การศึกษาผลการส่งเสริมความฉลาดของการรวมกันของไกลโคไซด์ทั้งหมดของ Cistanche Deserticola และ Lycium Barbarum Polysaccharides ในหนูเมาส์ C57BL/6J ที่อายุต่างกัน

สรุป

วัตถุประสงค์: เพื่อศึกษาผลของ glycosides ทั้งหมดของ cistanche Deserticola ร่วมกับ Lycium barbarum polysaccharides ต่อความสามารถในการเรียนรู้และความจำ การสังเคราะห์และการเสื่อมสลายของสารสื่อประสาท cholinergic และระดับความเครียดออกซิเดชันในสมองของหนู C57BL/6J ในเดือนต่างๆ ของปี อายุ. วิธีการ: หนูเมาส์ C57BL/6J จำนวน 48 ตัวอายุ 3, 6 และ 9 เดือนแต่ละตัวถูกแบ่งแบบสุ่มเป็นกลุ่มควบคุม กลุ่มที่มี glycosides ของ cistanche Deserticola 100 มก./กก. กลุ่ม Lycium barbarum polysaccharide 100 มก./กก. และรวมกัน (ไกลโคไซด์ทั้งหมดของ กลุ่มซิสแทนช์ เดสริโคลา 100 มก./กก. บวกไลเซียม บาร์บารัม โพลีแซคคาไรด์ 100 มก./กก.) หลังจากให้ยาทางช่องท้องเป็นเวลา 30 วัน ความสามารถในการเรียนรู้และความจำของหนูในวัยต่างๆ ที่มีอายุหลายเดือนได้รับการประเมินโดยการทดสอบเขาวงกตน้ำมอร์ริส การทดสอบการหลีกเลี่ยงความมืด และการทดสอบการกระโดดบนแท่น วัดระดับของ AChE, ChAT, T-SOD, GSH-Px และ MDA ในเปลือกสมองของหนูที่อายุหลายเดือนโดยการวัดสี ผลลัพธ์: เมื่อเปรียบเทียบกับกลุ่มควบคุม ความสามารถในการเรียนรู้และความจำของหนูในกลุ่มผสมอายุ 1 เดือนแต่ละกลุ่มได้รับการปรับปรุง กิจกรรมของ Chat และ T-SOD ในเยื่อหุ้มสมองของหนูในกลุ่มอายุ 3 และ {18}}เดือน กลุ่มผสมเพิ่มขึ้นอย่างมีนัยสำคัญ กิจกรรมของ ChAT และ GSH-Px ในเยื่อหุ้มสมองของหนูในกลุ่มผสมอายุ 9-เดือนเพิ่มขึ้นอย่างมีนัยสำคัญ และเนื้อหาของ MDA ในเปลือกสมองของหนูใน 6 และ 9-กลุ่มผสมอายุหนึ่งเดือนลดลงอย่างมีนัยสำคัญ (P<0.05) 05 or P<0 01). Conclusion: The combined administration of Cistanche glycosides and Lycium barbarum polysaccharides can improve the learning and memory abilities of C57BL/6J mice aged 3, 6, and 9 months, and its mechanism may be related to regulating the synthesis and degradation of cholinergic neurotransmitters in the brain and inhibiting the level of oxidative stress in the brain.

คำหลัก

ไกลโคไซด์รวมของซิสแทนช์ เดสริคอลก; Lycium barbarum โพลีแซคคาไรด์; อะเซทิลโคลีน; ความเครียดออกซิเดชัน

การเรียนรู้และความจำเป็นกิจกรรมอัจฉริยะขั้นสูงของระบบประสาทส่วนกลาง และสัมพันธ์กันอย่างใกล้ชิด ในตอนท้ายของศตวรรษที่ผ่านมา องค์การอนามัยโลกได้กำหนดและดำเนินการ "แผนการวิจัยวิทยาศาสตร์สมอง" และประเทศต่างๆ เช่น สหรัฐอเมริกาและญี่ปุ่นได้ดำเนินแผนการวิจัยอย่างแข็งขันเพื่อไขปริศนาของสมองมนุษย์ ไขปริศนาของ ความจำและแสวงหาวิธีการที่มีประสิทธิภาพและยาเพื่อปรับปรุงการเรียนรู้ของมนุษย์และการทำงานของหน่วยความจำและป้องกันและรักษาความผิดปกติของการเรียนรู้และความจำของมนุษย์ ไม่ต้องสงสัยเลยว่าการปรับปรุงฟังก์ชันการเรียนรู้และความจำ ตลอดจนการป้องกันและรักษาโรคที่เกี่ยวข้องจะเป็นภารกิจหลักในสาขาวิทยาศาสตร์เพื่อชีวิต

ซิสแทนช์ เดสทิโคลาและLycium barbarumเป็นสมุนไพรปรับสีผิวแบบดั้งเดิม 2 ชนิดที่ใช้กันทั่วไปในทางคลินิก ไกลโคไซด์ทั้งหมดของ Cistanche Deserticola คือสารสกัดเอทานอลจากลำต้นเนื้อแห้งเป็นเกล็ดของพืชตระกูล Orobaceae Cistanche Deserticola หรือ Cistanche Tubulosa มีการศึกษาพบว่าไกลโคไซด์ทั้งหมดของ Cistanche Deserticola มีผลอย่างมีนัยสำคัญต่อความเสียหายของเซลล์ PC12 ที่เกิดจาก A 1-42 มีผลในการป้องกันอย่างมีนัยสำคัญ [2] และสามารถปรับปรุงการเรียนรู้ที่เกิดจาก A 1-42 และความบกพร่องทางสติปัญญาและระดับความเครียดออกซิเดชันในหนูที่เป็นโรคอัลไซเมอร์ Lycium barbarum polysaccharide เป็นหนึ่งในส่วนประกอบที่มีประสิทธิภาพหลักที่สกัดจากผลของ Lycium barbarum ซึ่งมีฤทธิ์ต้านความเมื่อยล้า ชะลอวัย ต้านอนุมูลอิสระ และป้องกันระบบประสาทในการวิจัยตามใบสั่งแพทย์โบราณพบว่า Cistanche Deserticola มักมีบทบาทในการต่อต้านริ้วรอยร่วมกับผลเบอร์รี่จีน อย่างไรก็ตาม ไม่มีรายงานวรรณกรรมที่เกี่ยวข้องเกี่ยวกับการใช้ทั้งสองอย่างร่วมกันในการส่งเสริมความฉลาด ในการทดลองนี้ ใช้หนู C57BL/6J อายุ 3, 6 และ 9 เดือนเพื่อตรวจสอบผลกระทบของ glycosides ทั้งหมดของ cistanche Deserticola ร่วมกับ Lycium barbarum polysaccharides ต่อความสามารถในการเรียนรู้และความจำของหนู C57BL/6J ที่มีอายุหลายเดือนและที่เกี่ยวข้อง กลไกต่างๆ ผ่านการทดลองพฤติกรรม การกำหนดตัวบ่งชี้ที่เกี่ยวข้องกับความเครียดจากโคลิเนอร์จิคและออกซิเดชั่นในสมอง เพื่อให้เป็นพื้นฐานการวิจัยบางอย่างสำหรับการประยุกต์ใช้ทางคลินิกในการส่งเสริมความฉลาด

Chinese medicines such as ginseng, Cistanche deserticola, and astragalus

ยาจีนเช่นโสม Cistanche Deserticola และตาตุ่ม

1 วัสดุและอุปกรณ์

1.1 สัตว์ทดลอง

มีหนู 48 ตัว เกรด SPF C57BL/6J อายุ 3, 6 และ 9 เดือน อย่างละตัว เพศผู้อย่างละครึ่งและเพศเมียที่ซื้อมาจาก Nanjing Junke Biotechnology Co., Ltd. โดยมีใบรับรองสัตว์ทดลองหมายเลข 20180006018886 ในระหว่างการทดลอง ให้รับประทานฟรี น้ำและไฟสลับและไฟส่องสว่างมืด 12 ชั่วโมง การทดลองทั้งหมดดำเนินการตามระเบียบการทดลอง ส่วนการดำเนินการและการจัดการเป็นไปตามระเบียบการจัดการสัตว์ทดลองที่เกี่ยวข้อง

วัสดุยาจีนเช่น cistanche

คลิกที่นี่เพื่อดูผลิตภัณฑ์ Cistanche

【Ask for more】 Email: xue122522@foxmail.com / Whats App: 0086 18599088692 / Wechat: 18599088692

1.2 ยาและน้ำยา

ไกลโคไซด์ทั้งหมดของ cistanche Deserticola (เศษส่วนมวลมากกว่าหรือเท่ากับ 80 เปอร์เซ็นต์ หมายเลขแบทช์: JZ20092513), Lycium barbarum polysaccharides (เศษส่วนมวลมากกว่าหรือเท่ากับ 90 เปอร์เซ็นต์ หมายเลขแบทช์: JZ21042710), Nanjing Jingzhu Biotechnology Co., Ltd; BCA Kit, Acetylcholinesterase (AChE) Kit, Acetylcholine Transferase (ChAT) Kit, Malondialdehyde (MDA) Kit, Total Superoxide Dismutase (T-SOD) Kit, Glutathione Catalase (GSH-Px) Kit, Nanjing Jiancheng Biological Engineering Research Institute

1.3 เครื่องดนตรีหลัก

DMS-2 อุปกรณ์ทดลอง Morris Water Maze, DTT-2 Mouse Platform Jumping Device, SBA-2 อุปกรณ์ทดสอบการหลีกเลี่ยงความมืดของเมาส์, สถาบันการแพทย์, สถาบันวิทยาศาสตร์การแพทย์จีน; 4503R เครื่องหมุนเหวี่ยงความเร็วสูงอุณหภูมิต่ำ Eppendorf เยอรมนี VARIOSKAN FLASH ELISA, Thermo Corporation, สหรัฐอเมริกา

2 วิธี

2.1 การจัดกลุ่มและการบริหารสัตว์

หนูเมาส์ C57BL/6J จำนวน 48 ตัวอายุ 3, 6 และ 9 เดือนแต่ละตัวถูกสุ่มแบ่งออกเป็น 4 กลุ่ม โดยแต่ละกลุ่มมีหนู 12 ตัว เพศผู้ครึ่งตัวและเพศเมียครึ่งตัว รวมทั้งกลุ่มควบคุมเปล่า ไกลโคไซด์รวมของกลุ่ม Cistanche Deserticola (100 มก. /กก.), กลุ่ม Lycium barbarum polysaccharide (100 มก./กก.) และกลุ่มที่รวมกัน (glycosides ทั้งหมดของ Cistanche Deserticola บวกกับ Lycium barbarum polysaccharide 100 มก./กก.) พวกมันถูกบริหารให้ทุกวันโดย gavage เป็นเวลา 1 เดือน

2.2 การทดลองเขาวงกตน้ำมอร์ริส

อุปกรณ์ประกอบด้วยสระน้ำทรงกลมสีดำ แท่นวงกลมโปร่งใส กล้อง และระบบรับและประมวลผลภาพอัตโนมัติ ขอบสระด้านนอกแบ่งเท่าๆ กันออกเป็นสี่จุดที่น้ำเข้า: ตะวันออก ตะวันตก ใต้ และเหนือ ภายในสระมีแท่นโปร่งทรงกลมขนาดเส้นผ่านศูนย์กลาง 15 ซม. ในระหว่างการทดลอง ให้รักษาอุณหภูมิให้คงที่ ฉนวนกันเสียง และไม่มีแสงส่องโดยตรง เพื่อป้องกันปัจจัยภายนอกไม่ให้รบกวนหนู การทดลองดำเนินการเป็นเวลาทั้งหมดหกวัน ตั้งแต่วันแรกถึงวันที่ห้า ได้ทำการทดลองการนำทางตำแหน่ง โดยบันทึกเวลาที่เมาส์พบแพลตฟอร์มภายใน 120 วินาที ซึ่งเป็นเวลาแฝงในการหลบหนี หากเมาส์ไม่พบแพลตฟอร์มภายใน 120 วินาที เวลาแฝงในการหลบหนีคือ 120 วินาที หลังจากการฝึกแล้ว เมาส์แต่ละตัวไม่ว่าจะพบแท่นหรือไม่ก็ตาม ให้วางบนแท่นเพื่อเรียนรู้เป็นเวลา 15 วินาที และลงไปในน้ำจากควอดแดรนต์สัมพัทธ์ที่อยู่ติดกันของแท่นเพื่อเรียนรู้วันละสองครั้ง ในวันที่หก ได้มีการทดลองสำรวจอวกาศและถอดแท่นออก ครั้งแรกที่ข้ามแพลตฟอร์มหลังจากป้อนน้ำจากควอแดรนต์สัมพัทธ์ที่อยู่ติดกัน และวัดจำนวนครั้งที่ข้ามแพลตฟอร์มภายใน 120 วินาที

2.3 การทดลองหลีกเลี่ยงความมืด

อุปกรณ์นี้แบ่งออกเป็นสองห้องคือเปิดและมืด ห้องทั้งสองเชื่อมต่อกันด้วยรูเล็ก ๆ เพื่อให้หนูเข้าและออกได้ กระแสไฟฟ้า 40 V จ่ายไปที่ด้านล่างของห้องมืด ในขณะที่ไม่มีกระแสไฟฟ้าจ่ายไปที่ด้านล่างของห้องสว่าง การทดลองแบ่งออกเป็น 2 ช่วง คือ วันแรกเป็นขั้นการเรียนรู้ ขั้นแรกให้วางเมาส์กลับเข้าไปในรูแล้วใส่เข้าไปในห้องที่มีแสงสว่าง หลังจากปล่อยให้มันเคลื่อนไหวอย่างอิสระในห้องสองห้องเป็นเวลา 2 ถึง 3 นาทีเพื่อปรับตัวเข้ากับสภาพแวดล้อม ให้วางเมาส์กลับเข้าไปในรูและวางมันไว้ในห้องที่สว่าง นิสัยของหนูที่ชอบอยู่ในความมืดและหลีกเลี่ยงแสง และชอบเจาะรู จะทำให้หนูเข้าไปในห้องมืดและถูกไฟฟ้าดูดได้ หากหนูไม่เข้าไป มันจะถูกต้อนเข้าไปในห้องมืดเพื่อสร้างความทรงจำ วันที่สองเป็นขั้นตอนการทดสอบ นำหนูกลับเข้าไปในช่องแสงและบันทึกระยะเวลาฟักตัวของหนูที่เข้าไปในห้องมืดจากห้องแสงและจำนวนครั้งที่เข้าไปในห้องมืดภายใน 3 นาทีเป็นผลการทดสอบ

2.4 การทดลองดำน้ำบนแท่น

อุปกรณ์แท่นดำน้ำเป็นรูปสี่เหลี่ยมผืนผ้าขนาด 20 ซม. × 20 ซม. × ก 30 ซม. โดยมีแท่นยางหุ้มฉนวนที่ด้านล่างเพื่อให้หนูยืนได้และใช้กระแสไฟฟ้า 36 โวลต์ การทดลองดำเนินการสองวันติดต่อกัน โดยวันแรกเป็นช่วงการเรียนรู้และการฝึกอบรม ขั้นแรก หนูถูกวางไว้ในกล่องทดสอบแท่นกระโดดและปล่อยให้เคลื่อนไหวอย่างอิสระเป็นเวลา 3 นาทีเพื่อปรับตัวให้เข้ากับสภาพแวดล้อม จากนั้น หนูถูกวางบนแท่นฉนวน โดยตะแกรงทองแดงด้านล่างจะได้รับพลังงานสำหรับการกระตุ้นอย่างต่อเนื่องเป็นเวลา 180 วินาที หลังจากได้รับไฟฟ้าช็อต หนูทั้งสองก็กระโดดขึ้นไปบนแท่นเพื่อหลีกเลี่ยงไฟฟ้าช็อต หากหนูไม่กระโดดขึ้นไปบนแท่น พวกมันจะถูกนำทางด้วยตนเองไปยังแท่นฉนวนโดยผู้ดำเนินการทดลอง วันที่สองเป็นช่วงการทดสอบ วางเมาส์บนแท่นที่หุ้มฉนวน จากนั้นเพิ่มพลังงานให้กับกริดทองแดงด้านล่าง บันทึกเวลาที่เมาส์กระโดดออกจากแท่นเป็นครั้งแรกเป็นระยะเวลาแฝง จำนวนครั้งที่เมาส์กระโดดออกจากแท่นภายใน 180 วินาทีจะถูกบันทึกเป็นหมายเลขข้อผิดพลาด หากเมาส์ไม่กระโดดออกจากแท่นภายใน 180 วินาที ระยะเวลาแฝงจะถูกบันทึกเป็น 180 วินาที

2.5 การตรวจจับดัชนี

ในตอนท้ายของการทดลองพฤติกรรม หนูถูกตัดศีรษะ เยื่อหุ้มสมองถูกแยกออกอย่างรวดเร็วที่อุณหภูมิต่ำ และเนื้อเยื่อเปลือกนอกจำนวนหนึ่งได้รับการชั่งน้ำหนักอย่างแม่นยำ เพิ่มปริมาตรของน้ำเกลือธรรมดาถึงเก้าเท่า โฮโมจีเนตถูกทำให้เป็นเนื้อเดียวกัน 10 เปอร์เซ็นต์ และหมุนเหวี่ยงที่ 4 องศาที่ 3000 รอบ/นาที เป็นเวลา 10 นาที หลังจากเก็บส่วนเหนือตะกอนและวัดความเข้มข้นของโปรตีนด้วยชุด BCA แล้ว การทดลองได้ดำเนินการอย่างเคร่งครัดตามขั้นตอนในคำแนะนำของชุด AChE, ChAT, MDA, T SOD และ GSH-Px

2.6 การประมวลผลทางสถิติ

ใช้ SPSS 19 สำหรับซอฟต์แวร์ข้อมูลทั้งหมด 0 สำหรับการวิเคราะห์ทางสถิติ ในการทดลองเขาวงกตน้ำมอร์ริส ข้อมูลการทดลองการนำทางตำแหน่งได้รับการวิเคราะห์โดยใช้การวิเคราะห์ความแปรปรวนสองทาง ในขณะที่ข้อมูลการทดลองอื่นๆ วิเคราะห์โดยใช้การวิเคราะห์ความแปรปรวนทางเดียวร่วมกับการทดสอบ LSD เพื่อเปรียบเทียบความแตกต่างระหว่างกลุ่ม ผลลัพธ์ถูกแสดงเป็น (􀭰 x ± s) โดย P<0 05 as a statistically significant difference, using Origin 2021 for mapping.

3 ผลลัพธ์

Cistanche Deserticola มา

3.1 ผลของความเข้ากันได้ของ glycosides ทั้งหมดของ cistanche Deserticola และ Lycium barbarum polysaccharides ต่อการทดสอบ Morris water maze ในหนูเมาส์ C57BL/6J ที่อายุต่างกัน

ดังที่แสดงในรูปที่ 1 เมื่อเปรียบเทียบกับกลุ่มควบคุม ไม่มีการเปลี่ยนแปลงอย่างมีนัยสำคัญในเวลาแฝงการหลบหนีของหนูอายุ 3 และ 6-เดือนในแต่ละกลุ่มการรักษา ในขณะที่เวลาแฝงการหลบหนีของ 9- หนูอายุหนึ่งเดือนในแต่ละกลุ่มการรักษาในวันที่ 4 สั้นลงอย่างมีนัยสำคัญ (P<0. 05) 05). In the space exploration experiment, compared with the control group, the first time crossing platform time of the 6 and 9-month-old mouse combination group was significantly shortened, the number of times crossing platform in each month-old mouse combination group was significantly increased, the target quadrant residence time was significantly prolonged, and the target quadrant residence time of the 3 and 9-month-old mice in the total glycosides of cistanche deserticola group was significantly prolonged (P<0.05) 05 or P<0 01). The effect of the combination of total glycosides of cistanche deserticola and Lycium barbarum polysaccharides on the dark avoidance experiment in C57BL/6J mice at different months of age is shown in Figure 2. Compared with the control group, the incubation period of mice in the 3-month combined group was significantly prolonged, the number of errors in each month combined group was significantly reduced, and the number of errors in the 9-month Lycium barbarum polysaccharide group was significantly reduced (P<0. 05) 05 or P<0 .01).

3.2 ผลของความเข้ากันได้ของ glycosides ทั้งหมดของ cistanche Deserticola และ Lycium barbarum polysaccharides ต่อการทดสอบการกระโดดบนแท่นในหนูเมาส์ C57BL/6J ที่มีอายุเดือนต่างกัน

As shown in Figure 3, there was no statistically significant difference in latency and the number of errors in platform jumping experiments among mice in each group (P>0. 05) 05).

3.3 ผลของความเข้ากันได้ของ glycosides ทั้งหมดของ cistanche Deserticola และ Lycium barbarum polysaccharides ต่อการสังเคราะห์และการย่อยสลายของ ACh ในเปลือกสมองของหนู C57BL/6J ที่อายุต่างกัน

โสมทะเลทราย

ดังแสดงในรูปที่ 4 เมื่อเปรียบเทียบกับกลุ่มควบคุม กิจกรรมของ ChAT ในเปลือกสมองของหนูในกลุ่มที่รวมกันในแต่ละเดือนของอายุเพิ่มขึ้นอย่างมีนัยสำคัญ (P<0. 05) 05 or P<0 01).

3.4 ผลของความเข้ากันได้ของ glycosides ทั้งหมดของ cistanche Deserticola และ Lycium barbarum polysaccharides ต่อการสังเคราะห์และการย่อยสลายของ ACh ในเปลือกสมองของหนู C57BL/6J ที่อายุต่างกัน

3.5 ผลของความเข้ากันได้ของ glycosides ทั้งหมดของ cistanche Deserticola และ Lycium barbarum polysaccharides ต่อระดับของ MDA, T-SOD, GSH-Px ในเปลือกสมองของหนู C57BL/6J ที่อายุต่างกัน

ดังแสดงในรูปที่ 5 เมื่อเปรียบเทียบกับกลุ่มควบคุม ระดับ MDA ในเปลือกสมองของหนูในกลุ่มอายุร่วมเดือน 6-และ 9-เดือน และเดือน 6- - กลุ่ม glycosides ทั้งหมดของ cistanche Deserticola ลดลงอย่างมีนัยสำคัญ ระดับ T-SOD ในเปลือกสมองของหนูใน 3-กลุ่มอายุหนึ่งเดือนและ 6-อายุหนึ่งเดือนเพิ่มขึ้นอย่างมีนัยสำคัญ และ GSH- ระดับ Px ในกลุ่ม Lycium barbarum polysaccharide อายุ 9-1 เดือนและกลุ่มที่รวมกันเพิ่มขึ้นอย่างมีนัยสำคัญ (P<0. 05) 05 or P<0 01).

รูปที่ 1 ผลของ glycosides ทั้งหมดของ cistanche Deserticola รวมกับ lycium barbarum polysaccharides ต่อการทดสอบ Morris water maze ในหนู C57BL/6J ที่มีอายุหลายเดือน

A. กลุ่มควบคุม B. กลุ่ม Cistanche glycosides C. กลุ่ม Lycium barbarum polysaccharide D. กลุ่มรวมกัน