thภาษา
หน้าหลัก / ความรู้ / เนื้อหา

ความรู้

Part1: ปฏิกิริยาระหว่างกรดแอสคอร์บิก 5-กรดคาเฟอีนควินิก และเควอซิติน-3-รูติโนไซด์ในการมีอยู่และการขาดธาตุเหล็กในระหว่างกระบวนการทางความร้อนและอิทธิพลต่อกิจกรรมต้านอนุมูลอิสระ

Mar 15, 2022

ติดต่อสอบถามข้อมูลเพิ่มเติมtina.xiang@wecistanche.com

เชิงนามธรรม: สารออกฤทธิ์ทางชีวภาพในผักและผลไม้มีอิทธิพลต่อกันและกันสารต้านอนุมูลอิสระกิจกรรม. มาตรฐานบริสุทธิ์และส่วนผสมของสารประกอบพืชทั่วไป ได้แก่วิตามินซี, {{0}}กรด caffeoylquinic และเควอซิติน-3-รูติโนไซด์ (ผลรวม 0.3 มิลลิโมลาร์) ที่มีและไม่มีธาตุเหล็ก วิเคราะห์ก่อนและหลังการให้ความร้อนในสารละลายที่เป็นน้ำ ฤทธิ์ต้านอนุมูลอิสระวัดโดยปริมาณฟีนอลิกทั้งหมด (TPC), 1,1-ไดฟีนิล-2-พิคริลไฮดราซิล (DPPH) และ 2,2'-อะซิโน-บิส (3-เอทิลเบนโซไทอาโซลีน{{14} }กรดซัลโฟนิก) (TEAC) การหาปริมาณสารกำจัดอนุมูลอิสระ เหล็กเหล็กไอออนิก (Fe2 บวก )และเหล็กเฟอริก (Fe) ถูกวัดโดยโฟโตเมตริก สำหรับคุณสมบัติและการหาปริมาณของผลิตภัณฑ์ปฏิกิริยา ใช้ HPLC ผลการศึกษาพบว่าการแปรรูปด้วยความร้อนไม่จำเป็นต้องทำให้กิจกรรมต้านอนุมูลอิสระลดลง แม้ว่าความเข้มข้นของสารประกอบจะลดลง เนื่องจากผลิตภัณฑ์จากการย่อยสลายเองนั้นมีฤทธิ์ต้านอนุมูลอิสระ ในการทดสอบสารต้านอนุมูลอิสระทั้งหมด อัตราส่วน 2:1 ของกรดแอสคอร์บิกและกรดคาเฟอีนควินิก 5- เมื่อมีธาตุเหล็กมีผลเสริมฤทธิ์กันที่แข็งแกร่ง ในขณะที่อัตราส่วน 1:2 มีผลในการต่อต้านอย่างรุนแรง ธาตุเหล็กโปรออกซิแดนท์ส่งผลในทางบวกต่อกิจกรรมต้านอนุมูลอิสระร่วมกับสารต้านอนุมูลอิสระที่ใช้ ในขณะที่เหล็กเหล็กมีปฏิกิริยากับการทดสอบในหลอดทดลองทั่วไปสำหรับกิจกรรมต้านอนุมูลอิสระทั้งหมด ผลลัพธ์เหล่านี้บ่งชี้ว่าฤทธิ์ต้านอนุมูลอิสระของสารประกอบได้รับอิทธิพลจากปัจจัยต่างๆ เช่น อันตรกิริยากับโมเลกุลอื่นๆ อุณหภูมิ และแร่ธาตุที่มีอยู่

คีย์เวิร์ด: เอบีเอส; ความเป็นปรปักษ์กัน;กรดแอสคอร์บิก;สารประกอบออกฤทธิ์ทางชีวภาพ;5-กรดคาเฟโออิลควินิก; คอมเพล็กซ์คีเลต; เหล็กหล่อ; เหล็กเฟอริก HPLC; เควอซิทิน-3-การทำงานร่วมกันของรูติโนไซด์; TPC

คลิกที่นี่เพื่อรับข้อมูลเพิ่มเติม

flavonoids antioxidant

1. บทนำ

ในอาหารของมนุษย์ มีการบริโภคผลิตภัณฑ์จากพืชหลายชนิดตลอดทั้งวัน แม้ในมื้อเดียวกัน ผักและผลไม้เกี่ยวข้องกับประโยชน์ต่อสุขภาพหลายประการ เนื่องจากมีสารประกอบออกฤทธิ์ทางชีวภาพที่หลากหลาย เช่น วิตามิน แร่ธาตุ และสารเมแทบอลิซึมจากพืช |1] เมื่อเปรียบเทียบกับวิตามินและแร่ธาตุแล้ว ความรู้ในปัจจุบันนี้ไม่ถือว่าสารเมแทบอไลต์จากพืชรอง เช่น ฟีนอลิกส์[2] อย่างไรก็ตาม เมแทบอไลต์ทุติยภูมิจากพืชหลายชนิดเป็นสารต้านอนุมูลอิสระที่มีศักยภาพ ซึ่งช่วยปกป้องระบบชีวภาพจากสปีชีส์ออกซิเจนปฏิกิริยา (ROS) และสปีชีส์ไนโตรเจนปฏิกิริยา (RNS)[3] สารประกอบออกฤทธิ์ทางชีวภาพเหล่านี้สามารถโต้ตอบกันก่อนการบริโภค ส่งผลให้เกิดผลิตภัณฑ์หรือสารเชิงซ้อนจากปฏิกิริยาตามมามากมาย ดังนั้น การมีส่วนร่วมต่อสุขภาพของผู้บริโภคและฤทธิ์ต้านอนุมูลอิสระ (AOA) อาจเปลี่ยนแปลงได้ 4| หรือสูญเสียก่อนรับประทานอาหาร โครงสร้างโมเลกุลที่แตกต่างกันของสารประกอบและการผสมผสานที่หลากหลายสามารถนำไปสู่ผลกระทบเพิ่มเติม เสริมฤทธิ์กัน หรือแม้กระทั่งเป็นปฏิปักษ์ผ่านปฏิสัมพันธ์ ผลกระทบของปฏิกิริยาระหว่างส่วนประกอบพืชต่อความสามารถในการกำจัดอนุมูลอิสระยังไม่เป็นที่เข้าใจโดยสมบูรณ์ โดยเฉพาะอย่างยิ่งเนื่องจากระยะออกซิเดชันที่แตกต่างกันมากมายและความสามารถในการสร้างสารเชิงซ้อน สารประกอบออกฤทธิ์ทางชีวภาพที่สำคัญที่พบในพืชหลายชนิดคือ 5-กรด caffeoylquinic (กรดคลอโรจีนิก) กรดไฮดรอกซีซินนามิกเอสเทอร์ของกรดคาเฟอีนและกรดควินิก สามารถสร้างสารเชิงซ้อนของเหล็กเฟอริก ซึ่งโดยทั่วไปเกี่ยวข้องกับการดูดซึมธาตุเหล็กที่ไม่ใช่ฮีมในมนุษย์ที่ลดลง[5,6] ธาตุเหล็กเป็นส่วนประกอบของฮีโมโกลบิน เป็นแร่ธาตุที่จำเป็นต่อร่างกายมนุษย์ ในขณะที่ธาตุเหล็กที่มากเกินไปอาจทำให้เกิดความเครียดจากปฏิกิริยาออกซิเดชันในเซลล์ [7] ปฏิกิริยากับสารอาหารอื่นๆ สามารถเพิ่มหรือลดการดูดซึมธาตุเหล็กได้ เช่น โดยการสร้างสารเชิงซ้อน นอกจากนี้ เหล็กยังมีความสามารถในการรับและบริจาคอิเล็กตรอนได้อย่างง่ายดาย

สารออกฤทธิ์ทางชีวภาพที่น่าสนใจอีกชนิดในพืชคือเควอซิทิน-3-รูติโนไซด์(รูติน), aฟลาโวนอยด์ไกลโคไซด์ซึ่งส่วนใหญ่สังเคราะห์โดยพืชเพื่อป้องกันตัวเองจากรังสียูวี [8,9] มีความสามารถในการละลายน้ำได้ต่ำ [10] และไม่สามารถเข้าสู่กระแสเลือดของมนุษย์ได้โดยตรง ดังนั้นกิจกรรมออกฤทธิ์ทางชีวภาพจะไม่เริ่มจนกว่าการบริโภคจะผ่านไปหกถึงเก้าชั่วโมงหลังการบริโภคเมื่อผ่านไมโครไบโอมในลำไส้ ในผลิตภัณฑ์เสริมอาหาร เควอซิทิน-3-รูติโนไซด์มักใช้ร่วมกับกรดแอสคอร์บิก [11]วิตามินซีเป็นวิตามินที่จำเป็นต่อร่างกายมนุษย์และจำเป็นในกระบวนการเผาผลาญหลายอย่าง นอกจากนี้ยังเป็นสารต้านอนุมูลอิสระที่ละลายน้ำได้อย่างมีประสิทธิภาพ แต่ยังสามารถทำหน้าที่เป็นโปรออกซิแดนท์ได้ ซึ่งเป็นผลมาจากความสามารถในการลดธาตุเหล็กเฟอร์ริกผ่านการก่อตัวเชิงซ้อนของคีเลต ตามด้วยการเปลี่ยนแปลงของเหล็กเหล็กและแอสคอร์บิกเรดิคัล[12] เพิ่มการดูดซึมในร่างกายมนุษย์ของสารออกฤทธิ์ทางชีวภาพ quercetin-3-rutinoside, 5-กรด caffeoylquinic หรือธาตุเหล็กโดยการเพิ่มกรดแอสคอร์บิก [12] ในขณะที่ 5-กรด caffeoylquinic ลดการดูดซึมธาตุเหล็ก โดยความซับซ้อน [6]. ในการทำนายประโยชน์ต่อสุขภาพของผลิตภัณฑ์ต่างๆ เกี่ยวกับสารออกฤทธิ์ทางชีวภาพ มักใช้การทดสอบสารต้านอนุมูลอิสระในหลอดทดลอง การทำนายผลกระทบต่อสุขภาพนี้มีจำกัดเนื่องจากการดูดซึมของสารประกอบ การเผาผลาญ และกลไกการต้านอนุมูลอิสระที่แตกต่างกัน|13] อย่างไรก็ตาม การสอบวิเคราะห์เหล่านี้ยังคงมีประโยชน์ในการทดสอบสารประกอบออกฤทธิ์ทางชีวภาพ เช่น โพลีฟีนอล หรือในการศึกษานี้ เพื่อประเมิน AOA ของสารประกอบเดี่ยวและอันตรกิริยาของพวกมัน ผักและผลไม้ประกอบด้วยสารประกอบออกฤทธิ์ทางชีวภาพหลายชนิด ซึ่งสามารถสร้างสารเชิงซ้อนกับสารประกอบและโปรตีนอื่นๆ ที่สามารถโต้ตอบกับพวกมันได้ อันตรกิริยาเหล่านี้สามารถมีอิทธิพลต่อพฤติกรรมของสารประกอบและ AOA ที่เป็นผลลัพธ์ อย่างไรก็ตาม งานนี้มีวัตถุประสงค์เพื่อให้ความรู้ว่าสารประกอบออกฤทธิ์ทางชีวภาพมีปฏิสัมพันธ์ระหว่างกันอย่างไรและผลกระทบต่อ AOA ความแปลกใหม่ของการศึกษานี้คือปฏิกิริยาระหว่างสารประกอบฟีนอลิกทั่วไป ได้แก่ กรดแอสคอร์บิก 5-กรดคาเฟอีนิลควินิก เคอร์ซิติน-3-รูติโนไซด์ ระหว่างกันและการแปรรูปแร่เหล็กก่อนและหลังการให้ความร้อน ก่อนการศึกษานี้ ปัจจัยเหล่านี้ได้รับการประเมินแยกกัน ไม่ใช่ร่วมกัน มุ่งเน้นไปที่ AOA และความสามารถในการสร้างคอมเพล็กซ์ สมมติฐานคือ (1) กระบวนการทางความร้อนมีอิทธิพลต่อ AOA ในทางลบเนื่องจากการเสื่อมสภาพของสารต้านอนุมูลอิสระ (2) สารผสมในอัตราส่วนต่างๆ ของกรดแอสคอร์บิก 5-กรดคาเฟอีนควินิกและเควอซิทิน-3-รูติโนไซด์นำไปสู่การเสริมฤทธิ์กัน ผลต่อ AOA และ (3) การเติมแร่ธาตุและธาตุเหล็กโปรออกซิแดนท์จะลดฤทธิ์ต้านอนุมูลอิสระของสารต้านอนุมูลอิสระเพียงอย่างเดียวหรือในสารผสม

flavonoids clear free radicals

2. ผลลัพธ์

2.1.อิทธิพลของการประมวลผลทางความร้อนต่อฤทธิ์ต้านอนุมูลอิสระของกรดแอสคอร์บิก5-กรดคาเฟอีนควินิก และเคอร์ซิติน-3-มาตรฐาน Rutinoside และแร่เหล็ก

ในตัวอย่างบริสุทธิ์ของกรดแอสคอร์บิก 5-กรด caffeoylquinic หรือเควอซิทิน-3-รูติโนไซด์(รูปที่ 1) หรือส่วนผสมของพวกมัน (รูปที่ 2 และ 3) เป็นผลของเวลาการปรุงอาหารระหว่าง 0 ถึง 40 นาทีบน AOA ที่สังเกตพบ ยกเว้นในการรวมกันของกรดแอสคอร์บิกและธาตุเหล็ก AOA มีค่าต่ำกว่าในการทดสอบ TEAC และ DPPH หลังจากทำอาหาร 40 นาทีเมื่อเปรียบเทียบกับตัวอย่างที่ยังไม่ได้ปรุง (รูปที่ 1) ตัวอย่างที่มีกรดแอสคอร์บิกมีแนวโน้มที่จะลดลงใน AOA ในขณะที่ตัวอย่างที่มีเควอซิติน-3-รูติโนไซด์มีแนวโน้มที่จะเพิ่ม AOA ของพวกมันด้วยเวลาการปรุงอาหารที่ยาวนาน (รูปที่ 1-3)

Influence of cooking time (0, 10, 20, and 40 min) on ascorbic acid (AsA; yellow), 5-caffeoylquinic acid (CQA; red), quercetin-3-rutinoside (Rutin; blue) with (solid lines) and without (dashed lines) iron (Fe) on antioxidant activity (AOA); standard deviation not shown. All samples were tested using (a) TEAC, (b) DPPH, and (c) TPC assays. Significant differences (p ≤ 0.05 by Tukey's HSD test (n = 3)) with different cooking times of the same substance and between samples with and without iron are marked with an asterisk *. Differences to 0 min cooked samples of the same substance are marked with a triangle ▲. Letters indicate differences between the three substances as mean values over all measured times and are comparable to results of the same test assay in Figures 2 and 3. In binary mixtures, detected by the TEAC assay (Figure 2a–c), iron led to a significant or trending increase in AOA. Among samples without iron, no differences between AOA of mixtures or ratios were found. In the presence of iron at a cooking time of 0 min, the ratios 1:1 and 1:2 of ascorbic acid and 5-caffeylquinic acid, and a 2:1 ratio of the 5- caffeylquinic acid and queretin-3-rutinoside mixture, were higher in their AOA than their iron-free counterparts. In the DPPH assay (Figure 2d–f), the combination of ascorbic acid with 5-caffeoylquinic acid, as well as with quercetin-3-rutinoside, showed in the presence of iron in all ratios a higher AOA than the AOA of pure ascorbic acid. However, ascorbic acid combined with quercetin-3-rutinoside showed a higher AOA in the absence of iron, being comparable to pure quercetin-3-rutinoside. In the TPC assay (Figure 2g–i), the AOA of all three binary mixtures showed identical patterns. There was no influence of iron or cooking time on AOA. These results correspond with previous findings in pure substances (Figure 1): the lowest AOA was detected in ascorbic acid and 5-caffeoylquinic acid mixtures, followed by ascorbic acid with quercetin-3-rutinoside, and the highest AOA was found in the combination of 5-caffeoylquinic acid and quercetin-3-rutinoside. Figure 1. Influence of cooking time (0, 10, 20, and 40 min) on ascorbic acid (AsA; yellow), 5-caffeoylquinic acid (CQA; red), quercetin-3-rutinoside (Rutin; blue) with (solid lines) and without (dashed lines) iron (Fe) on antioxidant activity (AOA); standard deviation not shown. All samples were tested using (a) TEAC, (b) DPPH, and (c) TPC assays. Significant differences (p ≤ 0.05 by Tukey's HSD test (n = 3)) with different cooking times of the same substance and between samples with and without iron are marked with an asterisk *. Differences to 0 min cooked samples of the same substance are marked with a triangle N . Letters indicate differences between the three substances as mean values over all measured times and are comparable to results of the same test assay in Figures 2 and 3.

Influence of cooking time (0, 10, 20, and 40 min) on binary mixtures of ascorbic acid (AsA), 5-caffeoylquinic acid (CQA), quercetin-3-rutinoside (Rutin) with (solid lines) and without (dashed lines) iron (Fe) on antioxidant activity (AOA); standard deviation not shown. All samples tested using (a–c) TEAC, (d–f) DPPH, and (g–i) TPC assays. Colors indicate the different mixing ratios: equimolar mixtures are yellow, 1:2 ratios are red, and 2:1 ratios are blue. Significant differences (p ≤ 0.05 by Tukey's HSD test (n = 3)) within different cooking times of the same substance and between samples with and without iron are marked with an asterisk *. Differences to 0 min cooked samples of the same substance are marked with a triangle ▲. Letters indicate differences between substance mixtures and ratios as mean values over all measured times and are comparable to results of the same test assay in Figures 1 and 3. In all ternary mixtures, no differences between ratios, regardless of the presence of iron, in TEAC and DPPH assays were found (Figure 3a–f). Higher AOAs were found in the TEAC assay (Figure 3a–c) in the presence of iron. At 0 min cooking time the AOAs of the equimolar mixture and the 1:2:1 ratio of ascorbic acid, 5-caffeoylquinic acid, and quercetin-3-rutinoside were higher in the presence of iron. The DPPH assay revealed higher Figure 2. Influence of cooking time (0, 10, 20, and 40 min) on binary mixtures of ascorbic acid (AsA), 5-caffeoylquinic acid (CQA), quercetin-3-rutinoside (Rutin) with (solid lines) and without (dashed lines) iron (Fe) on antioxidant activity (AOA); standard deviation not shown. All samples tested using (a–c) TEAC, (d–f) DPPH, and (g–i) TPC assays. Colors indicate the different mixing ratios: equimolar mixtures are yellow, 1:2 ratios are red, and 2:1 ratios are blue. Significant differences (p ≤ 0.05 by Tukey's HSD test (n = 3)) within different cooking times of the same substance and between samples with and without iron are marked with an asterisk *. Letters indicate differences between substance mixtures and ratios as mean values over all measured times and are comparable to results of the same test assay in Figures 1 and 3.

2.2.อิทธิพลของธาตุเหล็กและส่วนผสมต่างๆ ของกรดแอสคอร์บิก 5-กรดคาเฟอีนควินิก และเคอร์ซิติน-3-มาตรฐานรูติโนไซด์ต่อฤทธิ์ต้านอนุมูลอิสระ

การวิเคราะห์ด้วยการทดสอบ TEAC (รูปที่ la) แสดงให้เห็นว่า AOA ของกรดแอสคอร์บิกบริสุทธิ์ต่ำกว่า AOA ของเควอซิติน{{0}}รูติโนไซด์ เมื่อมีธาตุเหล็ก AOA ของกรดแอสคอร์บิกยังต่ำกว่า AOA ของเควอซิติน-3-รูติโนไซด์และ5-กรดคาเฟโออิลควินิกด้วยซ้ำ การเติมธาตุเหล็กจะเพิ่ม AOA ของเควอซิทิน-3-รูติโนไซด์และกรดคาเฟอีนควินิก 5- ในช่วงเวลาทำอาหาร 0นาที เฉพาะ AOA ของกรดคาเฟอีนควินิก 5-เท่านั้นที่มีธาตุเหล็กสูงกว่าเมื่อมีและไม่มีธาตุเหล็ก การทดสอบ DPPH (รูปที่ 1b) ตรวจพบ AOA ที่สูงขึ้นของเควอซิติน-3-รูติโนไซด์ในกรณีที่ไม่มีธาตุเหล็กเมื่อเปรียบเทียบกับกรดคาเฟอีนควินิก 5- และกรดแอสคอร์บิก การปรากฏตัวของธาตุเหล็กทำให้ AOA เพิ่มขึ้นสำหรับ 5-กรด caffeoylquinic และ AOA ลดลงสำหรับตัวอย่าง quercetin-3-rutinoside ที่เวลาทำอาหาร 0 นาที เควอซิทิน-3-รูติโนไซด์จะสูงกว่าเมื่อไม่มีธาตุเหล็กเมื่อไม่มีธาตุเหล็ก เฉพาะในการทดสอบ TPC(รูปที่ lc) ธาตุเหล็กไม่ส่งผลต่อ AOA และลำดับของสารทั้งสามยังคงเหมือนเดิม

ในสารผสมไบนารีที่ตรวจพบโดยการทดสอบ TEAC (รูปที่ 2a-c) ธาตุเหล็กทำให้ AOA เพิ่มขึ้นอย่างมีนัยสำคัญหรือมีแนวโน้ม ในกลุ่มตัวอย่างที่ไม่มีธาตุเหล็ก ไม่พบความแตกต่างระหว่าง AOA ของของผสมหรืออัตราส่วน เมื่อมีธาตุเหล็กในเวลาทำอาหาร 0 นาที อัตราส่วน 1:1 และ 1:2 ของกรดแอสคอร์บิกและกรดคาเฟอีนควินิก 5- และอัตราส่วน 2:1 ของ {{10} }กรดคาเฟอีนิลควินิกและเควอซิติน-3-ส่วนผสมของรูติโนไซด์ใน AOA ของพวกมันสูงกว่าสารผสมที่ปราศจากธาตุเหล็ก ในการทดสอบ DPPH(รูปที่ 2d-f) การรวมกันของกรดแอสคอร์บิกกับ 5-กรด caffeoylquinic เช่นเดียวกับเควอซิทิน-3-รูติโนไซด์แสดงให้เห็นว่ามีธาตุเหล็กในทุกอัตราส่วน AOA ที่สูงกว่า AOA ของกรดแอสคอร์บิกบริสุทธิ์ อย่างไรก็ตาม กรดแอสคอร์บิกร่วมกับเควอซิทิน-3-รูติโนไซด์แสดง AOA ที่สูงกว่าในกรณีที่ไม่มีธาตุเหล็ก ซึ่งเทียบได้กับเควอซิตินบริสุทธิ์-3-รูติโนไซด์ ในการทดสอบ TPC (รูปที่ 2g-i) AOA ของสารผสมไบนารีทั้งสามแสดงรูปแบบที่เหมือนกัน ไม่มีอิทธิพลของธาตุเหล็กหรือเวลาในการปรุงอาหารต่อ AOA ผลลัพธ์เหล่านี้สอดคล้องกับการค้นพบก่อนหน้านี้ในสารบริสุทธิ์ (รูปที่ 1): ตรวจพบ AOA ต่ำสุดในกรดแอสคอร์บิกและ 5-ของผสมกรด caffeoylquinic ตามด้วยกรดแอสคอร์บิกกับเควอซิติน-3-รูติโนไซด์ และ AOA สูงสุดคือ พบในการรวมกันของ 5-กรด caffeoylquinic และ quercetin-3-rutinoside

ในสารผสมแบบไตรภาคทั้งหมด ไม่มีความแตกต่างระหว่างอัตราส่วน โดยไม่คำนึงถึงการมีธาตุเหล็กในการทดสอบ TEAC และ DPPH (รูปที่ 3a-f) พบ AOA ที่สูงขึ้นในการทดสอบ TEAC (รูปที่ 3a-c) ต่อหน้าเหล็ก ที่ 0เวลาทำอาหารขั้นต่ำ AOAs ของส่วนผสม Equimolar และอัตราส่วน 1:2:1 ของกรดแอสคอร์บิก5-กรดคาเฟอีนิลควินิกและเควอซิติน-3-รูติโนไซด์สูงกว่าเมื่อมีธาตุเหล็ก . การทดสอบ DPPH เผยให้เห็น AOA ที่สูงขึ้นในตัวอย่างที่มีธาตุเหล็กในอัตราส่วน 1:2:1 (รูปที่ 3e) ตามส่วนผสมแบบไบนารี การทดสอบ TPC ไม่ได้รับอิทธิพลจากธาตุเหล็กหรือโดยเวลาในการปรุงอาหาร (รูปที่ 3g-i) นอกจากนี้ ส่วนผสมที่เท่ากันทุกประการในกรณีที่ไม่มีธาตุเหล็กมี AOA ต่ำกว่าอัตราส่วน 1:2:2 ในของผสมที่ไม่เท่ากันกับสารประกอบที่เป็นสองเท่า อัตราส่วน 1:1:2 สูงขึ้นใน AOA เมื่อเทียบกับอัตราส่วน 2:1:1 (รูปที่ 3 ชั่วโมง) และในสารที่ไม่สมดุลที่มีสารประกอบเป็นสองเท่าสองตัว อัตราส่วน 1:2: อัตราส่วน 2 สูงกว่าใน AOA เมื่อเทียบกับอัตราส่วน 2:1:2 และ 2:2:1 (รูปที่ 3i) เมื่อมีและไม่มีธาตุเหล็ก

Influence of cooking time (0, 10, 20, and 40 min) on ternary mixtures of ascorbic acid (AsA), 5-caffeoylquinic acid (CQA), quercetin-3-rutinoside (Rutin) with (solid lines) and without (dashed lines) iron (Fe) on AOA; standard deviation not shown. All samples tested using (a–c) TEAC, (d–f) DPPH, and (g–i) TPC assays. Colors indicate different mixing ratios. Significant differences (p ≤ 0.05 by Tukey's HSD test (n = 3)) with different exposure times of the same substance and between samples with and without iron are marked with an asterisk *. Letters indicate differences between substance mixtures and ratios as mean values over all measured times and are comparable to results of the same test assay in Figures 1 and 2.

1flavonoids antioxidant

2.3. ผลเสริมฤทธิ์กันและเป็นปฏิปักษ์ของกิจกรรมต้านอนุมูลอิสระ

การทดสอบทั้งหมดแสดงให้เห็นผลกระทบจากการเสริมฤทธิ์กันและการเป็นปฏิปักษ์ที่อ่อนแอเป็นหลัก โดยมีปฏิกิริยาระหว่างกันต่ำกว่า 10 เปอร์เซ็นต์ (รูปที่ 4) น่าสังเกต ในบรรดาการทดสอบที่ใช้ทั้งหมด อัตราส่วน 2:1 ของกรดแอสคอร์บิกและกรดคาเฟอีนควินิก 5-เมื่อมีธาตุเหล็กมีผลเสริมฤทธิ์กันอย่างมาก ในขณะที่อัตราส่วน 1:2 ของกรดแอสคอร์บิกและคาเฟอีน 5-caffeoylquinic กรดมีฤทธิ์เป็นปฏิปักษ์อย่างรุนแรง ในการทดสอบ TPC ปรากฏการณ์เหล่านี้ยังปรากฏในสารผสมที่ไม่มีธาตุเหล็ก ในการสอบวิเคราะห์ DPPH ตรวจพบผลที่เป็นปฏิปักษ์อย่างแรงอีกในอัตราส่วนทั้งหมดของสารผสมแบบไบนารีโดยไม่มี 5-กรดคาเฟอีนิลควินิกและเควอซิติน-3-รูติโนไซด์(รูปที่ 4b) ที่มีธาตุเหล็ก สำหรับกรดแอสคอร์บิกแบบไตรภาค 5-กรดคาเฟอีนิลควินิกและเควอซิติน-3-ของผสมรูติโนไซด์ การทดสอบ TEAC แสดงผลที่เป็นปฏิปักษ์อย่างรุนแรงสำหรับอัตราส่วน 2:2:1 กับธาตุเหล็ก (รูปที่ 4a) ในส่วนผสมแบบไตรภาคที่มีธาตุเหล็ก การทดสอบ DPPH เผยให้เห็นผลกระทบที่เป็นปฏิปักษ์อย่างรุนแรงในตัวอย่างที่ปรุงแล้วในอัตราส่วน 1:2:1,1:1:2,2:1:1:1 และ 2:2:1 เช่นเดียวกับในของผสมที่ไม่มีธาตุเหล็ก ในอัตราส่วน 1:1:2, 1:2:2 และ 2:1:1 (รูปที่ 4b) การทดสอบ TPC แสดงผลการทำงานร่วมกันที่แข็งแกร่งในส่วนผสมที่ไม่มีธาตุเหล็กในอัตราส่วน 1:2:1 (รูปที่ 4c)

demostraction as the chart

2.4.เหล็กรวมและตรรกะ

เหล็กไอออนิกถูกเติมเป็นส่วนผสมที่เท่ากันของเหล็กเฟอริก 50 เปอร์เซ็นต์ (Fe3 บวก ) และเหล็กเฟอร์รัส 50 เปอร์เซ็นต์ (Fe2 บวก ) กับของผสมบริสุทธิ์ เลขฐานสอง และแบบไตรภาคีที่กล่าวไว้ข้างต้น ในตัวอย่างทั้งหมด อัตราส่วนของเหล็กเฟอริกจะเปลี่ยนไปเป็นเหล็กเฟอร์รัสเมื่อเทียบกับอัตราส่วนเท่ากันที่เพิ่มในตอนแรก เมื่อใดก็ตามที่มีกรดแอสคอร์บิกอยู่ในตัวอย่าง ธาตุเหล็กที่จับได้จะลดลงตามเวลาในการปรุงอาหารและหายไปหรือทำให้เสถียรในเวลาต่อมา (ตารางที่ 1) ความสัมพันธ์แบบเพียร์สันในข้อมูลการทดสอบ TEAC เผยให้เห็นความสัมพันธ์เชิงลบที่แข็งแกร่ง (-0.641,p น้อยกว่าหรือเท่ากับ 2.2*10-16) ระหว่าง AOA กับไอออนของเหล็ก และความสัมพันธ์เชิงบวกระหว่าง AOA และเหล็กเฟอริก (0.377,p<4.1*10-)over all="" samples.="" furthermore,="" the="" dpph="" assay="" showed="" a="" negative="" correlation="" (-0.429,p≤1.3*10-1l)="" between="" aoa="" and="" ferrous="" iron="" ions.="" meanwhile,="" aoa="" and="" ferric="" iron="" ions="" were="" only="" weakly=""><0.0006).in the="" tpcassay,="" aoa="" and="" ferrous="" iron="" ions="" were="" strongly="" negatively="" correlated="" (-0.772,="" p=""><2.2*10-16), and="" aoa="" and="" ferric="" iron="" ions="" were="" strongly="" positively="" correlated="" (0.685,=""><>

Measured ionic iron species, ferric iron (Fe3+) and ferrous iron (Fe2+), and calculated bound iron after mixing with ascorbic acid, 5-caffeoylquinic acid, and quercetin-3-rutinoside, and cooking for 0, 10, 20, and 40 min with equimolar concentrations of ferrous and ferric iron in percent; traces ≤ 5%

ในตัวอย่างกรดแอสคอร์บิกบริสุทธิ์ ตรวจพบเพียงร่องรอยของธาตุเหล็กเฟอริกโดยไม่คำนึงถึงเวลาในการปรุง นอกจากนี้ ปริมาณเหล็กเหล็กเพิ่มขึ้น ในขณะที่เหล็กที่ถูกผูกมัดลดลงในตัวอย่างกรดแอสคอร์บิกทั้งหมดหลังการปรุงอาหาร ใน 5-ตัวอย่างกรด caffeoylquinic เหล็กเฟอร์ริกลดลง 13.3 เปอร์เซ็นต์หลังจากผ่านกรรมวิธีทางความร้อน 40 นาที ในขณะเดียวกันเหล็กเฟอร์รัสก็เพิ่มขึ้นเล็กน้อย Quercetin-3-ตัวอย่างรูติโนไซด์ที่มีธาตุเหล็กทำให้ได้ปริมาณที่เกือบคงที่ เหล็กเหล็ก เหล็กที่ถูกผูกไว้เพิ่มขึ้นตามระยะเวลาในการหุงต้ม ในขณะที่เหล็กเฟอริกลดลง 20.49 เปอร์เซ็นต์ หลังจากทำอาหาร 40 นาที (ตารางที่ 1)

ในที่ที่มีกรดแอสคอร์บิก ตัวอย่างไบนารีที่ปรุงแล้ว 0 นาทีจะมีธาตุเหล็กที่จับได้ระหว่าง 18.9 เปอร์เซ็นต์ ถึง 28.9 เปอร์เซ็นต์ ซึ่งหลุดออกจากการปรุงอาหาร พบธาตุเหล็กที่ถูกผูกไว้ในสารผสมไบนารีหลังจากปรุงอาหาร 20 และ 40 นาทีเฉพาะเมื่อไม่มีกรดแอสคอร์บิก ส่วนผสมของแอสคอร์บิกแอซิดและ 5-กรดคาเฟโออิลควินิกมีธาตุเหล็กในปริมาณที่สูงกว่าการผสมของกรดแอสคอร์บิกและเควอซิติน-3-รูติโนไซด์ การรวมกันของ 5-กรด caffeoylquinic และ quercetin-3-rutinoside ในอัตราส่วนทั้งหมดแสดงรูปแบบที่คล้ายคลึงกัน เหล็กเหล็กเพิ่มขึ้นเล็กน้อย และเหล็กเฟอร์ริกลดลงเมื่อปรุงอาหารเป็นเวลานาน พบธาตุเหล็กในส่วนผสมนี้หลังจากทำอาหาร 20 และ 40 นาที (ตารางที่ 2)

Measured ionic iron species, ferric iron (Fe3+) and ferrous iron (Fe2+), and calculated bound iron after mixing with the double standard mixtures of ascorbic acid (AsA), 5-caffeoylquinic (CQA), and quercetin-3-rutinoside (Rutin), and cooking for 0, 10, 20, and 40 min with equimolar concentrations of ferrous and ferric iron in percent; traces ≤ 5%.

ในสารผสมแบบไตรภาค ปริมาณของเหล็กที่เป็นเหล็กสูงกว่า และปริมาณของเหล็กเฟอริกก็ต่ำกว่า ความเข้มข้นของธาตุเหล็กเท่ากันทุกประการในตอนแรก ปริมาณธาตุเหล็กสูงสุดโดยรวมพบในตัวอย่างเมื่อความเข้มข้นของกรดแอสคอร์บิกเพิ่มขึ้นเป็นสองเท่า (อัตราส่วน 2:1:1, 2:1:1, 2:2:1) กระบวนการทำอาหารเพิ่มปริมาณของเหล็กและเหล็กเฟอร์ริก ในขณะที่เหล็กที่ถูกผูกไว้ลดลง (ตารางที่ 3)

Measured ionic iron species, ferric iron (Fe3+) and ferrous iron (Fe2+), and calculated bound iron after mixing with the ternary standard mixtures of ascorbic acid (AsA), 5-caffeoylquinic (CQA), and quercetin-3-rutinoside (Rutin), and cooking for 0, 10, 20, and 40 min with equimolar concentrations of ferrous and ferric iron in percent; traces ≤ 5 %

2.5.การวิเคราะห์เชิงคุณภาพและเชิงปริมาณของสารผสมโดย HPLC

ข้อมูล HPLC แสดงให้เห็นว่าในตัวอย่างที่ปรุงสุกทั้งหมด 0 นาที ทั้งที่มีและไม่มีธาตุเหล็ก มีเพียงสารที่ใส่ในขั้นต้นของกรดแอสคอร์บิก 5-กรดคาเฟอีนควินิก และเควอซิติน-3-รูติโนไซด์เท่านั้นที่มีอยู่ (ไม่แสดงข้อมูล) หลังจากปรุงเป็นเวลา 40 นาที พีคเพิ่มเติมอีก 2 พี (พีค 3 และ 4) ได้มาจากกรดแอสคอร์บิก โดยไม่คำนึงถึงการมีธาตุเหล็ก (รูปที่ 5) เมื่อมีธาตุเหล็ก ผลิตภัณฑ์ใหม่สองผลิตภัณฑ์ของกรดคาเฟอีนควินิก 5- (พีค) 6 และ 7) และอีกตัวหนึ่งจากเควอซิทิน-3-รูติโนไซด์ (พีค 8) ถูกตรวจพบ (รูปที่ 5b)

ในกรณีที่ไม่มีธาตุเหล็ก ความเข้มข้นของกรดแอสคอร์บิกลดลงในสารผสมทั้งหมดในความสัมพันธ์ในการตอบสนองต่อขนาดยาจากความเข้มข้นเริ่มต้นที่ 0.3 มิลลิโมลาร์หลังจากทำอาหารเป็นเวลา 40 นาทีเป็น 26.79 เปอร์เซ็นต์ของความเข้มข้นเริ่มต้นและ ด้วยค่าเริ่มต้น 0.2 mM ระหว่าง 44.08 เปอร์เซ็นต์ และ 51.67 เปอร์เซ็นต์ โดยค่าเริ่มต้น 0.15 mM ระหว่าง 60.49 เปอร์เซ็นต์ ถึง 65.47 เปอร์เซ็นต์ โดยมีค่าเริ่มต้น 0.1 mM 77.84 เปอร์เซ็นต์ และ 86.41 เปอร์เซ็นต์และเพิ่มขึ้นถึง 90.05 เปอร์เซ็นต์โดยมีค่าเริ่มต้น 0.06 mM (ตาราง S1)

เมื่อมีธาตุเหล็ก เฉพาะในตัวอย่างกรดแอสคอร์บิกบริสุทธิ์ ความเข้มข้นลดลงหลังการปรุงอาหาร 40 นาที ซึ่งสูงกว่าตัวอย่างกรดแอสคอร์บิกที่ไม่มีธาตุเหล็ก (ตารางที่ S1) ตรงกันข้ามกับตัวอย่างกรดแอสคอร์บิกที่ไม่มีธาตุเหล็ก ความเข้มข้นของกรดแอสคอร์บิกที่สูงขึ้นทำให้อัตราส่วนการย่อยสลายสูงขึ้น (ตารางที่ S1) ในสารผสมไบนารีทั้งหมด ความเข้มข้นของกรดแอสคอร์บิกเท่านั้นที่ลดลงในตัวอย่างที่ปรุงสุก 0 นาที หลังจากทำอาหาร 40 นาที พบ 5-กรด caffeoylquinic หรือ quercetin-3-rutinoside ลดลงเมื่อรวมกับกรดแอสคอร์บิก สารทั้งสองลดความเข้มข้นของกรดแอสคอร์บิกที่ลดลง ความเข้มข้นของกรด caffeoylquinic ที่สูงขึ้น 5- นำไปสู่การลดการสลายตัวของกรดแอสคอร์บิกให้น้อยที่สุด ในส่วนผสมแบบไบนารีของ 5-กรด caffeoylquinic และ quercetin-3-rutinoside, 5-กรด caffeoylquinic ลดลงในขณะที่ความเข้มข้นของ quercetin-3-rutinoside คงที่หลังจากทำอาหาร 40 นาที ในส่วนผสมแบบสามส่วน เควอซิทิน-3-รูติโนไซด์จะคงตัวหลังจากปรุงอาหาร 40 นาที ในขณะที่ความเข้มข้นของกรดแอสคอร์บิกและ 5-กรดคาเฟอีนควินิกลดลง

HPLC-DAD chromatograms of the 1:1:1 ratio of ascorbic acid, 5-caffeoylquinic acid, and quercetin-3-rutinoside (a) after 40 min cooking in the absence of iron, and (b) after 40 min cooking in the presence of iron. 1: ascorbic acid, 2: insert peak, 3: ascorbic acid derivate, 4: ascorbic acid derivate, 5: 5-caffeoylquinic acid, 6: caffeic acid; 7: 5-caffeoylquinic acid derivate, 8: quercetin-3-rutinoside derivate, 9: quercetin-3-rutinoside, 10: impurity of the quercetin-3-rutinoside standard

Cistanche extract

สำหรับข้อมูลเพิ่มเติม คลิกลิงค์ด้านล่างสำหรับส่วนที่ 2:
https://www.xjcistanche.com/news/part2-interactions-of-ascorbic-acid-5-caffeo-54918073.html


คุณอาจชอบ