การสร้างภูมิคุ้มกันโรคไข้หวัดใหญ่ในบริบทของภูมิคุ้มกันที่มีอยู่ก่อน

แม้ว่าเราจะพัฒนาภูมิคุ้มกันโรคไข้หวัดใหญ่ตั้งแต่อายุยังน้อย แต่ก็ไม่เพียงพอที่จะป้องกันการติดเชื้อสายพันธุ์ใหม่ที่สร้างแอนติเจนในอนาคตได้ วิธีหนึ่งที่นำเสนอในการสร้างภูมิคุ้มกันในระยะยาวต่อเชื้อไวรัสไข้หวัดใหญ่สายพันธุ์ต่างๆ คือการเพิ่มการตอบสนองต่ออีพิโทปที่อนุรักษ์ไว้บนฮีแม็กกลูตินิน ซึ่งเป็นไกลโคโปรตีนบนพื้นผิวหลักของไวรัสไข้หวัดใหญ่ ภูมิคุ้มกันของร่างกายที่จำเพาะต่อไข้หวัดใหญ่ประกอบด้วยส่วนใหญ่ของความจำภูมิคุ้มกันโดยรวมในมนุษย์ และเป็นที่ทราบกันมานานแล้วว่าภูมิคุ้มกันที่มีอยู่ก่อนต่อไข้หวัดใหญ่นั้นหล่อหลอมการตอบสนองต่อการติดเชื้อไข้หวัดใหญ่และการฉีดวัคซีนในภายหลัง อย่างไรก็ตาม กลไกที่ภูมิคุ้มกันที่มีอยู่เดิมปรับเปลี่ยนการตอบสนองต่อการฉีดวัคซีนไข้หวัดใหญ่ยังไม่เป็นที่เข้าใจอย่างสมบูรณ์ ด้วยการใช้ชุดแบบจำลองทางคณิตศาสตร์ เราสำรวจสมมติฐานหลายประการที่อาจส่งผลให้การเพิ่มแอนติบอดีต่อเอพิโทปที่ได้รับการอนุรักษ์ลดลงหลังจากการฉีดวัคซีนซ้ำหลายครั้ง

cistanche tubulosa-ปรับปรุงระบบภูมิคุ้มกัน

ยกเว้นบุคคลที่มีภูมิคุ้มกันบกพร่องอย่างรุนแรงและประชากรที่อยู่โดดเดี่ยวบนเกาะห่างไกล ไม่มีใครที่ไร้เดียงสาด้านภูมิคุ้มกันต่อไข้หวัดใหญ่ แม้แต่ทารกก็ยังได้รับภูมิคุ้มกันที่ถ่ายโอนมาจากมารดา ซึ่งอาจส่งผลต่อการตอบสนองทางภูมิคุ้มกันต่อการฉีดวัคซีนหรือการติดเชื้อ (Albrecht et al. 1977; Halasa et al. 2008; Voysey et al. 2017; Willis et al. 2020) ในกลุ่มประชากรที่ไม่ได้รับการฉีดวัคซีน คาดว่าการติดเชื้อไข้หวัดใหญ่ครั้งแรกจะเกิดขึ้นภายใน 5 ปีแรกของชีวิต (Bodewes et al. 2011) ภูมิคุ้มกันโรคไข้หวัดใหญ่จึงเกิดขึ้นตั้งแต่อายุยังน้อยและสร้างภูมิคุ้มกันต่อสายพันธุ์ที่ติดเชื้อได้ยาวนาน ตัวอย่างเช่น ผู้สูงอายุส่วนใหญ่ได้รับการปกป้องจากการติดเชื้อโดยสายพันธุ์ H1N1 ที่เกิดการระบาดใหญ่ในปี 2009 (ศูนย์โรคและการป้องกัน 2009) และมีการเสนอว่านี่เป็นเพราะการไตเตอร์ของแอนติบอดีที่ทำปฏิกิริยาข้ามที่เพิ่มขึ้นซึ่งเกิดจากสายพันธุ์ H1N1 ที่คล้ายกันกับแอนติเจนซึ่งแพร่กระจายไปทั่วมากขึ้น กว่า 60 ปีก่อน (Hancock et al. 2009; Skountzou et al. 2010) ดังนั้นภูมิคุ้มกันต่อไข้หวัดใหญ่จึงสามารถคงอยู่ได้หลายสิบปี อย่างไรก็ตาม เราอาจติดเชื้อไข้หวัดใหญ่ซ้ำได้หลายครั้ง เนื่องจากไวรัสจะกลายพันธุ์อย่างต่อเนื่องและจัดประเภทใหม่เพื่อหนีจากภูมิคุ้มกันที่กำหนดไว้ล่วงหน้า มีการประเมินว่าผู้ที่ไม่ได้รับการฉีดวัคซีนจะติดเชื้อไข้หวัดใหญ่สายพันธุ์ใหม่ทุกๆ 3-7 ปี (Kucharski et al. 2015)

มีสองวิธีที่สายพันธุ์ไข้หวัดใหญ่หมุนเวียนเปลี่ยนแปลงไปตามกาลเวลา การเคลื่อนตัวของแอนติเจนเกิดจากการสะสมของการกลายพันธุ์อย่างค่อยเป็นค่อยไปในฮีแม็กกลูตินิน (HA) และไกลโคโปรตีนของนิวรามินิเดส (NA)ซึ่งเป็นแอนติเจนหลักบนพื้นผิวของไวรัส สายพันธุ์ไวรัสที่ลอยไปทางแอนติเจนสามารถหลบเลี่ยงแอนติบอดีที่เกิดขึ้นหลังจากการติดเชื้อสายพันธุ์ก่อนหน้าได้ ดังนั้น จึงปล่อยให้ไวรัสที่ลอยออกไปแพร่กระจายในประชากร การเบี่ยงเบนของแอนติเจนเป็นสาเหตุของการระบาดตามฤดูกาลของไข้หวัดใหญ่ และต้องมีการปรับปรุงวัคซีนเป็นระยะ การเปลี่ยนแปลงของแอนติเจนส่วนใหญ่เกิดจากการจัดเรียงใหม่ของสายพันธุ์ไข้หวัดใหญ่จากสัตว์สู่คน การเปลี่ยนแปลงของแอนติเจนสามารถทำให้เกิดการระบาดใหญ่ที่รุนแรงมากขึ้น เช่น การระบาดของเชื้อ H2N2 และ H3N2 ในปี 1957 และ 1968 แม้ว่าจะมีลำดับความหลากหลายที่มีนัยสำคัญระหว่างสายพันธุ์ แต่ก็มีข้อจำกัดบางประการเกี่ยวกับการเปลี่ยนแปลงของโปรตีน HA โดยเฉพาะอย่างยิ่ง การกลายพันธุ์ที่ทำให้เกิดการเคลื่อนตัวของแอนติเจนจะกระจุกตัวอยู่ใน "ส่วนหัว" ของ HA (ส่วนที่อยู่ห่างจากเยื่อหุ้มเซลล์มากที่สุด) และยังมีบริเวณที่ได้รับการอนุรักษ์ไว้มากกว่าบน "ก้าน" ของโมเลกุล HA ที่สามารถกระตุ้นแอนติบอดีป้องกันข้ามได้ ( Doud และ Bloom 2016; Neu และคณะ 2016) ผลกระทบของภูมิคุ้มกันที่สร้างไว้ล่วงหน้าต่อการตอบสนองทางภูมิคุ้มกันต่อการติดเชื้อไข้หวัดใหญ่หรือการฉีดวัคซีนเป็นปริศนาที่ทำให้เกิดโรคไข้หวัดใหญ่นับตั้งแต่เริ่มก่อตั้ง การศึกษาที่ดำเนินการในทศวรรษปี 1950 แสดงให้เห็นว่ามีผลกระทบของภูมิคุ้มกันที่มีอยู่แล้วต่อการตอบสนองทางภูมิคุ้มกันต่อการติดเชื้อหรือการฉีดวัคซีนในภายหลัง (Francis 1955, 1960) เพื่อให้เรื่องซับซ้อนขึ้น ภูมิคุ้มกันไข้หวัดใหญ่ที่กำหนดไว้ล่วงหน้าจะแตกต่างกันไปขึ้นอยู่กับประวัติส่วนตัวของการสัมผัสกับไข้หวัดใหญ่ ซึ่งมีความแปรปรวนสูง โดยเฉพาะอย่างยิ่งระหว่างกลุ่มอายุที่แตกต่างกัน (Linderman et al. 2014; Gostic et al. 2019) แม้ว่าการสัมผัสตามลำดับกับสายพันธุ์ที่แตกต่างกันของแอนติเจนจะสร้างรูปร่างของแอนติบอดีในบุคคลที่กำหนดอย่างต่อเนื่อง เราอาจคาดหวังว่าการตอบสนองต่อ epitopes ที่ได้รับการอนุรักษ์จะเพิ่มขึ้นด้วยการติดเชื้อไข้หวัดใหญ่ครั้งใหม่แต่ละครั้ง ในระบบแบบจำลองสัตว์ การเพิ่มขึ้นของระดับแอนติบอดีต่อบริเวณอนุรักษ์ของลำต้นของ HA ได้แสดงให้เห็นว่าให้การป้องกันแบบเฮเทอโรซับไทปิก (Wei et al. 2010; Kanekiyo et al. 2013; Krammer et al. 2013, 2014; Margine และคณะ 2013; Impagliazzo และคณะ 2015; Yassine และคณะ 2015) ในทำนองเดียวกัน มีหลักฐานในมนุษย์ที่ชี้ให้เห็นว่าแอนติบอดีที่เกิดจากการตอบสนองต่อชนิดย่อยของไวรัสใน clade ที่กำหนดสามารถให้การป้องกันไวรัสอื่น ๆ ใน clade เดียวกันได้อย่างจำกัด (แต่ไม่จำเป็นต้องเป็นไวรัสใน clade ที่แตกต่างกัน) (Gostic et al. 2016) คำถามหนึ่งที่มีมายาวนานคือเหตุใดการฉีดวัคซีนไข้หวัดใหญ่และการติดเชื้อซ้ำๆ จึงไม่เพิ่มระดับแอนติบอดีต่อปฏิกิริยาข้ามให้อยู่ในระดับที่เพียงพอเพื่อป้องกันการติดเชื้อ ที่นี่ เราจะทบทวนความเข้าใจของเราเกี่ยวกับการตอบสนองทางภูมิคุ้มกันของมนุษย์ต่อการฉีดวัคซีนไข้หวัดใหญ่ และภูมิคุ้มกันที่มีอยู่แล้วส่งผลต่อการตอบสนองต่อการฉีดวัคซีนอย่างไร เราหารือเกี่ยวกับข้อมูลเกี่ยวกับขนาดของการตอบสนองของแอนติบอดีต่อเอพิโทปต่างๆ ของไข้หวัดใหญ่ และวิธีที่สิ่งเหล่านี้ถูกกระตุ้นโดยการฉีดวัคซีน จากนั้นเราจะตรวจสอบว่าแบบจำลองทางคณิตศาสตร์ง่ายๆ สามารถนำมาใช้เพื่อทำความเข้าใจปัจจัยที่มีส่วนทำให้เกิดผลกระทบที่ภูมิคุ้มกันที่มีอยู่เดิมมีต่อการเพิ่มการตอบสนองของระบบภูมิคุ้มกันของร่างกายโดยการฉีดวัคซีนได้อย่างไร

cistanche tubulosa-ปรับปรุงระบบภูมิคุ้มกัน

คลิกที่นี่เพื่อดูผลิตภัณฑ์ Cistanche Enhance Immunity

【สอบถามเพิ่มเติม】 อีเมล:cindy.xue@wecistanche.com / Whats App: 0086 18599088692 / Wechat: 18599088692

มีภูมิคุ้มกันสูงต่อโรคไข้หวัดใหญ่ในมนุษย์

ผู้ใหญ่ที่มีสุขภาพแข็งแรงจะสะสมภูมิคุ้มกันต่อไวรัสไข้หวัดใหญ่ในระดับสูงโดยการฉีดวัคซีนป้องกันการแพร่ระบาด ตัวอย่างเช่น แอนติบอดีต่อวัคซีน IgG, IgA และ IgM ที่ทำปฏิกิริยากับวัคซีน inflreacha นั้นสามารถวัดได้อย่างง่ายดายโดยการทดสอบอิมมูโนซอร์เบนท์ที่เชื่อมโยงกับเอนไซม์ (ELISA) ในเลือดรอบนอกของผู้ใหญ่ที่มีสุขภาพดี (รูปที่ 1 เซลล์ B ของหน่วยความจำจำเพาะต่อวัคซีนเฉพาะเจาะจง (MBCs) บัญชีสำหรับ ∼ 1% ของ IgG MBCs ในเลือด ซึ่งสูงกว่าที่พบในแอนติเจนของวัคซีนทั่วไปอื่นๆ เช่น คางทูม หัด หัดเยอรมัน หรือไวรัส varicella-zoster (VZV) อย่างมีนัยสำคัญ (รูปที่ 1B, C; Rasheed และคณะ 2019; Eberhardt และคณะ 2020) นอกจากนี้ พลาสมาเซลล์เฉพาะสำหรับวัคซีนไข้หวัดใหญ่ยังมีสัดส่วนประมาณ ∼1% ของเซลล์พลาสมา IgG ทั้งหมดในไขกระดูก (รูปที่ 1D; Davis et al. 2020; Eberhardt et al. 2020) นี่อาจเป็น การดูถูกดูแคลนด้วยเหตุผลอย่างน้อยสองประการ: อาจมี MBC ที่ทำปฏิกิริยากับไข้หวัดใหญ่และพลาสมาเซลล์ที่มีอายุยืนยาวเพิ่มเติมต่อแอนติเจนของไข้หวัดใหญ่อื่นๆ ที่ไม่รวมอยู่ในการวิเคราะห์เหล่านี้ และเราไม่ได้ตรวจพบการตอบสนองต่อสายพันธุ์ก่อนหน้าที่มีปฏิกิริยาข้ามที่ทำปฏิกิริยากับวัคซีนปัจจุบัน สายพันธุ์

เนื่องจากการแบ่งประเภทอย่างต่อเนื่องของสายพันธุ์ไข้หวัดใหญ่ที่หมุนเวียน เอพิโทปใหม่จึงเกิดขึ้นเมื่อเวลาผ่านไป โดยส่วนใหญ่อยู่ในส่วนหัวของ HA และการเปลี่ยนแปลงเหล่านี้ทำให้ไวรัสสามารถหลบหนีได้แม้จะมีภูมิคุ้มกันอยู่แล้วก็ตาม ดังนั้น เพื่อปรับปรุงประสิทธิภาพของวัคซีน เราจำเป็นต้องเข้าใจให้ดีขึ้นว่าภูมิคุ้มกันที่มีอยู่แล้วส่งผลต่อความสามารถในการเพิ่มเอพิโทปแบบปฏิกิริยาข้าม และสร้างแอนติบอดีต่อเอพิโทปใหม่ของไวรัสที่หมุนเวียนอยู่ในปัจจุบันอย่างไร

การตอบสนองของการเรียกคืนความจำหลังการฉีดวัคซีน

มีการอธิบายก่อนหน้านี้ว่ามีจำนวนพลาสมาบลาสต์เพิ่มขึ้นชั่วคราวในเลือดส่วนปลาย ณ ประมาณวันที่ 7 หลังการฉีดวัคซีนหรือหลังการติดเชื้อ (Wrammert et al. 2011; Li et al. 2012; Ellebedy et al. 2016) ประชากรเซลล์นี้เป็นข้อกำหนดเฉพาะของลาร์แกนติเจนและกลายพันธุ์ทางร่างกาย โดยบอกว่ามันได้มาจากประชากรหน่วยความจำที่ถูกกระตุ้นอย่างรวดเร็วเมื่อได้รับสารแอนติเจนข้ามปฏิกิริยาอีกครั้ง หลังจากการฉีดวัคซีนเบื้องต้นหรือการติดเชื้อไข้หวัดใหญ่สายพันธุ์ที่มีความหลากหลายสูง เช่น สายพันธุ์ H1N1 ระบาดในปี 2009 หรือสายพันธุ์ H5N1 ปี 2005 พลาสมาบลาสต์เหล่านี้ส่วนใหญ่มีความเฉพาะเจาะจงสำหรับบริเวณต้นกำเนิด HA ที่ได้รับการอนุรักษ์ไว้อย่างสูง (Wrammert et al. 2011; Li et al. 2012; เอเลเบดี และคณะ 2014) นี่น่าจะเป็นผลมาจากความถี่สูงของ MBCs เฉพาะต้นกำเนิดเฉพาะ crosstie และความถี่ต่ำของ B เซลล์ไปที่ส่วนหัวของ HA ไข้หวัดใหญ่สายพันธุ์ใหม่ (เนื่องจากลำดับที่คล้ายคลึงกันต่ำระหว่างหัวหน้า HA ของการระบาดใหญ่ครั้งใหม่กับสายพันธุ์ไข้หวัดใหญ่ตามฤดูกาล ความถี่สารตั้งต้นของเคอร์เซอร์ของโคลน MBC ที่ขยายเมื่อเปรียบเทียบกับเซลล์ naive B ทำให้เซลล์หน่วยความจำ B มีความได้เปรียบในระหว่างการตอบสนองต่อการเรียกคืน นอกจากนี้ เนื่องจากการเปลี่ยนแปลงทางโซมาติกก่อนหน้านี้ ตัวรับ MBC B-cell จึงคาดว่าจะมีแอนติเจนสำหรับแอนติเจนที่สูงกว่าเซลล์ naive B ( Eisen และคณะ 1969) การเรียกคืน MBC แบบ cross-reactive แบบเลือกสรร แทนที่จะกระตุ้น B เซลล์ไร้เดียงสาโดยเฉพาะน่าจะมีส่วนช่วยในการสังเกต "Original antigenic sin" (OAS) (Francis 1955, 1960) ซึ่งการตอบสนองของระบบภูมิคุ้มกันเอียงไปทาง เอพิโทปที่ทำปฏิกิริยาข้ามซึ่งอาจมีสัมพรรคภาพต่ำกว่าสำหรับสายพันธุ์ที่ลอยไปทางแอนติเจน

รูปที่ 1 ผู้ใหญ่มีระดับภูมิคุ้มกันต่อไข้หวัดใหญ่ในระดับสูง แอนติบอดีต่อแอนติบอดีต่อ IgG, IgA และ IgM ที่ไวต่อปฏิกิริยาของวัคซีนป้องกันไข้หวัดใหญ่ถูกวัดในผู้ใหญ่ที่มีสุขภาพดีโดย ELISA (n=38) (A) ความถี่ของเซลล์ B หน่วยความจำจำเพาะแอนติเจนที่จำเพาะสำหรับคางทูม หัด หัดเยอรมัน และไข้หวัดใหญ่ (B) หรือ VZV และไข้หวัดใหญ่ (C) ถูกวัดโดยการกระตุ้น PBMC และการหาปริมาณโดย ELISpot ตามที่อธิบายไว้ก่อนหน้า (Rasheed et al. 2019; เอเบอร์ฮาร์ด และคณะ 2020) VZV และเซลล์พลาสมาไขกระดูก IgG ที่จำเพาะต่อไข้หวัดใหญ่ถูกหาปริมาณโดย ELISpot และพล็อตเป็นเปอร์เซ็นต์ของเซลล์พลาสมาไขกระดูกที่สร้าง IgG ทั้งหมด (D)

ไทเทอร์แอนติบอดีที่มีอยู่ก่อนหน้าส่งผลต่อขนาดของการตอบสนอง

แม้จะมีข้อดีของการเรียกคืนความจำหลังการฉีดวัคซีน แต่ก็มีหลักฐานที่แสดงว่ามีการรบกวนการตอบสนองของระบบภูมิคุ้มกันโดยความจำที่มีอยู่แล้ว โดยทั่วไปแล้ว บุคคลที่มีการไทเทอร์ของแอนติบอดีแบบ cross-reactive ที่มีอยู่แล้วสูงจะมีจุดสูงสุดที่ลดลงอย่างมีนัยสำคัญในการหมุนเวียนจำนวนพลาสมาบลาสต์ที่จำเพาะต่อแอนติเจนหลังการฉีดวัคซีนไข้หวัดใหญ่ (Ellebedy และคณะ 2020) บุคคลที่มีระดับแอนติบอดีที่มีอยู่แล้วสูงกว่าจะมีระดับแอนติบอดีเพิ่มขึ้นลดลงหลังการฉีดวัคซีน (Ellebedy และคณะ 2014, 2020) ดังนั้น การตอบสนองทางภูมิคุ้มกันของแต่ละบุคคลอาจถูกปรับโดยระดับแอนติบอดีที่มีอยู่แล้วของแต่ละบุคคล และเมื่อระดับแอนติบอดีต่อไข้หวัดใหญ่ลดลงเมื่อเวลาผ่านไป ขอบเขตของการปรับอาจเปลี่ยนแปลงเมื่อเวลาผ่านไป เห็นได้จากการตอบสนองทางภูมิคุ้มกันต่อการฉีดวัคซีนไข้หวัดใหญ่ในผู้ที่ได้รับการฉีดวัคซีนทุกปี เมื่อเทียบกับผู้ที่ข้ามการฉีดวัคซีนไข้หวัดใหญ่เป็นเวลาอย่างน้อย 3 ปี รูปที่ 2 แสดงการตอบสนองต่อการฉีดวัคซีนไข้หวัดใหญ่ตามฤดูกาลในคนทั้งสองกลุ่มนี้ รูปที่ 2A แสดงความสัมพันธ์ระหว่างไทเทอร์ของแอนติบอดีก่อนและหลังการฉีดวัคซีน ก่อนการฉีดวัคซีน ระดับแอนติบอดีจะลดลงอย่างมีนัยสำคัญในบุคคลที่ไม่ได้รับการฉีดวัคซีนไข้หวัดใหญ่เป็นเวลาอย่างน้อย 3 ปี (ช่องเปิด) เมื่อเทียบกับผู้ที่ได้รับการฉีดวัคซีนไข้หวัดใหญ่ในปีที่แล้ว (ช่องเต็ม) หากไทเทอร์ของแอนติบอดียังคงไม่เปลี่ยนแปลงหลังการฉีดวัคซีน จุดข้อมูลจะอยู่บนเส้นที่มีความชัน=1 (เส้นประ) การเพิ่มขึ้นของระดับแอนติบอดีหลังการฉีดวัคซีนจะทำให้จุดที่อยู่เหนือเส้นนี้ หากแอนติบอดีไทเทอร์ที่มีอยู่ก่อนหน้าไม่ส่งผลต่อการเพิ่ม เราคาดว่าจุดต่างๆ จะเรียงขนานกับเส้นประ อย่างไรก็ตาม รูปแบบที่ดีที่สุด (เส้นทึบ) มีความชันน้อยกว่าหนึ่ง (สี่เหลี่ยมจัตุรัสน้อยที่สุด ความชัน=0.45; 95% CI=[0.37;0.68]) แสดงให้เห็นว่าบุคคลที่มีแอนติบอดีที่มีอยู่ก่อนต่ำกว่า titers มีบูสต์ที่สูงขึ้นอย่างมาก ดังที่เห็นได้จากระยะทางที่เพิ่มขึ้นเหนือเส้นประ รูปที่ 2B แสดงความสัมพันธ์ที่สอดคล้องกันระหว่างไทเทอร์ของแอนติบอดีก่อนการฉีดวัคซีนและขนาดของการเพิ่ม ซึ่งกำหนดเป็นการเพิ่มขึ้นของไทเทอร์ของแอนติบอดี สำหรับการตอบสนองในกลุ่ม "ข้าม" (ช่องสี่เหลี่ยมเปิด) และกลุ่ม "รายปี" (ช่องสี่เหลี่ยมที่เต็มไป) การเพิ่มขึ้นของการพับ (กล่าวคือ การเพิ่มการพับ) ของการตอบสนองของแอนติบอดีลดลงพร้อมกับการเพิ่มขึ้นของไทเทอร์ของแอนติบอดีก่อนการฉีดวัคซีนที่สอดคล้องกัน รูปที่ 2C แสดงให้เห็นว่าความถี่ MBC และแอนติบอดีที่มีอยู่แล้วสามารถปรับการตอบสนองเหล่านี้ได้อย่างไร เมื่อมีระดับภูมิคุ้มกันที่มีอยู่แล้วในระดับต่ำ การเปิดใช้งานเซลล์ B หน่วยความจำแบบ cross-reactive อีกครั้งจะกลายเป็นปัจจัยหลักที่กำหนดการตอบสนอง ในขณะที่ระดับภูมิคุ้มกันที่มีอยู่แล้วในระดับสูง ผลตอบรับเชิงลบจากแอนติบอดีแบบ cross-reactive อาจมีส่วนทำให้การตอบสนองโดยรวมลดลง

cistanche tubulosa-ปรับปรุงระบบภูมิคุ้มกัน

การเพิ่มการตอบสนองต่อ Epitopes ที่แตกต่างกัน

การตอบสนองทางภูมิคุ้มกันต่ออีพิโทปที่แตกต่างกันหลังการฉีดวัคซีนอาจได้รับผลกระทบจากความสมดุลของเซลล์เมมโมรีบีที่มีอยู่แล้วและแอนติบอดีไทเทอร์ที่มีอยู่ก่อนหน้ากับอีพิโทปเหล่านี้ ตัวอย่างเช่น หลังจากการก่อภูมิคุ้มกันปฐมภูมิด้วยสายพันธุ์ H5N1 ชนิดใหม่ ความจำเพาะของแอนติบอดีที่ถูกกระตุ้นโดยการฉีดวัคซีนส่วนใหญ่เบ้กับอีพิโทปซึ่งจำเพาะต่อต้นกำเนิดข้ามปฏิกิริยาที่กว้างกว่า นี่เป็นผลมาจากจำนวน MBCs เฉพาะต้นกำเนิดที่มีอยู่แล้วที่สูงกว่า ซึ่งถูกกระตุ้นโดยการสัมผัสกับ H1N1 ก่อนหน้านี้ซึ่งมีเอพิโทปของต้นกำเนิดแบบ cross-reactive ร่วมกัน และการขาดหน่วยความจำที่มีอยู่แล้วกับโดเมนหลัก H5 ใหม่ อย่างไรก็ตาม หลังจากได้รับเชื้อ H5N1 ครั้งที่สองโดยการฉีดวัคซีนเสริม การตอบสนองทางภูมิคุ้มกันจะเบี่ยงเบนไปอย่างมากต่อการตอบสนองของแอนติบอดีจำเพาะต่อศีรษะ ในขณะที่ไทเทอร์ของแอนติบอดีที่จำเพาะต่อต้นกำเนิดยังคงไม่เปลี่ยนแปลงส่วนใหญ่ กลไกที่เป็นไปได้ประการหนึ่งสำหรับการครอบงำของแอนติบอดีจำเพาะต่อต้นกำเนิดและแอนติบอดีต่อ HA หลังการฉีดวัคซีน H5N1 รองก็คือ แอนติบอดีที่จำเพาะต่อต้นกำเนิดสูงจะรบกวนการตอบสนองการเรียกคืนหน่วยความจำ รูปที่ 3 แสดงแผนภาพการตอบสนองของแอนติบอดีต่อศีรษะและก้านหลังการสร้างภูมิคุ้มกันด้วยวัคซีนไข้หวัดใหญ่ตามฤดูกาล (TIV) (รูปที่ 3A, D) สายพันธุ์ H5N1 ใหม่ขนาดสูง (รูปที่ 3B, E) และสายพันธุ์ H5N1 ขนาดต่ำพร้อมการเติม สารเสริม (รูปที่ 3C, F) เช่นเดียวกับข้อมูลสำหรับวัคซีนที่ถูกข้ามเมื่อเทียบกับวัคซีนรายปี (รูปที่ 2) การเพิ่มขึ้นเท่าของการตอบสนองของแอนติบอดีต่อหัวหรือก้าน HA มีความสัมพันธ์เชิงลบกับการไทเทอร์ของแอนติบอดีก่อนการฉีดวัคซีนกับเอพิโทปเหล่านี้ ในกรณีของการฉีดวัคซีนด้วย TIV ตามฤดูกาล (รูปที่ 3A) ค่าไตเตอร์ของแอนติบอดีต่อทั้งก้าน HA และส่วนหัว HA ของ H1N1 จะทับซ้อนกัน ในกรณีนี้ ซึ่งแอนติบอดีไทเทอร์ที่ทำปฏิกิริยากับต้นกำเนิด HA ที่มีอยู่ก่อนหน้าและส่วนหัวมีความคล้ายคลึงกัน การเพิ่มขึ้นเท่าตัวในแอนติบอดีไทเทอร์จะคล้ายกันโดยไม่คำนึงถึงความจำเพาะของอีพิโทป และสัมพันธ์กับไทเทอร์ก่อนการฉีดวัคซีน (รูปที่ 3D) ในกรณีของการฉีดวัคซีนทุติยภูมิด้วยสายพันธุ์ H5N1 ใหม่ (รูปที่ 3B, C) มีระดับแอนติบอดีต่อก้านที่สูงกว่าส่วนหัวของ HA (และไม่มีบุคคลใดที่มี titers ต่ำมากต่อก้าน) ในกรณีนี้ การเพิ่มขึ้นของไทเทอร์แอนติบอดีจะเอียงไปทางโดเมนส่วนหัว HA ซึ่งแสดงไทเทอร์ก่อนการฉีดวัคซีนที่ต่ำกว่าอย่างมีนัยสำคัญ

รูปที่ 2 การเพิ่มแอนติบอดีหลังการฉีดวัคซีนไข้หวัดใหญ่ วัดระดับแอนติบอดีที่มีผลผูกพันกับแอนติเจนของวัคซีนไข้หวัดใหญ่โดย ELISA ก่อนและหลังการฉีดวัคซีน 14 วันในผู้ที่ได้รับการฉีดวัคซีนเมื่อปีที่แล้ว (รายปี) และผู้ที่ข้ามการฉีดวัคซีนไข้หวัดใหญ่เป็นเวลาอย่างน้อย 3 ปี (ข้าม) (A) ความสัมพันธ์ระหว่างระดับแอนติบอดีก่อนและหลังการฉีดวัคซีน (B) ความสัมพันธ์ระหว่างการเพิ่มขึ้นของไทเทอร์แอนติบอดีและไทเทอร์ก่อนการฉีดวัคซีน (C) แผนผังสรุปว่า MBCs และแอนติบอดีไทเทอร์ที่มีอยู่แล้วอาจส่งผลต่อการตอบสนองการเรียกคืนหลังจากการฉีดวัคซีนไข้หวัดใหญ่ตามฤดูกาลอย่างไร

รูปที่ 3 การตอบสนองของแอนติบอดีต่อศีรษะและก้านของฮีแม็กกลูตินิน (HA) การเพิ่มแอนติบอดีจำเพาะต่อศีรษะและลำต้นของ HA หลังการฉีดวัคซีนด้วยเชื้อ H1N1 เชื้อตาย (จากวัคซีนป้องกันไข้หวัดใหญ่ชนิดไตรวาเลนต์ตามฤดูกาล [TIV], [A, D] เชื้อ H5N1 ในปริมาณสูง [ B, E] และ H5N1 ในปริมาณต่ำพร้อมสารเสริม [C , ฟ]) สำหรับ H5N1 เราใช้ข้อมูลจากการฉีดวัคซีนเสริม (ดูรูปที่ 6 เพิ่มเติม) (A – C) พล็อตของไทเทอร์แอนติบอดีหลังการฉีดวัคซีน หากไทเทอร์ของแอนติบอดียังคงไม่เปลี่ยนแปลงหลังการฉีดวัคซีน จุดข้อมูลจะอยู่บนเส้นที่มีความชัน=1 (เส้นประ) เส้นที่เหมาะสมที่สุด (เส้นทึบ ความชัน < 1) แสดงให้เห็นว่ามีการเพิ่มขึ้นมากขึ้นเมื่อไทเตอร์เริ่มต้นต่ำ (D–F) ภูมิคุ้มกันก่อนการฉีดวัคซีนจะลดการเพิ่มและความสัมพันธ์จะเป็นเส้นตรงโดยประมาณบนพล็อตล็อก-ล็อก (แผงที่สร้างขึ้นด้วยข้อมูลจาก Ellebedy และคณะ 2014, 2020)

แบบจำลองการตอบสนองต่อศีรษะและก้านของฮา

แบบจำลองทางคณิตศาสตร์ของการตอบสนองทางภูมิคุ้มกันของร่างกายสามารถใช้เพื่อสำรวจสมมติฐานที่แตกต่างกันว่าเมมโมรีบีเซลล์และแอนติบอดีที่มีอยู่แล้วส่งผลต่อการเพิ่มการตอบสนองต่อเอพิโทปที่แตกต่างกันหลังการสร้างภูมิคุ้มกันอย่างไร รูปที่ 4 แสดงแบบจำลองสอง epitope แบบง่ายที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้ ซึ่งมุ่งเน้นไปที่ epitopes ของส่วนหัวและลำต้นของ HA และการโต้ตอบกับเซลล์ B และแอนติบอดีที่จำเพาะต่อ epitopes เหล่านี้ (Zarnitsyna et al. 2016) รูปที่ 4A แสดงแผนผังสำหรับแบบจำลองพื้นฐานของการตอบสนองทางภูมิคุ้มกันของร่างกาย (แบบจำลอง "พื้นฐาน") และการดัดแปลงทั้งสามของมันซึ่งสะท้อนถึงกลไกเพิ่มเติมสามประการ (รหัสสี) ในแบบจำลองพื้นฐาน บีเซลล์ที่จำเพาะต่อแอนติเจนจะถูกกระตุ้นโดยแอนติเจน ผ่านการขยายตัวของโคลนอล และผลิตแอนติบอดี การกระตุ้นเซลล์บีจำเพาะจะดำเนินต่อไปจนกว่าแอนติเจนทั้งหมดจะสลายตัว ในแบบจำลองพื้นฐาน การพับที่เพิ่มขึ้นในไทเทอร์แอนติบอดีไม่ขึ้นอยู่กับไทเทอร์ก่อนการฉีดวัคซีน มีหลายวิธีที่แอนติบอดีที่มีอยู่แล้วสามารถลดการตอบสนองต่อการเรียกคืนได้ (Zarnitsyna et al. 2016) แบบจำลองการชำระล้างแอนติเจน (ACM) ตั้งสมมติฐานว่าแอนติบอดีที่มีอยู่แล้วทำให้เกิดการชำระล้างแอนติเจนเร็วขึ้นซึ่งลดเวลาสำหรับอันตรกิริยาของบีเซลล์กับมัน และด้วยเหตุนี้ จึงนำไปสู่การขยายตัวของบีเซลล์น้อยลงและแอนติบอดีที่สร้างขึ้นน้อยลง แบบจำลองการยับยั้งแบบอาศัยสื่อกลางของตัวรับ Fc (FIM) ตั้งสมมติฐานว่าแอนติบอดีที่มีอยู่ก่อนสร้างสารเชิงซ้อนภูมิคุ้มกันแบบยับยั้งที่ลดการกระตุ้นของบีเซลล์ที่จำเพาะต่อแอนติเจนโดยการเชื่อมโยงข้ามตัวรับบีเซลล์ที่จับกับอีพิโทปของแอนติเจนและ B-cell Fc RIIB ที่จับกับ ส่วน Fc ของแอนติบอดีในระบบภูมิคุ้มกัน (Nimmerjahn และ Ravetch 2010) แบบจำลองการมาสก์ของอีพิโทป (EMM) ตั้งสมมติฐานว่าแอนติบอดีที่มีอยู่แล้วและบีเซลล์ซึ่งจำเพาะสำหรับอีพิโทปเดียวกันจะแย่งชิงการจับกับอีพิโทปนั้นบนแอนติเจน และยับยั้งการแพร่กระจายของบีเซลล์ที่จำเพาะต่ออีพิโทป สิ่งนี้เกิดขึ้นเป็นผลมาจากข้อจำกัดทางกายภาพที่เกี่ยวข้องกับขนาดของแอนติบอดี และไม่ส่งผลกระทบต่อการจับและการเพิ่มจำนวนของเซลล์บีที่จำเพาะสำหรับอีพิโทปอื่นๆ ที่อยู่ห่างไกลในเชิงพื้นที่ ตรงกันข้ามกับแบบจำลอง ACM ซึ่งแอนติเจนจะถูกกำจัดออกเร็วกว่าโดยการจับกับแอนติบอดี ในแบบจำลอง EMM การผลิตแอนติบอดีจะถูกควบคุมลงแม้ว่าจะมีแอนติเจนอยู่อย่างต่อเนื่องก็ตาม เมื่อพิจารณาแบบจำลองสองเอพิโทปแบบง่ายที่มีการตอบสนองต่อส่วนหัวและก้านของ HA (รูปที่ 4B) แอนติเจนอาจอยู่ในสี่สถานะ และสถานะถูกกำหนดโดยแอนติบอดีที่จับกับส่วนหัวและ/หรือก้าน แอนติเจนอิสระมีชื่อว่า HS ในขณะที่ OS, H O และ OO เป็นตัวแทนของแอนติเจนที่มีแอนติบอดีที่จับกับ H (เอพิโทปของส่วนหัว), S (เอพิโทปของต้นกำเนิด) หรือทั้งสองเอพิโทปตามลำดับ

รูปที่ 4 แผนผังสำหรับแบบจำลองทางคณิตศาสตร์เพื่ออธิบายการตอบสนองของแอนติบอดีที่ลดลง (A) แผนผังสำหรับแบบจำลอง one-epitope พื้นฐานและการดัดแปลงสามแบบที่รวมเอากลไกที่แตกต่างกันสามแบบ: การกวาดล้างแอนติเจนที่จับกับแอนติบอดีที่ได้รับการปรับปรุง (ACM เป็นสีเขียว) การยับยั้ง Fc R-mediated (FIM สีน้ำเงิน) และการมาสก์ของ epitope (EMM , เป็นสีส้ม) (B) แบบจำลองหนึ่งเอพิโทปถูกขยายไปยังแบบจำลองสองเอพิโทปโดยรวมหนึ่งเอพิโทปบนส่วนหัวของ HA (H) และหนึ่งเอพิโทปบนก้านของ HA (S) การจับกันของแอนติบอดีจำเพาะส่วนหัว (AH) และแอนติบอดีจำเพาะต้นกำเนิด (AS) กำหนดสถานะที่เป็นไปได้สี่สถานะของแอนติเจน: แอนติเจนอิสระที่ไม่มีแอนติบอดีผูกมัด (HS) แอนติเจนที่จับโดยแอนติบอดีที่ศีรษะ (OS) แอนติเจนที่จับโดย แอนติบอดีต่อลำต้น (H O) และแอนติเจนที่ถูกจับโดยแอนติบอดีทั้งสอง (OO)

รูปที่ 5 การเลือกปฏิบัติแบบอย่าง (A) การทำนายแบบจำลองสำหรับแบบจำลองพื้นฐานและการดัดแปลงที่รวมเอากลไกที่แตกต่างกันสามประการ: การกวาดล้างแอนติเจน (ACM), การยับยั้ง Fc-receptor ที่เป็นสื่อกลางของการกระตุ้น B-cell (FIM) และการปิดบังอีพิโทป (EMM) ด้วยการใช้แบบจำลองสองเอพิโทป เราคาดการณ์ว่าระดับที่แตกต่างกันของแอนติบอดีจำเพาะส่วนหัวและต้นกำเนิดที่ได้รับการฉีดวัคซีนล่วงหน้าจะส่งผลต่อการเพิ่มระดับไทเทอร์ของแอนติบอดีที่ส่วนหัวและก้านของ HA อย่างไร ชุดไทเทอร์แอนติบอดีส่วนหัวและต้นกำเนิดก่อนการฉีดวัคซีนที่แตกต่างกันสิบชุด (เลียนแบบบุคคลที่แตกต่างกัน 10 ราย) ถูกนำมาใช้สำหรับการทำนายการเพิ่มการพับหลังการฉีดวัคซีนในไทเทอร์แอนติบอดี การตอบสนองต่อศีรษะ (วงกลมสีแดง) และก้าน (สามเหลี่ยมสีน้ำเงิน) ในแต่ละบุคคลจะเชื่อมต่อกันด้วยเส้น (B) แผนที่สอดคล้องกันจากการศึกษาทดลองสามครั้ง (C) แผนผังแสดงให้เห็นว่าเซลล์บีและแอนติบอดีของหน่วยความจำก่อนการฉีดวัคซีนส่งผลต่อการตอบสนองต่อการฉีดวัคซีนที่สำคัญและกระตุ้นด้วยการระบาดใหญ่ H5N1 ใหม่อย่างไร ความถี่ในการฉีดวัคซีนสูงของเซลล์ B หน่วยความจำเฉพาะต้นกำเนิดกำหนดการตอบสนองหลักด้วยการเรียกคืนแอนติบอดีจำเพาะต้นกำเนิดอย่างมาก อย่างไรก็ตาม การเพิ่มไทเทอร์ของแอนติบอดีจำเพาะต้นกำเนิดหลังการฉีดวัคซีน H5N1 ครั้งแรกจะระงับการเพิ่มแอนติบอดีจำเพาะต้นกำเนิดต่อไปหลังการฉีดวัคซีนครั้งที่สอง ในทางกลับกัน แอนติบอดีที่สร้างขึ้นใหม่หลังการฉีดวัคซีนครั้งที่สองจะเน้นเฉพาะส่วนหัวเป็นหลัก

กลไกทั้งสามที่รวมอยู่ในแบบจำลอง ACM, FIM และ EMM สามารถอธิบายการลดลงของการเพิ่มการพับของแอนติบอดีเนื่องจากแอนติบอดีที่มีอยู่แล้ว แต่เราพบว่าแบบจำลองสองเอพิโทปให้การคาดการณ์ที่แตกต่างกันหากเราเปรียบเทียบวิธีตอบสนองต่อศีรษะและก้าน ของ HA สำหรับแต่ละบุคคลขึ้นอยู่กับระดับการให้วัคซีนล่วงหน้าที่ศีรษะและก้าน (รูปที่ 5A; Zarnitsyna et al. 2016) สำหรับแต่ละคน เราจะถือว่าระดับแอนติบอดีเริ่มต้นที่แตกต่างกันไปที่ศีรษะ (วงกลมสีแดง) และกับก้าน (สามเหลี่ยมสีน้ำเงิน) และเราเชื่อมโยงการตอบสนองที่คาดการณ์ไว้กับศีรษะและก้านในบุคคลที่กำหนดหลังการฉีดวัคซีนด้วยเส้น ผลลัพธ์ที่เพิ่มขึ้นสำหรับสภาวะเริ่มต้นที่แตกต่างกัน 10 แบบที่ผสมไทเทอร์แอนติบอดีเริ่มต้นสูงและต่ำสำหรับส่วนหัวและก้านจะแสดงขึ้น แบบจำลองพื้นฐานคาดการณ์ว่าการเพิ่มขึ้นจะไม่ขึ้นอยู่กับระดับภูมิคุ้มกันที่มีอยู่ ดังนั้น เส้นทั้งหมดจึงเป็นแนวนอนและมีความสูงเท่ากัน แบบจำลอง ACM คาดการณ์ว่าการกวาดล้างแอนติเจนจะส่งผลต่อการตอบสนองของศีรษะและลำต้นเท่ากัน เนื่องจากการจับกันของแอนติบอดีกับอีพิโทปจะกำจัดแอนติเจนทั้งหมดออก ดังนั้น เส้นจะขนานกัน และความสูงของเส้นเหล่านี้ถูกกำหนดโดยไทเทอร์ของแอนติบอดีที่มีอยู่แล้วทั้งหมดในแต่ละราย ในแบบจำลอง FIM การจับกันของสารเชิงซ้อนของแอนติบอดี-แอนติเจน (ผ่านส่วน Fc ของแอนติบอดี) กับ Fc RIIB บนเซลล์ B นำไปสู่การยับยั้งการกระตุ้นบีเซลล์โดยไม่คำนึงถึงความจำเพาะของอีพิโทป แบบจำลอง FIM คาดการณ์ว่าแอนติบอดีที่มีอยู่แล้วต่อเอพิโทปทั้งสองจะส่งผลต่อการสร้างการตอบสนองต่อทั้งส่วนหัวและก้านของ HA ในทำนองเดียวกัน ดังนั้น เส้นของแต่ละบุคคลจึงอยู่ในแนวนอน แบบจำลอง EMM เสนอว่าภูมิคุ้มกันที่มีอยู่แล้วส่งผลต่อการตอบสนองต่ออีพิโทปที่จับกับแอนติบอดีเท่านั้น และการตอบสนองที่จำเพาะต่อส่วนหัวและลำต้นสามารถเสริมด้วยปริมาณที่ต่างกัน ขึ้นอยู่กับไทเทอร์ของแอนติบอดีที่ได้รับวัคซีนล่วงหน้า แอนติบอดีที่มีอยู่ก่อนหน้ากับอีพิโทปที่กำหนดจะส่งผลให้เกิดการปกปิดมากขึ้นและการตอบสนองต่ออีพิโทปนั้นน้อยลง และแบบจำลอง EMM คาดการณ์ว่าเส้นที่เชื่อมต่อการตอบสนองกับส่วนหัวและลำต้นสำหรับบุคคลทั้งหมดจะตกลงไปตามแนวทแยงด้วยความชันเป็นลบ ตอนนี้เราเปรียบเทียบการคาดการณ์ของแบบจำลองกับข้อมูลจากการศึกษาวัคซีน 3 ครั้งที่บุคคลได้รับการฉีดวัคซีน HA จาก H1N1 และ H5N1 (ข้อมูลในรูปที่ 3) ข้อมูลการทดลองได้รับการวิเคราะห์ซ้ำเพื่อสร้างการพล็อตที่คล้ายกับข้อมูลในรูปที่ 5A โดยการเชื่อมต่อการตอบสนองของแอนติบอดีกับส่วนหัวและก้านของ HA ด้วยเส้นสำหรับแต่ละบุคคล สำหรับการศึกษาการฉีดวัคซีนทั้งสามกรณี เส้นที่เชื่อมต่อการตอบสนองของศีรษะและก้านในแต่ละบุคคล (เส้นบาง) และเส้นเฉลี่ยที่ใช้ข้อมูลทั้งหมด (เส้นหนา) จะแสดงในรูปที่ 5B เราพบว่าค่าเฉลี่ยของความชันจากเส้นบางๆ ของแต่ละบุคคล (ไม่แสดงไว้) แตกต่างจากศูนย์อย่างมีนัยสำคัญ สิ่งนี้ชี้ให้เห็นว่าการตอบสนองต่อศีรษะและก้านเพิ่มขึ้นเป็นระดับที่แตกต่างกันในแต่ละคน ดังนั้น จึงไม่สอดคล้องกับแบบจำลอง ACM และ FIM ซึ่งคาดการณ์ว่าการยับยั้งการตอบสนองเฉพาะศีรษะและก้านจะคล้ายกัน ในทางตรงกันข้าม ความชันโดยเฉลี่ยไม่แตกต่างอย่างมีนัยสำคัญจากความชันของความพอดีกับข้อมูลทั้งหมด (เส้นหนา) ที่รองรับโมเดล EMM

cistanche tubulosa-ปรับปรุงระบบภูมิคุ้มกัน

แบบจำลอง EMM สันนิษฐานว่าการตอบสนองต่อส่วนหัวและก้านของ HA นั้นถูกสร้างขึ้นอย่างอิสระ และไทเทอร์ที่มีอยู่แล้วที่ส่วนหัวจะไม่ส่งผลต่อการเพิ่มแอนติบอดีต่อก้าน (และในทางกลับกัน) เราอยากจะทราบว่าในการศึกษาการฉีดวัคซีนทั้งสามเรื่องที่พิจารณา ระดับเริ่มต้นของแอนติบอดีต่อส่วนหัวใหม่ค่อนข้างต่ำ ในกรณีนี้ เราไม่คาดหวังว่าจะมีการรบกวนระหว่างแอนติบอดีและบีเซลล์ที่จับกับเอพิโทปบนศีรษะด้วยการเพิ่มการตอบสนองต่ออีพิโทปบนก้านของ HA และเราไม่พบความสัมพันธ์ที่มีนัยสำคัญระหว่างไทเทอร์เริ่มต้นของส่วนหัว แอนติบอดีจำเพาะและการเพิ่มการพับของแอนติบอดีจำเพาะต้นกำเนิดในการศึกษาเหล่านี้ อย่างไรก็ตาม ข้อสันนิษฐานนี้อาจไม่เป็นจริงในกรณีของแอนติบอดีจำเพาะต่อศีรษะที่มีอยู่แล้วในระดับสูง และการมีส่วนร่วมของกลไกต่างๆ ที่อธิบายโดยแบบจำลอง ACM, FIM และ EMM ในการตอบสนองการเรียกคืนในสถานการณ์ที่แตกต่างกัน ตัวอย่างเช่น หลังจากการฉีดวัคซีนตามฤดูกาลซ้ำหลายครั้ง หรือ การติดเชื้อยังไม่สามารถระบุได้

การตอบสนองของแอนติบอดีต่อต้นกำเนิดของฮาในช่วงไพรม์และการกระตุ้นการฉีดวัคซีน H5N1

คำถามหนึ่งที่เหลืออยู่คือเหตุใดการตอบสนองต่อก้านของ HA จึงเพิ่มขึ้นในระหว่างการฉีดวัคซีนหลัก แต่ไม่ใช่การฉีดวัคซีนรองด้วย H5N1 (Ellebedy และคณะ 2014, 2020) เราใช้การศึกษาวัคซีน H5N1 แบบเสริมเป็นตัวอย่าง เนื่องจากการศึกษานี้ให้การตอบสนองโดยรวมที่แข็งแกร่งยิ่งขึ้น รูปที่ 6 แสดงการเพิ่มขึ้นเท่าตัวของแอนติบอดีต่อก้านของ HA เทียบกับไทเทอร์ก่อนการฉีดวัคซีนสำหรับทั้งการฉีดวัคซีนไพรม์และบูสต์ด้วย H5N1 แบบเสริม ระดับแอนติบอดีเริ่มต้นที่ก้านก่อนการฉีดวัคซีนหลักต่ำกว่าเมื่อเปรียบเทียบกับระดับแอนติบอดีเริ่มต้นก่อนการฉีดวัคซีนครั้งที่สอง และอาจอธิบายการเพิ่มขึ้นของการพับที่ค่อนข้างมากในระหว่างการฉีดวัคซีนหลักและการเพิ่มขึ้นที่จำกัดระหว่างการฉีดวัคซีนครั้งที่สอง ซึ่งคล้ายกับการตอบสนองของวัคซีนประจำปีและวัคซีนที่ข้ามไปที่แสดงในรูปที่ 2 ซึ่งบุคคลที่ได้รับการฉีดวัคซีนเมื่อเร็วๆ นี้และมีระดับแอนติบอดีที่มีอยู่แล้วสูงกว่าจะลดการเพิ่มการพับของระดับแอนติบอดี

การอภิปราย

ไข้หวัดใหญ่เป็นเชื้อโรคที่แสดงออกถึงสายพันธุ์ที่หลากหลาย สิ่งนี้ทำให้สามารถแพร่เชื้อไปยังบุคคลได้หลายครั้ง ในแต่ละครั้งจะกำหนดและปรับความจำภูมิคุ้มกันจำเพาะของไข้หวัดใหญ่ เป็นผลให้ระดับภูมิคุ้มกันต่อไข้หวัดใหญ่ในมนุษย์สูงอย่างน่าทึ่ง โดย MBCs เฉพาะไข้หวัดใหญ่โดยทั่วไปจะประกอบด้วยอย่างน้อย 1% ของ MBCs ที่หมุนเวียนทั้งหมด ซึ่งสูงกว่าความถี่ของ MBC ที่จำเพาะต่อแอนติเจนของวัคซีนในวัยเด็กที่ใช้กันทั่วไปอื่นๆ อย่างมีนัยสำคัญ (รูปที่ 1) แม้ว่าภูมิคุ้มกันที่ได้รับจะมีระดับสูง แต่การตอบสนองทางภูมิคุ้มกันต่อเอพิโทปที่สงวนไว้บนไวรัสนั้นไม่เพียงพอที่จะป้องกันการติดเชื้อใหม่ ที่นี่ เราวิเคราะห์การศึกษาเกี่ยวกับวัคซีน 3 เรื่องซึ่งมีการเพิ่มภูมิคุ้มกันต่อไข้หวัดใหญ่ด้วยสายพันธุ์โรคระบาดใหม่ โดยมีเป้าหมายเพื่อทำความเข้าใจว่าภูมิคุ้มกันที่มีอยู่แล้วปรับเปลี่ยนการตอบสนองของแอนติบอดีต่อเอพิโทปอนุรักษ์บนก้านของ HA ได้อย่างไร ภูมิคุ้มกันที่มีอยู่ก่อนนั้นรวมทั้งเซลล์หน่วยความจำ B และแอนติบอดี และแม้ว่าความถี่ที่เพิ่มขึ้นของเซลล์หน่วยความจำ B อาจเป็นประโยชน์ต่อการตอบสนองทุติยภูมิ แต่การตอบรับเชิงลบจากแอนติบอดีอาจจำกัดการตอบสนองดังกล่าว เราพบว่าบุคคลที่มีระดับแอนติบอดีต่อปฏิกิริยาข้ามที่มีปฏิกิริยาสูงอยู่แล้วจะมีการตอบสนองที่มีขนาดต่ำกว่าต่อการฉีดวัคซีนโดยมีการตอบสนองต่อการเรียกคืนที่ลดลง แม้ว่าความถี่ MBC ที่กำหนดไว้ล่วงหน้าในระดับสูง (รูปที่ 1 และ 2) การใช้แบบจำลองทางคณิตศาสตร์ เราวิเคราะห์การมีส่วนร่วมของปัจจัยต่างๆ เช่น ความถี่ MBC, การไตเตรทของแอนติบอดีก่อนการฉีดวัคซีน, การกวาดล้างแอนติเจนที่เพิ่มขึ้นที่จับกับแอนติบอดีเมื่อเปรียบเทียบกับแอนติเจนอิสระ, การยับยั้งการกระตุ้นการทำงานของ B-cell ผ่านการจับกันของคอมเพล็กซ์ภูมิคุ้มกันของแอนติบอดี-แอนติเจนกับตัวรับที่ยับยั้ง บนเซลล์บี และอีพิโทปมาส์กบนแอนติเจนด้วยแอนติบอดีเพื่อจำการตอบสนองหลังการฉีดวัคซีน (ดูแผนผังแบบจำลองในรูปที่ 4)

รูปที่ 6 การเพิ่มการตอบสนองของแอนติบอดีต่อต้นกำเนิดของ HA ระหว่างการฉีดวัคซีนไพรม์ด้วยวัคซีน H5N1 แบบเสริม และการขาดการกระตุ้นหลังการฉีดวัคซีนเสริม สามเหลี่ยมเติมเต็มและสามเหลี่ยมเปิดเป็นการตอบสนองต่อก้านของ HA หลังจากการฉีดวัคซีนไพรม์และบูสต์ตามลำดับ ภูมิคุ้มกันก่อนการฉีดวัคซีนจะลดการกระตุ้น และความสัมพันธ์จะเป็นเส้นตรงโดยประมาณบนพล็อตบันทึกล็อก (รูปที่สร้างจากข้อมูลใน Ellebedy และคณะ 2020)

ในกรณีของการตอบสนองเบื้องต้นต่อเชื้อไข้หวัดใหญ่สายพันธุ์ใหม่ เช่น สายพันธุ์ H1N1 ที่เกิดการระบาดใหญ่ในปี 2009 หรือสายพันธุ์ H5N1 ที่มีความหลากหลายสูง มีแอนติบอดีไทเทอร์ที่มีอยู่แล้วต่ำและความถี่ MBC เฉพาะต้นกำเนิด HA แบบข้ามปฏิกิริยาที่สร้างไว้ล่วงหน้าที่สูงกว่าเมื่อเปรียบเทียบกับ HA เฉพาะศีรษะ MBC ดังนั้น เพื่อตอบสนองต่อการติดเชื้อเบื้องต้นหรือการฉีดวัคซีนด้วยสายพันธุ์ใหม่เหล่านี้ จึงมีการตอบสนองการเรียกคืนที่แข็งแกร่งของแอนติบอดีจำเพาะต่อต้นกำเนิด HA แบบ crossreactive น่าประหลาดใจที่เมื่อสัมผัสกับสายพันธุ์ H5N1 ครั้งที่สอง การตอบสนองของแอนติบอดีจะเบ้ไปทางอีพิโทปของส่วนหัว HA เป็นหลักมากกว่าอีพิโทปของก้าน HA (รูปที่ 3 และ 5) เราตั้งสมมติฐานว่านี่เป็นเพราะระดับแอนติบอดีต่อแอนติบอดีต่อต้นกำเนิด HA ที่มีอยู่ก่อนหน้าสูงในเวลาของการฉีดวัคซีนทุติยภูมิ (รูปที่ 5C) และสำรวจกลไกที่แตกต่างกันสามประการที่อาจนำไปสู่การลดการตอบสนองโดยใช้แบบจำลองทางคณิตศาสตร์อย่างง่าย (รูปที่ 4 และ 5). เราพบว่าโมเดลการมาสก์อีพิโทปสรุปข้อมูลได้ใกล้เคียงที่สุดในสถานการณ์ของการตอบสนองต่อสายพันธุ์ใหม่ของการแพร่ระบาด เราสังเกตว่ากลไกที่พิจารณาอื่น ๆ เช่นการกวาดล้างแอนติเจนที่ปรับปรุงแอนติบอดีและการยับยั้งการกระตุ้น B-cell โดยการกระตุ้นตัวรับการยับยั้งบนเซลล์ B โดยคอมเพล็กซ์แอนติเจนและแอนติบอดี อาจกำหนดการตอบสนองการเรียกคืนเป็นส่วนใหญ่ในสถานการณ์ต่าง ๆ ของการฉีดวัคซีนและการติดเชื้อ ความจริงที่ว่าการตอบสนองของแอนติบอดีนั้นเบ้ไปทางความจำเพาะที่ไม่แพร่หลายในกลุ่มแอนติบอดี ณ เวลาของการฉีดวัคซีน H5N1 ทุติยภูมิอาจเป็นผลลัพธ์ที่เป็นประโยชน์ของการมาสก์อีพิโทปในขณะที่มันขยายรายการภูมิคุ้มกัน

เราใช้แบบจำลองสองเอพิโทปแบบธรรมดาโดยมีหนึ่งเอพิโทปบนศีรษะและหนึ่งเอพิโทปบนก้านของ HA เพื่อคาดการณ์การเลือกปฏิบัติของแบบจำลอง เป็นที่ยอมรับกันว่า HA มีเอพิโทปหลายอันบนหัวและมีเอพิโทปบนก้านน้อยกว่า (Caton et al. 1982; Das et al. 2013) การรวมเอพิโทปหลายตัวไว้บนส่วนหัวของ HA เข้ากับแบบจำลองจะต้องพิจารณาถึงการรบกวนแบบสเตอริก การรบกวนแบบสเตริกเกิดขึ้นจากขนาดที่เทียบเคียงได้ของ HA และโมเลกุลแอนติบอดี และความใกล้ชิดของเอพิโทปของส่วนหัว ก่อนหน้านี้การรบกวนของ Steric ได้รับการเสนอในบริบทของประสิทธิภาพการวางตัวเป็นกลางของ epitopes (Ndifon et al. 2009) และได้รับการสนับสนุนจากการศึกษาปริมาณสัมพันธ์ของการจับกันของแอนติบอดีต่อหัวของ HA บนไวรัสที่ไม่บุบสลาย (Taylor et al. 1987; เทย์เลอร์และดิมม็อค 1994) เราสามารถแนะนำพารามิเตอร์ที่กำหนดการแทรกแซงแบบสเตอริก เพื่อให้แอนติบอดีที่จับกับอีพิโทปของส่วนหัวไม่เพียงแต่ปิดกั้นการจับของแอนติบอดีเพิ่มเติมหรือตัวรับ Bcell กับอีพิโทปเดียวกันเท่านั้น แต่ยังยับยั้งการจับกับอีพิโทปใกล้เคียงบนส่วนหัวของ HA อีกด้วย เราได้แสดงให้เห็นว่าแบบจำลองหลายรายการที่มี epitopes เพิ่มเติมบนส่วนหัวของ HA และพิจารณาการรบกวนแบบ steric ระหว่าง epitopes บนศีรษะ สร้างไดนามิกและการทำนายที่คล้ายกับแบบจำลองสอง epitope ที่แสดงในรูปที่ 5 (Zarnitsyna et al. 2016) . ในการศึกษาที่อธิบายไว้ที่นี่ แอนติบอดีจำเพาะต่อศีรษะที่มีอยู่ก่อนหน้านี้มีค่าต่ำในขณะที่ฉีดวัคซีน เนื่องจากทั้ง H1N1 และ H5N1 เป็นสายพันธุ์ระบาดใหม่ เนื่องจากไม่มีความสัมพันธ์กันระหว่างการไตเตรทแอนติบอดีที่มีอยู่แล้วกับก้านและการเพิ่มการพับของแอนติบอดีที่ส่วนหัว นี่แสดงให้เห็นว่าแอนติบอดีไทเทอร์เฉพาะต้นกำเนิดไม่ส่งผลกระทบต่อการสร้างการตอบสนองต่อส่วนหัวของ HA (Zarnitsyna et al. 2016) . ในกรณีของสายพันธุ์ที่ลอยไปตามฤดูกาล เราคาดว่าระดับภูมิคุ้มกันที่มีอยู่แล้วที่ส่วนหัวของ HA จะสูงขึ้น และแอนติบอดีจำเพาะของศีรษะอาจรบกวนการจับยึดของ B-cell กับก้านเนื่องจากการขัดขวางทางสเตียรอยด์ วิธีการสร้างแบบจำลองของเราสามารถขยายออกไปได้อย่างง่ายดายเพื่อพิจารณาการแทรกแซงสเตอริกแบบไม่สมมาตร ซึ่งแอนติบอดีของศีรษะสามารถยับยั้งการสร้างแอนติบอดีต้นกำเนิดได้ แต่ไม่ใช่ในทางกลับกัน เมื่อมีข้อมูลการทดลองที่เกี่ยวข้อง สิ่งนี้จะช่วยให้เราสามารถประเมินบทบาทที่เป็นไปได้ของการรบกวน steric แบบไม่สมมาตรในการเพิ่มไทเทอร์แอนติบอดีที่ทำปฏิกิริยากับต้นกำเนิดในระหว่างสถานการณ์ต่าง ๆ ของการสร้างภูมิคุ้มกันหรือการติดเชื้อด้วยสายพันธุ์ที่ลอยไปทางแอนติเจน

cistanche tubulosa-ปรับปรุงระบบภูมิคุ้มกัน

แม้ว่าการเพิ่มระดับแอนติบอดีในการตอบสนองต่อการฉีดวัคซีนจะต่ำมากในผู้รับการทดลองที่ได้รับวัคซีนไข้หวัดใหญ่ตามฤดูกาลที่ได้รับการฉีดวัคซีนซ้ำแล้วซ้ำอีก รวมถึงปีก่อนการศึกษา (รูปที่ 2) แต่การฉีดวัคซีนประจำปีให้ประโยชน์ที่สำคัญ ตัวอย่างเช่น สิ่งสำคัญคืออย่ามองข้ามความจริงที่ว่า แม้ว่าการตอบสนองของผู้ป่วยที่ถูกข้ามวัคซีนจะเพิ่มขึ้น แต่ระดับระดับหลังการฉีดวัคซีนก็ยังไม่เกินระดับของวัคซีนที่ได้รับการฉีดวัคซีนในปีที่แล้ว นอกจากนี้ แม้ว่าการตอบสนองการเรียกคืนหน่วยความจำดูเหมือนจะถูกจำกัดในวัคซีนซ้ำที่มีไทเทอร์แอนติบอดีแบบ cross-reactive ที่มีอยู่แล้วสูง แต่ก็ไม่ได้ตัดความเป็นไปได้ที่ความจำเพาะของแอนติบอดีจำเพาะต่อสายพันธุ์ใหม่จะถูกกระตุ้นโดยการฉีดวัคซีน เนื่องจากขนาดของความจำเพาะของแอนติบอดีแบบใหม่ที่ได้มาจากเซลล์ B ไร้เดียงสานั้นน่าจะมีระดับไทเทอร์ที่ต่ำกว่าอย่างมีนัยสำคัญเมื่อเทียบกับไทเทอร์แอนติบอดีที่มีปฏิกิริยาข้ามที่มีปฏิกิริยาสูงที่มีอยู่แล้ว สิ่งนี้อาจไม่เพิ่มไทเทอร์โดยรวมอย่างมาก แต่อาจยังคงมีความเกี่ยวข้องทางภูมิคุ้มกันในกรณีของไวรัส ท้าทาย. แม้ว่าจะมีความสัมพันธ์เชิงลบที่แข็งแกร่งระหว่างไทเทอร์แอนติบอดีที่มีอยู่ก่อนหน้าและขนาดของการเพิ่มของไทเทอร์แอนติบอดีแบบปฏิกิริยาข้าม แต่อาจมีการขยายตัวของความจำเพาะของแอนติบอดีใหม่ในศูนย์เชื้อโรค ดังนั้นการฉีดวัคซีนซ้ำอาจส่งผลกระทบและปรับปรุงประสิทธิภาพของระบบภูมิคุ้มกันโดยรวม การเพิ่มแอนติบอดีต่อสเต็มเซลล์ HA อย่างจำกัดหลังการฉีดวัคซีน H5 ครั้งที่สองและการปรับขนาดแอนติบอดีในผู้ที่ได้รับวัคซีนซ้ำทำให้เกิดคำถามเกี่ยวกับขีดจำกัดของการเพิ่มแอนติบอดีต่อปฏิกิริยาข้าม แบบจำลองการมาสก์ของอีพิโทปทำนายว่าการเพิ่มปริมาณแอนติเจนอาจเอาชนะการเพิ่มแอนติบอดีอย่างจำกัด เนื่องจากการปกปิดอีพิโทปบนแอนติเจนโดยแอนติบอดีที่มีอยู่แล้ว (Zarnitsyna et al. 2016) กลยุทธ์เพิ่มเติม เช่น การรวมแอดจูแวนต์ แพลตฟอร์มวัคซีนใหม่ หรืออิมมูโนเจนชนิดใหม่ น่าจะจำเป็นสำหรับการเพิ่มระดับไทเทอร์ของแอนติบอดีที่มีปฏิกิริยาข้ามในวงกว้างเพิ่มเติม

ข้อมูลอ้างอิง

Albrecht P, Ennis FA, Saltzman EJ, Krugman S. 1977. การคงอยู่ของแอนติบอดีของมารดาในทารกที่เกิน 12 เดือน: กลไกของความล้มเหลวของวัคซีนโรคหัด เจกุมาร 91: 715–718 ดอย:10.1016/S0022-3476(77)81021-4

Bodewes R, de Mutsert G, van der Klis FR, Ventresca M, Wilks S, Smith DJ, Koopmans M, Fouchier RA, Osterhaus AD, ริมเมลซวาน GF 2554. ความชุกของแอนติบอดีต่อไวรัสไข้หวัดใหญ่ตามฤดูกาล A และ B ในเด็กในประเทศเนเธอร์แลนด์ วัคซีนคลิน อิมมูนอล 18: 469–476 ดอย:10.1128/CVI.00396-10

Caton AJ, Brownlee GG, Yewdell JW, Gerhard W. 1982 โครงสร้างแอนติเจนของไวรัสไข้หวัดใหญ่ A/PR/8/34 hemagglutinin (ชนิดย่อย H1) เซลล์ 31: 417–427 ดอย:10.1016/ 0092-8674(82)90135-0

ศูนย์ควบคุมและป้องกันโรค (CDC) 2552. การตอบสนองของแอนติบอดีต่อปฏิกิริยาข้ามซีรั่มต่อไวรัสไข้หวัดใหญ่ชนิด A (H1N1) หลังการฉีดวัคซีนไข้หวัดใหญ่ตามฤดูกาล MMWR Morb ตัวแทนประจำสัปดาห์ 58: 521– 524

ดาส เอสอาร์, เฮนสลีย์ เอสอี, อินซ์ ดับเบิลยูแอล, บรูค ซีบี, ซับบา เอ, เดลบอย เอ็มจี, รัส จี, กิ๊บส์ เจเอส, เบนนิงค์ เจอาร์, ยิวเดลล์ เจดับบลิว 2556. การนิยามการเคลื่อนตัวของแอนติเจนของฮีแม็กกลูตินินของไวรัสไข้หวัดใหญ่ A โดยการเลือกโมโนโคลนอลแอนติบอดีตามลำดับ. จุลินทรีย์โฮสต์ของเซลล์ 13: 314–323 ดอย:10.1016/j.chom.2013.02.008

Davis CW, Jackson KJL, McCausland MM, Darce J, Chang C, Linderman SL, Chennareddy C, Gerkin R, Brown SJ, Wrammert J, และคณะ 2020. เซลล์พลาสมาไขกระดูกของมนุษย์ที่เกิดจากวัคซีนไข้หวัดใหญ่จะลดลงภายในหนึ่งปีหลังการฉีดวัคซีน วิทยาศาสตร์ (ในสื่อ)

ด๊าด MB, บลูม เจดี. 2559. การวัดผลกระทบของการกลายพันธุ์ของกรดอะมิโนทั้งหมดต่อฮีแม็กกลูตินินไข้หวัดใหญ่อย่างแม่นยำ ไวรัส 8:155.

Eberhardt CS, Wieland A, Nasti TH, Grifoni A, Wilson E, Schmid DS, Pulendran B, Sette A, Waller EK, Rouphael N และอื่นๆ 2020. การคงอยู่ของเซลล์พลาสมาจำเพาะของไวรัส varicella-zoster ในไขกระดูกมนุษย์ที่โตเต็มวัยหลังการฉีดวัคซีนในวัยเด็ก เจ วิโรล 94. doi:10.1128/JVI .02127-19

Eisen HN, Little JR, Steiner LA, Simms ES, Grey W. 1969 ความเสื่อมในการตอบสนองของระบบภูมิคุ้มกันทุติยภูมิ: การกระตุ้นการสร้างแอนติบอดีโดยแอนติเจนที่ทำปฏิกิริยาข้าม Isr J Med วิทย์ 5: 338–351

Ellebedy AH, Krammer F, Li GM, Miller MS, Chiu C, Wrammert J, Chang CY, Davis CW, McCausland M, Elbein R, และคณะ 2014 การเหนี่ยวนำการตอบสนองของแอนติบอดีแบบ cross-reactive ในวงกว้างต่อบริเวณต้นกำเนิดไข้หวัดใหญ่ HA หลังการฉีดวัคซีน H5N1 ในมนุษย์ Proc Natl Acad วิทย์ 111: 13133– 13138 ดอย:10.1073/pnas.1414070111

Ellebedy AH, Jackson KJL, Kissick HT, Nakaya HI, Davis CW, Roskin KM, McElroy AK, Oshansky CM, Elbein R, Thomas S, และคณะ 2559. การกำหนดพลาสมาบลาสต์ที่จำเพาะต่อแอนติเจนและชุดย่อยของเซลล์หน่วยความจำ B ในเลือดหลังการติดเชื้อไวรัสและการฉีดวัคซีนของมนุษย์ แนท อิมมูนอล 17: 1226–1234

Ellebedy AH, Nachbagauer R, Jackson KJL, Dai YN, Han J, อัลซูสซี WB, Davis CW, Stadlbauer D, Rouphael N, Chromikova V, และคณะ 2020. วัคซีนป้องกันไข้หวัดใหญ่ H5N1 ชนิดเสริมช่วยเพิ่มทั้งการตอบสนองของเซลล์บีเซลล์หน่วยความจำแบบปฏิกิริยาข้ามและการตอบสนองของเซลล์บีไร้เดียงสาจำเพาะความเครียดในมนุษย์ Proc Natl Acad วิทย์ 117: 17957–17964 ดอย:10.1073/pnas .1906613117

Francis T Jr. 1955. สถานะปัจจุบันของการควบคุมโรคไข้หวัดใหญ่ แอนแพทย์ฝึกหัด 43: 534–538 ดอย:10.7326/ 0003-4819-43-3-534

ฟรานซิส ที. 1960. ว่าด้วยหลักคำสอนเรื่องบาปที่เกิดจากแอนติเจนดั้งเดิม พรอค แอม ฟิลอส ซ็อค 104: 572–578

นอสติก KM, แอมโบรส เอ็ม, วูโรบี เอ็ม, ลอยด์-สมิธ JO 2559. การป้องกันโรคไข้หวัดใหญ่สายพันธุ์ H5N1 และ H7N9 ได้อย่างมีประสิทธิภาพด้วยการพิมพ์เฮแม็กกลูตินินในวัยเด็ก. วิทยาศาสตร์ 354: 722– 726 ดอย:10.1126/science.aag1322

นอสติก KM, บริดจ์ อาร์, เบรดี้ เอส, วิบูด ซี, วูโรบี เอ็ม, ลอยด์-สมิธ JO 2019 ภูมิคุ้มกันในวัยเด็กที่ทำให้เกิดโรคไข้หวัดใหญ่ชนิด A ก่อให้เกิดความเสี่ยงเฉพาะปีเกิดในระหว่างการแพร่ระบาดของโรคไข้หวัดนก H1N1 และ H3N2 ตามฤดูกาล กรุณา Pathog 15: e1008109. ดอย:10.1371/journal.ppat.1008109

Halasa NB, Gerber MA, Chen Q, ไรท์ PF, Edwards KM. 2551. ความปลอดภัยและภูมิคุ้มกันของวัคซีนไข้หวัดใหญ่ชนิดไตรวาเลนต์เชื้อตายในทารก. เจติดเชื้อโรค 197: 1448–1454 ดอย:10.1086/587643

Hancock K, Veguilla V, Lu X, Zhong W, บัตเลอร์ EN, Sun H, Liu F, Dong L, DeVos JR, Gargiullo PM, และคณะ 2552. การตอบสนองของแอนติบอดีแบบ Crossreactive ต่อไวรัสไข้หวัดใหญ่สายพันธุ์ H1N1 ประจำปี 2552 N Engl J Med 361: 1945–1952 ดอย:10 .1056/NEJMoa0906453

อิมพาเลียซโซ เอ, มิลเดอร์ เอฟ, ไคเปอร์ส เอช, วากเนอร์ เอ็มวี, จู เอ็กซ์, ฮอฟฟ์แมน อาร์เอ็ม, ฟาน เมียร์สเบอร์เกน อาร์, ฮุยซิงห์ เจ, ว่านนิ่งเกน พี, แวร์สไปยจ์ เจ และอื่นๆ 2558. ก้านเฮแม็กกลูตินินไข้หวัดใหญ่ชนิดไตรเมอริกที่มีความเสถียรเป็นภูมิคุ้มกันในวงกว้าง วิทยาศาสตร์ 349: 1301–1306 ดอย:10.1126/science.aac7263

คาเนกิโย เอ็ม, เหว่ย ซีเจ, ยัสซีน HM, แม็คแทมนีย์ พีเอ็ม, บอยิงตัน เจซี, วิทเทิล เจอาร์, ราโอ เอสเอส, คง ดับเบิลยูพี, วัง แอล, นาเบล จีเจ 2013. วัคซีนไข้หวัดใหญ่ขนาดนาโนที่ประกอบเองสามารถกระตุ้นแอนติบอดี H1N1 ในวงกว้างได้ในวงกว้าง ธรรมชาติ 499: 102–106 ดอย:10.1038/nature12202

Krammer F, Pica N, Hai R, Margine I, Palese P. 2013. วัคซีนป้องกันไข้หวัดใหญ่ชนิด Chimeric hemagglutinin สร้างแอนติบอดีจำเพาะต่อก้านป้องกันในวงกว้าง เจวิโรล 87: 6542–6550 ดอย:10.1128/JVI.00641-13