ติดต่อ: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 อีเมล:audrey.hu@wecistanche.com

YANG Jian-hua1' 2 , HU Jun-ping2, RENA • Kasimu2 ,〔DU Nian-sheng

(1. Affiliated Tumor Hospital, Xinjiang Medical University, Urumqi 830011, China; 2. College of Pharmacy, Xinjiang Medical University, Urumqi 830054, China)

เชิงนามธรรม:วัตถุประสงค์: เพื่อศึกษาความสัมพันธ์ระหว่างโครงสร้างกับกิจกรรมของฟีนิลทานอยด์ไกลโคไซด์ในพืชของ Cistanche salsa ต่อฤทธิ์ต้านอนุมูลอิสระ วิธีการ: โดยระบบการทดสอบของ DPPH • ฤทธิ์ต้านอนุมูลอิสระของ phenylethanoid glycosides จำนวน 6 ชนิดจากพืชCistancheซัลซ่าถูกกำหนดเพื่อตรวจสอบความสัมพันธ์ระหว่างกิจกรรมต้านอนุมูลอิสระและลักษณะโครงสร้างของฟีนิลทานอยด์ไกลโคไซด์ zs ผลลัพธ์: ฤทธิ์ต้านอนุมูลอิสระของ phenylethanoid glycosides แปรผันโดยมีผลขึ้นอยู่กับขนาดยา ลำดับความแรงของฤทธิ์ต้านออกซิเดชันของส่วนประกอบทั้งหกแสดงเป็น2 ^Acetylacteoside > Acteoside Tubuloside BN ไอโซแอคทีโอไซด์ > Echinacoside > Cistanoside A. สรุป: ฤทธิ์ต้านอนุมูลอิสระของฟีนิลทานอยด์ไกลโคไซด์สัมพันธ์กับจำนวนฟีนอลไฮดรอกซิล สเตอริกกีดขวาง 2-อะซิติลบนกลูโคราโนสระดับกลาง และตำแหน่งของฟีนอลไฮดรอกซิล นอกจากนี้ มันอาจเกี่ยวข้องกับเจ3-คีโตนที่ไม่อิ่มตัวของฟีนอล-2-โพรพีนิล

คำสำคัญ: Cistanche salsa ( CA Mey. ) G, เบ็ค; ฟีนิลทานอยด์ไกลโคไซด์; ฤทธิ์ต้านอนุมูลอิสระ โครงสร้าง-กิจกรรม; DPPH

เอ็กไคนาโคไซด์

ยาจีนโบราณCistancheคือ Cistanche salsa (CA Mey.) G. Beck เป็นลำต้นเนื้อแห้งที่มีเกล็ดและใบ ตีพิมพ์ครั้งแรกใน "Shen Nong's Materia Medica" ความถี่ของการเกิดคือสูงสุด รองจากโสมในใบสั่งยาจีนต่อต้านริ้วรอยและต่อต้านวัย และมีชื่อเสียงของ "โสมทะเลทราย" Phenylethanoil glycosides เป็นส่วนประกอบที่มีลักษณะเฉพาะของCistancheพืชสกุล ปัจจุบันมีการแยกสารประกอบดังกล่าวมากกว่า 30 ชนิดจากพืชสกุลนี้ การศึกษาทางเภสัชวิทยาโดยพื้นฐานแล้วทำให้เห็นชัดเจนว่าสารประกอบเหล่านี้เป็นวัสดุหลักพื้นฐานสำหรับCistancheออกฤทธิ์ทางเภสัชวิทยา)

ไดเบนโซปิคริลเรดิคัล (DPPH •) เป็นอนุมูลอิสระที่ค่อนข้างเสถียรโดยมีอิเล็กตรอนอิสระอยู่บนเอ็นของมัน สารละลายเมทานอลของ DPPH-จะเป็นสีม่วงที่มีการดูดกลืนสูงสุดสูงสุดที่ 517 นาโนเมตร เมื่อมีสารกำจัดอนุมูลอิสระ การดูดซึมจะค่อยๆ หายไปเนื่องจากการจับคู่กับอิเล็กตรอนหนึ่งตัว ระดับการเปลี่ยนสีนั้นสัมพันธ์เชิงปริมาณกับจำนวนอิเล็กตรอนที่รับได้ ดังนั้น การใช้สเปกโตรโฟโตเมตรีในการตรวจจับการเปลี่ยนแปลงในการดูดกลืนแสงของ DPPH หลังจากทำปฏิกิริยากับสารละลายตัวอย่าง สามารถใช้เพื่อทดสอบความสามารถของตัวอย่างในการขจัดอนุมูลอิสระและต้านทานการเกิดออกซิเดชัน (3) ในปัจจุบัน มีรายงานการวิจัยสารต้านอนุมูลอิสระของฟีนิทิลแอลกอฮอล์ไกลโคไซด์ในมะเขือม่วงบดในการขับอนุมูลอิสระ แต่ไม่มีการวิเคราะห์ความสัมพันธ์ระหว่างโครงสร้างและการทำงานของสารออกฤทธิ์ระหว่างคุณสมบัติต้านอนุมูลอิสระและสารออกฤทธิ์ ในบทความนี้ มีการใช้วิธีการวิเคราะห์อนุมูลอิสระ DPPH • เป็นครั้งแรกเพื่อทดสอบฤทธิ์ต้านอนุมูลอิสระของโมโนเมอร์ฟีนิลแอลกอฮอล์ไกลโคไซด์ 6 ชนิดในรูหวนรง ตามลักษณะเฉพาะทางโครงสร้างและผลการกำหนดกิจกรรมของสารประกอบเหล่านี้ ส่วนประกอบของฟีทิลแอลกอฮอล์ไกลโคไซด์ถูกอนุมานในเบื้องต้น ความสัมพันธ์ระหว่างโครงสร้างกับกิจกรรมของฤทธิ์ต้านอนุมูลอิสระ

1 เครื่องมือและวัสดุ

เอ็กไคนาโคไซด์, ซิสแทนเช่ ไกลโคไซด์ A,verbascoside, isoverbasin glycoside, 2,-acetyl verbascoside, tube anthocyanin B reference substance (แยกและเตรียมจาก Cistanche salsa, UV, IR, EI-ms/h -nmrJ3c-nmr data สอดคล้องกับค่าวรรณกรรม เนื้อหาถูกกำหนดโดยพื้นที่ HPLC วิธีการทำให้เป็นมาตรฐานความบริสุทธิ์มากกว่าร้อยละ 95 สูตรโครงสร้างแสดงในรูปที่ 1 และตารางที่ 1); ไดฟีนิลพิคริลเรดิคัล (DPPH •) ถูกซื้อมาจากซิกมา; รีเอเจนต์อื่น ๆ ทั้งหมดนั้นบริสุทธิ์ในประเทศ

SpectraMax M5 multi-functional full-wavelength bio activity detector (Anthos Co. Austria), 96-แผ่นเพาะเชื้อ (Costar), AB104-N electronic balance]Mettler-Toledo Instr. (ซางไห่) จำกัด]

รูปที่ 1 สูตรโครงสร้างของฟีเนทานอยล์ไกลโคไซด์ 6 ชนิดใน Cistanche

ตารางที่ 1 หมู่แทนที่ในสารประกอบฟีนอลไกลโคไซด์ 6 ชนิดใน Cistanche

หมายเหตุ: Ac คือ acetyl, Cf คือ trans-caffeoyl, Glc * pD-gluviolanose และ Rha คือ aL-rhamnose

2 การเตรียมสารละลายทดสอบ

DPPH • เตรียมสารละลายสต็อกที่มีความเข้มข้น 1. 3 x 10'2mol/L กับเอทานอล เก็บไว้ในตู้เย็น เจือจางสารละลายสต็อกด้วยเอทานอลเป็น 1-3 xl{{7} }^mol/L ทันทีก่อนใช้; ฟีนอลแอลกอฮอล์ไกลโคไซด์ 6 ชนิด สารอ้างอิงและวิตามินซีถูกผสมสูตรเป็นสารละลายที่มีความเข้มข้น 0.05-50.0 ptg/mL ด้วยเอทานอล

แอคทีโอไซด์

3 วิธีและผลลัพธ์

3. 1 วิธี ขั้นแรก เติมตัวอย่าง 10 |xL ลงในหลุมตัวอย่าง เติมเอทานอล 10|jlL ลงในหลุมเปล่า แล้วเติม DPPH 190 จิล • ด้วยความเข้มข้น 1.3 xlO^mol/L แล้วใส่ลงใน มืดที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 30 นาที ใช้เครื่องตรวจจับกิจกรรมทางชีวภาพความยาวคลื่นเต็มความยาวคลื่นมัลติฟังก์ชั่น SpectraMax M5 เพื่อวัดการดูดกลืนแสง (A) ที่ 517 นาโนเมตร แต่ละค่าการดูดกลืนแสงถูกวัด 3 ครั้งขนานกัน และนำค่าเฉลี่ยมา อัตราการกวาดล้างคำนวณดังนี้: อัตราการกวาดล้าง ( เปอร์เซ็นต์ )=(ตัวอย่างที่ว่างเปล่า-A)/ช่องว่าง x 100 เปอร์เซ็นต์

3.2 ผลลัพธ์ ผลลัพธ์ของการกำหนดแสดงในตารางที่ 2 จะเห็นได้จากตารางที่ 2 ว่าฟีนิทิลแอลกอฮอล์ไกลโคไซด์หกชนิดที่ความเข้มข้นต่างกันมีระดับการขจัดผลต่อ DPPH ที่แตกต่างกัน • และความสามารถในการกำจัดอนุมูลอิสระของพวกมันมีปริมาณรังสีที่มีนัยสำคัญ- ผลสัมพันธ์กับความเข้มข้น Glycoside บน DP PH • ขนาดของผลการขับจะเพิ่มขึ้นตามความเข้มข้นที่เพิ่มขึ้น

ตารางที่ 2 อัตราการกวาดล้างของตัวอย่างที่มีความเข้มข้นต่างกันใน DPPH • («=3)

หมายเหตุ: กลุ่มควบคุมที่เป็นบวกคือกรดแอสคอร์บิก (วิตามินซี) จำนวนตัวอย่างคือ7

According to the IC5 of each sample. According to the value, the scavenging ability of 6 kinds of phenylethanoid glycosides on DPPH • is in order: 2'-acetyl verbascoside> verbascoside BN isophorbasin glycoside> echinacoside>cistanche glycoside A. ผลของฟีทิลแอลกอฮอล์ไกลโคไซด์หกชนิดที่ความเข้มข้นเดียวกันกับวิตามินซีกลุ่มควบคุมเชิงบวกนั้นต่ำกว่าวิตามินซีเล็กน้อย

verbascoside

4. การอภิปราย

ผลการศึกษานี้ยืนยันเพิ่มเติมว่าฟีทิลแอลกอฮอล์ไกลโคไซด์โดยทั่วไปมีฤทธิ์ต้านอนุมูลอิสระ การวิเคราะห์และเปรียบเทียบโครงสร้างทางเคมีของพวกมัน verbascoside, iso-verbasin glycoside, 2'-acetyl verbasin glycoside และ tube anorthosite B ล้วนเป็น glycosides ในขณะที่ echinacoside และcistancheA คือไตรกลีเซอไรด์ซึ่งมีอุปสรรค steric มาก ผลกระทบของการยับยั้ง steric ที่เพิ่มขึ้นทำให้ echinacoside และ solanacoside A เข้าถึงอนุมูลอิสระได้ยากดังนั้นความสามารถในการต้านอนุมูลอิสระจึงค่อนข้างอ่อนแอ ความแตกต่างของโครงสร้างระหว่าง echinacoside และ striata: echinacoside A เป็นเพียง R5 ของอดีตคือกลุ่มฟีนอลไฮดรอกซิลและกลุ่มหลังคือกลุ่มเมทอกซี กลุ่ม o-phenolic hydroxyl ถือเป็นกลุ่มการทำงานที่สำคัญสำหรับการทำงานของสารต้านอนุมูลอิสระ กลุ่มไดฟีนอลไฮดรอกซิลหายไปและฤทธิ์ต้านอนุมูลอิสระลดลงอย่างมาก โดยการวิเคราะห์โครงสร้างของสารประกอบและรวมผลการวัด อนุมานได้ว่าฤทธิ์ต้านอนุมูลอิสระของฟีนิลไกลโคไซด์ในมะเขือยาวมีความสัมพันธ์กับจำนวนอะไกลโคนและกลุ่มฟีนอลไฮดรอกซิลในกลุ่มฟีนิลอะคริลอยล์ ตำแหน่งการเชื่อมต่อของฟีนอล หมู่ไฮดรอกซิล ขนาดของสิ่งกีดขวาง steric ของสารประกอบ และกลูโคสส่วนกลาง 2 มีความสัมพันธ์บางอย่างระหว่างการแทนที่ของกลุ่มอะซิติลที่ตำแหน่ง ซึ่งอาจเกี่ยวข้องกับชิ้นส่วนโครงสร้างคีโตน a,/3 ที่ไม่อิ่มตัวบน กลุ่มสไตรีน acyl แต่มีความสัมพันธ์เพียงเล็กน้อยกับตำแหน่งการแทนที่ของกลุ่ม phenylacryloyl

DPPH • เป็นอนุมูลอิสระที่ค่อนข้างเสถียรซึ่งมีศูนย์กลางอยู่ที่ N โดยมีการดูดกลืนอย่างแรงที่ 517 นาโนเมตร หลังจากเพิ่มสารทดสอบ โดยการตรวจจับการเปลี่ยนแปลงในการดูดกลืนแสงที่ 517 นาโนเมตรหลังจาก DPPH • อนุมูลทำปฏิกิริยากับสารละลายตัวอย่าง สามารถตรวจสอบความสามารถของตัวอย่างในการขับอนุมูลอิสระและสารต่อต้านอนุมูลอิสระได้ การทดลองแสดงให้เห็นว่าการใช้ DPPH • เพื่อสร้างแบบจำลองความเสียหายจากอนุมูลอิสระในหลอดทดลอง ไม่จำเป็นต้องใช้อุปกรณ์ที่ซับซ้อนและรีเอเจนต์ราคาแพง ใช้งานง่าย ละเอียดอ่อน เชื่อถือได้ และทำซ้ำได้ เป็นวิธีที่ดีในการตรวจคัดกรองสารกำจัดอนุมูลอิสระ

ปัจจุบันวิตามินซีได้รับการยอมรับว่าเป็นสารต้านอนุมูลอิสระที่ใช้งานกันอย่างแพร่หลายและใช้กันอย่างแพร่หลาย ดังนั้น การทดลองนี้จึงเลือกวิตามินซีเป็นตัวควบคุมเชิงบวกสำหรับความสามารถในการต้านอนุมูลอิสระของฟีนิทิลแอลกอฮอล์ไกลโคไซด์ในการขับอนุมูลอิสระ

อ้างอิง

[1] เล่ยหลี่, ซ่งจื้อหง, ตู่เผิงเฟย. งานวิจัยเกี่ยวกับองค์ประกอบทางเคมีของความคืบหน้าการวิจัย Cistanche[J].Chinese Herbal Medicine, 2003,34(5):473476.

[2] ซ่งจื้อหง, เล่ยหลี่, ตู่เผิงเฟย. ความคืบหน้าการวิจัยฤทธิ์ทางเภสัชวิทยาของพืช Cistanche[J] ยาสมุนไพรจีน, 2546, 34(9): เอกสารแนบ 16-18.

[3] Xu Shenhong, Hang Hu. วิธีง่ายๆ ในการคัดกรองสารกำจัดอนุมูลอิสระ [J] ยาสมุนไพรจีน, 2000, 31(2): 96-97.

[4] Fu Rong, Zhu Jiuwei. การหาค่าฤทธิ์ต้านอนุมูลอิสระของ Chuanling, Rhodiola Rosea และ Huang Zhi โดย diphenyl piracy radical radical spectrophotometry [J] วารสาร Dalian University of Light Industry, 2004, 23 (2) ): 114-117.