โรคกระดูกพรุนเป็นปัญหาสาธารณสุขที่สำคัญสำหรับประชากรสูงอายุของโลกที่เพิ่มมากขึ้น

โปรดติดต่อoscar.xiao@wecistanche.comสำหรับข้อมูลเพิ่มเติม

เชิงนามธรรม:โรคกระดูกพรุนเป็นปัญหาสาธารณสุขที่สำคัญทั่วโลก โดยโรคกระดูกพรุนหลังวัยหมดประจำเดือนอันเนื่องมาจากการขาดฮอร์โมนเอสโตรเจน ส่งผลให้มีผู้ป่วยประมาณ 3/4 ของทั้งหมด ในการศึกษานี้ แกะ Merino วัย 18 ตัวถูกตัดรังไข่ออก และ 10 ตัวเป็นกลุ่มควบคุม ตัวเมียที่ตัดรังไข่ 3 ตัวได้รับการรักษาทุกสัปดาห์ด้วยเมทิลเพรดนิโซโลน 400 มก. เป็นเวลา 5 เดือน และ 3 ตัวได้รับการรักษาทุกสัปดาห์เป็นเวลา 2 เดือน ตามด้วยระยะเวลาพักฟื้น 3-เดือน ที่ 2 เดือน สัตว์ควบคุมห้าตัวและสัตว์ที่ตัดรังไข่หกตัวถูกทำการุณยฆาต เมื่อครบ 5 เดือน แกะที่เหลือทั้งหมดจะถูกทำการุณยฆาต ตัวอย่างไตถูกรวบรวมภายหลังการชันสูตรพลิกศพสำหรับการวิเคราะห์ qPCR ของ NPT1, PTH1R, NPT2a, NPT2c, Klotho, FGFR1Illc, VDR, CYP24A1, CYP27B1, TRPV5, TRPV6, CalD9k, CalD28k, PMCA และ NCX1 แกะที่ตัดรังไข่มีการแสดงออกของ VDR มากกว่าอย่างมีนัยสำคัญเมื่อเปรียบเทียบกับกลุ่มอื่น แกะที่ตัดรังไข่ที่รักษาด้วยกลูโคคอร์ติคอยด์เป็นเวลา 2 เดือน ตามด้วยนาเซียเซียเมื่อ 5 เดือน แสดงให้เห็นความแตกต่างอย่างมีนัยสำคัญในการแสดงออกของยีน TRPV5, CYP24A1 และโคลโทเมื่อเทียบกับกลุ่มอื่น ความแตกต่างในการแสดงออกของ klotho ถูกทำเครื่องหมายมากที่สุดหลังการปรับสำหรับการวัดซ้ำ (p=0.1) Klotho เป็นที่รู้จักกันในนามฮอร์โมน "ต่อต้านวัย" และเกี่ยวข้องกับการเผาผลาญแคลเซียมและฟอสฟอรัส Klotho อาจเกี่ยวข้องกับการฟื้นฟูความหนาแน่นของกระดูกในแกะที่ตัดรังไข่ซึ่งรักษาด้วยกลูโคคอร์ติคอยด์เป็นเวลา 2 เดือน ตามด้วยนาเซียเซียเมื่อ 5 เดือน ขอแนะนำให้ศึกษาเพิ่มเติมเกี่ยวกับบทบาทของโคลโธ

กรุณาคลิกที่นี่เพื่อทราบข้อมูลเพิ่มเติม

คำสำคัญ:โรคกระดูกพรุน แกะ; วิตามินดี; ฟอสเฟต; คิวพีซีอาร์; เมแทบอลิซึมของแคลเซียม เมแทบอลิซึมของฟอสฟอรัส โคลโท

1. บทนำ

โรคกระดูกพรุนเป็นปัญหาด้านสาธารณสุขที่สำคัญสำหรับประชากรสูงอายุของโลกที่เพิ่มสูงขึ้นเรื่อยๆ ทั่วโลก ทำให้สหรัฐฯ เสียค่าใช้จ่ายเกือบ 17 พันล้านดอลลาร์สหรัฐในปี 205 และคาดว่าจะเพิ่มขึ้นเป็น 25 พันล้านดอลลาร์สหรัฐในปี 2568 [1,2] ประมาณ 70-75 เปอร์เซ็นต์ของภาระโรคกระดูกพรุนเกิดจากโรคกระดูกพรุนหลังวัยหมดประจำเดือนในสตรี [1] โรคกระดูกพรุนปฐมภูมิซึ่งการขาดฮอร์โมนเอสโตรเจนส่งผลให้การสร้างกระดูกลดลงและเพิ่มการสลายของกระดูก ทำให้มวลกระดูกและความเปราะบางของกระดูกลดลง [3] . โรคกระดูกพรุนอาจเกิดขึ้นรองจากสาเหตุเฉพาะ เช่น การรักษากลูโคคอร์ติคอยด์ แกะเป็นสัตว์จำลองขนาดใหญ่ที่มีรากฐานมาอย่างดีสำหรับโรคต่างๆ ของโครงกระดูกมนุษย์ รวมถึงโรคกระดูกพรุน[4] ข้อดีอย่างหนึ่งของแบบจำลองสัตว์ขนาดใหญ่ เช่น แกะ คือความสามารถในการทดสอบรากฟันเทียมทางออร์โธปิดิกส์ เทคนิคการผ่าตัด และวัสดุชีวภาพ [4]นอกจากนี้ แกะยังมีราคาค่อนข้างต่ำ จัดการง่าย และมีวัสดุสำหรับการทดสอบมากมาย [4,5].

แบบจำลองแกะที่พบบ่อยที่สุดของโรคกระดูกพรุน ได้แก่ แกะที่ตัดรังไข่หลังผ่าตัด 12 เดือน และแกะที่ตัดรังไข่ 6-เดือนโดยรับประทานอาหารที่ขาดแคลเซียมและวิตามินดีที่ได้รับกลูโคคอร์ติคอยด์[4] ด้วยการใช้ปัจจัยกระตุ้นโรคกระดูกพรุนที่เป็นที่รู้จักร่วมกัน เช่น การตัดรังไข่ การรักษาด้วยกลูโคคอร์ติคอยด์ และการรับประทานอาหารที่มีแคลเซียมต่ำ เราสามารถสร้างแบบจำลองแกะของโรคกระดูกพรุนได้ในเวลาเพียง 5 เดือน [6,7] ซึ่งส่งผลให้ที่อยู่อาศัย แรงงานลดลง และต้นทุนอาหารสัตว์ที่เกี่ยวข้องกับการพัฒนาแบบจำลอง ในแบบจำลองนี้ การตัดรังไข่พบว่าเพิ่มความเข้มข้นของซีรั่มของเทโลเปปไทด์ C-terminal ของคอลลาเจนประเภทที่ 1 (CTX-I เครื่องหมายการสลายกระดูก) และ osteocalcin (เครื่องหมายการหมุนเวียนของกระดูก) เมื่อเทียบกับแกะกลุ่มควบคุม แกะที่ได้รับกลูโคคอร์ติคอยด์เป็นเวลา 2 เดือนมีความเข้มข้น CTX-I ในซีรัมสูงกว่าและความเข้มข้นของ osteocalcin ในซีรัมลดลง นอกจากนี้ ความหนาแน่นของกระดูกต้นขาและกระดูกสันหลังส่วนเอวและความหนาแน่นของมวลกระดูกเชิงปริมาตรและกระดูกทราเบคิวลาร์ของกระดูกหน้าแข้งส่วนต้นยังต่ำกว่าในกลุ่มที่ได้รับการทดลองเมื่อเทียบกับกลุ่มควบคุม โดยเฉพาะอย่างยิ่งสำหรับตัวเมียที่ได้รับกลูโคคอร์ติคอยด์ที่ตัดรังไข่ กรดอะมิโนและเมแทบอลิซึมของไขมันยังพบการเปลี่ยนแปลงในแกะที่ตัดรังไข่และแกะที่ได้รับกลูโคคอร์ติคอยด์ [7]cistanche wikungการเปลี่ยนแปลงที่คล้ายคลึงกันนี้ยังพบได้ในแบบจำลองโรคกระดูกพรุนอื่นๆ ของไข่ [8]

Cistanche สามารถต่อต้านริ้วรอย

ยีนที่ตอบสนองต่อวิตามินดีและระบบฟอสเฟตยังไม่เคยมีการสำรวจมาก่อนในแบบจำลองแกะที่ตัดรังไข่ วิตามินดี ซึ่ง 1,25-dihydroxyvitamin D เป็นรูปแบบที่ออกฤทธิ์ ในท้ายที่สุดจะนำไปสู่การเพิ่มขึ้นของความเข้มข้นของแคลเซียมและฟอสฟอรัสในพลาสมาที่เพิ่มขึ้นโดยจับกับตัวรับวิตามินดี (VDR) - retinoid X receptor heterodimer และเปลี่ยนแปลงการแสดงออกของวิตามินจำนวนมาก ยีนที่ตอบสนองต่อ D เช่น โปรตีนที่จับกับแคลเซียม (calbindin D9 และ 28k (CalD9k, CalD28k)) และช่องแคลเซียม (ตัวรับชั่วคราวของช่องไอออนบวกของตัวรับชั่วคราวที่ 5 และ 6 (TRPV5, TRPV6), พลาสมาเมมเบรนแคลเซียม ATPase (PMCA) , เครื่องแลกเปลี่ยนโซเดียม-แคลเซียม 1(NCX1)[9] การผลิต 1,25-ไดไฮดรอกซีวิตามินดีเป็นขั้นตอนที่มีการควบคุมอย่างเข้มงวด โดยที่ lo hydroxylase ของไต (CYP27B1) เร่งการเปลี่ยนแปลงของ 25-hydroxyvitamin D ถึง 1,25-dihydroxyvitamin D และเอนไซม์ 24-hydroxylase(CYP24A1) จะย่อยทั้ง 25-hydroxyvitamin D และ 1,25-dihydroxy vitamin D เป็นผลพลอยได้ที่ไม่ได้ใช้งานcistanche สหราชอาณาจักรระบบฟอสเฟตยังควบคุมความเข้มข้นของฟอสฟอรัสในพลาสมาและแคลเซียม[10] ลินช์พินในระบบนี้คือไฟโบรบลาสต์โกรทแฟคเตอร์ 23 ซึ่งผลิตโดยเซลล์สร้างกระดูกในกระดูกและควบคุมความเข้มข้นของฟอสฟอรัสในพลาสมาเป็นหลักโดยจับกับโคลโทแฟคเตอร์ร่วมเพื่อลดการแสดงออกของสารขนส่งร่วมโซเดียม-ฟอสเฟต (NPT1, NPT2a, NPT2c) [11]. เนื่องจากผลกระทบระหว่างกันของฮอร์โมนพาราไทรอยด์ และ 1,25-วิตามินดีไดไฮดรอกซี การพิจารณาผลของ FGF23 ต่อการเผาผลาญแคลเซียมจึงเป็นเรื่องที่ท้าทาย แต่มีหลักฐานที่ชี้ว่าสามารถควบคุมการดูดซึมแคลเซียมและไตในลำไส้ การดูดซึมแคลเซียมกลับ[12,13].

กลูโคคอร์ติคอยด์มีผลมากมายต่อเมแทบอลิซึมของแคลเซียมและฟอสฟอรัส รวมถึงการยับยั้งการดูดซึมแคลเซียมในลำไส้ การดูดซึมแคลเซียมในท่อไตที่ไตลดลง และการดูดซึมฟอสฟอรัสในไตลดลง [14-16] นอกจากนี้ มีงานวิจัยเพียงเล็กน้อยที่ตรวจสอบผลของการขาดฮอร์โมนเอสโตรเจนต่อยีนที่ตอบสนองต่อวิตามินดีและระบบฟอสเฟต [17,18]

อาหารที่มีแคลเซียมต่ำและตัดรังไข่ แบบจำลองแกะที่รักษาโรคกระดูกพรุนที่ได้รับกลูโคคอร์ติคอยด์ทำให้มีโอกาสสร้างข้อมูลเบื้องต้นเกี่ยวกับผลกระทบของการรักษาเหล่านี้ต่อการแสดงออกของยีนที่ตอบสนองต่อฟอสเฟตและวิตามินดีในไตของไข่ จุดมุ่งหมายของการศึกษาครั้งนี้มี 2 แบบคือ (1) ตรวจสอบว่าการตัดรังไข่หรือตัดรังไข่และการรักษาด้วยกลูโคคอร์ติคอยด์เปลี่ยนแปลงการแสดงออกของวิตามินดีและยีนที่เกี่ยวข้องกับฟอสเฟตในไตหรือไม่ (2) กำหนดความสัมพันธ์ระหว่างวิตามินดีในไตกับยีนที่เกี่ยวข้องกับฟอสเฟต เซรั่มวิตามินดีและตัวบ่งชี้การหมุนเวียนของกระดูกในซีรัม (CTX-I และ osteocalcin)

2. วัสดุและวิธีการ

วิธีการโดยละเอียดสำหรับการพัฒนาแบบจำลองแกะสำหรับโรคกระดูกพรุนที่ตัดรังไข่และบำบัดด้วยกลูโคคอร์ติคอยด์ได้รับการตีพิมพ์ก่อนหน้านี้แล้ว [6] โดยสังเขป Merino ewes (7-9 ปี,n=28) ถูกสุ่มแยกเป็นกลุ่ม: control(n=10)ovariectomized (OVX) (n=12), ovariectomized และการรักษาด้วยกลูโคคอร์ติคอยด์ (เมทิลเพรดนิโซโลน 40 มก. โดยการฉีดเข้าใต้ผิวหนัง) ทุกเดือนเป็นเวลา 2 เดือน ตามด้วยไม่รักษาเป็นเวลา 3 เดือน (n=3) และการรักษาด้วยกลูโคคอร์ติคอยด์ (เมทิลเพรดนิโซโลน 400 มก.) ทุกเดือนเป็นเวลา 5 เดือน (n=3) .ไบโอฟลาโวนอยด์ส้มแกะถูกเลี้ยงในยุ้งฉางและให้อาหารเม็ดควบคุม (แคลเซียม 115 กรัม/กก. 2.2 กรัม/แกะต่อวัน) หรือแคลเซียมต่ำ (แคลเซียม 5 กรัม/กก.; 1 กรัม/แกะต่อวัน) อาหารเม็ดเข้มข้นสำหรับแกะ [19] ข้อกำหนดการบำรุงรักษาสำหรับตัวเมียที่ไม่ได้ตั้งครรภ์คือ 1.2 กรัม/แกะต่อวัน[19]

เก็บตัวอย่างเลือดโดยการเจาะเลือดบริเวณคอหลังการผ่าตัด 2 เดือน 5 เดือน Osteocalcin ถูกวัดโดยใช้ชุด Micro Vue Osteocalcin immunoassay และ CTX-I โดยใช้ชุด IDS Serum CrossLaps ELISA ตามที่รายงานไว้ก่อนหน้านี้ [6] ความเข้มข้นของแคลเซียมและฟอสฟอรัสทั้งหมดในเซรั่มถูกวัดโดยใช้ spectrophotometry บน AU680 Clinical Chemistry Analyzer (Beckman Coulter, Brea แคลิฟอร์เนีย สหรัฐอเมริกา) เซรั่ม 25-ความเข้มข้นของไฮดรอกซีวิตามินดีวัดโดยใช้โครมาโตแกรมเหลวแบบเจือจางไอโซโทป raphy mass spectrometry ที่ Endolab, Canterbury Health Laboratories, Christchurch, New Zealand

ในเดือนนั้น ตัวเมีย 5 ตัวจากกลุ่มควบคุมและ 6 ตัวจากกลุ่ม OVX ถูกทำการุณยฆาตและทำการผ่าซาก ที่ 5 เดือน แกะที่เหลือถูกทำการุณยฆาตด้วย (กลุ่มควบคุม n =5, กลุ่ม OVX n=6, OVX บวกกลูโคคอร์ติคอยด์ 2 ม. n=3 และ OVX บวกกลูโคคอร์ติคอยด์ 5 ม. n=5 ) และตัดเนื้อ เก็บตัวอย่างไตภายใน 30 นาทีของการเสียชีวิตและแบ่งออกเป็นสองตัวอย่าง โดยตัวอย่างหนึ่งวางในฟอร์มาลินที่บัฟเฟอร์ที่เป็นกลาง 10 เปอร์เซ็นต์และผ่านกระบวนการทางจุลพยาธิวิทยา และอีกตัวอย่างหนึ่งแช่แข็งในไนโตรเจนเหลวและเก็บไว้ที่ -80 องศาจนกว่าจะผ่านกระบวนการเฮมาทอกซิลินและ ส่วนที่เปื้อน eosin ของไตได้รับการตรวจสอบโดยผู้เขียนหลักและยืนยันว่าไม่มีรอยโรคที่สำคัญ

ขั้นตอนการทดลองทั้งหมดได้รับการอนุมัติโดยคณะกรรมการจริยธรรมสำหรับสัตว์ของมหาวิทยาลัย Massey (อนุมัติหมายเลข 14/103) และดำเนินการตามหลักจรรยาบรรณสำหรับการใช้สัตว์ที่มีชีวิตเพื่อการวิจัยที่มหาวิทยาลัย Massey เมือง Palmerston North ประเทศนิวซีแลนด์

การสกัด RNA และ qPCR ถูกดำเนินการตามที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้ [20,21] โดยสังเขป Tri Reagent (Gigma-Aldrich Inc, Merck KGaA, Darmstadt, Germany) ถูกใช้เพื่อแยก RNA ตามคำแนะนำของผู้ผลิต จีโนม DNA ถูกลบออกโดยปราศจาก Ambion Turbo DNA (Thermo Fisher Scientific Inc., Waltham, MA, USA) ตามคำแนะนำของผู้ผลิต ความเข้มข้นของอาร์เอ็นเอถูกกำหนดโดยใช้ฟลูออโรมิเตอร์ Qubit 20 และชุดทดสอบช่วงกว้างของ Qubit RNA (Thermo Fisher Scientific Inc., Waltham, MA, USA) และประเมินคุณภาพ RNA โดยกำหนดอัตราส่วน 260/280 และการวิ่ง บนเจลอากาโรส ชุดการสังเคราะห์ cDNA สายแรกของ Transcriptor (โรช) ถูกใช้เพื่อสังเคราะห์ cDNA ส่วนผสมของปฏิกิริยา 20 ไมโครลิตรแต่ละชนิดมี RNA 600 ng, โอลิโก 2.5 ไมโครโมลาร์ (dT), บัฟเฟอร์ปฏิกิริยา 8 มิลลิโมลาร์ RT, 1 มิลลิโมลาร์ dNTP, การถอดรหัสย้อนกลับ 10U, สารยับยั้ง RNase 20 U และน้ำที่ปราศจาก Rnase-Dnase ปฏิกิริยาถูกดำเนินการที่ 55 องศาเป็นเวลา 30 นาที 85 องศาเป็นเวลา 5 นาที จากนั้นจึงแช่เย็นที่ 4 องศาโดยใช้ Applied Biosystems Veriti Thermal Cycler (Thermo Fisher Scientific Inc., Waltham, MA, USA) qPCR แบบเรียลไทม์ดำเนินการโดยใช้เครื่อง PCR แบบเรียลไทม์ StepOne Plus (Applied Biosystems, Thermo Fisher Scientific Inc, Waltham, MA, USA) PCR ผสมแต่ละชนิดมี 5 uL Power SYBR Green PCR master mix (Thermo Fisher Scientific Inc., Waltham, MA, USA) ไพรเมอร์ไปข้างหน้าและย้อนกลับที่ความเข้มข้นที่ระบุไว้ในตาราง S1,10 ng ของ cDNA และสร้างได้ถึง 10 μL ด้วย RNase น้ำปราศจาก DNase โปรโตคอล PCR ประกอบด้วย 95 องศาเป็นเวลา 20 วินาที, 40 รอบที่ 95 องศาสำหรับและ 60 องศาสำหรับ และสุดท้ายคือเส้นโค้งการหลอมเหลวตั้งแต่ 60 องศาถึง 95 องศาโดยมีอัตราการให้ความร้อน 0.3 องศา /15 วินาที ของผสมน้ำและปฏิกิริยาที่ไม่มีรีเวิร์สทรานสคริปเทสถูกรวมไว้เป็นตัวควบคุมเชิงลบในการรัน PCR ทุกครั้ง และตัวอย่างทั้งหมดถูกรันซ้ำกัน ประเมินยีนต่อไปนี้: NPT1, PTH1R, NPT2a, NPT2c, Klotho, FGFR1IIC, VDR, CYP24A1, CYP27B1, TRPV5, TRPV6, CalD9k, CalD28k, PMCA และ NCX1 ก่อนหน้านี้พบว่า PKG1 และ SDHA สามารถแสดงออกได้อย่างเสถียรในไตของไข่ [20] และตัวอย่างถูกทำให้เป็นมาตรฐานเมื่อเทียบกับการแสดงออกของยีนเหล่านี้และประสิทธิภาพของยีนโดยใช้ 2-วิธี AACt [22]

วิเคราะห์ทางสถิติโดยใช้ R Studio 1.3.1093 [23] กับเวอร์ชัน R

4.0.3 และกลอนที่เป็นระเบียบ nlme 3.1-150 และ Gary

2.1.2 แพ็คเกจ แบบจำลองเชิงเส้นถูกนำไปใช้กับข้อมูลการแสดงออกของรอยพับของยีนที่แปลงสภาพ log10 ในรูปแบบแรก การแสดงออกของยีนเป็นตัวแปรผลลัพธ์ ในขณะที่กลุ่ม (กลุ่มควบคุมหรือ OVX แต่ไม่รวมแกะที่ได้รับกลูโคคอร์ติคอยด์) และเวลา (การุณยฆาตที่ 2 ม. หรือ 5 ม.) เป็นตัวแปรตาม โดยมีเงื่อนไขปฏิสัมพันธ์ (กลุ่ม: เวลา) รวมอยู่ด้วย ในรูปแบบที่สอง การแสดงออกของยีนเป็นตัวแปรผลลัพธ์ ในขณะที่กลุ่ม (กลุ่มควบคุม, OVX, OVX ที่มีการรักษาด้วยกลูโคคอร์ติคอยด์เป็นเวลา 2 ม. และ OVX ที่มีการรักษาด้วยกลูโคคอร์ติคอยด์เป็นเวลา 5 ม.) เป็นตัวแปรตามประโยชน์ของไซโนโมเรียมเนื่องจากมีการทดสอบตัวแปรผลลัพธ์หลายตัว (ยีน) สำหรับความแตกต่างระหว่างกลุ่ม ค่า p ถูกปรับสำหรับการทดสอบหลายรายการโดยใช้ขั้นตอน Holm ตามลำดับ [24] ความเข้มข้นของแคลเซียม ฟอสฟอรัส และ25-ไฮดรอกซีวิตามินดีในซีรัมได้รับการทดสอบในแบบจำลองการแสดงออกของยีน แต่ไม่มีนัยสำคัญ และขาดความแตกต่างที่มีนัยสำคัญระหว่างกลุ่ม นอกจากนี้ การวิเคราะห์องค์ประกอบหลักถูกใช้เพื่อประเมินว่าข้อมูลการแสดงออกของรอยพับของยีน log10 เปลี่ยนแปลงไปตามกลุ่ม เวลาของนาเซีย หรือความเข้มข้น 25-ไฮดรอกซีวิตามินดีในซีรัมหรือไม่ ความสัมพันธ์แบบคู่ของ Spearman และ scatterplots ถูกใช้เพื่อศึกษาความสัมพันธ์ระหว่างข้อมูลการแสดงออกของยีนที่แปลง log10 และการวิเคราะห์ในซีรัม

3. ผลลัพธ์

3.1.ผลของการตัดรังไข่ เวลาตั้งแต่ตัดรังไข่ออก และการรักษากลูโคคอร์ติคอยด์ต่อความเข้มข้นของแคลเซียม ฟอสฟอรัส และ25-ไฮดรอกซีวิตามินดีในซีรัม

ผลลัพธ์ที่สมบูรณ์สำหรับความเข้มข้นของแคลเซียม ฟอสฟอรัส และ 25-ไฮดรอกซีวิตามินดีในแต่ละกลุ่มแสดงไว้ในรูปที่ 1 "ไม่มีความแตกต่างอย่างมีนัยสำคัญในความเข้มข้นของแคลเซียม ฟอสฟอรัส และ 25-ไฮดรอกซีวิตามินดีระหว่าง กลุ่มอาหารแคลเซียมต่ำตัดรังไข่และกลุ่มอาหารแคลเซียมที่ไม่ได้รับรังไข่เพียงพอและระยะเวลาตั้งแต่ตัดรังไข่ 2 เดือน 5 เดือน ผลลัพธ์เหล่านี้แนะนำว่าการตัดรังไข่ร่วมกับอาหารแคลเซียมต่ำไม่มีผลต่อความเข้มข้นของแคลเซียมในซีรัม และรักษาด้วยกลูโคคอร์ติคอยด์เป็นเวลาหลายเดือน ตามด้วยนาเซียเซียเมื่อ 5 เดือน มีความเข้มข้นของแคลเซียมในเลือดต่ำอย่างมีนัยสำคัญ (p =0.0462, adj R20.13) เมื่อเทียบกับการตัดรังไข่ 5 เมตรในอาหารที่มีแคลเซียมต่ำ และตัดรังไข่ 5 เมตรเมื่อ การรับประทานอาหารที่มีแคลเซียมต่ำและแกะที่ได้รับกลูโคคอร์ติคอยด์ อย่างไรก็ตาม การตรวจสอบข้อมูลชี้ให้เห็นว่าอาจเป็นเพราะสัตว์ตัวหนึ่งที่มีแคลเซียมต่ำ (1.52 มิลลิโมล/ลิตร, ช่วงอ้างอิง 2.0-2.7 มิลลิโมล/ลิตร) การนำออก ของ สัตว์ตัวนี้ลบความสำคัญใด ๆผักตบชวาทะเลทรายแกะอื่นทั้งหมดมีความเข้มข้นของแคลเซียมในซีรัมภายในช่วงอ้างอิง ไม่พบความแตกต่างในซีรัมฟอสฟอรัสหรือความเข้มข้นของ 25-ไฮดรอกซีวิตามินดีใน 5 เมตรที่ตัดรังไข่และแกะที่ได้รับกลูโคคอร์ติคอยด์

3.2.ผลของการตัดรังไข่และระยะเวลาตั้งแต่ตัดรังไข่ทิ้งต่อการแสดงออกของยีนที่เกี่ยวข้องกับวิตามินดีและฟอสฟาโทนินในไต

การแสดงออกของยีนของวิตามินดีและยีนที่เกี่ยวข้องกับฟอสเฟตไม่สัมพันธ์กับการตัดรังไข่หรือเวลาตั้งแต่ตัดรังไข่ออก (รูปที่ 2) ข้อยกเว้นคือรีเซพเตอร์วิตามินดี (VDR) โดยที่กลุ่ม OVX มีการแสดงออกของ VDR ที่มากกว่าอย่างมีนัยสำคัญ(p=0.05, adj R2 0.16); อย่างไรก็ตาม ความสำคัญนี้หายไปหลังจากปรับมาตรการซ้ำแล้วซ้ำอีก

3.3. ผลของการตัดรังไข่และการรักษา Glucocorticoid ต่อการแสดงออกของยีนที่เกี่ยวข้องกับวิตามินดีและฟอสฟาโทนินใน KIDNEY 5 เดือนหลังการผ่าตัด

ผลลัพธ์ทั้งหมดแสดงไว้ในรูปที่ 3 การแสดงออกของ PTH1R เพิ่มขึ้นอย่างมีนัยสำคัญในแกะ OVX ที่รักษาด้วยกลูโคคอร์ติคอยด์เป็นเวลา 5 เดือน เมื่อเทียบกับกลุ่มอื่นๆ (p=0.04, adj R40.18) ในขณะที่ TRPV5 (p{ การแสดงออกของ {8}}.01, adj R20.31) และ CYP24A1(p=0.005, adj R40.40) มีค่ามากกว่าอย่างมีนัยสำคัญในแกะ OVX ที่บำบัดด้วยกลูโคคอร์ติคอยด์เป็นเวลา 2 เดือนเมื่อเทียบกับกลุ่มอื่นๆ

การแสดงออกของโคลโธแตกต่างกันอย่างมีนัยสำคัญระหว่างทุกกลุ่ม (p =0.01, adj R20.48) โดยมีการแสดงออกต่ำสุดในแกะควบคุม แกะ OVX ที่รักษาด้วยกลูโคคอร์ติคอยด์เป็นเวลา 2 เดือนมีการแสดงออกสูงสุด (p =0.002) ตามด้วยแกะ OVX (p=0.008) และแกะ OVX ที่รักษาด้วยกลูโคคอร์ติคอยด์เป็นเวลา 5 เดือน (p{ {10}}.03) อย่างไรก็ตาม เมื่อปรับสำหรับการวัดซ้ำ การแสดงออกของยีนไม่แตกต่างกันอย่างมีนัยสำคัญระหว่างกลุ่มเหล่านี้ โดย klotho แสดงความแตกต่างที่ใหญ่ที่สุดในแกะ OVX ที่รักษาด้วย glucocorticoids เป็นเวลา 5 เดือน (p=0.1)

ในทำนองเดียวกัน การแสดงออกของ VDR แตกต่างกันอย่างมีนัยสำคัญระหว่างทุกกลุ่ม (p=0.03, adj R20.38) การแสดงออกที่ยิ่งใหญ่ที่สุดของ VDR คือในแกะ OVX ที่บำบัดด้วยกลูโคคอร์ติคอยด์เป็นเวลาหลายเดือน (p=0.009) ตามด้วยแกะ OVX (p=0.01) จากนั้นแกะ OVX ที่บำบัดด้วยกลูโคคอร์ติคอยด์เป็นเวลา 5 เดือน (p=0.05) และการแสดงออกต่ำสุดมีอยู่ในแกะควบคุม

3.4.PCA ของการแสดงออกของยีนโดยรวมระหว่างกลุ่ม

การวิเคราะห์ PCA ของ OVX, การควบคุม และนาเซียเซียเมื่อ 2 และ 5 เดือนไม่สามารถแยกกลุ่มต่างๆ ออกได้ (รูปที่ S1) PCL และ PC2 อธิบาย 69.6 เปอร์เซ็นต์ของความผันแปร ในทำนองเดียวกัน การวิเคราะห์ PCA ของกลุ่มที่ถูกทำการุณยฆาตเมื่อครบ 5 เดือนก็ไม่สามารถแยกกลุ่มต่างๆ ออกได้ PCL และ PC2 อธิบาย 53.2 เปอร์เซ็นต์ของการแปรผัน (รูปที่ S2) การวิเคราะห์ PCA แสดงให้เห็นว่าการแสดงออกของยีนโดยรวมไม่สามารถอธิบายได้ด้วยแคลเซียมและฟอสฟอรัสในซีรัมของความเข้มข้น 25-ไฮดรอกซีวิตามินดี (รูปที่ S3)

3.5.Pairwise Correlation ระหว่าง Analytes และ Gene Expression

โดยไม่คำนึงถึงสถานะการตัดรังไข่ ปริมาณแคลเซียมในอาหาร เวลาตั้งแต่การตัดรังไข่ (2m หรือ 5m) หรือสถานะการรักษาด้วยกลูโคคอร์ติคอยด์ การแสดงออกของยีน NPT1 มีความสัมพันธ์อย่างมีนัยสำคัญและมีความสัมพันธ์เชิงบวก (p<001) with="" pth1r,="" npt2c,="" klotho,="" cyp24a1,="" trpv5,="" cald9k,="" and="" cald28k="" gene="" expression.="" pth1r="" was="" significantly="" positively="" correlated=""><001) with="" npt2c,="" klotho,="" cyp24a1,="" cyp27b1,="" trpv5,="" and="" cald28k.="" npt2a="" was="" significantly="" positively="" correlated=""><0.001) with="" fgfr1wic.="" klotho="" was="" significantly="" positively="" correlated=""><0.001) with="" cyp24a1,="" cyp27b1,="" trpv5,="" and="" cald28k.="" cyp24a1="" was="" significantly="" positively="" correlated=""><0.001) with="" trpv5="" and="" cald28k.="" trpv6="" was="" significantly="" positively="" correlated=""><0.001) with="" cal9dk="" and="" pmca,="" while="" cal9dk="" was="" significantly="" positively="" correlated=""><0.001) with="" cald28k="" and="" pmca.="" none="" of="" the="" serum="" analytes="" measured="" (osteocalcin,="" ctx,="" 25ohd,="" ca,="" and="" p)="" were="" correlated="" with="" the="" expression="" of="" any="" genes.="" the="" full="" pairwise="" correlations="" are="" shown="" in="" figure="">

4. การอภิปราย

ผลการศึกษานี้ชี้ให้เห็นว่าการรักษาแกะที่ตัดรังไข่ด้วยกลูโคคอร์ติคอยด์มีผลกระทบมากที่สุดต่อการแสดงออกของยีน ในขณะที่การตัดรังไข่ด้วยตัวเองและเวลาตั้งแต่การตัดรังไข่ (2 และ 5 เดือน) มีผลกระทบต่อการแสดงออกของยีนเพียงเล็กน้อย ในการวิเคราะห์แบบไม่แปรผัน พบความแตกต่างอย่างมีนัยสำคัญในการแสดงออกของยีน TRPV5, CYP24A1 และ klotho ในแกะที่ตัดรังไข่ที่รักษาด้วยกลูโคคอร์ติคอยด์เป็นเวลา 2 เดือน ตามด้วยนาเซียเซียที่ 5 เดือน และใน PTH1R ในแกะที่ตัดรังไข่ที่รักษาด้วยกลูโคคอร์ติคอยด์เป็นเวลา 5 เดือน ความแตกต่างถูกทำเครื่องหมายมากที่สุดในนิพจน์ klotho หลังจากปรับการวัดซ้ำ

การตรวจเอกซเรย์คอมพิวเตอร์ส่วนปลายเชิงปริมาณของกระดูกหน้าแข้งส่วนต้นของแกะเหล่านี้แสดงให้เห็นว่าการตัดรังไข่ลดความหนาแน่นของมวลกระดูกโดยรวม (vBMD) ลง 8 เปอร์เซ็นต์ การตัดรังไข่ด้วยกลูโคคอร์ติคอยด์เป็นเวลา 5 เดือนโดย 27 เปอร์เซ็นต์ และการตัดรังไข่ด้วยกลูโคคอร์ติคอยด์เป็นเวลา 2 เดือนและนาเซียเซียเมื่อ 5 เดือน ร้อยละ 13 [6] สิ่งที่น่าสนใจคือ ปริมาณ BMD trabecular พื้นที่ trabecular และแร่ธาตุกระดูก trabecular มีความคล้ายคลึงหรือมากกว่าการควบคุมในแกะที่ตัดรังไข่ที่รักษาด้วยกลูโคคอร์ติคอยด์เป็นเวลา 2 เดือนและทำการุณยฆาตเมื่อ 5 เดือน บ่งชี้ว่ามวลกระดูกฟื้นตัว [6] Glucocorticoids มีผลดีหลายประการเกี่ยวกับกระดูกที่นำไปสู่การพัฒนาของโรคกระดูกพรุนที่เกิดจากกลูโคคอร์ติคอยด์ ผลกระทบเหล่านี้รวมถึงการยับยั้งการก่อตัวของเซลล์ต้นกำเนิดของ osteoblast และ osteoblasts การเพิ่มการตายของเซลล์สร้างกระดูกและการลดการผลิต osteoid ซึ่งทั้งหมดลดการสร้างกระดูก [25,26] ในเวลาเดียวกัน glucocorticoids เพิ่มการสลายของกระดูกโดยการลดการแสดงออกของ OPG เพิ่มการแสดงออกของ RANKL เพิ่มการก่อตัวของ osteoclast ลดการตายของเซลล์ osteoclast และเพิ่มการหลั่งของ cathepsins และ matrix metalloproteinases โดย osteoclasts [25,26]

โคลโทเป็นส่วนประกอบสำคัญของระบบฟอสเฟต โดยจับกับไฟโบรบลาสต์โกรทแฟกเตอร์ 23 (FGF23) ในไต จากนั้น คอมเพล็กซ์ klotho-FGF23 จะจับกับตัวรับ FGFR1IIC ซึ่งเริ่มต้นเส้นทางของเซลล์ต่างๆ และในท้ายที่สุด ส่งผลให้มีการควบคุมการแสดงออกของไต 24-ไฮดรอกซีเลส (CYP24A1) และการปรับลดการทำงานของไต la-hydroxylase (CYP27B1) และท่อไต สารขนส่งร่วม Na/P II (NPT2a และ 2c) [10] การแสดงออกที่เพิ่มขึ้น (ความแตกต่างที่ทำเครื่องหมายมากที่สุดหลังจากปรับการวัดซ้ำ) ของ klotho ในแกะบน glucocorticoids เป็นเวลา 2 เดือนแล้วทำการุณยฆาตที่ 5 เดือนอาจอธิบายการแสดงออกของ CYP241 ที่เพิ่มขึ้นเช่นกันที่พบในแกะกลุ่มนี้ แม้จะไม่มีความแตกต่างอย่างมีนัยสำคัญใน เซรั่มเข้มข้น 25OHD

Klotho เป็นที่รู้จักกันในนามโปรตีนต่อต้านวัยและหนูที่ขาด klotho มีการสร้างกระดูกและการสลายของกระดูกต่ำซึ่งนำไปสู่ภาวะกระดูกพรุนที่มีการหมุนเวียนของกระดูกต่ำ [27,28] นอกจากนี้ ความหลากหลายของยีน klotho จำเพาะสัมพันธ์กับความหนาแน่นของแร่ธาตุกระดูกที่ลดลงในมนุษย์ [29,30] โคลโทที่ละลายน้ำได้เพิ่มการควบคุมโปรตีนตอบสนองการเจริญเติบโตในช่วงต้น 1 (EGR-1) และกระตุ้นการแสดงออกของเครื่องหมายความแตกต่างของกระดูกในการเพาะเลี้ยงเซลล์สร้างกระดูก [31]นอกจากนี้ กลูโคคอร์ติคอยด์ยังสามารถยับยั้งปัจจัยการเจริญเติบโตของไฟโบรบลาสต์ 232] บางทีการแสดงออกของ klotho ที่มากขึ้นในแกะบน glucocorticoids เป็นเวลา 2 เดือนและทำการุณยฆาตที่ 5 เดือนนั้นสะท้อนถึงกระบวนการฟื้นตัวสำหรับการรักษาหลังการให้ glucocorticoid กับแกะ และด้วยบทบาทในการสร้างกระดูกและการสลายของกระดูก น่าจะเป็นตัวขับเคลื่อนหลักของการฟื้นฟูกระดูก และดังนั้นจึงอาจเป็นเป้าหมายการรักษาโรคกระดูกพรุนในมนุษย์

อย่างไรก็ตาม แกะ OVX มีการแสดงออกของ klotho เพิ่มขึ้นเมื่อเทียบกับแกะควบคุม ในทำนองเดียวกัน การศึกษาหนึ่งในหนูที่ขาดอะโรมาเทสพบว่าการขาดฮอร์โมนเอสโตรเจนเพิ่มระดับโปรตีน klotho และการรักษาด้วย estradiol ลดการแสดงออกของ klotho ในหนูเหล่านี้ [17] ในหนูทดลอง เอสโตรเจนปรับลด NPT2a ในกระบวนการที่ไม่ขึ้นกับ klotho/FGF23 และ PTH[18] อย่างไรก็ตาม ไม่พบผลกระทบนี้ในแกะที่ตัดรังไข่ในการศึกษานี้ มิฉะนั้น มีวรรณกรรมเพียงเล็กน้อยเกี่ยวกับผลของการขาดฮอร์โมนเอสโตรเจนต่อโคลโท การวิจัยเพิ่มเติมควรตรวจสอบผลของทั้งการทำรังไข่และกลูโคคอร์ติคอยด์ต่อการแสดงออกของโคลโท เนื่องจากมีบทบาทในการสูงวัยและในโรคไตเรื้อรัง

TRPV5 เป็นช่องแคลเซียมเยื่อบุผิวซึ่งส่วนใหญ่แสดงออกในท่อปลายโค้งและท่อเชื่อมต่อของไต [20,33] ช่อง TRPV5 เป็นแบบเปิดโล่ง แต่ผ่านการยับยั้งที่ขึ้นกับแคลเซียมร่วมกับสารคาโมดูลิน ซึ่งเป็นโปรตีนที่ไวต่อแคลเซียม [34] นิพจน์ TRPV5 สามารถเพิ่มได้โดย PTH และ 1,25(OH)D3 [35] แกะหนึ่งตัวที่ได้รับกลูโคคอร์ติคอยด์เป็นเวลา 2 เดือนและทำการุณยฆาตที่ 5 เดือนเป็นภาวะแคลเซียมในเลือดต่ำ และความเข้มข้นของแคลเซียมในเลือดในกลุ่มนี้ลดลงอย่างมีนัยสำคัญเมื่อเทียบกับกลุ่มอื่น ดังนั้นจึงเป็นไปได้ที่การแสดงออกของ TRPV5 ที่เพิ่มขึ้นนั้นเป็นผลมาจากความเข้มข้นของแคลเซียมในซีรัมที่ลดลงในสัตว์เหล่านี้ Glucocorticoids ได้รับการแสดงเพื่อลดการดูดซึมแคลเซียมในลำไส้โดยการลดการแสดงออกของ TRPV6 และ CalD9k [36,37] และเพิ่มการขับแคลเซียมในปัสสาวะ [14] แต่ภาวะแคลเซียมในเลือดต่ำที่มีนัยสำคัญทางคลินิกในบุคคลที่มีสุขภาพดีเป็นเรื่องปกติ ในทำนองเดียวกัน แกะที่มีความเข้มข้นของแคลเซียมในเลือดต่ำก็ไม่แสดงอาการทางคลินิกของภาวะแคลเซียมในเลือดต่ำ อีกทางหนึ่ง การแสดงออกที่เพิ่มขึ้นของ TRPV5 ในแกะที่ใช้ยากลูโคคอร์ติคอยด์เป็นเวลา 2 เดือน และจากนั้นการุณยฆาตที่ 5 เดือน อาจสะท้อนถึงกระบวนการฟื้นฟู โดยการเปลี่ยน BMD ของ trabecular ที่กู้คืน พื้นที่ และปริมาณแร่ธาตุในกระดูก จำเป็นต้องมีการสลายแคลเซียมจากไตเพิ่มขึ้น

ในแกะที่ได้รับกลูโคคอร์ติคอยด์เป็นเวลา 5 เดือน การแสดงออกของ PTH1R เพิ่มขึ้นเมื่อเทียบกับกลุ่มอื่นๆ นอกจากนี้ เมื่อเปรียบเทียบกับกลุ่มอื่น แกะในกลุ่มมีความแตกต่างกันเล็กน้อย แม้ว่าจะไม่พบความแตกต่างในความเข้มข้นของแคลเซียมในเลือดในแกะที่รักษาด้วยกลูโคคอร์ติคอยด์เป็นเวลา 5 เดือน แต่บางทีสิ่งนี้อาจเกี่ยวข้องกับการกระทำที่เพิ่มขึ้นของ PTH และตัวรับของมัน ผลกระทบของกลูโคคอร์ติคอยด์ต่อการหลั่งและการทำงานของ PTH นั้นไม่ชัดเจน การศึกษาบางชิ้นในมนุษย์พบว่าผู้ป่วยที่ได้รับกลูโคคอร์ติคอยด์เพิ่มความเข้มข้นของ PTH ในซีรัม ควบคู่ไปกับการดูดซึมแคลเซียมที่ลดลง การขับแคลเซียมในปัสสาวะเพิ่มขึ้น และมวลกระดูกลดลง [38,39] อย่างไรก็ตาม การศึกษาส่วนใหญ่ไม่พบการเปลี่ยนแปลงความเข้มข้นของ PTH ในซีรัมในมนุษย์ในการรักษากลูโคคอร์ติคอยด์ [38,40,41] งานวิจัยชิ้นหนึ่งแสดงให้เห็นว่าบางทีผลกระทบของกลูโคคอร์ติคอยด์อาจส่งผลต่อการเปลี่ยนแปลงการหลั่งของ PTH โดยเพิ่มการหลั่งของ PTH แบบพัลซาไทล์ในบุคคลที่ได้รับกลูโคคอร์ติคอยด์[4] อื่นๆ ยังแสดงการแสดงออกของ PTH1R ที่เพิ่มขึ้นในเซลล์ต้นกำเนิดจากเยื่อหุ้มเซลล์และเซลล์ที่มีลักษณะคล้ายเซลล์สร้างกระดูกเพื่อตอบสนองต่อการรักษาด้วยเดกซาเมทาโซน[43,44] ดังนั้น การเพิ่มขึ้นของการแสดงออกของ PTH1R ของไตในแกะที่รักษาด้วยกลูโคคอร์ติคอยด์เป็นเวลา 5 เดือนน่าจะมาจากการรักษากลูโคคอร์ติคอยด์เป็นเวลา 5 เดือน

ในขณะที่การตัดรังไข่ร่วมกับอาหารที่มีแคลเซียมต่ำเพียงเล็กน้อยทำให้เกิดการเปลี่ยนแปลงในการแสดงออกของยีนเพียงเล็กน้อย ดูเหมือนว่าจะทำให้การแสดงออกของ VDR เปลี่ยนแปลงไป โดยที่แกะที่ตัดรังไข่ออกด้วยอาหารแคลเซียมต่ำเพียงเล็กน้อยซึ่งมีการแสดงออกของ VDR มากกว่าเมื่อเทียบกับแกะควบคุม ซึ่งตรงกันข้ามกับการศึกษาในหนูที่ตัดรังไข่โดยที่อาหารที่มีระดับแคลเซียมปกติมีการแสดงออกของ VDR ของไตเพิ่มขึ้น ในขณะที่อาหารที่มีแคลเซียมต่ำทำให้การแสดงออกของ VDR ลดลง [45] การศึกษาแกะในปัจจุบันนี้เป็นเรื่องยากที่จะแยกผลของการตัดรังไข่ออกต่อการแสดงออกของไตของ VDR ออกจากผลของอาหารที่มีแคลเซียมต่ำ อย่างไรก็ตาม ไม่มีความแตกต่างอย่างมีนัยสำคัญในความเข้มข้นของแคลเซียมในซีรัมระหว่างกลุ่ม (ยกเว้นกลุ่มกลูโคคอร์ติคอยด์) ซึ่งแนะนำว่าการรับประทานอาหารที่มีแคลเซียมต่ำอย่างเล็กน้อยมีผลเพียงเล็กน้อย และบางทีผลกระทบต่อ VDR อาจเกิดจากการตัดรังไข่ อย่างไรก็ตาม จำเป็นต้องมีการวิจัยเพิ่มเติมเพื่อตรวจสอบความสัมพันธ์เหล่านี้

การศึกษาก่อนหน้านี้สองครั้งได้ตรวจสอบความสัมพันธ์ระหว่างยีนที่ตอบสนองต่อวิตามินดีและยีนที่เกี่ยวข้องกับฟอสเฟตในไตแกะ [20,21] อย่างไรก็ตาม ความสัมพันธ์ระหว่างวิตามินดีกับวิถีฟอสเฟตยังไม่ได้รับการตรวจสอบ ที่น่าสนใจ ความสัมพันธ์ที่สำคัญที่สุดระหว่างยีนที่รายงานในเอกสารทั้งสองนี้ถือเป็นจริงสำหรับความสัมพันธ์ของยีนในการศึกษาแกะในปัจจุบันนี้เช่นกัน ซึ่งชี้ให้เห็นถึงความสม่ำเสมอในผลลัพธ์ระหว่างการศึกษาและความสัมพันธ์ระหว่างยีนเหล่านี้ซิสแทนเช่ซัลซ่าสารสกัดจากจากความสัมพันธ์ที่น่าสนใจที่ไม่เคยมีการรายงานมาก่อน อย่างที่เราคาดหวังจากบทบาทสำคัญในการเผาผลาญแคลเซียม การแสดงออกของ PTH1R มีความสัมพันธ์อย่างมากกับ CalD28k, CalD9k, TRPV5 CYP27B1, CYP24A1, VDR, Klotho และ NPT2c การแสดงออกของ klotho มีความสัมพันธ์อย่างมากกับการแสดงออกของยีนของ TRPV5 ซึ่งสอดคล้องกับวรรณกรรมอื่นๆ ที่แสดงว่า klotho ควบคุม TRPV5 และส่งเสริมการดูดซึมแคลเซียมในไตอีกครั้ง [46,47]

น่าเสียดายที่ไม่สามารถแยกกลุ่มต่าง ๆ ตามการแสดงออกของยีนที่ตอบสนองต่อวิตามินดีและฟอสเฟตโดยใช้การวิเคราะห์ PCA น่าจะเป็นเพราะข้อจำกัดหลักของการศึกษานี้—ขนาดกลุ่มตัวอย่างที่เล็ก มีสัตว์เพียง 3-6 ตัวในแต่ละกลุ่ม ซึ่งอาจจำกัดความสามารถในการตรวจหาความแตกต่างในการแสดงออกของยีนระหว่างกลุ่ม

5. สรุปผลการวิจัย

ผลจากการศึกษานี้แสดงให้เห็นว่าความแตกต่างที่ชัดเจนที่สุดในการแสดงออกของยีนคือการแสดงออกของ klotho ของไตในแกะที่ตัดรังไข่ที่รักษาด้วย glucocorticoids เป็นเวลา 2 เดือน ตามด้วยระยะเวลาการกู้คืน 5 เดือน เนื่องจากโคลโทเป็นฮอร์โมน "ต่อต้านวัย" และมีบทบาทสำคัญในการเผาผลาญแคลเซียมและฟอสเฟต จึงเป็นไปได้ว่าฮอร์โมนนี้มีส่วนเกี่ยวข้องอย่างยิ่งในการฟื้นตัวของความหนาแน่นของกระดูก trabecular และพื้นที่ในแกะที่ได้รับการรักษา และอาจเป็นไปได้ว่า เป้าหมายการรักษาโรคกระดูกพรุนในมนุษย์ อย่างไรก็ตาม จำเป็นต้องมีการวิจัยเพิ่มเติมเกี่ยวกับผลกระทบของ glucocorticoids และ ovariectomy ต่อ klotho

บทความนี้คัดมาจาก สัตว์ 2022, 12, 67 https://doi.org/10.3390/ani12010067 https://www.mdpi.com/journal/animals