การกระตุ้นมาโครฟาจโดยแซ็กคาไรด์น้ำหนักโมเลกุลต่ำจาก Cistanche Deserticola

ติดต่อ: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 อีเมล:audrey.hu@wecistanche.com

［นามธรรมract］

เพื่อตรวจสอบผลการกระตุ้นภูมิคุ้มกันและกลไกของแซ็กคาไรด์น้ำหนักโมเลกุลต่ำจากCistanche deserticola(LMSC) บนมาโครฟาจในช่องท้องของเมาส์ RAW264 7 เซลล์ RAW264. 7 เซลล์ถูกแบ่งออกเป็นกลุ่มควบคุมปกติ, กลุ่มควบคุมเชิงบวกของ LPS และกลุ่มบำบัด LMSC RAW264. 7 เซลล์ได้รับการบำบัดด้วยความเข้มข้นต่างๆ ของ LMSC ตั้งแต่ 3. 91 ถึง 62 5 g·L － 1 การทดสอบสีแดงที่เป็นกลางถูกใช้เพื่อตรวจหากิจกรรมฟาโกไซติกของมาโครฟาจ ไม่พบการปลดปล่อยโดยใช้ชุด NO และระดับการแสดงออกของโปรตีนที่เกี่ยวข้องกับการกระตุ้นมาโครฟาจ (TNF- , IL-6, IKK , p-IKK , IκB , p-IκB , NF-κB และ p-NF-κB) ถูกตรวจพบโดย Western blot ผลการศึกษาพบว่า LMSC มีผลกระตุ้นต่อมาโครฟาจ มันสามารถเพิ่มการปล่อย NO ใน RAW264 ได้อย่างมาก 7 เซลล์และส่งเสริมการแสดงออกของไซโตไคน์ TNF- และ IL-6 นอกจากนี้ LMSC ยังเพิ่มฟอสโฟรีเลชั่นของ IKK , IκB และ NF-κB p65 อย่างมีนัยสำคัญ นอกจากนี้ แมนนิทอลเป็นหนึ่งในองค์ประกอบหลักใน LMSC ช่วยเพิ่มประสิทธิภาพการทำงานของเซลล์ฟาโกไซติกของมาโครฟาจอย่างมีนัยสำคัญ ผลลัพธ์เหล่านี้แสดงให้เห็นว่า LMSC สามารถกระตุ้นมาโครฟาจโดยการควบคุมเส้นทางการส่งสัญญาณ NF-κB และแมนนิทอลอาจเป็นหนึ่งในองค์ประกอบหลักที่ทำงานอยู่ใน LMSC

［คำสำคัญ］ แซคคาไรด์น้ำหนักโมเลกุลต่ำ ซิสแทนเชเดซิโกลา; การกระตุ้นภูมิคุ้มกัน มาโครฟาจ; ปัจจัยการอักเสบ NF-κB

Cistanche Deserticola YC Maเป็นพืชที่อยู่ในสกุลCistanche deserticolaวายซี หม่า. ลำต้นเนื้อสามารถใช้เป็นยาได้ มีหน้าที่ในการบำรุงหยางไต บำรุงเอสเซ้นส์และเลือด และทำให้ลำไส้ชุ่มชื้น เป็นที่รู้จักกันในชื่อ "โสมทะเลทราย" ส่วนประกอบทางเคมีของ Cistanche ได้แก่ phenylethanoid glycosides, iridoid glycosides, น้ำตาล, lignans และอีกหลายชนิด การศึกษาทางเภสัชวิทยาสมัยใหม่พบว่า Cistanche มีฤทธิ์ทางชีวภาพหลายอย่าง เช่น การป้องกันระบบประสาท การต่อต้านเนื้องอก การควบคุมภูมิคุ้มกัน ต้านการอักเสบ และสารต้านอนุมูลอิสระ [1] การศึกษาพบว่ายาต้มของ Cistanche และโพลีแซ็กคาไรด์สามารถปรับปรุงความสามารถในการฟาโกไซติกและฟังก์ชันการหลั่งของมาโครฟาจ [2-3] ได้อย่างมีนัยสำคัญ อย่างไรก็ตาม ไม่มีรายงานเกี่ยวกับการวิจัยกิจกรรมของคาร์โบไฮเดรตที่มีน้ำหนักโมเลกุลต่ำ ดังนั้นการศึกษานี้จึงใช้ระบบการเพาะเลี้ยงในหลอดทดลองของ RAW264 มาโครฟาจในช่องท้องของหนู 7 ตัวเพื่อสำรวจกิจกรรมการกระตุ้นภูมิคุ้มกันและกลไกที่เกี่ยวข้องของคาร์โบไฮเดรตที่มีน้ำหนักโมเลกุลต่ำของ Cistanche งานวิจัยนี้สามารถให้หลักฐานการทดลองเพิ่มเติมสำหรับความเข้าใจที่ครอบคลุมของอิมมูโนโมดูเลชั่นของซิสแทนเช่ในอนาคตเพื่อเป็นแนวทางในการประยุกต์ใช้ทางคลินิกต่อไป

Cistanche deserticola มีเอฟเฟกต์มากมาย คลิกที่นี่เพื่อทราบข้อมูลเพิ่มเติม

1. วัสดุ

RAW264. ซื้อเซลล์ 7 เซลล์จาก Cell Center ของ Chinese Academy of Medical Sciences; fetal bovine serum (FBS) ซื้อมาจาก PAN Biotech ประเทศเยอรมนี ซื้อยาปฏิชีวนะและสื่อ DMEM จาก Zhongke Machen Technology Co., Ltd. ซื้อ Lipopolysaccharide จาก Escherichia coli O55:B5 (LPS) จาก Sigma Company ประเทศสหรัฐอเมริกา ซื้อชุดไนตริกออกไซด์ (NO) จากสถาบันวิศวกรรมชีวภาพ Nanjing Jiancheng ซื้อชุดเคมีเรืองแสง ECL จาก Thermo Fisher ประเทศสหรัฐอเมริกา ซื้อแอนติบอดีจาก Cell Signaling Technology ประเทศสหรัฐอเมริกา Cistanche cistanche total glycosides, cistanche low-molecular-weight sugars, และ cistanche polysaccharides สร้างขึ้นเองโดยกลุ่มวิจัยของเรา สัดส่วนมวลของไกลโคไซด์รวมซิสแทนช์คือ 78.76 เปอร์เซ็นต์ เศษส่วนมวลของน้ำตาลน้ำหนักโมเลกุลต่ำของCistanche deserticolaคือ 58 00 เปอร์เซ็นต์และเศษส่วนมวลของCistanche deserticolaพอลิแซ็กคาไรด์ 65.24 เปอร์เซ็นต์. Tanon-5200ซื้อระบบแยกภาพหลายเจลจาก Shanghai Tianneng Technology Co., Ltd.; เครื่องอ่านไมโครเพลท Sunrise-Basic ซื้อมาจากบริษัท TECAN

2. วิธีการ

2. 1 วิธี Neutral red เพื่อวัดกิจกรรมฟาโกไซติกของแมคโครฟาจ

นำมาโครฟาจในช่องท้องของเมาส์มาโครฟาจในระยะการเจริญเติบโตแบบลอการิทึม หลังจากทริปซิไนเซชัน นับเซลล์ ปรับจำนวนเซลล์เป็น 5 × 104 เซลล์/มล. และฉีดวัคซีนในจานเพาะเลี้ยงเซลล์ 96-หลุม 100 ไมโครลิตร/หลุม ที่ 37 องศา เพาะเลี้ยงภายใต้สภาวะ CO2 5 เปอร์เซ็นต์ หลังจากที่เซลล์ยึดติดกับผนังแล้ว ให้ทิ้ง supernatant ของการเพาะเลี้ยง เพิ่มตัวกลาง DMEM (10 เปอร์เซ็นต์ FBS บวก 1 เปอร์เซ็นต์ P /S), LPS (1 มก.·L － 1) และ Cistanche cistanche ตามลำดับ Total glycosides,Cistancheพอลิแซ็กคาไรด์ทั้งหมดและน้ำตาลน้ำหนักโมเลกุลต่ำ Cistanche cistanche (3.91 ~ 62.5 g·L -1 ตามลำดับ กรองด้วยเมมเบรนกรองก่อนการบริหารให้) เพาะเลี้ยง หลังจากการเพาะเลี้ยงเป็นเวลา 48 ชั่วโมง ให้เติม 100 ไมโครลิตรของสารละลายน้ำเกลือทางสรีรวิทยาสีแดงเป็นกลาง 0.075 เปอร์เซ็นต์ 100 ไมโครลิตร ลงในบ่อแต่ละบ่อ เพาะเลี้ยงต่อไปเป็นเวลา 4 ชั่วโมง ดูดตะกอนเหนือตะกอน ล้างด้วย PBS 3 ครั้ง เติมเซลล์ไลเสต (กรดอะซิติกน้ำแข็ง) -เอทานอล 1:1) 100 ไมโครลิตร วางไว้ที่ 4 องศาเป็นเวลา 2 ชั่วโมง แล้ววัดค่าการดูดกลืนแสง (A540 นาโนเมตร) หลังจากที่เซลล์ถูกสลาย

2. 2 การตรวจจับปริมาณ NO ที่ปล่อยออกมาในเซลล์เหนือตะกอน

ฉีดวัคซีน RAW264 7 เซลล์ในจานหลุม 48-หลุม (1 × 105 เซลล์/มล., 500 ไมโครลิตร/หลุม) ดูดอาหารเลี้ยงเซลล์หลังจากการฟักตัวข้ามคืน เติมอาหารเลี้ยงเชื้อ DMEM (10 เปอร์เซ็นต์ FBS บวก 1 เปอร์เซ็นต์ P /S), 500 LPS แต่ละตัว (1 mg·L -1) และ Cistanche cistanche Total glycosides, polysaccharides ทั้งหมด และน้ำตาลน้ำหนักโมเลกุลต่ำ (3.91 ~ 62.5 g·L -1 ตามลำดับ) หลังจาก 24 ชั่วโมงของการเพาะเลี้ยงเหนี่ยวนำ สารเหนือตะกอนจะถูกรวบรวม กำหนดความเข้มข้นของ NO ในเซลล์เหนือตะกอนของแต่ละกลุ่มด้วยชุด NO ทำตามคำแนะนำ และสุดท้ายตรวจจับการดูดกลืนแสง (A570 nm) ด้วยเครื่องอ่านไมโครเพลท

2. 3. Western blot

ฉีดวัคซีน RAW264 7 เซลล์ในจานหลุม 6-หลุม ดูดอาหารเลี้ยงเซลล์หลังจากการฟักตัวข้ามคืน เติมอาหารเลี้ยงเชื้อ DMEM (10 เปอร์เซ็นต์ FBS บวก 1 เปอร์เซ็นต์ P /S), LPS (1 มก.·L － 1) และCistancheพอลิแซ็กคาไรด์ทั้งหมดและน้ำตาลที่มีน้ำหนักโมเลกุลต่ำ (3.91 ~ 62.5 ก.·ล. -1) แต่ละตัวคือ 2 มล. และส่วนลอยเหนือตะกอนถูกทิ้งหลังจาก 24 ชั่วโมงของการเพาะเลี้ยงแบบเหนี่ยวนำ เซลล์ถูกล้างสองครั้งด้วย PBS และทิ้งไป หลังจากทริปซิไนเซชั่น เซลล์จะถูกปิเปตลง ปั่นเหวี่ยง ขจัดส่วนลอยเหนือตะกอน เติม 100 ไมโครลิตร NP40 Lysis Buffer และละลายน้ำแข็งเป็นเวลา 40 นาที หลังจากการปั่นแยกส่วน supernatant ถูกนำมาใช้และความเข้มข้นของโปรตีนถูกกำหนดโดยวิธี BCA และความเข้มข้นของโปรตีนของแต่ละฮิสโตนถูกปรับให้เท่ากัน นำตัวอย่างโปรตีนในปริมาณเท่ากันและแยกไว้ใน SDS-PAGE 12 เปอร์เซ็นต์ภายใต้แรงดันคงที่ จากนั้นใช้ถังอิเล็กโตรโฟรีซิสถ่ายโอน Bio-Rad เพื่อถ่ายโอนเมมเบรนที่มีกระแสคงที่ 350 mA เป็นเวลา 1 ชั่วโมง และถ่ายโอนโปรตีนไปยังเมมเบรน PVDF (การปรับสภาพเมมเบรน PVDF ก่อน: แช่ในเมทานอลและปรับสมดุลด้วยบัฟเฟอร์การถ่ายโอน) หลังจากการปิดกั้นด้วยนมพร่องมันเนย 5 เปอร์เซ็นต์ (กำหนดค่าด้วย TBST ที่มี Tween 0.1 เปอร์เซ็นต์-20) เป็นเวลา 1 ชั่วโมงที่อุณหภูมิห้อง เมมเบรนจะถูกล้าง 3 ครั้งด้วย TBST และเมมเบรนถูกบ่มในโปรตีนเจือจางแอนติบอดีปฐมภูมิที่ 4 องศาค้างคืน เมมเบรนถูกล้าง 3 ครั้งด้วย TBST วันเว้นวัน และเติมสารเจือจางที่สอดคล้องกันเพื่อบ่มเป็นเวลา 1 ชั่วโมง เมมเบรนถูกล้าง 3 ครั้งด้วย TBST และแถบได้รับการพัฒนาด้วยตัวพัฒนาเคมีลูมิเนสเซนส์ของ ECL

2. 4 การวิเคราะห์ข้อมูล

ข้อมูลแสดงเป็น x ± s และทดสอบความสำคัญของความแตกต่างโดยใช้ซอฟต์แวร์ทางสถิติ GraphPad Prism 6 สำหรับการวิเคราะห์ความแปรปรวนทางเดียว เทค พี<0.01 as="" a="" very="" significant="" difference,="" and=""><0.05 as="" a="" significant="">

3. ผลลัพธ์

3. 1. ผลของ Cistanche cistanche น้ำตาลน้ำหนักโมเลกุลต่ำ รวม glycosides และ polysaccharides ทั้งหมดต่อกิจกรรม phagocytic ของ RAW264 7 เซลล์

การวิจัยองค์ประกอบทางเคมีของ Cistanche แสดงให้เห็นว่าCistancheส่วนใหญ่ประกอบด้วยฟีนิลทานอยด์ไกลโคไซด์, อิริดอยด์ ไกลโคไซด์ และคาร์โบไฮเดรต ในการทดลองนี้ จะเลือกไกลโคไซด์ทั้งหมดของซิสแทนช์ (รวมถึงฟีนิทิลแอลกอฮอล์ไกลโคไซด์และอิริดอยด์ ไกลโคไซด์) น้ำตาลโมเลกุลต่ำ และน้ำตาล ไซต์แอคทีฟทั้งสามแห่งของพอลิแซ็กคาไรด์ทั้งหมดได้รับการตรวจสอบถึงผลกระทบต่อการกระตุ้น RAW264 7 เซลล์ ทั้ง Cistanche cistanche polysaccharide และ cistanche น้ำตาลน้ำหนักโมเลกุลต่ำสามารถเพิ่มกิจกรรม phagocytic ของ RAW264 ได้อย่างมีนัยสำคัญ 7 เซลล์ แต่กิจกรรมฟาโกไซติกของกลุ่มการบริหารให้ไกลโคไซด์ทั้งหมดไม่มีการเปลี่ยนแปลงอย่างมีนัยสำคัญ นอกจากนี้ ยาควบคุมเชิงบวก LPS ยังปรับปรุงกิจกรรมฟาโกไซติกของ RAW264 อย่างมีนัยสำคัญอีกด้วย 7 เซลล์ดังแสดงในรูปที่ 1 ผลลัพธ์ข้างต้นชี้ให้เห็นว่าน้ำตาลและโพลีแซ็กคาไรด์ที่มีน้ำหนักโมเลกุลต่ำของ Cistanche อาจมีผลต่อการเปิดใช้งาน RAW264 7 เซลล์

3. 2. ผลของ Cistanche Total glycosides, น้ำตาลโมเลกุลต่ำ และ polysaccharides ทั้งหมดต่อปริมาณไนตริกออกไซด์ (NO) ในเซลล์เหนือตะกอน

เพื่อตรวจสอบเพิ่มเติมเกี่ยวกับผลการเปิดใช้งานของไซต์ที่ทำงานอยู่สามแห่งของ Cistanche บน RAW264 7 เซลล์ กำหนดเนื้อหาของ NO ในเซลล์เหนือตะกอนที่ถูกกระตุ้นโดยยาต่างๆ ผลการศึกษาพบว่าการปลดปล่อย NO ในกลุ่ม LPS สูงกว่าในกลุ่มควบคุมเปล่าอย่างมีนัยสำคัญ (P<0.01); the="" release="" of="" no="" in="" the="" 5="" doses="" of="" low="" molecular="" sugar="" and="" polysaccharides="" in="" the="" cistanche="" cistanche="" group="" was="" significantly="" higher="" than="" that="" in="" the="" control="" group="" (p=""><0.01) ),="" and="" was="" dose-dependent;="" the="" total="" glycosides="" of="">Cistancheไม่มีผลกระทบอย่างมีนัยสำคัญ ผลลัพธ์ข้างต้นบ่งชี้ว่าทั้งพอลิแซ็กคาไรด์และน้ำตาลน้ำหนักโมเลกุลต่ำของ Cistanche สามารถส่งเสริมการปล่อย NO จาก RAW264 7 เซลล์ ในหมู่พวกเขาผลกระทบของน้ำตาลน้ำหนักโมเลกุลต่ำของ Cistanche มีความสำคัญอย่างยิ่งดังแสดงในรูปที่ 2

3. 3. ผลของ Cistanche cistanche น้ำตาลน้ำหนักโมเลกุลต่ำต่อการแสดงออกของโปรตีน TNF- และ IL-6 ใน RAW264 7 เซลล์

TNF- เป็นตัวกลางในการอักเสบที่สำคัญซึ่งปรากฏในกระบวนการเปิดใช้งาน RAW264 7 เซลล์ ซึ่งสามารถส่งเสริมการสังเคราะห์และการปลดปล่อยไซโตไคน์อื่นๆ (เช่น IL-6) ผลการศึกษาพบว่าการแสดงออกของ TNF- และ IL-6 เพิ่มขึ้นอย่างมีนัยสำคัญหลังจากกระตุ้นน้ำตาลที่มีน้ำหนักโมเลกุลต่ำของ Cistanche cistanche ซึ่งบ่งชี้ว่าน้ำตาลที่มีน้ำหนักโมเลกุลต่ำของ Cistanche อาจส่งเสริมการแสดงออกของ TNF - และ IL-6 ใน RAW264 7 เซลล์ซึ่งกระตุ้นภูมิคุ้มกันของเซลล์ Phagocytosis ดูรูปที่ 3

3. 4. ผลกระทบด้านกฎระเบียบของน้ำตาลน้ำหนักโมเลกุลต่ำ Cistanche cistanche ต่อเส้นทางการส่งสัญญาณ IKK /IκB /NF-κB

เพื่อสำรวจกลไกที่เป็นไปได้ของ Cistanche cistanche น้ำตาลน้ำหนักโมเลกุลต่ำในการกระตุ้น RAW264 7 เซลล์ ผู้เขียนได้ตรวจสอบผลกระทบด้านกฎระเบียบที่มีต่อเส้นทางการส่งสัญญาณแบบคลาสสิกของ IKK /IκB /NF-κB Cistanche cistanche น้ำตาลน้ำหนักโมเลกุลต่ำสามารถเพิ่มฟอสโฟรีเลชั่นของ NF-κB และฟอสโฟรีเลชั่นของโปรตีนสัญญาณต้นน้ำที่สำคัญ IKK และ IκB อย่างมีนัยสำคัญ และลดการแสดงออกของโปรตีนIκBทั้งหมด ซึ่งบ่งชี้ว่ามีผลกระตุ้นต่อ IKK / เส้นทางการส่งสัญญาณ IκB /NF-κB ยากลุ่มควบคุมเชิงบวก LPS ก็มีผลบังคับเช่นเดียวกัน โดยสรุป น้ำตาลน้ำหนักโมเลกุลต่ำของ Cistanche อาจกระตุ้นเส้นทางการส่งสัญญาณ IKK /IκB /NF-κB ซึ่งจะทำให้เกิดการสังเคราะห์และปล่อยไซโตไคน์ เช่น TNF- และ IL-6 และในที่สุดก็ทำให้เกิดภูมิคุ้มกัน การเปิดใช้งาน RAW264 7 เซลล์ ดูรูปที่ 4

3. 5. การคัดกรองสารออกฤทธิ์ที่มีฤทธิ์กระตุ้นมาโครฟาจในน้ำตาลน้ำหนักโมเลกุลต่ำของ Cistanche

ห้องปฏิบัติการของเราได้วิเคราะห์น้ำตาลโมเลกุลต่ำที่มีอยู่ในCistancheในระยะแรกและพบว่าส่วนใหญ่ประกอบด้วยแมนนิทอล (ร้อยละ 16.53) ซูโครส (ร้อยละ 8.34) ฟรุกโตส (ร้อยละ 25.38) และกลูโคส (ร้อยละ 7.75) และส่วนผสมอื่นๆ ดังนั้น ผู้เขียนจึงใช้วิธีสีแดงเป็นกลางเพื่อคัดกรองผลการเปิดใช้งานของส่วนประกอบข้างต้นบนมาโครฟาจ แมนนิทอลสามารถเพิ่มกิจกรรมฟาโกไซติกของแมคโครฟาจอย่างมีนัยสำคัญในลักษณะที่ขึ้นกับขนาดยา ในขณะที่ผลกระทบของส่วนประกอบอื่นๆ ไม่มีนัยสำคัญ นี่แสดงให้เห็นว่าแมนนิทอลอาจเป็นหนึ่งในส่วนประกอบสำคัญในน้ำตาลที่มีน้ำหนักโมเลกุลต่ำของ Cistanche cistanche เพื่อกระตุ้นมาโครฟาจ ดังแสดงในรูปที่ 5

4. การอภิปราย

มีรายงานว่า Cistanche cistanche ซึ่งเป็นพืชกาฝากในวงศ์ Lydanaceae มีฤทธิ์กระตุ้นภูมิคุ้มกัน ดังนั้นจึงควรมีสารกระตุ้นภูมิคุ้มกัน ในการทดลองนี้ ผู้เขียนได้คัดกรองกิจกรรมฟาโกไซติกของมาโครฟาจในช่องท้องของหนูเมาส์บนส่วนต่างๆ ที่บริสุทธิ์ของCistancheและพบว่าน้ำตาลน้ำหนักโมเลกุลต่ำและโพลีแซ็กคาไรด์ของ Cistanche มีผลต่อการกระตุ้นมาโครฟาจ แต่ไกลโคไซด์ทั้งหมดของ Cistanche นั้นไม่ชัดเจน ในขณะเดียวกัน ผู้เขียนพบว่าน้ำตาลที่มีน้ำหนักโมเลกุลต่ำสามารถกระตุ้นมาโครฟาจที่ความเข้มข้นต่ำลงได้ ผู้เขียนจึงเลือกCistancheน้ำตาลน้ำหนักโมเลกุลต่ำเป็นจุดสนใจของการวิจัยในภายหลัง

จากการตรวจสอบผลกระทบของน้ำตาลซิสแทนเช่ที่มีน้ำหนักโมเลกุลต่ำต่อการแสดงออกของไซโตไคน์ TNF- และ IL-6 ผู้เขียนพบว่าน้ำตาลซิสแทนเช่ที่มีน้ำหนักโมเลกุลต่ำเพิ่มการแสดงออกของ TNF- และ IL-6 อย่างมีนัยสำคัญ ซึ่ง พิสูจน์เพิ่มเติมว่าน้ำตาลซิสแทนเช่ที่มีน้ำหนักโมเลกุลต่ำมีผลต่อหนู มาโครฟาจในช่องท้องมีผลกระตุ้น ดังนั้นผู้เขียนจึงได้สำรวจกลไกการทำงานที่เป็นไปได้ของมันต่อไป มีงานวิจัย

มันถูกแสดงว่าแบคทีเรียไลโปโพลีแซ็กคาไรด์ (LPS) สามารถกระตุ้นการกระตุ้นของมาโครฟาจของเมาส์และเซลล์เกลียของเมาส์ผ่านวิถีสัญญาณ เช่น JAK2/STAT3, NF-κB, p38/ERK และ MAPK [4-8] ทางเดิน NF-κB ได้รับการยอมรับว่าเป็นทางเดินแบบคลาสสิก ดังนั้นโปรตีนสัญญาณบนเส้นทางนี้จึงได้รับการทดสอบในการทดลองนี้ ผลการศึกษาพบว่าน้ำตาลที่มีน้ำหนักโมเลกุลต่ำของ Cistanche สามารถเพิ่มฟอสโฟรีเลชั่นของ NF-κB และฟอสโฟรีเลชั่นของโปรตีนส่งสัญญาณต้นน้ำที่สำคัญ IKK และ IκB ได้อย่างมีนัยสำคัญ ซึ่งบ่งชี้ว่าน้ำตาลที่มีน้ำหนักโมเลกุลต่ำของCistancheอาจกระตุ้นยักษ์ในช่องท้องของเมาส์ผ่านเส้นทางการส่งสัญญาณ IKK /IκB /NF-κB เซลล์ฟาจจะปล่อยไซโตไคน์ที่มีการอักเสบและมีบทบาทในการกระตุ้นภูมิคุ้มกันของเซลล์

ในระยะแรกของห้องปฏิบัติการ องค์ประกอบทางเคมีของสารสกัดน้ำตาลน้ำหนักโมเลกุลต่ำของCistanche deserticolaถูกวิเคราะห์อย่างเป็นระบบ พบว่าน้ำตาลน้ำหนักโมเลกุลต่ำส่วนใหญ่ประกอบด้วยโมโนเมอร์ เช่น แมนนิทอล ซูโครส ฟรุกโตส และกลูโคส การวิจัยเพิ่มเติมพบว่า mannitol สามารถปรับปรุงกิจกรรม phagocytic ของแมคโครฟาจได้อย่างมีนัยสำคัญ ดังนั้นจึงเป็นที่คาดการณ์ว่าแมนนิทอลอาจเป็นส่วนประกอบสำคัญของน้ำตาลที่มีน้ำหนักโมเลกุลต่ำซึ่งกระตุ้นการทำงานของภูมิคุ้มกันในระดับเซลล์

โดยสรุป การศึกษานี้ใช้แมคโครฟาจในระบบการเพาะเลี้ยงในหลอดทดลอง และพบว่า น้ำตาลน้ำหนักโมเลกุลต่ำของCistancheมีผลกระตุ้นอย่างมีนัยสำคัญต่อมาโครฟาจ และอาจกระตุ้นมาโครฟาจในช่องท้องของเมาส์ผ่านเส้นทางการส่งสัญญาณ NF-κB แล้วจึงมีบทบาท แมนนิทอลในน้ำตาลน้ำหนักโมเลกุลต่ำอาจมีบทบาทสำคัญในการกระตุ้นกิจกรรมฟาโกไซติกของแมคโครฟาจ

อ้างอิง

[1] ตู่ เผิงเฟย, กั๋ว หยูไห่. เทคนิคการเพาะปลูก Cistanche ทะเลทรายและ Tamarix เจ้าบ้าน [M] ปักกิ่ง: สำนักพิมพ์วิทยาศาสตร์, 2015:31.

[2] เกาเสี่ยวเซีย, เฉินจุน, เผิงหยานหลี่. ภาพรวมการวิจัยเกี่ยวกับผลทางเภสัชวิทยาของCistanche deserticolaพอลิแซ็กคาไรด์ [J] อาหารและยา, 2015, 17(2):136.

[3] Wang Xiangyan, Qi Yun, Cai Ruslan และอื่น ๆ การเปิดใช้งานมาโครฟาจของ Cistanche Polysaccharide [J] แถลงการณ์เภสัชวิทยาจีน พ.ศ. 2552 25(6):787

[4] หลิว จงหยวน, หลี่ เหยียนผิง. ฤทธิ์ทางชีวภาพและกลไกของแบคทีเรียไลโปโพลีแซคคาไรด์ [J] รีวิววิทยาศาสตร์การแพทย์ 2010, 16(2):166.

[5] Fu Zhihui, Xu Ling, Huang Jiao, และคณะ LPS ผ่านเส้นทาง p38 /MAPK และการเปิดใช้งาน NF-κB กระตุ้นการแสดงออกของ HIF-1 ใน RAW264 7 เซลล์ [J] Chongqing Medical University Journal, 2016, 41(10): 1033.

[6] Hao Yutong, Chen Chunhai, Yang Xuesen, และคณะ เส้นทางการส่งสัญญาณ JAK2 / STAT3 เกี่ยวข้องกับการกระตุ้น lipo poly ที่เกิดจากน้ำตาลของ microglia［J］ วารสารมหาวิทยาลัยการแพทย์ทหารที่สาม, 2552, 31(12):1119.

[7] เพลง Xiaomin, Liao Lixi, Dong Xin, et al. Mulbascum glycosides ยับยั้งการอักเสบที่เกิดจาก lipopolysaccharide ของ BV-2 microglia และกลไกของมัน [J] วารสารการแพทย์แผนจีนจีน, 2016, 41(13): 2506.