จากการศึกษาที่เกี่ยวข้องพบว่า cistanche เป็นสมุนไพรทั่วไปที่รู้จักกันในชื่อ "สมุนไพรมหัศจรรย์ที่ช่วยยืดอายุ" มีองค์ประกอบหลักคือซิสทาโนไซด์ซึ่งมีเอฟเฟกต์ต่างๆ เช่นสารต้านอนุมูลอิสระ, ต้านการอักเสบ,และการส่งเสริมการทำงานของภูมิคุ้มกัน. กลไกระหว่างกระท่อมและผิวขาวอยู่ในผลต้านอนุมูลอิสระของ cistancheไกลโคไซด์. เมลานินในผิวหนังของมนุษย์ผลิตโดยปฏิกิริยาออกซิเดชันของไทโรซีนที่เร่งปฏิกิริยาโดยไทโรซิเนสและปฏิกิริยาออกซิเดชั่นต้องการการมีส่วนร่วมของออกซิเจน ดังนั้นอนุมูลอิสระของออกซิเจนในร่างกายจึงกลายเป็นปัจจัยสำคัญส่งผลต่อการสร้างเมลานิน. Cistanche มี cistanoside ซึ่งเป็นสารต้านอนุมูลอิสระและสามารถลดการสร้างอนุมูลอิสระในร่างกายได้ยับยั้งการสร้างเมลานิน.

คลิกที่ Cistanche Tubulosa เพื่อการฟอกสีฟัน

สำหรับข้อมูลเพิ่มเติม:

david.deng@wecistanche.com วอทแอพ:86 13632399501

1. บทนำ

คาร์บาไมด์เปอร์ออกไซด์ (CP) เป็นสารออกฤทธิ์ในการฟอกสีฟัน [1] สารประกอบนี้เรียกว่ายูเรียเปอร์ออกไซด์หรือไฮโดรเจนเปอร์ออกไซด์-ยูเรีย CP ถูกนำมาใช้เป็นยาต้านการอักเสบและน้ำยาฆ่าเชื้อในการรักษาโรคปริทันต์และโรคเหงือกอักเสบเป็นครั้งแรก [2,3] อย่างไรก็ตาม การฟอกสีฟันเป็นผลข้างเคียงระหว่างการรักษา [4] การดำเนินการฟอกสีฟันของ CP เป็นผลมาจากกระบวนการออกซิเดชั่นทางเคมีที่เกี่ยวข้องกับเปอร์ออกไซด์และโมเลกุลเม็ดสีอินทรีย์ในเคลือบฟันและเนื้อฟัน การเปลี่ยนแปลงโครงสร้างของโมเลกุลเม็ดสีส่งผลให้โมเลกุลเล็กลงและฟันขาวขึ้น [5–7] เนื่องจากความสนใจที่เพิ่มขึ้นในความสวยงามของฟันขาวที่มีสุขภาพดี ขั้นตอนการฟอกสีฟันจึงเป็นที่นิยมมากขึ้น [8] และผลิตภัณฑ์ฟอกสีฟันที่มี CP ถูกนำมาใช้อย่างแพร่หลาย การใช้งานอื่นๆ ของ CP ในช่องปากคือการรักษาคราบพลัค เหงือกอักเสบ และโรคฟันผุ โดยฤทธิ์ต้านแบคทีเรียและต้านการอักเสบ [9–11]

แม้จะมีคุณสมบัติที่น่าสนใจ แต่ CP ก็ไม่เสถียรทางเคมี [12] มีความไวสูงต่อแสงและความร้อน [13] ปัจจัยเหล่านี้เป็นสาเหตุหลักของการเสื่อมสภาพของ CP เมื่อเก็บรักษาและส่งผลให้ประสิทธิภาพการฟอกสีฟันลดลง [14] มีการใช้สารเพิ่มความคงตัวและสารยับยั้งการเสื่อมสภาพหลายชนิดเพื่อป้องกันการเสื่อมสภาพของ CP อย่างไรก็ตาม สารทำให้คงตัวมีความหลากหลายในด้านประสิทธิภาพและแสดงข้อเสีย เช่น มีราคาแพง ไม่สามารถป้องกันการฟุ้งกระจาย ให้สีที่ไม่พึงประสงค์ หรือขาดความสามารถในการละลายที่เพียงพอ [15] สูตรน้ำที่มีสารฟอกสีฟันแสดงให้เห็นข้อเสียอย่างร้ายแรงของความคงตัวที่ไม่ดีในระหว่างการเก็บรักษาในระยะยาว [16] ซึ่งส่งผลให้ผลิตภัณฑ์สูญเสียความสามารถในการฟอกสีฟัน [17]

การพัฒนาเทคโนโลยีเภสัชกรรมทำให้สามารถผลิตสูตรการทำงานเพื่อเอาชนะปัญหายา เช่น ความคงตัวต่ำ [18] การห่อหุ้มยาในรูปแบบแห้งของฟิล์มเส้นใยนาโนที่มีเส้นผ่านศูนย์กลางอยู่ในช่วงนาโนด้วยเทคนิคอิเล็กโตรสปินนิงกำลังได้รับความสนใจอย่างมาก เนื่องจากความเรียบง่าย ความสามารถในการผลิตฟิล์มเส้นใยนาโนแบบไม่ถักทอที่มีอัตราส่วนระหว่างพื้นผิวต่อปริมาตรสูง ต้นทุนต่ำ และความสามารถในการขยายขนาดการผลิต [19,20] ฟิล์มเส้นใยนาโนอิเล็กโทรสปันเป็นสูตรที่ทำงานได้ซึ่งช่วยให้สารประกอบที่ออกฤทธิ์ถูกรวมเข้ากับพอลิเมอร์หรือส่วนผสมของพอลิเมอร์ที่เหมาะสม เมื่อพิจารณาว่า CP มีความไม่เสถียรสูง โดยเฉพาะอย่างยิ่งในระบบที่เป็นน้ำ การนำส่งยาในรูปของสูตรที่เป็นของแข็ง เช่น ฟิล์มนาโนไฟเบอร์ควรเป็นตัวเลือกที่ดีสำหรับการนำส่งสารนี้ นอกจากนี้ สูตรฟิล์มนาโนไฟบรัสยังสามารถเพิ่มการปฏิบัติตามข้อกำหนดของผู้ป่วยเนื่องจากความสะดวกในการใช้งาน [21]

เมื่อเร็ว ๆ นี้ เรารายงานว่าฟิล์มนาโนไฟเบอร์ที่บรรจุด้วย CP (CP-F) สามารถผลิตได้ด้วยเทคนิคอิเล็กโตรสปินนิงสำหรับการฟอกสีฟัน [22] โพลีไวนิลแอลกอฮอล์ (PVA) ใช้เป็นสารละลายพื้นฐานสำหรับการผลิตฟิล์มนาโนไฟบรัสด้วยไฟฟ้า Polyvinylpyrrolidone (PVP) และซิลิกาช่วยทำให้ CP มีความเสถียรและถูกใช้เป็นตัวพายาเพื่อป้องกันการเสื่อมสลายของ CP ในระหว่างกระบวนการ ฟิล์มซีพีนาโนไฟบรัสที่พัฒนาขึ้นมีประสิทธิภาพในการดักจับตัวยาสูงและมีฤทธิ์ในการฟอกสีฟัน อย่างไรก็ตาม ความเสถียรของ CP ใน CP-F ที่พัฒนาแล้วยังไม่ได้รับการตรวจสอบอย่างครอบคลุม ดังนั้น จึงจำเป็นต้องมีการทดสอบความคงตัวของสูตรใหม่นี้เพื่อคาดการณ์การเฝ้าติดตามและเพื่อตรวจสอบความถูกต้องและสภาวะการเก็บรักษาที่เหมาะสม การทดสอบความคงตัวของสูตรสามารถให้หลักฐานถึงคุณภาพของสูตรและอิทธิพลของปัจจัยแวดล้อม เช่น อุณหภูมิ แสง และความชื้น [23] หลักฐานสามารถนำไปใช้ในการพัฒนากระบวนการผลิตที่เหมาะสมและการเลือกบรรจุภัณฑ์และสภาวะการเก็บรักษา ดังนั้น การศึกษาครั้งนี้จึงมีวัตถุประสงค์เพื่อศึกษาความคงตัวของ CP ใน CP-F หลังจากเก็บไว้ในสภาวะต่างๆ จลนพลศาสตร์ของการย่อยสลายได้รับการศึกษาเพื่อประเมินครึ่งชีวิตและอายุการเก็บรักษาของผลิตภัณฑ์ที่พัฒนาขึ้น คุณสมบัติทางเคมีฟิสิกส์ของ CP-F ถูกกำหนดลักษณะและปริมาณของ CP ที่เหลืออยู่ใน CP-F ถูกกำหนดเพื่อประเมินประสิทธิภาพของ CP-F ในการทำให้เสถียรของ CP

2. วัสดุและวิธีการ

2.1. วัสดุ

2.2. การจัดทำซีพี-เอฟ

การเตรียม CP-F เป็นไปตามขั้นตอนที่รายงานในงานก่อนหน้า [22] โดยสังเขป สารละลาย CP ประกอบด้วย PVA, PVP, ซิลิกา, CP และน้ำในอัตราส่วนโดยน้ำหนัก 5.5:3:1:0.5:90 ขั้นแรกเตรียมโดยการละลาย PVA และ PVP ใน น้ำกลั่นและคนอย่างต่อเนื่องที่อุณหภูมิ 70 ◦C เป็นเวลา 12 ชม. สารละลาย PVA–PVP ที่เตรียมไว้ถูกทำให้เย็นลงจนถึงอุณหภูมิห้อง ซิลิกาและ CP ถูกชั่งน้ำหนักและกระจายตัวใน 1 เปอร์เซ็นต์ N, N-dimethylformamide หลังจากนั้น สารละลาย PVA–PVP ที่เตรียมไว้ถูกเติมลงในสารละลายนี้จนกระทั่งความเข้มข้นสุดท้ายของ CP เท่ากับ 0.5 เปอร์เซ็นต์ ตัวอย่างถูกกวนเบา ๆ จนได้สารละลายใส โซลูชัน CP นี้ใช้สำหรับการปั่นด้วยไฟฟ้า สำหรับการประดิษฐ์ CP-F นั้นใช้กระบวนการปั่นด้วยไฟฟ้า การติดตั้งประกอบด้วยแหล่งจ่ายไฟแรงดันสูง (FC Series Glassman High Voltage Regulated DC Power Supplies, High Bridge, NJ, USA), เข็มฉีดยาที่เชื่อมต่อกับปั๊ม (Harvard Apparatus Pump 11 Elite Syringe Pumps, Holliston, MA, USA) และตัวเก็บโลหะแบบอยู่กับที่ (VWR International, Radnor, PA, USA) หุ้มด้วยอะลูมิเนียมฟอยล์ สารละลาย CP ที่เตรียมไว้สำหรับการปั่นด้วยไฟฟ้าถูกถ่ายโอนไปยังกระบอกฉีดยาที่ติดตั้งเข็มสแตนเลส (Hamilton 2.5 mL, Model 1005 TLL SYR, Hamilton Metal Hub Needles, Bonaduz, สวิตเซอร์แลนด์) และถูกสูบในแนวนอนที่อัตราการไหล 10 µL/นาที . การปั่นด้วยไฟฟ้าถูกกำหนดไว้ที่ 15 kV และระยะห่างระหว่างปลายกระบอกฉีดและแผ่นสะสมคือ 10 ซม. ก่อนการทดสอบเพิ่มเติม CP-F ที่ได้รับถูกตัดเป็น 10 มม. × 50 มม. และวัดความหนาที่ 10 จุดโดยใช้ไมโครเมตร (INSIZE 3203-25A, Suzhou, China) ค่าความหนาได้รับการยืนยันโดยกล้องจุลทรรศน์แบบใช้แสง (Axio Vert.A1 FL-LED, ZEISS, Oberkochen, เยอรมนี) ที่ติดตั้งกล้องดิจิทัล (สี ZEISS Axiocam 105) ตัวอย่างถูกตัดในทิศทางตัดขวางและยึดในแนวตั้งบนสไลด์แก้ว โฟโตไมโครกราฟของตัวอย่างถูกตรวจสอบที่กำลังขยาย 5 เท่า และวัดความหนาด้วยซอฟต์แวร์ Image J (US National Institutes of Health, Bethesda, MD, USA) CP ในสารละลายโพลิเมอร์ (CP-P) เตรียมโดยการละลาย CP ในสารละลายโพลิเมอร์ที่มี PVA 5.5 เปอร์เซ็นต์ PVP 3 เปอร์เซ็นต์ และซิลิกา 1 เปอร์เซ็นต์ เพื่อให้ได้ CP สุดท้ายที่มีความเข้มข้น 5 เปอร์เซ็นต์ CP ในสารละลายน้ำ (CP-W) ได้มาจากการละลาย CP ในน้ำกลั่น เพื่อให้ได้ CP ความเข้มข้นสุดท้ายเท่ากับ CP-P ปริมาณของ CP ถูกวิเคราะห์โดยใช้โครมาโตกราฟีของเหลวสมรรถนะสูง (HPLC)

2.3. การวิเคราะห์ HPLC

สำหรับการตรวจหา CP ที่เหลืออยู่ในตัวอย่าง ได้ทำการดำเนินการ HPLC (Hewlett Packard series 1100, Agilent Technologie, Santa Clara, CA, USA) และสภาวะ HPLC จากรายงานก่อนหน้า [24] คือ ใช้กับการปรับเปลี่ยนบางอย่าง โดยสังเขป ตัวอย่างจำนวน 0.1 กรัมถูกละลายในน้ำปราศจากไอออน 10 มิลลิลิตร จากนั้นสารละลายถูกปั่นแยกโดยใช้เครื่องหมุนเหวี่ยง SorvallTM ST16R (Thermo Fisher Scientific, Waltham, MA, USA) ด้วย ความเร็ว 1{{30}},000 รอบต่อนาที เป็นเวลา 15 นาที ตัวอย่างที่เก็บได้จำนวน 1,000 µL ผสมกับ 1,000 µL ของ 0.1 M triphenylphosphine และกวนเป็นเวลา 2 ชั่วโมงพร้อมการป้องกันแสง การวิเคราะห์ดำเนินการที่ 25 ± 0.2 ◦C คอลัมน์กลับเฟส (4.6 มม. × 250 มม. Hypersil ODS Agilent Technologies, ซานตาคลารา, แคลิฟอร์เนีย, สหรัฐอเมริกา) ถูกใช้และตรวจพบที่ 225 นาโนเมตร ปริมาตรการฉีดคือ 10 µL เฟสเคลื่อนที่ที่อัตราส่วนที่แตกต่างกันของแอซีโทไนไทรล์ต่อน้ำถูกดำเนินการด้วยอัตราการไหล 1.0 มล./นาที ที่จุดเริ่มต้นของเวลาทำงาน อัตราส่วนปริมาตร 50:50 ถูกใช้จนถึง 6.5 นาที หลังจากนั้น อัตราส่วนเฟสเคลื่อนที่เปลี่ยนเป็น 100:0 ที่ 10 นาที อัตราส่วนเฟสเคลื่อนที่เปลี่ยนกลับเป็น 50:50 จนกระทั่งครบเวลาดำเนินการ 25 นาที เส้นโค้งการสอบเทียบเตรียมโดยใช้สารละลายน้ำของ CP ที่ช่วง 50–200 ไมโครกรัม/มิลลิลิตร ได้เส้นโค้งมาตรฐานเชิงเส้นที่มีค่าสัมประสิทธิ์สหสัมพันธ์ (r 2 ) เท่ากับ 0.9997 จำนวน CP ที่เหลืออยู่คำนวณโดยใช้สมการ (1):

2.4. ผลของอุณหภูมิและแสง UV ต่อจลนศาสตร์การย่อยสลายของ CP

2.5. ผลกระทบของอุณหภูมิและความชื้นต่อ CP-F หลังการเก็บรักษาระยะยาว

2.6. การวัดสี

วิเคราะห์สีของ CP-F โดยใช้คัลเลอริมิเตอร์ (คัลเลอริมิเตอร์แบบพกพาความแม่นยำแบบพกพา Fru WR10, Shenzhen wave optoelectronics technology Co., Ltd, เซินเจิ้น ประเทศจีน) การวัดนำมาจากจุดที่แตกต่างกันสามจุดบนพื้นผิวของ CP-F ผลลัพธ์การวัดสีได้รับการประเมินภายใต้ค่าพิกัด L*a*b* ของ CIE (Commission International declarative) โดยที่ L* แสดงถึงระดับความสว่างตั้งแต่ 0 (ศูนย์) ถึง 100 (สีขาว) และ a* และ b* แสดงถึง ระดับของพิกัดสีเขียว–แดง และระดับของสีน้ำเงิน–เหลือง ตามลำดับ [25] ค่า a* ที่เป็นบวกบ่งชี้ถึงระดับของสีแดง และค่า a* ที่เป็นลบบ่งชี้ถึงระดับของสีเขียว ค่า b* ที่เป็นบวกจะระบุระดับของสีเหลือง และค่า b* ที่เป็นลบจะแสดงระดับของสีน้ำเงิน ศูนย์กลางของพิกัด a* และ b* นั้นไม่มีสี และค่าที่เพิ่มขึ้นของ a* และ b* แสดงถึงความอิ่มตัวของสี วัดค่า L*a*b* ของ CP-F ในการประเมินการเปลี่ยนแปลงสีระหว่างสีของ CP-F ในขั้นต้นและ 12 เดือนหลังการเก็บรักษา ความแตกต่างของสีทั้งหมด (∆E) คำนวณโดยใช้สมการ (2) ค่า ∆E เกี่ยวข้องกับการมองเห็นสี หากค่า ∆E ต่ำกว่า 1 จะมองไม่เห็นการเปลี่ยนแปลงของสี หากค่า ∆E เป็น 1 ถึง 3 จะมองเห็นการเปลี่ยนแปลงของสีเล็กน้อย และหากค่า ∆E สูงกว่า 3 จะมองเห็นการเปลี่ยนแปลงของสี ทำการวัดสีที่ 5 จุดจากตัวอย่างอิสระสามตัวอย่างในแต่ละสภาวะการจัดเก็บ

2.7. การศึกษาสัณฐานวิทยา

2.8. การตรวจสอบโครงสร้างภายใน

2.9. การตรวจสอบพฤติกรรมทางความร้อน

2.10. การศึกษาปฏิสัมพันธ์ของโมเลกุล

2.11. การตรวจสอบคุณสมบัติทางกล

คุณสมบัติทางกลของ CP-F ได้รับการประเมินโดยใช้เครื่องวิเคราะห์พื้นผิว (TA.XT Plus, Texture Analyzer Stable Micro Systems, Surrey, UK) โดยวิธีการที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้ [26] โดยมีการดัดแปลงบางอย่าง ก่อนทำการทดสอบ เครื่องวิเคราะห์พื้นผิวได้รับการสอบเทียบกับโหลดเซลล์ 5 กก. และติดตั้งอุปกรณ์จับยึดแรงดึง (A/TG) CP-F ตัดเป็นรูปสี่เหลี่ยมผืนผ้าขนาด 0.5 ซม. × 5.0 ซม. ตัวอย่างถูกยึดระหว่างที่จับ ความยาวเริ่มต้นระหว่างด้ามจับตั้งไว้ที่ 3 ซม. ความเร็วในการทดสอบคือ 1 มม./วินาที ด้วยแรงกระตุ้น 5 กรัม ตัวอย่างถูกดึงจนเกิดการแตกหักของตัวอย่าง เมื่อถึงจุดแตกหัก จะมีการบันทึกค่าของแรงและการยืดตัว ทำการวัดด้วยตัวอย่างฟิล์มอิสระสามตัวอย่างจากแต่ละสภาวะการจัดเก็บ สมบัติทางกลของฟิล์มมีลักษณะเด่นคือค่าความต้านทานแรงดึง (σ) การยืดตัวเมื่อขาด (ε) และโมดูลัสของยัง (E) ซึ่งคำนวณโดยใช้สมการ (3)–(5) ตามลำดับ:

โดยที่ F คือแรงสูงสุดที่ฟิล์มแตก (N), A คือพื้นที่หน้าตัดของตัวอย่าง (ซม.2), ∆L คือส่วนขยายของตัวอย่าง และ L0 คือความยาวดั้งเดิมของ ตัวอย่าง (ซม.)

2.12. การตรวจสอบคุณสมบัติ Mucoadhesive

เครื่องวิเคราะห์พื้นผิว (TA.XT Plus Texture Analyzer, Stable Micro Systems, Surrey, UK) ถูกนำมาใช้เพื่อตรวจสอบคุณสมบัติกาวของ CP-F โดยใช้วิธีการที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้ [22] โดยมีการดัดแปลงบางอย่าง ก่อนการทดสอบ เครื่องวิเคราะห์พื้นผิวได้รับการสอบเทียบกับโหลดเซลล์ 5 กก. ติด CP-F เข้ากับหัววัด (P 0.5 Perspex, 0.5-นิ้ว) โดยใช้เทปกาวสองหน้า เยื่อบุลำไส้ของสุกรขนาด 2 ซม. × 5 ซม. ติดเข้ากับสไลด์แก้วแล้ววางบนแท่นวาง พื้นผิวของเยื่อเมือกได้รับความชุ่มชื้นโดยการหยดน้ำลายเทียม 1 มล. หัววัดถูกลดระดับลงเพื่อสัมผัสกับพื้นผิวของเยื่อเมือก แรงสัมผัส 0.2 N ถูกนำไปใช้โดยมีเวลาสัมผัส 60 วินาที จากนั้นโพรบถูกถอนออกในอัตรา 1 มม./วินาที ซอฟต์แวร์ Texture Exponent (Stable Micro Systems, Surrey, UK) ถูกนำมาใช้เพื่อกำหนดแรงยึดเกาะ การทดลองดำเนินการเพิ่มขึ้นสามเท่าสำหรับตัวอย่างฟิล์มจากแต่ละสภาวะการเก็บรักษา

2.13. การวิเคราะห์ทางสถิติ

3. ผลลัพธ์และการอภิปราย

พบว่า CP-F ที่ประดิษฐ์ขึ้นส่วนใหญ่มีความหนาสม่ำเสมอ เมื่อใช้ไมโครเมตร ฟิล์มจะแสดงความหนาเฉลี่ย 0.98 ± 0.10 มม. ภาพถ่ายไมโครกราฟภาคตัดขวางจากกล้องจุลทรรศน์แบบใช้แสงของ CP-F ดังแสดงในรูปที่ 1 แสดงให้เห็นว่าความหนาของฟิล์มคือ 100 ± 0.05 มม. ซึ่งเป็นผลมาจากไมโครมิเตอร์ CP-F ที่ได้รับซึ่งมีความหนาประมาณ 1 มม. ได้รับการคัดเลือกเพื่อศึกษาเพิ่มเติม

โดยทั่วไป การวิเคราะห์ HPLC ที่ใช้สำหรับการหาค่า CP ในสูตรผสมนั้นได้รับการตรวจสอบโดยการเลือกของไตรฟีนิลฟอสฟีนออกไซด์และไตรฟีนิลฟอสฟีน ค่าพีคของโครมาโตแกรม HPLC ของไตรฟีนิลฟอสฟีนออกไซด์และไตรฟีนิลฟอสฟีนถูกนำเสนอในเวลาการกักเก็บที่แตกต่างกันที่ 5.0 นาที และ 10.5 นาที ตามลำดับ ดังแสดงในรูปที่ S1a [27] ได้ไตรฟีนิลฟอสฟีนออกไซด์จากปฏิกิริยาออกซิเดชันของไตรฟีนิลฟอสฟีนโดย CP [28] ในการศึกษาปัจจุบัน การหาค่า CP ได้มาจากบริเวณพีคของไตรฟีนิลฟอสฟีนออกไซด์ ค่าสูงสุดของไตรฟีนิลฟอสฟีนที่เหลืออยู่ในโครมาโตแกรม HPLC ยืนยันว่า CP ทั้งหมดมีปฏิกิริยาอย่างสมบูรณ์ นอกจากนี้ เพื่อจำกัดการรบกวนจากปฏิกิริยาออกซิเดชันจากปัจจัยอื่นๆ ที่อาจนำไปสู่การประเมินค่า CP ที่สูงเกินไป การตรวจหาไตรฟีนิลฟอสฟีนออกไซด์ในตัวอย่างเปล่าที่ไม่มี CP ได้ดำเนินการ และผลลัพธ์จะแสดงในรูปที่ S1b

สำหรับข้อมูลเพิ่มเติม: david.deng@wecistanche.com WhatApp:86 13632399501