หนูที่น่าพิศวง Diamine Oxidase ไม่ไวต่อฮีสตามีนทางปากหรือทางผิวหนัง

เชิงนามธรรม

1. วัตถุประสงค์

เพื่อประเมินการมีส่วนร่วมของไดเอมีนออกซิเดสภายในร่างกาย (DAO) ในการยับยั้งฮิสตามีนจากภายนอก เพื่อค้นหาสายพันธุ์ของหนูที่มีความไวต่อฮีสตามีนเพิ่มขึ้น และเพื่อทดสอบประสิทธิภาพของ rhDAO ในแบบจำลองการทดสอบฮีสตามีน

2. วิธีการ

หนูไดอามีนออกซิเดสที่น่าพิศวง (KO) ถูกท้าทายด้วยการให้ฮีสตามีนทางปากและทางใต้ผิวหนังร่วมกับ -adrenergic blocker propranolol โดยมีตัวยับยั้งฮิสตามีน-N-เมทิลทรานสเฟอเรส (HNMT) สองตัวคือเมโธพรีนและแทครีน พร้อมด้วยกรดโฟลิกเพื่อเลียนแบบการบาดเจ็บของไตเฉียบพลันและทำการรักษา ด้วย DAO ของมนุษย์แบบรีคอมบิแนนท์ อุณหภูมิร่างกายหลักถูกวัดโดยใช้ไมโครชิปที่ฝังใต้ผิวหนัง และวัดระดับฮีสตามีนในพลาสมาโดยใช้การทดสอบการเรืองแสงที่แก้ไขตามเวลาที่เป็นเนื้อเดียวกัน

3. ผลลัพธ์

อุณหภูมิร่างกายหลักและระดับฮีสตามีนในพลาสมาไม่แตกต่างกันอย่างมีนัยสำคัญระหว่างหนูทดลองชนิดไวด์ (WT) และหนู DAO KO หลังการทดสอบฮีสตามีนทางปากและใต้ผิวหนังโดยมีและไม่มีการบาดเจ็บของไตเฉียบพลันหรือการใช้สารยับยั้ง HNMT การรักษาด้วย DAO ของมนุษย์ชนิดรีคอมบิแนนท์ลดพื้นที่เฉลี่ยใต้เส้นโค้ง (AUC) สำหรับการสูญเสียอุณหภูมิแกนกลางของร่างกายลง 63 เปอร์เซ็นต์ (p=0.002) และคะแนนทางคลินิกลง 88 เปอร์เซ็นต์ (p<0.001). The AUC of the histamine concentration was reduced by 81%.

4. ข้อสรุป

การยับยั้งฮีสตามีนจากภายนอกไม่ได้เกิดจากการสลายตัวของเอนไซม์และการกรองของไต การรักษาด้วย DAO ของมนุษย์แบบรีคอมบิแนนท์ช่วยลดการสูญเสียอุณหภูมิแกนกลางของร่างกายที่เกิดจากฮีสตามีนอย่างมาก และความเข้มข้นของฮีสตามีน และป้องกันการเกิดอาการทางคลินิกที่รุนแรง

คำหลัก

เอมีนออกซิเดส (ประกอบด้วยทองแดง) · ฮีสตามีน เอ็น-เมทิลทรานสเฟอเรส · การบาดเจ็บของไตเฉียบพลัน · การเผาผลาญอาหาร · แทครีน · เมโทพรีน · อุณหภูมิของร่างกาย

คลิกที่นี่เพื่อซื้อผลิตภัณฑ์เสริมอาหาร Cistanche

การแนะนำ

มากกว่าร้อยละ 95 ของฮีสตามีนทั้งหมดในมนุษย์ถูกเก็บไว้ในแมสต์เซลล์และเบโซฟิล เช่นเดียวกับสัตว์เลี้ยงลูกด้วยนมหลายชนิด ในมนุษย์ ความหนาแน่นของแมสต์เซลล์จะสูงที่สุดในระบบทางเดินอาหาร ผิวหนัง และปอด [1] และด้วยเหตุนี้ อวัยวะเหล่านี้จึงแสดงอาการที่เกิดจากฮีสตามีนในโรคโดยมีส่วนร่วมอย่างชัดเจนจากการกระตุ้นแมสต์เซลล์ ความเข้มข้นของฮีสตามีนคั่นระหว่างหน้าในท้องถิ่นหลังจากการสลายตัวอย่างเฉียบพลันสามารถสูงถึง 10–1000 µMs [2, 3, ดูแหล่งข้อมูลออนไลน์] ในคน เช่นเดียวกับสุนัขและสุกร ความเข้มข้นของฮีสตามีนในพลาสมาปกติต่ำกว่า 1 นาโนกรัม/มิลลิลิตร (9 นาโนโมลาร์) และอาการจะเริ่มพัฒนาที่ระดับนาโนกรัมต่อมิลลิลิตร [4–7] ความดันเลือดต่ำที่มีนัยสำคัญโดยมีอัตราการเต้นของหัวใจเพิ่มขึ้นสามารถวัดได้ตั้งแต่ 5 ng/ml และเมื่อระดับเพิ่มขึ้นมากกว่า 10 ng/ml การพัฒนาของหลอดลม, ภาวะหัวใจเต้นผิดจังหวะ, ความดันเลือดต่ำอย่างรุนแรง และกล้ามเนื้อกระตุกของหลอดเลือดสามารถนำไปสู่ความผิดปกติของหลายระบบที่คุกคามชีวิตได้ [8, 9]. ฮีสตามีนไม่เพียงแต่เกี่ยวข้องกับการขยายตัวของหลอดเลือด การเพิ่มการซึมผ่านของหลอดเลือด ภาวะขาดออกซิเจน และการพัฒนาของหลอดเลือดบวม แต่ยังแสดงให้เห็นถึงการมีส่วนร่วมของการอักเสบที่มีอิทธิพลต่อระบบภูมิคุ้มกันแบบปรับตัวผ่านการรับสมัคร การสุก และการกระตุ้นเซลล์เอฟเฟกต์ภูมิคุ้มกัน นอกจากนี้ ยังมีบทบาทในระบบภูมิคุ้มกันโดยกำเนิดโดยการโต้ตอบกับเซลล์เดนไดรต์ เซลล์นักฆ่าตามธรรมชาติ และแกรนูโลไซต์ [10, 11]

ความเข้มข้นของฮีสตามีนพื้นฐานในหนูและหนูแรทอยู่ระหว่าง 20 และ 100 ng/ml เมื่อวัดโดยใช้วิธีการที่เชื่อถือได้ ดังนั้นจึงสูงกว่าที่พบในมนุษย์หลายเท่า [6, 7] ยังไม่ชัดเจนว่าระดับฮีสตามีนสูงเหล่านี้มีบทบาททางสรีรวิทยาหรือไม่ สัตว์ฟันแทะสามารถต้านทานฮีสตามีนได้อย่างฉาวโฉ่ด้วยปริมาณ 50 เปอร์เซ็นต์ (LD50) ในหนูเมาส์สายพันธุ์ต่างๆ ที่ 3,000–4,000 และ 400–500 มก./กก. หลังการให้ทางปากและทางหลอดเลือดดำ ตามลำดับ [12, 13] ความเข้มข้นของฮีสตามีนสูงสุดในพลาสมาหลังการให้ยาลูกกลอน 400 มก./กก. ในหนูเมาส์ขนาด 20 กรัมจะอยู่ที่ประมาณ 8 มก./มล. โดยสมมติว่าปริมาตรในพลาสมาเท่ากับ 1 มล. เมื่อกระตุ้นให้เกิดภาวะภูมิแพ้ในมนุษย์โดยการควบคุมตัวต่อต่อย ความเข้มข้นของฮีสตามีน 140 นาโนกรัม/มล. มีความสัมพันธ์กับความดันเลือดต่ำที่คุกคามชีวิตอย่างรุนแรง [14] ฮีสตามีนถูกเผาผลาญและปิดการใช้งานอย่างไร?

ฮีสตามีนแสดงการจับกับโปรตีนในพลาสมาเฉลี่ย 13 เปอร์เซ็นต์ และถูกกรองอย่างอิสระในไต [15] อัตราการกรองของไต (GFR) ในทางทฤษฎีสามารถมีส่วนช่วยประมาณร้อยละ 15–20 ต่อครึ่งชีวิตของ 3–4 นาทีที่พบในอาสาสมัครที่มีสุขภาพดี [5, ดูแหล่งข้อมูลออนไลน์] ที่ GFR ปกติ 100 มล./นาที และปริมาตรพลาสมา 3,000 มล. ครึ่งชีวิตของฮีสตามีนจะเท่ากับ 20 นาที ในหนูทดลอง ค่า GFR ปกติ 10 µl/min/g จะส่งผลให้ฮีสตามีครึ่งชีวิตลดลง 3 นาที [16 ดูแหล่งข้อมูลออนไลน์] อย่างไรก็ตาม ฮีสตามีนแสดงอัตราการสกัดที่สูงในไต ซึ่งเกินอัตราตาม GFR และการสกัดนี้ถูกกำหนดให้ดูดซึมและดูดซึมกลับเข้าไปในเซลล์ท่อใกล้เคียงผ่านสารขนส่งไอออนบวกอินทรีย์ 2 (OCT2) ตามด้วยการยับยั้งการทำงานของเอนไซม์ [17 ดู ด้านล่าง]. ในมนุษย์น้อยกว่า 1 เปอร์เซ็นต์ของสารกัมมันตภาพรังสีที่ฉีดเข้าไปในปัสสาวะภายใน 6 ชั่วโมงแรก [18] อัตราการขับฮีสตามีนในมนุษย์ต่ำ ซึ่งพบในสุนัขและแมวด้วย ได้รับการยืนยันจากผู้อื่น [19] ในเนื้อเยื่อของหนูและหนู กว่า 50 เปอร์เซ็นต์ของกัมมันตภาพรังสีที่ฉีดเข้าไปจะพบในไต และน้อยกว่า 2 เปอร์เซ็นต์ในรูปของฮีสตามีน 30 นาทีหลังการให้ทางหลอดเลือดดำ [20] ไตยังเป็นอวัยวะที่มีกัมมันตภาพรังสีสูงที่สุดหลังจากให้สารฮีสตามีนในปริมาณสูงในหนู [21] ตัวขนส่ง OCT2 มีการแสดงออกอย่างมากในไตของมนุษย์และสัตว์ฟันแทะ และอาจมีหน้าที่ในการสกัดฮีสตามีนจากช่องพลาสมาและการดูดซึมกลับของฮีสตามีนในปัสสาวะหลักที่กรองเข้าไปในเซลล์ท่อใกล้เคียง [22 ดูด้านล่าง]

การขนส่งอย่างรวดเร็วของฮีสตามีนนอกเซลล์จากของเหลวคั่นระหว่างหน้าหลังจากปล่อยจากแมสต์เซลล์หรือพลาสมาไปยังช่องอื่น ๆ ที่ห่างจากเซลล์บุผนังหลอดเลือดจะเป็นอีกหนึ่งความเป็นไปได้ในการยับยั้งฮีสตามีน สิ่งนี้อาจยับยั้งการเหนี่ยวนำของความดันเลือดต่ำอย่างรุนแรงและการรั่วไหลของหลอดเลือดผ่านการส่งสัญญาณ endothelial nitric oxide synthase (NOS) และจับกับตัวรับฮีสตามีน [23–25] อย่างไรก็ตาม ไม่มีข้อมูลสัตว์ในสัตว์ทดลองที่ศึกษาอัตราการขนส่งฮีสตามีนจากการไหลเวียนของระบบเข้าสู่เซลล์บุผนังหลอดเลือดหรือเซลล์เนื้อเยื่อ ในการศึกษาในหลอดทดลองหลายการศึกษา ฮีสตามีนถูกขนส่งแบบสองทิศทางโดยใช้ OCT2 ที่มีสัมพรรคภาพต่ำ ความจุสูง และ OCT3 [22, 26, 27] ฮีสตามีนเป็นสารตั้งต้นที่ดีเยี่ยมสำหรับตัวขนส่ง OCT2 และ OCT3 ของหนู ซึ่งแสดงประสิทธิภาพการขนส่งที่สูงกว่าเมื่อเทียบกับโปรตีน OCT ของมนุษย์ที่เทียบเท่า [26]

เฮอร์บา ซิสแทนเช่

เมื่อใช้ฮิสตามีนกัมมันตภาพรังสีที่มีความเข้มข้นต่ำในหนูทดลอง เมทิลเลชันผ่านฮิสตามีน-เอ็น-เมทิลทรานสเฟอเรส (HNMT) ดูเหมือนจะเป็นเส้นทางหลักของการยับยั้ง อย่างไรก็ตาม ความท้าทายของหนูที่มีปริมาณฮีสตามีนสูงจะเปลี่ยนเมตาบอลิซึมเป็นกรดอิมิดาโซลอะซีติก (IMAA) และไรโบไซด์คอนจูเกต โดยตรวจพบอนุพันธ์เมทิลเลตเพียงเล็กน้อย [28–30] ความเข้มข้นของฮีสตามีนในเลือดพื้นฐานที่เพิ่มขึ้นห้าเท่าในหนูที่น็อคเอาต์ HNMT สนับสนุนข้อมูลเหล่านี้ [31] กรดอิมิดาโซลอะซิติกถูกสร้างขึ้นจากปฏิกิริยาออกซิเดชันของฮีสตามีนโดยไดเอมีนออกซิเดส (DAO) ซึ่งปล่อยอิมิดาโซลอะซีตัลดีไฮด์ ซึ่งจะถูกแปลงเป็น IMAA และอนุพันธ์ของไรโบไซด์ โดยส่วนใหญ่อยู่ในตับ ปฏิกิริยาออกซิเดชันของฮีสตามีนผ่าน DAO ดูเหมือนจะมีบทบาทมากขึ้นในการสลายตัวของฮีสตามีนหลังจากการท้าทายทางปากในหนูทดลอง ซึ่งไม่น่าแปลกใจเมื่อพิจารณาว่าการแสดงออกของ DAO ในหนูนั้นสูงเฉพาะในทางเดินอาหารเท่านั้น [30] เมื่อมีการท้าทายฮีสตามีนทางปากในมนุษย์ การปนเปื้อนออกซิเดชันผ่าน DAO เป็นเส้นทางแคตาบอลิกที่โดดเด่นโดยมี IMAA เป็นสารเมแทบอไลต์หลักในปัสสาวะ [18]

Diamine oxidase เป็น amine oxidase ที่มีทองแดงและเป็นหนึ่งในสองเอนไซม์ที่สามารถยับยั้งฮีสตามีนได้ [32] ในเนื้อเยื่อที่เลือก ส่วนใหญ่เป็นลำไส้เล็กและเซลล์ท่อไตใกล้เคียง DAO อยู่ในโครงสร้างเม็ดภายในเซลล์ที่ไม่ชัดเจนและจับกับนอกเซลล์กับเฮปาแรนซัลเฟตโปรตีโอไกลแคน ในขณะที่ HNMT มีอยู่เฉพาะในไซโตพลาสซึม [33, 34] การแสดงออกของ HNMT แพร่กระจายไปทั่วร่างกาย โดยระดับที่สูงขึ้นจะพบในระบบประสาทส่วนกลาง กระเพาะปัสสาวะ หัวใจ ไต ตับ ปอด และในเนื้อเยื่อไขมัน

หลังจากการยับยั้ง DAO โดยใช้ aminoguanidine แกะแสดงอาการทางคลินิกอย่างกว้างขวางของความเป็นพิษของฮีสตามีนหลังจากการท้าทายของฮีสตามีนทางปากเมื่อเทียบกับกลุ่มควบคุมที่ไม่มีการรักษาล่วงหน้าของ aminoguanidine [35] การทดลองที่คล้ายกันในสุกรส่งผลให้เกิดการเจ็บป่วยและการตายอย่างรุนแรงในสัตว์ที่ได้รับการรักษาด้วย aminoguanidine ล่วงหน้า และต่อมาถูกท้าทายด้วยสารฮีสตามีนทางปาก [36] ค่ามัธยฐานของความเข้มข้นของฮีสตามีนในพลาสมาเพิ่มขึ้น 20-เท่าตัวในสุกรที่มีการยับยั้ง DAO การรักษาหนูด้วยอะมิโนกัวนิดีนตามด้วยการให้สารฮีสตามีนทางปากเพิ่ม IMAA ในปัสสาวะและลดความเข้มข้นของฮีสตามีนประมาณห้าเท่า [37] ข้อมูลเหล่านี้บ่งชี้ว่า DAO มีบทบาทสำคัญในการย่อยสลายฮีสตามีนที่ได้รับจากภายนอก

ในหนูทดลอง การรักษาด้วย aminoguanidine ช่วยเพิ่มความเข้มข้นของฮีสตามีนในลำไส้อย่างมากหลังจากให้สารฮีสตามีนทางหลอดเลือดดำ [30] อย่างไรก็ตาม aminoguanidine ไม่ใช่ตัวยับยั้ง DAO ที่เฉพาะเจาะจง แต่บล็อกเอ็นไซม์ NOS ทั้งสามตัวด้วย และดูเหมือนจะขัดขวางการขนส่งฮีสตามีนในเลือดไปยังเนื้อเยื่อ [38, 39] การให้ burimamide ซึ่งเป็น histamine receptor 2 antagonist แสดงผลที่เป็นอันตรายด้วยอัตราการตายที่เพิ่มขึ้นในแบบจำลองช็อกการไหลเวียนเลือดในหนูแรท อย่างไรก็ตาม ในเวลาเดียวกัน มีการเผยแพร่ว่าบูริมาไมด์เป็นสารยับยั้ง DAO ที่มีศักยภาพ [40, 41] ในสุนัข บูริมาไมด์ทำให้ความเข้มข้นของฮีสตามีนเฉลี่ยในพลาสมาเพิ่มขึ้น 17-เท่าตัว และความดันเลือดเฉลี่ยลดลงอย่างมาก [42] เชื่อกันว่าผลกระทบนี้เกิดจากการกระตุ้นแมสต์เซลล์ที่เป็นไปได้

ในทำนองเดียวกัน บทบาทของ HNMT ได้รับการศึกษาโดยใช้เมทิลฮิสตามีนเป็นตัวยับยั้ง HNMT แต่เมทิลฮีสตามีนยังเป็นสารตั้งต้นที่ยอดเยี่ยมสำหรับ DAO [43] Amodiaquine และ quinacrine เป็นตัวยับยั้ง HNMT ที่มีศักยภาพ [44–46] แต่ยังยับยั้ง DAO ด้วยความเข้มข้นของการยับยั้ง 50 เปอร์เซ็นต์ (IC50) ที่ประมาณ 500 nM [47, ข้อมูลที่ไม่ได้เผยแพร่] ดังนั้น ข้อมูลที่ได้รับโดยใช้สารยับยั้งซึ่งมักใช้ที่ความเข้มข้นสูง ต้องตีความด้วยความระมัดระวัง เนื่องจากผลกระทบนอกเป้าหมายทั้งที่ทราบและไม่ทราบมีแนวโน้มและสามารถบิดเบือนความเกี่ยวข้องทางสรีรวิทยาของการศึกษาในสัตว์ทดลองได้อย่างมีนัยสำคัญ

การศึกษาเมแทบอลิซึมอาจบ่งชี้ถึงความสำคัญของเอนไซม์ทั้งสองในการย่อยสลายฮีสตามีน แต่แคแทบอลิซึมของฮีสตามีนอาจแยกออกจากผลทางสรีรวิทยาหรือพยาธิสรีรวิทยา ความเข้มข้นของฮีสตามีนแบบแยกส่วนอาจมีความสำคัญและเมแทบอลิซึมอาจลดลง

ดังนั้นเราจึงตัดสินใจใช้เมาส์ DAO knock-out (KO) เพื่อศึกษาบทบาทของ DAO ในการย่อยสลายฮีสตามีนจากภายนอก เป้าหมายหลักประการที่สองคือการพัฒนาแบบจำลองของเมาส์ที่มีความไวของฮีสตามีนเพิ่มขึ้น เพื่อให้เราสามารถศึกษาบทบาทของฮีสตามีนในสายพันธุ์กลายพันธุ์ทางพันธุกรรมต่างๆ ได้ดีขึ้น และเพื่อทดสอบประสิทธิภาพของ DAO ของมนุษย์ที่เกิดรีคอมบิแนนต์ในแบบจำลองความท้าทายของฮีสตามีน

แคปซูล Cistanche

วัสดุและวิธีการ

โมเดลสัตว์

ทำการทดลองโดยใช้หนู C57BL6/J Aoc1tm1b(EUCOMM)Hmgu (DAO) KO อายุ 10–18-สัปดาห์ และเพื่อนร่วมครอกป่า (WT) เอ็มบริโอเฮเทอโรไซกัสถูกจัดเตรียมโดย European Mouse Mutant Archive, มิวนิก, เยอรมนี และฝังลงในหนูทดลอง C57BL6/N ที่ตั้งครรภ์เทียม ลูกหลานของหนู Heterozygous C57BL6/J ได้รับการยืนยันโดยใช้ PCR (ดูแหล่งข้อมูลออนไลน์) และนำไปขยายพันธุ์หนู DAO KO ต่อไปที่แผนกวิจัยชีวการแพทย์ มหาวิทยาลัยการแพทย์เวียนนา โดยสัตว์ทดลอง GZ 66009/{ {14}}WF/V/3b/2016 การทดลองในสัตว์ทั้งหมดดำเนินการตามโปรโตคอล GZ 66009/0258- V/3b/2019 โปรโตคอลการทดลองได้รับการอนุมัติจากกระทรวงศึกษาธิการ วิทยาศาสตร์ และการวิจัยของออสเตรีย สัตว์ถูกเก็บไว้ที่รอบกลางวันและกลางคืน 12:12 ชั่วโมงที่ 22 องศาโดยให้น้ำและอาหารเพียงพอ สำหรับการวัดอุณหภูมิแบบไม่รุกล้ำ ทรานสปอนเดอร์ (IPTT-300, BioMedic Data Systems Inc., USA) ถูกฝังเข้าใต้ผิวหนัง 2 สัปดาห์ก่อนการทดลองโดยใช้ยาสลบไอโซฟลูเรนสั้นๆ ทรานสปอนเดอร์จะวัดอุณหภูมิสามครั้งภายในหนึ่งวินาที และค่าเฉลี่ยของการวัดเหล่านี้จะถูกบันทึกจากภายนอกกรงโดยใช้เครื่องอ่าน ค่าเฉลี่ยนี้จะใช้สำหรับการคำนวณต่อไป ทรานสปอนเดอร์ใต้ผิวหนังเหล่านี้ใช้เพื่อหลีกเลี่ยงการจัดการกับสัตว์มากเกินไป และเพื่อป้องกันการบาดเจ็บจากการใส่หัววัดอุณหภูมิทางทวารหนักซ้ำๆ [48] ในสัตว์หลายชนิดรวมถึงสัตว์ฟันแทะ การแสดงให้ฮีสตามีนลดอุณหภูมิของร่างกายและถือเป็นการอ่านค่าที่ทันสมัยที่สุดสำหรับผลกระทบของฮีสตามีน [49, 50] ในช่วงเวลาสังเกต อาการทางคลินิกได้รับการประเมินโดยสัตวแพทย์ผู้มีประสบการณ์ตามคะแนนภูมิไวเกินที่เผยแพร่ [51] คะแนนอยู่ระหว่าง 0 (ไม่มีอาการ) ถึง 1 (ถูและเกาศีรษะและจมูก), 2 (กิจกรรมที่ลดลงพร้อมกับอัตราการหายใจที่เพิ่มขึ้นและ/หรือกิจกรรมที่ลดลง, อาการบวมรอบปากและตา), 3 (การหายใจลำบาก, ตัวเขียวบริเวณหาง และปาก, หายใจดังเสียงฮืด ๆ) และ 4 (ไม่มีกิจกรรมใด ๆ หลังจากแหย่หรือสั่นและชัก). คะแนน 5 หมายถึงเสียชีวิต การทดลองท้าทายทั้งหมดเริ่มขึ้นระหว่างเวลา 9:00 น. ถึง 11:00 น. เพื่อหลีกเลี่ยงการเปลี่ยนแปลงที่ขึ้นกับเวลาของวัน [52]

การตั้งค่าการทดลองทั่วไป

ใช้สารทั้งหมดในปริมาณ 5 มล./กก. Propranolol (P0884, Sigma-Aldrich, Austria) ถูกละลายในน้ำเกลือและฉีดเข้าช่องท้อง (ip) ที่ความเข้มข้น 2 มก./กก. 20 นาที ก่อนการทดสอบฮีสตามีนเพื่อเพิ่มความไวต่อฮีสตามีน [53] ฮีสตามีนไดไฮโดรคลอไรด์ (H7250, Sigma-Aldrich, ออสเตรีย) ถูกละลายใน H2O ที่กลั่นสองครั้ง (dd) และเจือจางเพิ่มเติมในน้ำเกลือ ความเข้มข้นของฮีสตามีนที่ระบุทั้งหมดอ้างอิงถึงเบสของฮีสตามีน (111.15 ดาลตัน)

1. การให้ฮีสตามีนทางปากและใต้ผิวหนัง

หนูถูกอดอาหารเป็นเวลาทั้งหมด 60 นาที หลังจากอดอาหาร 40 นาที โพรพราโนลอลถูกบริหารและหลังจากนั้น 20 นาทีให้ฮีสตามีนที่ความเข้มข้น 30 มก./กก. ต่อ os (po) โดยใช้ทางปากทางปาก สำหรับหนูทดลองแบบจำลองการทดสอบใต้ผิวหนัง (sc) ได้รับฮิสตามีนที่ความเข้มข้น 50 มก./กก. โดยไม่ใช้โพรพราโนลอล หรือ 5 มก./กก. ด้วยโพรพราโนลอล สำหรับการตรวจวัดความเข้มข้นของฮีสตามีนในพลาสมา กลุ่มย่อยของหนูถูกทำให้สลบที่จุดเวลาต่างๆ กันหลังจากการท้าทายฮีสตามีนโดยใช้ไซลาซีน 10 มก./กก. และคีตามีน 100 มก./กก. พลาสมาซิเตรตถูกรวบรวมจากหนูที่ดมยาสลบโดยใช้การเจาะหัวใจ ใช้หนูหนึ่งถึงห้าตัวต่อจุดเวลาและจีโนไทป์

2. การยับยั้ง histamine‑N‑methyltransferase (HNMT) ที่เกิดขึ้นพร้อมกัน

Metoprine (M338835, Toronto Research Chemicals, แคนาดา) ละลายในกรดแลคติค 10 เปอร์เซ็นต์ (L1875, Sigma-Aldrich, ออสเตรีย) เจือจางเพิ่มเติมในน้ำเกลือและให้ไอพีที่ 3 มก./กก. 1 ชั่วโมงก่อนทดสอบด้วยฮีสตามีน 5 มก./กก. Tacrine (A79922, Sigma-Aldrich, ออสเตรีย) ถูกละลายใน ddH2O, เจือจางเพิ่มเติมในน้ำเกลือ, และต่อมาใช้ 10 มก./กก. ip 1 ชั่วโมงก่อน 25 มก./กก. ฮิสตามีน sc และ 2 มก./กก. โพรพราโนลอล มีการใช้ Tacrine ip ความเข้มข้น 2 มก./กก. ร่วมกับฮีสตามีน 30 มก./กก. ร่วมกับโพรพราโนลอล 2 มก./กก.

Cistanche มาตรฐาน

3. การเหนี่ยวนำให้เกิดการบาดเจ็บของไตเฉียบพลัน (AKI) ก่อนการทดสอบฮีสตามีน

Folic acid (F7876, Sigma-Aldrich, Austria) was reconstituted in ddH2O, further diluted in saline, and applied i.p. at a concentration of 100 mg/kg 48 h before challenge with 5 mg/kg s.c. histamine and 2 mg/kg propranolol. The degree of acute kidney injury was estimated using plasma creatinine values. As a cut-off for inclusion, a creatinine value of at least threefold above the mean baseline value was used as described [54]. Baseline plasma creatinine concentrations of 0.11 and 0.17 mg/dl were measured in two mice and therefore an inclusion cut-off of>เลือก 42 มก./ดล. พลาสมาซิเตรตที่ดึงออกมาผ่านการเจาะหัวใจถูกนำมาใช้เพื่อวัดค่าครีเอตินินโดยใช้เครื่องวิเคราะห์ Cobas (เครื่องวิเคราะห์ Cobas C311, Roche, สวิตเซอร์แลนด์) ในการตรวจสอบความเข้มข้นของฮีสตามีนในพลาสมาที่จุดเวลาต่างๆ กันระหว่างการทดสอบ SC ฮีสตามีนด้วยโพรพราโนลอลในการบาดเจ็บของไตเฉียบพลัน หนู 2-4 ตัวต่อจุดเวลาจะถูกดมยาสลบ และเก็บซิเตรตพลาสมาโดยการเจาะหัวใจ

4. DAO ช่วยชีวิตหลังการบริหารฮีสตามีน

Recombinant human (rh) DAO ที่มีรูปแบบการจับกับ heparin ที่กลายพันธุ์ (อธิบายไว้ใน Gludovacz et al. [55]) ฉีดเข้าเส้นเลือดดำ (iv) ที่ความเข้มข้น 4 มก./กก. 40 นาที ก่อนใช้ 2 มก./กก. propranolol และ 60 นาทีก่อนการทดสอบด้วยฮิสตามีน 5 มก./กก.

สำหรับการตรวจหาความเข้มข้นของฮีสตามีนและ DAO ในพลาสมา หนูได้รับการรักษาด้วย DAO 4 มก./กก. หรือบัฟเฟอร์ iv 60 นาทีก่อนทดสอบด้วยฮิสตามีน 5 มก./กก. ร่วมกับโพรพราโนลอล 2 มก./กก. หนูถูกดมยาสลบในช่วงเวลาต่างๆ พลาสมาซิเตรตถูกรวบรวมโดยใช้การเจาะหัวใจจากหนูสองถึงสามตัวต่อจุดเวลา เก็บเลือดในโซเดียมซิเตรต 3.8 เปอร์เซ็นต์ และส่วนหนึ่งผสมกับไดมินาซีน-อะซีตูเรตทันที (D7770, Sigma-Aldrich, ออสเตรีย) ทำให้ได้ความเข้มข้นสุดท้ายที่ 10 µM เพื่อยับยั้งการสลายตัวของฮีสตามีนโดย rhDAO

การวิเคราะห์การแสดงออกของยีน

ตัวอย่างเนื้อเยื่อถูกแช่แข็งด้วยแรงกระแทกในไนโตรเจนเหลว และได้รับ RNA ทั้งหมดโดยใช้ FavorPrep Tissue Total RNA Kit (FATRK001, Favorgen, ไต้หวัน) หลังจากการทำให้เนื้อเยื่อเป็นเนื้อเดียวกันโดยใช้ท่อสลาย (Lysing Matrix E, MP Biomedicals, เยอรมนี) บนเครื่อง Precellys 24 (Bertin Instruments ประเทศฝรั่งเศส) การถอดความแบบย้อนกลับดำเนินการโดยใช้ชุดการสังเคราะห์ OneScript Plus cDNA (G236, ABM Good, แคนาดา) สำหรับปริมาณ PCR BrightGreen Express 2× Mastermix (MasterMix-EL, ABM Good, แคนาดา) ถูกนำมาใช้ Exon spanning primer สำหรับ DAO, HNMT และ histidine decarboxylase (HDC) ได้รับการออกแบบโดยใช้ซอฟต์แวร์ Primer3 (แหล่งข้อมูลออนไลน์ตารางที่ 1) ยีนการดูแลทำความสะอาด RPLP0 ใช้สำหรับการทำให้เป็นมาตรฐาน [56]

รอยเปื้อนตะวันตก

สำหรับการวิเคราะห์ Western blot ตัวอย่างเนื้อเยื่อแช่แข็งถูกสลายใน 20 mM K-phosphate buffer (pH 7.2) โดยใช้ lysing tubes (Lysing Matrix E tubes, MP Biomedicals, Germany) บน Precellys 24 (Bertin Instruments, ฝรั่งเศส) . ความเข้มข้นของโปรตีนทั้งหมดถูกกำหนดโดยใช้ QuantiPro BCA Assay Kit (QPBCA-1KT, Sigma, Austria) สำหรับ Polyacrylamide gel electrophoresis โปรตีนทั้งหมด 40 µg และ 40 ng recombinant murine DAO (จัดทำโดย EG, University of Natural Resources and Life Sciences, Vienna, Austria โดยใช้วิธีการที่อธิบายไว้ใน [57]) ถูกแยกออกโดยใช้ Tris–glycine gel 12 เปอร์เซ็นต์ ( 4561043, Bio-Rad, สหรัฐอเมริกา) โมโนโคลนอล ABP1 แอนติบอดี (sc-515908, ซานตาครูซ, สหรัฐอเมริกา) ถูกใช้สำหรับการตรวจจับ DAO ที่ความเข้มข้น 0.4 µg/ml และใช้โมโนโคลนอล GAPDH แอนติบอดี (2118, Cell Signal Technology, USA) เป็นตัวโหลด ควบคุมด้วยการเจือจาง 1:2000 โมโนโคลนอลแอนติบอดี IgG-HRP ต้านหนูเมาส์ (A2554, Sigma Aldrich, ออสเตรีย) และแอนติบอดีต่อต้านกระต่าย IgG-HRP (A0545, Sigma Aldrich, ออสเตรีย) ถูกใช้เป็นแอนติบอดีตรวจจับที่เจือจาง 1:40,000 ได้รับรูปภาพโดยใช้ Clarity Max Western ECL Substrate (1705062, BioRad, USA) บน ChemiDoc Imaging System (17001401, Bio-Rad, USA)

ซิสแทนเช ตูบูโลซา

การวัดกิจกรรม DAO

กิจกรรม Diamine oxidase ของเนื้อเยื่อที่เป็นเนื้อเดียวกันและการยับยั้งโดย methoprene และ tacrine ถูกวัดตามที่อธิบายไว้ [58] ตัวอย่างเนื้อเยื่อที่แช่แข็งถูกแยกสลายใน K-phosphate buffer 20 mM (pH 7.2) โดยใช้ท่อสลายบน Precellys 24 ความเข้มข้นของโปรตีนทั้งหมดถูกกำหนดโดยใช้ QuantiPro BCA Assay Kit และสารสกัดโปรตีนทั้งหมด 500 µg ของเนื้อเยื่อต่างๆ ถูกบ่มเป็นเวลา 120 นาที ออร์โธ-อะมิโนเบนซาลดีไฮด์ (oABA) และ ddH2O หรือ 200 µM แคดาเวรีน (CAD) อย่างใดอย่างหนึ่ง เดลต้า-1-พิเพอริดีน ซึ่งเป็นผลิตภัณฑ์ autocyclization ของ CAD หลังจากการปนเปื้อนโดย DAO ควบแน่นด้วย oABA ก่อตัวเป็นฟลูออโรฟอร์ ซึ่งสามารถวัดได้ที่ EX440/30 และ EM620/40 นาโนเมตร สำหรับการพิจารณาการยับยั้ง DAO นั้น rhDAO ถูกบ่มล่วงหน้าด้วยเมโธพรีนและทาไครน์ที่ความเข้มข้นต่างกันเป็นเวลา 30 นาที และวัดตามที่อธิบายไว้ข้างต้น

สำหรับการกำหนดกิจกรรมของ DAO นั้น เนื้อเยื่อโฮโมจีเนตที่มีความเข้มข้นของโปรตีน 200 µg/ml ผสมกับ HRP (ความเข้มข้นสุดท้าย 1.2 µg/ml, P6782, Sigma-Aldrich, ออสเตรีย) และ aminoguanidine (ความเข้มข้นสุดท้าย 10 µM, 396494, Sigma-Aldrich , ออสเตรีย) หรือ K-ฟอสเฟตบัฟเฟอร์ (pH 7.2) ถูกเติมและบ่มเป็นเวลา 15 นาทีที่ 37 องศา Amplex red™ (ความเข้มข้นสุดท้าย 100 µM, A12222, Thermo Scientific, USA) ถูกเติมและปฏิกิริยาถูกเริ่มต้นโดยการเพิ่มความเข้มข้นสุดท้าย putrescine 200 µM (51799, Sigma-Aldrich, ออสเตรีย) โพแทสเซียมฟอสเฟตบัฟเฟอร์ (pH 7.2) ถูกใช้เป็นตัวควบคุมเชิงลบ ตัวอย่างถูกบ่มที่อุณหภูมิ 37 องศา และวัดทุกๆ 10 นาที เป็นเวลา 120 นาที โดยใช้ EX550 และ EM590 นาโนเมตร สัญญาณเฉพาะของ DAO คำนวณโดยการลบตัวอย่างด้วยอะมิโนกัวนิดีน ซึ่งเป็นสารยับยั้ง DAO ที่มีศักยภาพและเปลี่ยนแปลงไม่ได้ จากตัวอย่างที่มี K-phosphate buffer

สำหรับการวัดกิจกรรม DAO ในพลาสมาในหนูที่ได้รับ iv Rhoda การทดสอบแบบไฮบริดโดยใช้โมโนโคลนอลแอนติบอดีจากโคลนเซลล์ไฮบริโดมาต่อต้าน DAO 8/119 ที่จัดทำโดย Prof. Quaroni (มหาวิทยาลัยคอร์เนล อิทากา นิวยอร์ก) และ Amplex red™ ถูกนำมาใช้ แผ่นเรืองแสงสีดำที่จับโปรตีนสูง (475,515, Thermo Scientific Nunc, เดนมาร์ก) ถูกเคลือบด้วย 100 µl ของ 5 µg/ml anti-DAO 8/119 ในบัฟเฟอร์คาร์บอเนต-ไบคาร์บอเนต 50 มิลลิโมลาร์ ( C3041, Sigma-Aldrich, ออสเตรีย) บ่มค้างคืนที่ 4 องศา และต่อมาถูกบล็อกด้วย BSA 120 µl 1 เปอร์เซ็นต์ (A4503, Sigma-Aldrich, ออสเตรีย) เป็นเวลา 50 นาทีที่อุณหภูมิห้อง หลังจากบล็อกตัวอย่างพลาสมาและมาตรฐาน 100 µl แล้ว ก่อนหน้านี้เจือจาง 1:10 ใน PBS ถูกเติมและบ่มเป็นเวลา 1 ชั่วโมงที่อุณหภูมิห้อง หลังจากนั้น 90 ไมโครลิตร ฮอสแรดิช เปอร์ออกซิเดส (ความเข้มข้นสุดท้าย 1.2 ไมโครกรัม/มิลลิลิตร) และแอมเพล็กซ์ เรด™ (ความเข้มข้นสุดท้าย 100 ไมโครโมลาร์) ใน PBS ที่มี BSA 0.1 เปอร์เซ็นต์ถูกเติม และปฏิกิริยาถูกเริ่มต้นโดยการเติม 10 ไมโครลิตร พุเตรสซีน (ความเข้มข้นสุดท้าย 200 ไมโครโมลาร์) หรือ PBS วัดการเรืองแสงที่ 37 องศาทุกๆ 5 นาทีเป็นเวลา 120 นาทีโดยใช้ EX550 และ EM590 นาโนเมตร น้ำยาซักผ้าคือทวีน 0.1 เปอร์เซ็นต์-20 (P1379, Sigma-Aldrich, ออสเตรีย) ใน PBS เส้นโค้งมาตรฐาน 3–30 ng/ml rhDAO ถูกเตรียมในพลาสมาของเมาส์ การวัดทั้งหมดดำเนินการซ้ำกัน

การวัดฮีสตามีน

พลาสมาซิเตรตที่มีไดมินาซีน-อะซีตูเรต 10 µM (D7770, Sigma-Aldrich, ออสเตรีย) ถูกนำมาใช้เพื่อวัดความเข้มข้นของฮีสตามีนโดยใช้ชุดไดนามิกไดนามิกฟลูออเรสเซนซ์ที่แก้ไขเวลา (HTRF) ฮิสตามีนที่เป็นเนื้อเดียวกัน (62HTMDPET, Cisbio, ฝรั่งเศส) ชุดนี้ใช้ตามคำแนะนำของผู้ผลิต กราฟมาตรฐานฮีสตามีนในพลาสมาแบบรวมของหนูเมาส์ C57Bl/6J ถูกใช้สำหรับการหาปริมาณ ความเข้มข้นของฮีสตามีนทั้งหมดอ้างอิงถึงเบสของฮีสตามีน และการวัดทั้งหมดดำเนินการซ้ำกัน

การวิเคราะห์ทางสถิติ

การวิเคราะห์ทางสถิติดำเนินการโดยใช้ GraphPad Prism เวอร์ชัน 8.40 (GraphPad Software Inc. ซานดิเอโก) นัยสำคัญทางสถิติสำหรับความแตกต่างของกิจกรรม DAO ในเนื้อเยื่อที่เป็นเนื้อเดียวกันถูกคำนวณโดยใช้ ANOVA ที่วัดซ้ำด้วยการแก้ไข Geisser – Greenhouse พื้นที่ใต้เส้นโค้ง (AUC) จากการวัดอุณหภูมิร่างกายส่วนแกนกลางแต่ละส่วนและคะแนนทางคลินิกระหว่างการทดลองถูกนำมาเปรียบเทียบโดยใช้การทดสอบทีสองด้านที่ไม่มีการจับคู่โดยไม่มีการแก้ไขของเวลช์ เปรียบเทียบความเข้มข้นของฮีสตามีนในพลาสมาระหว่างกลุ่มกับการวิเคราะห์ความแปรปรวนแบบสองทาง สำหรับการเปรียบเทียบความเข้มข้นของฮีสตามีนในพลาสมาหลังการทดสอบ SC ระหว่างหนูที่มีจีโนไทป์ต่างกัน โดยมีและไม่มีการบาดเจ็บของไตเฉียบพลัน และได้รับ DAO หรือบัฟเฟอร์อย่างใดอย่างหนึ่ง ข้อมูลจะถูกจัดกลุ่มเป็นช่วงๆ เพื่อพิจารณาค่าที่ขาดหายไปในแต่ละกลุ่มย่อย (จีโนไทป์: 5, 1{{ 14}}, 20, 30, 40, 45, 60 นาที การบาดเจ็บของไตเฉียบพลัน: 0, 10–15, 20–30, 40–45 และ 60 นาที DAO: 0, 10, 30 และ 45 นาที). การทดสอบ t-test แบบสองด้านแบบไม่จับคู่ถูกใช้เพื่อทดสอบความแตกต่างของความเข้มข้นของครีเอตินินในพลาสมาจากหนูที่ได้รับและไม่มีกรดโฟลิก 100 มก./กก. นัยสำคัญทางสถิติถูกกำหนดเป็นหน้า<0.05 in all tests.

สารสกัดจากซิสแตนช์

บทสรุป

หนู DAO KO แยกไม่ออกจากหนู WT โดยพื้นฐานแล้วโดยใช้การทดสอบฮีสตามีนทางปากและใต้ผิวหนังจากภายนอก การมีส่วนร่วมของ HNMT ในการยับยั้งฮีสตามีนที่นำไปสู่การลดอาการ โทโพโลยีอยู่ในระดับปานกลาง แต่ผลจากการยับยั้งแคลในเภสัชวิทยาอาจได้รับการพิจารณาเบื้องต้น ข้อมูลที่ใช้การยับยั้ง HNMT ด้วยเมโธพรีนแสดงให้เห็นแนวโน้มการมีส่วนร่วมของ DAO ภายนอกในการยับยั้งฮิสตามีน ไตมีส่วนร่วมในการสกัดฮีสตามีนอย่างรวดเร็วจากการไหลเวียน แต่หนูที่น่าพิศวง 509 Diamine oxidase ที่เพิ่มขึ้นเจ็ดเท่านั้นไม่ไวต่อยาทางปากหรือทางใต้ผิวหนัง… 1 3 ความเข้มข้นของฮีสตามีนไม่ได้แปลเป็นฟีโนไทป์ที่เกินจริงที่วัดโดยใช้อุณหภูมิกลาง การสูญเสียเป็นการอ่านค่าฟีโนไทป์ การใช้ DAO ของมนุษย์หรือของหนูที่เป็นรีคอมบิแนนท์อาจสนับสนุนหรือช่วยยกเลิกการมีส่วนร่วมของฮีสตามีนในสัตว์จำลองต่างๆ ที่สงสัยว่ามีการสลายตัวของแมสต์เซลล์พร้อมกับการปลดปล่อยฮีสตามีนจำนวนมากอย่างรวดเร็วหรือด้วยการเหนี่ยวนำที่เพิ่มขึ้นของเอนไซม์ฮิสทิดีนดีคาร์บอกซิเลสที่ตามด้วยการปล่อยของสังเคราะห์ใหม่ ฮีสตามีนเป็นเวลาหลายชั่วโมง การเพาะพันธุ์หนู KO สองเท่าจริงด้วยสำเนาที่ไม่ได้ใช้งานของทั้งยีน DAO และ HNMT หากเป็นไปได้ อาจคุ้มค่ากับการศึกษา หนู KO เดี่ยวของ DAO หรือ HNMT ไม่แสดงฟีโนไทป์ที่ชัดเจน [ข้อมูลที่ไม่ได้เผยแพร่, 31] ในทำนองเดียวกัน การทดสอบการมีส่วนร่วมของสารขนส่งฮีสตามีนหลักสองตัว ได้แก่ OCT2 และ OCT3 ในการเปลี่ยนแปลงฟีโนไทป์ที่เกิดจากฮีสตามีนอาจช่วยให้เราเข้าใจกลไกที่อยู่เบื้องหลังการพัฒนาอาการที่เกิดจากฮีสตามีนในสัตว์ฟันแทะได้ดีขึ้น และ ดังนั้นจึงอาจเป็นไปได้ในมนุษย์ด้วย แม้จะมีความพยายามในการวิจัยที่สำคัญมากว่า 100 ปีตั้งแต่การค้นพบ เรายังมีหนทางที่ต้องทำก่อนที่เราจะได้รับความเข้าใจที่แท้จริงเกี่ยวกับแคแทบอลิซึมของฮีสตามีน

อ้างอิง

1. Boehm T, Ristl R, Joseph S และคณะ ความผิดปกติของเมตาโบโลมและลิพิโดมระหว่างเหตุการณ์การกระตุ้นเซลล์แมสต์อย่างรุนแรงในผู้ป่วยที่มีภาวะแมสต์ไซโทซิสทั่วร่างกายโดยไม่ได้ตั้งใจ เจ ภูมิแพ้ คลินิค อิมมูนอล 2021. https://doi.org/10.1016/j.jaci.2021.03.043. 2. แพ็กการ์ด KA, Khan MM. ผลของฮีสตามีนต่อ Th1/Th

2 ไซโตไคน์สมดุล Int อิมมูโนฟาร์มาคอล 2546;3:909–20. https://doi.org/ 10.1016/S1567-5769(02)00235-7

3. Hesterberg R, Sattler J, Lorenz W และอื่น ๆ ปริมาณฮีสตามีน กิจกรรมไดเอมีนออกซิเดส และกิจกรรมฮิสตามีนเมทิลทรานสเฟอเรสในเนื้อเยื่อของมนุษย์: ข้อเท็จจริงหรือนิยาย? การกระทำของตัวแทน 2527;14:325– 34. https://doi.org/10.1007/BF01973821.

4. ไดเออร์ เจ, วอร์เรน เค, เมอร์ลิน เอส และคณะ การวัดค่าฮีสตามีนในพลาสมา: คำอธิบายของวิธีการที่ได้รับการปรับปรุงและค่าปกติ เจ ภูมิแพ้ คลินิค อิมมูนอล 2525;70:82–7. https://doi.org/10.1016/ 0091-6749(82)90233-0

5. Pollock I, Murdoch RD, Lessof MH ฮีสตามีนในพลาสมาและความทนทานทางคลินิกต่อฮีสตามีนที่ฉีดเข้าไปในผู้ป่วยปกติ ภูมิแพ้ และลมพิษ การกระทำของตัวแทน 2534;32:359–65. https://doi.org/10. 1007/BF01980899.

6. Liu J, Wang L, Hu W และอื่นๆ การพัฒนาวิธี UHPLC–MS/MS สำหรับการตรวจหาฮีสตามีนในพลาสมาในสัตว์เลี้ยงลูกด้วยนมหลายสายพันธุ์ เจ โครมาโตกร์ บี 2014;971:35–42. https:// doi.org/10.1016/j.jchromb.2014.08.043.

7. Xu Y, Kang T, Dou D และคณะ การประเมินและการเพิ่มประสิทธิภาพของแบบจำลองสัตว์สำหรับปฏิกิริยา anaphylactoid ที่เกิดจากการฉีด Asian Pac J Allergy อิมมูนอล 2015;33:330–8. https://doi.org/ 10.12932/AP0619.33.4.2015.

8. Maintz L, Novak N. การแพ้ฮีสตามีนและการแพ้ฮีสตามีน แอม เจ คลินิค Nutr. 2550;85:1185–96. https://doi.org/10.1093/ajcn/85.5. 1185.

9. Ginsburg R, Bristow MR, Kantrowitz N และอื่น ๆ การยั่วยุของฮีสตามีนของอาการกระตุกของหลอดเลือดหัวใจทางคลินิก: ความหมายที่เกี่ยวข้องกับการเกิดโรคของโรคหลอดเลือดหัวใจตีบ แอม ฮาร์ต เจ. 1981;102:819–22. https://doi.org/10.1016/0002-8703(81) 90030-2

10. O'Mahony L, Akdis M, Akdis CA การควบคุมการตอบสนองของภูมิคุ้มกันและการอักเสบโดยตัวรับฮีสตามีนและฮีสตามีน เจ ภูมิแพ้ คลินิค อิมมูนอล 2554;128:1153–62. https://ดอย. org/10.1016/j.jaci.2011.06.051.

11. เธอร์มอนด์ RL, Gelfand EW, Dunford PJ. บทบาทของตัวรับฮีสตามีน H1 และ H4 ในการอักเสบจากภูมิแพ้: การค้นหายาแก้แพ้ชนิดใหม่ Nat Rev การค้นพบยาเสพติด 2551;7:41–53. https://doi.org/10.1038/nrd2465.

12. Pericin C, Thomann P. การเปรียบเทียบความเป็นพิษเฉียบพลันของ clioquinol, histamine และ chloroform ในหนูสายพันธุ์ต่างๆ ใน: Chambers PL, Günzel P, บรรณาธิการ กลไกการออกฤทธิ์ของพิษต่ออวัยวะเป้าหมายบางส่วน เบอร์ลิน: สปริงเกอร์; 2522. น. 371–3.

13. ลามันนา ซี, รอสส์ ฯพณฯ ความสัมพันธ์ของปริมาณพิษที่ทำให้ถึงตายต่อน้ำหนักตัวของหนูเมาส์ Toxicol Appl Pharmacol. 2511;13:307–15. https://doi.org/10.1016/0041-008X(68)90104-X

14. Van der Linden P, Hack C, Poortman J และอื่น ๆ ความท้าทายของแมลงต่อยในผู้ป่วย 138 ราย: ความสัมพันธ์ระหว่างความรุนแรงทางคลินิกของแอนาฟิแล็กซิสและการกระตุ้นแมสต์เซลล์ เจ ภูมิแพ้ คลินิค อิมมูนอล 2535;90:110–8. https://doi.org/10.1016/S0091-6749(06) 80017-5

15. วิลเลียมส์ ดับบลิวอาร์, Shale DJ การแทนที่ในหลอดทดลองของผู้ไกล่เกลี่ย vasoactive จากโปรตีนในพลาสมา: กลไกที่เป็นไปได้สำหรับปฏิกิริยาหลอกที่แพ้ต่อยาปิดกั้นประสาทและกล้ามเนื้อ BrJ Anaesth. 2535;69:508–10. https://doi.org/10.1093/bja/69.5.508.

16. Sasaki Y, Iwama R, Sato T และอื่นๆ การประมาณค่าอัตราการกรองของไตในหนูที่รู้ตัวโดยใช้สมการอย่างง่าย Physiol Rep. 2014;2:e12135. https://doi.org/10.14814/phy2.12135.

17. Helander CG, Lindell SE, Westling H. การกำจัด C14-ไตที่ระบุว่าฮีสตามีนออกจากเลือดในมนุษย์ Scand J Clin Lab สืบสวน 2508. https://doi.org/10.1080/00365516509083360.

18. Sjaastad O, Sjaastad ÖV การสลายตัวของ l4C-histamine ที่ให้ทางปากในคน แอคต้า ฟาร์มาคอล ท็อกซิคอล. 2517;34:33–45. https://doi.org/10.1111/j.1600-0773.1974.tb02011.x

19. ไชเออร์ อาร์.ดับบลิว. เมแทบอลิซึมของฮีสตามีนในสปีชีส์ต่างๆ Br J Pharm Chemoth. 2499;11:472–3. https://doi.org/10.1111/ญ. 1476-5381.1956.tb00020.x.

20. Snyder SH, Axelord J, Bauer H. ชะตากรรมของ C14-ฮีสตามีนในเนื้อเยื่อสัตว์ J Pharmacol Exp Ther. 2507;144:373–9.

21. โรส บี บราวน์ เจเอสแอล การกระจายและอัตราการหายไปของฮีสตามีนที่ฉีดเข้าเส้นเลือดดำในหนูแรท แอม เจ ฟิสิโอล พ.ศ. 2481;124:412–20. https://doi.org/10.1152/ajplegacy.1938.124.2. 412.

22. Koepsell H, Lips K, Volk C. ตัวขนส่งไอออนบวกอินทรีย์แบบ Polyspecifc: โครงสร้าง หน้าที่ บทบาททางสรีรวิทยา และผลกระทบทางชีวเภสัชกรรม ฟาร์มาเรส 2550;24:1227–51. https://doi.org/ 10.1007/s11095-007-9254-z.

23. Lantoine F, Iouzalen L, Devynck MA และอื่น ๆ การผลิตไนตริกออกไซด์ในเซลล์บุผนังหลอดเลือดของมนุษย์ที่ถูกกระตุ้นโดยฮีสตามีนนั้นต้องการ Ca2 บวกกับการไหลเข้า ชีวเคมี 2541;330:695–9. https://doi.org/10.1042/ bj3300695.

24. Mikelis CM, Simaan M, Ando K และอื่น ๆ RhoA และ ROCK ไกล่เกลี่ยการรั่วไหลของหลอดเลือดที่เกิดจากฮีสตามีนและการช็อกแบบอะนาไฟแล็กติก นัทคอมมูน. 2558;6:6725. https://doi.org/10.1038/ncomms7725.

25. Ashina K, Tsubosaka Y, Nakamura T และอื่น ๆ ฮีสตามีนกระตุ้นการซึมผ่านของหลอดเลือดโดยเพิ่มการไหลเวียนของเลือดและการหยุดชะงักของสิ่งกีดขวางบุผนังหลอดเลือดในร่างกาย กรุณาหนึ่ง 2558;10:e0132367. https://doi.org/10.1371/journal.pone.0132367.

26. Schömig E, Lazar A, Gründemann D. Extraneuronal monoamine transporter และ organic cation transporters 1 และ 2: การทบทวนประสิทธิภาพการขนส่ง ใน: Sitte HH, Freissmuth M, บรรณาธิการ ตัวขนส่งสารสื่อประสาท เบอร์ลิน: สปริงเกอร์; 2549. น. 151–80.

27. Ohtsu H. ความก้าวหน้าในการวิจัยสัญญาณภูมิแพ้ในแมสต์เซลล์: บทบาทของฮีสตามีนในโรคภูมิคุ้มกันและโรคหัวใจและหลอดเลือด และระบบขนส่งฮีสตามีนในเซลล์ เจ ฟาร์มาคอล วิทย์. 2551;106:347–53. https://doi.org/10.1254/jphs.FM0070294.

28. คาร์จาลา SA, Turnquest B, Schayer RW สารกัมมันตภาพรังสีฮีสตามีนในปัสสาวะ เจ ไบโอล เคม. 2499;219:9–12. https://ดอย. org/10.1016/S0021-9258(18)65762-X.

29. เชเยอร์ อาร์ดับบลิว. การสลายตัวของปริมาณทางสรีรวิทยาของฮีสตามีนในร่างกาย Physiol Rev. 1959;39:116–26. https://doi.org/10.1152/ physrev.1959.39.1.116.

30. เรลลี่ แมสซาชูเซตส์, Schayer RW การศึกษาในร่างกายเกี่ยวกับการสลายตัวของฮีสตามีนและการยับยั้ง บริษัท เจ ฟาร์มาคอล. 2513;38:478–89. https://ดอย. org/10.1111/j.1476-5381.1970.tb10590.x.

31. Naganuma F, Nakamura T, Yoshikawa T และคณะ ฮีสตามีน N-เมทิลทรานสเฟอเรสควบคุมความก้าวร้าวและวงจรการนอนหลับ ตัวแทนวิทยาศาสตร์ 2017;7:15899. https://doi.org/10.1038/s41598-017-16019-8

32. McGrath AP, Hilmer KM, Collyer CA และอื่นๆ โครงสร้างและการยับยั้งไดเอมีนออกซิเดสของมนุษย์ ชีวเคมี. 2552;48:9810–22. https://doi.org/10.1021/bi9014192.

33. ชเวลเบอร์เกอร์ เอช.จี. การวิเคราะห์เนื้อเยื่อและการแปลตำแหน่งเซลล์ย่อยของสัตว์เลี้ยงลูกด้วยนมไดเอมีนออกซิเดสด้วยกล้องจุลทรรศน์คอนโฟคอลเลเซอร์สแกนฟลูออเรสเซนต์ Infamm ความละเอียด 2541;47:60–1. https://doi.org/ 10.1007/s000110050273.

34. นิชิโบริ เอ็ม, ทาฮาระ เอ, ซาวาดะ เค และคณะ ตำแหน่งของเซลล์ประสาทและหลอดเลือดของฮิสตามีน N-เมทิลทรานสเฟอเรสในระบบประสาทส่วนกลางของวัว Eur J Neurosci. 2543;12:415–24. https://doi.org/ 10.1046/j.1460-9568.2000.00914.x.

35. Sjaastad ÖV. ศักยภาพของ aminoguanidine ต่อความไวของแกะต่อฮีสตามีนที่ให้ทางปาก ผลของ amino-guanidine ต่อการขับออกของ histamine ภายในร่างกายทางปัสสาวะ เอ็กซ์พี ฟิสิออล 2510;52:319–30. https://doi.org/10.1113/expphysiol.1967.sp001 918

36. Sattler J, Häfner D, Klotter HJ และคณะ ฮีสตามีนที่เกิดจากอาหารเป็นปัญหาทางระบาดวิทยา: การเพิ่มขึ้นของฮีสตามีนในพลาสมาและการเปลี่ยนแปลงของระบบไหลเวียนโลหิตหลังการให้สารฮีสตามีนทางปากและการปิดล้อมของไดเอมีนออกซิเดส (DAO) การกระทำของตัวแทน 2531;23:361–5. https://doi.org/10.1007/BF02142588.

37. Bowman MA, Simell OG, Peck AB และอื่น ๆ เภสัชจลนศาสตร์ของการบริหารให้อะมิโนกัวนิดีนและผลต่อความถี่ของโรคเบาหวานในหนูเมาส์ที่ไม่เป็นเบาหวาน J Pharmacol Exp Ther. 2539;279:790–4.

38. Matejovic M, Krouzecky A, Martinkova V และอื่น ๆ การยับยั้งการสังเคราะห์ไนตริกออกไซด์แบบเลือกเหนี่ยวนำระหว่างแบคทีเรียในสุกรที่มีภาวะ hyperdynamic ในระยะยาว ช็อก 2547;21:458–65. https://ดอย. org/10.1097/00024382-200405000-00010

39. Alderton WK, Cooper CE, Knowles RG การสังเคราะห์ไนตริกออกไซด์: โครงสร้าง หน้าที่ และการยับยั้ง Biochem J. 2001;357:593–615. https://doi.org/10.1042/bj3570593.

40. Altura BM, Halevy S. ประโยชน์และผลเสียของฮีสตามีน H1- และ H2-ตัวรับคู่อริในการไหลเวียนโลหิตช็อก พนัส. 2521;75:2941–4. https://doi.org/10.1073/pnas.75.6.2941.

41. โทมัส LL, Bochner BS, Lichtenstein LM การยับยั้งกิจกรรมฮิสตามิเนสของเม็ดเลือดขาวชนิดโพลีมอร์โฟนิวเคลียร์จากมนุษย์โดย H-2 คู่อริ ไบโอเคม ฟาร์มาคอล 2521;27:2562–5. https:// doi.org/10.1016/0006-2952(78)90327-1

42. Thermann M, Lorenz W, Schmal A และอื่น ๆ อิทธิพลของ H1-และ H{2}}ตัวรับคู่อริต่อระบบไหลเวียนเลือดและความเข้มข้นของฮีสตามีนในพลาสมาในสุนัข การกระทำของตัวแทน 2520;7:97–101. https://doi.org/10.1007/BF01964888.

43. เอลมอร์ BO, Bollinger JA, Dooley DM ไดเอมีนออกซิเดสในไตของมนุษย์: การแสดงออกที่แตกต่างกัน การทำให้บริสุทธิ์ และลักษณะเฉพาะ J Biol Inorg เคมี 2545;7:565–79. https://doi.org/10. 1007/วินาที00775-001-0331-1

44. Duch DS, Bowers SW, Nichol CA การเพิ่มระดับฮีสตามีนในสมองโดยสารยับยั้งไดอะมิโนไพริมิดีนของฮิสตามีน N-เมทิลทรานสเฟอเรส ไบโอเคม ฟาร์มาคอล 2521;27:1507–9. https://ดอย. org/10.1016/0006-2952(78)90109-0

45. Horton JR, Sawada K, Nishibori M และอื่นๆ โครงสร้างพื้นฐานสำหรับการยับยั้งฮีสตามีน เอ็น-เมทิลทรานสเฟอเรสโดยยาหลายชนิด เจ โมล ไบโอล 2548;353:334–44. https://doi.org/10.1016/j.jmb.2005. 08.040 น.

46. ​​Horton JR, Sawada K, Nishibori M และอื่นๆ ฮิสตามีนเมทิลทรานสเฟอเรสของมนุษย์ในรูปแบบโพลีมอร์ฟิคสองรูปแบบ: การเปรียบเทียบโครงสร้าง ความร้อน และจลนพลศาสตร์ โครงสร้าง. 2544;9:837–49. https:// doi.org/10.1016/S0969-2126(01)00643-8

47. Duch DS, Bacchi CJ, Edelstein MP และอื่นๆ สารยับยั้งเมแทบอลิซึมของฮีสตามีน ในหลอดทดลอง และ ในร่างกาย: ความสัมพันธ์กับฤทธิ์ต้านไตรพาโนโซม ไบโอเคม ฟาร์มาคอล 2527;33:1547–53. https:// doi.org/10.1016/0006-2952(84)90426-X.

48. Hox V, Desai A, Bandara G และอื่น ๆ เอสโตรเจนเพิ่มความรุนแรงของภาวะภูมิแพ้ในหนูเพศเมียผ่านการแสดงออกของเอ็นโดทีเลียลไนตริกออกไซด์ซินเทสและการผลิตไนตริกออกไซด์ เจ ภูมิแพ้ คลินิค อิมมูนอล 2558;135:729-736.e5. https://doi.org/ 10.1016/j.jaci.2014.11.003.

49. แพ็คแมน อีดับเบิลยู, รอสซี จีวี, แฮร์ริสสัน เจดับบลิวอี ผลของฮีสตามีนและแอนติฮีสตามีนต่ออุณหภูมิของร่างกาย เจฟาร์มาคอล. 2496;5:301–10. https://doi.org/10.1111/j.2042-7158.1953.tb139 90.x

50. Morris SC, Perkins C, Potter C และอื่น ๆ เพิ่มประสิทธิภาพการยับยั้งยาของแอนาฟิแล็กซิสที่อาศัย IgE ในหนู เจ ภูมิแพ้ คลินิค อิมมูนอล 2021;149:671–84. https://doi.org/10.1016/j.jaci.2021.06.022.

51. Li XM, Serebrisky D, Lee SY และคณะ แบบจำลองแอนาฟิแล็กซิสในถั่วลิสงของหนู: การตอบสนองของ T- และ B-cell ต่อสารก่อภูมิแพ้ในถั่วลิสงที่สำคัญเลียนแบบการตอบสนองของมนุษย์ เจ ภูมิแพ้ คลินิค อิมมูนอล 2543;106:150–8. https://doi.org/10.1067/mai.2000.107395.

52. Hasegawa A, Watanabe M, Osada H และอื่น ๆ อิทธิพลของกลูโคคอร์ติคอยด์ต่อการแปรผันตามช่วงเวลาของวันใน IgE-, ฮีสตามีน- และแอนาฟิแล็กซิสแบบระบบที่กระตุ้นการทำงานของเกล็ดเลือดโดยใช้ปัจจัยกระตุ้นในหนูสายพันธุ์ต่างๆ Biochem Biophys Res ชุมชน 2018;495:2184–8. https://doi.org/10.1016/j.bbrc.2017.12.099.

53. Fishel CW, Szentivanyi A, Talmage DW การทำให้ไวต่อการกระตุ้นและการลดความไวของหนูต่อฮีสตามีนและเซโรโทนินโดยนิวโรฮิวเมอร์ เจ อิมมูนอล. พ.ศ. 2505;89:8–18.

54. Stallons LJ, วิเทเกอร์ RM, Schnellmann RG ยับยั้งการสร้างไบโอไมโตคอนเดรียลในการบาดเจ็บของไตเฉียบพลันที่เกิดจากกรดโฟลิกและพังผืดในระยะแรก สารพิษ 2014;224:326–32. https://ดอย. org/10.1016/j.toxlet.2013.11.014.

55. Gludovazz E, Schuetzenberger K, Resch M และอื่น ๆ การกลายพันธุ์ที่มีผลผูกพันกับเฮปารินของไดเอมีนออกซิเดสของมนุษย์ทำให้เกิดการพัฒนาชีวเภสัชภัณฑ์ที่ย่อยสลายฮีสตามีนในระดับเฟิร์สคลาส อีไลฟ์. 2021;10:e68542. https://doi.org/10.7554/eLife. 68542.

56. Eissa N, Kermarrec L, Hussein H และอื่น ๆ ความเหมาะสมของยีนอ้างอิงสำหรับการทำให้ RNA ของผู้ส่งสารเป็นปกติในหนู 2,4-กรดไดไนโตรเบนซีนซัลโฟนิก (DNBS) ที่เหนี่ยวนำให้เกิดลำไส้ใหญ่อักเสบโดยใช้ PCR แบบเรียลไทม์เชิงปริมาณ ตัวแทนวิทยาศาสตร์ 2017;7:42427. https://doi.org/10. 1038/srep42427.

57. Gludovazz E, Maresch D, Bonta M และอื่น ๆ การศึกษาคุณสมบัติของไดเอมีนออกซิเดสของมนุษย์ (rhDAO) ชนิดรีคอมบิแนนท์ที่ผลิตในเซลล์รังไข่หนูแฮมสเตอร์จีน (CHO) เจ ไบโอเทคอล. 2559;227:120–30. https://doi.org/10.1016/j.jbiotec.2016.04.002.

58. Boehm T, Karer M, Gludovazz E และอื่น ๆ การหาปริมาณของกิจกรรมไดเอมีนออกซิเดสที่เรียบง่าย ละเอียดอ่อน และเฉพาะเจาะจงในเมทริกซ์เชิงซ้อนโดยใช้ฟลูออโรฟอร์ที่ค้นพบใหม่ซึ่งมาจากสารตั้งต้นตามธรรมชาติ Infamm ความละเอียด 2020;69:937–50. https://doi.org/10. 1007/วินาที00011-020-01359-5

59. Matsumura Y, Tan EM, Vaughan JH ภาวะภูมิไวเกินต่อฮีสตามีนและแอนาฟิแล็กซิสอย่างเป็นระบบในหนูที่มีการปิดล้อมเบต้าอะดรีเนอร์จิคทางเภสัชวิทยา: การป้องกันโดยนิวคลีโอไทด์ เจ ภูมิแพ้ คลินิค อิมมูนอล 2519;58:387–94. https://doi.org/10.1016/0091- 6749(76)90119-6

60. ฮันเตอร์ เอเจ, เมอร์เรย์ ทีเค, โจนส์ เจเอ และคณะ เภสัชวิทยา cholinergic ของ tetrahydraminoacridine ในร่างกาย และ ในหลอดทดลอง บริษัท เจ ฟาร์มาคอล. 2532;98:79–86. https://doi.org/10.1111/j.1476-5381. 1989.tb16865.x.

61. Rabe M, Schaefer F. แบบจำลองหนูที่เป็นโรคไตชนิดไม่ดัดแปลงพันธุกรรม เนฟรอน 2559;133:53–61. https://doi.org/10.1159/00044 5171.

62. มิยาโมโตะ วาย, นากาโนะ เอส, คาเนโกะ เอ็ม และคณะ การประเมินทางคลินิกของสารยับยั้งโปรตีเอสสังเคราะห์ใหม่ในการผ่าตัดหัวใจแบบเปิด ผลต่อการปล่อยเซโรโทนินและฮีสตามีนในพลาสมาและการอนุรักษ์เลือด อาซาโอะ. 2535;38:ม395-8. https://doi.org/10.1097/00002480- 199207000-00063.

63. Race oncology—มะเร็งวิทยาที่มีความแม่นยำ https://www.raceoncology. คอม/. เข้าถึงเมื่อ 23 พ.ย. 2564

64. Myers JW, Von Hof DD, Kuhn JG และอื่น ๆ ปฏิกิริยา anaphylactoid ที่เกี่ยวข้องกับการฉีด bisantrene สืบสวนยาเสพติดใหม่ 2526;1:85–8. https://doi.org/10.1007/BF00180195.

65. เรลลี่ แมสซาชูเซตส์, Schayer RW. การศึกษาเพิ่มเติมเกี่ยวกับการเร่งปฏิกิริยาของฮีสตามีนในร่างกาย บริษัท เจ ฟาร์มาคอล. 2514;43:349–58.

66. Malinski T, Taha Z, Grunfeld S และอื่น ๆ การแพร่กระจายของไนตริกออกไซด์ในผนังหลอดเลือดแดงใหญ่ที่ตรวจสอบในแหล่งกำเนิดโดยไมโครเซนเซอร์พอร์ไฟรินิก Biochem Biophys Res ชุมชน 2536;193:1076–82. https://ดอย. org/10.1006/bbrc.1993.1735.

67 Ginsburg M, Wajda I, Waelsch H. Transglutaminase และการรวมตัวกันของฮีสตามีนในร่างกาย ไบโอเคม ฟาร์มาคอล 2506;12:251–64. https://doi.org/10.1016/0006-2952(63)90148-5

68. Vowinckel J, Stahlberg S, Paulmann N และอื่น ๆ ฮีสตามีเลชันของกลูตามีนตกค้างเป็นการดัดแปลงหลังการแปลภาษาแบบใหม่ที่เกี่ยวข้องกับการส่งสัญญาณ G-โปรตีน FEBS เล็ต 2555;586:3819–24. https://doi.org/10.1016/j.febslet.2012.09.027.

69. McNally W, Roth M, Young R และอื่น ๆ การตรวจหารังสีเอกซ์ทั่วร่างกายเชิงปริมาณของการกระจายเนื้อเยื่อแทกรีนในหนูแรทตามการให้ยาทางหลอดเลือดดำหรือทางปาก ฟาร์มาเรส 2532;6:924– 32. https://doi.org/10.1023/A:1015933210803.

70. คัมมิง พี, ไรเนอร์ พีบี, วินเซนต์ เอสอาร์ การยับยั้ง histamine-N-methyltransferase ในสมองหนูโดย 9-amino-1,2,3,4-tetrahydroacridine (THA) ไบโอเคม ฟาร์มาคอล 2533;40:1345–50. https://doi.org/10. 1016/0006-2952(90)90402-7.

71. Cavallito JC, Nichol CA, Brenckman WD และอื่น ๆ สารยับยั้งที่ละลายในไขมันของ dihydrofolate reductase I. จลนพลศาสตร์ การกระจายตัวของเนื้อเยื่อ และขอบเขตของการเผาผลาญของไพริเมทามีน เมโธพรีน และอีทอร์ฟีนในหนู สุนัข และคน การกำจัดยา Metab 2521;6:329–37.

72. Nishibori M, Oishi R, Itoh Y และอื่นๆ 9-อะมิโน-1, 2, 3, 4-Tetrahydroacridine เป็นตัวยับยั้งที่มีศักยภาพของฮีสตามีน N-เมทิลทรานสเฟอเรส เจพีเอ็น เจ ฟาร์มาคอล 2534;55:539–46. https://doi.org/10.1254/jjp.55. 539.

73. Hough LB, Khandelwal JK, Green JP. ยับยั้งเมแทบอลิซึมของฮีสตามีนในสมองโดยเมโธพรีน ไบโอเคม ฟาร์มาคอล 1986;35:307–10. https://doi.org/10.1016/0006-2952(86)90530-7

74. Kaneko H, Koshi S, Hiraoka T และอื่น ๆ การยับยั้งการบาดเจ็บของไตหลังขาดเลือดกลับคืนสู่เลือดโดยไดเอมีนออกซิเดส Biochim Biophys แอคต้า 2541;1407:193–9. https://doi.org/10.1016/S0925- 4439(98)00039-8

75. Koshi S, Inoue M, Obayashi H และอื่นๆ การยับยั้งการบาดเจ็บหลังขาดเลือดกลับคืนสู่ลำไส้เล็กโดยไดเอมีนออกซิเดส Biochim Biophys แอคต้า 2534;1075:231–6. https://doi.org/10.1016/ 0304-4165(91)90271-ซ.

Matthias Karer1 · Marlene Rager‑Resch1 · Teresa Haider2 · Karin Petroczi1 · Elisabeth Gludovacz3 · Nicole Borth3 · Bernd Jilma1 · Thomas Boehm1

1 ภาควิชาเภสัชวิทยาคลินิก Medical University Vienna, Waehringer Guertel 18-20, 1090 Vienna, Austria

2 Department of Neurophysiology, Center for Brain Research, Medical University Vienna, เวียนนา, ออสเตรีย

3 ภาควิชาเทคโนโลยีชีวภาพ มหาวิทยาลัยทรัพยากรธรรมชาติและวิทยาศาสตร์สิ่งมีชีวิต เวียนนา ออสเตรีย