การสูบไอไม่เหมือนกันทั้งหมด: ผลต่างของปอดของการสูบไอแคนนาบิไดออลกับนิโคติน

 เชิงนามธรรม

Rational Vaping กลายเป็นวิธีการยอดนิยมในการสูดดมสารออกฤทธิ์ทางจิตหลายชนิด แม้ว่าการประเมินผลกระทบต่อระบบทางเดินหายใจของการสูบไอจะมุ่งเน้นไปที่ผลิตภัณฑ์ที่มีนิโคตินเป็นหลัก แต่การสูบไอด้วยสารแคนนาบิไดออล (CBD) ก็กำลังได้รับความนิยมมากขึ้นเรื่อยๆ ปัจจุบันยังไม่ทราบแน่ชัดว่าผลกระทบด้านสุขภาพจากการสูบนิโคตินและสารแคนนาบินอยด์มีความคล้ายคลึงกันหรือไม่

วัตถุประสงค์

การศึกษานี้เปรียบเทียบผลข้างเคียงของปอดจากการสูดดม CBD แบบระเหยแบบเฉียบพลันเทียบกับนิโคติน

วิธีการ

การศึกษาการหายใจเข้าในสิ่งมีชีวิตในหนูและการทดลองความเป็นพิษต่อเซลล์ในหลอดทดลองกับเซลล์ของมนุษย์ได้ดำเนินการเพื่อประเมินผลกระทบที่ทำให้เกิดความเสียหายในปอดของ CBD หรือละอองลอยนิโคตินที่ปล่อยออกมาจากอุปกรณ์สูบไอ

คุณประโยชน์อาหารเสริม cistanche - เพิ่มภูมิคุ้มกัน

การวัดและผลลัพธ์หลัก

การอักเสบของปอดในหนูได้รับคะแนนโดยมิญชวิทยา โฟลว์ไซโตเมทรี และการหาปริมาณระดับของไซโตไคน์และคีโมไคน์ที่ทำให้เกิดการอักเสบ ความเสียหายของปอดได้รับการประเมินโดยมิญชวิทยา การวัดการทำงานของไมอีโลเพอรอกซิเดส และระดับนิวโทรฟิลอีลาสเทสในของเหลวสำหรับล้างหลอดลมและเนื้อเยื่อปอด ความสมบูรณ์ของเยื่อบุผิว/เยื่อบุผนังปอดได้รับการประเมินโดยการหาปริมาณระดับโปรตีน BAL, การรั่วไหลของอัลบูมิน และการรั่วไหลของ FITC-เด็กซ์แทรนในปอด ความเครียดจากการเกิดออกซิเดชันถูกกำหนดโดยการวัดศักยภาพของสารต้านอนุมูลอิสระใน BAL และปอด ประเมินผลกระทบทางพิษต่อเซลล์ของ CBD และละอองนิโคตินต่อนิวโทรฟิลของมนุษย์และเซลล์เยื่อบุผิวทางเดินหายใจขนาดเล็กของมนุษย์ได้รับการประเมินโดยใช้ระบบเชื่อมต่ออากาศและของเหลว ในหลอดทดลอง การสูดดมละออง CBD ส่งผลให้เกิดการเปลี่ยนแปลงการอักเสบมากขึ้น ความเสียหายของปอดรุนแรงมากขึ้น และความเครียดจากปฏิกิริยาออกซิเดชันที่สูงขึ้นเมื่อเทียบกับนิโคติน ละอองลอย CBD ยังแสดงความเป็นพิษต่อเซลล์ของมนุษย์สูงกว่าเมื่อเทียบกับนิโคติน

ข้อสรุป

การสูบไอของ CBD ทำให้เกิดการตอบสนองต่อการอักเสบที่รุนแรง และนำไปสู่การเปลี่ยนแปลงทางพยาธิสภาพที่เกี่ยวข้องกับการบาดเจ็บของปอดมากกว่าการสูบไอนิโคติน

การแนะนำ

ทศวรรษ 1990 เป็นทางเลือกหนึ่งของการใช้กัญชา โดยทั่วไปเครื่องพ่นไอระเหยของกัญชาเป็นอุปกรณ์ขนาดใหญ่ที่ให้ความร้อนแก่สมุนไพรกัญชาแห้งจนถึงขั้นทำให้กลายเป็นไอของสารแคนนาบินอยด์ ในช่วงต้นทศวรรษ 2000 เครื่องพ่นไอระเหยแบบพกพาขนาดเล็กได้กลายมาเป็น "บุหรี่ไฟฟ้า" และกลายเป็นรูปแบบที่นิยมใช้ในการบริหารนิโคติน1 บุหรี่ไฟฟ้าให้ความร้อนกับนิโคตินในสารละลายแทนที่จะให้ความร้อนจากใบยาสูบแห้ง เมื่อเร็วๆ นี้ เครื่องพ่นไอในตลาดกัญชาได้ติดตามการเปลี่ยนแปลงที่คล้ายกัน โดยมีการใช้สารสกัดกัญชาเหลวมากขึ้น2–7 สเปรย์ที่ปล่อยออกมาจากผลิตภัณฑ์สูบไอไม่เพียงแต่ประกอบด้วยสารออกฤทธิ์ทางจิต เช่น นิโคตินและแคนนาบินอยด์เท่านั้น (โดยหลักคือ tetrahydrocannabinol (THC) และ cannabidiol (CBD)) แต่ยังเป็นพิษต่อระบบทางเดินหายใจด้วย (เช่น ฟอร์มาลดีไฮด์ อะโครลีน เบนซาลดีไฮด์)8–11 องค์ประกอบทางเคมีหลายชนิดที่เกี่ยวข้องกับการสูบนิโคตินและแคนนาบินอยด์มีความคล้ายคลึงกัน และองค์ประกอบอื่นๆ ก็แตกต่างกันมาก โดยให้ความสำคัญกับการพิจารณาปัญหาเหล่านี้ในบริบทของการทำความเข้าใจผลที่ตามมาของระบบทางเดินหายใจของ สูบไอสารทั้งสอง ตัวอย่างเช่น ตัวทำละลายที่ใช้ในผลิตภัณฑ์สูบไอที่มีนิโคตินและแคนนาบินอยด์อาจแตกต่างกัน เนื่องจากคุณสมบัติไลโปฟิลิกของแคนนาบินอยด์12 วิตามินอีอะซิเตตถูกระบุว่าเป็นสารเติมแต่งในผลิตภัณฑ์สูบไอที่มีสาร THC และมีบทบาทสำคัญในการระบาดในปี 2019 ของบุหรี่ไฟฟ้าและการบาดเจ็บที่ปอดที่เกี่ยวข้องกับการสูบไอ (VALI)13 14 การศึกษาจำนวนจำกัดเกี่ยวกับผลกระทบต่อระบบทางเดินหายใจของการสูบไอมุ่งเน้นไปที่ผลิตภัณฑ์ที่มีนิโคตินเป็นหลัก การศึกษาในหลอดทดลองชี้ให้เห็นว่าการสูบนิโคตินสามารถกระตุ้นเซลล์ภูมิคุ้มกันและทำให้การทำงานหลักบางอย่างของพวกมันลดลง15 การศึกษาในสัตว์ทดลองแสดงให้เห็นว่าการสัมผัสนิโคตินจากบุหรี่ไฟฟ้าส่งผลเสียต่อการตอบสนองทางระบบภูมิคุ้มกัน16 17 การศึกษาเชิงสังเกตของมนุษย์แสดงให้เห็นว่าการสูบนิโคตินยับยั้ง ลักษณะต่างๆ ของระบบภูมิคุ้มกันโดยธรรมชาติในเซลล์เยื่อบุผิวในจมูก18 19 การศึกษาทางระบาดวิทยาได้รายงานความสัมพันธ์ระหว่างการสูบไอนิโคตินกับภาวะระบบทางเดินหายใจเรื้อรัง (ไอเรื้อรัง หลอดลมอักเสบ หอบหืด)20–24 นับตั้งแต่การวิจัยเกี่ยวกับผลลัพธ์ด้านสุขภาพระบบทางเดินหายใจและภูมิคุ้มกันที่เกี่ยวข้อง เมื่อใช้กัญชาจะเน้นไปที่กัญชารมควันโดยเฉพาะ25–31 ปัจจุบันยังไม่ทราบว่าผลกระทบต่อสุขภาพจากการสูบนิโคตินและกัญชามีความคล้ายคลึงกันหรือไม่ การศึกษานี้มีวัตถุประสงค์เพื่อเปรียบเทียบผลกระทบของการสูดดมสารแคนนาบินอยด์แบบระเหยแบบเฉียบพลันกับนิโคตินในรูปแบบเปรียบเทียบกัน

ตารางที่ 1 การเปรียบเทียบสารเคมีที่ตรวจพบในผลิตภัณฑ์สูบไอ (ของเหลวที่ไม่ผ่านความร้อน) ที่ใช้ในการทดลองการสัมผัสในสิ่งมีชีวิตและในหลอดทดลอง

วัสดุและวิธีการ

วิธีการที่ใช้มีการอธิบายไว้อย่างละเอียดในไฟล์เสริมออนไลน์

ผลิตภัณฑ์สูบไอ

เราใช้ผลิตภัณฑ์สูบไอเชิงพาณิชย์สองรายการ ชิ้นหนึ่งมีสาร CBD และอีกชิ้นมีสารนิโคติน (เรียกโดยย่อว่า CBD-vape และ Nic-vape) พ็อดที่บรรจุสาร CBD คือ CalmVape จาก The Kind Group LLC และพ็อดที่บรรจุสารนิโคตินคือ Juul โดย Juul Labs ผลิตภัณฑ์ทั้งสองถูกซื้อทางออนไลน์ในสหรัฐอเมริกาเมื่อวันที่ 2 พฤศจิกายน020 พ็อด CalmVape ถูกระบุว่าบรรจุ CBD 50 มก./มล. ละลายในส่วนผสมของไตรกลีเซอไรด์สายโซ่ขนาดกลาง (MCT) และมีรสชาติตามธรรมชาติ Juul ถูกระบุว่ามีนิโคติน 5.0% ละลายในส่วนผสมของกลีเซอรีนผักโพรพิลีนไกลคอล (PG) (VG) และรสยาสูบเวอร์จิเนีย เราทดสอบของเหลวที่ไม่ได้รับความร้อนและที่ให้ความร้อนตลอดจนการปล่อยก๊าซเรือนกระจกที่เกิดจากผลิตภัณฑ์ทั้งสองโดยใช้การตรวจโครมาโทกราฟี–แมสสเปกโตรเมทรีที่ผ่านการตรวจสอบความถูกต้องครบถ้วนและเผยแพร่ก่อนหน้านี้32 ส่วนผสมหลักที่ระบุในของเหลวจากผลิตภัณฑ์ทั้งสองแสดงอยู่ในตารางที่ 1 รายการรายละเอียดของสารเคมีที่ระบุใน สารละลายที่ให้ความร้อน รวมถึงผลผลิตของสารประกอบคาร์บอนิลที่อาจเป็นพิษสี่ชนิด (ฟอร์มาลดีไฮด์ อะซีตัลดีไฮด์ อะซิโตน และอะโครลีน) ในละอองลอยที่ปล่อยออกมามีให้ไว้ในตัวเลขเสริมออนไลน์ E1–E4 และตารางเสริมออนไลน์ E1 และ E2

ประโยชน์ของอาหารเสริม Cistanche-วิธีเสริมสร้างระบบภูมิคุ้มกัน

หนู

หนูตัวผู้และตัวเมีย C57BL/6NCr อายุหกสัปดาห์ถูกจัดหาจากห้องปฏิบัติการ Charles River (วิลมิงตัน แมสซาชูเซตส์ สหรัฐอเมริกา) และตั้งอยู่ภายใต้สภาวะที่ปราศจากเชื้อโรคโดยเฉพาะ โดยมีรอบแสง/มืด 12/12 ชั่วโมง จำนวนสัตว์ต่อกลุ่มที่ได้รับสัมผัสคือ n=10 (ตัวผู้ 5 ตัวและตัวเมีย 5 ตัว ยกเว้น Nic-vape ซึ่งมีตัวผู้ 5 ตัวและตัวเมีย 4 ตัว; หนูตัวเมีย 1 ตัวมีขนาดเล็กมากและจำเป็นต้องถูกการุณยฆาตก่อนการศึกษาจะเสร็จสิ้น ). การทดลองทั้งหมดดำเนินการตามแนวทางที่กำหนดโดยคณะกรรมการการดูแลและใช้สัตว์ประจำสถาบัน และสอดคล้องกับข้อบังคับของรัฐ รัฐบาลกลาง และ NIH ทั้งหมด

สภาวะการสัมผัสสัตว์

ละอองลอยจากผลิตภัณฑ์สูบไอผลิตขึ้นโดยใช้เครื่องกำเนิดละอองบุหรี่ไฟฟ้าตามที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้14 33 อุปกรณ์ Juul ถูกใช้เพื่อละอองผลิตภัณฑ์ทั้งสอง สัตว์ถูกเผยในห้องเหนี่ยวนำขนาด 15 ลิตรที่ถูกดัดแปลงในแต่ละวันจนเกิดเป็นพัฟทั้งหมด 20 อันที่เกิดขึ้นตลอด 1 ชั่วโมง (1 พัฟทุกๆ 3 นาที), 5 วัน/สัปดาห์เป็นเวลา 2 สัปดาห์ พัฟแต่ละอันมีปริมาตร 55 มล. และถูกละอองลอยตลอดระยะเวลา 3 วินาที ละอองลอยจากผลิตภัณฑ์สูบไอแต่ละรายการถูกสร้างขึ้นโดยใช้โปรโตคอลการสูบไอที่เหมือนกันซึ่งมีจุดประสงค์เพื่อเลียนแบบพฤติกรรมการสูบไอของผู้สูบนิโคตินที่มีประสบการณ์34 เนื่องจากขาดสิ่งตีพิมพ์ที่อธิบายพฤติกรรมการสูบไอของไอ CBD เราจึงปฏิบัติตามโปรโตคอลการสูบไอแบบเดียวกันสำหรับผลิตภัณฑ์ทั้งสอง แม้ว่าเราไม่ได้วัด CBD และนิโคตินในอากาศภายในห้องสัมผัสกับสัตว์ แต่เราได้ประมาณตามปริมาตรของของเหลวที่กลายเป็นไอต่อวัน CBD และความเข้มข้นของนิโคตินในของเหลว ละอองลอย และอัตราการไหลของอากาศที่สัตว์สัมผัสโดยเฉลี่ยอยู่ที่ 20.5 มก./ m3 CBD และนิโคติน 22.8 มก./ลบ.ม. สัตว์ควบคุมสัมผัสกับอากาศที่ถูกกรองโดยใช้เกณฑ์วิธีการสัมผัสแบบเดียวกัน

สภาวะการสัมผัสภายนอกร่างกาย

เซลล์ที่ใช้ในการทดลองในหลอดทดลองได้รับสัมผัสโดยตรงกับพัฟที่สร้างขึ้นใหม่ในระบบสัมผัสแบบปิด โดยที่ห้องเชื่อมต่อระหว่างอากาศและของเหลว (ALI) ถูกเก็บไว้ในตู้ฟักที่มีอุณหภูมิ 37 องศา สำหรับการทดลอง ALI เราใช้อุปกรณ์สูบไอระบบปิดและสูตรของเหลวแบบเติมแบบเดียวกับที่ใช้สำหรับการทดลองการสัมผัส ในสิ่งมีชีวิต ที่อธิบายไว้ข้างต้น รายละเอียดวิธีการอยู่ในไฟล์เสริมออนไลน์

ประโยชน์ของซิสตานช์สำหรับระบบภูมิคุ้มกันของผู้ชาย

คลิกที่นี่เพื่อดูผลิตภัณฑ์ Cistanche Enhance Immunity

【สอบถามเพิ่มเติม】 อีเมล:cindy.xue@wecistanche.com / Whats App: 0086 18599088692 / Wechat: 18599088692

การประเมินการอักเสบของปอด

การอักเสบของปอดได้รับคะแนนโดยโฟลว์ไซโตเมทรี, ฮิสโตเคมี และโดยการหาปริมาณระดับของไซโตไคน์และคีโมไคน์ (รูปที่ E5 เสริมออนไลน์), 14 35 36 และรายละเอียดที่สมบูรณ์ถูกจัดให้มีไว้ในไฟล์เสริมออนไลน์

การประเมินความเสียหายของปอด

ความสมบูรณ์ของเยื่อบุผิว/เยื่อบุปอดในปอดได้รับการประเมินโดยการหาปริมาณระดับโปรตีนโดย BCA และการรั่วไหลของอัลบูมินในช่องว่างหลอดลมโดยวิธี ELISA โดยใช้ตัวอย่าง BAL และหลอดลมในการรั่วไหลทั่วร่างกายโดยการวัดพลาสมาเรืองแสง 1 ชั่วโมงหลังจากการหยอดในหลอดลมของโพรบฟลูออเรสเซนต์ วัดระดับนิวโทรฟิลอีลาสเทส (NE) 37 38 ในเนื้อเยื่อ BAL และปอดโดยใช้ชุด NE ELISA จากระบบ R&D (Cat. #DY4517-05) ตามระเบียบการของผู้ผลิต กิจกรรมของ Myeloperoxidase (MPO) วัดโดยการทดสอบแคลอรี่ใน BAL และเนื้อเยื่อปอด โดยใช้ชุดทดสอบ MPO จาก Abcam (Cat. #ab105136) โดยใช้คำแนะนำของผู้ผลิต มีการใช้คราบน้ำมัน Red O เพื่อแสดงภาพมาโครฟาจในถุงไขมันที่เต็มไปด้วยไขมัน รายละเอียดการทดสอบมีอยู่ในไฟล์เสริมออนไลน์ การประเมินทางเนื้อเยื่อวิทยาในส่วนของปอดได้รับการประเมินโดยนักพยาธิวิทยาทางสัตวแพทย์ตามที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้40 41

การวัดความเครียดจากปฏิกิริยาออกซิเดชันในหนู BAL และปอด

การตอบสนองต่อการอักเสบแบบเฉียบพลันครอบงำระบบต้านอนุมูลอิสระอย่างรวดเร็วเพื่อส่งเสริมการบาดเจ็บของปอด 42–44 ความเครียดจากการเกิดออกซิเดชันถูกกำหนดโดยการวัดศักยภาพของสารต้านอนุมูลอิสระใน BAL และ lysates ปอดตามที่อธิบายไว้ในไฟล์เสริมออนไลน์

การทดสอบความเป็นพิษต่อเซลล์ในหลอดทดลอง

เซลล์เยื่อบุผิวทางเดินหายใจขนาดเล็กของมนุษย์ (hSAECs) จาก LONZA และนิวโทรฟิลของมนุษย์ที่บริสุทธิ์ได้รับสัมผัสโดยตรงกับ CBD และละอองลอยนิโคตินที่สร้างขึ้นใหม่ในการเพาะเลี้ยงส่วนต่อประสานระหว่างอากาศและของเหลว ระเบียบวิธีเปิดเผยและรายละเอียดระเบียบวิธีอยู่ในเอกสารเสริมออนไลน์ ความเป็นพิษต่อเซลล์ถูกวัดโดยใช้การแยกสีย้อมสีน้ำเงินแบบทริแพน การดูดซึมสีย้อมสีแดงที่เป็นกลาง และการตรวจวิเคราะห์การตายของเซลล์ของ Annexin V-FITC ตามที่อธิบายไว้ในไฟล์เสริมออนไลน์

การวัดระดับ NE ในสื่อวัฒนธรรม PMN

ระดับ NE ในสื่อเพาะเลี้ยงเซลล์ PMN ที่สัมผัสละอองลอยหลังจากช่วงพักฟื้นถูกหาปริมาณโดยชุด ELISA จากระบบ R&D (Cat. #DY4517-05) ตามคำแนะนำของผู้ผลิต

การสอบวิเคราะห์การซึมผ่านของ FITC-เด็กซ์แทรน

การซึมผ่านของพาราเซลล์ในชั้นเดียวของ SAEC ของมนุษย์ที่สัมผัสละอองลอยจากวัฒนธรรม ALI ดำเนินการเพื่อประเมินความสมบูรณ์ของสิ่งกีดขวาง และรายละเอียดได้อธิบายไว้ในไฟล์เสริมออนไลน์

การวิเคราะห์ทางสถิติ

ความแตกต่างที่มีนัยสำคัญทางสถิติระหว่างค่าอันดับเฉลี่ยของกลุ่มที่ได้รับสัมผัสต่างๆ (CBD, นิโคติน และการควบคุมอากาศ) ถูกกำหนดโดยการทดสอบแบบไม่อิงพารามิเตอร์ของ Kruskal-Wallis ค่า P ได้รับการแก้ไขสำหรับการทดสอบหลายครั้งโดยใช้วิธี 'ขั้นตอนการเพิ่มเชิงเส้นสองขั้นตอนของ Benjamini, Krieger และ Yekutieli' อัตราการค้นพบที่ผิดพลาด (FDR) และความแตกต่างระหว่างทั้งสองกลุ่มถือว่ามีนัยสำคัญทางสถิติที่ p<0.05when FDR was set at Q<0.1. We also evaluated if there were differences between male versus female mice in the responses to inhalation of CBD and nicotine aerosols in comparison with air. All statistical analyses were carried out using GraphPad Prism V.9.3.1 software (GraphPad; La Jolla, California, USA).

cistanche tubulosa-ปรับปรุงระบบภูมิคุ้มกัน

ผลลัพธ์

การสัมผัสกับละอองลอย CBD ทำให้เกิดการสะสมของเซลล์ภูมิคุ้มกันโดยธรรมชาติและเซลล์ภูมิคุ้มกันที่ปรับตัวได้ในปอดมากขึ้น เมื่อเทียบกับการสัมผัสนิโคติน

การแทรกซึมของเซลล์ภูมิคุ้มกันทั้งหมดสูงขึ้นอย่างมีนัยสำคัญในปอดของหนูหลังจากการสูดดมละอองลอย CBD มากกว่านิโคตินหรืออากาศที่กรอง (รูปที่ 1A) เซลล์ภูมิคุ้มกัน 7 ใน 10 ชุดย่อยที่ศึกษาได้รับผลกระทบอย่างมีนัยสำคัญมากขึ้นหลังจากได้รับสาร CBD เมื่อเทียบกับนิโคติน การวิเคราะห์ทางภูมิคุ้มกันบกพร่องเผยให้เห็นการแทรกซึมของนิวโทรฟิล CD11b+Ly6G+ ในปอดของหนูที่มีนัยสำคัญทางสถิติหลังจากการสูดดม CBDaerosols (14488 เทียบกับ 3674 นิวโทรฟิลในอากาศ, p<0.05) as well as following nicotine aerosol exposure (15410 vs 3674 neutrophils in air, p<0.001) (figure 1B). Total numbers of CD11bCD- 11c+Siglec-F+ alveolar macrophages were significantly reduced following CBD-Vape or Nic-Vape inhalation as compared with air-exposed mice (15965 cells in CBD and 18834 cells in NicVape vs 43465 cells in air (p<0.05)) (figure 1C). Inhalation of both CBD and nicotine aerosols resulted in significantly lower numbers of pulmonary interstitial CD11bCD11c+CD206+ macrophages as compared with air-exposed control mice (11460 vs 47319 cells for CBD-Vape, p<0.0001) and 27727 vs 47319 cells for Nic-Vape, p<0.05). The reduction in the numbers of pulmonary interstitial macrophages was significantly greater following inhalation of CBD aerosols compared with nicotine (11460 cells in CBD-vape vs 27727 cells in Nic-Vape, p<0.05) (figure 1D). CD11bCD11c+arginase-1+ macrophages were significantly reduced following inhalation of both CBD-Vape and Nic-Vape compared with air-exposed control (13450 vs 44009 for CBD-Vape (p<0.001), and 24280 vs 44009 for Nic-Vape (p<0.05)) (figure 1E). However, the reduction in the numbers of CD11bD11c+arginase-1+ macrophages was significantly more following inhalation of CBD aerosols compared with Nic-Vape (13450 cells in CBD-vape vs 24280 cells in Nic-Vape (p<0.05). The number of CD19+ B cells was not statistically different (figure 1F). Following inhalation of CBD aerosols, the numbers of CD8+ and CD4+ T cells in the lungs were, respectively, 3.3-fold (p<0.001) and 5.6-fold (p<0.0001) higher than following nicotine inhalation (figure 1G, H). CD4+IL-17A+ T cells were not altered in the lungs following CBD-Vape or Nic-Vape exposures as compared with air control (figure 1I). CD4+RORγt + T cells, expressing the master transcription factor essential for the differentiation into proinflammatory Th17 cells, were significantly increased following inhalation of CBD aerosols as compared with both nicotine (11983 vs. 2015; p<0.001) and air exposure (11983 vs. 5887; p<0.05) (figure 1J). Furthermore, CBD aerosols resulted in markedly increased infiltration of CD4+Foxp3+ regulatory T cells into the lungs compared with nicotine (4401 cells in CBD-Vape vs 1688 cells in Nic-Vape; p<0.001) (figure 1K). There were no statistically significant differences observed between male and female mice concerning the infiltration of any of the innate and adaptive immune cells, regardless of the different exposure conditions (online supplemental figure E6A–K). Relatively more Oil Red O-positive lipid-laden macrophages were detected in BAL following CBD-aerosol inhalation compared with nicotine aerosol (0.66 vs 0.32; p<0.05) or air-exposure (0.66 vs 0.15; p<0.001) (figure 2A). Lung tissue sections of air-breathing mice contained rare (typically 1–2 positive cells in the entire lung lobe) lipid-containing, Oil Red O-positive intra-alveolar macrophages (online supplemental figure E7A). In contrast, lungs from CBD and nicotine-exposed animals regionally contained one or more Oil Red O-positive macrophages within multiple alveolar lumina that were often adjacent to one another (online supplemental figure E7B, C), with no obvious differences found in males versus females. Histological examination of H&E-stained lung tissue sections from filtered air-breathing control mice showed air-filled alveolar lumina bounded by thin alveolar walls (figure 2B). In contrast, peribronchiolar and/or intrabronchiolar, perivascular, alveolar infiltrates, and interstitial infiltrates of lymphocytes, macrophages, and granulocytes were the predominant findings in the CBD and nicotine-exposed mouse lungs (figure 2C–E). Small focal lesions and occasionally larger and more regionally extensive focal lesions were noted. Lesions were found primarily near terminal bronchioles and often subpleural. The frequency and severity of lesions were greater following CBD aerosol inhalation compared with nicotine. The male mice showed a greater frequency of most lesions as compared with female mice following inhalation of both CBD and nicotine.

รูปที่ 1 ผลกระทบของการสัมผัส CBD หรือละอองนิโคตินแบบเฉียบพลันต่อการแทรกซึมของเซลล์ภูมิคุ้มกันในปอด จำนวนทั้งหมดของเม็ดเลือดขาว (A), CD11b+ Ly6G+ นิวโทรฟิล (B), CD11b-CD11c+ Siglec-F + มาโครฟาจ (C), CD11b- CD11c+ CD206+ มาโครฟาจ (D), CD11b- CD11c+ อาร์จิเนส+ มาโครฟาจ (E) และ จำนวนเซลล์ CD19+ B (F), CD8+ ทีเซลล์ (G), CD4+ ทีเซลล์ (H), CD4+ IL17A+ (I) และซีดี 4+ ROR t + ทีเซลล์อักเสบ (J) และ CD4+ FOXP3+ ทีเซลล์ (K) ในปอดของหนูที่สัมผัสกับอากาศ นิโคติน หรือละอองลอย CBD ถูกกำหนดโดยการไหล cytometry โดยใช้เครื่องหมายเฉพาะและปฏิบัติตามกลยุทธ์ gating ตามที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้ และแสดงในรูปที่ 1 เพิ่มเติมออนไลน์ ข้อมูลจะแสดงเป็นพล็อตกล่องพร้อมหนวดที่ค่าต่ำสุดและสูงสุด ความแตกต่างระหว่างทั้งสองกลุ่มถือว่ามีนัยสำคัญที่ p<0.05, the statistical significance of the difference between the two groups is indicated with symbols *p<0.05; ***p<0.001; ****p<0.0001after performing non-parametric Kruskal-Wallis test with false discovery rate (FDR) correction for multiple comparisons by GraphPad Prism V.9 software (GraphPad; La Jolla, California, USA). In each exposure condition, n=10 mice (5 males+5 females) (n=9 (5 males+4 females) for Nic-Vape) were used. CBD, cannabidiol.

ละอองลอย CBD มีผลในการปรับระดับไซโตไคน์ได้ดีกว่าละอองนิโคติน

เราพบว่าการสูดดมละอองลอยของ CBD ช่วยเพิ่มระดับของไซโตไคน์ IL-5, IL-6 และ G-CSF ใน BAL อย่างมีนัยสำคัญ เมื่อเปรียบเทียบกับทั้งการสัมผัสนิโคตินและอากาศ (p<0.01) and enhanced the levels of chemokine KC compared with air-control only (p<0.001) (figure 3A–D). Levels of IL-2 were significantly lower following CBD and Nic-vape aerosol exposures compared with air (p<0.05) (figure 3E). IL-10 and IFN-γ levels were significantly reduced only after CBD aerosol exposure compared with air (p<0.05) (figure 3F, G). IL-1α levels were not significantly different, though there was a trend for the values to be lower following exposure to CBD-Vape aerosols (figure 3H). There were no statistically significant differences observed between male and female mice in the levels of these cytokines or chemokines (online supplemental figure E8A–H and online supplemental table E3).

การสัมผัสกับละอองลอย CBD ส่งผลให้เกิดความเสียหายต่อเยื่อบุผนังปอดมากกว่าการสัมผัสละอองนิโคติน

ระดับโปรตีนทั้งหมดใน BAL เพิ่มขึ้นหลังจากการสูดดมละอองลอย CBD เมื่อเปรียบเทียบกับการควบคุมอากาศ (435µg/mL เทียบกับ 287µg/mL; p<0.01) (figure 4A, left panel). Additionally, serum albumin levels leaking into the BAL were markedly increased following CBD aerosol inhalation when compared with both nicotine aerosol (70303ng/mL vs 32741ng/mL in NicVape; p<0.01) and air inhalation (70303ng/mL vs 26042ng/ mL in air control; p<0.0001) (figure 4B, left panel). The systemic leak of FITC-dextran from the lungs into the plasma was markedly higher following CBD aerosol inhalation than Nic-vape aerosol (469.9ng/mL vs 227.6ng/mL in Nic-Vape; p<0.01) or air exposures (469.9ng/mL vs 157.5ng/mL in air control; p<0.0001) (figure 4C, left panel). Furthermore, the FITC-dextran leak following Nic-vape aerosol exposure was not significantly different when compared with air control (227.6ng/mL vs 157.5ng/mL). There were no statistically significant differences observed in the levels of these markers when comparing male with female mice following any of the exposures (figure 4A–C, right panels and online supplemental table E3). It is known that elastase activity in inflammatory diseases increases and correlates with the levels of elastase proteins and neutrophil infiltrates as the disease progresses.45 46 NE levels in the BAL were markedly augmented following inhalation of CBD aerosols (1.8-fold vs air; p<0.001) and Nic-Vape aerosols (1.42-fold vs air; p<0.01) (figure 5A, left panel). The levels of NE measured in lung tissue were significantly increased following CBD-Vape as compared with both Nic-Vape (1.3-fold; p<0.01) and air (1.41-fold; p<0.001) (figure 5B, left panel). There were no statistically significant differences observed in NE levels between male and female mice, measured either in the BAL or lung tissues (figure 5A, B, right panels and online supplemental table E3). We detected higher MPO activity in lung tissues following inhalation of CBD aerosols compared with nicotine aerosols (~2fold; p<0.05) and air (~8.44fold; p<0.0001) (figure 6A). BAL MPO activity following CBD and nicotine aerosol-inhalation was equivalent, but greater than air controls (p<0.01) (online supplemental figure E9A). There were no statistically significant differences observed in MPO activity between male and female mice, either in lung tissue or in the BAL (figure 6B; online supplemental figure E9B and online supplemental table E3).

รูปที่ 2 การเปลี่ยนแปลงการอักเสบในปอดหลังจากการสูดดมสาร CBD และละอองนิโคติน ที่จุดสิ้นสุดของการเผยสัมผัส หนูถูกการุณยฆาต หลอดลมถูกบรรจุเพื่อรวบรวม BAL ใน 1% FBS ใน PBS และปอดถูกเก็บเกี่ยว (A) เซลล์ BAL ไซโตสปินบนสไลด์แก้วถูกย้อมด้วยสารละลาย Oil Red O.5% และเซลล์ Oil Red O-positive ตามที่อธิบายไว้ในวิธีการ ผลลัพธ์จะแสดงเป็นกล่องแปลงที่มีหนวดที่ค่าต่ำสุดและสูงสุด ความแตกต่างระหว่างทั้งสองกลุ่มถือว่ามีนัยสำคัญที่ p<0.05 and indicated with the symbols *p<0.05; ***p<0.001 by performing non-parametric Kruskal-Wallis test with FDR correction for multiple comparisons using GraphPad Prism V.9 software (GraphPad; La Jolla, California, USA). In each experiment n=10 (5 males+5 females) for CBD-vape and air exposure and n=9 (5 males+4 females) for Nic-vape). (B–E) Left lung lobes from all mice were embedded, sectioned and H&E stained as described in the methods. (B) (Air): Image of the histologically unremarkable lung from air-breathing control mouse showing air-filled alveolar lumina bounded by thin alveolar walls (arrows). H&E, ×20. (C) Nic-vape: Peribronchiolar lymphocytic, macrophagic (arrowhead) granulocytic infiltrate (circle). H&E, ×20 magnification. B=bronchiolar lumen. (D, E) CBD-vape: Perivascular infiltrates composed of mononuclear (lymphocytes and macrophages) and granulocytic infiltrates (arrows). Intra-alveolar granulocytes (circles) and macrophages (arrowheads) were also present. H&E, ×20 magnification. BD, cannabidiol; B, bronchiolar lumen; FDR, false discovery rate; PBS, phosphate-buffered saline; V, vessel lumen.

การสัมผัสกับสาร CBD และละอองนิโคตินทำให้ศักยภาพในการต้านอนุมูลอิสระในปอดลดลง

ความสามารถในการต้านอนุมูลอิสระทั้งหมดลดลงอย่างเห็นได้ชัดในเนื้อเยื่อปอดทั้งสองข้าง (หน้า 23)<0.01vs air) and BAL (p=0.001vs air) following inhalation of CBD aerosols (figure 7A; online supplemental figure E10A). However, following nicotine aerosol exposure it was significantly reduced only in the BAL (p<0.01vs air) compared with air (online supplemental figure E10A). We did not observe any statistically significant differences in the antioxidant potential between male and female mice for each exposure group, either in lung tissue or in the BAL (figure 7B; online supplemental figure E10B and online supplemental table E3).

รูปที่ 3 การปรับสภาพแวดล้อมของไซโตไคน์/เคมีบำบัดในของเหลว BAL หลังจากการสูดดม CBD และละอองนิโคติน ระดับของไซโตไคน์และเคโมไคน์ที่เกี่ยวข้องกับการอักเสบต่างๆ ใน ​​BAL (A–H) ของหนูหลังจากการสัมผัสกับอากาศ 2 สัปดาห์ ละอองลอย Nic-Vape หรือละอองลอย CBD-Vape ถูกหาปริมาณโดยใช้ MULTIPLEX MAP Kit ตามที่อธิบายไว้ในวัสดุและวิธีการ ข้อมูลจะแสดงเป็นกล่องแปลงพร้อมหนวดที่ค่าต่ำสุดและสูงสุด การทดสอบครัสคัล-วาลลิสแบบไม่มีพารามิเตอร์พร้อมการแก้ไข FDR สำหรับการเปรียบเทียบหลายรายการได้ดำเนินการเพื่อดูว่ามีความแตกต่างที่มีนัยสำคัญทางสถิติระหว่างทั้งสองกลุ่มโดยใช้ซอฟต์แวร์ GraphPad Prism V.9 (GraphPad; La Jolla, California, USA) ความแตกต่างระหว่างทั้งสองกลุ่มถือว่ามีนัยสำคัญที่ p<0.05 and is indicated with symbols *p<0.05; **p<0.01; ***p<0.001; ****p<0.0001. In each experiment n=10 for CBD-vape and air exposure (5 males+5 females) and n=9 (5 males+4 females) for Nic-Vape). CBD, cannabidiol.

ละออง CBD เป็นพิษมากกว่าละอองนิโคตินต่อ hSAECs และขัดขวางความสมบูรณ์ของสิ่งกีดขวางของเยื่อบุผิว

เราสังเกตว่าเมื่อ SAEC ของมนุษย์สัมผัสกับละอองลอย CBD ในหลอดทดลอง เป็นเวลา 1 ชั่วโมง สัณฐานวิทยาของเซลล์เยื่อบุผิวถูกรบกวนอย่างเห็นได้ชัด (รูปที่ 8A, B เทียบกับ 8C) การตายของเซลล์ใน hSAEC เพิ่มขึ้นอย่างมีนัยสำคัญหลังจากได้รับละอองลอย CBD เมื่อเปรียบเทียบกับอากาศ (41% เทียบกับ 12.5% ​​ในการควบคุมอากาศ; p<0.05) (figure 8D, E). Even though the cell death following CBD-Vape exposure was higher compared with exposure to nicotine aerosols, it, however, did not reach statistical significance (41% vs. 16% in Nic-Vape). Additionally, exposure to CBD aerosols diminished the epithelial barrier integrity of human SAECs compared with air by 2.1-fold (p<0.05) and while the exposure to nicotine aerosols also showed an increased trend, it was not significantly different compared with air-control (1.7-fold decrease in Nic-Vape vs air control) (figure 8F).

cistanche พืชเพิ่มระบบภูมิคุ้มกัน

ละอองลอยของ CBD แต่ไม่ใช่ละอองนิโคตินทำให้เกิดการตายของเซลล์ apoptotic ในนิวโทรฟิลของมนุษย์ที่บริสุทธิ์ แต่ทั้งคู่ก็เพิ่มการปล่อย NE

การได้รับละอองลอย CBD แบบเฉียบพลันทำให้เกิดการตายของเซลล์อย่างเห็นได้ชัดในนิวโทรฟิลของมนุษย์ที่บริสุทธิ์ (การตายของเซลล์ 44.5% หลังจาก CBDVape เทียบกับ 14% ในการควบคุมอากาศ; p<0.0001) and (44.5% vs 21%cell death in Nic-Vape; p<0.001) (figure 9A). CBD aerosol-induced neutrophil cell death was mainly due to increased apoptosis compared with air (29% vs. 10% in air control; p<0.0001) and compared with Nic-Vape (29% vs. 12% in Nic-Vape; p<0.001) (figure 9B). Furthermore, both CBD and nicotine aerosols lead to enhanced accumulation of NE levels in the neutrophil cell culture media as compared with air control (2-fold increase in CBD-Vape; p<0.001and 1.45-fold increase in Nic-Vape; p<0.05) (figure 9C). However, the levels were significantly higher following CBD versus nicotine exposure (CBD-Vape 1.4-fold higher than Nic-Vape; p<0.05) (figure 9C). Pictures of human neutrophils after ALI exposures and the 24-hour recovery period are provided in online supplemental figure E12. Importantly, an aliquot of purified neutrophils that were incubated in media (unexposed) for the duration of the experiment showed low cell death (~11%) that was equivalent to values noted in neutrophils exposed to air (~14%) in the ALI chambers (figure 9A), nor was apoptosis or increased NE levels induced (figure 9B, C).

รูปที่ 4 เครื่องหมายของความเสียหายของปอดที่เกิดขึ้นหลังจากการสูดดมการสัมผัส CBD และละอองนิโคติน ในตอนท้ายของการสัมผัส หนูถูกการุณยฆาต, เก็บเกี่ยว BAL และระดับของ (A) โปรตีนทั้งหมดและ (B) อัลบูมินใน BAL ถูกหาปริมาณตามที่อธิบายไว้ในส่วนวัสดุและวิธีการ (C) ระดับของ FITC-เด็กซ์แทรนที่รั่วเข้าไปในพลาสมาถูกหาปริมาณ แผงด้านซ้ายในแต่ละรูปแสดงข้อมูลจากชายและหญิงรวมกัน ในขณะที่แผงด้านขวาแสดงข้อมูลเป็นชายและหญิง ผลลัพธ์จะแสดงเป็นพล็อตกล่องพร้อมหนวดที่ค่าต่ำสุดและสูงสุด ความแตกต่างระหว่างกลุ่มถือว่ามีนัยสำคัญที่ p<0.05 and are indicated as symbols **p<0.01, ****p<0.0001, calculated after performing non-parametric Kruskal-Wallis test with FDR correction for multiple comparisons by employing GraphPad Prism V.9 software (GraphPad; La Jolla, California, USA). In each experiment n=10 (5 males+5 females) for air and CBD-vape exposures and n=9 (5 males+4 females) for the Nic-Vape group. CBD, cannabidiol.

รูปที่ 5 ระดับของนิวโทรฟิลอีลาสเทสในปอดที่วัดหลังจากได้รับ CBD และละอองนิโคติน เมื่อสิ้นสุดการสัมผัสเป็นเวลา 2- สัปดาห์ หนูถูกการุณยฆาต BAL และปอดถูกเก็บเกี่ยว และเตรียมไลซีนเนื้อเยื่อ ( A, B ) ระดับ NE ใน BAL และ lysates เนื้อเยื่อปอดถูกวัดปริมาณโดย ELISA แผงด้านซ้ายในแต่ละรูปจะแสดงข้อมูลเป็นเพศชายรวมกัน ในขณะที่แผงด้านขวาแสดงข้อมูลเป็นเพศชายและเพศหญิง ผลลัพธ์จะแสดงเป็นพล็อตกล่องพร้อมหนวดที่ค่าต่ำสุดและสูงสุด การทดสอบครัสคัล-วาลลิสแบบไม่อิงพารามิเตอร์พร้อมการแก้ไข FDR สำหรับการเปรียบเทียบหลายรายการถูกนำมาใช้เพื่อดูว่ามีความแตกต่างที่มีนัยสำคัญทางสถิติระหว่างทั้งสองกลุ่มโดยใช้ซอฟต์แวร์ GraphPad Prism V.9 (GraphPad; La Jolla, California, USA) ความแตกต่างระหว่างทั้งสองกลุ่มถือว่ามีนัยสำคัญที่ p<0.05 and is indicated with symbols **p<0.01, ***p<0.001. In each experiment n=10 (5 males+5 females) for air and CBD-vape exposures each and n=9 (5 males+4 females) for Nic-Vape. CBD, cannabidiol; NE, neutrophil elastase.

การอภิปราย

การค้นพบของเราเปิดเผยว่าผลกระทบที่เป็นอันตรายต่อระบบภูมิคุ้มกันและความเสียหายของปอดหลังจากการสูดดมการสัมผัสผลิตภัณฑ์สูบไอที่มีสารแคนนาบินอยด์มีความรุนแรงมากกว่าหลังจากได้รับละอองลอยจากอุปกรณ์สูบไอที่มีนิโคติน เราได้ค้นพบผลที่เป็นอันตรายของ CBD ที่ถูกระเหยซึ่งส่งผลต่อสภาวะสมดุลของภูมิคุ้มกันในปอดโดยใช้แบบจำลองเมาส์ของการทดลองสูบไอและในหลอดทดลองกับเซลล์ของมนุษย์ การศึกษาของเราเปิดเผยว่าการสูบไอของ CBD ทำให้เกิดสภาพแวดล้อมจุลภาคในปอดที่ทำให้เกิดการอักเสบ ซึ่งนำไปสู่การสะสมของเซลล์ภูมิคุ้มกันอักเสบอย่างเห็นได้ชัด ซึ่งแสดงกิจกรรมที่เพิ่มขึ้นของปัจจัยที่สร้างความเสียหายให้กับเนื้อเยื่อ เช่น MPO และ NE และนำไปสู่การกระตุ้นการบาดเจ็บของปอดผ่านกระบวนการที่อาจรวมถึงความเครียดจากปฏิกิริยาออกซิเดชัน แม้ว่าการศึกษาหลายชิ้นได้ตรวจสอบผลกระทบต่อระบบทางเดินหายใจของการสูบไอนิโคติน ตามความรู้ของเรา นี่เป็นรายงานแรกที่แสดงให้เห็นว่าแม้แต่การได้รับสาร CBD ที่ถูกระเหยในระยะสั้นก็ยังเปลี่ยนแปลงสภาพแวดล้อมการอักเสบในปอด ซึ่งนำไปสู่ความเสียหายของปอด สิ่งสำคัญที่ควรทราบก็คือ เราใช้ผลิตภัณฑ์สูบไอที่มีสาร CBD ปราศจาก THC เพื่อกำจัดอิทธิพลใดๆ ก็ตามที่ THC อาจมีต่อผลกระทบต่อปอด เนื่องจากข้อจำกัดทางกฎหมายในการเข้าถึงผลิตภัณฑ์สูบไอที่มี THC เราจึงไม่สามารถดำเนินการทดลองที่จะเปรียบเทียบผลกระทบของการสูบไอ THC ได้ การศึกษาล่าสุดฉบับเดียวรายงานว่า CBD ในผลิตภัณฑ์สูบไอถือได้ว่าเป็นสารตั้งต้นของ THC ดังนั้นจึงยิ่งเพิ่มปัญหาเข้าไปอีกโดยการกระตุ้นผลกระทบที่เป็นอิสระจาก CBD และอาศัย THC ที่เกี่ยวข้องกับการใช้ผลิตภัณฑ์สูบไอของกัญชาโดยทั่วไป47

นอกจากนี้ ผลกระทบที่เป็นพิษต่อระบบทางเดินหายใจจากการสูบไออาจรุนแรงขึ้นได้เนื่องจากมีส่วนประกอบอื่นๆ ของผลิตภัณฑ์สูบไอ รวมถึงตัวทำละลายที่แตกต่างกัน (MCT ในผลิตภัณฑ์ CBD และ PG: VG ในผลิตภัณฑ์นิโคติน) รสชาติและเทอร์ปีนที่แตกต่างกันปรากฏอยู่ในผลิตภัณฑ์ทั้งสองตามที่เปิดเผยโดย การวิเคราะห์ผลิตภัณฑ์ ผลพลอยได้จากการสลายตัวที่อาจเกิดขึ้นจำนวนมากถูกตรวจพบในสารละลายที่ให้ความร้อนทั้งสองชนิด ซึ่งบ่งชี้ว่าผลิตภัณฑ์ทั้งสองไวต่ออุณหภูมิสูง อย่างไรก็ตาม มีการตรวจพบสารประกอบคาร์บอนิลในระดับที่สูงขึ้นในละอองลอยที่มี CBD ซึ่งบ่งชี้ว่าผลิตภัณฑ์สูบไอของ CBD ที่ใช้ในการศึกษาของเราอาจมีความไวต่อการย่อยสลายจากความร้อนมากกว่าเมื่อเปรียบเทียบกับผลิตภัณฑ์นิโคติน อาจเนื่องมาจากความแตกต่างในองค์ประกอบทางเคมีของสารละลาย 2 ชนิด และ/หรือ สภาวะการกลายเป็นไอภายในอุปกรณ์สูบไอที่แตกต่างกัน เครื่องหมายของการอักเสบและความเสียหายของปอดจำนวนมากที่วัดได้ในการศึกษาของเรานั้นสูงขึ้นอย่างต่อเนื่องหลังจากการสัมผัสกับผลิตภัณฑ์สูบไอที่มีส่วนผสมของ CBD มากกว่าอุปกรณ์สูบไอที่มีนิโคติน ตัวอย่างเช่น เรารายงานว่าการสูดดมน้ำมัน CBD vape ทำให้เกิดการเพิ่มจำนวนทีเซลล์ CD4+ และ CD8+ ที่แข็งแกร่งยิ่งขึ้น และมีจำนวนนิวโทรฟิลในปอดสูง รายละเอียดที่คล้ายกันของการเพิ่มนิวโทรฟิลและการปรับเซลล์ CD4+ และ CD8+ ทีเซลล์ถูกพบในปอดของผู้ป่วยที่ใช้น้ำมันกัญชาที่ระเหยจนทำให้เกิดอาการบาดเจ็บที่ปอดและระบบหายใจล้มเหลว3 มีความเชื่อมโยงที่แน่นแฟ้นอยู่ระหว่าง ทีเซลล์อักเสบ ปัจจัยการเคลื่อนตัวของนิวโทรฟิล และการจัดหานิวโทรฟิลในความผิดปกติของการอักเสบในปอด 48 สภาพแวดล้อมการอักเสบที่เพิ่มขึ้นในปอดหลังจากได้รับละอองลอย CBD สามารถควบคุมการสะสมและ/หรือการกระตุ้นนิวโทรฟิลในพื้นที่หลอดลมและถุงลมได้โดยตรง ผ่านการปล่อยสารเฉพาะ ปัจจัยการขับเคลื่อนนิวโทรฟิล เช่น IL-6, G-CSF และ KC (CXCL1) หรือโดยอ้อมผ่านการกระตุ้นของมาโครฟาจในปอดและเซลล์เยื่อบุผิวที่อาศัยอยู่49 50 ยังเป็นไปได้ที่ละอองลอย CBD อาจทำลายเยื่อบุผิวของปอดและเริ่มต้นได้ กระบวนการสรรหาและกระตุ้นนิวโทรฟิลผ่านกลไกรวมถึงความเสียหายของเนื้อเยื่อในท้องถิ่น 51 อันที่จริงเราแสดงให้เห็นว่าละอองลอย CBD ทำลายความสมบูรณ์ของเยื่อบุผิวและกระตุ้นการตายของเซลล์ใน hSAECs โดยแนะนำว่าละอองลอย CBD สามารถกระตุ้นความเสียหายของเนื้อเยื่อปอดได้โดยตรง และกระตุ้น DAMPs เพื่อเป็นสื่อกลางในการอักเสบของปอด . การแทรกซึมของนิวโทรฟิลและการทำลายเนื้อเยื่อปอดที่เกิดจาก NE นั้นเป็นที่รู้กันว่าเป็นสื่อกลางในความเสียหายของปอดที่เกิดจากควันบุหรี่และความสมบูรณ์ของเยื่อบุผิวที่ถูกบุกรุก 52–56 นิวโทรฟิลหลังจากกลับบ้านไปที่ปอดแสดงฟีโนไทป์ที่เปิดใช้งานและทำให้กระบวนการอักเสบยืดเยื้อ 57 ดังนั้นเราจึงให้เหตุผลว่า การเพิ่มจำนวนนิวโทรฟิลที่สะสมในปอดของหนูที่สัมผัสกับละอองลอย CBD (14488 เทียบกับ 3674 ในอากาศ) อาจมีผลกระทบทางชีวภาพเนื่องจากสถานะการเปิดใช้งาน เซลล์แกรนูโลไซต์เหล่านี้เป็นแหล่งที่มาของปัจจัยสำคัญสองประการ ได้แก่ ไมอีโลเพอออกซิเดสและ NE ที่เกี่ยวข้องกับกิจกรรมของจุลินทรีย์และการเปลี่ยนแปลงของปอด ระดับ MPO ที่เพิ่มขึ้นตามที่สังเกตในการศึกษาของเรา ถือเป็นเครื่องหมายบ่งชี้ความเครียดจากการอักเสบและออกซิเดชันที่มีนัยสำคัญในโรคต่างๆ รวมถึงการบาดเจ็บที่ปอด39 58 โปรตีน MPO ที่ปล่อยออกมาจากนิวโทรฟิลที่ถูกกระตุ้นจะทำหน้าที่เป็นตัวปรับออโตไคน์ ซึ่งแสดงอาการคล้ายไซโตไคน์ที่ทำให้เกิดการอักเสบ คุณสมบัติในการกระตุ้นการทำงานของ PMN ในลักษณะที่ไม่ขึ้นอยู่กับกิจกรรมการเร่งปฏิกิริยาของ MPO 59 ดังนั้น จากรายงานเหล่านี้และการค้นพบในปัจจุบันของเรา เราจึงตั้งสมมติฐานว่าการสูดดมละอองลอย CBD แบบเรื้อรังสามารถกระตุ้นให้เกิดสภาพแวดล้อมจุลภาคที่ทำให้เกิดการอักเสบที่รุนแรงซึ่งอาจเป็นอันตรายต่อปอดมากกว่า สภาวะสมดุลและอาจทำให้โรคปอดที่มีอยู่รุนแรงขึ้นอีก การแทรกซึมของนิวโทรฟิลเข้าไปในปอดหลังจากการสูดดมละอองลอย CBD อาจเกิดขึ้นได้จากการควบคุมเคมีบำบัดที่ละลายน้ำได้ เช่น KC และด้วยเหตุนี้จึงสามารถรับผิดชอบต่อระดับ NE ที่เพิ่มขึ้นที่พบใน BAL และเนื้อเยื่อปอด เนื่องจากการได้รับละอองลอยของ CBD ทำให้เกิดการปลดปล่อย NE จากนิวโทรฟิลของมนุษย์ ในหลอดทดลอง สิ่งนี้สนับสนุนข้อสรุปว่าละอองลอยของ CBD มีศักยภาพในการกระตุ้นนิวโทรฟิล ในร่างกาย โดยตรง และเพิ่มการอักเสบของปอดในผู้ใช้ เมื่อระดับของ NE และกิจกรรมที่เกี่ยวข้องเพิ่มขึ้นในระหว่างการตอบสนองต่อการอักเสบโดยอาศัยนิวโทรฟิล ดังนั้นเราจึงวัดระดับของ NE เป็นดัชนีของกิจกรรมเท่านั้น นอกจากนี้ ผลกระทบที่เป็นอันตรายของการสูบไอ CBD อาจรุนแรงขึ้นเนื่องจากระบบต้านอนุมูลอิสระบกพร่องดังที่เราสังเกตเห็น ซึ่งปัจจัยต่างๆ เช่น MPO ที่เกิดจาก CBD-Vape อาจมีบทบาทสำคัญ39 58 CD4+ROR t + T cells ซึ่งแสดงถึงปัจจัยการถอดรหัสหลักที่จำเป็นสำหรับการสร้างความแตกต่างในเซลล์ proflammation Th17 ได้รับการเสริมและคาดการณ์สภาพแวดล้อมจุลภาคที่เกิดจากการอักเสบที่เกิดจากละอองลอย CBD การเหนี่ยวนำที่เพิ่มขึ้นของเซลล์ควบคุม CD4+FoxP3+ T (Tregs) อาจเป็นกลไกหนึ่งที่ทำให้การสูบไอของ CBD สามารถกระตุ้นภูมิคุ้มกันได้ เทร็กระงับการกระตุ้น การเพิ่มจำนวน และการผลิตไซโตไคน์ของทีเซลล์ CD4+ และ CD8+ และมีส่วนเกี่ยวข้องในการยับยั้งเซลล์เดนไดรต์โดยการลดโมเลกุลของต้นทุนกระตุ้น 60 เทร็กแสดงสายโซ่รีเซพเตอร์ IL-2 ซึ่งอำนวยความสะดวกในการใช้ IL-2 และอาจกีดกันเซลล์ T effector จากความพร้อมของ IL-2 ซึ่งมีส่วนช่วยในการปราบปรามเซลล์ T effector61 ดังนั้น ระดับ IL-2 ใน BAL จึงลดลงเนื่องจาก CBD การเสริม Tregs ที่เกิดจากละอองลอยอาจเป็นสื่อกลางในการทำงานของทีเซลล์ผิดปกติ และการปราบปรามภูมิคุ้มกันแบบปรับตัวในปอด เพิ่มความไวต่อการติดเชื้อทางเดินหายใจ และทำให้เกิดผลลัพธ์ที่ไม่ดีต่อการฉีดวัคซีนป้องกันโรค เราสังเกตเห็นการลดลงอย่างมีนัยสำคัญของจำนวนมาโครฟาจคั่นระหว่างหน้าในปอดหลังจากได้รับ CBD Siglec-F+ ซึ่งโดยทั่วไปถือว่าเป็นเครื่องหมายของอีโอซิโนฟิล มีการแสดงออกอย่างมากในมาโครฟาจของถุงลมของหนู และเมื่อใช้ร่วมกับ CD11c จะระบุการระบุมาโครฟาจของถุงลมในปอดของหนูได้แม่นยำที่สุด การลดลงอย่างมีนัยสำคัญในจำนวน CD11bCD11c+Siglec-F+ alveolar macrophages ที่ตรวจพบในหนูที่สัมผัสกับ CBD ได้รับการสนับสนุนจากการศึกษาก่อนหน้านี้ 62 การศึกษาก่อนหน้านี้รายงานว่าการสัมผัส EC ในหนูทำให้เกิดความผิดปกติของถุงขนาดใหญ่มาโครฟาจที่เกี่ยวข้องกับการดูดซึมของเชื้อโรคที่ไม่ดี พร้อมการปรับปรุงร่วมกันของ ภาระของเชื้อโรคในปอดซึ่งมีความสัมพันธ์กับระยะเวลาการฟื้นตัวที่ล่าช้าและอัตราการเสียชีวิตที่เพิ่มขึ้นหลังการติดเชื้อ16 การลดลงอย่างเห็นได้ชัดในจำนวนอาร์จิเนสในปอดที่ต้านการอักเสบ-1+ M2 มาโครฟาจหลังจากการสูดดมละอองลอยของสาร CBD อาจส่งผลให้ภาวะสมดุลของภูมิคุ้มกันในปอดผิดปกติและความเสียหายเพิ่มเติม .63 สภาพแวดล้อมจุลภาคที่ทำให้เกิดการอักเสบที่เพิ่มขึ้นซึ่งตรวจพบในปอดหลังจากการสูดดม CBD ส่วนหนึ่งอาจมีสาเหตุมาจากจำนวนมาโครฟาจในปอด M2 ที่ต้านการอักเสบที่ลดลง จำนวนมาโครฟาจที่ลดลงอาจส่งผลกระทบอย่างมีนัยสำคัญต่อการตอบสนองของปอดต่อการติดเชื้อทางเดินหายใจ ซึ่งอาจเกิดจากการทำลายเซลล์มาโครฟาจที่ผิดปกติ ดังนั้น การสัมผัสกับละอองลอยจากบุหรี่ไฟฟ้าที่มีสารนิโคตินทำให้เกิดการลดลงของกระบวนการทำลายเซลล์ของฮีโมฟีลัส ไข้หวัดใหญ่ (NTHI) ที่ไม่สามารถพิมพ์ได้ โดยแมคโครฟาจ ซึ่งส่วนใหญ่เกิดจากการมีสารปรุงแต่งรสบุหรี่ไฟฟ้า64 เนื่องจากสารปรุงแต่งรสทั่วไปยังใช้สำหรับสูตร CBD อีกด้วย มันเพิ่มความเป็นไปได้ที่ความผิดปกติของมาโครฟาจที่เกิดจากสเปรย์ CBD อาจรุนแรงขึ้นด้วยการเติมสารเคมีแต่งกลิ่นต่างๆ

รูปที่ 6 การเพิ่มกิจกรรมของ myeloperoxidase (MPO) ในปอดหลังจากได้รับ CBD และละอองนิโคติน ( A, B ) เราวัดกิจกรรม MPO ในเนื้อเยื่อปอด lysates ของสัตว์ที่สัมผัสกับนิโคตินหรือ CBD โดยใช้ชุดทดสอบ MPO จาก Abcam ตามที่อธิบายไว้ในรายละเอียดในส่วนวัสดุเสริม แผงด้านซ้ายแสดงข้อมูลเป็นเพศชาย ในขณะที่แผงด้านขวาแสดงข้อมูลเป็นชายและหญิง ข้อมูลจะแสดงเป็นกล่องแปลงพร้อมหนวดที่ค่าต่ำสุดและสูงสุด การทดสอบครัสคัล-วาลลิสแบบไม่มีพารามิเตอร์พร้อมการแก้ไข FDR สำหรับการเปรียบเทียบหลายรายการได้ดำเนินการเพื่อดูว่ามีความแตกต่างที่มีนัยสำคัญทางสถิติระหว่างทั้งสองกลุ่มโดยใช้ซอฟต์แวร์ GraphPad Prism V.9 (GraphPad; La Jolla, California, USA) ความแตกต่างระหว่างทั้งสองกลุ่มถือว่ามีนัยสำคัญที่ p<0.05 and is indicated with the symbols *p<0.05, ****p<0.0001. In each experiment n=10 mice for air and CBD-vape exposures each (5 males+5 females) and n=9 for Nic-Vape group (5 males+4 females). CBD, cannabidiol; FDR, false discovery rate

รูปที่ 7 การเปลี่ยนแปลงศักยภาพในการต้านอนุมูลอิสระในปอดหลังจากได้รับสาร CBD และละอองนิโคติน เมื่อสิ้นสุดการสัมผัสนิโคตินหรือละอองลอย CBD หนูจะถูกการุณยฆาตและเตรียมไลเซตเนื้อเยื่อปอด ( A, B ) ระดับสารต้านอนุมูลอิสระทั้งหมดใน lysates เนื้อเยื่อปอดถูกวัดปริมาณโดยใช้ชุดทดสอบสารต้านอนุมูลอิสระของเคย์แมน (Cat # 709001) ตามที่อธิบายไว้ในรายละเอียดในส่วนวัสดุเสริมออนไลน์ แผงด้านซ้ายแสดงข้อมูลเป็นชายและหญิงรวมกัน ในขณะที่แผงด้านขวาแสดงข้อมูลเป็นชายและหญิง ข้อมูลจะแสดงเป็นกล่องแปลงพร้อมหนวดที่ค่าต่ำสุดและสูงสุด การทดสอบครัสคัล-วาลลิสแบบไม่อิงพารามิเตอร์พร้อมการแก้ไข FDR สำหรับการเปรียบเทียบหลายรายการถูกนำมาใช้เพื่อดูว่ามีความแตกต่างที่มีนัยสำคัญทางสถิติระหว่างทั้งสองกลุ่มโดยใช้ซอฟต์แวร์ GraphPad Prism V.9 (GraphPad; La Jolla, California, USA) ความแตกต่างระหว่างทั้งสองกลุ่มถือว่ามีนัยสำคัญที่ p<0.05 and is indicated by the symbol **p<0.01. In each experiment, n=10 mice for air and CBD-vape exposures each (5 males+5 females) and n=9 for the Nic-Vape group (5 males+4 females). CBD, cannabidiol; FDR, false discovery rate.

รูปที่ 8 สัณฐานวิทยาของเซลล์เยื่อบุผิว ความเป็นพิษต่อเซลล์ และความสมบูรณ์ของสิ่งกีดขวางเยื่อบุผิวของเซลล์เยื่อบุผิวทางเดินหายใจขนาดเล็ก (SAEC) ของมนุษย์หลังจากการสัมผัสกับ CBD และละอองลอยนิโคติน SAEC ของมนุษย์ (0.5 ล้านเซลล์/การเพาะเลี้ยงในรูปแบบ 6-รูปแบบเพลตหลุม) ได้รับการเพาะเลี้ยงในอาหารเลี้ยงเชื้อที่สมบูรณ์ในการเจริญเติบโตข้ามคืนและในวันถัดไปสัมผัสโดยตรงที่ส่วนต่อประสานอากาศ-ของเหลว (ALI) ถึง 110 พัฟของ อากาศ นิโคติน (นิโคติน 50 มก./มล.) หรือสเปรย์ที่ประกอบด้วย CBD (50 มก./มล.) ตามที่อธิบายไว้ในวิธีการ ละอองลอยทั้งหมดถูกสร้างขึ้นในปริมาตรแบบพัฟ 55 มล. ตามที่บรรยายไว้ในส่วนวิธีการ ในตอนท้ายของการสัมผัส เซลล์ถูกเอาออกจากห้อง ALI และบ่มในตัวกลางการเจริญเติบโตที่สมบูรณ์เป็นเวลา 24 ชั่วโมงที่ 37 องศา หลังจากสิ้นสุดระยะเวลาการพักฟื้น เซลล์จะถูกถ่ายภาพครั้งแรก (A – C ) ที่ × 200 ในกล้องจุลทรรศน์คอนทราสต์เฟส (Olympus IX73) จากนั้นทำการตรวจวิเคราะห์ความเป็นพิษของเซลล์โดยใช้ ( D ) วิธี trypan blue (วัดเป็นเปอร์เซ็นต์การตายของเซลล์) หรือ ( E ) ได้ดำเนินการตามวิธีการดูดซึมสีแดงที่เป็นกลาง (แสดงเป็นเปอร์เซ็นต์ของการควบคุมอากาศ) สำหรับ (F) การสอบวิเคราะห์ความสามารถในการซึมผ่านของ FITC-เด็กซ์แทรน, SAEC ของมนุษย์/สิ่งแทรกสำหรับการเพาะเลี้ยง 1 ล้านตัวถูกเพาะเลี้ยงข้ามคืนและวันถัดไปโดยตรงที่ ALI ถึง 110 การพ่นอากาศ, นิโคติน (นิโคติน 50 มก./มล.) หรือ CBD (50 มก./มล.) ที่ประกอบด้วย ละอองลอย เมื่อการเผยสัมผัสเสร็จสิ้น FITC-เด็กซ์แทรนที่ความเข้มข้น 10 มก./มล. ถูกเติมไปยังห้องปลายและบ่มเป็นเวลา 2.5 ชั่วโมง เก็บตัวอย่างจากห้อง basolateral และวัดแสงเรืองแสงโดยใช้ความยาวคลื่น Exci485/Emi528 ในเครื่องอ่านเพลทไฮบริด H1 ที่ทำงานร่วมกัน (BioTek) ความเข้มข้นของ FITC-เด็กซ์แทรนในห้องเบโซด้านข้างคำนวณโดยใช้เส้นโค้งมาตรฐาน ความแตกต่างระหว่างทั้งสองกลุ่มถือว่ามีนัยสำคัญที่ p<0.05 and is indicated with the symbol *p<0.05, calculated using non-parametric Kruskal-Wallis test with FDR correction for multiple comparisons by GraphPad prism V.9 software (GraphPad; La Jolla, California, USA). Results are depicted as box plots with whiskers at min and max from three independent experiments each performed in triplicate as described in online supplemental methods. CBD, cannabidiol; FDR, false discovery rate; SAECs, small airway epithelial cells.

รูปที่ 9 การตายของเซลล์อะพอพโทซิสในนิวโทรฟิลของมนุษย์บริสุทธิ์และระดับของนิวโทรฟิลอีลาสเทส (NE) ที่ปล่อยออกมาหลังจากการสัมผัสกับ CBD และละอองลอยนิโคติน นิวโทรฟิลของมนุษย์ที่บริสุทธิ์จากเลือดครบส่วนถูกเพาะที่ 0.8 ล้านเซลล์/สิ่งแทรกในการเพาะเลี้ยงในรูปแบบ 6- ในรูปแบบเพลตหลุมและสัมผัสกับอากาศ นิโคติน (นิโคติน 50 มก./มล.) หรือ CBD 110 ครั้งทันที ( 50 มก./มล.)-ประกอบด้วยละอองลอยที่ส่วนต่อประสานระหว่างอากาศและของเหลวในปริมาตรแบบพัฟขนาด 55 มล. ตามที่อธิบายไว้ในส่วนวิธีการ เมื่อสิ้นสุดการเผยสัมผัส เซลล์ถูกเอาออกจากห้อง ALI และนำกลับคืนในตัวกลางการเจริญเติบโตที่สมบูรณ์เป็นเวลา 24 ชั่วโมง ถัดไป การตายของเซลล์ถูกวัดโดยใช้ (A) การทดสอบการแยกสีย้อมสีน้ำเงินทริแพน และ (B) การตายของเซลล์แอนเนกซิน V-FITC ตามที่กล่าวไว้ในรายละเอียดในส่วนวิธีการ ทันทีหลังจากการแยกเดี่ยว ส่วนที่เหลือของนิวโทรฟิลบริสุทธิ์จะถูกเก็บไว้ในอาหารเลี้ยงเชื้อที่สมบูรณ์ในตู้บ่มเพาะ CO2 โดยเป็น 'ส่วนควบคุมที่ไม่ได้รับแสง' เชิงลบตลอดระยะเวลาของการทดสอบ เพื่อประเมินขอบเขตของการตายของเซลล์ การชักนำให้เกิดการตายของเซลล์ หรือระดับ NE ใน ไม่มีการสัมผัสใด ๆ ( C ) ระดับของ NE ถูกวัดปริมาณในอาหารเลี้ยงเชื้อปรับอากาศที่เก็บเกี่ยวหลังจากระยะเวลาการพักฟื้นสิ้นสุดลงโดยดำเนินการ NE ELISA ตามที่กล่าวไว้ในส่วนวิธีการ ข้อมูลถูกแสดงเป็นกล่องแปลงที่มีหนวดที่ต่ำสุดและสูงสุดจากการทดลองอิสระแต่ละครั้งดำเนินการเป็นสามเท่า สำหรับการทดสอบอะพอพโทซิส: ข้อมูลโดยเฉลี่ยจากผู้บริจาค n=5 รายต่อกลุ่ม สำหรับวิธีทริแพนบลู: ข้อมูลเฉลี่ยจากผู้บริจาค n=6 กลุ่มควบคุมที่ไม่ได้รับการควบคุม ผู้บริจาคแบบควบคุมทางอากาศและผู้บริจาค Nic-Vape n=7 และผู้บริจาค CBD-Vape n=8 สำหรับข้อมูลเฉลี่ยการทดสอบ NE จากผู้บริจาค n=6 รายต่อกลุ่ม) ความแตกต่างระหว่างทั้งสองกลุ่มถือว่ามีนัยสำคัญที่ p<0.05 which is indicated by the symbols *p<0.05, **p<0.01, ***p<0.001, ****p<0.0001 calculated using non-parametric Kruskal-Wallis test with FDR correction for multiple comparisons by GraphPad Prism V.9 software (GraphPad; La Jolla, California, USA). ALI, air–liquid interface; CBD, cannabidiol; FDR, false discovery rate.

ตารางที่ 2 การเปรียบเทียบเครื่องหมายต่างๆ ของผลลัพธ์การศึกษาหลังจากได้รับผลิตภัณฑ์สูบไอที่มีส่วนผสมของ CBD (CBD-vape) และผลิตภัณฑ์สูบไอที่มีนิโคติน (Nic-vape)

การมีอยู่ของมาโครฟาจในถุงไขมันที่เต็มไปด้วยไขมันที่สังเกตได้ในเซลล์ที่ได้รับการฟื้นฟูจาก BAL ของหนูหลังจากการสูดดมละอองลอยของสาร CBD ในการศึกษาของเรา ยืนยันกับรายงานก่อนหน้านี้ที่แสดงให้เห็นการโจมตีของโรคปอดบวมจากไขมันจากภายนอกในผู้ป่วยที่สูบไอน้ำมันกัญชาและมีไขมัน -มาโครฟาจในปอดที่เต็มไปด้วยภาระ65 เนื่องจากโรคปอดบวมจากไลโปอิดจากภายนอกที่มีมาโครฟาจในปอดที่มีไขมันเป็นจุดเด่นของ EVALI จึงชี้ให้เห็นว่าการสูดดมน้ำมัน CBD vape อาจไม่ปราศจากความเสี่ยงและอาจนำไปสู่อาการบาดเจ็บที่ปอดในไอระเหยของกัญชา กรณีต่างๆ ที่นำเสนอในรายงานทางคลินิกของ EVALI ชี้ให้เห็นถึงความเชื่อมโยงเชิงสาเหตุที่ชัดเจนยิ่งขึ้นระหว่างการสูบไอของกัญชากับการหายใจล้มเหลวเมื่อเปรียบเทียบกับการสูบไอนิโคติน65–68 ตรงกันข้ามกับการศึกษาก่อนหน้านี้ของเราในหนูที่สูดดม VEA (สาเหตุที่น่าจะเป็นไปได้ของ EVALI) ในการศึกษานี้ เรา ไม่ได้สังเกตว่ามีฟองมาโครฟาจ14 แม้ว่าความเสี่ยงโดยรวมของภาวะแทรกซ้อนในปอดที่เกี่ยวข้องกับการสูบไออาจต่ำกว่าเมื่อเทียบกับการสูบบุหรี่ แต่การสูบไอดูเหมือนจะก่อให้เกิดความเสี่ยงต่อสุขภาพของระบบทางเดินหายใจ โดยเฉพาะอย่างยิ่งในผู้สูบกัญชาในระยะยาว โดยสรุป การศึกษาของเราแสดงให้เห็นอย่างชัดเจนว่าสภาพแวดล้อมที่ทำให้เกิดการอักเสบในปอดที่เกิดจากการสูดดมละอองลอยของ CBD นั้นมากกว่าที่เกิดจากละอองลอยนิโคติน และสิ่งนี้สะท้อนให้เห็นจากการหยุดชะงักของความสมบูรณ์ของสิ่งกีดขวางในปอดและความเสียหายของปอด (สรุปในตารางที่ 2) สิ่งนี้ชี้ให้เห็นว่าการสูบไอของกัญชาอาจนำไปสู่ผลลัพธ์ที่รุนแรงยิ่งขึ้น รวมถึงความไวต่อการติดเชื้อทางเดินหายใจที่เพิ่มขึ้น การตอบสนองต่อการฉีดวัคซีนป้องกันโรคที่ไม่ดี และอาการที่แย่ลงในผู้ป่วยที่เป็นโรคปอดอักเสบที่อยู่ภายใต้โรค16–19 35 36 69 70 เราไม่ได้สังเกตเลย การเปลี่ยนแปลงพฤติกรรมของสัตว์ที่มองเห็นได้ในระหว่างหรือหลังการสัมผัส หรือการเปลี่ยนแปลงของน้ำหนักเมื่อเปรียบเทียบกับการควบคุมทางอากาศ (รูปเสริมออนไลน์ E11) ในการศึกษานี้ การได้รับละอองนิโคตินไม่ได้กระตุ้นให้เกิดระดับของไซโตไคน์/คีโมไคน์ต่างๆ ใน ​​BAL ในระดับเดียวกันเมื่อเปรียบเทียบกับการศึกษาครั้งก่อนๆ 71 สาเหตุของความคลาดเคลื่อนนี้อาจเป็นเพราะผู้เขียนเหล่านี้วัดระดับการถอดเสียงของไซโตไคน์ต่างๆ ในปอด ทำให้เป็นเนื้อเดียวกันหลังจากได้รับสารนิโคติน-ละอองลอย และระดับการถอดเสียงบางครั้งไม่ได้แปลเป็นการเปลี่ยนแปลงเมื่อวัดที่ระดับโปรตีนเหมือนกับที่เราทำ นอกจากนี้ โปรไฟล์ไซโตไคน์และการปรับระบบภูมิคุ้มกันยังขึ้นอยู่กับของเหลวอิเล็กทรอนิกส์ วิธีการสร้าง/ระยะเวลาการสัมผัสละอองลอย และสารเคมีแต่งกลิ่นรสที่เติมเข้าไป ในขณะที่กัญชาได้รับการพิสูจน์ว่ามีประโยชน์ต่อสุขภาพในการจัดการกับความเจ็บปวด การนอนหลับ และการบรรเทาอาการคลื่นไส้/อาเจียนที่เกิดจากเคมีบำบัดในผู้ป่วยโรคมะเร็งและในผู้ป่วยที่มีอาการชัก72–76 ขาดหลักฐานที่ชัดเจนเกี่ยวกับความปลอดภัยของกัญชาเมื่อนำกัญชาจากการสูบไอ สินค้า. ในเรื่องนี้ การศึกษาของเราเป็นเรื่องใหม่และระบุบทบาทของการสูดดมละอองลอย CBD ในการกระตุ้นการอักเสบในปอดและความเสียหายของปอด

cistanche tubulosa-ปรับปรุงระบบภูมิคุ้มกัน

เนื่องจากการศึกษาของเราใช้แบบจำลองการสัมผัสในสัตว์และในหลอดทดลอง จึงจำเป็นต้องพิจารณาข้อจำกัดหลายประการเมื่อคาดการณ์ผลลัพธ์ที่นำเสนอต่อการสัมผัสในชีวิตจริงในมนุษย์ ข้อจำกัดประการหนึ่งของการศึกษาวิจัยครั้งนี้คือการมุ่งเน้นไปที่การสัมผัสในระยะสั้นเท่านั้น ผลลัพธ์ของการได้รับละอองลอย CBD เรื้อรังในระยะยาว และผลกระทบต่อการตอบสนองต่อการติดเชื้อทางเดินหายใจและ/หรือการฉีดวัคซีนป้องกันโรคมีความสำคัญ วิธีการสัมผัสสัตว์ของเรานั้นใช้ระบบการสัมผัสทั้งร่างกาย และการสัมผัสกับจมูกเพียงอย่างเดียวอาจเหมาะสมกว่าในการจำลองการสัมผัสไอระเหยที่มีประสบการณ์ แม้จะใช้ระบบการสัมผัสทั้งร่างกาย แต่เราตรวจสอบได้ว่าการสะสมบนขนของสัตว์ (และผนังกรง) ไม่ได้มีส่วนช่วยในการกลืนอนุภาคโดยการดูแลสัตว์ และส่งผลต่อความเป็นพิษที่สังเกตได้ เราใช้หนูจำนวนจำกัดต่อกลุ่มที่ได้รับสัมผัส มีแนวโน้มว่าหนูจำนวนมากขึ้นอาจทำให้ข้อสรุปการศึกษาของเราแข็งแกร่งยิ่งขึ้น แม้ว่าแบบจำลอง ALI ในหลอดทดลองจะให้แนวทางเฉพาะการสัมผัสโดยการสูดดมสำหรับการดำเนินการการศึกษาทางชีววิทยาเกี่ยวกับผลกระทบต่อสุขภาพที่เกี่ยวข้องกับการใช้ผลิตภัณฑ์สูบไอ แต่การคาดการณ์ข้อมูลจากการศึกษาในหลอดทดลองกับความเสี่ยงในมนุษย์ยังคงเป็นสมมติฐาน การศึกษาเชิงสังเกตและการทดลองในอนาคตกับผู้ใช้ CBD เป็นประจำและผลิตภัณฑ์สูบไอที่มีนิโคตินเป็นสิ่งจำเป็นเพื่อยืนยันการค้นพบของเรา สุดท้ายนี้ ในการทดลองของเรา สัตว์และเซลล์สัมผัสกับละอองลอยจากผลิตภัณฑ์ทั้งสองที่เกิดขึ้นในลักษณะที่เหมือนกัน อย่างไรก็ตาม ผู้ใช้ผลิตภัณฑ์สูบไอจากกัญชาอาจใช้ผลิตภัณฑ์เหล่านี้ในลักษณะที่แตกต่างจากไอนิโคตินอย่างมาก (เช่น ใช้บ่อยน้อยกว่า) เมื่อข้อมูลจากการศึกษาเชิงสังเกตในกลุ่มไอระเหยของกัญชาเกิดขึ้น ควรคำนึงถึงความแตกต่างที่เป็นไปได้ในรูปแบบการใช้ผลิตภัณฑ์ที่สังเกตได้ในสภาวะที่สมจริง เมื่อจำลองการสัมผัสสัตว์และในหลอดทดลองในห้องปฏิบัติการ การศึกษาในอนาคตควรตรวจสอบผลกระทบต่อระบบทางเดินหายใจของผลิตภัณฑ์สูบไอที่มีสารแคนนาบินอยด์ในวงกว้าง รวมถึง THC

ข้อมูลอ้างอิง

1 กระทรวงสาธารณสุขของสหรัฐอเมริกาและ การใช้บุหรี่ไฟฟ้าในเยาวชนและผู้ใหญ่วัยหนุ่มสาว: รายงานของศัลยแพทย์ทั่วไป [PDF–8.47 MB]PDF icon แอตแลนตา จอร์เจีย: กระทรวงสาธารณสุขและบริการมนุษย์ของสหรัฐอเมริกา, CDC, 2016

2 Borodovsky JT, Crosier BS, Lee DC และคณะ การสูบบุหรี่ การสูบไอ การรับประทานอาหาร: การทำให้ถูกกฎหมายส่งผลกระทบต่อวิธีที่ผู้คนใช้กัญชาหรือไม่? นโยบายยา Int J 2016;36:141–7

3 He T, Oks M, Esposito M และคณะ "Tree-in-bloom": อาการบาดเจ็บเฉียบพลันที่ปอดอันเนื่องมาจากการสูบไอของน้ำมันกัญชา แอน อัม ทอรัค โซค 2017;14:468–70.

4 แนปป์ AA, Lee DC, Borodovsky JT และคณะ แนวโน้มใหม่ในการบริหารกัญชาในกลุ่มผู้ใช้กัญชาวัยรุ่น สุขภาพของ J Adolesc 2019;64:487–93.

5 Kriegel D. Vaping กัญชากับการสูบบุหรี่: มีผู้ชนะหรือไม่? 2021. พร้อมใช้งาน: https://vaping360.com/learn/vaping-vs-hooking-weed/ [เข้าถึง 15 ก.ย. 2021].

6 Volkow ND, Baler RD, Compton WM และคณะ ผลกระทบต่อสุขภาพจากการใช้กัญชา เอ็น เอ็ง เจ เมด 2014;370:2219–27.

7 Pahr K, Carter A. คู่มือสำหรับผู้เริ่มต้นสู่ CBD สายสุขภาพ 2562. พร้อมใช้งาน: https://www. healthline.com/health/your-cbd-guide [เข้าถึง 19 ส.ค. 2564]

8 สุไลมาน ส. ความเป็นพิษของปิโตรเลียมไฮโดรคาร์บอน ในหลอดทดลอง: ผลของเอ็น-อัลเคน เบนซีน และโทลูอีนต่อแมคโครฟาจในถุงลมปอดและเอนไซม์ไลโซโซมในปอด อาร์ค ท็อกซิคอล 1987;59:402–7.

9 Lachenmeier DW, Kuballa T, Reusch H และคณะ เบนซีนในน้ำแครอทสำหรับทารก: ข้อมูลเชิงลึกเพิ่มเติมเกี่ยวกับกลไกการสร้างและการประเมินความเสี่ยง รวมถึงข้อมูลการบริโภคจากการศึกษาของโดนัลด์ เคมีอาหาร Toxicol 2010;48:291–7.

10 Li YS, Li YF, Li QN และคณะ ความเป็นพิษเฉียบพลันต่อปอดในหนูที่เกิดจากท่อนาโนคาร์บอนหลายผนัง เบนซิน และการรวมกันของพวกมัน สภาพแวดล้อมเป็นพิษ 2010;25:409–17.

11 Anderson RP, Zechar K. Lung อาการบาดเจ็บจากการสูดดมน้ำมันกัญชาบิวเทนเลียนแบบโรคปอดบวม ตัวแทนเคส Respir Med 2019;26:171–3.

12 โฮลท์ AK, Poklis JL, นายสันติภาพ การวิเคราะห์องค์ประกอบทางเคมีย้อนหลังในของเหลวบุหรี่ไฟฟ้าที่มีการควบคุมและไร้การควบคุม ฟร้อนท์เคมี 2021;9:752342.

13 Blount BC, Karwowski MP, Shields PG และคณะ วิตามินอีอะซิเตตในน้ำล้างหลอดลมที่เกี่ยวข้องกับ EVALI N Engl J Med 2020;382:697–705.

14 Bhat TA, Kalathil SG, Bogner PN และคณะ แบบจำลองสัตว์ของวิตามินอีอะซิเตตที่สูดดมและการบาดเจ็บที่ปอดคล้าย EVALI N Engl J Med 2020;382:1175–7.

15 Merecz-Sadowska A, Sitarek P, Zielinska-Blizniewska H, ​​และคณะ บทสรุปของการศึกษาในหลอดทดลองและในสัตว์ทดลองที่ประเมินผลกระทบของการสัมผัสบุหรี่ไฟฟ้าต่อสิ่งมีชีวิตและสิ่งแวดล้อม Int J Mol วิทย์ 2020;21:652.

16 Sussan TE, Gajghate S, Thimmulappa RK และคณะ การสัมผัสกับบุหรี่ไฟฟ้าจะช่วยลดการป้องกันแบคทีเรียและไวรัสในปอดในแบบจำลองเมาส์ กรุณาหนึ่ง 2015;10:e0116861.

17 ฮวาง เจเอช, ไลส์ เอ็ม, สลาเดวสกี เค และคณะ การสูดดมบุหรี่ไฟฟ้าจะเปลี่ยนแปลงภูมิคุ้มกันโดยธรรมชาติและไซโตไคน์ของทางเดินหายใจ ขณะเดียวกันก็เพิ่มความรุนแรงของการตั้งอาณานิคมของแบคทีเรีย เจ โมล เมด (เบอร์ลิน) 2016;94:667–79.

18 มาร์ติน EM, แคลปป์ PW, Rebuli ME และคณะ การใช้บุหรี่ไฟฟ้าทำให้เกิดการยับยั้งยีนภูมิคุ้มกันและตอบสนองต่อการอักเสบในเซลล์เยื่อบุจมูกซึ่งคล้ายกับควันบุหรี่ Am J Physiol ปอดเซลล์ Mol Physiol 2016;311:L135–44.

19 Rebuli ME, Glista-Baker E, Hoffman JR และคณะ การใช้บุหรี่ไฟฟ้าเปลี่ยนแปลงการตอบสนองทางภูมิคุ้มกันของเยื่อเมือกในจมูกต่อไวรัสไข้หวัดใหญ่ชนิดเชื้อเป็น การทดลองทางคลินิก ฉันคือ J Respir Cell Mol Biol 2021;64:126–37.

20 Bloom JW, Kaltenborn WT, Paoletti P, และคณะ ผลต่อระบบทางเดินหายใจของบุหรี่ที่ไม่สูบบุหรี่ Br Med J (คลิน เรส เอ็ด) 1987;295:1516–8.

21 พินัยกรรม TA, Pagano I, Williams RJ, และคณะ การใช้บุหรี่ไฟฟ้าและความผิดปกติของระบบทางเดินหายใจในกลุ่มตัวอย่างผู้ใหญ่ การพึ่งพายาเสพติดแอลกอฮอล์ 2019;194:363–70.

22 Xie W, Kathuria H, Galiatsatos P, และคณะ ความสัมพันธ์ระหว่างการใช้บุหรี่ไฟฟ้ากับภาวะทางเดินหายใจที่เกิดขึ้นในผู้ใหญ่ในสหรัฐอเมริกาตั้งแต่ปี 2013 ถึง 2018 JAMA Netw Open 2020;3:e2020816

23 ภัตตะ DN, Glantz SA ความสัมพันธ์ระหว่างการใช้บุหรี่ไฟฟ้ากับโรคระบบทางเดินหายใจในผู้ใหญ่: การวิเคราะห์ระยะยาว ฉันคือ J Prev Med 2020;58:182–90.

24 Li D, Sundar IK, McIntosh S, และคณะ ความสัมพันธ์ของการสูบบุหรี่และการใช้บุหรี่ไฟฟ้ากับอาการหายใจดังเสียงฮืด ๆ และอาการทางเดินหายใจที่เกี่ยวข้องในผู้ใหญ่: ผลลัพธ์ภาคตัดขวางจากการประเมินประชากรของการศึกษายาสูบและสุขภาพ (เส้นทาง) คลื่นที่ 2 การควบคุม Tob 2020; 29:140–7

25 ทาชกิน DP, โคลสัน AH, คลาร์ก เวอร์จิเนีย และคณะ อาการทางระบบทางเดินหายใจและการทำงานของปอดในผู้สูบกัญชาปริมาณมากเป็นปกติวิสัย ผู้สูบกัญชาและยาสูบ ผู้สูบยาสูบเพียงอย่างเดียว และผู้ไม่สูบบุหรี่ ฉัน Rev Respir Dis 1987;135:209–16.

26 ทาชกิน DP. กัญชารมควันเป็นสาเหตุของการบาดเจ็บที่ปอด Monaldi Arch Chest Dis 2005;63:93–100.

27 ทาชกิน DP. ผลของการสูบกัญชาต่อปอด แอน อัม ทอแร็ค โซค 2013;10:239–47.

28 บอลด์วิน GC, ทาชกิน DP, บัคลีย์ DM, และคณะ กัญชาและโคเคนทำให้การทำงานของแมคโครฟาจในถุงลมลดลงและการผลิตไซโตไคน์ลดลง ฉันคือ J Respir Crit Care Med 1997;156:1606–13.

29 Taylor DR, Poulton R, Moffitt TE และคณะ ผลต่อระบบทางเดินหายใจของการพึ่งพากัญชาในคนหนุ่มสาว การเสพติด 2000;95:1669–77.

30 อัลดิงตัน เอส, วิลเลียมส์ เอ็ม, โนวิทซ์ เอ็ม, และคณะ ผลของกัญชาต่อโครงสร้าง การทำงาน และอาการของปอด ทรวงอก 2007;62:1058–63.

31 Moore BA, Augustson EM, Moser RP, และคณะ ผลต่อระบบทางเดินหายใจของการใช้กัญชาและยาสูบในตัวอย่างที่สหรัฐอเมริกา เจเจ็น แพทย์ฝึกหัด 2548;20:33–7.

32 Goniewicz ML, Knysak J, Gawron M, และคณะ ระดับสารก่อมะเร็งและสารพิษที่เลือกสรรในไอจากบุหรี่ไฟฟ้า การควบคุมโทบ 2014;23:133–9.

33 Bhat TA, Kalathil SG, Leigh N และคณะ ผลกระทบเฉียบพลันของการสูดดมละอองของผลิตภัณฑ์ยาสูบที่ให้ความร้อน (IQOS) ต่อความเสียหายของเนื้อเยื่อปอดและการเปลี่ยนแปลงของการอักเสบในปอด นิโคตินทอปเรส 2021;23:1160–7.

34 คอสมิเดอร์ แอล, แจ็คสัน เอ, ลีห์ เอ็น และคณะ พฤติกรรมการพองตัวของวงจรชีวิตและภูมิประเทศของผู้ใช้บุหรี่ไฟฟ้า ต็อบเรกุลวิทย์ 2018;4:41–9.

35 Bhat TA, Kalathil SG, Bogner PN และคณะ ควันบุหรี่มือสองทำให้เกิดการอักเสบและทำให้ภูมิคุ้มกันต่อการติดเชื้อทางเดินหายใจลดลง เจ อิมมูนอล 2018;200:2927–40.

36 Bhat TA, Kalathil SG, Bogner PN และคณะ AT-rvd1 บรรเทาควันบุหรี่มือสองที่ทำให้อาการปอดอักเสบรุนแรงขึ้น และฟื้นฟูภูมิคุ้มกันต้านเชื้อแบคทีเรียที่ควันบุหรี่มือสอง เจ อิมมูนอล 2021;206:1348–60.

37 คาร์เดน ดี เซียว เอฟ โมค ซี และคณะ นิวโทรฟิลอีลาสเทสส่งเสริมการบาดเจ็บของหลอดเลือดขนาดเล็กในปอดและการสลายโปรตีนของ cadherins บุผนังหลอดเลือด วารสารสรีรวิทยาอเมริกัน - สรีรวิทยาหัวใจและระบบไหลเวียนโลหิต 2541; 275: H385–92

38 Kawabata K, Hagio T, Matsuoka S. บทบาทของนิวโทรฟิลอีลาสเทสในการบาดเจ็บที่ปอดเฉียบพลัน ยูโรเจเรฟ 2002;451:1–10.

39 ข่าน AA, อัลซาห์ลี MA, เราะห์มานี AH Myeloperoxidase เป็นตัวชี้วัดทางชีวภาพของโรค: มุมมองทางชีวเคมีและพยาธิวิทยาล่าสุด Med Sci (บาเซิล) 2018;6:33.

40 ดีเทอร์ต เค, กัตเบียร์ บี, วีนโฮลด์ เอสเอ็ม และคณะ สเปกตรัมของจุลพยาธิวิทยาของเชื้อโรคและแบบจำลองเฉพาะในแบบจำลองเมาส์ของโรคปอดบวมเฉียบพลัน กรุณาหนึ่ง 2017;12:e0188251.

41 ก้น YM, Smith ML, Tazelaar HD และคณะ พยาธิวิทยาของการบาดเจ็บที่ปอดที่เกี่ยวข้องกับการสูบไอ N Engl J Med 2019;381:1780–1.

42 ลี WL, ดาวนีย์ GP การกระตุ้นนิวโทรฟิลและการบาดเจ็บที่ปอดเฉียบพลัน Curr ความคิดเห็น Crit Care 2001; 7: 1–7

43 ฟิงค์ ส.ส. บทบาทของออกซิเจนและไนโตรเจนที่เกิดปฏิกิริยาในกลุ่มอาการหายใจลำบากเฉียบพลัน Curr ความคิดเห็น Crit Care 2002; 8: 6–11

44 Abraham E. Neutrophils และการบาดเจ็บที่ปอดเฉียบพลัน ยาคริตแคร์ 2003;31:S195–9

45 แพม CTN. นิวโทรฟิลซีรีนโปรตีเอสปรับการตอบสนองต่อการอักเสบ Int J Biochem เซลล์ Biol 2008;40:1317–33.

46 Arecco N, Clarke CJ, Jones FK และคณะ ระดับและกิจกรรมของอีลาสเทสจะเพิ่มขึ้นในกล้ามเนื้อ dystrophic และทำให้การอยู่รอดของเซลล์ไมโอบลาสต์ลดลง การเพิ่มจำนวน และความแตกต่าง ตัวแทนวิทยาศาสตร์ 2559;6:24708.

47 Czégény Z, Nagy G, Babinszki B, และคณะ CBD เป็นสารตั้งต้นของ THC ในบุหรี่อิเล็กทรอนิกส์ ตัวแทนวิทยาศาสตร์ 2021;11:8951.

48 ลินเด็น เอ, ลาอัน เอ็ม, แอนเดอร์สัน GP. นิวโทรฟิล อินเตอร์ลิวคิน-17เอ และโรคปอด ยูโร เรสปิริ เจ 2005;25:159–72.

49 Ma K, Yang L, Shen R และคณะ เซลล์ Th17 ควบคุมการผลิต CXCL1 ในมะเร็งเต้านม อินท์ อิมมูโนฟาร์มาคอล 2018;56:320–9.

50 Becker S, Quay J, Koren HS และคณะ การแสดงออกของ MCP-1 ที่เป็นส่วนประกอบและกระตุ้น GRO อัลฟา เบต้า และแกมมาในเยื่อบุผิวทางเดินหายใจของมนุษย์และมาโครฟาจในหลอดลมและถุงลม ฉันชื่อเจ ฟิสิออล 1994;266:L278–86

51 Potey PM, Rossi AG, Lucas CD และคณะ นิวโทรฟิลในการเริ่มต้นและการแก้ไขของการอักเสบในปอดเฉียบพลัน: ทำความเข้าใจการทำงานทางชีวภาพและศักยภาพในการรักษา เจ พาทอล 2019;247:672–85.

52 Heijink IH, Brandenburg SM, Postma DS, และคณะ ควันบุหรี่ทำให้การทำงานของสิ่งกีดขวางเยื่อบุทางเดินหายใจลดลงและการฟื้นฟูการสัมผัสระหว่างเซลล์และเซลล์ ยูโร Respir J 2012;39:419–28.

53 Aghapour M, Raee P, Moghaddam SJ และคณะ ความผิดปกติของสิ่งกีดขวางเยื่อบุทางเดินหายใจในโรคปอดอุดกั้นเรื้อรัง: บทบาทของการสัมผัสควันบุหรี่ ฉันคือ J Respir Cell Mol Biol 2018;58:157–69.

54 Shapiro SD, Goldstein NM, Houghton AM และคณะ นิวโทรฟิลอีลาสเทสมีส่วนทำให้เกิดถุงลมโป่งพองที่เกิดจากควันบุหรี่ในหนู แอม เจ พาทอล 2003;163:2329–35.

55 Antunes MA, Rocco PRM. ถุงลมโป่งพองในปอดที่เกิดจากอีลาสเทส: ข้อมูลเชิงลึกจากแบบจำลองการทดลอง อัน Acad Bras Cienc 2011;83:1385–96.

56 Ghosh A, Coakley RD, Ghio AJ และคณะ การใช้บุหรี่ไฟฟ้าแบบเรื้อรังจะเพิ่มระดับนิวโทรฟิลอีลาสเทสและเมทริกซ์เมทัลโลโปรตีเอสในปอด ฉันคือ J Respir Crit Care Med 2019;200:1392–401.

57 Fortunati E, Kazemier KM, Gutters JC และคณะ นิวโทรฟิลของมนุษย์จะเปลี่ยนไปใช้ฟีโนไทป์ที่ถูกกระตุ้นหลังจากกลับบ้านไปที่ปอด โดยไม่คำนึงถึงโรคที่เกิดจากการอักเสบ คลินิก Exp Immunol 2009;155:559–66.

58 ศรัทธา เอ็ม, สุกุมารัน เอ, พูลิมูด เอบี และคณะ ตัวบ่งชี้การอักเสบมีความน่าเชื่อถือเพียงใดในการทำงานของ myeloperoxidase คลิน ชิม แอคตา 2008;396:23–5.

59 เลา ดี, โมลเนา เอช, ไอเซริช เจพี และคณะ Myeloperoxidase เป็นสื่อกลางในการกระตุ้นนิวโทรฟิลโดยการเชื่อมโยงกับอินทิกริน CD11b / CD18 Proc Natl Acad Sci สหรัฐอเมริกา 2548;102:431–6.

60 ชมิดต์ เอ, โอเบอร์เล เอ็น, แครมเมอร์ พีเอช. กลไกระดับโมเลกุลของการปราบปรามทีเซลล์ที่ใช้ Treg ภูมิคุ้มกันส่วนหน้า 2555;3:51.

61 ธอร์นตัน (AM), เชวัค EM. ทีเซลล์กระตุ้นภูมิคุ้มกัน CD4+CD25+ ยับยั้งการกระตุ้นโพลีโคลนอลทีเซลล์ ในหลอดทดลอง โดยการยับยั้งการผลิตอินเตอร์ลิวคิน 2 เจประสบการณ์แพทย์ 1998;188:287–96.

62 Kalininskiy A, Kittel J, Nacca NE และคณะ การสัมผัสกับบุหรี่ไฟฟ้า การติดเชื้อทางเดินหายใจ และภูมิคุ้มกันโดยกำเนิดบกพร่อง: การทบทวนเชิงบรรยาย เมดสำหรับเด็ก 2021;4:5.

63 Lucas R, Czikora I, Sridhar S, และคณะ Arginase 1: ตัวกลางไกล่เกลี่ยที่ไม่คาดคิดของความผิดปกติของกั้นเส้นเลือดฝอยในปอดในรูปแบบของการบาดเจ็บที่ปอดเฉียบพลัน อิมมูนอลหน้า 2013;4:228.

64 Ween MP, Whittall JJ, Hamon R และคณะ Phagocytosis และการอักเสบ: การสำรวจผลกระทบของส่วนประกอบของไอบุหรี่อิเล็กทรอนิกส์ต่อแมคโครฟาจ ตัวแทนฟิสิออล 2017;5:e13370.

65 เกย์ B, ฟิลด์ Z, Patel S, และคณะ การบาดเจ็บที่ปอดจากการสูบไอ: กรณีของโรคปอดบวมจากไขมันที่เกี่ยวข้องกับบุหรี่ไฟฟ้าที่มีกัญชา ตัวแทนเคส พูลโมนอล 2020;2020:7151834.

66 Abeles M, Popofsky S, Wen A และคณะ การบาดเจ็บที่ปอดที่เกี่ยวข้องกับการสูบไอที่เกิดจากการสูดดมน้ำมันกัญชา กุมารพัลโมนอล 2020;55:226–8.

67 Adapa S, Gayam V, Konala VM และคณะ ความเป็นพิษเฉียบพลันต่อปอดเฉียบพลันที่เกิดจากกัญชา: ซีรีส์กรณีศึกษาและการทบทวนวรรณกรรม J Investig Med ตัวแทนกรณีผลกระทบสูง 2020;8:2324709620947267

68 Conuel EJ, Chieng HC, Fantauzzi J และคณะ การบาดเจ็บที่ปอดที่เกี่ยวข้องกับการสูบไอของน้ำมันแคนนาบินอยด์ และลักษณะภาพเอ็กซ์เรย์ ฉันเจเมด 2020;133:865–7.

69 Lugade AA, Bogner PN, Thatcher TH และคณะ การได้รับควันบุหรี่ทำให้ปอดอักเสบรุนแรงขึ้นและลดภูมิคุ้มกันต่อการติดเชื้อแบคทีเรีย เจ อิมมูนอล 2014;192:5226–35.

70 Bhat TA, Kalathil SG, Miller A และคณะ ผู้ไกล่เกลี่ยที่เชี่ยวชาญเฉพาะด้านสามารถเอาชนะการปราบปรามภูมิคุ้มกันที่เกิดจากการสัมผัสกับควันบุหรี่มือสอง เจ อิมมูนอล 2020;205:3205–17.

71 Garcia-Arcos I, Geraghty P, Baumlin N, และคณะ การได้รับบุหรี่อิเล็กทรอนิกส์แบบเรื้อรังในหนูจะทำให้เกิดลักษณะของ COPD ในลักษณะที่ขึ้นอยู่กับนิโคติน ทรวงอก 2016;71:1119–29.

72 บูซ GW. Cannabidiol เป็นกลยุทธ์การรักษาที่เกิดขึ้นใหม่ในการลดผลกระทบของการอักเสบต่อความเครียดจากปฏิกิริยาออกซิเดชั่น ฟรี Radic Biol Med 2011;51:1054–61.

73 Rosenberg EC, Tsien RW, Whalley BJ และคณะ แคนนาบินอยด์และโรคลมบ้าหมู การบำบัดทางระบบประสาท 2558;12:747–68.

74 สถาบันวิทยาศาสตร์ วิศวกรรมศาสตร์ การแพทย์แห่งชาติ; กองสุขภาพและการแพทย์. ผลการรักษาของกัญชาและแคนนาบินอยด์ ใน: ผลกระทบต่อสุขภาพของกัญชาและแคนนาบินอยด์: สถานะปัจจุบันของหลักฐานและข้อเสนอแนะสำหรับการวิจัย สำนักพิมพ์สถาบันการศึกษาแห่งชาติ, 2017.

75 Thiele EA, Marsh ED, JA ฝรั่งเศส และคณะ Cannabidiol ในผู้ป่วยที่มีอาการชักที่เกี่ยวข้องกับกลุ่มอาการ Lennox-gestalt (GWPCARE4): การทดลองระยะที่ 3 แบบสุ่ม, ปกปิดสองด้าน, ควบคุมด้วยยาหลอก มีดหมอ 2018;391:1085–96.

76 สำนักงานคณะกรรมการอาหารและยาแห่งสหรัฐอเมริกา FDA อนุมัติยาตัวแรกที่ประกอบด้วยสารออกฤทธิ์ที่ได้มาจากกัญชาเพื่อรักษาโรคลมบ้าหมูในรูปแบบที่รุนแรงและหายาก 2018. พร้อมใช้งาน: https://www.fda.gov/NewsEvents/Newsroom/PressAnnouncements/ ucm611046.htm [เข้าถึง 15 ก.ย. 2021]