สารยับยั้งฟาร์เนซิลทรานสเฟอเรส LNK-754 ลดทอนภาวะเสื่อมของแอกซอนและลดพยาธิสภาพของอะไมลอยด์ในหนูส่วนที่ 2

การถ่ายภาพสดของเซลล์ประสาท

สำหรับการทดลองการถ่ายภาพสด เซลล์ประสาทถูกเตรียมดังข้างต้นและชุบในจานก้นแก้วขนาด 35 มม. (MatTek # P35G-1.5-14C) เป็นเวลา 7 วันในการเพาะเลี้ยง จากนั้น 10 นาโนโมลาร์ LNK-754 หรือโลนาฟาร์นิบถูกเติมไปยังอาหารเลี้ยงเชื้อที่มีการปรับสภาพ การเพาะเลี้ยงกลุ่มควบคุมได้รับการปฏิบัติด้วย DMSO ในฐานะพาหะนำ หลังการรักษา 48 ชั่วโมง สารสื่อจะถูกแทนที่ด้วยสื่อปรับสภาพจากแผ่นเซลล์ประสาทคู่ขนานที่ไม่ผ่านการบำบัด 25nM ของ LysoTracker-Green DND-26 (#L7526, Invitrogen) ถูกเพิ่มไปยังสื่อที่มีการปรับสภาพ และเซลล์ประสาทถูกบ่มเป็นเวลา 30 นาทีที่ 37 องศา

เซลล์ประสาทเป็นส่วนสำคัญของระบบประสาท สามารถรับ ประมวลผล และส่งข้อมูล และเป็นพื้นฐานสำคัญของความฉลาดและพฤติกรรมของมนุษย์ ภูมิคุ้มกันเป็นการรับประกันที่สำคัญสำหรับร่างกายมนุษย์ในการต้านทานโรค สามารถระบุและทำลายเชื้อโรคและเซลล์ที่ผิดปกติและรักษาสุขภาพของร่างกายได้

การวิจัยแสดงให้เห็นว่ามีความสัมพันธ์กันอย่างมากระหว่างเซลล์ประสาทและระบบภูมิคุ้มกัน เซลล์ประสาทอาจส่งผลต่อระบบภูมิคุ้มกันโดยการปล่อยสารสื่อประสาทหลายชนิด เช่น นอเรพิเนฟริน เอพิเนฟริน เป็นต้น สารสื่อประสาทเหล่านี้สามารถเปลี่ยนการทำงานของเซลล์ภูมิคุ้มกัน เพิ่มการแพร่กระจายและการทำงานของเซลล์ภูมิคุ้มกัน และปรับปรุงภูมิคุ้มกันของร่างกาย ขณะเดียวกันระบบภูมิคุ้มกันยังสามารถส่งผลต่อการทำงานของเซลล์ประสาทผ่านวิถีทางต่างๆ เซลล์ภูมิคุ้มกันสามารถหลั่งไซโตไคน์และฮอร์โมนหลายชนิด ซึ่งส่งผลต่อการเจริญเติบโต การพัฒนา และการทำงานของเซลล์ประสาทผ่านทางวิถีภูมิคุ้มกัน

นอกจากนี้ปัจจัยทางจิตวิทยาและสังคมสามารถมีอิทธิพลต่อภูมิคุ้มกันและการทำงานของเส้นประสาทได้ อารมณ์เชิงลบ เช่น ความเครียด ความวิตกกังวล และภาวะซึมเศร้า อาจส่งผลเสียต่อระบบภูมิคุ้มกันและเซลล์ประสาท ส่งผลให้ภูมิคุ้มกันของร่างกายลดลง อารมณ์เชิงบวก ความสัมพันธ์ทางสังคมเชิงบวก และวิถีชีวิตที่ดีต่อสุขภาพสามารถส่งเสริมการพัฒนาภูมิคุ้มกันและเซลล์ประสาทให้แข็งแรงได้

โดยสรุป มีความสัมพันธ์แบบโต้ตอบและสนับสนุนซึ่งกันและกันระหว่างเซลล์ประสาทและภูมิคุ้มกัน การรักษาสุขภาพจิต การเผชิญกับชีวิตเชิงบวก และการใช้ชีวิตที่ดีสามารถส่งเสริมภูมิคุ้มกันของร่างกายและการพัฒนาเซลล์ประสาทให้แข็งแรงได้ จะเห็นได้ว่าเราต้องปรับปรุงความจำของเรา Cistanche Deserticola สามารถปรับปรุงความจำได้อย่างมาก เนื่องจาก Cistanche Deserticola ยังสามารถควบคุมความสมดุลของสารสื่อประสาท เช่น การเพิ่มระดับอะซิติลโคลีนและปัจจัยการเจริญเติบโต สารเหล่านี้มีความสำคัญมากต่อความจำและการเรียนรู้ นอกจากนี้ เนื้อสัตว์ยังช่วยเพิ่มการไหลเวียนของเลือดและส่งเสริมการส่งออกซิเจน ซึ่งช่วยให้สมองได้รับสารอาหารและพลังงานที่เพียงพอ ซึ่งจะช่วยเพิ่มความมีชีวิตชีวาและความทนทานของสมอง

คลิกรู้วิธีปรับปรุงการทำงานของสมอง

การถ่ายภาพแบบไทม์แลปส์ของเซลล์ประสาทดำเนินการโดยใช้กล้องจุลทรรศน์สนามกว้าง Ti2 การถ่ายภาพเริ่มทันทีที่ 30 นาทีและต่อเนื่องไม่เกิน 30 นาที 1- ภาพถูกถ่ายทุกนาที และถ่ายภาพพื้นที่แยก 20–30 จุดต่อจานภายใน 30 นาที การหาปริมาณระยะทางและความเร็วของอนุภาค LysoTracker และการวิเคราะห์ kymograph ดำเนินการโดยใช้ซอฟต์แวร์ NIS Elements และอธิบายไว้ในรายละเอียดด้านล่าง ในการทดลองแยกกัน มีการเพิ่ม 1μM Lysosensor-Green DND-189 (#L7535, Invitrogen) ลงในสื่อปรับอากาศ และถ่ายภาพเซลล์ประสาทที่มีชีวิตถ่ายไว้ไม่เกิน 15 นาทีโดยใช้กล้องจุลทรรศน์คอนโฟคอล Nikon A1 ที่มีวัตถุประสงค์ 60X (NA 1.4) และซอฟต์แวร์ NIS Elements

การถ่ายภาพเนื้อเยื่อสมองแบบสด

หนูเมาส์ 5XFAD อายุ {{0}} ตัวถูกฉีด ip ทุกวันเป็นเวลา 3 สัปดาห์และเมื่อการบำบัดเสร็จสิ้น หนูได้รับการดมยาสลบและกระจายไปด้วยสารละลายที่ประกอบด้วย 1M KCl, 1M MgCl2, 0.1mM ไคนูเรเนต , 0.01mM DL-2-อะมิโน-5-กรดฟอสโฟโนเพนตาโนอิก, กลูตาไธโอน 5mM, กลูโคส 25mM, NaCl 125mM, NaH2PO4 1.4mM และ NaHCO3 25mM

จากนั้น สมองจะถูกผ่าอย่างรวดเร็วใน ACSF ที่ให้ออกซิเจนเย็นจัดซึ่งมี KCl 2.5mM, NaCl 85mM, NaH2PO4 1.25mM, NaHCO3 25mM, {{10}}.5mM CaCl2, 4mM 4 MgCl2, ซูโครส 75mM, กลูโคส 25mM 50uM C6H7NaO6, 0.1mM ไคนูเรเนต, 0.01mM DL-2-อะมิโน-5-กรดฟอสโฟโนเพนตาโนอิกและ 5mM กลูตาไธโอน ชิ้นโคโรนาขนาด 300 ไมโครเมตรได้รับโดยใช้ไมโครโตมแบบสั่น Compresstome VF-200 (เครื่องมือที่แม่นยำ) และปล่อยให้พักเป็นเวลา 30 นาทีเพื่อนำกลับคืนที่ 32 องศาในสารละลาย ACSF ที่ให้ออกซิเจนซึ่งมี KCl 2.5 มิลลิโมลาร์ต่อไปนี้, NaCl 85 มิลลิโมลาร์, 1.25 มิลลิโมลาร์ NaH2PO4, NaHCO3 25 มิลลิโมลาร์, CaCl2 0.5 มิลลิโมลาร์, 4 มิลลิโมลาร์ 4 MgCl2, ซูโครส 75 มิลลิโมลาร์, กลูโคส 25 มิลลิโมลาร์, 50 มิลลิโมลาร์ C6H7NaO6, ไคนูเรเนต 0.1 มิลลิโมลาร์, 0.01 มิลลิโมลาร์ DL2-กรดอะมิโน-5-กรดฟอสโฟโนเพนทาโนอิก และกลูตาไธโอน 5 มิลลิโมลาร์

จากนั้น ชิ้นต่างๆ ถูกย้ายไปยังจานก้นแก้วขนาด 35 มม. (MatTek # P35G-1.5-14C) ที่มี ACSF ที่ให้ออกซิเจนด้วย 25nM LysoTracker-Green และการเจือจาง 1:10,000 ของ 1 มก./ มล. Tiazine Red (#S570435, Sigma Aldrich) ที่เหมือนกันกับ ACSF ที่ใช้ระหว่างช่วงพักฟื้น ความมีชีวิตของชิ้นได้รับการยืนยันโดยใช้การถ่ายภาพเนื้อเยื่อแบบไทม์แลปส์ ชิ้นถูกบ่มด้วย LysoTracker-Green และ Tiazine Red เป็นเวลา 15 นาทีที่อุณหภูมิห้อง จากนั้นบริเวณเปลือกสมองจะถูกถ่ายภาพทันทีในสารละลายเดียวกันที่ 32 องศา บนกล้องจุลทรรศน์คอนโฟคอล Nikon A1 ที่มีวัตถุประสงค์ 60X (NA 1.4) และซอฟต์แวร์ NIS Elements สำหรับ ไม่เกิน 30 นาที

การสกัดสมองและอิมมูโนล็อตติง

หนูถูกดมยาสลบโดยการฉีดไซลาซีนในช่องท้อง (15 มก./กก.) และคีตามีน (100มก./กก.) ผสมกับน้ำเกลือที่มีบัฟเฟอร์ฟอสเฟต (1XPBS) พร้อมด้วยฟีนิลเมทิลซัลโฟนิล ฟลูออไรด์ (20 มก./มล.) ลิวเพปติน (0.5 มก./ มล.), โซเดียมออร์โธวานาเดต (20 ไมโครโมลาร์) และไดไทโอไทรอิทอล (0.1 มิลลิโมลาร์) ตามด้วยการนำสมองออก บัฟเฟอร์ทั้งหมดที่ใช้สำหรับการสกัดโปรตีนประกอบด้วยค็อกเทลตัวยับยั้งโปรตีเอส III (#535140, มิลลิพอร์) และตัวยับยั้งหยุดฟอสฟาเตส (#78420, Thermo Fisher Scientific) เนื้อเยื่อซีกสมองถูกชั่งน้ำหนักและทำให้เป็นเนื้อเดียวกันด้วยตนเองโดยใช้โดนซ์โฮโมจีไนเซอร์ 1:10 (w/v) ใน 1XPBS

หลังการทำให้เป็นเนื้อเดียวกัน ไลซีนจะถูกปั่นแยกที่ 20,8{{10}}0 กรัม เป็นเวลา 30 นาทีที่ 4 องศา เศษส่วนที่ละลายได้ (ส่วนลอยเหนือตะกอน) ถูกกำจัดออก และเม็ดถูกแขวนลอยใหม่โดยการปิเปตในบัฟเฟอร์ของการวิเคราะห์กัมมันตภาพรังสี (RIPA) [50 มิลลิโมลาร์ ทริส, 0.15 โมลาร์ NaCl, 1% ออคทิลฟีนอกซีโพลีเอทอกซีเอทานอล (IGEPAL), 1 มิลลิโมลาร์ EDTA, 1 มิลลิโมลาร์ EGTA, 0.1 เปอร์เซ็นต์ SDS และ 0.5 % โซเดียม ดีออกซีโคเลตที่ pH8] เพื่อบ่มบนน้ำแข็งเป็นเวลา 30 นาที

ตัวอย่างถูกโซนิค (Misonix XL{{0}}) เป็นเวลา 20 วินาทีบนน้ำแข็ง จากนั้นปั่นแยกที่ 20,800 กรัม เป็นเวลา 30 นาที ที่ 4 องศา เศษส่วนที่ละลายได้ของ RIPA (ส่วนลอยเหนือตะกอน) ถูกนำออก และเม็ดถูกแขวนลอยใหม่ในกัวนิดีน 5 โมลาร์ (pH 8.0) สำหรับการวิเคราะห์โปรตีนที่ไม่ละลายน้ำ แต่ละตัวอย่างถูกโซนิคเป็นเวลา 20 วินาทีบนน้ำแข็ง หมุนเป็นเวลา 1 ชั่วโมงที่อุณหภูมิห้อง จากนั้นปั่นเหวี่ยงที่ 20,800 กรัม เป็นเวลา 30 นาที ที่ 4 องศา การทดสอบกรดไบซินโคนิก (BCA) (#23225, Thermo Fisher Scientific) ถูกนำมาใช้เพื่อวัดความเข้มข้นของโปรตีนของแต่ละตัวอย่าง

สำหรับ Western blots นั้น โปรตีน 20 ไมโครกรัมของแต่ละตัวอย่างจะถูกโหลดลงบนเจล NuPAGE (Invitrogen) 4–12% และแยกกันโดยใช้บัฟเฟอร์ MOPS ภายใต้เงื่อนไขที่ลดลงและถูกทำให้เสียสภาพ โปรตีนถูกถ่ายโอนไปยังเมมเบรนโพลีไวนิลดีนไดฟลูออไรด์และพัฒนาโดยใช้ Pierce ECL (เคมีเรืองแสงที่ได้รับการปรับปรุง; Thermo Fisher Scientific) สัญญาณที่พัฒนาถูกทำให้มองเห็นได้โดยใช้ ProteinSimple FCR (FluorChem R) และสัญญาณเคมีเรืองแสงที่ตามมาถูกหาปริมาณโดยใช้ซอฟต์แวร์ AlphaView (ProteinSimple) รอยเปื้อนทั้งหมดได้รับการวิเคราะห์โดยใช้เครื่องมือแก้ไขพื้นหลังเฉพาะที่ ยกเว้นรอยเปื้อน HDJ-2 ซึ่งได้รับการวิเคราะห์โดยใช้เครื่องมือลิงก์พื้นหลังร่วมกับการแก้ไขพื้นหลังหลายภูมิภาค (ซอฟต์แวร์ AlphaView)

เอ 42 เอลิซา

ในการวัด A 42 ในซีกสมองโฮโมจีเนตจากหนู 5XFAD มีการใช้เอนไซม์- LinkedImmunosorbent-Assay (ELISA) (Thermo Fisher Scientific, KHB3441) ที่มีวางจำหน่ายทั่วไปตามคำแนะนำของผู้ผลิตเพื่อวิเคราะห์กัวนิดีนและ A 42 ที่ละลายได้ใน PBS ในซีกสมองซีก ในการวัด A 42 ในสมองของหนู hAPP/PS1 มีการใช้ ELISA ที่มีจำหน่ายในท้องตลาด (h amyloid 42 ELISA ความไวสูง, บริษัท Te Genetics, ซูริก, สวิตเซอร์แลนด์) ELISA ดำเนินการตามระเบียบการของผู้ผลิต

อิมมูโนฟลูออเรสเซนต์เนื้อเยื่อสมองของหนู

หลังจากการไหลเวียนของเลือด สมองถูกแยกออกและสมองซีกสมองถูกตรึงไว้ในฟอร์มาลิน 10% ตามด้วยการเก็บรักษาด้วยการแช่แข็งในสารละลายซูโครส 30% ใน 1XPBS ไมโครโตมแบบเลื่อนเยือกแข็งถูกใช้เพื่อเก็บเกี่ยวส่วนโคโรนาหรือทัลขนาด 30- ไมโครเมตร ส่วนต่างๆ ถูกวางตามลำดับในเพลตหลุม 12- ในสารละลายป้องกันการแช่แข็ง (1xPBS, ซูโครส 30% และเอทิลีนไกลคอล 30%) และเก็บไว้ที่ −20 องศาจนกระทั่งใช้งาน การย้อมสีอิมมูโนฟลูออเรสเซนซ์ถูกดำเนินการโดยส่วนการล้างครั้งแรกสามครั้งใน 1XTBS และจากนั้นบ่มส่วนใน 16 มิลลิโมลาร์ ไกลซีน ใน 1XTBS เป็นเวลา 1 ชั่วโมงที่อุณหภูมิห้อง หลังจากการล้างเพิ่มเติม 3 ครั้งใน 1XTBS ส่วนต่างๆ ถูกปิดกั้นในซีรัมแพะ 5% ใน 0.25% ไทรทัน X-100 ใน 1XTBS เป็นเวลา 2 ชั่วโมงที่อุณหภูมิห้อง

จากนั้นส่วนต่างๆ ถูกบ่มข้ามคืนในแอนติบอดีปฐมภูมิในสารละลายของ 0.25% ไทรทัน X-100, 1% ซีรั่มอัลบูมินของวัว และ 1XTBS ที่ 4 องศา จากนั้นจึงดำเนินการสร้างภูมิคุ้มกันทุติยภูมิด้วยแอนติบอดีทุติยภูมิที่มีป้ายกำกับ AlexaFluor ที่ความเข้มข้น 1: 1,000 (Thermo Fisher Scientific) ProLong Gold (#P36934, Thermo Fisher Scientific) ถูกใช้เพื่อยึดส่วนต่างๆ ก่อนที่จะถ่ายภาพด้วยกล้องจุลทรรศน์สนามกว้าง Ti2 หรือกล้องจุลทรรศน์คอนโฟคอลสแกนด้วยเลเซอร์ Nikon A1 สำหรับการหาปริมาณภาพโดยใช้ซอฟต์แวร์ Nikon NIS Elements สำหรับการได้มา

การตั้งค่าการได้มาทั้งหมดยังคงเหมือนเดิมระหว่างจีโนไทป์และภาพทั้งหมดได้มาภายในระยะเวลาการถ่ายภาพเดียวกันสำหรับการทดลองแต่ละครั้ง (ศูนย์กล้องจุลทรรศน์ขั้นสูงของมหาวิทยาลัยนอร์ธเวสเทิร์นและศูนย์การถ่ายภาพนิคอน)

ปริมาณภาพ

สมองของเมาส์

การหาปริมาณอิมมูโนฟลูออเรสเซนต์ของการสร้างภูมิคุ้มกันเนื้อเยื่อสมองของหนูดำเนินการใน 3-5 ส่วนต่อสัตว์หนึ่งตัว จากพิกัด Bregma ประมาณ −0.94 ถึง −2.55 มม. ซึ่งถ่ายภาพโดยใช้วัตถุประสงค์ 10X บนกล้องจุลทรรศน์สนามกว้าง Ti2 การวิเคราะห์เชิงปริมาณ รวมถึงเกณฑ์ขนาดและความเข้ม ดำเนินการโดยใช้ซอฟต์แวร์ Nikon NIS-Elements (ศูนย์การถ่ายภาพ Nikon ของมหาวิทยาลัยนอร์ธเวสเทิร์น)

เกณฑ์ถูกกำหนดโดยใช้เครื่องมือการวิเคราะห์ทั่วไปตามขนาด รูปร่าง และคอนทราสต์ของวัตถุ จากนั้นจึงสร้างไบนารีมาสก์สำหรับแต่ละช่องสัญญาณและภูมิภาคที่สนใจ ทั้งนี้ขึ้นอยู่กับสัญญาณ เกณฑ์ดำเนินการแยกกันในแต่ละช่องสัญญาณเพื่อแยกสัญญาณที่น่าสนใจโดยการปรับอัตราส่วนสัญญาณต่อเสียงรบกวนให้เหมาะสม และกำจัดสัญญาณพื้นหลังที่ไม่เฉพาะเจาะจง สำหรับการคำนวณพื้นที่ครอบคลุมของ LAMP1, BACE1 หรือ LysoTracker-Green รวมถึงการวัดความเข้มของฟลูออเรสเซนซ์ของ LAMP1 และ Lysosensor ในเซลล์ประสาทปฐมภูมิ บริเวณที่สนใจถูกติดตามด้วยตนเองโดยใช้องค์ประกอบ NIS และชั้นไบนารีถูกสร้างขึ้นสำหรับแต่ละภูมิภาคที่สนใจ

ในการคำนวณอัตราส่วนของ LAMP1 ต่อ A 42 พื้นที่ของ LAMP1 ในเซลล์ประสาท dystrophic ถูกทำให้เป็นมาตรฐานไปยังพื้นที่ A 42 บนพื้นฐานคราบจุลินทรีย์ส่วนบุคคลและอัตราส่วนเฉลี่ยต่อเมาส์ระหว่างกลุ่มการรักษาถูกหาปริมาณ การวิเคราะห์ค่าสัมประสิทธิ์สหสัมพันธ์ของเพียร์สันสำหรับ BACE1 และ LAMP1 ดำเนินการโดยใช้องค์ประกอบ NIS บนพื้นฐานต่อแผ่นโลหะบนการฉายภาพความเข้มสูงสุดของภาพ Z-stack 30μm ที่ถ่ายโดยใช้กล้องจุลทรรศน์คอนโฟคอลสแกนด้วยเลเซอร์ Nikon A1 ที่มีขนาดขั้น 1μm

ในการคำนวณอัตราส่วนของ LysoTrackerGreen ต่อ Tiazine red พื้นที่ของ LysoTracker-Green ในเซลล์ประสาท dystrophic ได้รับการปรับให้เป็นมาตรฐานกับพื้นที่ของ Tiazine Red บนพื้นฐานคราบจุลินทรีย์แต่ละตัว และอัตราส่วนเฉลี่ยต่อเมาส์ถูกหาปริมาณระหว่างกลุ่มการรักษา ส่วนโคโรนาสี่ส่วนจากพิกัด Bregma ประมาณ −1.7 0 ถึง −2.55 มม. ถูกนำมาใช้ในการคำนวณพื้นที่หรือความเข้มของสัญญาณแต่ละสัญญาณในแต่ละบริเวณสมองตามลำดับสำหรับเมาส์แต่ละตัว การวิเคราะห์พื้นที่ที่ปกคลุมด้วยคราบจุลินทรีย์และขนาดคราบจุลินทรีย์ดำเนินการโดยใช้ค่าเฉลี่ยห้าส่วนต่อเมาส์จากพิกัด Bregma ที่ประมาณ −0.94 ถึง −2.55 มม. การเลือกส่วน การได้มาของภาพ การติดตามภาพ และการหาปริมาณดำเนินการโดยบุคคลที่มองไม่เห็นกลุ่มการรักษาและจีโนไทป์

เซลล์ประสาทปฐมภูมิ

สำหรับการหาปริมาณของการกระตุ้นภูมิคุ้มกันของ LAMP1 ในเซลล์ประสาทหลักของเมาส์คงที่ โซมาถูกติดตามด้วยตนเองตามสัณฐานวิทยาโดยใช้องค์ประกอบ NIS และสร้างไบนารีมาสก์สำหรับแต่ละภูมิภาคที่สนใจและช่องทาง เกณฑ์ถูกใช้เพื่อปรับสัญญาณ LAMP1 ให้เหมาะสมและแยกแยะ LAMP1 ในนิวไรต์ รวมถึงทั้งเดนไดรต์และแอกซอน โดยการแยกพิกเซลของ LAMP1 ที่เป็นบวกสำหรับพิกเซล tubulin

สัญญาณเซลล์ Soma LAMP1 ถูกแยกออกจากพื้นที่ LAMP1 ทั้งหมดเพื่อวิเคราะห์ถุง LAMP1 ในเซลล์ประสาท สำหรับการวิเคราะห์การเคลื่อนที่ของ LysoTracker-Green ในเซลล์ประสาท รูปภาพจะถูกหาปริมาณโดยใช้ NISElements ความเร็วและระยะทางของอนุภาค LysoTrackerGreen ทั้งหมดในแต่ละเฟรมถูกติดตามโดยใช้คุณลักษณะการติดตามการเคลื่อนไหวอัตโนมัติใน NIS-Elements มีการกำหนดเกณฑ์และนำไปใช้กับภาพยนตร์ทั้งหมดตามขนาดและความเข้มของแสงเรืองแสงของอนุภาค LysoTracker-Green เพื่อกำจัดเสียงรบกวนรอบข้าง

สำหรับการสร้างไคโมกราฟ การถ่ายภาพเหลื่อมเวลาของเซลล์ประสาทเดี่ยวดำเนินการบนกล้องจุลทรรศน์คอนโฟคอล 60X และแอกซอนถูกระบุในลักษณะทางสัณฐานวิทยา เปอร์เซ็นต์ของความถี่ของอนุภาคที่เคลื่อนที่ในทิศทางแอนเทอโรเกรดหรือถอยหลังเข้าคลอง หรือคงที่ ถูกหาปริมาณโดยการหารจำนวนอนุภาคสำหรับแต่ละกลุ่มด้วยจำนวนอนุภาคทั้งหมด สำหรับการวิเคราะห์ด้วยไคโมกราฟ อนุภาคที่เคลื่อนที่ถูกกำหนดให้มีความเร็วสูงกว่า 0.1μM/วินาที

การวิเคราะห์ทางสถิติ

ซอฟต์แวร์ GraphPad Prism v8 ถูกใช้เพื่อทำการวิเคราะห์ทางสถิติ รวมถึงการวิเคราะห์ความแปรปรวน (ANOVA) ด้วยการทดสอบภายหลังเมื่อเปรียบเทียบมากกว่าสองตัวอย่างและการทดสอบทีแบบไม่มีคู่เมื่อมีการเปรียบเทียบเพียงสองตัวอย่างเท่านั้น รายละเอียดการทดสอบเฉพาะ รวมถึงจำนวนซ้ำ ประเภทของการทดสอบภายหลัง และค่า P ระบุไว้ในคำอธิบายรูปภาพ การหาปริมาณทั้งหมดถูกพล็อตที่ค่าเฉลี่ย±SEM สรุปความสำคัญเมื่อค่า P น้อยกว่า 0.05 ซึ่งระบุด้วย *P<0.05, **P<0.01, ***P<0.001, ****P<0.0001.

For more information:1950477648nn@gmail.com