การกำหนดปริมาณซาโปนินทั้งหมดใน Boschniakia Rossica และ Herba Cistanches โดย Spectrophotometry Ⅰ

เชิงนามธรรม:

วัตถุประสงค์ วิธีการเชิงปริมาณนี้จัดทำขึ้นจากซาโปนินทั้งหมดใน Boschniakia rossica และซิแทนเช่เฮอร์บาและเนื้อหาของซาโปนินทั้งหมดถูกกำหนดไว้- วิธีการ เลือกซาลิโดรไซด์เป็นสารอ้างอิง ใช้ปฏิกิริยาสีกับวานิลลินและกรดเปอร์คลอริก จากนั้นปริมาณซาโปนินทั้งหมดใน Boschniakia rossica และ Herba cistanches ถูกกำหนดที่ 523 นาโนเมตรโดยสเปกโตรโฟโตมิเตอร์ Ｒผลลัพธ์ เส้นโค้งซาลิโดรไซด์เป็นเส้นตรงในช่วง 0 05133 - 0. 2567มก.·มล-1ที่มีความสัมพันธ์กันของ 0 9992 และสมการการถดถอยเชิงเส้นคือ Y=1 611X + 0. 0573. สำหรับ Boschniakia rossica การฟื้นตัวของซาลิโดรไซด์โดยเฉลี่ยคือ 99 68% โดยมี ＲSD เป็น 1 68% ( n=6); และสำหรับระยะทางของเฮอร์บา ค่าการฟื้นตัวของซาลิโดรไซด์โดยเฉลี่ยคือ 101 18% โดยมี ＲSD เป็น 0 94% (=6) สรุป วิธีการมีความถูกต้อง เรียบง่าย และเชื่อถือได้ ดังนั้นจึงสามารถใช้เพื่อกำหนดปริมาณซาโปนินทั้งหมดในถัง Boschniakia rossica และ Herba cistanches

คำสำคัญ:บอชเนียเกีย รอสซิกา;ซิแทนเช่เฮอร์บา; ซาโปนินทั้งหมด- การกำหนด; สเปกโตรโฟโตมิเตอร์; ซาลิโดรไซด์

CISTANCHE ใช้เวลานานเท่าใดในการทำงาน?

Cistanche Deserticola Y. C. Ma และ Bosehniakia rossica Fedtseh et Flerov เป็นพืชสมุนไพรที่เป็นปรสิตในวงศ์ Orobanchiaceae Cistanche Deserticola เป็นพืชปรสิตที่อาศัยอยู่บนรากของ Haloxylon ammodendron ซึ่งเป็นต้นไม้ในทะเลทราย ส่วนใหญ่ผลิตใน Xinjiang และ Alxa League, มองโกเลียใน เป็นที่รู้จักในชื่อ "โสมทะเลทราย" เนื่องจากมีผลผลิตต่ำและมีคุณค่าทางยาสูง ตั๊กแตน [1] ผลิตในภาคตะวันออกเฉียงเหนือของประเทศของฉัน [2] ตามตำนานพื้นบ้าน มันมีผลเป็นอมตะ จึงได้ชื่อว่า "หญ้ายุคนิรันดร์" ในภาคตะวันออกเฉียงเหนือ ใช้สำหรับความอ่อนแอเนื่องจากการขาดไต ปวดเอวและเข่า ลำไส้แห้ง และท้องผูก สามารถบำรุงร่างกายให้แข็งแรง ชะลอวัย และเป็นทรัพยากรยาแท้ของภาคอีสาน [3] ทั้งสองมีผลคล้ายกัน และทั้งสองมีผลในการปรับไต เสริมหยาง ทำให้ลำไส้ชุ่มชื้น และเป็นยาระบาย [4] ตามบันทึกเกี่ยวกับ Cistanche Deserticola ใน "บทสรุปของ Materia Medica" ของ Li Shizhen แห่งราชวงศ์หมิง "สารนี้เป็นยาชูกำลัง แต่ไม่รุนแรง จึงเรียกว่าสงบ หายากที่จะได้รับจาก Congrong ดังนั้นจึงเต็มไปด้วย ซิสตานเช่ เดซินิโกลา” กล่าวคือ ครั้งหนึ่ง Cistanche Deserticola เคยถูกใช้เป็นยาทางเลือกแทน Cistanche Deserticola การวิจัยสมัยใหม่แสดงให้เห็นว่าทั้ง Cistanche Deserticola และ Estuary Deserticola มีฤทธิ์ทางเภสัชวิทยา เช่น ต่อต้านริ้วรอย [5, 6] ต่อต้านความเมื่อยล้า [7, 8] ปรับปรุงการทำงานของระบบภูมิคุ้มกัน [9, 10] และเพิ่มความจำ [{{ 12}}].

ปริมาณไกลโคไซด์ทั้งหมดใน Grasshopper และ Cistanche Deserticola มีคุณค่าของการศึกษาเชิงลึก ทั้งสองประกอบด้วยซาโปนิน น้ำมันหอมระเหย น้ำตาล กรดอะมิโน และส่วนประกอบอื่นๆ นักวิชาการได้รายงานการศึกษาเปรียบเทียบส่วนประกอบของน้ำมันหอมระเหย น้ำตาล กรดอะมิโน และส่วนประกอบอื่นๆ ของทั้งสอง [4, 14, 15] แต่การกำหนดปริมาณไกลโคไซด์รวมของทั้งสอง ยังไม่มีรายงานในวรรณคดี . ส่วนประกอบหลักของ Cistanche Deserticola คือ phenylpropanoid glycosides (ชุดของกลูโคไซด์ A, B, C, D, E, F, G, H, I, J, K) [16] และ Cistanche Deserticola คือ phenylethanoid glycosides (ชุดของ Cistanche Deserticola )[17,18] ซาโปนินของทั้งสองมีความคล้ายคลึงกัน และมีส่วนประกอบที่คล้ายกันคือซาลิโดรไซด์ เราเชื่อว่าไกลโคไซด์เป็นส่วนผสมออกฤทธิ์ที่สำคัญของทั้งสองชนิด และเราสำรวจการใช้สเปกโตรโฟโตเมทรีเพื่อกำหนดปริมาณของไกลโคไซด์ทั้งหมด เพื่อเป็นพื้นฐานทางทฤษฎีสำหรับการพัฒนาและการใช้ประโยชน์จากทรัพยากร Echinacea Deserticola และ Cistanche Deserticola ต่อไป

1 วัสดุและเครื่องมือ

1. 1 วัสดุและสารรีเอเจนต์: ผักโขม officinale เก็บจากบริเวณภูเขาฉางไป๋ ระบุว่าเป็นพืชในวงศ์ Orobanaceae

พืช Orobanche coerulescens แห้งทั้งหมด ล้างตัวอย่าง และสะเด็ดน้ำ

แยกใส่ในกล่องอบแห้งอุณหภูมิคงที่ที่ 40 องศา แห้งจนมีน้ำหนักคงที่ บด กรองผ่านตะแกรง 40 mesh แล้วเตรียม

[19]; Cistanche Deserticola, Hohhot Enhe Trading Co., Ltd. ที่ระบุอยู่ในรายการ

Cistanche Deserticola Y. ซีหม่าเนื้อแห้ง

ก้าน ล้าง ผึ่งลม ตากให้แห้งจนมีน้ำหนักคงที่ บดแล้วกรองผ่านตะแกรง 40- พักไว้ สีแดง

สารอ้างอิง Crassuside (จัดทำโดย China Institute of Pharmaceutical and Biological Products หมายเลขชุด 110818

- 200404 สำหรับการพิจารณาเนื้อหา); รีเอเจนต์ทดลองทั้งหมดที่ใช้เป็นเกรดการวิเคราะห์ในประเทศ

1. 2 เครื่องมือ 752N สเปกโตรโฟโตมิเตอร์ที่มองเห็นด้วยรังสี UV (Shanghai Jingke); ตู่-1901 คู่

เครื่องสเปกโตรโฟโตมิเตอร์แบบลำแสง UV (Beijing Puxi General Co., Ltd.); เครื่องชั่งเชิงวิเคราะห์อิเล็กทรอนิกส์

AL104 1/100,000 (Mettler-Toledo Instrument Shanghai Co., Ltd.); แจ้ง-80

เครื่องบดอเนกประสงค์ความเร็วสูง (Shandong Hualu Electric Heating Instrument Co., Ltd.)

2 วิธี

2. 1 การเตรียมสารละลายอ้างอิง

ใช้เครื่องชั่งเชิงวิเคราะห์เพื่อชั่งน้ำหนักซาลิโดรไซด์ 15. 40 มก. ละลายในเมทานอลที่ถ่ายโอนไปยัง 25- ขวดปริมาตร และปรับปริมาตรตามเครื่องหมาย เตรียมให้มีซาลิโดรไซด์ 0.0% ต่อมิลลิลิตร สารละลาย 616 มก. ใช้เป็นสารละลายอ้างอิงและปิดผนึกไว้ในตู้เย็นเพื่อใช้ในภายหลัง

2. 2 การเตรียมสารละลายทดสอบ

ใช้เครื่องชั่งเชิงวิเคราะห์เพื่อชั่งน้ำหนักผงยาของ Grasshopper และ Cistanche Deserticola ได้อย่างแม่นยำ 2. 0กรัม วางไว้ในขวดก้นกลม เติมเอทานอล 90% 40 มล. ให้ความร้อนและการสกัดกรดไหลย้อนของตั๊กแตนหนึ่งครั้ง และให้ความร้อนและกรดไหลย้อน Cistanche Deserticola สองครั้ง เวลาในการสกัดแต่ละครั้งคือ 1.5 ชั่วโมง หลังจากนั้น การกรองแบบดูด รวมสารกรอง ตั้งสมาธิให้แห้งในอ่างน้ำ เติมน้ำ 25 มล. เพื่อละลาย สกัดด้วยปิโตรเลียมอีเทอร์ 3 ครั้ง ครั้งละ 25 มล. ทิ้งของเหลวปิโตรเลียมอีเทอร์ในชั้นบนออก แล้วจึงสกัดต่อ 3 ครั้ง ด้วยเอ็น-บิวทานอลที่อิ่มตัวด้วยน้ำ ครั้งละ 25 มล. ผสมสารสกัดเอ็น-บิวทานอล 3 ชนิด ระเหยของเหลว n-บิวทานอลในอ่างน้ำในตู้ดูดควัน เจือจางด้วยเมทานอลลงในขวดวัดปริมาตรขนาด 10 มล. ผสมให้เข้ากัน จากนั้นตวงสารละลายอย่างแม่นยำ 1 มล. และเจือจางด้วย เมทานอลถึงปริมาตร 25 มล. ขวดผสมให้เข้ากันแล้วใช้เป็นน้ำยาทดสอบเพื่อใช้ในภายหลัง

2. 3. การเลือกความยาวคลื่นการวัด

1. ใส่สารละลายอ้างอิงและสารละลายทดสอบ 25 มล. ลงในหลอดทดลองที่มีจุกปิด ระเหยตัวทำละลายเมทานอลในอ่างน้ำอุณหภูมิคงที่ที่ 60 องศา แล้วเติม 0 สารละลายกรดอะซิติกวานิลลิน-กลาเซียล 5% 2 มล. และสารละลายกรดเปอร์คลอริก 0.8 มล. ถูกทำปฏิกิริยาในอ่างน้ำ 60 องศาเป็นเวลา 15 นาที นำหลอดทดลองออกมาและทำให้เย็นลงทันทีด้วยน้ำเย็นเป็นเวลา 5 นาที เติมกรดอะซิติกน้ำแข็ง 5 มล. แล้วเขย่าให้เข้ากัน [20] เตรียมสารละลายอ้างอิงโดยใช้เมทานอลในลักษณะเดียวกัน สารละลายหลังการพัฒนาสีจะต้องผ่านการสแกนความยาวคลื่น และความยาวคลื่นการดูดกลืนแสงสูงสุด 523 นาโนเมตรหลังจากปฏิกิริยาสีของซาลิโดรไซด์ถูกเลือกระหว่าง 400 ถึง 800 นาโนเมตร เป็นความยาวคลื่นการวัดของไกลโคไซด์ทั้งหมดของ Escherichia coli และ Cistanche Deserticola รูปแบบการสแกนของสารควบคุมและสารทดสอบแสดงในรูปที่ 1

2. 4. การตรวจสอบความสัมพันธ์เชิงเส้น: ใช้ปิเปตเพื่อวาดโซลูชันอ้างอิง 0 อย่างถูกต้อง 5,1. 0,

1. 5,2. 0,2. ใส่ 5 มล. ลงในหลอดทดลองที่มีฝาปิดหมายเลข 1 ถึง 5 และทำปฏิกิริยาสีตามขั้นตอนใน "2.3" ทำการทดลองเปล่ากับเมทานอลภายใต้สภาวะคู่ขนาน และวัดค่าการดูดกลืนแสงที่ความยาวคลื่น 523 นาโนเมตร ค่าการดูดกลืนแสง A (Y ) คือค่าพิกัด ความเข้มข้น mg·ml-1

(X) คือค่าแอบซิสซา การถดถอยเชิงเส้นจะดำเนินการ และสมการการถดถอยคือ Y {{0}} 611X +0 0573 ( r=0. 9992) ผลลัพธ์แสดงให้เห็นว่าความเข้มข้นของมวลของซาลิโดรไซด์อยู่ที่ 0 ความสัมพันธ์เชิงเส้นนั้นดีภายในช่วง 05133-0.2567mg·ml-1 ผลลัพธ์แสดงในรูปที่ 2

2. 5 การทดสอบความเสถียร

วัดปริมาณสารละลายทดสอบของ Grasshopper และ Cistanche Deserticola ในปริมาณที่เหมาะสมอย่างแม่นยำ พัฒนาสีตามวิธีภายใต้ "2.3" และวัดค่าการดูดกลืนแสงอย่างเท่าเทียมกันใน 6 ครั้งภายใน 30 นาที นี่แสดงให้เห็นว่าภายใน 30 นาทีหลังจากการพัฒนาสี Grasshopper และ Cistanche Deserticola จะมีเสถียรภาพของสารละลายทดสอบค่อนข้างดี ผลลัพธ์แสดงไว้ในตารางที่ 1

2. 6 การทดสอบความแม่นยำ

วัดสารละลายอ้างอิงในปริมาณที่เหมาะสมอย่างแม่นยำ พัฒนาสีตามวิธีภายใต้ "2.3" ด้านบน และวัดค่าการดูดกลืนแสง 6 ครั้งอย่างต่อเนื่อง ผลลัพธ์แสดงไว้ในตารางที่ 2 ผลลัพธ์แสดงให้เห็นว่าความแม่นยำของเครื่องมือทดลองนี้อยู่ในเกณฑ์ดี

รูปที่ 1 รูปแบบการสแกนแบบชั้นบางของสารอ้างอิงซาลิโดรไซด์ (A), สารละลายทดสอบตั๊กแตน (B) และสารละลายทดสอบซิสแตนช์เดซิโคลา (C)

2. 7. การทดสอบความสามารถในการทำซ้ำ

ชั่งน้ำหนักตั๊กแตนและผง Cistanche Deserticola ได้อย่างแม่นยำ 6 ส่วน แต่ละส่วนบรรจุ 2. 0กรัม หลังจากการให้ความร้อนและการสกัดกรดไหลย้อนโดยใช้กระบวนการสกัดที่เหมาะสมที่สุดที่กำหนดไว้ ให้ทำตามขั้นตอนภายใต้ "2.3" และวัดค่า การดูดกลืนแสงที่ความยาวคลื่น 523 นาโนเมตร ผลการวัดแสดงไว้ในตารางที่ 3 และตารางที่ 4

2. 8. การทดสอบอัตราการฟื้นตัวของตัวอย่าง

ชั่งน้ำหนักตัวอย่าง Grasshopper และ Cistanche Deserticola จำนวน 6 ตัวอย่างอย่างแม่นยำ โดยมีเปอร์เซ็นต์มวลที่ทราบของไกลโคไซด์ทั้งหมด แต่ละตัวอย่างคือ 12 มก. เติมสารละลายอ้างอิงซาลิโดรไซด์ 2 มิลลิลิตรอย่างแม่นยำ ปฏิบัติตาม "2.2" แยกตัวอย่างใต้รายการ กำหนดปริมาณไกลโคไซด์ทั้งหมดหลังจากการพัฒนาสีตามรายการ "2.3" และคำนวณอัตราการคืนสภาพของตัวอย่าง ผลลัพธ์แสดงไว้ในตารางที่ 5 และตารางที่ 6