ส่วนที่ 2: เภสัชวิทยาเครือข่ายแบบบูรณาการและแบบจำลองม้าลายเพื่อตรวจสอบองค์ประกอบสองผลกระทบของ Cistanche Tubulosa สำหรับการรักษาทั้งโรคกระดูกพรุนและโรคอัลไซเมอร์

ติดต่อ:joanna.jia@wecistanche.com/ WhatsApp: 008618081934791

คลิกที่นี่เพื่อดูส่วนที่ 1

3. ผลลัพธ์

3.1 สารประกอบผู้สมัครและ Poเป้าหมายหลัก

ในการวิจัยองค์ประกอบทางเคมีของ CT ได้รวบรวมส่วนผสมทั้งหมด 75 รายการจาก TCMSP จากนั้นทำ PCA เพื่อแสดงภาพการกระจายทางเคมีของ CT ดังที่แสดงในรูปที่ 1 ส่วนผสมของ CT มีความหลากหลายในด้านเคมี และ 28 ในนั้นพอใจกฎของ Lipinski ที่ 5 (Lipinski, 2003) ที่น่าสนใจคือมีหลายส่วนที่ทับซ้อนกันระหว่างส่วนผสมของ CT และยาโมเลกุลขนาดเล็กที่อนุมัติสำหรับ OP/AD มันแสดงให้เห็นว่าสารประกอบจำนวนมากใน CT มีศักยภาพในการใช้ยาได้บน OP/AD เพื่อประเมินความสามารถในการให้ยาของพวกมันเพิ่มเติม สารประกอบ 43 ชนิดถูกคัดกรองโดย DL หลังจากการทำนายเป้าหมาย สารประกอบที่เป็นตัวเลือก 26 ตัวถูกเลือกสำหรับการวิเคราะห์ที่ตามมา และสามารถเชื่อมต่อกับโปรตีนเป้าหมายได้ทั้งหมด 847 ชนิด

Cistanche has anti-Alzheimer's disease effect.

cistamcheมีฤทธิ์ต้านโรคอัลไซเมอร์

รายการยีนที่เกี่ยวข้องกับ OP หรือ AD ถูกรวบรวมจากฐานข้อมูล DisGeNET และ GeneCards เป็นผลให้มีการรวบรวมรายการยีน 3052 และ 8042 ตามลำดับ เราใช้คะแนนสองคะแนนจากฐานข้อมูล DisGeNET และ GeneCards เป็นคะแนนการประเมิน โดยคัดกรองเป้าหมายที่ห้าอันดับแรก อัตราส่วนหนึ่งในห้าถูกกำหนดโดยการทดลองก่อน จากนั้นเป้าหมายทั่วไปของ OP-ED จำนวน 211 รายการได้รับการเก็บรักษาไว้เพื่อให้ตรงกับเป้าหมายของสารประกอบที่เป็นตัวเลือก 26 รายการ สุดท้าย เป้าหมายของโปรตีนทั้งหมด 81 เป้าหมาย (ตารางเสริม S2) ที่เชื่อมต่อกับสารประกอบที่เลือกได้ 22 ชนิด (ตารางเสริม S3) ถูกเลือกสำหรับกลไกระดับโมเลกุลของการวิเคราะห์การกระทำ ซึ่งสร้างเครือข่ายปฏิสัมพันธ์ระหว่างโปรตีนกับโปรตีน (PPI) ที่แสดงในรูปที่ 2

สารประกอบ 22 ชนิดถูกแบ่งออกเป็น 11 ประเภท: 5 ฟีนิลทานอยด์ไกลโคไซด์ (PhGs) (ดีแคฟเฟออยด์แลคติโอไซด์, ซิสตาโนไซด์อี ฯลฯ ), 3 ฟีนิลแลคริลโอลิโกแซคคาไรด์ (ซิสตาโนไซด์ เอช, ซิสตาโนไซด์ เอฟ เป็นต้น), 3 อิริดอยด์ และไอริดอยด์ ไกลโคไซด์ เจ็นซิโพซิออนไรด์ เป็นต้น), ลิกแนน 3 ตัวและลิกแนน ไกลโคไซด์ (ยังกัมบิน, ( บวก )-ปิโนเรซินอล-O- -ดี-กลูโคปาราโนไซด์ เป็นต้น), 2 ฟลาโวนอยด์ (เควอซิทิน, เจนิสไตน์), 1 อัลคาลอยด์, 1 เทอร์ปีน, 1 สเตอรอล, 1 แอลกอฮอล์ไขมัน 1 กรดไขมันและอื่น ๆ ตามรายงานก่อนหน้านี้ สารประกอบเหล่านี้เป็นส่วนประกอบหลักหรือสารออกฤทธิ์ที่ออกฤทธิ์ของ CT (Fu et al., 2018)

ในรูปที่ 2 พบว่าเป้าหมายทั่วไปทั้งหมด 81 รายการมีความสัมพันธ์กับ OP และ AD ระดับของ PPI ถูกนำมาใช้เป็นพารามิเตอร์ลักษณะเฉพาะเพื่อกำหนดความสำคัญของเป้าหมายที่เป็นไปได้ โปรตีนเป้าหมายสมมุติ 5 อันดับแรกที่เกี่ยวข้องกับ OP และ AD ได้แก่ อัลบูมิน (ALB), อินซูลิน (INS), อินเตอร์ลิวคิน 6 (IL6), TNF-alpha (TNF) และปัจจัยการเจริญเติบโตของผิวหนัง (EGF)

Figure 1. Chemical distribution based on principal component analysis (PCA).

รูปที่ 1.การกระจายสารเคมีตามการวิเคราะห์องค์ประกอบหลัก (PCA)

Figure 2. The number of CT, OP and AD targets prediction and the Compound-Target network of CT.

รูปที่ 2จำนวนการทำนายเป้าหมาย CT, OP และ AD และ Compound-Targetเครือข่าย คสช.

3.2 การวิเคราะห์เครือข่ายแบบบูรณาการและจำแนกประเภท

81 โปรตีนเป้าหมายสมมุติในตาราง S2 ถูกเลือกเพื่อเริ่มต้นการวิเคราะห์การเพิ่มสมรรถนะของวิถี GO และ KEGG หลังจากการกรองด้วย p-value (การตัด GO ที่น้อยกว่าหรือเท่ากับ 005, KEGG pathway cut-off ที่น้อยกว่าหรือเท่ากับ 0.01), เงื่อนไข GO 15 ข้อและ 66 KEGG เงื่อนไขวิถีถูกส่งกลับดังแสดงในรูปที่ 3 และ 4 มีคำศัพท์ GO ทั้งหมด 16 คำรวมอยู่ด้วย: 5 สำหรับการทำงานของโมเลกุล 5 สำหรับกระบวนการทางชีววิทยาและ 6 สำหรับส่วนประกอบเซลล์ เนื่องจากการศึกษานี้มีวัตถุประสงค์เพื่อค้นหาการเกิดโรคทั่วไปที่อาจเกิดขึ้นของ OP และ AD เราจึงลบเงื่อนไขทางเดินที่เกี่ยวข้องโดยตรงกับโรคอื่นๆ และจำแนกส่วนที่เหลือออกเป็นหมวดหมู่การทำงานที่แตกต่างกัน แนะนำว่าส่วนผสมออกฤทธิ์ 22 อย่างของ CT อาจควบคุมเส้นทางทั้งหมด 66 ทาง ซึ่งส่วนใหญ่สัมพันธ์กับการส่งสัญญาณ ระบบต่อมไร้ท่อ ระบบภูมิคุ้มกัน การเติบโตของเซลล์ และความตาย เพื่อมีบทบาทในการเผชิญหน้ากับ OP และ AD

เพื่อแสดงความแตกต่างในการกระทำของสารประกอบประเภทต่างๆ เครือข่าย PPI ที่สร้างขึ้นในรูปที่ 2 ถูกวิเคราะห์ตามหมวดหมู่ในตารางที่ S3 รูปที่ 5 แสดงให้เห็นว่า 5 PhGs, 2 flavonoids, 1 terpene และ 1 sterol โดยเฉพาะอย่างยิ่ง flavonoids อาจมีความสำคัญมากกว่าส่วนผสมอื่น ๆ ของ CT เทียบกับ OP และ AD หลังจากนั้น สารประกอบออกฤทธิ์ทั้ง 4 ชุดนี้ได้รับเลือกให้เปิดเผยวิถีการบีบอัดของพวกมัน ดังที่เห็นได้จากรูปที่ 6 PhGs, flavonoids, terpene และ sterol ทำงานร่วมกันหรืออยู่คนเดียวใน 27 เส้นทาง ซึ่งประกอบด้วย 11 โมดูล: การเจริญเติบโตและความตายของเซลล์ ระบบต่อมไร้ท่อ ระบบภูมิคุ้มกัน การส่งสัญญาณ การพัฒนา และอื่นๆ ผลการวิจัยชี้ให้เห็นว่าสารประกอบเหล่านี้อาจมีบทบาทเสริมฤทธิ์กันในผลบวกของ CT ต่อ OP และ AD เป็นที่น่าสังเกตว่าผลการป้องกันของ PhGs อาจมีความโดดเด่นมากกว่าฟลาโวนอยด์ในโรคเกี่ยวกับระบบประสาท เนื่องจาก PhGs มีปฏิสัมพันธ์โดยตรงกับวิถีของโรคอัลไซเมอร์ ในขณะที่ฟลาโวนอยด์เกี่ยวข้องกับโมเลกุลส่งสัญญาณและปฏิสัมพันธ์ มีเพียงสเตอรอลและเทอพีนเท่านั้นที่เกี่ยวข้องกับการเผาผลาญไขมันและระบบขับถ่าย นอกจากนี้ PhGs, terpene และ flavonoids ยังแสดงให้เห็นความสัมพันธ์ที่อาจเกิดขึ้นกับโรคต่อมไร้ท่อและเมตาบอลิซึม

จากภาพประกอบของ PPI มีการใช้สารฟลาโวนอยด์ 2 ชนิด (GE, QU), เทอร์พีน 1 ชนิด (AA) และ 1 สเตอรอล (BSS) เป็นสารประกอบที่มีคุณค่าสำหรับการวิจัยเพิ่มเติมเกี่ยวกับกลไกระดับโมเลกุล ที่น่าสนใจ เราพบว่าพวกมันทั้งหมดสัมพันธ์กับเส้นทางการส่งสัญญาณ MAPK และเส้นทางการส่งสัญญาณ TGF-beta และค่า p ของทั้งสองวิถีก็สูงขึ้นเช่นกัน เป้าหมายสมมุติของสารประกอบที่มีค่า 4 ชนิดและการกระจายของโปรตีนที่ได้รับผลกระทบในสองวิถีทางถูกแสดงไว้ในรูปที่ 7

Figure 3. Level2 GO terms enrichment analysis (Molecular Function, Biological Process, Cellular Component).

รูปที่ 3การวิเคราะห์การเพิ่มคุณค่าเงื่อนไขระดับ 2 GO (ฟังก์ชันโมเลกุล กระบวนการทางชีวภาพส่วนประกอบเซลลูล่าร์)

3.3 การตรวจสอบประสิทธิภาพของสารประกอบที่มีค่า

ในการวิเคราะห์เครือข่ายนี้ซึ่งกำหนดขึ้นใน 3.2 เราได้รวบรวมสารประกอบที่มีค่า 4 ชนิดสำหรับการตรวจสอบกิจกรรมทางเภสัชวิทยา โดยวิธีการวิเคราะห์เชิงทอพอโลยีในการศึกษานี้ เราพบว่าเจนิสไตน์ (GE, C9, DL=0.21), เควอซิทิน (QU, C11, DL=0.28), กรดอะบีติก (AA, C19, DL=0.28) และ -ซิโทสเตอรอล (BSS, C20, DL=0.21) แสดงการโต้ตอบที่เป็นไปได้ต่อการต่อต้าน OP และ AD ในส่วนนี้ ตัวอ่อนของ zebrafish ใน vivo ที่เหนี่ยวนำโดย Pre หรือ AlCl3 ถูกสร้างขึ้นตามลำดับเพื่อประเมินผลการป้องกันของสารประกอบ 4 ตัวต่อ OP และ AD

3.3.1. ผลของสารประกอบ 4 ชนิดต่อ OP

เพื่อตรวจสอบว่าสารประกอบ 4 ชนิดมีผลป้องกัน OP หรือไม่ Pre ถูกใช้เพื่อสร้างแบบจำลอง OP zebrafish การพัฒนาเซลล์สร้างกระดูกได้รับการตรวจสอบครั้งแรกโดยการย้อมด้วยสีแดงของ alizarin เพื่อตรวจสอบผลกระทบโดยตรงของสารประกอบ 4 อย่างต่อการสร้างกระดูก เมื่อเทียบกับปลาม้าลายกลุ่มควบคุม เห็นได้ชัดว่า Pre ทำให้เกิดการเปลี่ยนแปลงในสัณฐานวิทยาของกระดูกและความหนาแน่นของกระดูกของกะโหลกม้าลายในกลุ่มแบบจำลอง (รูปที่ 8) การลดลงของพื้นที่การย้อมสีและ IOD ในกลุ่ม Pre และแนวโน้มตรงกันข้ามในกลุ่ม Ed ยังแสดงให้เห็นความสำเร็จของแบบจำลอง OP ด้วย ยิ่งไปกว่านั้น พื้นที่การย้อมสีและ IOD ของกะโหลกม้าลาย 2 IOD ในกลุ่ม BSS/GE/QU/AA เพิ่มขึ้นอย่างมีนัยสำคัญเมื่อเทียบกับกลุ่มแบบจำลอง (รูปที่ 9) เครื่องหมายทั่วไปของการก่อตัวและการสลายของกระดูก เช่น ALP และ TRAP ได้รับการทดสอบเพื่อประเมินผลการต่อต้านโรคกระดูกพรุนของสารประกอบ 4 ชนิดเพิ่มเติม ดังแสดงในรูปที่ 10 Pre ลดกิจกรรม ALP ลงอย่างมีนัยสำคัญและเพิ่มกิจกรรม TRAP ในทางตรงกันข้ามกับกลุ่มควบคุม ในทางกลับกัน สารประกอบ Ed และ 4 แสดงให้เห็นแนวโน้มตรงกันข้ามกับกลุ่ม Pre ในกิจกรรม ALP และ TRAP ของปลาม้าลายอย่างมีนัยสำคัญ ผลลัพธ์เหล่านี้รวมกันยืนยันว่า BSS, QU, GE และ AA อาจมีบทบาทเชิงบวกในการสร้างกระดูกในปลาม้าลาย OP ที่เหนี่ยวนำล่วงหน้า

Figure 4. KEGG pathway enrichment analysis.

รูปที่ 4การวิเคราะห์การเพิ่มคุณค่าเส้นทางของ KEGG

3.3.2. ผลของสารประกอบ 4 ชนิดต่อ AD

เพื่อประเมินผลการป้องกันต่อ AD ของสารประกอบ 4 ชนิด แบบจำลอง AD zebrafish ที่เหนี่ยวนำโดย AlCl3-ที่รู้จักเป็นอย่างดีได้ถูกนำมาใช้ สำหรับโมเดล AD dyskinesia นี้ เครื่องวิเคราะห์พฤติกรรมถูกใช้เพื่อติดตามการเคลื่อนไหวของปลาม้าลาย ดังที่แสดงไว้ในรูปที่ 11 AS ของกลุ่ม AlCl3 ต่ำกว่ากลุ่มควบคุมอย่างมีนัยสำคัญ ในขณะที่สำหรับ DPZ และสารประกอบทั้งหมด 4 AS นั้นอยู่ใกล้กับกลุ่มควบคุม DRR และ RE ถูกแสดงไว้ในตาราง S4 ผลการศึกษาพบว่าความเข้มข้นที่แตกต่างกันของ GE, BSS, QU และ AA เพิ่ม DRR ขึ้น 2.37-37.64 เปอร์เซ็นต์ , 60.18-103.92 เปอร์เซ็นต์ , 70{{14 }}.61 เปอร์เซ็นต์ , 2.37-42.64 เปอร์เซ็นต์ ตามลำดับโดยมีนัยสำคัญบางส่วน (p-value < 0.001-0.01)="" ∆ss="" ในกลุ่มควบคุม="" กลุ่ม="" alcl3="" และกลุ่ม="" dpz="" สนับสนุนเพิ่มเติมว่าการสร้างแบบจำลอง="" ad="" ประสบความสำเร็จ="" re="" สำหรับ="" ge,="" bss,="" qu="" และ="" aa="" คือ="" 13.12-50.45="" เปอร์เซ็นต์="" ,="" 11.41-63.09="" เปอร์เซ็นต์="" ,="" 1.63-66.89="" เปอร์เซ็นต์="" ,="" 13.{{34}="" }.09="" เปอร์เซ็นต์="" ตามลำดับ="" ผลลัพธ์เหล่านี้มีความแตกต่างอย่างมีนัยสำคัญแสดงให้เห็นว่า="" ge,="" bss,="" qu="" และ="" aa="" สามารถปรับปรุงดายสกินของปลาม้าลายได้ในระดับหนึ่ง="" การกำหนดกิจกรรมของเครื่องหมายการนำกระแสประสาท="" (ache="" และ="" chat)="" ในกลุ่มแสดงในรูปที่="" 12="" alcl3="" เพิ่มกิจกรรม="" ache="" อย่างมีนัยสำคัญและลดกิจกรรม="" chat="" เมื่อเทียบกับกลุ่มควบคุม="" แต่สารประกอบ="" dpz="" และ="" 4="" แสดงความสามารถในการกู้คืนการเปลี่ยนแปลงที่เกิดจาก="" alcl3="" ในกิจกรรม="" ache="" และ="" chat="" บางส่วน="" สอดคล้องกับผลการประเมินผลการฟื้นฟูสมรรถภาพดายสกิน="" โดยสรุป="" ge,="" bss,="" qu="" และ="" aa="" อาจมีศักยภาพที่จะกลายเป็นสารต่อต้าน="" ad="">

Figure 5. Illustration of Compound-Target network.

รูปที่ 5ภาพประกอบของเครือข่าย Compound-Target

3.4 การตรวจสอบเป้าหมายสมมุติฐาน

เพื่อตรวจสอบเป้าหมายสมมุติที่คาดการณ์ไว้ในงานนี้ เป้าหมายที่เกี่ยวข้องกับเส้นทางการส่งสัญญาณ MAPK และ TGF-beta ถูกเลือกสำหรับการวิเคราะห์ qRT-PCR ระดับการแสดงออกของ mRNA สัมพัทธ์ในแบบจำลอง OP แสดงไว้ในรูปที่ 13 เมื่อเปรียบเทียบกับกลุ่ม Pre GE เพิ่มระดับของ mapk14a, fgfr1b, tgfb1, bmp2 และลดระดับ tp53, TNF- , jun, tgfbr1 และ c-fos . QU เพิ่มระดับของ mapk14a, fgfr1b, tgfb1, bmp2 และลดระดับของ tp53, jun และ il1b BSS แสดงผลการลดลงใน tp53, TNF- และ mapk3 เท่านั้น ดังแสดงในรูปที่ 14 ในแบบจำลอง AD GE, QU, BSS และ AA ลดระดับการแสดงออกของ mRNA ของ tp53 GE และ QU ทั้งสองลดระดับของ TNF- , bmp2, tgfbr1, sp1, tgfb2 และ ifn และเพิ่มระดับของ jun ในขณะที่ GE และ AA เพิ่มระดับของ mapk3 มีเพียง GE เท่านั้นที่ดูเหมือนจะย้อนกลับการเพิ่มขึ้นของ mapk14a, fgfr1b, fgfr1a และ igf1ra นอกจากนี้ QU ยังลดระดับ il1b และ EGF ที่สูงอีกด้วย ระดับการแสดงออกของ mRNA สัมพัทธ์ของยีน ซึ่งรวมถึง tp53, TNF- , mapk14a, mapk3, fgfr1b, bmp2, jun, il1b และ tgfbr1 เปลี่ยนแปลงอย่างมีนัยสำคัญเมื่อเทียบกับกลุ่มควบคุมในแต่ละรุ่น ผลลัพธ์เหล่านี้ชี้ให้เห็นว่าอาจเป็นตัวเชื่อมระหว่างโรคทั้งสอง นอกจากนี้ ผลลัพธ์เหล่านี้ยังชี้ให้เห็นถึงความเป็นไปได้ของผลเสริมฤทธิ์กันของสารประกอบ 4 ชนิด

Figure 6. Illustration of KEGG pathway enrichment analysis.

รูปที่ 6ภาพประกอบของการวิเคราะห์การเพิ่มประสิทธิภาพของเส้นทาง KEGG

4. การอภิปราย

OP และ AD เป็นโรคทางคลินิกที่พบบ่อยที่สุดที่เกี่ยวข้องกับอายุ กลไกทางพยาธิสรีรวิทยาที่ซับซ้อนของพวกเขาได้จำกัดการรักษาโรคสองโรคอย่างมีประสิทธิภาพมานานหลายปี ปัจจัยเสี่ยงของ OP และ AD แสดงให้เห็นว่ากลุ่มที่อ่อนแอของทั้งสองโรคมีความคล้ายคลึงกันบางส่วน เช่น สตรีสูงอายุ (Abraham et al., 2013; Patel, 2017), ผู้ป่วยโรคเบาหวาน (Vieira et al., 2018; Xia et al., 2012) ผู้สูบบุหรี่ระยะยาว (Franic and Verdenik, 2018; Zhong et al., 2015) และบุคคลที่ไม่เคลื่อนไหว (Koedijk et al., 2017; Sofi et al., 2011) นอกจากนี้การศึกษาในปัจจุบันได้ระบุว่าโปรตีนที่สำคัญบางตัวใน AD ก็มีหน้าที่ในการเผาผลาญของกระดูกเช่นกัน (Li et al., 2016; Pan et al., 2018) มีเหตุผลที่เชื่อได้ว่า OP และ AD ไม่ได้เป็นอิสระอย่างสมบูรณ์ แม้ว่าจะมีความเชื่อมโยงที่อาจเกิดขึ้นบ้าง สิ่งนี้ชี้ให้เห็นถึงการรักษาแบบ homo-therapy สำหรับ heteropathy ซึ่งหมายถึงการรักษา OP และ AD ด้วยการรักษาแบบเดียวกัน

บนพื้นฐานของวัตถุประสงค์และหลักการรักษาของ TCM การปรับไม่ถูกต้องในโรคสามารถจำแนกได้เป็น "รูปแบบ" หลายแบบ ดังนั้นโรคต่างๆ เช่น OP และ AD อาจแบ่งปัน "รูปแบบ" เดียวและรับการรักษาโดย TCM เดียวกัน (Jiang, 2005) CT เป็นยาบำรุงไตที่ใช้กันอย่างแพร่หลายในการรักษา OP และ AD การศึกษาสมัยใหม่ได้ให้หลักฐานที่กระชับว่า CT มีผลทางเภสัชวิทยาในเชิงบวกต่อโครงกระดูกและระบบประสาท อย่างไรก็ตาม ยังคงต้องการการศึกษารายละเอียดเพิ่มเติมเพื่อเปิดเผยกลไกของ CT

Cistanche has positive pharmacologic actions on the skeleton and nervous system.

cistanche และ tongkat aliมีการกระทำทางเภสัชวิทยาในเชิงบวกบนโครงกระดูกและระบบประสาท.

ในการศึกษานี้ เพื่อความเข้าใจที่ชัดเจนเกี่ยวกับผลกระทบของ CT ต่อ OP และ AD ได้มีการกำหนดวิธีการทางเภสัชวิทยาแบบเครือข่ายขึ้นเพื่อคาดการณ์ส่วนผสมออกฤทธิ์ที่เป็นไปได้และวิเคราะห์เส้นทางที่เกี่ยวข้อง แตกต่างจากการศึกษาเภสัชวิทยาเครือข่ายครั้งก่อนเกี่ยวกับ CT (Liu et al., 2017) เครือข่ายโมเลกุล "หนึ่งยา - สองโรค" ได้ดำเนินการเป็นครั้งแรก แทนที่จะมุ่งเน้นไปที่โรคเดียวเท่านั้น ในอีกด้านหนึ่ง การวิเคราะห์เครือข่ายแบบบูรณาการได้ค้นพบสารประกอบออกฤทธิ์ทั้งหมด 22 ชนิดของ CT ที่มีผลคู่สำหรับการบำบัดทั้ง OP และ AD ในทางกลับกัน รูปแบบของทั้งสองโรคสนับสนุนการเปิดเผยความเชื่อมโยง การวิเคราะห์แบบจำแนกพบว่าสารประกอบออกฤทธิ์เหล่านี้อาจมีผลเสริมฤทธิ์กันในโมดูลการทำงานทางชีวภาพจำนวนมาก และ PhGs, flavonoids, terpene และ sterol มีประสิทธิภาพที่ดีขึ้น เพื่อตรวจสอบความเป็นไปได้และความเหมาะสมของเครือข่ายที่ดำเนินการนี้ zebrafish ถูกใช้เพื่อสร้างแบบจำลอง OP และ AD ในร่างกาย และประเมินประสิทธิภาพของสารประกอบสี่ชนิด และมีการใช้การตรวจสอบเป้าหมายสมมุติเพื่อเปิดเผยการทำงานร่วมกันที่เป็นไปได้ การศึกษาร่วมกันในซิลิโคและในร่างกายเป็นจุดเริ่มต้นใหม่สำหรับการเปิดเผยผลการป้องกันของ CT ในสองโรค อาจให้เบาะแสใหม่เกี่ยวกับความสัมพันธ์ระหว่างการเกิดโรค OP และ AD รวมทั้งช่วยในการพัฒนากลยุทธ์การรักษาในอนาคตสำหรับสองโรค อย่างไรก็ตาม วิธีการนี้ยังคงต้องการการปรับปรุงและความสมบูรณ์แบบในการสำรวจกลไกการทำงานร่วมกันของ CT ทั้งหมดสำหรับการรักษา OP และ AD ในการศึกษานี้ เฉพาะสารประกอบบางชนิดเท่านั้นที่ถูกเลือกเพื่อตรวจสอบความถูกต้อง จำเป็นต้องตรวจสอบอีก 18 องค์ประกอบที่ใช้งานอยู่กับเป้าหมายและเส้นทางพื้นฐานโดยการทดลอง และความคล้ายคลึงกันระหว่าง OP และ AD ยังคงต้องมีการสำรวจและค้นพบเพิ่มเติมโดยเฉพาะจากมุมมองของการรักษา

where to buy cistanche

หาซื้อได้ที่ไหน cistanche

ในการศึกษาของเรา BSS, GE, AA และ QU ได้รับการพิสูจน์แล้วว่ามีผลในการป้องกัน OP และ AD ในปลาม้าลาย องค์ประกอบที่มีคุณค่าเหล่านี้ยังได้รับการตรวจสอบการทดลองในวรรณกรรมอื่น ๆ และแสดงให้เห็นกิจกรรมทางเภสัชวิทยาที่สอดคล้องกับในบทความนี้ (Ayaz et al., 2017; Chauhan et al., 2018; King et al., 2015; Ramnath et al. , 2018; Thummuri et al., 2018; Vargas-Restrepo et al., 2018; Wang et al., 2019; Yuan et al., 2018) มันพิสูจน์เพิ่มเติมถึงประสิทธิผลและความสมเหตุสมผลของเครือข่ายนี้ และระบุผลคู่ของสารประกอบ 18 ที่เหลือ สำหรับการตรวจสอบเป้าหมายสมมุติฐาน 9 เป้าหมายที่มีประสิทธิภาพซึ่งประกอบด้วย TP53, JUN, TNF, IL1B, MAPK14, MAPK3, FGFR1, BMP2 และ TGFBR1 ถูกคัดกรองเป็นเป้าหมายทั่วไปของ OP และ AD ในที่สุด TP53 เป็นตัวยับยั้งเนื้องอกที่สำคัญ และการกระตุ้นอาจกระตุ้นการตายของเซลล์ประสาท (Xiao et al., 2019) TP 53, JUN และ SP1 เป็นปัจจัยการถอดรหัสที่ใช้งานอยู่ใน OP หลัก (Xie et al., 2015) TNF และ IL1B เป็นไซโตไคน์ที่มีการอักเสบทั่วไป โดยมีหน้าที่ส่งเสริมการสร้างกระดูก (Osteoclastogenesis) (Geissler et al., 2018) และการสูญเสียมวลกระดูก (Sang et al., 2017) นอกจากนี้ ทั้งคู่ยังเป็นเป้าหมายในการรักษาโรค AD ผ่านการยับยั้งการอักเสบของเส้นประสาทเพื่อปกป้องเซลล์ประสาท (Liu et al., 2017) TGFB1, TGFB2, TGFBR1 และ TGFBR1 มีผลซับซ้อนต่อการอักเสบของเส้นประสาท (Lippa et al., 1998) และ osteolysis (Quinn et al., 2001) โปรตีน morphogenetic ของกระดูก (BMPs) เป็นหนึ่งในปัจจัยที่เกี่ยวข้องกับความแตกต่างของ glial ของเซลล์ต้นกำเนิดประสาท (Kwak et al., 2014) การแสดงออกที่เพิ่มขึ้นของ BMP2 ได้รับการพิสูจน์แล้วว่ามีบทบาทสำคัญในการสร้างความแตกต่างของ osteoblast (Li et al., 2017) นอกเหนือจากเป้าหมายที่ได้รับการตรวจสอบแล้วจากการทดลองเหล่านี้ เป้าหมายทั่วไป 81 รายการที่ระบุไว้ในตาราง S2 ยังคาดว่าจะเป็นเป้าหมายในการรักษาโรค แต่ยังไม่ได้รับการวิจัยหรือมีการศึกษาเบื้องต้นในงานวิจัยอื่นๆ

เป็นที่น่าสังเกตว่าเป้าหมายที่มีค่าเหล่านี้ทั้งหมดเกี่ยวข้องกับเส้นทางการส่งสัญญาณ MAPK และ TGF-beta ตามการวิเคราะห์การเพิ่มสมรรถนะ KEGG เส้นทางการส่งสัญญาณ MAPK ควบคุมการเพิ่มจำนวนของเซลล์ การแยกตัว การอยู่รอดหรือการตายของเซลล์ การอักเสบ และภูมิคุ้มกันโดยกำเนิด มีรายงานว่าเส้นทางการส่งสัญญาณ MAPK ที่ถูกบุกรุกมีส่วนทำให้เกิดพยาธิสภาพของการเสื่อมสภาพของระบบประสาท เช่น AD (Kim and Choi, 2015) รวมถึงการยับยั้งเซลล์สร้างกระดูกโดยตรง (Xiao et al., 2019) สำหรับสมาชิกในครอบครัว TGF- พวกเขามีบทบาทที่แตกต่างกันในโครงกระดูกโดยมีผลโดยตรงต่อการด้อยค่าของกระดูก (Sun et al., 2016) ในขณะที่การกระตุ้นการส่งสัญญาณ TGF-beta ของเส้นประสาทจะเพิ่มความผิดปกติของระบบประสาทและโรคคล้าย AD (Tesseur et al ., 2549). ดังนั้น คาดว่าเส้นทางการส่งสัญญาณ MAPK และ TGF-beta จะกลายเป็นกลไกที่ใช้ร่วมกันในการเปิดเผยการเกิดโรคของ OP และ AD หรือชะลอการลุกลาม นอกจากเส้นทางทั้งสองแล้ว สารประกอบออกฤทธิ์ 22 ชนิดควบคุมเส้นทางทั้งหมด 66 เส้นทาง โดยเฉพาะอย่างยิ่งเส้นทางที่มีค่า p สูงสุด เช่น เส้นทางการส่งสัญญาณ Prolactin เส้นทางการส่งสัญญาณ FoxO และการสร้างความแตกต่างของเซลล์ Th17 ก็ควรค่าแก่การให้ความสนใจและการวิจัยเช่นกัน เป็นกุญแจสำคัญในการเปิดเผยความสัมพันธ์ระหว่าง OP และ AD ในที่สุด การค้นพบที่สรุปได้อาจบ่งบอกถึงความเชื่อมโยงระหว่างโรคทั้งสองในระบบภูมิคุ้มกันและระบบต่อมไร้ท่อ

5. สรุป

ในงานนี้ เราเสนอแนวทางเภสัชวิทยาเครือข่าย ซึ่งรวมการวิเคราะห์ PCA การคัดกรอง DL การรวบรวมและการทำนายเป้าหมายหลายรายการ การสร้างเครือข่าย PPI รวมถึงการวิเคราะห์เส้นทาง GO และ KEGG เพื่อตรวจสอบประสิทธิภาพของ CT สำหรับการรักษา OP และ AD ผลลัพธ์ของเราชี้ให้เห็นว่าสารออกฤทธิ์ 22 ชนิดของ CT อาจควบคุมการส่งสัญญาณเป็นหลัก ระบบต่อมไร้ท่อ ระบบภูมิคุ้มกัน การเติบโตของเซลล์ และความตาย เพื่อมีบทบาทสำคัญในการรักษา OP และ AD เพื่อให้เข้าใจกลไกของ CT ได้ดีขึ้น เครือข่ายนี้จึงถูกขุดค้นและวิเคราะห์อย่างลึกซึ้งโดยขึ้นอยู่กับประเภทของสารประกอบ ในท้ายที่สุด เราใช้แบบจำลอง zebrafish OP และ AD แยกกันเพื่อระบุสารประกอบที่มีค่า 4 ชนิดและเป้าหมายที่เกี่ยวข้อง ซึ่งเป็นวิธีการที่เป็นไปได้ในการเชื่อมต่อจีโนมกับเภสัชพลศาสตร์และค้นหาสารประกอบที่มีเอฟเฟกต์คู่