ผลของ Phenylethanoid Glycosides ที่สกัดจาก Herba Cistanches ต่อการเรียนรู้และความจำของหนูที่เป็นโรคอัลไซเมอร์

ali.ma@wecistanche.com

Jianhua Yang,1 Bowei Ju,2,3 และ Junping Hu 2

พื้นหลัง.เพื่อตรวจสอบผลกระทบของphenylethanoidไกลโคไซด์(PhGs) ที่สกัดจากเฮอร์บาCistanchesเกี่ยวกับความสามารถด้านพฤติกรรมและการรับรู้ของหนูดัดแปลงพันธุกรรม APP/PSI ด้วยโรคอัลไซเมอร์โรค(ค.ศ.)

วิธีการหนู AD ถูกสุ่มแบ่งออกเป็นกลุ่มควบคุม กลุ่มแบบจำลอง กลุ่มโดเนเปซิล กลุ่ม PhG และกลุ่ม verbascose ตามลำดับ สามสัปดาห์ต่อมา สัตว์เหล่านี้ได้รับการประเมินพฤติกรรมและการรับรู้โดยการทดสอบรัง การทดสอบเขาวงกตในน้ำของมอร์ริส และการทดสอบขั้นตอนลง

ผลลัพธ์.ความสามารถในการรับรู้ในกลุ่มเหล่านี้เพิ่มขึ้นอย่างมีนัยสำคัญเมื่อเทียบกับในกลุ่มแบบจำลอง การทดสอบแบบ step-down ระบุว่าข้อผิดพลาดที่เกิดจากหน่วยความจำลดลงในกลุ่ม PhG และกลุ่ม verbasscose มีการลดลงอย่างมีนัยสำคัญเมื่อเทียบกับกลุ่มแบบจำลอง (P <>

บทสรุปPhGs ลดทอนคุณสมบัติความผิดปกติทางปัญญาของยีนดัดแปลงพันธุกรรม APP/PSI นอกจากนี้ PhGs ยังเป็นส่วนประกอบสำคัญสำหรับกิจกรรมต่อต้าน AD ของ H. Cistanches

Cistanche มีสารต่อต้านโรคอัลไซเมอร์ผลกระทบ

1. ความเป็นมา

โรคอัลไซเมอร์(AD) เป็นโรคความเสื่อมที่เกี่ยวข้องกับอายุของระบบประสาทส่วนกลาง (CNS) ที่มีความผิดปกติทางความคิดและความจำเสื่อม[1–3] ด้วยกระบวนการชราภาพและอายุขัยทั่วโลก ความชุกของ AD มีแนวโน้มเพิ่มขึ้น ซึ่งส่งผลให้เกิดการเจ็บป่วยสูง โรคเรื้อรัง และค่าใช้จ่ายในการรักษาสูง จนถึงปัจจุบัน กลไกของ ADis ยังไม่ได้กำหนดไว้อย่างชัดเจน [4–7] ดังนั้นจึงเป็นเรื่องเร่งด่วนที่จะต้องศึกษากลไกของ AD และพัฒนาวิธีการป้องกัน ควบคุม และรักษาโรค AD อย่างมีประสิทธิภาพ

จนถึงปัจจุบันยังไม่มีวิธีที่มีประสิทธิภาพในการป้องกันและรักษา AD และยาส่วนใหญ่ที่ใช้การตั้งค่าแบบเอียงใช้สำหรับการรักษาตามอาการ สารที่ได้รับการอนุมัติสำหรับ AD โดย FDA ได้แก่ cholinesteraseinhibitors (เช่น donepezil) และตัวรับกรดอะมิโน excitatory (เช่น memantine) ที่ได้รับการพิจารณาเพื่อลดทอนอาการและปรับปรุงความสามารถด้านความรู้ความเข้าใจ/พฤติกรรม อย่างไรก็ตาม ประสิทธิภาพไม่เป็นที่น่าพอใจเนื่องจากการตอบสนองต่อการรักษาที่จำกัดหลังการให้ยา [8–10]. ยาจีนโบราณซึ่งมีประวัติอันยาวนานโดยอาศัยประสบการณ์นับพันปี แสดงให้เห็นแหล่งที่มาและข้อดีหลายประการเมื่อเทียบกับสารเคมี รวมถึงเป้าหมายที่หลากหลาย ความปลอดภัยที่ยอดเยี่ยม ผลข้างเคียงน้อย และความเหมาะสมสำหรับการบริหารในระยะยาว ยาสมุนไพรเหล่านี้มีความเหนือกว่าสารอื่นๆ ในแง่ของการรักษาโรคเรื้อรังและโรคทนไฟ นอกจากนี้ ยาเหล่านี้มีศักยภาพมากในการรักษา AD [11-13] ดังนั้นจึงมีความพยายามเพิ่มขึ้นในการพัฒนาสารใหม่สำหรับ AD จากยาสมุนไพรโดยใช้เทคนิคที่ทันสมัย

Click to Cistanche UK สำหรับโรคอัลไซเมอร์

Herba Cistanches หรือที่รู้จักในภาษาจีนว่า Rou Cong-Rong เป็นสัตว์ป่าใกล้สูญพันธุ์ซึ่งส่วนใหญ่กระจายอยู่ในดินแดนที่แห้งแล้งและทะเลทรายอันอบอุ่นทางตะวันตกเฉียงเหนือของจีน Herba Cistanche ใช้เป็นยาชูกำลังและ / หรือในสูตรสำหรับโรคไตเรื้อรังความอ่อนแอ และอาการท้องผูกในวัยชราที่มีประวัติยาวนานถึงสองพันปี องค์ประกอบทางเคมีของ Herba Cistanche ส่วนใหญ่ประกอบด้วยน้ำมันระเหย, ฟีนิลลิทานอยด์ไกลโคไซด์ที่ไม่ระเหย (PhGs), อิริดอยด์, ลิกแนน, อัลดิทอล, โอลิโกแซ็กคาไรด์และโพลีแซ็กคาไรด์ มีการศึกษาจำนวนมากขึ้นที่มุ่งเน้นไปที่การต่อต้านวัย โดยเฉพาะแบบจำลองสัตว์ที่สร้างขึ้นโดยใช้ A 25-35, D-galactose, Al2O3, กรดควิโนลินิก และสโคโพลามีน การศึกษาเหล่านี้ระบุว่า PhGs สามารถส่งผลต่อความจำ การลดความเครียดจากปฏิกิริยาออกซิเดชันในเนื้อเยื่อสมอง การยับยั้งการตายของเซลล์ประสาท และการลดลงของ acetylcholine esterase[14-16]

ตามใบสั่งแพทย์โบราณ H. Cistanche มักใช้เพื่อบำรุงไตและยับยั้งกระบวนการชรา ในยุคปัจจุบัน สมุนไพรได้รับการอนุมัติให้มีประสิทธิภาพในการรักษาโรคบางชนิดได้อย่างปลอดภัย นอกจากนี้ยังถูกนำมาใช้ในบุคคลที่อาศัยอยู่ในจีนแผ่นดินใหญ่[17] ในปี 2559 CFSA อนุมัติความปลอดภัยของแหล่งอาหาร H. Cistanchein จากนั้นในปี 2561 คณะกรรมการสุขภาพแห่งชาติของสาธารณรัฐประชาชนจีนได้ออกกฎหมายว่าสามารถใช้เป็นแหล่งอาหารและผู้สมัครสำหรับการวิจัยและพัฒนายาใหม่ [18, 19] ]. ตามความรู้ที่ดีที่สุดของเรา ส่วนประกอบที่ออกฤทธิ์ของ H. Cistanche คือ PhGs ซึ่ง echinacoside และverbascose ทำหน้าที่เป็นส่วนประกอบที่เป็นตัวแทนมากที่สุด ได้รับการระบุว่าเป็นดัชนีคุณภาพสำหรับ H. Cistanche โดยเภสัชตำรับจีน ตัวอย่างเช่น PhGs ของ H. Cis-tanche อาจทำหน้าที่เป็นวัตถุเจือปนอาหารหลังจากการทำให้บริสุทธิ์

การศึกษาก่อนหน้านี้ของเราระบุว่า PhG ที่สกัดจาก H. Cistanche นั้นมากกว่า 80 เปอร์เซ็นต์ [11] นอกจากนี้ PhG monomer และ verbascose มีเนื้อหาสูงและทำหน้าที่เป็นส่วนประกอบสำคัญ การศึกษาอย่างกว้างขวางระบุว่า PhGs และ PhG monomer ทั้งหมด (เช่น ver-bascose และ echinacoside) นำเสนอประสิทธิภาพในการต่อต้าน AD อย่างมีนัยสำคัญ ตัวอย่างเช่น การศึกษาในสัตว์ทดลองแสดงให้เห็นว่า PhGs, verbascose และ echinacoside ทั้งหมดมีส่วนสำคัญต่อการเพิ่มความสามารถในการเรียนรู้/ความจำและพฤติกรรมการรับรู้ ลดความเครียดจากปฏิกิริยาออกซิเดชันในเนื้อเยื่อสมอง ยับยั้งการตายของเซลล์ประสาท และลดการสร้าง A ในสมอง และแอซีทิลโคลีนเอสเทอเรสแอคทิวิตี [20-25] การทดลองในหลอดทดลองเผยให้เห็นว่า PhGscould ดำเนินการกับแบบจำลองเซลล์ AD ลดความเครียดออกซิเดชัน ขจัดอนุมูลอิสระ ยับยั้งการรวมตัวของอะไมลอยด์ และลดการสูญเสียเซลล์ประสาทและการตายของเซลล์ประสาท[20, 25, 26] นอกจากนี้ PhGs ยังสามารถลดความสามารถในการรับรู้และการสร้าง A 1-40 และ A 1-42 ใน thehippocampus ในหนูดัดแปลงพันธุกรรม APPswe/PSIdE9 มันสามารถควบคุมเป้าหมายต้นน้ำและปลายน้ำของเส้นทางการส่งสัญญาณอินซูลินซึ่งปรับปรุงการส่งสัญญาณของอินซูลินและควบคุมการเผาผลาญพลังงานสมองตลอดจนความสามารถในการต่อต้าน AD ที่ตามมา [27]

แบบจำลองสัตว์มีความสำคัญต่อการศึกษาวิจัยเกี่ยวกับโรคและการพัฒนาร้านขายยา แบบจำลอง AD ที่มีพื้นฐานมาจากสัตว์แปลงพันธุ์ได้รับการพิจารณาว่าเป็นหนึ่งในความก้าวหน้าที่สำคัญที่สุด เนื่องจากแบบจำลองสัตว์ AD แปลงพันธุ์สามารถเลียนแบบ AD ที่ระดับโมเลกุล ซึ่งแสดงอาการและสัญญาณที่เป็นปกติ นอกจากนี้ รุ่นนี้ยังเหนือกว่ารุ่นอื่นๆ ที่เกี่ยวข้องกับ AD ในด้านความเสถียรและความน่าเชื่อถือ จนถึงตอนนี้ ไม่มีแบบจำลอง AD ดัดแปลงพันธุกรรมเพื่อตรวจสอบผลกระทบของโมโนเมอร์ PhG ต่อการเกิดโรคของ AD ในการศึกษานี้ ได้มีการสร้างแบบจำลองหนูเมาส์ APP/PSI AD ตามด้วยการกำหนดกิจกรรมต่อต้าน AD ของโมโนเมอร์ PhG ที่เรียกว่า verbascose โดยการประเมินการทดสอบการทำรัง การทดสอบเขาวงกตน้ำของมอร์ริส และการทดสอบแบบลดขั้นตอน

2. วิธีการ

2.1. ตัวแทน.

PhGs ของ H. Cistanche จัดทำขึ้นตามคำอธิบายทั่วไปของเรา [20] คุณภาพที่กำหนดโดยใช้วิธี UV สูงถึง 87.6 เปอร์เซ็นต์ ปริมาณ Theechinacoside และ verbascose ที่กำหนดโดย HPLC เท่ากับ 37.8 เปอร์เซ็นต์ และ 17.7 เปอร์เซ็นต์ ตามลำดับ สูตรกราฟิกสำหรับ PhGs, verbascose และ echinacoside แสดงในรูปที่ 1 Stems of C. tubulosa (Schrenk) Wight ถูกรวบรวมในเดือนตุลาคม 2016 จาก Xinjiang ประเทศจีน พืชถูกระบุโดยดร. จุนผิงหู. ตัวอย่างบัตรกำนัลเหล่านี้ทั้งหมด (หมายเลข 201610) ได้รับการฝากไว้ที่ Plant Herbarium, School of Pharmacy, Xinjiang Medical University, Xinjiang, China

สารสกัดจากซิสแทนเช่

2.2. สัตว์.

หนูแปลงพันธุ์ APP/PSI เพศผู้ 10 ตัว (3 เดือน) และหนูเพศเมีย 20 ตัว (ตัวผู้: 10; ตัวเมีย: 10, 20-30 ก.) ที่ซื้อมาจากศูนย์วิจัยสัตว์จำลองของมหาวิทยาลัยหนานจิง (SCXK 2015-0001, หนานจิง, ประเทศจีน) สัตว์เหล่านี้ได้รับอาหารในห้องปลอดเชื้อก่อโรค (SPF) เฉพาะใน Animal Center of Xinjiang Medical University (SCXK 2011-0001, Xinjiang, China) ด้วยอาหารเกรด SPF สัตว์ทุกตัวสามารถเข้าได้ฟรี สำหรับอาหารและน้ำที่ผ่านการฆ่าเชื้อแล้ว ระเบียบการการศึกษาได้รับการอนุมัติโดยคณะกรรมการจริยธรรมของมหาวิทยาลัยการแพทย์ซินเจียง

2.3. การเพิ่มจำนวนและการระบุตัวตนของหนูดัดแปลงพันธุกรรม APP/PSI

หนูทดลองดัดแปลงพันธุกรรม ({0}} สัปดาห์) ได้รับการตัดหางที่มีความยาว 0.5 ซม. สำหรับการสกัดดีเอ็นเอ นำหางไปใส่ในท่อ Eppendorf ตามด้วยการเพิ่มโปรลีส K จนกระทั่งมีความเข้มข้น 400 ไมโครกรัม/ มล. ต่อจากนั้น ของผสมถูกวอร์เท็กซ์ที่ 55 องศาในชั่วข้ามคืน จากนั้นจึงหมุนเหวี่ยงที่ 13,000 รอบต่อนาที เป็นเวลา 10 นาทีที่ 4 องศาเพื่อให้ได้ส่วนลอยเหนือตะกอน ทำการสกัด DNA โดยใช้ชุดเครื่องมือทางการค้าตามคำแนะนำของผู้ผลิต (Qiagen, Germany)

สำหรับการขยาย DNA ไพรเมอร์จำเพาะสำหรับ APP และ PSI ได้รับการออกแบบตามที่กล่าวไว้ในตารางที่ 1 การขยายเสียงดำเนินการในปริมาตรรวม 20ul โดยใช้เงื่อนไขต่อไปนี้: การทำให้เสียสภาพก่อนกำหนด 94 องศาเป็นเวลา 5 นาที ตามด้วย 35 รอบของการเปลี่ยนสภาพที่ 94 องศาเป็นเวลา 30 วินาที ,65 องศา 35 วินาที และ 72 องศา 45 วินาที และ 72 องศา 3 นาที ผลิตภัณฑ์ DNA ที่ผลิตขึ้นอยู่ภายใต้การสังเคราะห์ด้วยอะกาโรเจลอิเล็กโตรโฟรีซิสที่แรงดันคงที่ 100V เป็นเวลา 30 นาที สุดท้าย ภาพถูกแสดงโดยใช้ระบบ Chemi-Doc MP

2.4. การจัดกลุ่ม

การใช้การสุ่มที่สร้างโดยซอฟต์แวร์ SPSS180 หนูเมาส์ AD ถูกสุ่มแบ่งออกเป็นกลุ่มควบคุม (i) (n=10, หนูเมาส์ C57BL/6J); (ii) กลุ่มรุ่น (n=10); (iii) หมู่ Donepezil (n=10, 0.65 มก./กก., การบริหารให้ในกระเพาะอาหาร-ตริก); (iv) กลุ่ม PhG ที่อยู่ภายใต้ PhG vialavage ที่มีความเข้มข้น 250 มก./กก. (n=10), 125 มก./กก.(n=10) และ 62.5 มก./กก. (n {{16} }); และ (v) verbascose group(n=10, 125 มก./กก., การบริหารในกระเพาะอาหาร) สัตว์ที่ใช้ในกลุ่ม (ii)-(v) คือหนูเมาส์แปลงพันธุ์ APPswe/PSIdE9 การล้างถูกดำเนินการเมื่ออายุ 6 เดือนและกินเวลานาน 3 เดือนด้วยความถี่วันละครั้ง สัตว์ในกลุ่มควบคุมและกลุ่มแบบจำลองอยู่ภายใต้การฉีดของการบริหารให้น้ำกลั่นสองครั้งในกระเพาะอาหาร

2.5. การทดสอบการทำรัง

สัตว์ถูกเลี้ยงแยกกันเป็นเวลาอย่างน้อย 24 ชั่วโมงก่อนการทดสอบในกรงมาตรฐาน (28 × 12 × 16 ซม.) ซึ่งเต็มไปด้วยขี้เลื่อยที่หนา 1 ซม. ในขั้นต้น เวลาแฝงจะถูกตรวจสอบเมื่อเริ่มต้นการทดสอบ และได้รับเวลารวม 120 ครั้ง คะแนนซ้อนถูกคำนวณตามที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้ [28]

2.6. การทดสอบเขาวงกตน้ำมอร์ริส

เครื่องมือนี้ประกอบด้วยสระน้ำทรงกลมที่บรรจุน้ำไว้ (23 ± 2 องศาเซลเซียสและความลึก 40 ซม.) ซึ่งตั้งอยู่ในห้องทดสอบที่มีผนังสีขาวและมีสัญญาณบ่งชี้หลายอย่าง แท่น (เส้นผ่านศูนย์กลาง 10 ซม.) ถูกแช่ 1 ซม. ใต้ผิวน้ำในหนึ่งในสี่สี่เหลี่ยมที่เหมือนกัน ตำแหน่งของแท่นยึดได้รับการแก้ไขตลอดการทดลองซื้อกิจการ ในระหว่างนั้นให้วางหนูแต่ละตัวในน้ำที่หันหน้าเข้าหาผนังสระเพื่อควบคุมอิทธิพลของทิศทาง ในวันที่ 1 และ 2 ได้ทำการทดสอบการได้มาซึ่งรวม 4 เซสชันต่อวันเป็นเวลา 6 วันติดต่อกัน สำหรับแต่ละเซสชั่น หนูได้รับอนุญาตให้หนีโดยการว่ายน้ำไปยังแท่นที่มองไม่เห็นและเวลาแฝงในการหลบหนี (กล่าวคือ เวลาที่ใช้ในการค้นหาและปีนขึ้นไปบนแท่น) และความเร็วในการว่ายน้ำถูกบันทึกด้วยเวลาตัดรอบ 60 วินาที หนูที่ไม่พบแพลตฟอร์มภายใน 60 วินาที จะได้รับคำแนะนำให้ไปที่แพลตฟอร์มด้วยตนเอง และอนุญาตให้อยู่บนแพลตฟอร์มเป็นเวลา 10 วินาที ในวันที่ 11 การทดสอบเพื่อได้มาซึ่งการทดลองได้ดำเนินการอีกครั้งเป็นเวลา 6 วันติดต่อกันหลังจากการรักษาด้วยยาทั้งหมด

2.7. การทดสอบขั้นตอนลง

ประมาณ 24 ชั่วโมงหลังจากให้ยาตัวสุดท้าย สัตว์เหล่านั้นต้องอยู่ในสิ่งอำนวยความสะดวกขั้นบันไดและสภาพแวดล้อมที่ปรับตัวได้เป็นเวลา 3 นาที ตั้งเวลาไว้ 5 นาที และแรงดันไฟฟ้าอยู่ที่ 32 โวลต์ เมื่อถูกกระตุ้น หนูทดลองกระโดดขึ้นไปบนแท่นแล้วถูกตั้งเวลาเมื่อมีสัญญาณของเครื่องตรวจจับอินฟราเรดเปลี่ยนแปลง เวลาแฝงถูกบันทึกเป็นเวลาจากแพลตฟอร์มไปยังช่องด้านล่างเป็นครั้งแรก ในกรณีที่ไม่กระโดดออกจากแพลตฟอร์ม เวลาแฝงจะถูกบันทึกเป็น 5 นาที จากนั้นจึงบันทึกความถี่ของการกระตุ้นทั้งหมดหลังจากระยะแฝง การทดสอบเสร็จสิ้นภายใน 2 วัน สังเกตการเรียนรู้และความจำในวันที่ 1 และวันที่ 2 ตามลำดับ latencystage และความถี่ข้อผิดพลาดถูกบันทึกไว้สำหรับเมาส์แต่ละตัว

2.8. การวิเคราะห์ทางสถิติ.

ซอฟต์แวร์ SPSS 180 ใช้สำหรับการวิเคราะห์ทางสถิติ ข้อมูลถูกนำเสนอเป็นค่าเฉลี่ย±ส่วนเบี่ยงเบนมาตรฐาน ทำการทดสอบ t ของนักเรียนเพื่อเปรียบเทียบระหว่างกลุ่ม P < 0:05="">

3. ผลลัพธ์

3.1. การระบุจีโนไทป์

เนื่องจากจีโนม DNA ทำหน้าที่เป็นเทมเพลตสำหรับการขยายสัญญาณ จึงได้แถบความถี่สองแถบที่มีความยาว 344 kb และ 608 kb ในรุ่น F1 ตามลำดับ ซึ่งสอดคล้องกับความยาวของยีน APP และยีน PSI (รูปที่ 2)

3.2. คะแนนการทำรัง

ห้าเกรดถูกแบ่งออกเป็นคะแนนการซ้อน (รูปที่ 3) ในกลุ่มควบคุม มีการสังเกตพฤติกรรมการทำรังภายในไม่กี่นาทีหลังจากวางกระดาษลงในกรง ในกลุ่มแบบจำลอง การสำรวจของหนูลดลงเมื่อเปรียบเทียบกัน และสัตว์บางชนิดอาจมีพฤติกรรมที่เกี่ยวข้องกับความวิตกกังวล เช่น การดูแลขนและการล้างหน้า ซึ่งทำให้เกิดความล่าช้าในพฤติกรรมการทำรัง สัตว์เหล่านี้ส่วนใหญ่มีคะแนน 1 หรือ 2 อย่างไรก็ตาม คะแนนการทำรังเพิ่มขึ้นอย่างมีนัยสำคัญ ซึ่งแสดงในลักษณะที่ขึ้นกับเวลาหลังการรักษาด้วย PhG (รูปที่ 4)

3.3. ผลของ PhGs ต่อการนำทางหนู AD ดัดแปลงพันธุกรรมในระยะแฝง

เมื่อขยายเวลาฝึกซ้อม เวลาแฝงในแต่ละกลุ่มลดลงอย่างมีนัยสำคัญ 2 วันแรกทำหน้าที่เป็นเวลาฝึกซ้อม ในวันที่ 3 เวลาแฝงในกลุ่มแบบจำลองแสดงให้เห็นการขยายอย่างมีนัยสำคัญเมื่อเปรียบเทียบกับในกลุ่มควบคุมปกติ (P < 0:01)="" ในทำนองเดียวกัน="" ในวันที่="" 4="" และ="" 5="" เวลาแฝงในกลุ่มแบบจำลองแสดงการขยายอย่างมีนัยสำคัญเมื่อเทียบกับในกลุ่มควบคุมปกติ(p="">< 0:05)="" ในวันที่="" 3="" เวลาแฝงในกลุ่ม="" donepezil="" ลดลงอย่างมีนัยสำคัญเมื่อเทียบกับในกลุ่มแบบจำลอง="" (p="">< 0:05)="" เวลาแฝงในกลุ่ม="" phg="" แสดงให้เห็นการลดลงอย่างมีนัยสำคัญในลักษณะที่ขึ้นกับขนาดยาเมื่อเปรียบเทียบกับในกลุ่มแบบจำลอง="" (p="">< 0:05,="" ตารางที่="">

3.4. PhGs ลดทอนร่องรอยการว่ายน้ำของหนู AD ดัดแปลงพันธุกรรมอย่างมีนัยสำคัญ

ในกลุ่มแบบจำลอง ร่องรอยการว่ายน้ำของหนูเป็นลักษณะทั่วไปของการค้นหาชายขอบ ในกลุ่ม PhG และกลุ่ม verbascose ร่องรอยการว่ายน้ำอยู่ในประเภทเส้นตรงหรือประเภทแนวโน้ม สิ่งนี้บ่งชี้ว่า PhG สามารถปรับปรุงหน่วยความจำพิเศษของหนู AD ดัดแปลงพันธุกรรม APP/PSI ได้อย่างมีนัยสำคัญ (รูปที่ 5)

3.5. ผลกระทบของ PhGs ต่อการสำรวจพิเศษของหนูทดลอง

แพลตฟอร์มถูกดึงมาในวันที่ 6 ของการทดสอบเขาวงกตน้ำเพื่อตรวจสอบความสามารถในการสำรวจพิเศษ ความถี่ของการส่งผ่านแพลตฟอร์มถูกบันทึกภายใน 60 วินาที ข้อมูลของเราแสดงให้เห็นว่ามีการลดลงอย่างมีนัยสำคัญในความถี่ของการส่งผ่านแพลตฟอร์มในกลุ่มโมเดล เมื่อเทียบกับการควบคุมปกติ (P < 0="" :01).="" เมื่อเทียบกับกลุ่มแบบจำลอง="" การเพิ่มขึ้นอย่างมีนัยสำคัญไม่ได้สังเกตเห็นในความถี่ของการส่งผ่านแพลตฟอร์มในกลุ่ม="" phg="" และกลุ่ม="" verbascose="" (p="">< 0:05,="" ตารางที่="">

เมื่อวางแท่นบนจตุภาคที่สาม มันถูกเรียกว่าจตุภาควัตถุประสงค์ การคงอยู่นานขึ้นในควอแดรนต์บ่งชี้ถึงการปรับปรุงอย่างมีนัยสำคัญในการเรียนรู้และความจำของหนูหลังการให้ยา ข้อมูลของเราแสดงให้เห็นว่ามีการลดลงอย่างมีนัยสำคัญในจตุภาควัตถุประสงค์ในกลุ่มแบบจำลองเมื่อเทียบกับกลุ่มควบคุมปกติ (P < {{{="" {2}}}}:01)="" เมื่อเปรียบเทียบกับกลุ่มแบบจำลอง="" พบว่ามีการเพิ่มขึ้นอย่างมีนัยสำคัญในกลุ่ม="" phg,="" กลุ่ม="" donepezil="" และกลุ่ม="" verbascose="" ตามลำดับ="" (p="">< 0:05,="" ตารางที่="">

3.6. ผลกระทบของ PhGs ต่อการทดสอบขั้นตอนใน ADMice ดัดแปลงพันธุกรรม

เวลาแฝงในกลุ่มแบบจำลองต่ำกว่าอย่างมีนัยสำคัญในกลุ่มควบคุม (P < {0}}:01)="" นอกจากนี้="" donepezil="" ยังอาจทำให้เวลาแฝงเพิ่มขึ้นอย่างมีนัยสำคัญ="" (p="">< 0:01)="" ในทำนองเดียวกัน="" กลุ่ม="" phg="" และ="" verbascosegroup="" ยังแสดงเวลาแฝงที่นานขึ้นอย่างมีนัยสำคัญ="" (p="">< 0:01)="" นอกจากนี้="" กลุ่ม="" phg="" และกลุ่ม="" verbascose="" พบว่าความถี่ข้อผิดพลาดลดลงอย่างมีนัยสำคัญในการทดสอบแบบ="" step-down="" ที่เกิดจากความจำและความบกพร่องในการเรียนรู้=""><0:01). these="" indicated="" that="" phgs="" contributed="" to="" the="" improvement="" of="" memory="" and="" learning="" capacity="" of="" transgenic="" ad="" mice="" (table="">

4. การอภิปราย

AD เป็นโรคของระบบประสาทเสื่อมที่มักเกิดขึ้นในประชากรสูงอายุ น่าเสียดายที่กลไกที่แน่นอนยังไม่ชัดเจน ซึ่งจำกัดการคัดกรองยาในระดับหนึ่ง จนถึงปัจจุบัน มีการศึกษาวิจัยอย่างกว้างขวางเกี่ยวกับการพัฒนายาในมุมมองของการวิจัยในสัตว์ และมีแบบจำลองสัตว์ AD หลายตัวรวมถึงแบบจำลองที่อิงจาก A 25-35, D-galactose, Al2O3, กรดควิโนลินิก และสโคโพลามีน โมเดลเหล่านี้กระตุ้นให้เกิดความผิดปกติของการรับรู้ แต่มีข้อเสียรวมถึงอาการไม่สบายในระยะหลัง ความแตกต่างระหว่างบุคคลจำนวนมาก และการทดลองที่ยาวนานขึ้นซึ่งขัดขวางการเลียนแบบรอยโรคที่ลุกลามและเสื่อมสภาพ [29–31] ด้วยความก้าวหน้าของเทคนิคดัดแปรพันธุกรรมในการสร้างแบบจำลองสัตว์ AD [27, 32,33] ความก้าวหน้าอย่างมากได้เกิดขึ้นในการทำความเข้าใจเกี่ยวกับการเกิดโรคของ AD ร่วมกับการพัฒนายาใหม่ อย่างไรก็ตาม การเกิดโรคของ AD ค่อนข้างซับซ้อนและเท่านั้น มีการระบุเป้าหมายของยีนสองสามตัวที่เป็นต้นเหตุของการเกิด AD [34–36] บนพื้นฐานนี้ ADmodel ดัดแปลงพันธุกรรมสมควรได้รับการประยุกต์ใช้เพิ่มเติมในการพัฒนายา การระบุไซต์ของยีนที่เกี่ยวข้องกับ AD ตามแบบจำลอง AD ดัดแปลงพันธุกรรมโดยใช้เทคนิคการผสมข้ามพันธุ์จะมีส่วนช่วยในการรักษา AD ในการตั้งค่าทางคลินิกและสร้างแบบจำลอง AD ใหม่ที่เกี่ยวข้องกับไวรัสหลายชนิด

ในการศึกษานี้ แบบจำลอง APPswe/PSIDE9 ที่เลือกมีส่วนสำคัญต่อเมแทบอลิซึมของ APP การพัฒนาและการเกิดโรคของ AD ตลอดจนความก้าวหน้าของโรค สำหรับการเพิ่มจำนวนและการระบุตัวของหนูดัดแปรพันธุกรรม แยก DNA จากตัวอย่างเลือดและเนื้อเยื่อ ตามลำดับ สำหรับการเก็บตัวอย่างเลือด เพื่อให้แน่ใจว่าการอยู่รอดของสัตว์นั้น ตัวอย่างถูกเก็บจากส่วนท้าย ซึ่งทำได้ยากด้วยปริมาตรของตัวอย่างที่น้อยกว่า นอกจากนี้ อาจก่อให้เกิดการบาดเจ็บต่อสัตว์และส่งผลต่อการวิเคราะห์ที่ตามมา ในทางตรงกันข้าม การสกัดดีเอ็นเอจากเนื้อเยื่อมักจะดำเนินการในสัปดาห์ที่ 6-8 ซึ่งง่ายต่อการสร้างรูปร่างและทำให้การเจริญเติบโตของสัตว์ได้รับบาดเจ็บน้อยลง นอกจากนี้ ไม่มีความแตกต่างทางสถิติในเนื้อหาดีเอ็นเอและความบริสุทธิ์ระหว่างสองวิธีนี้ ดังนั้น ดีเอ็นเอจึงถูกสกัดจากเนื้อเยื่อเพื่อระบุจีโนมของหนูดัดแปรพันธุกรรม

อาการทางคลินิกโดยทั่วไปของ AD คือการเรียนรู้และความจำที่ลดลงอย่างต่อเนื่อง ดังนั้น การสังเกตการเรียนรู้และความจำจึงมีความสำคัญต่อการประเมินประสิทธิภาพของยา ในการศึกษานี้ การทดสอบรังร่วมกับการทดสอบเขาวงกตน้ำของมอร์ริสและการทดสอบขั้นตอนลงเพื่อตรวจสอบผลกระทบของ PhGs ต่อหน่วยความจำและการเรียนรู้ของหนูดัดแปลงพันธุกรรม APP/PSI ในการทดสอบการนำทาง เวลาแฝงในกลุ่มโมเดลบ่งชี้ว่าเพิ่มขึ้นอย่างมากเมื่อเทียบกับการควบคุมปกติ (P < 0:05)="" ในขณะเดียวกัน="" เวลาแฝงในกลุ่ม="" thedonepezil="" ลดลงอย่างมีนัยสำคัญเมื่อเทียบกับกลุ่มแบบจำลอง="" (p="">< 0:05)="" เมื่อเปรียบเทียบกับกลุ่มแบบจำลอง="" เวลาแฝงในกลุ่ม="" phg="" แสดงให้เห็น="" การลดลงอย่างมีนัยสำคัญในลักษณะที่ขึ้นกับขนาดยา="" (p="">< {{10}}:05)="" ในการสำรวจพิเศษ="" พบว่าความถี่ของการส่งผ่านแพลตฟอร์มในกลุ่มแบบจำลองลดลงอย่างมีนัยสำคัญเมื่อเทียบกับการควบคุมปกติ="" (p="">< 0:01)="" เมื่อเทียบกับกลุ่มโมเดล="" ความถี่ในการส่งผ่านแพลตฟอร์มในกลุ่ม="" phg="" และกลุ่ม="" donepezil="" เพิ่มขึ้นอย่างมีนัยสำคัญ="" (p="">< 0:05)="" ในการทดสอบแบบลดขั้นตอน="" ความถี่ของการกระตุ้นข้อผิดพลาดที่เกิดจากความจำและความบกพร่องในการเรียนรู้ลดลงอย่างมากหลังการให้ยา="" phgs(p="">< 0:01)="" การทดสอบพฤติกรรมเปิดเผยว่าการแทรกแซงของ="" phg="" สามารถปรับปรุงหน่วยความจำและการเรียนรู้ของหนู="" ad="" ดัดแปลงพันธุกรรม="" app/psi="">

ยาสมุนไพรแผนโบราณที่มีประวัติยาวนานถูกนำมาใช้ในการรักษาโรคเรื้อรังและความผิดปกติของวัสดุทนไฟ ในปัจจุบัน การพัฒนายาใหม่บน AD บนพื้นฐานของยาสมุนไพรได้รับการเน้นอย่างมากในการสกัดส่วนประกอบออกฤทธิ์และ/หรือการเตรียมสารประกอบ เมื่อเทียบกับส่วนประกอบการสกัดแบบแอคทีฟ ส่วนประกอบโมโนเมอร์เดี่ยวแสดงให้เห็นถึงข้อดีหลายประการ เช่น การใช้ความเข้มข้นต่ำ การตรวจสอบไซต์เป้าหมายอย่างง่าย และทิศทางประสิทธิภาพที่ดีขึ้น Verbascose เป็นโมโนเมอร์ของ PhGs เนื่องจากแสดงเนื้อหาและกิจกรรมสูง ในการศึกษานี้ กลุ่มที่พูดละเอียดแสดงความสามารถในการต่อต้าน AD ได้ดีกว่าเมื่อเทียบกับกลุ่ม PhG สิ่งนี้สนับสนุนการวิจัยและพัฒนาสารต่อต้านโฆษณาตามรายละเอียด H. Cistanches แสดงประวัติศาสตร์อันยาวนานในการบริโภคอาหาร ย้อนหลังไปถึงราชวงศ์ฮั่น เทคนิคสมัยใหม่ยอมรับว่า H. Cistanches ปลอดภัยเหมือนอาหาร ในการศึกษานี้ เราอนุมัติศักยภาพของ H. Cistanches ในด้านอาหารเพื่อสุขภาพ การพัฒนายา และการดูแลสุขภาพ โดยเฉพาะอย่างยิ่งในประชากรสูงอายุและผู้ที่มีความเหนื่อยล้า

Cistanche ปูทางสำหรับการพัฒนายาใหม่สำหรับการรักษา AD

สำหรับข้อมูลเพิ่มเติมกรุณาคลิกที่ภาพ

แบบจำลองสัตว์มีความสำคัญต่อการศึกษาวิจัยเกี่ยวกับโรคและการพัฒนายา เมื่อเร็ว ๆ นี้ เทคนิคดัดแปรพันธุกรรมได้ถูกนำมาใช้เพื่อสร้างแบบจำลอง AD ซึ่งเลียนแบบการเกิดโรคของ AD ที่ระดับโมเลกุล ร่วมกับอาการทั่วไปและสัญญาณชีพ โมเดลเหล่านี้ได้รับการพิสูจน์แล้วว่ามีประสิทธิภาพในด้านความเสถียรและความน่าเชื่อถือเมื่อเทียบกับรุ่น AD อื่นๆ ในการศึกษานี้ มีการใช้แบบจำลองหนูเมาส์แปลงพันธุ์ APP/PSI ซึ่งเป็นที่ยอมรับกันดีในการเลียนแบบกระบวนการทางพยาธิวิทยาของ AD ซึ่งได้นำเสนอคุณลักษณะที่ส่งล่วงหน้าของความผิดปกติทางพฤติกรรม ความผิดปกติของการรับรู้ โล่ในวัยชรา การพันกันของเส้นประสาทเส้นใย และการตายของเซลล์ประสาท [37–39] ในการศึกษานี้ ขั้นแรกเราใช้ ADmice ดัดแปลงพันธุกรรมเพื่อตรวจสอบผลกระทบของ PhGs ต่อการเรียนรู้และความจำ ซึ่งสามารถให้ข้อมูลที่เป็นประโยชน์สำหรับการวิจัยและพัฒนาสารต่อต้าน AD บนพื้นฐานของ PhGs

โดยสรุป PhGs สามารถลดลักษณะการทำงานผิดปกติทางปัญญาของยีนแปลงพันธุ์ APP/PSI ได้ การศึกษาของเรายืนยันว่า PhGs เป็นส่วนประกอบสำคัญสำหรับกิจกรรมต่อต้าน AD ของ H. Cistanches อาจเป็นการปูทางไปสู่การพัฒนายาใหม่สำหรับการรักษา AD