เทคโนโลยีการเตรียมสำหรับเม็ด Wenyang Tongbian

เชิงนามธรรม:

วัตถุประสงค์เพื่อกำหนดและเพิ่มประสิทธิภาพเทคโนโลยีการเตรียมของ Wenyang Tongbiangranules

วิธีการยาต้มน้ำถูกสกัด ใช้เนื้อหาของเอ็กไคนาเซียไกลโคไซด์ในยาราชาและสารประกอบผลผลิตเป็นดัชนี การทดสอบมุมฉาก L9 (34) ใช้เพื่อเพิ่มประสิทธิภาพการสกัดเม็ดเม็ด Wenyang Tongbian กระบวนการขึ้นรูปที่ดีที่สุดได้รับการปรับปรุงให้เหมาะสมโดยพิจารณาจากความยากของการแกรนูล ความสามารถในการขึ้นรูป และผลผลิตของอนุภาค ผลลัพธ์ การสกัดที่ดีที่สุดรวมถึงการเติมน้ำ 10 เท่าและการสกัด 3 ครั้ง ครั้งละ 1 ชั่วโมง กระบวนการก่อตัวที่ดีที่สุด: ชนิดของวัสดุเสริมคือเดกซ์ทริน อัตราส่วนของส่วนเติมเนื้อยาคือ 1∶0.9 และสารทำให้เปียกที่ดีที่สุดคือเอทานอล 85% สรุป กระบวนการสกัดและการขึ้นรูปมีความเสถียรและสมเหตุสมผล เรียบง่ายและเป็นไปได้ พร้อมความสามารถในการทำซ้ำที่ดี ซึ่งสามารถเป็นพื้นฐานสำหรับการผลิตทางอุตสาหกรรมของเม็ดเม็ด Wenyang Tongbian

คำหลัก: เหวินหยาง ตงเปี้ยน กรานลือ- การทดสอบมุมฉาก การสกัด; การปั้น

สูตรสมุนไพรใหม่สำหรับไตการขาดหยาง

บริการสนับสนุนของ Wecistanche

อีเมล:wallence.suen@wecistanche.com

Whatsapp/โทรศัพท์:+86 15292862950

ท้องผูกขาดหยางพบได้บ่อยในผู้สูงอายุและสตรี วิธีการรักษาไม่ควรเป็นการชะล้างแบบธรรมดา วิธีวอร์มมิงหยางให้ผลลัพธ์ที่ดี [1] Wenyang Tongbian Granules เป็นผลิตภัณฑ์เตรียมในโรงพยาบาลที่พัฒนาขึ้นจากประสบการณ์ทางคลินิกของศาสตราจารย์ Lin Aizhen จากโรงพยาบาลแพทย์แผนจีนประจำจังหวัด Hubei ในการรักษาอาการท้องผูกจากการทำงานในผู้สูงอายุ ประกอบด้วย Cistanche Deserticola เปลือกอบเชย ตาตุ่ม และ Atractylodes Macrocephala ในสูตรนี้ Cistanche Deserticola มีหน้าที่ในการบำรุงหยางในไตและให้ประโยชน์แก่แก่นแท้และเลือด และเป็นยาหลักที่ทำให้หยางอุ่น เปลือกอบเชยมีหน้าที่ทำให้เส้นเมอริเดียนอุ่นขึ้นและปลดบล็อกหลอดเลือด เติมไฟและรองรับหยาง สาหร่ายคลอเรลมีหน้าที่ในการเลี้ยงหยางและเสริมพลังชี่ ช่วยสมานแผล และส่งเสริมการสร้างเนื้อเยื่อใหม่ และ Atractylodes macrocephala มีหน้าที่เสริมสร้างม้ามและเติมพลังชี่ ทำให้ความชื้นแห้ง และส่งเสริมการขับปัสสาวะ

การศึกษาพบว่าฟีนิลเอทานอลไกลโคไซด์เป็นส่วนผสมหลักใน Cistanche Deserticola [2] ในบรรดาสารเหล่านี้ เอไคนาโคไซด์และเวอร์บาสโคไซด์เป็นส่วนผสมที่มีลักษณะเฉพาะในการควบคุมคุณภาพของ Cistanche Deserticola ตามที่ระบุไว้ในเภสัชตำรับจีน หลิว เซียนหง และคณะ [3] สรุปจากการทดลองในมนุษย์ในสัตว์ทดลองว่า Cistanche Deserticola เหมาะสำหรับการรักษาอาการท้องผูกทางคลินิก และสามารถรักษาทั้งอาการและสาเหตุที่แท้จริงได้ ส่วนประกอบทางเคมีหลักของเปลือกอบเชย ได้แก่ น้ำมันหอมระเหย โพลีแซ็กคาไรด์ ฟลาโวนอยด์ ฯลฯ การศึกษาทางเภสัชวิทยาสมัยใหม่แสดงให้เห็นว่าเปลือกอบเชยมีผลทางเภสัชวิทยา เช่น การขยายตัวของหลอดเลือด ป้องกันแผลในกระเพาะอาหาร และฤทธิ์ต้านเชื้อแบคทีเรีย [4] Astragalus polysaccharides, flavonoids และ astragaloside IV เป็นส่วนประกอบทางเคมีหลักที่ออกฤทธิ์กระตุ้นภูมิคุ้มกัน [5] Atractylodes macrocephala มีฤทธิ์ในการเสริมสร้างม้ามและควบคุมความผิดปกติของพืชในลำไส้ และสามารถนำมาใช้ทางคลินิกเพื่อรักษาความผิดปกติของระบบทางเดินอาหาร [6] ใบสั่งยาดั้งเดิมส่วนใหญ่จะใช้ในการต้มยาแผนจีน แต่ก็มีข้อเสียเช่นความไม่สะดวกในการต้ม การรับประทานในปริมาณมาก และความไม่สะดวกในการพกพา เพื่อให้ใบสั่งยาจากประสบการณ์ทางคลินิกนี้ใช้กันอย่างแพร่หลายในการปฏิบัติทางคลินิก จึงได้รับการพัฒนาเป็นเม็ด การทดลองนี้ใช้ผลผลิตยาพอกและปริมาณเอชินาโคไซด์ซึ่งเป็นสารออกฤทธิ์หลักในยาหลักเป็นตัวบ่งชี้ ยังคงใช้กระบวนการต้มน้ำแบบดั้งเดิม และใช้วิธีการทดสอบมุมฉาก L9 (34) เพื่อเพิ่มปริมาณน้ำที่เติมให้เหมาะสม เวลาในการต้ม และเวลาในการต้มในกระบวนการสกัดเพื่อให้ได้กระบวนการสกัดที่ดีที่สุด ในเวลาเดียวกัน กระบวนการขึ้นรูปแบบเม็ดเล็กได้รับการตรวจสอบเพื่อกำหนดกระบวนการขึ้นรูปที่มีความเสถียรและสมเหตุสมผล โดยเป็นข้อมูลอ้างอิงสำหรับการผลิตนำร่อง การควบคุมคุณภาพ และการประยุกต์ใช้ทางคลินิกของสารเตรียม [7-8]

1 เครื่องมือและรีเอเจนต์

1.1 เครื่องมือ

พันธมิตร e2695โครมาโตกราฟีของเหลวประสิทธิภาพสูง, เครื่องตรวจจับอาร์เรย์ไดโอด 2998 (Waters, USA), ES225SMDR 1/100,000 เครื่องชั่งเชิงวิเคราะห์ (Precisa, สวิตเซอร์แลนด์), เครื่องทำน้ำบริสุทธิ์พิเศษ UPT-11-10T (Shenzhen UPT Technology Co., Ltd.) KQ-500เครื่องทำความสะอาดอัลตราโซนิก CNC ความถี่คู่ VDE (Kunshan Ultrasonic Instrument Co., Ltd.)

1.2 ยาทดลอง

ชิ้นไวน์ Cistanche(หมายเลขชุด: 2322050113 ผลิตในมองโกเลียใน) ชิ้นอบเชย (หมายเลขชุด: 2323020103 ผลิตในกวางสี) ชิ้นสาหร่ายคลอเรล (หมายเลขชุด: 2323020105 ผลิตในกานซู) ชิ้น Atractylodes macrocephala (หมายเลขชุด: 2322080101 ผลิตในเจ้อเจียง ) (Hubei Chenmei Chinese Medicine Co., Ltd. ชิ้นทั้งหมดได้รับการระบุว่าเป็นของแท้โดย Chen Shuhe หัวหน้าเภสัชกรของ Institute ofการแพทย์แผนจีนของโรงพยาบาลการแพทย์แผนจีนประจำจังหวัดหูเป่ย และมีคุณสมบัติตามฉบับปี 2020ชาวจีน ตำรับยาส่วนที่ 1) สารอ้างอิงเอชินาโคไซด์(หมายเลขแบทช์: 111670-201907 ความบริสุทธิ์: 91.8% การวิจัยการตรวจสอบอาหารและยาของจีน)

เดกซ์ทริน (หมายเลขแบทช์: 230102), แป้งข้าวโพด (หมายเลขแบทช์: 221008) (Henan Zhenghong Pharmaceutical Excipients Co., Ltd.), ซูโครส (หมายเลขแบทช์: TF28221205), เซลลูโลสไมโครคริสตัลไลน์ (หมายเลขแบทช์: TF471211001), แลคโตส (หมายเลขแบทช์: TF463Y230101) (หูหนาน Jiudian Hongyang Pharmaceutical Co., Ltd.)

2 วิธีและผลลัพธ์

2.1 การหาปริมาณเอชินาโคไซด์

2.1.1 เงื่อนไขโครมาโตกราฟี: Agilent 5 TC-C18 (25 0 nm × 4.6 mm, 5 μm) ถูกใช้เป็นคอลัมน์โครมาโตกราฟี เมทานอลถูกใช้เป็นเฟสเคลื่อนที่ A, สารละลายกรดฟอร์มิก 0.1% ถูกใช้เป็นเฟสเคลื่อนที่ B, การชะแบบไล่ระดับ (0-17 นาที, 26.5%A; 17-20 นาที, 26.5% → 29.5%A; 20-54 นาที

29.5%เอ, 54-55 นาที, 29.5% → 26.5%เอ; 55-60นาที 26.5%A); อัตราการไหล 1.0 มล.·นาที-1; อุณหภูมิคอลัมน์ 30 องศา ; เครื่องตรวจจับอาร์เรย์ไดโอด, ความยาวคลื่นการตรวจจับ 330 นาโนเมตร; ปริมาณการฉีด10μL; หมายเลขทะเบียนตามทฤษฎีที่คำนวณจากพีคเอชินาโคไซด์ไม่ควรน้อยกว่า 3,000[9]

2.1.2 การเตรียมสารละลายอ้างอิง

รับประทานเอชินาโคไซด์ในปริมาณที่เหมาะสม โดยมีน้ำหนักแม่นยำ 9.65 มก. ใส่ลงในขวดวัดปริมาตรขนาด 25 มล. เติม 50%

เมทานอลเพื่อละลายและเจือจางให้ได้เครื่องหมายเพื่อเป็นสารละลายอ้างอิง ปิเปตสารละลายสต็อคเอชินาโคไซด์ 1 มล. ลงในขวดวัดปริมาตรขนาด 25 มล. อย่างถูกต้อง เติมเมทานอล 50% เพื่อเจือจางที่เครื่องหมาย เขย่าให้เข้ากัน และเตรียมสารละลายอ้างอิงที่มี 14.17 ไมโครกรัมต่อ 1 มล. [9]

2.1.3 การเตรียมสารละลายทดสอบ

นำผงแป้งแห้งประมาณ 0.5 กรัม บดให้เป็นผง ชั่งน้ำหนักอย่างถูกต้อง ใส่ลงในขวดทรงกรวยสีน้ำตาล เติมเมทานอล 50% 50 มล. อย่างแม่นยำ อุดให้แน่น เขย่าให้เข้ากัน ชั่งน้ำหนัก บำบัดด้วยอัลตราโซนิกเป็นเวลา 40 นาที (กำลังไฟ 250 วัตต์ ความถี่ 45 kHz) ปล่อยให้เย็น ชั่งน้ำหนักอีกครั้ง เติมเมทานอล 50% เพื่อสร้างน้ำหนักที่หายไป เขย่าให้เข้ากัน ปล่อยให้ยืน เอาส่วนเหนือตะกอน กรองแล้วนำตัวกรอง

2.1.4 การเตรียมสารละลายตัวอย่างที่เป็นลบ

นำผงแป้งแห้งของสูตรที่ไม่มีไวน์ Cistanche ประมาณ 0.5 กรัม และเตรียมสารละลายตัวอย่างที่เป็นค่าลบตามวิธีการภายใต้ "2.1.3"

2.1.5 การทดสอบความจำเพาะ

ปิเปตสารละลายทดสอบ สารละลายอ้างอิง และสารละลายตัวอย่างที่เป็นลบตามลำดับอย่างแม่นยำ และวัดตามเงื่อนไขโครมาโตกราฟีภายใต้ "2.1.1" บันทึกโครมาโตกราฟี ผลลัพธ์แสดงไว้ในรูปที่ 1 ไม่มีการรบกวนกับตัวอย่างที่เป็นลบ ผลการวิจัยพบว่าวิธีนี้มีความจำเพาะที่ดี

รูปที่ 1 โครมาโตกราฟีเฉพาะของเม็ด Wenyang Tongbian

2.1.6 การตรวจสอบความสัมพันธ์เชิงเส้น

นำเอชินาโคไซด์ในปริมาณที่เหมาะสม ชั่งน้ำหนักอย่างแม่นยำถึง 10.11 มก. ใส่ลงในขวดวัดปริมาตรขนาด 25 มล. เติมเมทานอล 50% เพื่อเจือจางให้เป็นชุดความเข้มข้นของสารละลายอ้างอิง แล้วฉีดตามเงื่อนไขโครมาโทกราฟีภายใต้ "2.1 .1" เพื่อกำหนดค่าพื้นที่พีคของเอชินาโคไซด์ วาดเส้นโค้งมาตรฐาน โดยให้ปริมาณการฉีดของการอ้างอิงเอคินาโคไซด์เป็นแกนนอน (ug, X) และค่าปริพันธ์ของพื้นที่พีคเป็นแกนตั้ง (Y) และดำเนินการถดถอยเชิงเส้น

สมการการถดถอยคือ Y=1.294×104X - 4.931×104, r=0.9997 ผลการวิจัยพบว่าค่าอินทิกรัลพื้นที่พีคของปริมาณการฉีดเอชินาโคไซด์มีความสัมพันธ์เชิงเส้นที่ดีระหว่าง 1.4850 ถึง 371.2392 ไมโครกรัม

2.1.7 การทดสอบความแม่นยำ

ดูดสารละลายอ้างอิง 10 μL อย่างแม่นยำ (ความเข้มข้นของมวล 37.12 ug·mL- 1) ภายใต้ "2.1.6" ฉีด 6 ครั้ง บันทึกค่าพื้นที่สูงสุดของเอคินาโคไซด์ ตามลำดับ และคำนวณค่า RSD ให้เป็น 1.1% ซึ่งบ่งชี้ ว่าเครื่องมีความแม่นยำดี

2.1.8 การทดสอบความสามารถในการทำซ้ำ

นำส่วนผสมที่แห้งแบบเดียวกันมาบดเป็นผง ชั่งน้ำหนัก 6 ส่วนอย่างแม่นยำ โดยแต่ละส่วนมีน้ำหนักประมาณ 0.5 กรัม แล้วใส่ลงในขวดทรงกรวยสีน้ำตาล แยกตามวิธีการใน "2.1.3" กำหนดเนื้อหาและคำนวณ ผลลัพธ์แสดงให้เห็นว่าปริมาณเอชินาโคไซด์โดยเฉลี่ยในตัวอย่างคือ 1.46 มก.·ก.-1 และค่า RSD อยู่ที่ 2.7% ซึ่งบ่งชี้ว่าความสามารถในการทำซ้ำของวิธีนี้นั้นดี

2.1.9 การทดสอบความเสถียร

ใช้สารละลายตัวอย่างเดียวกัน วาด 10 μL อย่างแม่นยำ และฉีดภายใน 0, 2, 4, 8, 12, 18 และ 24 ชั่วโมงตามลำดับ ค่า RSD ของพื้นที่พีคคือ 0.71% ซึ่งบ่งชี้ว่าสารละลายตัวอย่างมีความคงตัวที่ดีภายใน 24 ชั่วโมง

2.1.10 การทดสอบการกู้คืนตัวอย่าง

ชั่งน้ำหนักตัวอย่างทดสอบชุดเดียวกันจำนวน 6 ส่วนอย่างแม่นยำ แต่ละส่วนมีขนาด 0.24 กรัม แล้วใส่ลงในขวดทรงกรวยสีน้ำตาล ตามอัตราส่วนมวล 1:1 ของส่วนประกอบในตัวอย่างทดสอบ ให้เติมสารอ้างอิงเอไคนาโคไซด์ 0.9 มล. อย่างถูกต้อง (ความเข้มข้นของมวลคือ 371.24 ug·mL-1) ใต้ "2.1.6" เตรียมสารละลายทดสอบตามวิธีใน "2.1.3" กำหนดพื้นที่พีคของโครมาโทกราฟีของเอไคนาโคไซด์ และคำนวณปริมาณ ผลลัพธ์แสดงให้เห็นว่าอัตราการฟื้นตัวเฉลี่ยของเอชินาโคไซด์คือ 101.09% และค่า RSD คือ 1.6%

2.2 แผนการทดลองและตัวชี้วัดการประเมินผล

เลือกปริมาณน้ำที่เติม (A) เวลาในการสกัด (B) และจำนวนการสกัด (D) เป็นปัจจัยที่จะตรวจสอบ ระดับปัจจัยสามระดับถูกกำหนดไว้ตามผลลัพธ์ของการตรวจสอบปัจจัยเดียวก่อนหน้านี้ ดูตารางที่ 1 ใช้ตารางทดสอบมุมฉาก L9 (34) ในการทดลอง ดูตารางที่ 2 การทดสอบใช้ผลผลิตของเพสต์และปริมาณของเอไคนาโคไซด์ เป็นตัวชี้วัดการประเมินผลเพื่อตรวจสอบกระบวนการสกัดน้ำที่เหมาะสมที่สุด

แท็บ 1 ปัจจัยและระดับของการทดสอบมุมฉาก

2.2.1 การทดสอบมุมฉาก

ตามอัตราส่วนใบสั่งยา ให้ชั่งน้ำหนัก 18 ส่วนของรสชาติยาแต่ละส่วน ซองละ 55 กรัม และทำการสกัดยาต้มน้ำตามรูปแบบการออกแบบมุมฉากในตารางที่ 2 แต่ละกลุ่มมี 2 ส่วนขนานกัน ยาต้มจะถูกกรองผ่านตะแกรง 80- ตะแกรง ส่วนผสมที่กรองจะถูกรวม ทำให้เย็น วัดปริมาตรยาต้ม ปิเปต 50 มล. ลงในจานระเหยอย่างแม่นยำ ซึ่งชั่งน้ำหนักคงที่ และระเหยจนแห้ง และทำให้แห้งภายใต้ความดันลดลงที่ 60 องศา เพื่อให้ได้ตัวอย่างแห้งวางตั้งฉาก คำนวณผลผลิตยาเม็ด (ผลผลิตยาเม็ด=(น้ำหนักยาเม็ดแห้ง × ปริมาตรยา) / (50 × น้ำหนักชิ้นยาต้ม) × 100%) ตามเงื่อนไขโครมาโตกราฟีภายใต้ "2.1.1" และวิธีการภายใต้ "2.1.3" หาปริมาณการสกัดเอไคนาโคไซด์ในสารสกัดทดสอบมุมฉากทั้ง 9 กลุ่มตามลำดับ ปริมาณการสกัดเอไคนาโคไซด์=น้ำหนักเพสต์แห้ง × ปริมาณเอไคนาโคไซด์ / น้ำหนักชิ้นยาต้มไวน์ คะแนนที่ครอบคลุม=เนื้อหาเอชินาโคไซด์ KW เนื้อหาสูงสุด × 0.5 × 100% + อัตราผลตอบแทนของการวาง ÷ อัตราผลตอบแทนของการวางสูงสุด × 0.5 × 100% [10] ผลลัพธ์แสดงไว้ในตารางที่ 2

ดังที่แสดงในตารางที่ 3 โดยนำคะแนนที่ครอบคลุมของผลผลิตแปะและเนื้อหาเอชินาโคไซด์เป็นตัวบ่งชี้การประเมิน ค่าช่วง R ในตารางแสดงให้เห็นว่าผลกระทบหลักและรองของแต่ละปัจจัยคือ D > B > A; ผลการวิเคราะห์ความแปรปรวนแสดงให้เห็นว่าปัจจัย D (เวลาในการต้ม) มีนัยสำคัญทางสถิติ (P < 0.05) และเลือกระดับ D3 แล้ว ปัจจัย A (การเติมน้ำ) และปัจจัย B (เวลาในการต้ม) ไม่มีนัยสำคัญทางสถิติ (P > 0.05) เมื่อพิจารณาว่าอัตราการดูดซึมน้ำของวัสดุยาในการเตรียมนี้ค่อนข้างสูง (155%) และเมื่อรวมกับปัจจัยต่างๆ เช่น ความต้องการในการผลิตจริง เงื่อนไขการสกัดที่เหมาะสมที่สุดจะถูกเลือกเป็น A2B1D3 กล่าวคือ เติมน้ำ 10 เท่า ต้มยา 3 ครั้ง ครั้งละ 1 ชั่วโมง