ฟังก์ชั่นการกำจัดส่วนต่าง ๆ ของการสกัด C. Deserticola กับแบบจำลองหนูท้องผูก

เชิงนามธรรม: วัตถุประสงค์ เพื่อศึกษาฤทธิ์เป็นยาระบายของส่วนต่างๆ ที่สกัดได้ของ C. Deserticola วิธีการ สร้างแบบจำลองหนูที่ท้องผูกด้วยอิโมเดียมเพื่อสังเกตการถ่ายอุจจาระและตรวจหาฮอร์โมนในทางเดินอาหารและสารสื่อประสาท ฯลฯ ผลที่ได้ สารสกัดส่วนต่าง ๆ ของ C. Deserticola ต้องส่งเสริมผลต่อการขับถ่ายของหนูที่ท้องผูก เมื่อเทียบกับกลุ่มแบบจำลอง SS, AchE, SP และ MTL ของส่วนโอลิโกแซ็กคาไรด์มีแนวโน้มเพิ่มขึ้น 5-HT, VIP และ NT ของส่วนโอลิโกแซ็กคาไรด์เพิ่มขึ้นอย่างมีนัยสำคัญ (P<0. 05 or P<0. 01), AQP3 significantly reduced (P<0. 01), which suggested that the oligosaccharide part had obvious therapeutic effects. The remaining parts showed no significant difference. Oligosaccharide was an ef-the festive working part of C. deserticola. CONCLUSION The oligosaccharide of C. deserticola has good purging effects, and can effectively treat constipation, which provides the scientific basis for pharmaceutical development.

คำสำคัญ:ค. ทะเลทราย; ล้าง; ฮอร์โมนในทางเดินอาหาร สารสื่อประสาท; โอลิโกแซ็กคาไรด์

Cistanche Deserticola เป็นลำต้นเนื้อแห้งเป็นเกล็ดของพืชตระกูล Orobaceae Cistanche Deserticola หรือ Cistanche Deserticola ดอกไม้รูปท่อ เป็นที่รู้จักกันในนาม "โสมทะเลทราย" และมีหน้าที่ต่างๆ เช่น ทำให้ลำไส้ชุ่มชื้น ส่งเสริมการเคลื่อนไหวของลำไส้ บำรุงไต และเพิ่มพลังหยาง Cistanche Deserticola มีฤทธิ์ผ่อนคลายและเป็นยาระบาย และเหมาะสำหรับการรักษาอาการท้องผูกในผู้ที่มีร่างกายอ่อนแอ. ในปัจจุบัน มีรายงานมากมายเกี่ยวกับผลการถ่ายอุจจาระของ Cistanche Deserticola แต่มีการเปรียบเทียบเล็กน้อยเกี่ยวกับความแตกต่างของผลการถ่ายอุจจาระของส่วนสกัดต่างๆ ก่อนหน้านี้ กลุ่มวิจัยของเราได้สำรวจผลการถ่ายอุจจาระของ Cistanche Deserticola ต่อหนูที่ท้องผูกและหนูธรรมดา ในการระบุส่วนที่มีประสิทธิภาพ กลุ่มวิจัยของเราได้สำรวจเพิ่มเติมถึงความแตกต่างในผลของการถ่ายอุจจาระของสารสกัด Cistanche Deserticola ที่แตกต่างกันต่อหนูที่ท้องผูก ซึ่งเป็นพื้นฐานทางวิทยาศาสตร์สำหรับการพัฒนายาใหม่

โสมทะเลทราย

คลิกที่นี่เพื่อดูผลิตภัณฑ์ Cistanche

【สอบถามเพิ่มเติม】 อีเมล:cindy.xue@wecistanche.com / Whats App: 0086 18599088692 / Wechat: 18599088692

1 วัสดุ

1.1 ยาทดลอง

Cistanche Deserticola ซื้อมาจากบริษัท มองโกเลีย Wangyedi Co., Ltd. และระบุโดยศาสตราจารย์ Zhai Yanjun จากมหาวิทยาลัยแพทย์แผนจีนเหลียวหนิงว่าเป็นลำต้นเนื้อแห้งเป็นเกล็ดของพืช Cistanche Deserticola YCMa ในครอบครัวยาจีน; Loperamide ไฮโดรคลอไรด์แคปซูล (ชื่อทางการค้า: Yimengting, หมายเลขแบทช์: 150413966, Xi'an Janssen Pharmaceutical Co., Ltd.); Tongbianling Capsules (หมายเลขชุด 12090202, Jinan Limeng Pharmaceutical Co., Ltd.); ถ่านกัมมันต์ (หมายเลขชุด 20040602, Liyang Zhuxi Activated Carbon Co., Ltd.); ชุดสาร ​​P (SP) (หมายเลขแบทช์: BPE30328), somatostatin (SS) kit (หมายเลขแบทช์: BPE30378), motilin (MTL) kit (หมายเลขแบทช์: BPE30376), acetylcholinesterase (AchE) kit (batch number: BPE30063), Vasoactive ชุดทดสอบเปปไทด์ในลำไส้ (VIP) (หมายเลขชุด BPE31682), ชุดทดสอบ 5-hydroxytryptamine (5-HT) (หมายเลขชุด BPE30326), ชุดทดสอบ aquaporin 3 (AQP3) (หมายเลขชุด BPE30361), นิวโรเทนซิน ( NT) ชุดทดสอบ (หมายเลขแบทช์ BPE30823) ทั้งหมดจัดทำโดย Shanghai Langton Biotechnology Co., Ltd; รีเอเจนต์ที่เหลือคือการวิเคราะห์ที่บริสุทธิ์

ซุปสมุนไพรซุปเปอร์แมน

1.2 เครื่องดนตรี 

เครื่องมือติดฉลากเอนไซม์ (Thermo Fisher Scientific, USA); TGL-16เครื่องหมุนเหวี่ยงตั้งโต๊ะ C (โรงงานเครื่องมือวิทยาศาสตร์ Shanghai Anting); เครื่องชั่งอิเล็กทรอนิกส์ (Shanghai Yousheng Weighing Instrument Co., Ltd.); เครื่องผสม Vortex (โรงงาน Shanghai Qingpu Huxi Instrument); กล่องอุณหภูมิและความชื้นคงที่ (Shanghai Yiheng Scientific Instrument Co., Ltd.)

1.3 สัตว์

หนู SD ที่มีน้ำหนักตัว 180-220g เกรด SPF จัดหาโดย Liaoning Changsheng Biotechnology Co., Ltd. หมายเลขใบอนุญาต SCXK (Liao) 2015-0001

2 วิธี

2.1 การเตรียมสารสกัดจากส่วนต่างๆ ของ Cistanche Deserticola

ชิ้น Cistanche Deserticola

ใช้ยาต้ม Cistanche Deserticola ในปริมาณที่เหมาะสม เติมน้ำ ความร้อน และกรดไหลย้อน 8 เท่า เพื่อสกัด 3 ครั้ง ครั้งละ 1 ชั่วโมง รวมตัวกรอง ลดความดัน และเข้มข้นให้มีความหนาแน่นสัมพัทธ์ 1.15 (วัดที่ 50 องศา) เติมเอทานอล 95 เปอร์เซ็นต์เป็นแอลกอฮอล์ 60 เปอร์เซ็นต์ ตกตะกอนที่อุณหภูมิต่ำเป็นเวลา 12 ชั่วโมง กรอง และตกตะกอนไปยังจุดสกัดโพลีแซคคาไรด์ทั้งหมด ; นำของเหลวที่ได้จากความเข้มข้นของสุญญากาศมาทำให้บริสุทธิ์ด้วยเรซินที่มีรูพรุนขนาดใหญ่ ล้างด้วยน้ำ รวบรวมน้ำยาล้างน้ำและระเหยให้แห้งเพื่อให้ได้เศษส่วนโอลิโกแซ็กคาไรด์ทั้งหมด จากนั้นชะด้วยเอทานอล 40 เปอร์เซ็นต์ รวบรวมเอธานอล 40 เปอร์เซ็นต์ ทำให้เข้มข้นภายใต้ความดันลดลง และทำให้แห้งเพื่อให้ได้ไกลโคไซด์ทั้งหมด ละลายแต่ละส่วนที่สกัดในน้ำแล้วพักไว้

การทดลอง Cistanche Deserticola

2.2 การจัดกลุ่ม

หลังจากหนึ่งสัปดาห์ของการให้อาหารแบบปรับตัว หนู SD ถูกสุ่มแบ่งออกเป็น 6 กลุ่ม โดยมีหนู 8 ตัวในแต่ละกลุ่ม รวมถึงกลุ่มควบคุมปกติ กลุ่มจำลอง กลุ่มควบคุมยาที่ให้ผลบวก กลุ่มโพลีแซคคาไรด์ทั้งหมด กลุ่มโอลิโกแซ็กคาไรด์ทั้งหมด และกลุ่มซาโปนินทั้งหมด หนูปกติถูกถ่าย ยกเว้นกลุ่มควบคุมปกติ หนูแต่ละกลุ่มได้รับ 3.0mg · kg-1 แคปซูล loperamide hydrochloride (ชื่อทางการค้า: Yimengting) โดยสายยางเป็นเวลาสามวันติดต่อกันเพื่อจำลองแบบของอาการท้องผูก หลังจากประสบความสำเร็จในการสร้างแบบจำลอง ยกเว้นกลุ่มควบคุมปกติและกลุ่มแบบจำลอง หนูในกลุ่มอื่นๆ ทั้งหมดถูกป้อนอย่างต่อเนื่องในขนาด 1 มล./100 ก. เป็นเวลา 9 วันด้วยความเข้มข้น 2.74 ก. · กก.-1 ที่สอดคล้องกับตัวอย่างทดสอบ . กลุ่มควบคุมปกติและกลุ่มตัวอย่างถูกเจาะด้วยน้ำเกลือทางสรีรวิทยาในปริมาณที่เท่ากัน

ชิ้น Cistanche Deserticola

2.3 ตัวบ่งชี้การสังเกต

2.3.1 สถานะการถ่ายอุจจาระของหนู

หลังจากการให้ยาครั้งล่าสุด หนูอดอาหารเป็นเวลา 12 ชั่วโมงและไม่สามารถช่วยได้นอกจากน้ำ แต่ละกลุ่มได้รับถ่านกัมมันต์ 20 เปอร์เซ็นต์โดย gavage ในอัตรา 25mL · kg-1 หนูถูกวางไว้ในกรงเมตาบอลิซึมและสังเกตจำนวนอนุภาคและน้ำหนักของอุจจาระสีดำที่ถูกขับออกมาภายใน 6 ชั่วโมง

2.3.2 ระดับการแสดงออกของตัวบ่งชี้ต่างๆ ในซีรัม พลาสมา และเนื้อเยื่อลำไส้ของหนูแรท

หลังจากเสร็จสิ้นการสังเกต หนูทุกตัวยังคงอดอาหารเป็นเวลา 6 ชั่วโมงและไม่สามารถช่วยอะไรได้นอกจากน้ำ เลือดประมาณ 5 มล. ถูกนำมาจากหลอดเลือดแดงใหญ่ในช่องท้องทั้งหมดและใส่เข้าไปในหลอด EP สองหลอด หลอดหนึ่งเติมเฮปาริน 50 ไมโครลิตรล่วงหน้าเพื่อเก็บพลาสมา และอีกหลอดหนึ่งเก็บซีรั่ม หลังจากยืนเป็นเวลา 30 นาที ปั่นแยกที่ 2,500r · นาที-1 เป็นเวลา 5 นาที เก็บซีรั่มและพลาสมาแยกจากกัน นำส่วนลอยไปทดสอบ และเก็บไว้ที่ระดับ -70 ที่อุณหภูมิต่ำ เนื้อเยื่อลำไส้ใหญ่ 2 ซม. หลังจากถอดลิ้นตาบอดออกแล้ว เนื้อหาถูกล้างด้วยน้ำเกลือทางสรีรวิทยา และทำให้แห้งด้วยกระดาษกรอง และเติม PBS (pH 7.4) ในปริมาณที่เหมาะสม หมุนเหวี่ยงที่ 4 องศา 3500r · นาที-1 เป็นเวลา 15 นาที และนำส่วนเหนือตะกอนไปทดสอบ ส่วนลอยเหนือตะกอนถูกเก็บไว้ที่ -70 องศาที่อุณหภูมิต่ำ ใช้ซีรั่ม พลาสมา และเนื้อเยื่อลำไส้ใหญ่ตามคำแนะนำของชุดอุปกรณ์ และดำเนินการ SS, AchE, SP, MTL, 5-HT, VIP, NT และ AQP3

2.4 การประมวลผลข้อมูล

SPSS 17.0 ซอฟต์แวร์ทางสถิติถูกใช้สำหรับการวิเคราะห์ความแปรปรวน และข้อมูลทั้งหมดแสดงเป็น 珚 x ± s ทำการทดสอบค่า t สำหรับความแตกต่างระหว่างกลุ่มและ P<0.05 was considered significant and statistically significant.

3 ผลลัพธ์

3.1 ผลต่อการถ่ายอุจจาระของหนูที่มีอาการท้องผูก

เมื่อเปรียบเทียบกับกลุ่มควบคุมปกติ อนุภาคของอุจจาระและน้ำหนักของหนูกลุ่มตัวอย่างมีแนวโน้มลดลง เมื่อเปรียบเทียบกับกลุ่มแบบจำลอง กลุ่ม Cistanche Deserticola แสดงแนวโน้มการส่งเสริมจำนวนอนุภาคอุจจาระและน้ำหนักอุจจาระในหนู กลุ่มโอลิโกแซ็กคาไรด์ทั้งหมดของ Cistanche Deserticola มีแนวโน้มสูงกว่ากลุ่มการรักษาอื่น ๆ แต่ไม่มีนัยสำคัญทางสถิติ ซึ่งบ่งชี้ว่ากลุ่มโอลิโกแซ็กคาไรด์ทั้งหมดมีผลการรักษาที่มีนัยสำคัญและเป็นจุดดำเนินการที่มีประสิทธิภาพ ผลลัพธ์แสดงไว้ในตารางที่ 1

แท็บ 1 ผลของตัวอย่างทดสอบต่อจำนวนกากของเสียและน้ำหนักของอุจจาระของหนูที่ท้องผูก(士s,n=8)

3.2 ผลต่อระดับ SS, NT และ AchE ในซีรั่มในหนูจำลองที่มีอาการท้องผูก

จากผลการศึกษาในตารางที่ 2 จะเห็นได้ว่าเมื่อเทียบกับกลุ่มควบคุมปกติ SS และ NT ของหนูทดลองกลุ่มตัวอย่างลดลงอย่างมีนัยสำคัญ (P<0.01), and AchE showed a downward trend, indicating that the constipation model was successfully established. Compared with the model group, the NT of rats in each treatment group was significantly increased (P<0.05), while SS and AchE showed an increasing trend. Among them, the total oligosaccharide group showed a significant increase, indicating that the total oligosaccharide had a significant therapeutic effect and was an effective site of action for Cistanche deserticola.

3.3 ผลต่อระดับ SP และ MTL ในพลาสมาในหนูจำลองที่มีอาการท้องผูก

จากผลลัพธ์ในตารางที่ 3 จะเห็นได้ว่าเมื่อเปรียบเทียบกับกลุ่มควบคุมปกติ ค่า SP และ MTL ของหนูกลุ่มตัวอย่างลดลงอย่างมีนัยสำคัญ (P<0.05 or P<0.01), indicating that the constipation model was successfully established. Compared with the model group, the SP and MTL of rats in each treatment group showed an increasing trend. Among them, the SP of rats in the total oligosaccharide group was significantly increased compared to the other treatment groups (P<0.05 or P<0.01), and the MTL showed an increasing trend, but there was no statistical difference, indicating that the total oligosaccharide group had a significant therapeutic effect and was an effective part of Cistanche deserticola.

แท็บ 2 ผลของตัวอย่างทดสอบต่อ SS, NT และ AchE ในซีรั่มของหนูที่ท้องผูก (士s,n=8)

หมายเหตุ: เมื่อเปรียบเทียบกับกลุ่มควบคุมปกติ aP<0.05, bP<0.01; Compared with the model group, cP<0.05, dP<0.01; Compared with the total oligosaccharide group, eP<0.05, fP<0.01 (the same in the following table)

3.4 ผลกระทบต่อ AQP3, 5-HT, เนื้อหา VIP ในเนื้อเยื่อลำไส้ของหนูทดลองจำลองอาการท้องผูก

เมื่อเทียบกับกลุ่มควบคุมปกติ 5-HT และ VIP ของหนูกลุ่มตัวอย่างลดลงอย่างมาก (P<0.05 or P<0.01), and AQP3 showed an upward trend, indicating that the constipation model was successfully established. Compared with the model group, the 5-HT, and VIP of the total oligosaccharide group rats were significantly increased (P<0.05 or P<0.01), while AQP3 was significantly reduced (P<0.01). The AQP3 and 5-HT of the total oligosaccharide group rats showed significant differences compared to the other treatment groups (P<0.05 or P<0.01), and VIP showed an upward trend, but there was no statistical difference, It indicates that the total oligosaccharide group has significant therapeutic effects and is the effective site of action for Cistanche deserticola (Table 4).

แท็บ 3 ผลของตัวอย่างทดสอบต่อ SP และ MTL ในพลาสมาของหนูที่ท้องผูก (士s,n=8)

4. การอภิปราย

อาการท้องผูกเป็นโรคทางคลินิกทั่วไปที่เกี่ยวข้องกับการเคลื่อนไหวของระบบทางเดินอาหาร MTL และ SP เป็นเปปไทด์กระตุ้นที่มีหน้าที่ควบคุมการเคลื่อนที่ของทางเดินอาหาร ซึ่งสามารถส่งเสริมการเคลื่อนที่ของทางเดินอาหาร NT อยู่ในเนื้อเยื่อเส้นประสาท ลำไส้เล็กส่วนปลาย และลำไส้เล็กส่วนต้น และมีหน้าที่ในการเพิ่มการเคลื่อนไหวของลำไส้ใหญ่ SS มีอยู่ในช่องท้องประสาทของลำไส้และเซลล์ D ของตับอ่อนและกระเพาะอาหาร ซึ่งสามารถยับยั้งการบีบตัวของทางเดินอาหาร ยืดเวลาการขนส่งของลำไส้ใหญ่และลำไส้เล็ก [6] และยับยั้งการหลั่งของวีไอพีและฮอร์โมนในทางเดินอาหารอื่นๆ 5-HT เป็นสารสื่อประสาทที่สำคัญในระบบประสาทของลำไส้ ซึ่งสามารถส่งเสริมการหลั่งและการบีบตัวของลำไส้ AQP3 ตั้งอยู่ในเซลล์เยื่อบุผิวของทางเดินอาหารและมีบทบาทสำคัญในการดูดซึมน้ำ การทดลองนี้มีผลในการรักษาอาการท้องผูกโดยการควบคุมฮอร์โมนในทางเดินอาหารและสารสื่อประสาทในลำไส้เหล่านี้

สถานที่สกัดมีผลส่งเสริมการขับถ่ายของหนูที่ท้องผูก เมื่อเปรียบเทียบกับกลุ่มแบบจำลอง กลุ่มโอลิโกแซ็กคาไรด์ทั้งหมดมีแนวโน้มเพิ่มขึ้นใน SS, AchE, SP และ MTL โดยเพิ่มขึ้นอย่างมากใน 5-HT, VIP และ NT (P<0.05 or P<0.01), and a significant decrease in AQP3 (P<0.01), indicating that the total oligosaccharide group has a significant therapeutic effect, There was no significant difference between the other groups, and total oligosaccharides were the effective active sites of Cistanche deserticola. The total oligosaccharides of Cistanche deserticola have good moisturizing and defecating effects, which can effectively treat constipation. It is hoped that this result will provide a scientific basis for the development of new drugs.

แท็บ 4 ผลกระทบของ AQP3, 5-HT และ VIP ในเนื้อเยื่อลำไส้ใหญ่ของหนู (士s,n=8)

อ้างอิง:

[1] ตำรับยาจีน. ตอนที่ ๑ [ส]. 2553:126

[2] จงผิง. โสมทะเลทรายและ Cistanche [J] ป่าไม้กับมนุษย์, 2547, 24(11): 25

[3] ตู่ เผิงเฟย, เจียง หยง, กัว หยูไห่ และคณะ การวิจัยเกี่ยวกับ Cistanche Deserticola และการพัฒนาอุตสาหกรรม [J] วารสารเภสัชศาสตร์จีน, 2554, 46 (12): 882-886

[4] Wu Feng, Zhao Xi, Xue Hua และคณะ ผลของแคปซูลว่านหางจระเข้เห็ดหลินจือต่อการทำให้ลำไส้ชุ่มชื้นและบรรเทาอาการท้องผูก [J] วารสารเวชศาสตร์การขนส่ง, 2551, 22 (4): 338

[5] Foxx OA, Camilleri M, Ste PD และคณะ ผลของอะนาล็อกโซมาโตสแตติน-ดีบุกต่อกลไกของกระเพาะอาหารและการทำงานของประสาทสัมผัสในมนุษย์ที่มีสุขภาพดี[J] ไส้, 2546, 52: 1555-1561.

[6] Park JH, Rhee PL, Kim G และคณะ จำนวนเซลล์ต่อมไร้ท่อมีความสัมพันธ์กับภาวะภูมิไวเกินของอวัยวะภายในในผู้ป่วยที่มีอาการท้องเสียซึ่งมีอาการลำไส้แปรปรวนมากกว่าปกติ[J] Neurogastro-enterol Motil, 2006, 18(7): 539-546

[7] Brancati SB, Zadori ZS, Nemeth J และคณะ สาร P กระตุ้นการป้องกันเยื่อเมือกในกระเพาะอาหารที่ระดับเหนือไขสันหลังโดยการเพิ่มระดับของเอนโดมอร์ฟิน-2 ในหนู[J] Brain Res Bull, 2013,91(2):38-45.

[8] Fukuda A, Goto T, Kuroishi KN และคณะ เฮโมไคนิน-1ยับยั้งสาร P กระตุ้นการสร้างและการทำงานของ os-teoclast[J] นิวโรเปปไทด์, 2013, 47 (4):251-259.

[9] เลเยอร์ PK, Laczinski J, Salfelder A และอื่นๆ โคลีนเอสเทอเรสที่กำลังพัฒนา: ไฟร์วอลล์ AChEasa เพื่อยับยั้งการเพิ่มจำนวนเซลล์และสนับสนุนการสร้างความแตกต่าง[J] Chem Biol Interact, 2013, 203(1):227-269