การระบุ Echinacoside และ 2,3,5,4'-tetrahydroxy Stilbene พร้อมกัน-2-Ο- -D-glucoside ในของเหลวในช่องปาก Congrong Tongbian โดย HPLC
Mar 05, 2024
เชิงนามธรรม:วัตถุประสงค์คือเพื่อตรวจหาเอไคนาโคไซด์และ 2,3,5,4'-tetrahydroxy stilbene-2-Ο- -D-กลูโคไซด์ในของเหลวในช่องปากทางเดินอาหาร Congrong พร้อมกันโดย HPLC คอลัมน์ Tech Mate C18-ST (4.6 มม.×250.0 มม., 5 μm) ถูกนำมาใช้กับการชะล้างแบบไล่ระดับโดยอะซีโตไนไตรล์-0.2% สารละลายกรดฟอร์มิก; ความยาวคลื่นการตรวจจับคือ 330นาโนเมตร อัตราการไหลคือ 1.0 มล./นาที ผลลัพธ์แสดงให้เห็นว่าเอไคนาโคไซด์และ 2,3,5,4'-tetrahydroxy stilbene-2-Ο- -D-กลูโคไซด์ในตัวอย่างนำเสนอความละเอียดที่ดีจากพีคโครมาโตกราฟีที่อยู่ติดกันโดยมีความสัมพันธ์เชิงเส้นที่ดีในช่วง 0 .159 3-0.955 8 ส.ค. และ 0.385 3-4.623 5 ส.ค. วิธีการที่กำหนดไว้นั้นเรียบง่ายและแม่นยำ และสามารถใช้เพื่อระบุเอไคนาโคไซด์และสติลบีนไกลโคไซด์ในของเหลวในช่องปากทางเดินอาหาร Congrong
คำสำคัญ:ของเหลวในช่องปาก Congrong Degestive;เอชินาโคไซด์- 2,3,5,4'-เตตระไฮดรอกซีสติลบีน-2-Ο- -ดี-กลูโคไซด์; HPLC
สารสกัดซิสแทนช์ออร์แกนิกที่มีเอไคนาโคไซด์ 30% และแอคทีโอไซด์ 12%
มาตรฐานคุณภาพในปัจจุบันของซิสตานเช่ รองของเหลวในช่องปากทางเดินอาหารมีปัญหา เช่น รายการทดสอบง่ายๆ การใช้งานไม่ดี และการดำเนินการที่ยุ่งยากและใช้เวลานาน นอกเหนือจากรายการตรวจสอบทั่วไปแล้ว มาตรฐานยังมีเฉพาะรายการระบุชั้นบางสำหรับ Polygonum multiflorum และ Citrus aurantium และ Polygonum multiflorum และ Citrus aurantium วิธีการระบุโครมาโทกราฟีแบบชั้นบางจริงนั้นไม่เข้มงวดเพียงพอและทำงานได้ไม่ดี รายการกำหนดปริมาณใช้อัลตราไวโอเลตสเปกโตรโฟโตมิเตอร์เพื่อตรวจจับ 1,8-ไดไฮดรอกซีแอนทราควิโนนในของเหลวทางปากของ Cistanche purpurea เนื่องจากวิธีนี้ต้องใช้การสกัดกรดไหลย้อนหลายครั้ง การดำเนินการจึงยุ่งยากและใช้เวลานาน อีกทั้งความสามารถในการทำซ้ำและความแม่นยำยังต่ำ ไม่สามารถควบคุมคุณภาพของยาดั้งเดิมได้ และขาดการควบคุมคุณภาพของยา King Cistanche Deserticola ในงานวิจัยมาตรฐานนี้ ได้มีการกำหนดechinaceaside ใน Cistanche Deserticolaและสติลบีน ไกลโคไซด์ ใน Polygonum multiflorumใน Cistanche Deserticola Oral Liquid ได้รับการศึกษา ขึ้นอยู่กับองค์ประกอบของสูตรและคุณลักษณะของกระบวนการ จึงได้กำหนดเฟสของเหลวประสิทธิภาพสูงขึ้น วิธีการโครมาโตกราฟีถูกนำมาใช้เพื่อกำหนดเอไคนาโคไซด์และสติลบีน ไกลโคไซด์ในของเหลวในช่องปากของ Cistanche Rong และขีดจำกัดของเนื้อหาถูกกำหนดขึ้นเพื่อปรับปรุงและปรับปรุงมาตรฐานการควบคุมคุณภาพต่อไป วิธีการระบุนั้นง่ายและรวดเร็ว และมีการกำหนดขีดจำกัดของเนื้อหาอย่างสมเหตุสมผล หลังจากการตรวจสอบระเบียบวิธีแล้ว ความแม่นยำ ความแม่นยำ ความเป็นเส้นตรง ความทนทาน และความแม่นยำของช่วงนั้นอยู่ในเกณฑ์ดี และสามารถใช้เพื่อกำหนดปริมาณของ Cistanche Rong Tongbang Oral Liquid [1-5]
1 เครื่องมือและรีเอเจนต์
1.1 เครื่องมือ
โครมาโตกราฟีของเหลวประสิทธิภาพสูงของ Waters (2695 และ ARC); เครื่องชั่งอิเล็กทรอนิกส์ 1/100,000 (MS205DU), 1/10,000 เครื่องชั่งอิเล็กทรอนิกส์ (ME204E, Mettler-Toledo)
1.2 ทดสอบยาและรีเอเจนต์
ด้านเอ็กไคนาเซีย (หมายเลขแบทช์ 110670-201706 ความบริสุทธิ์ 89.7%); stilbene glycoside (หมายเลขแบทช์ 110844-201915 ความบริสุทธิ์ 90.7%) ทั้งหมดนี้จัดทำโดยสถาบันควบคุมอาหารและยาแห่งประเทศจีน; Cistanche purpurea ของเหลวในช่องปาก (หมายเลขชุด 20191204, 20191205, 20191206, 20200404, 20200405, 20200406, 20200407, 20200408, 20200409, 20200410) จัดทำโดยบริษัทยาในกานซู; เมทานอล ฯลฯ มีความบริสุทธิ์ทางโครมาโตกราฟี น้ำเป็นน้ำบริสุทธิ์พิเศษ รีเอเจนต์อื่นๆ เป็นเกรดเชิงวิเคราะห์
2 วิธีการและผลลัพธ์
2.1 เงื่อนไขโครมาโตกราฟี
ใช้ Tech Mate C{{0}}ST (4.6 มม. × 250.0 มม., 5 μm) เป็นคอลัมน์โครมาโตกราฟี ใช้อะซีโตไนไตรล์เป็นเฟส A เคลื่อนที่ และใช้ สารละลายกรดฟอร์มิก 0.2% เป็นเฟส B เคลื่อนที่ ดำเนินการชะล้างแบบเกรเดียนต์ตามข้อบังคับในตารางที่ 1 อุณหภูมิคอลัมน์ อุณหภูมิ 35 องศา ; ความยาวคลื่นการตรวจจับคือ 330 นาโนเมตร อัตราการไหล 1.0 มล./นาที ปริมาตรการฉีดของตัวอย่างทดสอบและสารอ้างอิงคือ 10 ไมโครลิตรต่อชิ้น จำนวนเพลตตามทฤษฎีไม่ควรน้อยกว่า 4000 โดยขึ้นอยู่กับพีคของเอ็กไคนาซีไซด์
2.2 การเตรียมสารละลาย
การเตรียมสารละลายอ้างอิง: ผสมสารอ้างอิงเอ็กไคนาซีไซด์และสารอ้างอิงสติลบีนไกลโคไซด์ในปริมาณที่เหมาะสม ชั่งน้ำหนักอย่างแม่นยำ และเติมเมทานอล 70% เพื่อเตรียมสารละลายผสมที่มีเอ็กไคนาเซียไซด์ 70 ไมโครกรัมและ 150 ไมโครกรัม ของสติลบีน ไกลโคไซด์ ต่อ 1 มิลลิลิตร , แค่นั้นแหละ. การเตรียมสารละลายทดสอบ: เขย่าผลิตภัณฑ์ให้เข้ากันใช้เวลาประมาณ 0.3 กรัม ชั่งน้ำหนักให้แม่นยำ ใส่ลงในขวดตวงสีน้ำตาลขนาด 25 มล. เติมเมทานอล 70% ในปริมาณที่เหมาะสม โซนิเคต 30 นาที ปล่อยให้เย็น เติม 70 % เมทานอลที่จะเจือจางเป็นเกล็ด เขย่าให้เข้ากัน กรอง และนำสารกรองที่เหลือเพื่อให้ได้ การเตรียมสารละลายตัวอย่างที่เป็นลบ: ชั่งน้ำหนักตัวอย่างที่เป็นลบประมาณ 0.3 กรัมอย่างแม่นยำ และจัดเตรียมตามวิธีการเตรียมของสารละลายทดสอบ
รูปที่ 1 HPLC chromatograms ของของเหลวในช่องปากทางเดินอาหาร Congrong
2.3 การทบทวนระเบียบวิธี
2.3.1 เส้นโค้งการทำงานและช่วงเชิงเส้น
วาดสารละลายอ้างอิงแบบผสมอย่างแม่นยำ และเติมเมทานอล 70% เพื่อเตรียมชุดสารละลายอ้างอิงแบบผสม วาด 1{{20}} µL ของชุดสารละลายควบคุมแต่ละชุดข้างต้นอย่างแม่นยำ ฉีดลงในโครมาโตกราฟีของเหลว และวัดค่ารวมของพื้นที่พีค นำความเข้มข้นของสารละลายอ้างอิง (µg/mL) มาเป็นพิกัด (x) และค่าปริพันธ์ของพื้นที่พีคเป็นค่า abscissa (y) วาดกราฟเพื่อให้เส้นตรงผ่านจุดกำเนิด สมการการถดถอยคือ y1=1.510 4×106x-1.177 2×105 (r=0.999 9), {{10} }.644 0×106x-6.3836×105 (r=0.999 9) ผลลัพธ์แสดงให้เห็นว่าเอ็กไคนาเซียไซด์และสติลบีน ไกลโคไซด์มีความสัมพันธ์เชิงเส้นที่ดีในช่วงมวล 0.159 3 ถึง 0.955 8 ug และ 0.385 3 ถึง 4.623 5 ส.ค.
ซิสตานเช่ ตูบูโลซา
2.3.2 การทดสอบความแม่นยำ
ดึงสารละลายอ้างอิงแบบผสมออกมา 10 µL อย่างแม่นยำ และฉีดซ้ำ 6 ครั้งภายใต้สภาวะโครมาโทกราฟี "2.1" RSD ของพื้นที่พีคของเอคินาโคไซด์และสติลบีนไกลโคไซด์ถูกวัดเป็น 0.66% และ 0.59% ตามลำดับ ซึ่งบ่งชี้ว่าความแม่นยำของเครื่องมือนั้นดี
2.3.3 การทดสอบความเสถียร
ตามวิธีการภายใต้ "2.1" นำผลิตภัณฑ์นี้ (ชุดหมายเลข 20191205) มาทำสารละลายทดสอบ ฉีดตัวอย่างเพื่อการวัดที่ 0 ชั่วโมง 4 ชั่วโมง 8 ชั่วโมง 12 ชั่วโมง 20 ชั่วโมง และ หลังจากเตรียม 24 ชั่วโมง และบันทึกบริเวณจุดสูงสุด ค่าเบี่ยงเบนมาตรฐานสัมพัทธ์อยู่ระหว่าง 2.37% ถึง 2.79% ผลปรากฏว่าสารละลายทดสอบมีความคงตัวภายใน 24 ชั่วโมง
2.3.4 การทดสอบความสามารถในการทำซ้ำ
นำตัวอย่างทดสอบชุดเดียวกันจำนวน 6 ส่วน (หมายเลขชุดงาน 20191205) และฉีดตัวอย่างเพื่อตรวจวัดตามเงื่อนไขโครมาโตกราฟีภายใต้ "2.1" ผลลัพธ์ ค่าเบี่ยงเบนมาตรฐานสัมพัทธ์ของเอ็กไคนาซีไซด์คือ 1.48% โดยมีความสามารถในการทำซ้ำได้ดี ค่าเบี่ยงเบนมาตรฐานสัมพัทธ์ของ stilbene glycoside คือ 1.10% โดยมีความสามารถในการทำซ้ำได้ดี
ซิสตานเช่ ตูบูโลซา
2.3.5 การกำหนดอัตราการฟื้นตัว
ใช้การเพิ่มและการกู้คืนตัวอย่างเพื่อให้ 50% ของจำนวนตัวอย่าง (0.3 กรัม) ของตัวอย่างทดสอบและเนื้อหาการสุ่มตัวอย่าง 1.0:0 .5, 1.{{10}}:1.0, 1.0:1.5 ตามลำดับ และดูดซับสารละลายสำรองสารอ้างอิง 1 ได้อย่างแม่นยำ (ปริมาณเอ็กไคนาเซียไกลโคไซด์คือ 0.431 5 มก./มล.) 1.0 มล., 2.0 มล. และอย่างละ 3.0 มล. จากนั้นเติมสารละลายสต๊อกสารอ้างอิง 2 อย่างถูกต้อง (สติลบีนไกลโคไซด์ ความเข้มข้นของมวล 0.8678 มก./มล.) 1.25 มล., 2.50 มล. และ 3.75 มล. ตามลำดับ เติมขวดวัดปริมาตรลงในขวดปริมาตร 25 มล. ตามลำดับโดยใช้
เป่าแห้งด้วยเครื่องเป่าลมไนโตรเจน จากนั้นชั่งน้ำหนักตัวอย่าง 9 ตัวอย่างในชุดเดียวกันโดยมีสารที่ทราบอยู่อย่างแม่นยำ (หมายเลขชุดที่ 20191205 ปริมาณเอ็กไคนาซีไซด์คือ 7.810 2 มก./กรัม ปริมาณสติลบีนไกลโคไซด์คือ 14.232 4 มก./ g) และจำนวนตัวอย่างของแต่ละตัวอย่างคือ จำนวนตัวอย่างของตัวอย่างทดสอบคือประมาณ 0.15 กรัม เพิ่มลงในขวดวัดปริมาตรด้านบนตามลำดับ เตรียมตามวิธีการภายใต้สารละลายทดสอบ วัดกันตามกฎหมายครับ คำนวณอัตราการฟื้นตัว ผลลัพธ์ก็ง่าย
การฟื้นตัวโดยเฉลี่ยของสติลบีนไกลโคไซด์และสติลบีนไกลโคไซด์คือ 98.28% และ 98.43% ตามลำดับ และ RSD อยู่ที่ 1.56% และ 0.97% ตามลำดับ ซึ่งบ่งชี้ถึงความแม่นยำของเครื่องมือที่ดี
หากคุณสนใจบทความนี้ คุณสามารถติดต่อเรา:
อีเมล:wallence.suen@wecistanche.com
Whatsapp/โทรศัพท์:+86 15292862950
เลือกซื้อรายละเอียดข้อมูลจำเพาะเพิ่มเติม:
https://www.xjcistanche.com/cistanche-ร้านค้า
