อนุพันธ์เบนโซควิโนนต่อต้านริ้วรอยนวนิยายจาก Onosma Bracteatum Wall

โปรดติดต่อoscar.xiao@wecistanche.comสำหรับข้อมูลเพิ่มเติม

เชิงนามธรรม:จุดมุ่งหมายของการศึกษานี้คือการศึกษาโมเลกุลต่อต้านริ้วรอยจากผนัง Onosma bracteatum Wall ซึ่งเป็นพืชสมุนไพรแบบดั้งเดิมที่ใช้ในระบบการแพทย์ Unani และ Ayurvedic ในระหว่างการแยกด้วยการทดสอบทางชีวภาพ เบนโซควิโนนที่รู้จัก 2 ชนิด ได้แก่ อัลโลมิโครฟีลโลน (1) และเอเรติกีโนน (2) ร่วมกับเบนโซควิโนนชนิดใหม่ 3 ชนิดที่กำหนดเป็น ehretiquinones BD(3-5) แยกได้จาก O. bracteatum โครงสร้างของพวกเขามีลักษณะเฉพาะโดยการวิเคราะห์ทางสเปกโตรสโกปีผ่าน 1D และ 2D NMR โดยการวิเคราะห์ MS spectroscopic และเปรียบเทียบกับรายงานในวรรณคดีsistancheศักยภาพในการต่อต้านริ้วรอยของเบนโซควิโนนที่แยกได้นั้นได้รับการประเมินโดยการทดสอบอายุขัยของยีสต์ และผลการวิจัยพบว่า 1,2,4 และ 5 ช่วยยืดอายุการทำซ้ำของยีสต์ K6001 อย่างมีนัยสำคัญ ซึ่งบ่งชี้ว่าเบนโซควิโนนเหล่านี้ที่ได้จาก O. bracteate มีความสามารถในการ ใช้เป็นยารักษาโรคที่มีศักยภาพสำหรับโรคที่เกี่ยวข้องกับอายุ

คำสำคัญ:ต่อต้านริ้วรอย; Onosma bracteatum; การอธิบายโครงสร้าง เบนโซควิโนน; อายุขัยซ้ำ; K6001

Anti-aging（,

กรุณาคลิกที่นี่เพื่อทราบข้อมูลเพิ่มเติม

1. บทนำ

การแก่ชราเป็นกระบวนการทางธรรมชาติที่สังเกตได้จากการทำงานทางสรีรวิทยาที่เสื่อมลงเรื่อยๆ และอัตราการตายเพิ่มขึ้น และมักมาพร้อมกับโรคต่างๆ ของมนุษย์ เช่น โรคหัวใจและหลอดเลือด เบาหวาน โรคหลอดเลือดสมอง มะเร็ง และโรคเกี่ยวกับระบบประสาท (โรคพาร์กินสันและอัลไซเมอร์)[1] ความก้าวหน้าในการปฏิบัติด้านสาธารณสุข การศึกษา และการแพทย์ไม่เพียงแต่ทำให้อายุขัยยืนยาวขึ้นเท่านั้น แต่ยังเพิ่มจำนวนประชากรสูงอายุอีกด้วย จากข้อมูลขององค์การอนามัยโลก (WHO) ประชากรที่มีอายุ 60 ปีจะเพิ่มขึ้นเป็นสองเท่าภายในปี 2050 [2] อายุขัยที่เพิ่มขึ้นยังเพิ่มความชุกของโรคที่เกี่ยวข้องกับอายุอีกด้วย ดังนั้นกลยุทธ์ในการค้นหาโมเลกุลต่อต้านวัยจึงมีความสำคัญอย่างยิ่ง [3] ผลิตภัณฑ์จากธรรมชาติเป็นแหล่งค้นคว้ายาที่สำคัญตั้งแต่สมัยโบราณ และยาในปัจจุบันจำนวนมากได้มาจากแหล่งธรรมชาติ ในการศึกษาก่อนหน้านี้ เรารายงานสารประกอบธรรมชาติจำนวนมากที่มีคุณสมบัติในการต่อต้านริ้วรอยโดยใช้วิธีวิเคราะห์ทางชีวภาพของยีสต์ K6001 การจำลองช่วงชีวิต [-6] การทดสอบนี้มักใช้เนื่องจากยีสต์มีราคาไม่แพงและมีความสามารถในการทำซ้ำได้ดีเมื่อเทียบกับสิ่งมีชีวิตแบบจำลองอื่นๆ เช่น แมลงวันน้ำส้มสายชู หนู และไส้เดือนฝอย [7-10] ในปี พ.ศ. 2547 Jarolim et al. ได้อธิบายระบบการทดสอบทางชีวภาพแบบใหม่ที่มีสายพันธุ์ยีสต์ K6001 เพื่อปรับปรุงการทดสอบอายุขัย 11]ต่อต้านริ้วรอย cistancheOnosma bracteatum Wall เป็นของครอบครัว Boraginaceae เป็นที่รู้จักกันในชื่อ Gaozaban ในระบบการแพทย์ Unani และ Sedge ในตะวันออกกลาง O.bracteatum มักใช้เป็นยาขับปัสสาวะ ยาแก้ท้องเฟ้อ ยาขับปัสสาวะ ยาเพิ่มภูมิคุ้มกัน และยาคลายกล้ามเนื้อ และเป็นส่วนประกอบสำคัญของสูตรอายุรเวทต่างๆ สำหรับการรักษาโรคความดันโลหิตสูง โรคเรื้อน โรคไขข้อ และโรคหอบหืด [12,13] การศึกษาทางเภสัชวิทยาเกี่ยวกับ O.bracteatum รายงานว่ามีฤทธิ์ต้านเชื้อแบคทีเรีย ยาแก้ปวด สารต้านอนุมูลอิสระ และการรักษาบาดแผล [14-16] นอกจากนี้ยังมีกิจกรรมการยับยั้ง acetyl-cholinesterase และ NADH oxidase นอกจากนี้ยังมีคาร์โบไฮเดรต กรดไขมัน ฟลาโวนอยด์ แทนนิน ไกลโคไซด์ และองค์ประกอบฟีนอล[12,15] วัตถุประสงค์ของการศึกษานี้คือเพื่อให้ได้สารประกอบต่อต้านวัยจาก O. bracteatum โดยใช้การทดสอบทางชีวภาพของยีสต์ K6001 จำลองแบบชีวภาพcistanche คืออะไรสารประกอบ Arti-aging (1, 2, 4 และ 5) และสารประกอบที่ไม่ออกฤทธิ์ 3 ถูกทำให้บริสุทธิ์จาก O.bracteatum โดยคอลัมน์โครมาโตกราฟีและแสดงลักษณะเฉพาะโดยการวิเคราะห์ทางสเปกโตรสโกปีและเปรียบเทียบกับข้อมูลที่อธิบายไว้ในรายงานที่ตีพิมพ์ก่อนหน้านี้ (รูปที่ 1)?

2. ผลลัพธ์

2.1. การแยกตัว

วัสดุพืชแห้งของ O.bracteatum ถูกบดให้เป็นผงสม่ำเสมอและสกัดด้วยเมทานอลเพื่อให้ได้สารสกัดหยาบ สารสกัดที่ยังไม่ผ่านกระบวนการจึงถูกแบ่งส่วนระหว่างเอทิลอะซิเตตกับน้ำ หลังจากการประเมินทางชีวภาพของตัวอย่างเอทิลอะซิเตตและชั้นน้ำ ตัวอย่างชั้นเอทิลอะซิเตตที่ออกฤทธิ์ถูกนำไปยังชุดของซิลิกาเจลและโครมาโตกราฟีแบบคอลัมน์เปิด ODS ภายใต้การแนะนำของระบบการวิเคราะห์ทางชีวภาพ และสุดท้ายถูกทำให้บริสุทธิ์โดย HPLC เพื่อให้ผลผลิตสองอย่างที่ทราบ (1 และ 2) และนวนิยายสามเล่ม (3-5) อนุพันธ์เบนโซควิโนน โครงสร้างของเบนโซควิโนนที่รู้จักถูกระบุว่าเป็น allomicrophyllone (1,00043 เปอร์เซ็นต์ของน้ำหนักแห้ง)[17,18] และ ehretiquinone (2,0 0013 เปอร์เซ็นต์ )[19] ในขณะที่โครงสร้างของเบนโซควิโนนใหม่ได้รับการอธิบายและตั้งชื่อเป็น ehretiquinone B(3, 0.00023 เปอร์เซ็นต์ ), ehretiquinone C(4,0.00014 เปอร์เซ็นต์ ) และ ehretiquinone D(5,0.00028 เปอร์เซ็นต์ )( รูปที่ 1) โดยการวิเคราะห์ทางสเปกโทรสโกปี ซึ่งรวมถึง 1D และ 2DNMR, HR-ESI-TOF-MS และการเปรียบเทียบข้อมูลทางสเปกโตรสโกปีกับข้อมูลที่รายงานในเอกสารประกอบ (ดู วัสดุเสริม)

anti aging4

Cistanche สามารถต่อต้านริ้วรอย

2.2.การอธิบายโครงสร้าง1

Ehretiquinone B (3) ได้มาในรูปของผงสีแดงและสูตรโมเลกุล (C2.H20Os) ของมันถูกกำหนดโดย HR-ESI-TOF-MS ข้อมูล'H NMR (ตารางที่ 1) แสดงการมีอยู่ของโปรตอนอะโรมาติกสามตัวที่ oH6.53,6.57 และ 6.61 ซึ่งสอดคล้องกับ 1,2,4-เบนซีนไตรแทนที่; สอง cis olefinic protons ที่ δy 6.85 และ 6.52; สองโปรตอนทรานส์โอเลฟินิกที่ bH 6.18 และ δH 5.68; โปรตอนโอเลฟินิกสามตัวที่ H 5.13,5.31 และ0H 5.64; โปรตอนเมทิลีนสองตัวที่ OH 2.52 และ 0H 2.78; หมู่เมทิลีนที่มีออกซิเจนหนึ่งหมู่ที่ bH4.20; โปรตอนมีไทน์หนึ่งตัวที่ bμ 3.83 และหนึ่งหมู่เมทิลที่ δH 1.69 ข้อมูล The13C NMR (ตารางที่ 2) แสดงการมีอยู่ของสัญญาณคาร์บอน 22 ตัว สัญญาณเหล่านี้เกิดจากคีโตนสองกลุ่ม (6c 195.4,193.1), 1,2,4-เบนซีนไตรสารทดแทน (6c114.3,114.9,117.6,127.5,144.9 และ 150.0), คาร์บอนโอเลฟินิกแปดตัว(6c118.2,122.5,124.6 ,131.9,134.0,138.7, 139.4 และ 143.8), คาร์บอนควอเทอร์นารีออกซิเจนหนึ่งตัว (c 80.6), ออกซีเมทิลีนหนึ่งตัว (6c62.9), คาร์บอนควอเทอร์นารีหนึ่งตัว (6c 55.4), หนึ่งมีไทน์ (6c 39.3), หนึ่งเมทิลีน (6c 36.2) และหมู่เมทิลหนึ่งหมู่ (6c 22.7)ซิสทานเช เบเนฟิซิโอสสเปกตรัม 'H-1H COZY ระบุสัญญาณความสัมพันธ์ระหว่าง H-5 และ H-6; H-7 และ H-8; H-5'และ H-6'; H-7'และ H-8' จากสัญญาณเหล่านี้ ได้ชิ้นส่วนโครงสร้างของ 3 ดังแสดงในรูปที่ 2 สเปกตรัม HMBC ระบุความสัมพันธ์ที่สำคัญของ H-13C ต่อไปนี้: H-3 ถึง C-4; H-5 ถึง C-1 และ C-3;H-6 ถึง C-1 และ C-4;H-7 ถึง C -1, C-3, C-9 และ C-3';H-8 ถึง C-11;H-11 ถึง C -8, C-9 และ C-10;H-5'to C-3';H-6' ถึง C-2 'และ C-4';H-7' ถึง C-1', C-2', C-3'และ C-9'; H-8'to C-9'and H-11'to C-9'and C-10' บนพื้นฐานของสัญญาณเหล่านี้ ชิ้นส่วนของโครงสร้าง เชื่อมต่อเพื่อให้ได้โครงสร้างระนาบของ 3 ดังอธิบายในรูปที่ 2

anti aging3

สารสกัดจาก Cistanche ป้องกันรังสี

การกำหนดค่าสัมพัทธ์ของ 3 ถูกกำหนดโดยความสัมพันธ์ของ NOESY และค่าคงที่ของการมีเพศสัมพันธ์ ค่าคงที่ของคัปปลิ้ง (s 6=10.5 Hz) ระบุการกำหนดค่า cis ของโปรตอนที่ตำแหน่ง 5' และ 6' ในขณะที่ค่าคงที่คัปปลิ้งขนาดใหญ่ (Jzg,=16.5 Hz) และความสัมพันธ์ NOESY ระหว่าง H{ {7}}'/H-7'(รูปที่ 3) แนะนำการกำหนดค่าทรานส์ของโปรตอนที่ 7' และ 8' ใน 3 ในสเปกตรัม NOESY ความสัมพันธ์ระหว่าง H-11/H{{ 14}} ยืนยันโครงแบบทรานส์ของพันธะคู่ และ H-10/H-7'(รูปที่ 3) ระบุทิศทางเดียวกันของโปรตอนเหล่านี้ และพบว่ามันเหมือนกับเอเรติควิโนน (2)[ 19]. นอกเหนือจากความสัมพันธ์ NOESY ที่เหมือนกันแล้ว 'H NMR และ 13C NMR ของ 3 และ ehretiquinone (2) ที่ 2',3' และ 7 ตำแหน่ง และใกล้กับตำแหน่งเหล่านี้ ยังเหมือนกันซึ่งสนับสนุนการกำหนดค่าสัมพัทธ์ที่เหมือนกันของ 3 และ เอเรติควิโนน (2). ในขณะที่เปรียบเทียบ 3 กับเอเรติควิโนน (2) ข้อมูลสเปกโทรสโกปีเสนอว่าหมู่เมทิลที่ C-11' ในเอเรติควิโนน (2) ถูกแทนที่ด้วย CH2OH ใน 3 โครงสร้างที่เหลือของ 3 พบว่าเหมือนกันกับเอเรติควิโนน ( 2) ดังแสดงในรูปที่ 1 ดังนั้น โครงสร้างของ 3 จึงถูกกำหนดและตั้งชื่อว่า ehretiquinone B(รูปที่ 1)

Ehretiquinone C(4) ได้มาเป็นผงสีแดง สูตรโมเลกุลของ 4(C22H20Os) ถูกกำหนดหาโดย HR-ESI-TOF-MS ข้อมูล'H NMR และ 13C NMR ของ 4 (ตารางที่ 1 และ 2) แสดงให้เห็นว่า4 มีความคล้ายคลึงกันมากกับเอเรติควิโนน (2) ความแตกต่างระหว่างสารประกอบคือการแทนที่ของ CH3 (6H1.70,bc22.7)in2 โดย CH2OH(6H4.05,6c 65.8) ใน 4 ที่ตำแหน่ง 11 ดังแสดงในรูปที่ 1 ความแตกต่างได้รับการยืนยันโดย HMBCcorrelation ระหว่าง H{ {30}} ถึง C-11 และ H-11 ถึง C-8, C-9 และ C-10 ดังแสดงในรูปที่ 2 ในขณะเดียวกัน ความสัมพันธ์ 'H-13C อื่นๆ และสหสัมพันธ์ COZY เหมือนกันกับ 3 สเปกตรัมสหสัมพันธ์ NOESY ระบุว่าการกำหนดค่าสัมพัทธ์ของ 4 นั้นคล้ายคลึงกับของ ehretiquinone B (3) (รูปที่ 3) ดังนั้น โครงสร้างของ 4 จึงถูกกำหนดและตั้งชื่อว่า ehretiquinone C (รูปที่ 1)

ได้รับ Ehretiquinone D(5) เป็นผงสีเหลือง สูตรโมเลกุลของ 5(C, H2O) ถูกกำหนดหาโดย HR-ESI-TOF-MS ข้อมูล 'H NMR และ 13C NMR data (ตารางที่ 1 และ 2) เกือบจะเหมือนกันทุกประการกับของ allomicrophyllone (1)[17,18 ]. การเปรียบเทียบ 5 และ allomicrophyllone (1) ระบุว่า CH3 (OH 1.16,δc 29.8) ที่ตำแหน่ง 10' ใน allomicrophyllone (1) ถูกแทนที่ด้วย CH, OH(6H 3.41,6c69.7) ใน 5 ซึ่งได้รับการยืนยันเพิ่มเติมโดย ความสัมพันธ์ของ HMBC ระหว่างตำแหน่ง H-8'to C-10'; H-11'to C-10'and H-10' to C-8' ดังแสดงในรูปที่ 2 ส่วนที่เหลือ-13CHMBCand LH{{36 }}พบว่าความสัมพันธ์ของ H COZY มีความคล้ายคลึงกับความสัมพันธ์ของ ehretiquinone B (3) และ ehretiquinone C (4) (รูปที่ 2) การกำหนดค่าสัมพัทธ์ของ 5 ซึ่งวัดโดยสเปกตรัม NOESY พบว่าคล้ายกับเอเรติควิโนนบี (3) อย่างไรก็ตาม ตำแหน่ง 9'ของสายโซ่ข้างที่ติดอยู่ที่ 2' เป็นจุดศูนย์กลางของไครัล และจำเป็นต้องมีการสร้างวิธีการสำหรับสเตอริโอเคมีดังกล่าว และสเตอริโอเคมีของตำแหน่ง 9' จะยังคงได้รับการชี้แจง ดังนั้น โครงสร้างของ 5 จึงถูกกำหนดและตั้งชื่อว่า ehretiquinone D (รูปที่ 1) ได้รับ Allomicrophyllone (1) เป็นผงสีเหลือง สูตรโมเลกุลของ1(C2.H2O5)ถูกกำหนดหาโดย HR-ESI-TOF-MS และระบุโดยการเปรียบเทียบข้อมูล MS,' H NMR และ 13C NMR กับเอกสารประกอบ [17,18] ได้รับ Ehretiquinone (2) เป็นผงสีแดง สูตรโมเลกุลของ 2(C2H2Oa) ถูกกำหนดหาโดย HR-ESI-TOF-MS และระบุบนพื้นฐานของการเปรียบเทียบข้อมูล MS, 1H NMR และ 13C NMR กับข้อมูลเหล่านั้นในวรรณคดี [19]

anti aging2