่เหลือได้รับการฉีด streptozotocin Bacteriocin (40 มก.·กก.-1) ในช่องท้องเพียงครั้งเดียว จำลองหนูโมเดลของโรคไตจากเบาหวาน. 72 ชั่วโมงหลังจากที่หนูฉีดสเตรปโตโซโทซิน ระดับน้ำตาลในเลือดมากกว่าหรือเท่ากับ 16.7 มิลลิโมล·L-1 และอัตราการขับโปรตีนในปัสสาวะ 24-ชั่วโมงหลังจาก 3 สัปดาห์นั้นสูงกว่าของ กลุ่มควบคุม และการหาปริมาณโปรตีนในปัสสาวะ 24-ชั่วโมง มากกว่าร้อยละ 50 ก่อนการจำลองแบบ ซึ่งบ่งชี้ว่าแบบจำลอง สำเนาสำเร็จ สี่สัปดาห์หลังการฉีดสเตรปโตโซโตซิน ปริมาณต่ำ กลาง และสูงเอ็กไคนาโคไซด์กลุ่มได้รับ 20 มก.·กก.-1, 50 มก.·กก.-1 และ 100 มก.·กก.-1เอ็กไคนาโคไซด์( ละลายในน้ำเกลือปกติที่ 37 องศา ตามมาตรฐาน 5 มล.·กก.-1 สำหรับน้ำหนักตัวของหนู หนูในกลุ่มโลซาร์แทนโพแทสเซียมจะได้รับโลซาร์แทนโพแทสเซียม 16 มก.·กก. ทางปาก-1 ให้กลุ่มรุ่นและกลุ่มควบคุมในปริมาณเท่ากันโดยให้น้ำเกลือปกติวันละครั้งเป็นเวลา 2 สัปดาห์

1.5 การเก็บตัวอย่าง

หลังจากการให้ยาครั้งสุดท้าย หนูได้อดอาหารโดยไม่มีอาหารและน้ำ และบันทึกปริมาณน้ำที่หนูกินเป็นเวลา 24 ชั่วโมง และเก็บปัสสาวะเป็นเวลา 24 ชั่วโมง เช้าตรู่ของวันที่สอง หนูถูกชั่งน้ำหนัก หลังจากเก็บปัสสาวะ การฉีดสารละลายโซเดียมเพนโทบาร์บิทัล 2 เปอร์เซ็นต์ 2 เปอร์เซ็นต์ 2 มล.กก.-1 สำหรับการดมยาสลบ การแยกเลือดจากหลอดเลือดแดงในช่องท้องของหนู การหมุนเหวี่ยง (3 500 r·min-1, 15 นาที) และเก็บเซรั่ม เก็บในตู้เย็นชั่วคราวที่อุณหภูมิ -20 องศา ; แยกเนื้อเยื่อไตของหนูออกเป็นสองส่วน ส่วนหนึ่งตรึงด้วยพาราฟอร์มัลดีไฮด์ 4 เปอร์เซ็นต์ อีกส่วนหนึ่งเตรียมเป็นเนื้อเดียวกัน 10 เปอร์เซ็นต์ และวางในตู้เย็น -80 องศาเพื่อใช้ในภายหลัง

1.6 ความมุ่งมั่นของการเผาผลาญกลูโคสและไขมันในหนู

ใช้ซีรั่มจากหนูแต่ละกลุ่ม ใช้เครื่องวัดระดับน้ำตาลในเลือดเพื่อวัดระดับน้ำตาลในเลือดขณะอดอาหาร และเครื่องวิเคราะห์ทางชีวเคมีอัตโนมัติเพื่อตรวจหาไตรกลีเซอไรด์เอสเทอร์ คอเลสเตอรอล และระดับไลโปโปรตีนความหนาแน่นต่ำ

1.7 24 นำโปรตีนในปัสสาวะ การทำงานของไต และตัวบ่งชี้ที่เกี่ยวข้องกับพังผืดของไต

ปัสสาวะ 24 ชม. ของหนูแต่ละกลุ่ม ปริมาณไมโครโปรตีนในปัสสาวะ 24- ชม. ถูกกำหนดโดยการตรวจภูมิคุ้มกันด้วยคลื่นวิทยุ และดำเนินการตามคำแนะนำอย่างเคร่งครัด เก็บซีรั่มของหนูแต่ละกลุ่ม และตรวจพบเนื้อหาของครีเอตินินในเลือดและยูเรียไนโตรเจนโดยเครื่องวิเคราะห์ทางชีวเคมีอัตโนมัติ ELISA ตรวจพบระดับ TIMP-1 ในซีรัม และตรวจพบระดับ HA และ LN โดย การตรวจภูมิคุ้มกันด้วยรังสี การดำเนินการได้ดำเนินการอย่างเคร่งครัดตามคำแนะนำ

1.8 HE การย้อมสีเพื่อสังเกตการเปลี่ยนแปลงทางพยาธิสภาพของเนื้อเยื่อไตและการย้อมสี TUNEL

สังเกตการตายของเซลล์เนื้อเยื่อไต นำเนื้อเยื่อไตที่ตายตัวของแต่ละกลุ่มมาฝังไว้ในพาราฟินแล้วแบ่งส่วน ส่วนหนึ่งใช้สำหรับการย้อมสี HE เพื่อสังเกตการเปลี่ยนแปลงทางสัณฐานวิทยาของท่อไต โกลเมอรูไล และคั่นระหว่างไตภายใต้กล้องจุลทรรศน์แบบใช้แสง อีกส่วนใช้สำหรับย้อมสี TUNEL ทำงานตามคำแนะนำของชุดอุปกรณ์ และสังเกตจำนวนและความเป็นบวกของเซลล์เนื้อเยื่อไตภายใต้กล้องจุลทรรศน์ จำนวนเซลล์ อัตราส่วนจำนวนเซลล์บวกต่อจำนวนเซลล์เนื้อเยื่อไต คือ คำนวณซึ่งเป็นอัตราการตายของเซลล์

2 ผลลัพธ์

1. วิธี Western Blot เพื่อกำหนดการแสดงออกของโปรตีน VCAM-1, TGF- และ -SMA ในเนื้อเยื่อไต

ใช้ homogenate เนื้อเยื่อไตของหนูประมาณ 50 มก. ละลายด้วยเซลล์ไลเสตที่มีสารยับยั้งโปรตีเอส และแยกโปรตีนทั้งหมดด้วยไลเซตของเซลล์ โดยใช้วิธีการ BCA สำหรับการหาปริมาณโปรตีน ตัวอย่างโปรตีนทั้งหมดที่สกัดโดย 50 ไมโครโมล·L-1 ถูกถ่ายโอนไปยังเมมเบรนไนโตรเซลลูโลสโดยพอลิอะคริลาไมด์เจลอิเล็กโตรโฟรีซิสและปิดผนึกด้วยนมไขมันต่ำ 5 เปอร์เซ็นต์ จากนั้นจึงเติมแอนติบอดีปฐมภูมิ (1∶1000) และ -แอคตินโปรตีนตามลำดับ โมโนโคลนัลแอนติบอดี (1:300) ฟักตัวในชั่วข้ามคืนที่ 4 องศา สุดท้าย เพิ่มแอนติบอดีทุติยภูมิและฟักเป็นเวลา 2 ชั่วโมงที่ 37 องศา และตรวจสอบโดยอิเล็กโตรเคมีลูมิเนสเซนซ์ ใช้ซอฟต์แวร์วิเคราะห์ภาพ Photoshop เพื่อวิเคราะห์ค่าสีเทาของแถบโปรตีน

2 ผลการศึกษาแสดงให้เห็นถึงผลของอิไคนาโคไซด์ต่อการเผาผลาญกลูโคสและไขมันในหนูที่เป็นโรคไตจากเบาหวาน

เมื่อเปรียบเทียบกับกลุ่มควบคุม ระดับน้ำตาลในเลือดที่อดอาหารของหนูกลุ่มตัวอย่างเพิ่มขึ้นอย่างมีนัยสำคัญ และความแตกต่างมีนัยสำคัญทางสถิติ (P<0.05); triglycerides,="" cholesterol,="" and="" low-density="" lipoprotein="" increased,="" but="" the="" difference="" was="" not="" statistically="" significant="" (p="">0.05) ) เมื่อเทียบกับกลุ่มแบบจำลอง ระดับน้ำตาลในเลือดที่อดอาหารของหนูในกลุ่มที่ได้รับยาระดับกลางและระดับสูงของเอ็กไคนาโคไซด์และกลุ่มโลซาร์แทนโพแทสเซียมลดลงอย่างมีนัยสำคัญ และความแตกต่างมีนัยสำคัญทางสถิติ (P<0.05); triglycerides,="" cholesterol,="" and="" low-density="" lipoprotein="" were="" reduced,="" but="" the="" difference="" was="" not="" statistically="" significant="" (p="">0.05).

3 ผลของอิไคนาโคไซด์ต่อโปรตีนในปัสสาวะ 24-ชั่วโมงและการทำงานของไตในหนูที่เป็นโรคไตจากเบาหวาน

เมื่อเปรียบเทียบกับกลุ่มควบคุม ระดับไมโครอัลบูมินในปัสสาวะ ยูเรียไนโตรเจน และครีเอตินีนของกลุ่มตัวอย่างเพิ่มขึ้นอย่างมีนัยสำคัญทางสถิติ และความแตกต่างมีนัยสำคัญทางสถิติ (P<0.05); compared="" with="" the="" model="" group,="" the="" middle="" and="" high="" dose="">เอ็กไคนาโคไซด์กลุ่ม ระดับไมโครอัลบูมินในปัสสาวะ ยูเรียไนโตรเจน และครีเอตินีนของหนูในกลุ่มโพแทสเซียมและโลซาร์แทนโปแตสเซียมลดลงอย่างมีนัยสำคัญ และความแตกต่างมีนัยสำคัญทางสถิติ (P<>

4 ผลของ echinacoside ต่อการเกิดพังผืดของไตในหนูที่เป็นโรคไตจากเบาหวาน

เมื่อเปรียบเทียบกับกลุ่มควบคุม ระดับซีรัมของ HA, TIMP-1 และ LN ในกลุ่มแบบจำลองเพิ่มขึ้นอย่างมีนัยสำคัญ และความแตกต่างมีนัยสำคัญทางสถิติ (P<0.05); the="" levels="" of="" ha,="" timp-1,="" and="" ln="" of="" rats="" in="" the="" sartan="" potassium="" group="" were="" significantly="" reduced,="" and="" the="" differences="" were="" statistically="" significant=""><>

5 การย้อมสี HE เพื่อสังเกตการเปลี่ยนแปลงทางพยาธิสภาพของเนื้อเยื่อไตในหนูที่เป็นโรคไตจากเบาหวาน

โครงสร้างเซลล์ของเนื้อเยื่อไตนั้นสมบูรณ์และไม่พบการเปลี่ยนแปลงทางพยาธิสภาพที่ชัดเจน การย้อมสี HE ของหนูในกลุ่มแบบจำลองและขนาดต่ำเอ็กไคนาโคไซด์กลุ่มแสดงให้เห็น: โกลเมอรูลัสบวมและเพิ่มขึ้นในปริมาตร เซลล์เยื่อบุผิวท่อไตบวมหรือหลุดออก คั่นระหว่างไตพร้อมกับการแทรกซึมของเซลล์อักเสบ และบาง mesangial hyperplasia และ interstitial proliferation ก็มองเห็นได้ พังผืด HE การย้อมสีหนูในปริมาณปานกลางและสูงของเอ็กไคนาโคไซด์และกลุ่มยาโลซาร์แทนโปแตสเซียมพบว่ารอยโรคของเนื้อเยื่อไตลดลงอย่างมีนัยสำคัญ โดยมีการแทรกซึมของเซลล์อักเสบเพียงเล็กน้อย, mesangial hyperplasia และ interstitial fibrosis ก็เบากว่ากลุ่มตัวอย่าง

6 ผลของอิไคนาโคไซด์ต่อการตายของเนื้อเยื่อไตในหนูที่เป็นโรคไตจากเบาหวาน

การย้อมสี TUNEL แสดงให้เห็นว่าเมื่อเทียบกับกลุ่มควบคุม อัตราการตายของเซลล์ของหนูในกลุ่มตัวอย่างเพิ่มขึ้นอย่างมีนัยสำคัญ และความแตกต่างมีนัยสำคัญทางสถิติ (P＜0.05); อัตราการตายของเซลล์หนูในกลุ่มโพแทสเซียมสีแทนลดลงอย่างมีนัยสำคัญ และความแตกต่างมีนัยสำคัญทางสถิติ (P<>

7 ผลของอิไคนาโคไซด์ต่อการแสดงออกของยีนที่เกี่ยวข้องกับการตายของเซลล์ในเนื้อเยื่อไตของหนูที่เป็นโรคไตจากเบาหวาน

ผล RT-PCR แสดงให้เห็นว่าเมื่อเปรียบเทียบกับกลุ่มควบคุม การแสดงออกของ Bax และ Caspase-3 mRNA ในกลุ่มแบบจำลองมีการควบคุมที่เพิ่มขึ้นอย่างมีนัยสำคัญ และการแสดงออกของ Bcl-2 mRNA ถูกควบคุมอย่างมีนัยสำคัญ และความแตกต่างมีนัยสำคัญทางสถิติ (P<0.05); compared="" with="" the="" model="" group="" in="" comparison,="" the="" expression="" of="" bax="" and="" caspase-3="" mrna="" was="" significantly="" down-regulated="" in="" the="" middle="" and="" high-dose="">เอ็กไคนาโคไซด์กลุ่มและกลุ่มโลซาร์แทนโพแทสเซียม และการแสดงออกของ Bcl-2 mRNA มีการควบคุมที่เพิ่มขึ้นอย่างมีนัยสำคัญ และความแตกต่างมีนัยสำคัญทางสถิติ (P<>

8 ผลของอิไคนาโคไซด์ต่อการแสดงออกของโปรตีน VCAM-1, TGF- และ -SMA ในหนูที่เป็นโรคไตจากเบาหวาน

เมื่อเปรียบเทียบกับกลุ่มควบคุม การแสดงออกของโปรตีน VCAM-1, TGF- และ -SMA ในกลุ่มแบบจำลองมีการควบคุมที่เพิ่มขึ้นอย่างมีนัยสำคัญ และความแตกต่างมีนัยสำคัญทางสถิติ (P<0.05); the="" expressions="" of="" vcam-1,="" tgf-β,="" and="" α-sma="" proteins="" in="" rats="" in="" the="" dose="" group="" and="" the="" losartan="" potassium="" group="" were="" significantly="" down-regulated,="" and="" the="" differences="" were="" statistically="" significant=""><>

3 การอภิปราย

จุดเริ่มต้นของโรคไตจากเบาหวานถูกซ่อนไว้และการเกิดโรคมีความซับซ้อนและหลากหลาย เมื่อก่อตัวแล้วจะรักษาได้ยาก เป็นโรคเรื้อรังที่มีอันตรายร้ายแรงและเป็นสาเหตุสำคัญของโรคไตวายเรื้อรังระยะสุดท้าย [8] ผู้ป่วยโรคไตจากเบาหวานมักได้รับการรักษาด้วยสารยับยั้งเอนไซม์ที่ทำให้เกิด angiotensin และตัวรับ angiotensin receptor antagonists แต่ผลการรักษาทางคลินิกไม่ค่อยน่าพอใจ [9] โลซาร์แทนโปแตสเซียมเป็นตัวรับแอนจิโอเทนซิน Ⅱ รีเซพเตอร์ ซึ่งสามารถใช้รักษาความดันโลหิตสูงที่จำเป็นได้ การศึกษาบางชิ้น [10-11] แสดงให้เห็นว่าโลซาร์แทนโพแทสเซียมยังสามารถยับยั้งการทำงานของไตในหนูด้วยโรคไตจากเบาหวานพังผืดปกป้องการทำงานของไต ดังนั้น การศึกษานี้จึงเลือกโลซาร์แทนโพแทสเซียมเป็นตัวควบคุมเชิงบวกเพื่อเปรียบเทียบผลการป้องกันของเอ็กไคนาโคไซด์บนเนื้อเยื่อไตของหนูด้วยโรคไตโรคเบาหวานการศึกษาทางคลินิก [12-13] แสดงให้เห็นว่าเนื้อหาของเอ็กไคนาโคไซด์ใน Changui Yishen Capsules ประมาณ 3.104 มก. · กก.-1 หลังจากแปลงตามปริมาณการบริหารให้คนและเมาส์ ปริมาณต่ำสุดของ Changui Yishen Capsules สำหรับโรคไตจากเบาหวานหนูคือ 0.648 g·kg-1 และเปลี่ยนขนาดยาเป็นเอ็กไคนาโคไซด์คือประมาณ 2 มก.·กก.-1 เนื่องจากมีรายงานทางคลินิกเพียงเล็กน้อยเกี่ยวกับการรักษาเอ็กไคนาโคไซด์สำหรับโรคเบาหวานหรือโรคไต การศึกษานี้เลือกขนาดยาที่ต่ำที่สุด 10 เท่าของขนาดยาทางคลินิก นั่นคือ 20 มก.·กก.-1 เอ็กไคนาโคไซด์เป็นขนาดต่ำ และเพิ่มตามลำดับ 50 มก.·กก.-1เอ็กไคนาโคไซด์เป็นขนาดปานกลาง และ 100 มก.·กก.-1เอ็กไคนาโคไซด์เป็นปริมาณที่สูง

Echinacoside จาก cistanche รักษาโรคไตจากเบาหวาน

ในการศึกษานี้ การให้ยาในขนาดต่ำเอ็กไคนาโคไซด์ไม่มีผลชัดเจนต่อเนื้อเยื่อไตของโรคไตจากเบาหวานหนูในขณะที่ปริมาณปานกลางและสูงของเอ็กไคนาโคไซด์สามารถปรับปรุงการเปลี่ยนแปลงทางพยาธิสภาพของเนื้อเยื่อไตอย่างมีนัยสำคัญและปรับปรุงความเสียหายของเนื้อเยื่อไตในโรคไตจากเบาหวานหนู , แนะนำว่าปริมาณปานกลางและสูงของเอ็กไคนาโคไซด์สามารถป้องกันความเสียหายของเนื้อเยื่อไตของโรคไตจากเบาหวานหนูในลักษณะที่ขึ้นกับความเข้มข้น และคาดว่าจะใช้ในการรักษาทางคลินิกโรคไตจากเบาหวาน. ในการศึกษานี้ การให้ยาขนาดปานกลางและสูงเอ็กไคนาโคไซด์สามารถเพิ่มมวลกายของหนูได้อย่างมีนัยสำคัญด้วยโรคไตจากเบาหวานและลดปริมาณน้ำ ปริมาณปัสสาวะ และระดับน้ำตาลในเลือดที่อดอาหาร การศึกษาทางคลินิก [14] แสดงให้เห็นว่าอินซูลินในผู้ป่วยที่มีโรคไตจากเบาหวานอยู่ในภาวะขาดสัมบูรณ์หรือสัมพัทธ์ และระดับน้ำตาลในเลือดสูงขึ้น ความเข้มข้นของกลูโคสในเลือดที่มากเกินไปจะเกินความสามารถในการดูดกลับของไต ขับออกทางปัสสาวะ ความถี่ในการปัสสาวะเพิ่มขึ้น และน้ำดื่มเพิ่มขึ้น มวลกายที่ลดลงนั้นสอดคล้องกับผลการศึกษาครั้งนี้ ซึ่งชี้ให้เห็นว่าเอ็กไคนาโคไซด์อาจเพิ่มมวลกายของโรคไตจากเบาหวานหนูโดยการลดน้ำตาลในเลือดและลดการดื่มและปัสสาวะของพวกเขา

ในการศึกษานี้ การให้ยาขนาดปานกลางและสูงเอ็กไคนาโคไซด์สามารถลดปริมาณไมโครอัลบูมินในปัสสาวะ ครีเอตินีน และยูเรียไนโตรเจนในหนูได้อย่างมีนัยสำคัญด้วยโรคไตจากเบาหวาน. ครีเอทินีนและยูเรียไนโตรเจนส่วนใหญ่ถูกขับออกจากร่างกายผ่านการกรองไต ซึ่งสามารถสะท้อนการทำงานของไตได้แม่นยำยิ่งขึ้น เมื่อไตทำงานผิดปกติ อัตราการกรองไตลดลง ความเข้มข้นของครีเอตินีนในเลือดและยูเรียไนโตรเจนจะเพิ่มขึ้นอย่างมาก [15] ระดับโปรตีนในปัสสาวะเป็นหนึ่งในตัวชี้วัดที่ใช้กันมากที่สุดเพื่อสะท้อนถึงระดับของความเสียหายของไต ซึ่งสามารถทำลายเซลล์ mesangial โดยตรง และยังสามารถทำให้ความเสียหายของไตและการทำงานของไตแย่ลงอีกด้วย [16] การวิจัยโดย Zhang Yun et al. [17] พบว่าน้ำตาลในเลือดสูงในหนูที่มีโรคไตจากเบาหวานอาจทำให้อัตราการกรองไตลดลง ส่งผลให้ระดับครีเอตินีนในเลือด ยูเรียไนโตรเจน และระดับไมโครอัลบูมินในปัสสาวะเพิ่มขึ้น ผลการศึกษาครั้งนี้ชี้ให้เห็นว่าเอ็กไคนาโคไซด์อาจลดน้ำตาลในเลือด ปรับปรุงการทำงานของไต ลดครีเอตินินในเลือด ยูเรียไนโตรเจน และระดับไมโครอัลบูมินในปัสสาวะ และปรับปรุงความเสียหายของเซลล์เนื้อเยื่อไต

ในการศึกษานี้ การให้ยาขนาดปานกลางและสูงเอ็กไคนาโคไซด์สามารถลดการแสดงออกของ Bax และ Caspase-3 mRNA in . ได้อย่างมากโรคไตจากเบาหวานหนู ควบคุมการแสดงออกของ Bcl-2 mRNA และยับยั้งการตายของเซลล์เนื้อเยื่อไต ยีน Bax เป็นสมาชิกโปรอะพอพโทติคของตระกูล Bcl-2 ภายใต้สภาวะทางสรีรวิทยา Bax และ Bcl-2 จะสร้างเฮเทอโรไดเมอร์ ซึ่งลดการซึมผ่านของเยื่อหุ้มเซลล์และการปล่อยไซโตโครม C เมื่อการแสดงออกของ Bcl-2 ถูกควบคุมลง จะทำให้เกิดการซึมผ่านของเซลล์เพิ่มขึ้น ปล่อยไซโตโครมซี กระตุ้นการเรียงซ้อนแคสเปสที่ปลายน้ำ และกระตุ้นการตายของเซลล์ [18] แคสเปส-3เป็นโมเลกุลบริหารกระบวนการอะพอพโทซิส ซึ่งสามารถย่อยสลายโปรตีนที่สำคัญหลายชนิดในเซลล์และมีส่วนร่วมในการตายของเซลล์ [19] การศึกษาของดงและคณะ (20) แสดงให้เห็นว่าเอ็กไคนาโคไซด์สามารถยับยั้งการตายของเซลล์แบบอะพอพโทซิสได้ ซึ่งสอดคล้องกับผลการศึกษาครั้งนี้ ชี้ให้เห็นว่าเอ็กไคนาโคไซด์สามารถยับยั้งการตายของเซลล์เนื้อเยื่อไตซึ่งช่วยป้องกันความเสียหายของเนื้อเยื่อไต ในการศึกษานี้ การให้ยาขนาดปานกลางและสูงเอ็กไคนาโคไซด์สามารถลดการแสดงออกของโปรตีน VCAM-1 ในโรคไตจากเบาหวานหนู VCAM-1 เป็นโมเลกุลการยึดเกาะของเซลล์หลอดเลือดที่สำคัญ ซึ่งเกี่ยวข้องอย่างใกล้ชิดกับการเกิดขึ้นและการพัฒนาของเบาหวาน ไตy และสามารถใช้สำหรับการประเมินทางคลินิกของผู้ป่วยด้วยโรคไตจากเบาหวาน[21]. การศึกษาของจางและคณะ [22] แสดงให้เห็นว่า VCAM-1 สามารถกระตุ้นการตายของเซลล์ประสาทหลังจากการตกเลือดในสมองในหนูแรท ผลการศึกษานี้ชี้ให้เห็นว่าการให้ยาขนาดปานกลางและสูงเอ็กไคนาโคไซด์อาจยับยั้งการแสดงออกของ VCAM-1 และยับยั้งการตายของเซลล์ไตในหนูที่เป็นโรคไตจากเบาหวาน

ในการศึกษานี้ การให้ยาขนาดปานกลางและสูงเอ็กไคนาโคไซด์สามารถลดระดับของ HA, TIMP-1 และ LN ในหนูได้อย่างมากด้วยโรคไตโรคเบาหวานHA เป็นองค์ประกอบหลักของเมทริกซ์นอกเซลล์ และ LN เป็นไกลโคโปรตีนที่มีโครงสร้างที่สำคัญ ซึ่งเป็นตัวบ่งชี้ทางคลินิกที่ใช้กันทั่วไปของการเกิดพังผืดของเนื้อเยื่อ [23] TIMP-1 เป็นตัวยับยั้งเมทริกซ์เมทัลโลโปรตีน (MMP) ซึ่งสามารถยับยั้งการแสดงออกของ MMP ยับยั้งการเสื่อมสภาพของเมทริกซ์นอกเซลล์ และส่งเสริมการเกิดพังผืดของเนื้อเยื่อไต [24] การศึกษาโดย Bieniaa et al. [25] แสดงให้เห็นว่า TIMP-1 สามารถยับยั้งการแสดงออกของ MMP ส่งเสริมการแสดงออกของ HA และ LN และส่งเสริมการเกิดขึ้นและการพัฒนาของพังผืดของเนื้อเยื่อไต ซึ่งสอดคล้องกับผลการศึกษาครั้งนี้ ชี้ให้เห็นว่าเอ็กไคนาโคไซด์อาจยับยั้งระดับ HA, TIMP-1 และ LN ยับยั้งการเกิดขึ้นและการพัฒนาของการเกิดพังผืดในไต ในการศึกษานี้ การให้ยาขนาดปานกลางและสูงเอ็กไคนาโคไซด์สามารถลดการแสดงออกของโปรตีน TGF- และ -SMA ลงได้อย่างมากในโรคไตจากเบาหวานหนู การศึกษาจำนวนมาก [26-27] ได้แสดงให้เห็นว่าวิถีการส่งสัญญาณ TGF- /Smad มีบทบาทสำคัญในการเกิดขึ้นและการพัฒนาของพังผืดคั่นระหว่างหน้าในไต เมื่อ TGF- จับกับตัวรับในเยื่อหุ้มเซลล์ มันสามารถทำให้เกิดฟอสโฟรีเลต Smad2 และ Smad3 และ Smad ที่กระตุ้นการทำงานจะสร้างทริมเมอร์ ซึ่งจะถ่ายโอนไปยังนิวเคลียสเพื่อควบคุมการแสดงออกของโมเลกุลเอฟเฟกต์ดาวน์สตรีม เช่น -SMA และเมทริกซ์เมทัลโลโปรตีน กระตุ้นการสร้างพังผืดในไต [28] -SMA เป็นสัญญาณของการเปลี่ยนแปลงของไฟโบรบลาสต์เป็นมัยโอไฟโบรบลาสต์ ซึ่งสามารถส่งเสริมการหลั่งและการสะสมของเมทริกซ์นอกเซลล์ และส่งเสริมการเกิดพังผืดในไต ข้อเสียคือขนาดตัวอย่างมีขนาดเล็ก ซึ่งอาจทำให้เกิดข้อผิดพลาดทางสถิติบางอย่างในผลลัพธ์ แต่สามารถให้พื้นฐานทางทฤษฎีบางประการสำหรับการเลือกขนาดยาและการประยุกต์ใช้ทางคลินิกของเอ็กไคนาโคไซด์.

อ้างอิง:

[1] ZANCHI C, MASSONI D, TRIONFINI P, และคณะ MicroRNA-184 เป็นเอฟเฟกเตอร์ปลายทางของอัลบูมินูเรียที่ขับการเกิดพังผืดของไตในหนูที่มีโรคไตจากเบาหวาน[เจ]. Diabetologia, 2017, 60(6): 1114-1125.

[2] TENCEL GC, YILDRIM S. การแสดงออกที่เพิ่มขึ้นของ eNOS และ iNOS มีความสัมพันธ์กับการตายของเซลล์โรคไตจากเบาหวานในชนิดที่ชักนำให้เกิดสเตรปโตโซโตซิน 1เบาหวานหนู[J]. เจ คอมพ์ ปทุม, 2559, 154(1): 63.

[3] SCHALKWIJK CG, CHATURVEDI N, TWAAFHOVEN H, et al.Amadori- อัลบูมินมีความสัมพันธ์กับภาวะแทรกซ้อนของ microvascular และนำไปสู่โรคไตในประเภทที่ 1เบาหวานผู้ป่วย[J]. Eur J Clin Invest, 2015, 32(7): 500-506.

[4] Wei Dawei, Ge Xinyu, Liu Yihan, และคณะเอ็กไคนาโคไซด์กระตุ้นเซลล์ต้นกำเนิดจากไขกระดูกให้เติบโต การศึกษาความแตกต่างของเซลล์สร้างกระดูก[J] เภสัชวิทยาและคลินิกของ Chinese Materia Medica, 2017, 33(2): 48-52.

[5]MORIKAWA T, NINOMIYA K, IMAMURA M, และคณะ อะซิเลต- ฟีนิลเลทานอยด์ไกลโคไซด์เอ็กไคนาโคไซด์และแอคทีโอไซด์จากCistanchetubulosa ปรับปรุงความทนทานต่อกลูโคสในหนูทดลอง[J] เจ นัท เมด, 2014, 68(3): 561-566.

[6]Guo Congcong, Jiao Mingwen, Zhang Yaqin, และคณะ การปรับปรุงและประเมินวิธีการสร้างแบบจำลองของฝ่ายเดียวการผ่าตัดไตร่วมกับการชักนำให้เกิดสเตรปโตโซโตซินโรคไตจากเบาหวานในหนู[J]. ความก้าวหน้าทางสัตวแพทยศาสตร์ พ.ศ. 2562 40 (2): 135-139

[7] He Zhu, Kuang Shixiang, Zhang Shusen, และคณะ Naotong ยาต้มกับเซลล์ประสาทฮิปโปแคมปัสของหนูแรทขาดออกซิเจน/ออกซิเจน อิทธิพลของการแสดงออกของ Bcl-2, Bax และ Caspase-3[J] วารสารจีนผู้สูงอายุ, 2015, 23 (24): 6973-6976.

[8]ROSSING P. ส่งเสริม ทำนาย และป้องกันความก้าวหน้าของโรคไตในโรคเบาหวานประเภท 1[J]เบาหวานMed, 2015, 15 (11): 900-919.

[9] เปา เจี้ยนโจว, โจว เปาหัว. การศึกษาทางคลินิก 68 รายของโรคไตจากเบาหวานรับการรักษาโดย Yiqi Yangyin Huoxue Decoction [J] เภสัชวิทยาและคลินิกของ Chinese Materia Medica, 2015, 31(2): 177-178.