การศึกษาการทำงานของระบบประสาทและภูมิคุ้มกันของ Cistanche Deserticola และผลิตภัณฑ์นึ่งไวน์ข้าวในหนูทดลองที่ได้รับ Glucocorticoid

ติดต่อ: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 อีเมล:audrey.hu@wecistanche.com

Bonan Liu,Ji Shi,Zhe Li,Chao Zhang,Pengpeng Liu,Wei Yao และ Tianzhu Jia

1 School of Pharmacy, Liaoning University of Traditional Chinese Medicine, Dalian 116600, China

2 โรงพยาบาลแห่งที่สองของ Dalian Medical University, Dalian 116600, China

เชิงนามธรรม

ที่อาศัยในทะเลทรายสมุนไพร Cistancheได้รับการบันทึกครั้งแรกใน "เสินหน่อสมุนไพรคลาสสิก" และถูกระบุว่าเป็นยาสมุนไพรชั้นดีในเอกสารฉบับนี้ /e ตำรับยาจีนบันทึกชิ้นส่วนของ Cistanche deserticola(CD) และข้าวนึ่งไวน์Cistanche deserticola(WCD) สามารถใช้ในคลินิกเป็นยาต้มประเภทหลักได้ หลังจากนึ่งกับไวน์ข้าวแล้ว ฤทธิ์ต้านความชราและการปรับสีไตหยางจะเพิ่มขึ้น ในการศึกษานี้ เราตรวจพบเนื้อหาทางเคมีของ Cistanche Deserticola และ WCD และกลไกทางเภสัชวิทยาของการขาดพลังของไต-หยางในหนูทดลอง จุดมุ่งหมาย. /e วัตถุประสงค์ของการศึกษาครั้งนี้เพื่อศึกษาผลของ Cistanche Deseticola และ WCD ต่อ neuroendocrine-ฟังก์ชั่นภูมิคุ้มกันของภาวะไต-หยางบกพร่องในหนูทดลองที่ได้รับกลูโคคอร์ติคอยด์เกินขนาด วัสดุและวิธีการ หนู Sprague Dawley (SD) ได้รับการคัดเลือก /e หนูฉีดสารแขวนลอยน้ำคอร์ติโคสเตอโรนใต้ผิวหนังสำหรับหนูทดลองที่ได้รับกลูโคคอร์ติคอยด์เกินขนาด /e หนูควบคุมเชิงบวกถูกฉีดด้วยยาเม็ด Jinkuishenqi และขนาดสูง ปานกลาง และต่ำCistanche Deserticola/WCD สารแขวนลอย (1.646 ก./(กก. วัน), 5.48 ก./(กก. วัน), 2.74 ก./(กก. วัน) และ 1.37 ก./(กก. วัน) ตามลำดับ); กลุ่มควบคุมเปล่า (BC) และกลุ่มควบคุมแบบจำลอง (MC) ได้รับปริมาตรของน้ำกลั่นที่เท่ากันกับกลุ่มยาในกลุ่มยาเป็นเวลา 40 วันที่ต่อเนื่องกันที่ขนาดยา 1 มล./100 กรัม หลังจากการให้ยาครั้งสุดท้าย เก็บเลือดจากหลอดเลือดแดงใหญ่ในช่องท้อง และระดับซีรัมของ T, CRH, ACTH, CORT, คอร์ติซอล, IL-10, IL-6, IL-2, TNF - และ IFN-c ถูกวัด คำนวณดัชนีอวัยวะของต่อมไทมัสและม้าม /e การแสดงออกของ Bax, Bcl-2, caspase-3, Fas และ FasL ในต่อมหมวกไตถูกวัดโดยอิมมูโนฮิสโตเคมี /e การเปลี่ยนแปลงทางพยาธิวิทยาในต่อมไทมัสและต่อมหมวกไต สังเกตได้จาก การย้อมสี HE (×200) กลุ่มย่อยของ T lymphocyte ในเลือดส่วนปลายถูกตรวจพบโดย cytometry เพื่อน และการแสดงออกของ CaM mRNA ใน hypothalamus และเนื้อเยื่อ hypophysis ก็ถูกวัดด้วย RT-PCR ผลลัพธ์. เมื่อเปรียบเทียบกับกลุ่ม MC กลุ่ม Cistanche Deserticola และ WCD มีกิจกรรมเพิ่มขึ้น ดัชนีอวัยวะของต่อมไทมัสและม้าม ระดับซีรัมของ T, CRH, ACTH, CORT, cortisol, IL-2 และ IL -10, อัตราส่วนของ CD4 plus /CD8 plus และการแสดงออกของ Bcl-2, caspase-3, Fas, FasL และ CaM ในเนื้อเยื่อ hypophysis /eCistanche Deserticolaและหมู่ WCD ยังแสดงการลดลงในระดับ IL-6, TNF- และ IFN-c ในซีรัมและการแสดงออกของ CaM mRNA ในไฮโปทาลามัส บทสรุป Cistanche Deseticola และ WCD แต่ละขนาดสามารถต่อต้านฮอร์โมนเพศและปัจจัยภูมิคุ้มกันที่ผิดปกติในหนูทดลองที่ได้รับกลูโคคอร์ติคอยด์เกินขนาด เสริมสร้างและฟื้นฟูประสิทธิภาพของเซลล์ประสาท hypothalamic และปรับปรุงฟังก์ชั่นภูมิคุ้มกัน.

บทนำ

Cistanche deserticolaซึ่งเรียกว่า "โสมทะเลทราย" เป็นยาจีนโบราณที่ใช้เป็นสมุนไพรหยางโทนิคมานานหลายศตวรรษเพื่อบำรุงไตและเสริมสร้างหยาง [1] แปดสายพันธุ์และหนึ่งรูปแบบของ Cistanches Herba ได้รับการบันทึกในประเทศจีนและมีเพียง Cistanche deserticola YC Ma และ Cistanche tubulosa (Schenk) Wight เท่านั้นที่ถูกบันทึกไว้ในตำรับยาจีน [2] การศึกษาทางเภสัชวิทยาแสดงให้เห็นว่า Cistanches Herba มีสารป้องกันระบบประสาท [3], ภูมิคุ้มกัน [4], ป้องกันโรคหัวใจ [5], ต้านความเมื่อยล้า [6], ต้านการอักเสบ [7], ปกป้องตับ [8], สารต้านอนุมูลอิสระ [9], ต้านแบคทีเรีย [10], ยาระบาย [11] และฤทธิ์ต้านเนื้องอก [12] กิจกรรมทางชีวภาพที่รายงานในวงกว้างของสกุลนี้มาจากองค์ประกอบทางพฤกษเคมีที่ซับซ้อนและหลากหลาย Cistanche deserticola ประกอบด้วย phenylethanoid glycosides, iridoids, polysaccharides [13] เป็นต้น เนื้อหาของ phenylethanoid glycosides สูงที่สุดในวัสดุยาดั้งเดิม [14] การประมวลผลของ Chinese Materia Medica (CMM) เป็นเทคนิคทางเภสัชกรรมแบบดั้งเดิมเพื่อตอบสนองความต้องการที่แตกต่างกัน สำหรับการบำบัด การจ่าย และการเตรียมการตามทฤษฎีการแพทย์แผนจีน ผลิตภัณฑ์แปรรูปเหล่านี้มีชื่อว่า ยาต้ม ซึ่งใช้ในคลินิก /e เป้าหมายของการประมวลผลคือการเพิ่มประสิทธิภาพและ/หรือลดความเป็นพิษของยาดิบ ตำรับยาจีน พ.ศ. 2558 ได้บันทึกว่า Cistanche thick slices (CD) และ Rice wine-steamed Cistanche (WCD) สามารถใช้เป็นยาต้มในคลินิกได้ กลุ่มวิจัยของเราแสดงให้เห็นว่ายาระบายบรรเทาลง และฤทธิ์ต้านความชราและฤทธิ์ของไตหยางก็ดีขึ้นหลังจากที่ Cistanche นึ่งกับไวน์ข้าว [15]

การทำงานของแกนไฮโปทาลามัส-ต่อมใต้สมอง-ต่อมหมวกไต-ต่อมไทมัส (HPAT) ผิดปกติในกลุ่มอาการขาดไต-หยาง [16] ผู้ป่วยที่มีภาวะไต-หยางบกพร่องก็มีภูมิคุ้มกันบกพร่องเช่นกัน ความผิดปกติของแกน HPA มีความสัมพันธ์อย่างใกล้ชิดกับภาวะภูมิคุ้มกันบกพร่อง ทฤษฎีโครงข่ายประสาทและภูมิคุ้มกัน (NEI) แสดงให้เห็นว่าระบบภูมิคุ้มกันและระบบประสาทต่อมไร้ท่อมีลิแกนด์และตัวรับจำนวนมาก [17] และไฮโปทาลามัสถือเป็นจุดหมุนในการเชื่อมโยงระบบประสาทต่อมไร้ท่อกับระบบภูมิคุ้มกัน

ในการศึกษานี้ เราจำลองภาวะขาดไต-หยางในหนูจำลองที่มีการฉีดคอร์ติโคสเตียรอยด์จากภายนอก และสำรวจกลไกของการขาดยางไต-หยางเพื่อตอบสนองต่อผลิตภัณฑ์แปรรูปต่างๆ ของ Cistanche deserticola จากมุมมองของต่อมไร้ท่อ-ฟังก์ชั่นภูมิคุ้มกัน.

วัสดุและวิธีการ

วัสดุและรีเอเจนต์

Cistanche deserticolaรวบรวมจาก Alashan Neimenggu ในปี 2019.5 และระบุว่าเป็นลำต้นเนื้อแห้งของ Cistanche deserticola YC Ma โดย Prof. Yanjun Zhai (โรงเรียนเภสัช มหาวิทยาลัยการแพทย์แผนจีนเหลียวหนิง ประเทศจีน) ตัวอย่างบัตรกำนัลได้รับการเก็บรักษาไว้ในศูนย์เทคโนโลยีวิศวกรรมการแปรรูปเหลียวหนิง

สารประกอบมาตรฐานของ jugol ซื้อมาจาก Chengdu Pure Chem-Standard Co., Ltd. (เฉิงตู ประเทศจีน); cistanoside F, echinacoside, cistanoside A และ iso-acteoside ถูกซื้อจาก Must Company (มณฑลเสฉวนประเทศจีน); acteoside ถูกซื้อจาก Dalian Meilun Bio Co., Ltd. (ต้าเหลียน ประเทศจีน). ซื้ออะซิโตไนไทรล์และเมทานอลเกรด MS จาก Merck KGaA (ดาร์มสตัดท์ ประเทศเยอรมนี) ซื้อกรดฟอร์มิกเกรด HPLC จากเมอร์ค KGaA (ดาร์มสตัดท์ เยอรมนี) ซื้อไวน์ข้าวจาก Zhejiang Brand Tower Shaoxing Wine Co., Ltd. (Zhejiang, China)

Corticosterone (CAS: 50-22-6, ความบริสุทธิ์ > 98 เปอร์เซ็นต์ , TCI Shanghai Development Ltd. Co. ), chinkuei shin เคี้ยวยาเม็ด (Beijing Tongrentang Technology Development Co., Ltd.), หนู ACTH, CRH, T, IL{{ 2}}, IFN-c, TNF- , IL-2 และ IL-10 ชุดตรวจจับ ELISA ถูกซื้อจาก Nanjing Jian cheng Co., Ltd. /e rat cortisol ELISA kit จัดทำโดย BOSK Co ., แอนติบอดี CD4 ของหนูแรท, แอนติบอดี CD8a (หมายเลข 561833 และ 559976), RBC lysate (Solarbio, R1010), สารละลายบัฟเฟอร์ PBS (Solarbio, P1020-500), TRIzol (MAN0001271), CaM และ -actin อัพสตรีมและ ไพรเมอร์ปลายน้ำถูกจัดเตรียมโดย Guangzhou Invitrogen Co. Reverse Transcription Kit (no. RR037A) และ cDNA Synthesis Kit (หมายเลข 10000068167) จัดทำโดย Bole Life Medicine Products (Shanghai) Co., Ltd. คลอโรฟอร์ม, ไอโซโพรพานอล, เอทานอล 75 เปอร์เซ็นต์, และสารละลายยูรีเทนล้วนบริสุทธิ์ในการวิเคราะห์และผลิตโดย Sinopharm Chemical Reagent Co., Ltd. น้ำบริสุทธิ์พิเศษผลิตโดยระบบ Milli-Q (18.2 MΩ, Millipore, MA, USA)

เครื่องมือทดลอง

เอ็นไซม์มาร์กเกอร์ (Thermo, รุ่น 3530911931), เครื่องล้างจานอัตโนมัติ (รุ่น HBS- 4009), เครื่องวัดแรงกดดึงจอแสดงผลดิจิตอล (รุ่น VICTOR- 50N), เครื่องหมุนเหวี่ยงเพื่อความเย็นแบบเยือกแข็งความเร็วสูง (รุ่น Sigma 3k15) ), ultra microspectrophotometer (รุ่น B-50Q), gene amplifier (รุ่น L96G), real-time fluorescence quantitative PCR (รุ่น StepOne), flow cytometer (รุ่น AC66051710132), Paraffin microtome (รุ่น Laika), กล้องจุลทรรศน์ (Olympus) , รุ่น BS-53) และเครื่องมือวัดน้ำบริสุทธิ์ (รุ่น F7JA36507) ถูกนำมาใช้

การเตรียมตัวอย่างสำหรับ UPLC-Q-TOF-MS และการทดลองทางเภสัชวิทยา

WCD ได้รับการประมวลผลจาก Cistanche Deserticola ชุดเดียวกันในห้องปฏิบัติการของเรา สำหรับการเตรียม WCD แผ่นซีดีแห้ง (หนา 5 มม.) (100 กรัม) ถูกผสมกับไวน์ข้าว (30 มล.) นึ่งที่ความดันสูง (1.25 kPa) เป็นเวลา 4 ชั่วโมง แล้วจึงทำให้แห้งที่ 55 องศา

ผงหยาบของ CD และ WCD ถูกแช่ในเอทานอล 95 เปอร์เซ็นต์ 10 ครั้งเป็นเวลา 0.5 ชั่วโมง สกัดด้วยกรดย้อน 3 ครั้งในแต่ละครั้งเป็นเวลา 1 ชั่วโมง และกรอง และกรอง 3 ครั้งถูกรวมเข้าด้วยกัน /e เอทานอลถูกนำกลับมาใช้ใหม่ภายใต้แรงดันที่ลดลง และได้รับสารสกัดสำหรับการบริหาร /e สารสกัด (1 มล.) ถูกเติมลงในเมทานอล 50 เปอร์เซ็นต์ ทำให้ปริมาตรรวมเป็น 20 มล. และเก็บไว้ที่ 4 องศาสำหรับการวิเคราะห์เนื้อหา

เงื่อนไข UPLC-QqQ-MS สำหรับการวิเคราะห์ CD และ WCD Extracts

ระบบ UPLC-MS/MS ที่มีซอฟต์แวร์ MassLynx 4.1 Analyst ถูกใช้เพื่อดำเนินการเก็บข้อมูลและประมวลผล /e คอลัมน์วิเคราะห์คือ Acquity UPLC BEH C18 (1{{10}}0 mm × 2.1 mm, 1.7 µm) ที่อุณหภูมิ 40 องศา C. /e เฟสเคลื่อนที่คือ 0.1 เปอร์เซ็นต์ สารละลายในน้ำกรดฟอร์มิก (A) และอะซีโตไนไตรล์ที่มีกรดฟอร์มิก 0.1 เปอร์เซ็นต์ (B) /e การไล่ระดับการไล่ระดับเป็น 000–1.00 นาทีด้วย 3 เปอร์เซ็นต์ B, 1.01–2.00 นาที ด้วย 3 เปอร์เซ็นต์ –11.5 เปอร์เซ็นต์ B, 2.01–3{{ 29}} นาที กับ 12 เปอร์เซ็นต์ B, 3.01–4.00 นาที กับ 15 เปอร์เซ็นต์ B, 4.01–5.00 นาที กับ 20 เปอร์เซ็นต์ B, 5.01–6.00 นาที ด้วย 22 เปอร์เซ็นต์ B, 6.01–8.00 นาทีกับ 25 เปอร์เซ็นต์ B, และ 8.01–9.00 นาทีที่มีอัตราการไหล 10 เปอร์เซ็นต์ B. /e เท่ากับ 0.3 มล./ นาที และปริมาตรของการฉีดคือ 1.0 ไมโครลิตร

แมสสเปกโตรมิเตอร์แบบสามเท่าของ Waters (Xevo TQD, Waters Corp., Milford, MA, USA) ที่ติดตั้งแหล่งกำเนิดอิออไนเซชันแบบสเปรย์ไอออน (ESI) ถูกใช้ในโหมดไอออนลบ /e ก๊าซละลายคือไนโตรเจนที่มีอัตราการไหล 500 ลิตร/ชม. ที่อุณหภูมิ 250 องศา สารประกอบที่ตรวจพบทั้งหมดถูกวัดในโหมดการตรวจสอบปฏิกิริยาหลายรายการ (MRM); ตารางที่ 1 แสดงพารามิเตอร์พลังงาน และตารางที่ 2 แสดงกราฟการปรับเทียบสำหรับส่วนประกอบที่วิเคราะห์

การเตรียมสารอ้างอิง

Tubuloside A (3.02 มก.), echinacoside (3.00 มก.), 2′-acetylacteoside (2.34 มก.), acteoside (2.45 มก.), isoacteoside (0.61 มก.), cis tanoside F (2.14 มก.), ซาลิโดรไซด์ (3.39 มก.), กรดเจนิโพซิดิก (2.84 มก.), อาจูกอล (1.58 มก.) และคาทัลพอล (2.39 มก.) ถูกละลายในเมทานอลเพื่อเตรียมสารละลายสต็อก /e สารละลายสต็อกถูกเจือจางด้วยเมทานอลเพื่อให้ได้ความเข้มข้นที่เหมาะสมสำหรับสารละลายมาตรฐานการทำงาน สารละลายที่เตรียมไว้ทั้งหมดถูกเก็บไว้ที่ 4 องศาก่อนใช้งาน

การเตรียมและการจัดกลุ่มแบบจำลองสัตว์

หนูเพศผู้ SD (180–220 ก.) ถูกซื้อจาก Liaoning Chang sheng Biotechnological Co. เลขที่ใบอนุญาตสัตว์: SCXK (Liao) 2015–0001 หนูทุกตัวได้รับอาหารและน้ำฟรีที่ 25 องศาและความชื้นสัมพัทธ์ 30-50 เปอร์เซ็นต์ สัตว์ถูกเลี้ยงไว้ 7 วันก่อนการทดลอง

สุ่มหนู 100 ตัวเป็น 1{{30}} กลุ่ม: กลุ่มควบคุมว่างเปล่า (BC) กลุ่มควบคุมแบบจำลอง (MC) กลุ่มควบคุมเชิงบวก (PC) กลุ่มควบคุมไวน์ข้าว (WC) ซีดี กลุ่มที่มีขนาดยาสูง (CD-HD), กลุ่มขนาดยาสูงของซีดี (CD-MD), กลุ่มขนาดยาต่ำของซีดี (CD-LD), กลุ่มขนาดยาสูงของ WCD (WCD-HD), กลุ่มขนาดยากลางของ WCD (WCD-MD ) และกลุ่ม WCD low-dose (WCD-LD) /e ปริมาณของ CD-HD/WCD-HD, CD-MD/ WCD-MD และ CD-LD/WCD-LD คือ 5.48 ก./(กก. ∙ ง.), 2.74 ก./ (กก. ∙ ง.) และ 1.37 ก. /(กก. ∙ ง) ตามลำดับ ปริมาณ /e สำหรับกลุ่ม PC คือ 1.646 ก./(กก. ∙ d) และสำหรับกลุ่ม WC 1 มล./100 ก. เป็นเวลา 40 วัน /e วันที่ 6 หลังการให้ยา หนูถูกฉีดเข้าใต้ผิวหนังด้วยคอร์ติโคสเตอโรนวอเตอร์ sus pension (คอร์ติโคสเตอโรนบวก 0.1 เปอร์เซ็นต์ไดเมทิลซัลฟอกไซด์บวก 0.1 เปอร์เซ็นต์ ทวีน-80 บวกโซเดียม 0.9 เปอร์เซ็นต์ คลอไรด์) ยกเว้นกลุ่ม BC [18] /e ความเข้มข้นของคอร์ติโคสเตอโรนเท่ากับ 5 กรัม/ลิตร และขนาดยาคือ 0.1 มล./100 กรัม /e หนูในกลุ่ม BC ได้รับน้ำเกลือปกติบวก 0.1 เปอร์เซ็นต์ไดเมทิลซัลฟอกไซด์บวก 0.1 เปอร์เซ็นต์ Tween- 80 บวกโซเดียมคลอไรด์ 0.9 เปอร์เซ็นต์โดยการฉีดในขนาดเดียวกัน

การกำหนดฟังก์ชันแกน HPA

การทดสอบน้ำหนัก อุณหภูมิ และกำลังการถือครอง:ทำการทดสอบน้ำหนักทุก 3 วัน และวัดอุณหภูมิทุก 6 วัน ระหว่างการทดลอง ในวันที่ 39 กำลังสูงสุดของขาหลังวัดด้วยกริปมิเตอร์ /e หนูถูกวางบนแท่นเรียบ ทำให้ขาหลังของพวกมันจับเสา /e หนูจะจับวัตถุตามสัญชาตญาณเพื่อป้องกันการถอยหลังเมื่อดึงหางออกจนแรงดึงเกินที่จับ เมื่อหนูสูญเสียการยึดเกาะ พรีแอมพลิฟายเออร์สามารถบันทึกแรงจับสูงสุดได้โดยอัตโนมัติ

การกำหนดระดับของ T, CRH, ACTH, CORT และ Cortisol ในซีรัม: หนึ่งชั่วโมงหลังการให้ยาครั้งสุดท้าย หนูถูกทำให้หมดความรู้สึกโดยการฉีดสารละลายยูรีเทนในช่องท้อง (20 ก./100 มล.) /en เก็บตัวอย่างเลือด หมุนเหวี่ยงที่ 3500 r เป็นเวลา 15 นาทีเพื่อให้ได้ซีรั่ม และเก็บไว้ที่ -20 องศา วัดความเข้มข้นของ T, CRH, ACTH, CORT และคอร์ติซอลด้วยชุดอุปกรณ์ ELISA ของหนูตามคำแนะนำของผู้ผลิต

การสังเกตด้วยกล้องจุลทรรศน์: โครงสร้างทางสัณฐานวิทยาของเนื้อเยื่อต่อมหมวกไตถูกสังเกตโดยการย้อมสี HE เนื้อเยื่อต่อมหมวกไตถูกตรึงในพาราฟอร์มัลดีไฮด์ 10 เปอร์เซ็นต์ ถูกทำให้แห้งในเอทานอล ทำให้โปร่งใสด้วยสารละลายไซลีน ฝังด้วยวิธีการทั่วไป ตัดเป็นชิ้นหนา 4 ไมโครเมตร ล้างด้วยสารละลายไซลีน ให้ความชุ่มชื้นด้วยการไล่ระดับเอทานอล จากนั้นย้อมด้วยฮีมาทอกซิลินและอีโอซิน น้ำยาย้อมสี หลังจากทำโปร่งใสด้วยไซลีนแล้ว แผ่นเคลือบด้วยหมากฝรั่งที่เป็นกลางและสังเกตได้ภายใต้กล้องจุลทรรศน์

การย้อมสีอิมมูโนฮิสโตเคมีของ Bax, Bcl-2, Caspase-3, Fas และ FasL การแสดงออกของโปรตีนในต่อมหมวกไต

ส่วนต่อมหมวกไตของหนูแรทที่ฝังด้วยพาราฟินแบบตรึงฟอร์มาลินถูกกำจัดพาราฟินและให้น้ำอีกครั้งหลังจากถูกตัดที่ความหนา 4 ไมโครเมตร สำหรับการปิดกั้นการออกฤทธิ์ของเปอร์ออกซิเดสที่เกิดภายใน ส่วนต่างๆ ถูกบ่มล่วงหน้าในบล็อกของไฮโดรเจนเปอร์ออกไซด์เป็นเวลา 10 นาที ส่วนต่างๆ ถูกจุ่มลงใน 0.01 โมลาร์ซิเตรต (pH 6.0) และให้ความร้อนจนเดือด /e ทำซ้ำหลังจาก 5-10 นาที หลังจากเย็นตัวลง ล้างส่วนต่างๆ ด้วย PBS (pH 7.2–7.6) 1-2 ครั้ง ทิ้งไว้ที่อุณหภูมิห้องประมาณ 5 นาที และล้างด้วย PBS (pH 7.2–7.6) 2-3 ครั้ง /e เติมสารละลายบล็อคบีเอสเอ 5 เปอร์เซ็นต์ที่อุณหภูมิห้อง และของเหลวส่วนเกินบนส่วนถูกสลัดออก 20 นาทีต่อมา แอนติบอดีปฐมภูมิที่เจือจางซึ่งจำเพาะสำหรับ Fas/ FasL, Bcl-2/Bax และแคสเปส-3 (1:100 ที่เจือจางด้วย PBS) ถูกเติมและบ่มที่ 37 องศาเป็นเวลา 1 ชั่วโมงหรือ 4 องศาในชั่วข้ามคืน /e ส่วนถูกล้าง 2-3 ครั้งด้วย PBS (pH 7.2–7.6) /en, IgG ต้านหนูเมาส์ของแพะที่ถูกไบโอตินถูกเติมเข้าไป และส่วนต่างๆ ถูกทำให้แห้งที่ 20–37 องศา เป็นเวลา 20 นาที และล้างด้วย PBS (pH 7.2–7.6) 4 ครั้ง เป็นเวลา 5 นาที หลังจากล้างด้วย PBS อย่างทั่วถึง ส่วนต่างๆ จะถูกฟักด้วยส่วนผสมของรีเอเจนต์ A และ B เป็นเวลา 30 นาที บ่มด้วย PBS เป็นเวลา 45 นาที และในที่สุดก็พัฒนาด้วยซับสเตรต DAB (DAKO) เป็นเวลา 30 นาที ก่อนที่จะทำการย้อมเคาน์เตอร์ด้วยฮีมาทอกซิลินเล็กน้อย และติดตั้ง

การกำหนดหน้าที่ของภูมิคุ้มกัน

การคำนวณดัชนีอวัยวะภูมิคุ้มกัน:หนึ่งชั่วโมงหลังจากการให้ยาครั้งสุดท้าย หนูถูกทำให้หมดความรู้สึกโดยการฉีดสารละลายยูรีเทนในช่องท้อง (20 ก./100 มล.) จากนั้นจึงนำม้ามและต่อมไทมัสออกและชั่งน้ำหนักทันทีในเครื่องดูดควันปลอดเชื้อ ค่าสัมประสิทธิ์น้ำหนักของม้ามหรือต่อมไทมัส ( เปอร์เซ็นต์ ) ม้ามหรือน้ำหนักต่อมไทมัส (มก.)/น้ำหนักตัว (ก.)

ผลการทดลอง

การวิเคราะห์ UPLC-QqQ-MS:เพื่อให้ได้การแยกที่ดีที่สุด รูปร่างสูงสุด และเวลาการวิเคราะห์สั้น ๆ เงื่อนไขโครมาโตกราฟีรวมถึงคอลัมน์ เฟสเคลื่อนที่ และโปรแกรมการไล่ระดับสีได้รับการศึกษาในการทดลองเบื้องต้นของเรา /e โครมาโตแกรมทั่วไปที่มีโหมด MRM แสดงไว้ในรูปภาพจากตารางที่ 4 เราจะเห็นว่าเนื้อหาของฟีนิลเอธานอลไกลโคไซด์ใน WCD เพิ่มขึ้นเมื่อเทียบกับของในซีดี โดยเฉพาะอย่างยิ่งสำหรับเอไคนาโคไซด์และแอคทีโอไซด์ ในขณะที่เนื้อหาของอิริดอยด์ลดลงใน WCD

กฎระเบียบสำหรับการทำงานของแกน HPA: หนูในกลุ่ม MC และกลุ่มทดลองมีอาการขาดไตและหยางค่อย ๆ หลังจากได้รับคอร์ติโคสเตอโรน /e อาการ เช่น การลดน้ำหนัก ภาวะอุณหภูมิร่างกายต่ำ ผมร่วง ผมหงอก การตอบสนองล่าช้า การบริโภคน้ำและกิจกรรมที่ลดลงอย่างมีนัยสำคัญ ดีขึ้นอย่างมากในกลุ่ม CD และ WCD รูปที่ 2(a) แสดงการเปลี่ยนแปลงของน้ำหนัก /e น้ำหนักของยาแต่ละกลุ่มเพิ่มขึ้น โดยเฉพาะในกลุ่ม CD-HD และ WCD-HD น้ำหนักที่เพิ่มขึ้นในกลุ่ม MC นั้นต่ำที่สุด รูปที่ 2(b) แสดงการเปลี่ยนแปลงของอุณหภูมิ ซึ่งต่ำที่สุดในกลุ่ม MC และอุณหภูมิเพิ่มขึ้นในกลุ่ม WCD-HD, WCD-MD และ WCD-LD

ระดับของ T, CRH, ACTH, CORT และ Cortisol: รูปที่ 3 แสดงให้เห็นว่าเมื่อเทียบกับกลุ่ม BC ระดับของ T, CRH, ACTH และ CORT ในซีรัมของหนูแรทลดลง (P <0 01)="" และระดับคอร์ติซอลลดลง="" (p="">< 0.05)="" ในกลุ่ม="" mc="" เมื่อเทียบกับกลุ่ม="" mc="" ระดับของ="" t="" ในกลุ่ม="" wcd-hd="" และ="" wcd-md="" เพิ่มขึ้น="" (p="">< 0.01)="" ระดับของ="" crh="" ใน="" wcd-ld="" ปรับปรุงกลุ่ม="" wcd-md="" และ="" wc="" (p=""><0.01) เนื้อหาของ="" acth="" เพิ่มขึ้นในกลุ่ม="" cd-hd,="" wcd-md="" และ="" wcd-hd="" (p="">< 0.01),="" ระดับ="" cort="" ที่อัปเกรดใน="" กลุ่ม="" cd-md,="" wcd-md="" และ="" wcd-hd="" (p="">< 0.01)="" และปรับปรุงให้ดีขึ้นในกลุ่ม="" cd="" hd="" และ="" wcd-ld="" (p="">< 0.05)="">

ผลจากการสังเกตด้วยกล้องจุลทรรศน์: เนื้อเยื่อของต่อมหมวกไตสามารถแบ่งออกเป็นชั้นเยื่อหุ้มสมองและชั้นไขกระดูก ชั้นคอร์เทกซ์ประกอบด้วยชั้นทรงกลม มัด และไขว้กันเหมือนแห เซลล์มีไขมันมากกว่า และชั้นไขกระดูกประกอบด้วยเซลล์ pheochromocytoma ส่วนใหญ่และเนื้อเยื่อเส้นใยจำนวนเล็กน้อย ดังที่แสดงในรูปที่ 4 เราพบว่าทั้งหมดเป็นเรื่องปกติในกลุ่ม BC ในขณะที่ในกลุ่ม MC เยื่อหุ้มสมองต่อมหมวกไตมีภาวะ hyperplasia เซลล์ลีบ และความหนาแน่นที่เพิ่มขึ้นอย่างเห็นได้ชัด แถบกระเปาะหนาขึ้น และโซนพังผืดโปร่งแสง โซนเรติคูลาริสแคบ และเซลล์ที่เล็กกว่าแสดงสีไม่สม่ำเสมอและความแออัดของเส้นเลือดฝอย ในกลุ่ม PC สามารถมองเห็นขอบเขตของเยื่อหุ้มสมองและไขกระดูกได้ เซลล์ของแถบทรงกลมและแถบมัดถูกจัดเรียงอย่างเท่าเทียมกัน และโครงสร้างทางสัณฐานวิทยาได้รับการฟื้นฟู การฟื้นฟูที่ดีขึ้นเหมือนกันในกลุ่ม WCD และผลกระทบในกลุ่ม WCD-MD ดีกว่ากลุ่ม WCD-HD และ WCD-LD สัณฐานวิทยาของต่อมหมวกไตในกลุ่มซีดีไม่ดีเท่าในกลุ่ม WCD

อิมมูโนฮิสโตเคมี: การตายของเซลล์ประสาทถูกควบคุมโดยยีน apoptotic และ antiapoptotic จำนวนมาก ส่วนใหญ่เป็นยีนที่ส่งเสริมการตายของเซลล์ Bax และยีนต่อต้านการตายของเซลล์ของตระกูล Bcl-2 Bcl-2 ถูกแปลเป็นภาษาท้องถิ่นในออร์แกเนลล์ที่ผลิตออกซิเจนปฏิกิริยา เช่น ไมโทคอนเดรีย เอนโดพลาสมิกเรติคูลัม และเยื่อหุ้มนิวเคลียส Bcl-2 มีผลกระทบเพียงเล็กน้อยต่ออนุมูลอิสระ แต่สามารถป้องกันความเสียหายจากออกซิเดชันในเซลล์ได้ Bax ขนส่งจากไซโตพลาสซึมไปยังเยื่อหุ้มไมโตคอนเดรีย เปลี่ยนโครงสร้างเมมเบรนของไมโตคอนเดรีย และส่งเสริมการปลดปล่อยไซโตโครมซีและการเหนี่ยวนำให้เกิดการตายของเซลล์

มีการแสดงออกในไซโตพลาสซึมของต่อมหมวกไตของโปรตีน Bax และ Bcl{{0}} /e การย้อมสีแสดงอนุภาคสีเหลืองทั้งหมด เมื่อเทียบกับกลุ่ม BC ความหนาแน่นทางแสงเฉลี่ยของโปรตีน Bax ในกลุ่ม MC เพิ่มขึ้นอย่างมีนัยสำคัญ (P <{5}}.01) เมื่อเทียบกับกลุ่ม="" mc="" ความหนาแน่นของแสงเฉลี่ยในกลุ่ม="" cd-ld="" และ="" wcd-ld="" ลดลงอย่างมีนัยสำคัญ="" (p="">< 0.01)="" (รูปที่="">ผลลัพธ์แสดงให้เห็นว่า CD และ WCD สามารถกระตุ้นการตายของเซลล์ในเซลล์ที่มีการอักเสบและลดความเสียหายของต่อมหมวกไตผ่านการส่งเสริมการแสดงออกของโปรตีน FasL และจับกับโปรตีน Fas กระตุ้นโปรตีน caspase-3 และกระตุ้น caspase cascade ผลกระทบของกลุ่ม WCD-HD นั้นดีที่สุด

การกำหนดการทำงานของภูมิคุ้มกัน

ดัชนีภูมิคุ้มกัน

เมื่อเทียบกับกลุ่ม BC ค่าสัมประสิทธิ์ไทมัสและดัชนีม้ามของกลุ่ม MC ลดลงอย่างมีนัยสำคัญ (P < {{0}}.01)="" เมื่อเปรียบเทียบกับกลุ่ม="" mc="" กลุ่ม="" wcd-md="" มีความแตกต่างมากที่สุด="" (p="">< 0.05)="" ค่าสัมประสิทธิ์ไธมัสเกือบกลับสู่ระดับปกติ="" สำหรับดัชนีม้าม="" กลุ่ม="" wcd="" md,="" wcd-ld="" และ="" cd-md="" มีความแตกต่างอย่างมีนัยสำคัญเมื่อเปรียบเทียบกับกลุ่ม="" mc="" (p="">< 0.01)="" (ดูรูปที่="" 6)="" ดังนั้นการรักษา="" wcd="" และ="" cd="" สามารถปกป้องอวัยวะภูมิคุ้มกัน="" และผลของ="" wcd="">

การตรวจหา T Lymphocyte Subsets ในเลือดส่วนปลาย

เปอร์เซ็นต์ของเซลล์ CD4 บวกในจตุภาคบนซ้ายและเซลล์ CD8 บวกในจตุภาคล่างขวาใน BC และกลุ่มยาแต่ละกลุ่มสูงกว่าในกลุ่ม MC เมื่อเทียบกับกลุ่ม BC อัตราส่วนของ CD4 plus /CD8 plus ลดลงอย่างมีนัยสำคัญในกลุ่ม MC (P < 001)="" เมื่อเทียบกับกลุ่ม="" mc="" อัตราส่วนของ="" cd4="" plus="" d8="" plus="" เพิ่มขึ้นอย่างมีนัยสำคัญในกลุ่ม="" pc,="" กลุ่ม="" wcd="" และกลุ่ม="" cd-hd="" (p="">< 0.01)="" (รูปที่="" 7)="" การกำหนดระดับของ="" il{="" {12}},="" il-6,="" il-2,="" tnf-="" และ="" ifn-c="">

รูปที่ 8 แสดงให้เห็นว่าเมื่อเทียบกับกลุ่ม BC ระดับของ IL-6, TNF- และ IFN-c เพิ่มขึ้นอย่างมีนัยสำคัญ (P < 0.01)="" ระดับ="" il-10="" และ="" il-2="" ลดลงในกลุ่ม="" mc="" เมื่อเทียบกับกลุ่ม="" mc="" ระดับของ="" il-6,="" tnf-="" และ="" ifn-c="" ลดลง="" และ="" il-10="" และ="" il-2="" เพิ่มขึ้นในซีรัมในแต่ละกลุ่มยา="" ผลกระทบของ="" wcd="" ดีกว่าผลกระทบของ="" cd="" โดยเฉพาะอย่างยิ่งในกลุ่ม="" wcd-md="" ซึ่งเอฟเฟกต์นั้นใกล้เคียงกับกลุ่ม="">

ผลการทดลองสังเกตด้วยกล้องจุลทรรศน์เนื้อเยื่อต่อมไทมัส

รูปที่ 9 แสดงให้เห็นว่าในกลุ่ม BC มีลิมโฟไซต์จำนวนมาก ลิมโฟไซต์และเรติคูโลไซต์ถูกจัดเรียงอย่างหลวม ๆ ตรงกลางโดยมีไทโมไซต์ทรงกลมหรือรูปไข่กระจัดกระจาย /ไม่มีเนื้อร้าย ไม่มีการแทรกซึมของเซลล์อักเสบ และไม่มีการเปลี่ยนแปลงที่ผิดปกติ

กลุ่ม MC แสดงเนื้อเยื่อเนื้อร้ายของลิมฟอยด์จำนวนมาก โดยมีการจัดเรียงของลิมโฟไซต์และเรติคูโลไซต์ที่ไม่เป็นระเบียบอยู่ตรงกลาง ไทโมไซต์กลมหรือรูปไข่หายไป เซลล์เสื่อมหรือเนื้อร้ายจำนวนมากปรากฏชัด และมีการกรองเซลล์อักเสบที่มีการเปลี่ยนแปลงทางพยาธิวิทยาที่ผิดปกติ

ในกลุ่มซีดี ลักษณะทางสัณฐานวิทยาของลิมโฟไซต์กลับมาเป็นปกติ และการจัดเรียงของลิมโฟไซต์ส่วนกลางและเรติคูโลไซต์เกือบปกติ ไทโมไซต์กลมหรือวงรีหายดีแล้ว แต่เซลล์ลิมโฟไซต์ที่เสื่อมหรือเนื้อตายจำนวนเล็กน้อยและเซลล์อักเสบที่แทรกซึมยังคงอยู่

ในกลุ่ม WCD และกลุ่ม PC ลักษณะทางสัณฐานวิทยาของลิมโฟไซต์ได้รับการซ่อมแซมให้ดีขึ้น /e เซลล์ลิมโฟไซต์และเรติคูโลไซต์ในศูนย์ถูกจัดตำแหน่งอย่างดี ไทโมไซต์กลมหรือวงรีเกือบปกติ แต่ยังคงมีเซลล์ลิมโฟไซต์ที่แทรกซึมและเสื่อมสภาพจำนวนเล็กน้อย

การแสดงออกของยีน CaM โปรตีน

ค่า RQ (CaM mRNA/ -actin mRNA) ถูกพิจารณาเพื่อตรวจสอบการแสดงออกของ CaM mRNA RQ ของกลุ่ม BC คือ 1 การแสดงออกของ CaM mRNA ในมลรัฐในกลุ่ม MC เพิ่มขึ้นอย่างมีนัยสำคัญ (P < 0.01)="" ในขณะที่ค่าลดลงใน="" wcd-hd="" กลุ่ม="" wcd-md,="" wcd="" ld="" และ="" cd-hd="" (p="">< {{10}}.05)="" (รูปที่="" 10)="" การแสดงออกของ="" cam="" mrna="" ในกลุ่ม="" hypophysis="" ในกลุ่ม="" mc="" นั้นต่ำกว่าในกลุ่ม="" bc="" (p="">< 0.01)="" ในกลุ่ม="" wcd-hd,="" wcd-md,="" wcd-ld,="" cd-hd="" และ="" cd-ld="" เพิ่มขึ้น="" (p="">< 0.05)="" และผลในกลุ่ม="" wcd="" ดีกว่าผลในกลุ่ม="">

การอภิปราย

เภสัชตำรับจีน [2] บันทึกว่าสามารถใช้ CD และ WCD ในคลินิกเป็นชิ้นยาต้มประเภทหลัก หลังจากนึ่งกับไวน์ข้าวแล้ว ฤทธิ์ต้านความชราของไตและหยางก็เพิ่มขึ้น ผ่าน UPLC-QqQ-MS เราตรวจพบการเปลี่ยนแปลงเชิงปริมาณในฐานวัสดุเคมีระหว่างกระบวนการนึ่งไวน์ข้าว อิริดอยด์ไกลโคไซด์ไม่เสถียรและเนื้อหาของไกลโคไซด์เหล่านี้ลดลง แม้จะตรวจไม่พบก็ตาม เนื้อหาของฟีนิลเอธานอลไกลโคไซด์ก็เปลี่ยนไปเช่นกัน ซึ่งอาจก่อให้เกิดการเปลี่ยนแปลงในเภสัชพลศาสตร์และผลทางคลินิก

แบบจำลองการขาดไต-หยางแบบคลาสสิกถูกจำลองโดยการฉีดคอร์ติโคสเตอโรนใต้ผิวหนัง [19] ยาคอร์ติโคสเตอโรนที่ให้ยาเกินขนาดสามารถยับยั้งความลับของ CRH ในไฮโปทาลามัสได้ ในขณะเดียวกันความลับของ ACTH ก็ถูกยับยั้งเช่นกัน /e ระดับฮอร์โมนคอร์เทกซ์ต่อมหมวกไตลดลง ดังนั้น การทำงานของแกน HPA จึงลดลง ความผิดปกติของแกน HPA เป็นลักษณะทั่วไปของภาวะไต-หยางบกพร่อง [20] จากนั้นหนูจะแสดงปรากฏการณ์ "การพร่อง" และอาการก็สอดคล้องกับอาการขาดไตหยางในคลินิก

ในกลุ่ม MC ระดับของ CRH, ACTH, T และ CORT ในซีรัมของหนูลดลงอย่างมีนัยสำคัญ (P < 0.01)="" หลังจากได้รับการรักษาด้วย="" cd="" และ="" wcd="" เนื้อหาของ="" crh,="" acth,="" t,="" cort="" และคอร์ติซอลทั้งหมดเพิ่มขึ้นในระดับหนึ่ง="" และผลของ="" wcd-md="" นั้นดีที่สุดเกือบเท่ากับในกลุ่มพีซี="" ผลลัพธ์เหล่านี้บ่งชี้ว่าสมดุลฮอร์โมนสัมพัทธ์ในแกน="" hpa="" ถูกทำลายในกลุ่ม="" mc="" cd="" และ="" wcd="" สามารถปรับปรุงการฟื้นตัวของระดับฮอร์โมนในแกนต่อมหมวกไตที่ผิดปกติได้="" แต่ผลของ="" wcd="">

การปรับสัดส่วนของสมาชิกในครอบครัวของ Bcl{{0}} เป็นหนึ่งในกลไกหลักที่ Fas/FasL เป็นสื่อกลางในเส้นทางของตัวรับความตาย และตระกูล Bcl-2 ควบคุมวิถีของไมโตคอนเดรีย [21] ปัจจัยที่ยับยั้งการตายของเซลล์ Bcl-2 และปัจจัยกระตุ้นการตายของเซลล์ เช่น Bax ล้วนอยู่ในกลุ่ม Bcl-2 [22] การตายของเซลล์อาจถูกกำหนดโดยอัตราส่วนสัมพัทธ์ของปัจจัยยับยั้งการตายของเซลล์และปัจจัยกระตุ้นการตายของเซลล์ [23] ไมโตคอนเดรียมีหน้าที่เป็นจุดตรวจส่วนกลางสำหรับการตายของเซลล์ในรูปแบบต่างๆ [24] การศึกษาในปัจจุบันพบว่า CD-MD และ WCD สามารถอนุมานการแสดงออกของ Bax และเพิ่ม Bcl-2 เพื่อปรับปรุงการขาดยางของไต Fas เป็นตัวรับการตายที่สำคัญที่กระตุ้นการตายของเซลล์โดยการผูกกับ Fas ลิแกนด์ (FasL) [25] การแสดงออกของ Fas และ FasL ในกลุ่ม MC เพิ่มขึ้น ในขณะที่การแสดงออกนี้เพิ่มขึ้นอย่างมีนัยสำคัญในกลุ่ม WCD-MD (P <0.01) เมื่อเทียบกับกลุ่ม="" mc="" ทั้งระบบ="" fas/fasl="" และ="" bax/bcl-2="" จะแปลงสัญญาณ="" apoptotic="" ไปยังตระกูล="" caspase="" [26]="" แคสเปส-3เป็นหนึ่งในโปรตีเอสที่สำคัญที่เริ่มต้นการตายของเซลล์="" การกระตุ้น="" caspase-3="" บ่งชี้ว่าการตายของเซลล์เข้าสู่ระยะที่ไม่สามารถย้อนกลับได้="" [27]="" การแสดงออกของแคสเปส-3="" ในกลุ่ม="" mc="" เพิ่มขึ้นและเพิ่มขึ้นอย่างมีนัยสำคัญในกลุ่ม="" wcd-hd="" และ="" wcd-md="" (p=""><>

ข้อบกพร่องของฟังก์ชั่นภูมิคุ้มกันเป็นอาการที่สำคัญอย่างหนึ่งของภาวะไต-หยางบกพร่อง [28] ในการศึกษานี้ เราพบว่าดัชนีของม้ามและต่อมไทมัสของกลุ่ม WCD-MD ฟื้นตัวอย่างมีนัยสำคัญ (P < 0.01,="" p="">< 0{{3{="" {32}}}}5).="" การตอบสนองทางภูมิคุ้มกันของระบบภูมิคุ้มกันนั้นส่วนใหญ่ควบคุมโดยกลุ่มย่อย="" [29]="" il-2="" คือปัจจัยการเจริญเติบโตของทีเซลล์="" ที่หลั่งโดยทีเซลล์และมาโครฟาจ="" มีส่วนร่วมในการควบคุมการอักเสบ="" ควบคุมภูมิคุ้มกัน="" และเพิ่มความต้านทานการติดเชื้อ="" [30]="" ระดับ="" il-2="" ในกลุ่ม="" mc="" ลดลง="" (p="">< 0.01)="" และหลังการรักษาด้วย="" cd="" และ="" wcd="" ระดับ="" il-2="" ฟื้นตัว="" il-6="" และ="" tnf-="" คือไซโตไคน์ที่เกิดจากการอักเสบ="" ระดับที่เพิ่มขึ้นของ="" il-6="" และ="" tnf-="" ไซโตไคน์ทำให้เกิดความไม่สมดุลของไซโตไคน์และทำให้รุนแรงขึ้นในการอักเสบ="" ระดับของ="" il-6="" และ="" tnf-="" เพิ่มขึ้นในกลุ่ม="" mc="" ในขณะที่หลังการรักษา="" ระดับของ="" il-6="" และ="" tnf-="" ลดลง="" ทีเซลล์แบ่งออกเป็นเซลล์="" cd4="" และเซลล์="" cd8="" และอัตราส่วน="" cd4="" plus="" d8="" plus="" สามารถใช้เป็นดัชนีที่สำคัญของการควบคุมภูมิคุ้มกัน="" [31]="" cd4="" plus="" d8="" plus="" ในกลุ่ม="" mc="" ลดลงอย่างเห็นได้ชัด="" (p="">< 0.01)="" ในขณะที่ในกลุ่ม="" wcd="" และ="" cd="" hd="" เพิ่มขึ้น="" (p=""><>

แกน HPA เป็นระบบควบคุมที่สำคัญที่สุดเพราะควบคุมการหลั่งกลูโคคอร์ติคอยด์และระบบต่อมไร้ท่อเพื่อรักษาหน้าที่การหลั่งของเยื่อหุ้มสมองต่อมหมวกไต [32] การแสดงออกของ CaM mRNA มากเกินไปในเนื้อเยื่อไฮโปทาลามัสเกี่ยวข้องกับการขาดหยางของไต CD และ WCD สามารถปิดกั้นช่องแคลเซียม ยับยั้งการแสดงออกของ CaM mRNA ในไฮโปทาลามัส และลดการไหลเข้าของแคลเซียม ซึ่งส่งผลให้กิจกรรมเชิงซ้อนของ Ca2 plus ·CaM ลดลง

การเกิดโรคไต-หยางมีกระบวนการพัฒนาโรคเรื้อรัง ไตไม่ใช่แนวคิดทางกายวิภาคล้วนๆ อีกต่อไป และเป็นคำทั่วไปสำหรับภูมิคุ้มกันต่อมไร้ท่อและระบบทางเดินปัสสาวะ เครือข่าย Neuroendocrine-immune (NEI) เป็นระบบการกำกับดูแลแบบบูรณาการที่สำคัญ [33] CD และ WCD สามารถควบคุมการทำงานของแกน HPAT และปรับปรุงการฟื้นตัวของภาวะขาดยางในไต /is ผลให้พื้นฐานการทดลองสำหรับการป้องกันทางคลินิกและการรักษาภาวะไต-หยางพร่อง

อ้างอิง

[1] Y. Zhang, H. Wu และ SN Wang, "การเปรียบเทียบหน้าที่การบำรุงไตและการเสริมสร้างหยางของ Herba Cistanches สามสายพันธุ์" China J Chin Mater Med, vol. 19 ไม่ 3, หน้า 169–171, 1994.

[2] Chinese Pharmacopoeia Commission, Pharmacopoeia of People's Republic of China: One Edition, China Medical Science Press, Beijing, China, 2015.

[3] M. Zhu, C. Lu และ W. Li, "การได้รับ echinacoside ชั่วคราวเพียงพอที่จะกระตุ้นการส่งสัญญาณ TrK และปกป้องเซลล์ประสาทจาก rotenone" Journal of Neurochemistry, vol. 124 หมายเลข 4, หน้า 571–580, 2556.

[4] LL Li, XW Wang, XF Wang, และคณะ "Glycosides of Cistanche anti-lipid peroxidation and anti-radiation effect," Traditional Chinese Medicine, vol. 22 ไม่ 6, หน้า 364–367, 1997.

[5] E. Preutthipan, CF Ng, CM Koon, ECW Wong, B. Tomlinson และ CBS Lau "/e ผลการป้องกันของ Herba Cistanches ต่อความเป็นพิษต่อกล้ามเนื้อที่เกิดจากสแตตินในหลอดทดลอง" Journal of Ethnopharmacology, vol. 190, น. 68–73, 2559.

[6] HS Wong, J. Chen, PK Leong, HY Leung, WM Chan, and KM Ko, "Herba ลดน้ำหนักในหนูอ้วนที่เกิดจากอาหารที่มีไขมันสูงซึ่งอาจเกิดจากการแยกไมโตคอนเดรีย" Journal of Functional Foods, vol. 10, หน้า 292–304, 2014.

[7] Y. Jia, Q. Guan, Y. Jiang, et al., "การแก้ไขอาการลำไส้ใหญ่บวมจากโซเดียมเดกซ์แทรนซัลเฟตในหนูด้วยสารสกัดจาก Cistanche tubulosa ที่อุดมด้วย echinacoside" Phytotherapy Research, vol. 28 ไม่ 1, หน้า 110–119, 2014.

[8] Y. Leung, L. Li, T. Wen และ Y.-Q. Li, "ผลการป้องกันของ echinacoside ต่อความเป็นพิษต่อตับที่เกิดจากคาร์บอนเตตระคลอไรด์ในหนู" Toxicology, vol. 232 หมายเลข 1-2, หน้า 50–56, 2550.

[9] JH Yang, JP Hu และ NS Du "ความสัมพันธ์ระหว่างโครงสร้างกับกิจกรรมของ phenylethanoid glycosides ในพืชของ Cistanche salsa ในฤทธิ์ต้านอนุมูลอิสระ" Journal of Chinese Medicine, vol. 32 ไม่ 7, หน้า 1067–1069, 2552.

[10] XQ Han และ YP Zhu "กระบวนการสกัด Cistanche polysaccharide และการวิจัยการกระทำของแบคทีเรีย" J Anhui Agric Sci, vol. 37, ไม่ 32, หน้า 15855-15856, 2009.

[11] PF Tu, ZG Zhang และ ZQ Lou "การวิเคราะห์ phenylethanoid glycosides ของ Cistanche โดย RP-HPLC" Acta Pharm Sin, vol. 32 ไม่ 4, หน้า 294–300, 1997.