สารต้านอนุมูลอิสระใหม่จากผลพลอยได้จากโรงเบียร์สำหรับสูตรเครื่องสำอาง 2
Jul 06, 2022
โปรดติดต่อoscar.xiao@wecistanche.comสำหรับข้อมูลเพิ่มเติม
2.11. การวิเคราะห์ทางสถิติ
ข้อมูลแสดงเป็นค่าเฉลี่ย±ส่วนเบี่ยงเบนมาตรฐาน (SD) ของการทดลองอิสระอย่างน้อยสามครั้ง การวิเคราะห์ทางสถิติดำเนินการโดยใช้ ANOVA ทางเดียวกับ Dunnett หรือ Bonferroni post hoc test และ Student's t-test ตามความเหมาะสม ความแตกต่างถือว่ามีนัยสำคัญที่ p<0.05. analyses="" were="" performed="" using="" graphpad="" prism="" software="" (version="" 5.0;="" graphpad="" software,="" la="" jolla,="" ca,="" usa)="" on="" a="" windows="">0.05.>

กรุณาคลิกที่นี่เพื่อทราบข้อมูลเพิ่มเติม
3. ผลลัพธ์และการอภิปราย
3.1.กระบวนการผลิตคราฟต์เบียร์ภายใต้การศึกษา
คราฟท์เบียร์ต่างจากเบียร์ที่ผลิตในอุตสาหกรรมตรงที่ไม่มีการพาสเจอร์ไรส์หรือผ่านการกรอง ดังนั้นจึงรักษาองค์ประกอบ กลิ่น และรสชาติของเบียร์ไว้ได้มากกว่า องค์ประกอบของคราฟต์เบียร์เป็นเพียงน้ำ มอลต์ ฮ็อพ และยีสต์ (Saccharomyces Cerevisiae) โดยไม่มีสารเติมแต่งอื่น ๆ ดังนั้นส่วนผสมทางเคมีที่มีอยู่ในเบียร์จึงขึ้นอยู่กับส่วนผสมที่เติมและขจัดออกในระหว่างกระบวนการผลิตเบียร์ [8] . ผู้ผลิตคราฟต์เบียร์มักหลีกเลี่ยงการเติมกรดซิตริก ซึ่งอาจส่งผลให้ผลิตภัณฑ์ออกซิเดชันลดลง หรือสารเติมแต่งอื่นๆ เช่น กลิ่น น้ำตาล รส และน้ำผลไม้ [8] ในเบียร์ที่ศึกษาในงานปัจจุบัน ไม่ได้ใช้สารเติมแต่งใดๆ และส่วนประกอบคือน้ำที่ยังไม่ผ่านกระบวนการ มอลต์ ฮ็อพ และยีสต์
ตารางที่ 1 แสดงรายการเบียร์ที่ศึกษาในงานปัจจุบันและระบุองค์ประกอบและคุณสมบัติหลัก ข้อมูลอื่น ๆ เกี่ยวกับเบียร์เป็นความลับและไม่สามารถเปิดเผยได้ รูปที่ 1 แสดงขั้นตอนการผลิตคราฟต์เบียร์ที่ใช้ในงานนี้

ขั้นตอนการผลิตเบียร์คราฟต์เบียร์เริ่มต้นด้วยส่วนผสมของมอลต์และน้ำในสัดส่วนที่เหมาะสม สามารถใช้มอลต์ที่แตกต่างกันห้าชนิดและผสมเข้าด้วยกันตามสูตรที่แตกต่างกัน (ตารางที่ 1) น้ำและมอลต์จะถูกทำให้ร้อนที่อุณหภูมิ 70 องศาเป็นเวลา 90 นาที และสาโทที่ได้จะถูกกรองเพื่อขจัดมอลต์ที่ใช้แล้ว ในขั้นตอนต่อไป สามารถใช้ Perle และ Saaz ได้ 2 แบบในสัดส่วนที่ต่างกัน ฮอปส์จะถูกเติมลงในสาโทที่กรองแล้วและต้มที่อุณหภูมิ 100 องศาเป็นเวลา 90 นาที หลังจากนั้นฮ็อพที่ใช้แล้วจะถูกลบออกโดยการหมุนเหวี่ยง (กระบวนการวังวน) ในช่วงเวลา 1300-1550 ขึ้นอยู่กับขนาดของแบทช์ ขั้นตอนต่อไปคือการหมักเมื่อเติมยีสต์ Saccharomyces Cerevisiae และให้ความร้อนที่ 20-22 องศาเป็นเวลา 90 นาทีเพื่อเปลี่ยนน้ำตาลให้เป็นแอลกอฮอล์ ยีสต์ที่ใช้แล้วจะถูกลบออกโดยการหมุนเหวี่ยง เบียร์ที่ได้จะถูกบรรจุขวด และหลังจากช่วงระยะเวลาแปรผันของการสุกเต็มที่ 20-30 วัน ก็พร้อมสำหรับการบริโภค โดยสรุป ส่วนผสมในการต้ม ได้แก่ น้ำ มอลต์ ฮ็อพ และยีสต์ ผลิตภัณฑ์ขั้นกลาง ได้แก่ สาโท สาโทหลังจากฮ็อพ (สาโทหลังจากการต้มกับฮ็อพและการกำจัดฮ็อพที่ใช้แล้ว) และเบียร์หลังจากยีสต์ (เบียร์ที่เกิดขึ้นหลังจากการหมักและการกำจัดยีสต์ที่ใช้แล้วในเวลาต่อมา) ผลิตภัณฑ์สุดท้ายคือเบียร์ที่สุกแล้ว วัสดุที่ใช้แล้ว ได้แก่ มอลต์ ฮ็อพ และยีสต์ ผลิตภัณฑ์ทั้งหมดเหล่านี้ได้รับการวิเคราะห์อย่างครบถ้วนสำหรับปริมาณฟีนอลทั้งหมดและความสามารถในการต้านอนุมูลอิสระ
3.2. การกำหนดปริมาณฟีนอลทั้งหมด
การศึกษาก่อนหน้านี้ [10] ระบุโพลีฟีนอลสี่สิบเจ็ดชนิดในเบียร์เชิงพาณิชย์สี่ประเภท ได้แก่ ลาเกอร์ พิลเซ่น มาร์เซเบียร์ และเบียร์ไม่มีแอลกอฮอล์ โดยใช้เทคนิคอิเล็กโตรสเปรย์ไอออไนซ์แบบไฮบริด ในบรรดาโพลีฟีนอล เป็นไปได้ที่จะระบุกรดฟีนอลิก ไฮดรอกซีซินนาโมอิลควินิกส์ ฟลาโวนอล ฟลาโวน อัลคิลเมทพีซีฟีนอล อัลฟาและกรดไอโซ-อัลฟา-กรด กรดไฮดรอกซีฟีนิลอะซิติก และเพรนิลฟลาโวนอยด์
ในคราฟต์เบียร์ การศึกษาอื่นระบุสารประกอบฟีนอลและไนโตรเจนโดยโครมาโตกราฟีของเหลวประสิทธิภาพสูงและแมสสเปกโตรเมตรี [11] มีการระบุสารประกอบฟีนอล 57 ชนิด ร่วมกับสารประกอบไนโตรเจน 11 ชนิดที่อยู่ในคลาสฟีนนอกไซด์

Cistanche สามารถต่อต้านริ้วรอย
ในการศึกษาก่อนหน้านี้ [12] สารประกอบฟีนอล 20 ชนิด เช่น กรดแกลลิก คาเทชิน หรือฮิวมูโลน ถูกหาปริมาณในคราฟต์เบียร์ สาโท ส่วนผสม และผลิตภัณฑ์ใช้แล้วทั้งหกชนิดของการศึกษาปัจจุบันโดย LC- ที่ผ่านการตรวจสอบแล้ว วิธี MS/MS ผลรวมของสารประกอบฟีนอล (SPC) ที่ระบุและหาปริมาณในมอลต์ข้าวบาร์เลย์ไม่มีนัยสำคัญและมักเกิดจากกรดทรานส์-พี-คูมาริก ซึ่งถูกถ่ายโอนไปยังสาโทในระหว่างการเตรียมที่ต้องเตรียมและรับผิดชอบต่อ SPC ที่ไม่มีความสำคัญของ สาโท กรดขมและเพรนิลฟลาโวนอยด์ถูกตรวจพบในฮ็อพเริ่มต้น ในขณะที่ความเข้มข้นของพวกมันลดลงในฮ็อพที่ใช้แล้ว ซึ่งบ่งชี้ว่าพวกมันถูกถ่ายโอนไปยังระดับกลางของการผลิต สารประกอบฟีนอลิกซึ่งส่วนใหญ่มีอยู่ในมอลต์และฮ็อพของข้าวบาร์เลย์เริ่มต้น ลดลงในเบียร์ขั้นสุดท้ายเนื่องจากถูกดูดซึมเข้าสู่ยีสต์ที่เติมเพื่อการหมัก
จากผลลัพธ์ก่อนหน้านี้ เราสามารถสรุปได้ว่าสารประกอบฟีนอลอาจส่งผลต่อปริมาณฟีนอลรวม (TPC) ของเบียร์ภายใต้การศึกษา เมื่อดูผลการวิเคราะห์ TPC ของเรา รายงานในตารางที่ 3 ดูเหมือนว่าตัวทำละลายในการสกัดจะมีผลอย่างมากต่อ TPC ในความเป็นจริง มอลต์เริ่มต้นภายใต้การสกัดเอทานอลมีค่า TPC ที่สูงกว่าค่าการสกัดด้วยน้ำ โดยมีค่าการสกัดในเอทานอลค่อนข้างมาก ตั้งแต่ 28 ถึง 72 มก. GAE/g และช่วงที่จำกัดสำหรับสารสกัดในน้ำ , จากประมาณ 11 ถึง 16 มก. GAE/g.cistanche การยืดอายุสิ่งนี้บ่งชี้ว่าสำหรับสารประกอบที่สามารถมีอิทธิพลต่อ TPC ในการศึกษานี้ การสกัดในเอทานอลจะมีประสิทธิภาพมากกว่าในน้ำ Zhao et al รายงานผลลัพธ์ที่คล้ายกันเกี่ยวกับค่า TPC [9] สำหรับข้าวบาร์เลย์ 14 สายพันธุ์ที่สกัดด้วยอะซิโตน โดยให้ค่า GAE/g จาก 2.17 ถึง 2.56 มก. ดังนั้นในผลงานของ Zhao et al. อะซิโตน (2008) มีประสิทธิภาพในการสกัดสารประกอบฟีนอลจากข้าวบาร์เลย์น้อยกว่าน้ำหรือเอทานอล 70 องศาในการศึกษานี้ การศึกษาอื่น ๆ อีกหลายชิ้นได้แสดงให้เห็นว่าเอทานอลมีประสิทธิภาพในการสกัดสารประกอบที่มีอิทธิพลต่อ TPC [24,25] ข้อมูลของเราเกี่ยวกับประเภทมอลต์เริ่มต้นระบุว่ามอลต์ประเภท 3 และ 5 มี TPC ที่สูงกว่าประเภทอื่นๆ (ตารางที่ 1) เนื่องจากมีอยู่เมื่อค่าสูงที่สุด

เกี่ยวกับ TPC ของสาโท ควรระลึกไว้เสมอว่าผลิตภัณฑ์นี้ไม่ได้ผ่านการสกัด แต่ใช้ตามที่ได้รับจากโรงเบียร์ TPC ของสาโทต่ำกว่ามอลต์เริ่มต้นและขึ้นอยู่กับระยะการชงครั้งแรก ซึ่งประกอบด้วยมอลต์ที่ให้ความร้อนและน้ำที่อุณหภูมิ 70 องศาเป็นเวลา 90 นาที ในระหว่างระยะนี้ ฟีนอลสามารถแพร่กระจายจากเมล็ดหยาบ (เมล็ดมอลต์เป็นเพียงพื้นดินที่หยาบ) และละลายเป็นสาโท อย่างไรก็ตาม เมื่อเราได้รับแล้ว มอลต์เริ่มต้นจะถูกบดเพื่อนำอนุภาคละเอียดกลับมาใช้ใหม่เพื่อเพิ่มประสิทธิภาพการสกัดฟีนอลcistanche nzสิ่งนี้สามารถอธิบายค่าสูงสุดของมอลต์เริ่มต้นที่ปรากฏในแง่ของสาโท: ฟีนอลสามารถถูกปล่อยออกมาได้เพียงบางส่วนจากอนุภาคหยาบในระหว่างการผลิตสาโท และฟีนอลที่ยังคงอยู่ภายในธัญพืชสามารถถูกปล่อยออกมาได้อย่างง่ายดายจากอนุภาคที่ดีที่สุดในระหว่างการสกัดในน้ำหรือในเอทานอล 70 องศา .
มอลต์ที่ใช้แล้วมีค่าปานกลางระหว่างมอลต์เริ่มต้นและสาโทที่สอดคล้องกัน ยืนยันว่าสารประกอบฟีนอลิกยังคงมีอยู่ในมอลต์ที่ใช้แล้ว: การสกัดในน้ำและเอทานอล 70 องศาเผยให้เห็นค่า TPC ที่เห็นได้ชัดเจนตั้งแต่ 9 ถึง 14 มก. GAE/g และ GAE/g 12 ถึง 37 มก. สำหรับการสกัดในน้ำและเอทานอล ตามลำดับ
ตารางที่ 3 รายงานค่า TPC ของทั้ง Perle และ Saaz บริสุทธิ์ ฮ็อพเริ่มต้นทั้งสองมี TPC ที่สูงมาก และค่าที่ได้รับหลังจากการสกัดในเอธานอลนั้นสูงกว่าที่ได้จากน้ำอีกครั้ง เป็นการยืนยันว่าเอทานอลเป็นตัวทำละลายที่ดีกว่าน้ำสำหรับการสกัดฟีนอล การกระโดดเริ่มต้นของ Perle มีมูลค่าสูงกว่า Saaz อย่างไรก็ตาม มันไม่ได้ถูกใช้เป็นฮ็อพบริสุทธิ์ แต่ผสมตามสูตรลับเฉพาะ ดังนั้น จึงวิเคราะห์ส่วนผสมที่ใช้สำหรับกระบวนการผลิตเบียร์ทุกครั้ง TPC สามารถสอดคล้องกับการผสมของฮ็อพสองชนิดที่แตกต่างกันในเปอร์เซ็นต์ต่างๆ ซึ่งอยู่ตรงกลางระหว่างเปอร์เซ็นต์ของฮ็อพบริสุทธิ์โดยประมาณ TPC ของสาโทที่ได้รับหลังจากการเติมฮ็อพนั้นสูงกว่าค่าของสาโทก่อนที่จะเติมฮ็อพ ซึ่งบ่งชี้ว่าส่วนหนึ่งของสารประกอบฟีนอลิกถูกถ่ายโอนจากฮ็อพไปยังสาโทในระหว่างกระบวนการผลิตเบียร์ ซึ่งในระยะนี้ประกอบด้วย ต้มฮ็อพในสาโท 100 องศา 90 นาที อย่างไรก็ตาม ถึงแม้ว่า TPC ของฮ็อพจะสูงมาก แต่ TPC ของสาโทก็เพิ่มขึ้นเล็กน้อย อาจมีคนคาดหวังว่าฮ็อพที่ใช้ไปจะมี TPC สูง แต่จริง ๆ แล้ว TPC นั้นต่ำกว่า ซึ่งอาจบ่งชี้ว่าสารประกอบฟีนอลิกส่วนใหญ่หายไปในระหว่างกระบวนการ เนื่องจากความไม่เสถียรทางความร้อนของสารประกอบฟีนอลิกบางชนิด [26]

ยีสต์เริ่มต้นแสดง TPC ที่เห็นได้ชัดเจน โดยเฉพาะอย่างยิ่งเมื่อทำการสกัดในน้ำ ในขณะที่ได้ค่าที่ต่ำกว่ามากจากการสกัดด้วยเอทานอล 70 องศา สิ่งนี้สามารถอธิบายได้ด้วยข้อเท็จจริงที่ว่ายีสต์บริสุทธิ์ละลายได้น้อยกว่าและให้ความชุ่มชื้นในเอธานอลน้อยกว่าในน้ำ ดังนั้นการสกัดจึงมีประสิทธิภาพน้อยกว่าขนาดองคชาต cistancheปรากฏว่าส่วนหนึ่งของ TPC ในยีสต์ถูกถ่ายโอนไปยังเบียร์ เนื่องจาก TPC ของเบียร์ที่เกี่ยวข้องเพิ่มขึ้น อีกครั้ง ควรสังเกตด้วยว่าการวิเคราะห์ดำเนินการกับเบียร์ที่ไม่ผ่านการสกัด ซึ่งไม่ได้รับผลกระทบจากวิธีการสกัด อย่างไรก็ตาม TPC ของยีสต์ที่ใช้แล้วเป็นที่สนใจเป็นพิเศษเพราะไม่มีนัยสำคัญ ในความเป็นจริง TPC ของยีสต์ที่ใช้แล้วหลังจากการสกัดด้วยน้ำนั้นต่ำกว่าของยีสต์เริ่มต้นเล็กน้อย ในขณะที่ค่าสำหรับยีสต์ที่ใช้แล้วหลังจากการสกัดในเอธานอลนั้นสูงกว่าค่าในยีสต์เริ่มต้น นี่เป็นเพราะความชุ่มชื้นของยีสต์ในระหว่างการหมัก ซึ่งชอบการละลายและการสกัดฟีนอล

TPC ของเบียร์สุดท้ายไม่แตกต่างกันทางสถิติ (p<0.05) from="" that="" of="" beers="" after="" yeast,="" indicating="" that="" the="" compounds="" remain="" stable="" during="" beer="">0.05)>
โดยสรุป เบียร์ขั้นสุดท้ายได้รับการเสริมสมรรถนะด้วยสารประกอบฟีนอลิกตลอดกระบวนการผลิตเบียร์ ในระหว่างที่ส่วนผสมต่างๆ ได้ถ่ายโอนสารประกอบเหล่านี้ไปยังเบียร์ TPC สูงสุดพบในเบียร์ Triplo Malto และ Maior ของเสียถูกใช้ประโยชน์เพียงบางส่วนเท่านั้น และค่า TPC ที่ไม่สำคัญถูกเน้นย้ำและมีความสำคัญอย่างยิ่งต่อยีสต์เมื่อทำการสกัดในน้ำ
3.3. การประเมินฤทธิ์ต้านอนุมูลอิสระ
กิจกรรมการต้านอนุมูลอิสระได้รับการประเมินโดยการประเมินความสามารถในการต้านอนุมูลอิสระเทียบเท่าของ Trolox (DPPH) พารามิเตอร์สารต้านอนุมูลอิสระที่ลดเฟอร์ริกไอออน (FRAP) และกิจกรรมการขจัดไอออนบวกและพลังงานรีดิวซ์ (ABTS) และผลลัพธ์ตามลำดับถูกรายงานในตาราง {{2} }.

PDF สำหรับมอลต์เริ่มต้นอยู่ในช่วงประมาณ 9 ถึง 24 μmol TE/g สำหรับสารสกัดน้ำ และ 20 ถึง 42 โมล TE/g สำหรับสารสกัดเอทานอล ค่า DPPH โดยทั่วไปจะสูงกว่าค่าที่ได้รับจาก Zhao et al [9] หลังจากการสกัดอะซิโตน พวกเขารายงานจริง ๆ ว่ากิจกรรมการขับออกอย่างรุนแรงของตัวอย่างมอลต์ 14 ตัวอย่างมีตั้งแต่ 9.33 ถึง 11.78 μumol TE/g
เกี่ยวกับสาโทต้องทราบว่าค่าการสกัดน้ำและเอทานอลเหมือนกัน ตามที่ได้อธิบายไว้ก่อนหน้านี้ สาโทไม่ได้ถูกสกัดและถูกจัดหาให้เป็นวิธีแก้ปัญหาโดยโรงเบียร์ สาโทของมอลต์ที่แตกต่างกันแสดงค่าที่ต่ำกว่ามอลต์เริ่มต้นที่สอดคล้องกัน เหตุผลนี้อาจเหมือนกับที่อธิบายไว้สำหรับ TPC นั่นคือการละลายโมเลกุลที่ไม่สมบูรณ์จากมอลต์เป็นสาโทในระหว่างกระบวนการผลิตเบียร์ มอลต์ที่ใช้แล้วที่ได้รับหลังจากการสกัดด้วยเอทานอลมีค่าที่สูงกว่าที่ได้จากการสกัดด้วยน้ำ แต่มีค่าต่ำกว่ามอลต์เริ่มต้นมาก ซึ่งหมายความว่าโมเลกุลบางตัวถูกถ่ายโอนไปยังสาโท ในขณะที่โมเลกุลอื่นๆ สูญหายไปในระหว่างกระบวนการ
ทั้งฮ็อพ Perle และ Saaz แสดงค่า DPPH สูง โดยเฉพาะอย่างยิ่งเมื่อทำการสกัดในเอทานอล (ประมาณ 72-89 umol TE/g หลังจากการสกัดในน้ำ และ 258-354 μmol TE/g หลังจากการสกัดในเอทานอล) ส่วนผสมของพวกเขาแสดงค่าที่สอดคล้องกับสูตรเฉพาะที่ใช้ในการผลิตเบียร์แต่ละชนิด การผสม hops เริ่มต้นสะท้อนถึงองค์ประกอบของฮ็อพ
สาโทหลังจากการเติมฮ็อพพบว่าค่า DPPH เพิ่มขึ้นเล็กน้อยเมื่อเทียบกับสาโทก่อนหน้า หมายความว่าโมเลกุลบางตัวที่มีอิทธิพลต่อค่า DPPH ถูกถ่ายโอนไปยังสาโท แต่ถ้าใครพิจารณาถึงค่า DPPH ที่ลดลงอย่างมากสำหรับฮ็อพที่ใช้แล้ว ก็สรุปได้ว่า โมเลกุลที่มีอิทธิพลต่อ DPPH ถูกทำลายในระหว่างขั้นตอนการผลิตเบียร์เนื่องจากไม่เสถียรทางความร้อน [26] ฮ็อพที่ใช้แล้วแสดงค่า DPPH ที่ลดลงอย่างมากเมื่อเทียบกับฮ็อพเริ่มต้น ซึ่งยืนยันถึงความไม่คงตัวทางความร้อนของโมเลกุลที่ส่งผลต่อค่า DPPHผงซิสแทนเช่ยีสต์เริ่มต้นแสดงค่า DPPH เล็กน้อยสำหรับสารสกัดในน้ำและในเอทานอล เป็นที่น่าสนใจที่จะสังเกตการเพิ่มขึ้นของสาโทหลังจากที่อดอาหารอย่างรวดเร็ว และโดยเฉพาะอย่างยิ่งในยีสต์ที่ใช้แล้ว ซึ่งสามารถสังเกตการเพิ่มขึ้นอย่างมีนัยสำคัญของค่า DPPH คำอธิบายสามารถพบได้ในปฏิกิริยาของเอนไซม์ที่เกิดขึ้นต่อหน้ายีสต์บนฟลาโวนอลไกลโคไซด์: เอ็นไซม์ของยีสต์สามารถเปลี่ยนไกลโคไซด์เป็นอะไกลโคนที่มีปฏิกิริยามากกว่าไกลโคไซด์ที่สอดคล้องกัน [27,28] ค่า DPPH สำหรับเบียร์ขั้นสุดท้ายไม่แตกต่างกันทางสถิติ (p<0.05)from those="" of="" wort="" after="">0.05)from>
ฤทธิ์ต้านอนุมูลอิสระที่กำหนดโดย ABTS ของมอลต์เริ่มต้นอยู่ในช่วงประมาณ 21 ถึง 47 ไมโครโมล TE/g สำหรับการสกัดในน้ำ และตั้งแต่ 41 ถึง 97 สำหรับสารสกัดเอทานอล ค่าที่สูงกว่าที่กำหนดโดย Zhao et al [9]. การค้นพบของเราสอดคล้องกับการสังเกตค่า TPC ที่สูงขึ้นเมื่อทำการสกัดในเอทานอล มอลต์เริ่มต้นประเภท 5 ซึ่งใช้สำหรับการผลิตเบียร์ Maior เท่านั้น มีมูลค่าสูงเป็นพิเศษ ในกรณีของสาโท ค่า ABTS นั้นสูงกว่าค่าของมอลต์เริ่มต้นที่สอดคล้องกัน สิ่งนี้บ่งชี้ว่ากระบวนการผลิตสาโทสามารถสกัดโมเลกุลเพิ่มเติมที่สามารถมีอิทธิพลต่อผลลัพธ์ของ ABTS ดังที่ได้แสดงให้เห็นสำหรับค่า DPPH มอลต์ที่ใช้แล้วมีค่า ABTS ต่ำกว่ามอลต์เริ่มต้น ซึ่งยืนยันว่าโมเลกุลถูกถ่ายโอนไปยังสาโทในระหว่างกระบวนการ ABTS สำหรับการเริ่มต้นกระโดดสูงมาก แต่ลดลงอย่างมากในสาโทหลังจากกระโดด โมเลกุลที่เหลือที่สามารถมีอิทธิพลต่อ ABTS นั้นมีอยู่ในฮ็อพที่ใช้แล้ว ABTS ของการเริ่มต้น veast สูงขึ้นเมื่อทำการสกัดในน้ำ ยืนยันการสังเกตครั้งก่อน นั่นคือ ความสามารถในการละลายของยีสต์ในน้ำได้ดีกว่าในเอทานอล เบียร์หลังจากยีสต์มีค่า ABTS สูง ในขณะที่ยีสต์ที่ใช้แล้วมีค่าต่ำกว่า คล้ายกับเบียร์สุดท้าย จากนั้นจึงประเมินฤทธิ์ต้านอนุมูลอิสระโดย FRAP มอลต์เริ่มต้นแสดงค่าตั้งแต่ 56 ถึง 80 umol TE/g สำหรับสารสกัดน้ำ และจาก 33 ถึง 54 ไมโครโมล TE/g สำหรับสารสกัดเอทานอล 70 องศา สำหรับสารสกัดน้ำ คุณค่าสูงสุดคือของอัตตา ในขณะที่สารสกัดเอทานอล ค่าที่สูงที่สุดคือของอัลเทอร์ สาโทมีค่าต่ำกว่ามอลต์เริ่มต้น และไม่พบความแตกต่างที่มีนัยสำคัญในประเภทต่างๆ มอลต์ที่ใช้แล้วไม่ได้แสดงความแตกต่างอย่างมีนัยสำคัญจากการเริ่มมอลต์ซิสแทนเช่ ซัลซ่าสกัดค่าสำหรับการเริ่มต้นกระโดดมีค่าเกือบ 332 และ 377 umol TE/g สำหรับ Perle และ Saaz ตามลำดับ เมื่อทำการสกัดในน้ำ ในขณะที่มีค่าต่ำกว่าอย่างมีนัยสำคัญ 120และ 110 umol TE/g สำหรับ Perle และ Saaz ตามลำดับ เมื่อสกัดด้วยเอธานอล 70 องศา ยืนยันความแตกต่างระหว่างวิธีการสกัดทั้งสองวิธี สิ่งนี้ยังได้รับการยืนยันในของผสมเริ่มต้น ซึ่งให้ค่าที่สูงกว่าหลังการสกัดด้วยน้ำเมื่อเทียบกับหลังจากการสกัดด้วยเอทานอล ค่าของสาโทหลังฮ็อพจะสูงที่สุดเมื่อเทียบกับสาโทก่อนหน้า ซึ่งบ่งชี้ว่าการเพิ่มขึ้นของโมเลกุลสามารถส่งผลต่อค่า FRAP ในระหว่างกระบวนการผลิตเบียร์ ฮ็อพของเสียมีค่าสูงเป็นพิเศษเมื่อทำการสกัดในน้ำ (ค่าอยู่ระหว่าง 88 ถึง 103 ไมโครโมล TE/g) ในขณะที่ฮ็อพของเสียมีค่าสูงเป็นพิเศษเมื่อดำเนินการในเอทานอล 70 องศา (ค่าอยู่ในช่วง 29 ถึง 33 โมล TE /g) ยีสต์เริ่มต้นมีค่าสูงสุด (71.045±5.859 μmol TE/g) เมื่อทำการสกัดในน้ำ แต่ค่าต่ำสุดสำหรับสารสกัดเอทานอล 70 องศา (44.494±0.501 umol TE/g) อีกครั้ง ค่า FRAP สำหรับยีสต์เหลือทิ้งสูงกว่าค่าเริ่มต้น (ตั้งแต่ 103 ถึง 136 โมล TE/g สำหรับสารสกัดน้ำ และ 70 ถึง 82 ไมโครโมล TE/กรัม สำหรับสารสกัดเอทานอล 70 องศา) ซึ่งบ่งชี้ว่าความกว้างใหญ่ไพศาลนั้นอุดมไปด้วยโมเลกุลที่สามารถส่งผลต่อการวิเคราะห์ FRAP ระหว่างกระบวนการกลั่นเบียร์ เบียร์หลังยีสต์มีค่าที่สูงกว่าสาโทในขั้นตอนที่แล้วหลังจากต้มและเอาฮ็อพออก แสดงว่าเมื่อเบียร์สัมผัสกับยีสต์จะอุดมไปด้วยโมเลกุลที่สามารถส่งผลต่อค่า FRAP ได้ ได้แสดงมูลค่าเพิ่มสูงขึ้นด้วย มากกว่าเบียร์ในระยะก่อนหน้าหลังจากการเติม การหมัก และการกำจัดยีสต์ ซึ่งบ่งชี้ว่าการสุกสามารถนำไปสู่การเพิ่มขึ้นของจำนวนโมเลกุลที่สามารถส่งผลต่อการวิเคราะห์ FRAP
ในหลายกรณี พบว่ายีสต์ที่ใช้แล้วมีคุณค่าสูงกว่ายีสต์เริ่มต้น คำอธิบายหนึ่งที่เป็นไปได้สำหรับสิ่งนี้คือยีสต์อาจสามารถดูดซับโมเลกุลจากวัสดุอื่น ๆ ในระหว่างกระบวนการผลิตเบียร์ และส่งเสริมการปลดปล่อยของ aglycones ที่มีปฏิกิริยามากกว่าไกลโคไซด์ 27,28] ข้อเท็จจริงที่ว่าในเบียร์ การเพิ่มขึ้นของค่า FRAP นั้น สังเกตได้จากสาโทก่อนหน้านั้น อาจเกิดจากการมีอยู่ของเบียร์จำนวนมากที่ไม่ได้ถูกกำจัดออกจากเบียร์ทั้งหมด ซึ่งบางส่วนยังคงดำเนินกระบวนการหมักต่อไปโดยการปล่อย aglycones ซึ่งก็คือ มีปฏิกิริยาตอบสนองมากกว่าไกลโคไซด์ที่เกี่ยวข้อง ดังที่ได้อธิบายไว้ก่อนหน้านี้ 3.4. ฤทธิ์ทางชีวภาพของสารสกัดที่ใช้แล้วใน Keratinocytes ของมนุษย์
ฤทธิ์ทางชีวภาพได้รับการประเมินในสารสกัดที่ใช้แล้ว โดยเฉพาะอย่างยิ่งในสารสกัดจากโรงเบียร์ Alter ในขั้นแรก เราประเมินความเป็นพิษต่อเซลล์ของมอลต์ที่ใช้แล้ว (SP-M) ฮอปที่ใช้แล้ว (SP-H) และสารสกัดจากยีสต์ที่ใช้แล้ว (SP-YE) ในเซลล์เคราติโนไซต์ HaCaT เซลล์ HaCaT ได้รับการบำบัดด้วยความเข้มข้นของสารสกัดที่มีตั้งแต่ 0.003 ถึง 3 มก./มล. เป็นเวลา 24 ชั่วโมง และความอยู่รอดของเซลล์ถูกประเมินโดยการทดสอบ MTT การบำบัดเซลล์ HaCaT ด้วยสารสกัดที่ความเข้มข้นต่ำกว่า 0.3 มก./มล. ไม่ส่งผลต่อความมีชีวิตของเซลล์ (รูปที่ 2) ดังนั้น ความเข้มข้น 0.03 มก./มล. จึงถูกเลือกสำหรับการทดลองที่ตามมา ริ้วรอยแห่งวัยของผิวเป็นกระบวนการที่ซับซ้อนซึ่งเกี่ยวข้องกับปัจจัยทั้งภายในและภายนอก ซึ่งนำไปสู่การสูญเสียการทำงานและโครงสร้างทางผิวหนังอย่างต่อเนื่อง [29] มีหลักฐานเพิ่มขึ้นว่าความผิดปกติของไมโตคอนเดรียและความเครียดจากปฏิกิริยาออกซิเดชันเป็นลักษณะสำคัญของอายุผิว [30] ด้วยเหตุนี้ การพัฒนาส่วนผสมที่ช่วยปรับปรุงการทำงานของไมโตคอนเดรียและป้องกันความเครียดจากปฏิกิริยาออกซิเดชันจึงเป็นกลยุทธ์ในการต่อต้านริ้วรอยของผิวหนัง
เพื่อประเมินความสามารถของสารสกัดในการปรับปรุงการทำงานของไมโตคอนเดรีย เซลล์ HaCaT ได้รับการรักษาด้วยสารสกัดในสารละลายโดยไม่มีสารอาหารสำหรับการเผาผลาญของเซลล์ ดังแสดงในรูปที่ 3 การบำบัดเซลล์ HaCaT เป็นเวลา 4 ชั่วโมงด้วยสารละลายและไม่มีสารอาหารช่วยลดการทำงานของไมโตคอนเดรียอย่างมีนัยสำคัญ

ภายใต้สภาวะการทดลองเดียวกัน การเพิ่ม 0.03 มก./มล. SP-H และ SP-YE แต่ไม่ใช่ SP-M ได้ฟื้นฟูกิจกรรมของไมโตคอนเดรียอย่างมีนัยสำคัญ ซึ่งบ่งชี้ถึงความสามารถในการสนับสนุนกลไกของโภชนาการระดับเซลล์ ที่ความเข้มข้นเท่ากัน สารสกัด SP-M, SP-H และ SP-YE ยังได้รับการประเมินสำหรับฤทธิ์ต้านอนุมูลอิสระของพวกมันในเซลล์ HaCaT เซลล์ HaCaT ได้รับการบำบัดด้วยสารสกัดพร้อมกันหรือ 2 ชั่วโมงก่อนความเครียดออกซิเดชัน (100uM H, O เป็นเวลา 30 นาที) และกิจกรรมต้านอนุมูลอิสระได้รับการประเมินในแง่ของการสร้าง ROS ภายในเซลล์ วิธีการทดลองนี้อนุญาตให้มีการเลือกปฏิบัติความสามารถของสารสกัดในการต่อต้านและ/หรือป้องกันการก่อตัวของ ROS ภายในเซลล์ สารสกัด SP-M, SP-Hand SP-YE ทั้งหมดจะสกัดปฏิกิริยากับ H, O โดยตรง โดยมีการลดลงอย่างมากในการก่อตัวของ ROS ในเซลล์ HaCaT (รูปที่ 4)

4. บทสรุป
ในการศึกษานี้ ได้ทำการประเมินปริมาณฟีนอลทั้งหมดและกิจกรรมต้านอนุมูลอิสระของเบียร์ประเภทต่างๆ วัสดุตั้งต้น สารตัวกลางของกระบวนการผลิตเบียร์ และมอลต์ที่ใช้แล้ว ฮ็อพ และยีสต์ที่ใช้แล้ว ตามที่ระบุไว้โดย Zhao et al. [5] ควรมองถึงความแตกต่างในผลการวิเคราะห์ฤทธิ์ต้านอนุมูลอิสระโดยพิจารณาจากความแตกต่างในวิธีการวิเคราะห์ที่ใช้ในการประเมินกิจกรรมเหล่านี้ ความแตกต่างในผลการวิเคราะห์ฤทธิ์ต้านอนุมูลอิสระอาจเนื่องมาจากความผันแปรในกระบวนการและวิธีการสกัด และจลนพลศาสตร์ของปฏิกิริยาที่แตกต่างกัน [31] นอกจากนี้ ความแตกต่างบางประการระหว่างตัวอย่างขึ้นอยู่กับองค์ประกอบและไม่ได้ขึ้นอยู่กับกระบวนการผลิตเบียร์ เนื่องจากใช้กระบวนการเดียวกันสำหรับเบียร์ทั้งหมด การศึกษานี้เสนอหลักฐานว่าเบียร์มีฟีนอลจากส่วนผสมของเบียร์ และผลิตภัณฑ์จากการต้มเบียร์และของเสียเป็นแหล่งที่น่าสนใจสำหรับการเตรียมผลิตภัณฑ์เสริมอาหารและเครื่องสำอาง การศึกษานี้แสดงให้เห็นถึงผลการต่อต้านริ้วรอยของของเสียจากเบียร์ทำมือในเซลล์เคราติโนไซต์ของมนุษย์ ซึ่งชี้ให้เห็นถึงศักยภาพในการใช้เป็นส่วนผสมในการเตรียมเครื่องสำอาง ดังนั้น การศึกษานี้จึงยืนยันเพิ่มเติมถึงความสนใจในการใช้ประโยชน์จากของเสียจากการผลิตอาหาร การศึกษาในอนาคตจะทุ่มเทให้กับการศึกษาและพัฒนาสูตรเครื่องสำอางสำเร็จรูปใหม่จากผลพลอยได้จากเบียร์ เพื่อตรวจสอบการใช้ cosmetic ในอุตสาหกรรมที่เป็นไปได้
บทความนี้คัดมาจาก Cosmetics 2021, 8, 96 https://doi.org/10.3390/cosmetics8040096 https://www.mdpi.com/journal/cosmetics
