การหาค่า Echinacoside ใน Cistanche โดย HPLC

การกำหนด HPLC ของ echinacoside ใน Cistanche

ติดต่อ:joanna.jia@wecistanche.com/ WhatsApp: 008618081934791

คีย์เวิร์ด: cistanche, เอ็กไคนาโคไซด์

วัตถุประสงค์:

HPLC กำหนดปริมาณของเอ็กไคนาโคไซด์ในCistancheบดในสภาพไนโตรเจนเหลวและในสภาวะอากาศแห้งตามธรรมชาติ เปรียบเทียบในธรรมชาติcistancheและปลูกฝังCistanche.

วิธีการ: ใช้ lc{0}}a ระบบ HPLC (ชิมาดสึ ประเทศญี่ปุ่น) คอลัมน์คือ YMC inertial ods-sp (4.6 mm × 150 mm,5 μ m;YMC Co Ltd, Japan); เฟสเคลื่อนที่: acetonitrile-methanol-1 เปอร์เซ็นต์กรดฟอร์มิก (10:15:75); ตรวจจับความยาวคลื่น 334 นาโนเมตร; อัตราการไหล 0.7 มก. · มล.^-1. อุณหภูมิคอลัมน์ 30 องศาเซลเซียส

ผลลัพธ์: เงื่อนไขการรักษาที่แตกต่างกันมีผลชัดเจนมากต่อเอ็กไคนาโคไซด์เนื้อหา โดยมีระดับที่สูงกว่าโดยทั่วไปของเอ็กไคนาโคไซด์ในCistancheพื้นดินภายใต้ไนโตรเจนเหลวมากกว่าพื้นดินภายใต้สภาวะอากาศแห้งตามธรรมชาติ เนื้อหาสารออกฤทธิ์ของป่าCistancheสูงกว่าวัฒนธรรมประดิษฐ์มาก

Cistancheเป็นสัตว์ใกล้สูญพันธุ์ ซึ่งเป็นพืชกาฝากที่อาศัยอยู่ในรากของ Clostridium, Salix rubrum ในประเทศจีน,Cistancheส่วนใหญ่จำหน่ายในมองโกเลียใน หนิงเซี่ย กานซู่ และซินเจียง โดยมีชื่อเสียงในด้าน "โสมทะเลทราย" ซึ่งมีคุณค่าทางยามาก ส่วนประกอบทางยาหลักของมันคือ ฟีนิลทานอยด์ ไกลโคไซด์ ซึ่งสามารถแบ่งออกเป็นเอ็กไคนาโคไซด์,ใบเหนียว,Cistancheและอื่น ๆ ขึ้นอยู่กับองค์ประกอบทดแทน ในหมู่พวกเขาเอ็กไคนาโคไซด์ได้ปรับปรุงการทำงานทางเพศ สารต้านอนุมูลอิสระ และผลการขับอนุมูลอิสระ แต่ยังมีผลต้าน apoptotic บางอย่าง ตั้งแต่ปี 1980 เทคโนโลยี HPLC ซึ่งเป็นวิธีการที่ง่ายและรวดเร็วสำหรับการแยกสารฟีนิลทานอยด์ไกลโคไซด์ มีการใช้กันอย่างแพร่หลายในการแยกผลิตภัณฑ์จากธรรมชาติ เลือกวิธี HPLC เพื่อวิเคราะห์เนื้อหาของCistancheส่วนประกอบสำคัญของป่าและการเพาะปลูกเทียมCistancheในช่วงเวลาการเติบโตที่แตกต่างกัน ให้พื้นฐานทางวิทยาศาสตร์สำหรับการพัฒนาอย่างมีเหตุผลและการใช้ประโยชน์ของCistancheและการประเมินคุณภาพอย่างมีประสิทธิผล

Cistanchetubulosaมีเอฟเฟกต์มากมาย คลิกที่นี่เพื่อทราบข้อมูลเพิ่มเติม

เครื่องมือและรีเอเจนต์

Shimadzu, Japan lc-20เครื่องมือ HPLC, lc-20ที่ปั๊มลูกสูบคู่แบบตีคู่, CTO-20เตาอบแบบเสา, โซดา-20เครื่องตรวจจับความยาวคลื่นคู่ UV Vis; Kunshan kq-100 เครื่องทำความสะอาดอัลตราโซนิก; Acetonitrile (chromatographically บริสุทธิ์สถาบันวิจัยเคมี Tianjin Guangfu); เมทานอล (chromatographically pure, Tianjin Guangfu Chemical Research Institute); กรดฟอร์มิก (chromatographically pure, Tianjin Guangfu Chemical Research Institute); น้ำกลั่น

ควบคุม:เอ็กไคนาโคไซด์, เนื้อหา มากกว่าหรือเท่ากับร้อยละ 98.43 (Shanghai Yuanye Bio-Technology Co., Ltd.)

ห้าตัวอย่างของCistanche: เทียมปลูกเป็นเวลาหนึ่งปีโดยมีดังต่อไปนี้Cistanche, ปลูกเพื่อCistanche, เทียมแห้งCistanche, ป่าCistanche, และปลูกเทียมมานานกว่าสามปีด้วยCistanche.

วิธีการและผลลัพธ์

การกำหนดสภาวะโครมาโตกราฟี

เพื่อแยกยอดที่วัดได้เอ็กไคนาโคไซด์ในโครมาโตกราฟี LC จากสารอื่นๆ รวมทั้งเพื่อควบคุมแรงดันปั๊มและตารางเวลาให้อยู่ในช่วงที่เหมาะสม ได้ทำการทดลองดัดแปลงสภาวะโครมาโตกราฟี และหลังจากการทดลองปรับให้เหมาะสมด้วยเฟสเคลื่อนที่แล้ว สรุปได้ว่า ยิ่งอุณหภูมิสูงขึ้น เวลากักเก็บสั้นลงและความเข้มข้นยิ่งต่ำลง แรงดันปั๊มยิ่งสั้นลง และเวลาการกักเก็บยิ่งต่ำลง แต่ความสูงสูงสุดกลับลดลง ซึ่งไม่เอื้ออำนวยต่อการวัด ในที่สุด เฟสเคลื่อนที่ถูกกำหนดหาเป็นกรดฟอร์มิกของอะซีโตไนไตรล์-เมทานอล-1 เปอร์เซ็นต์ (10:15:75) ความยาวคลื่นของการตรวจจับ 334 นาโนเมตร อัตราการไหล 0.7 มล./นาที และอุณหภูมิของคอลัมน์ 30 องศาเซลเซียส ตามเงื่อนไขวัตถุประสงค์ของอุณหภูมิห้องและแรงดันแบริ่งสูงสุดของปั๊ม ซึ่งส่งผลให้มีข้อมูลมากมายด้วยรูปทรงยอดแหลมที่คมชัดและการแยกส่วนประกอบที่ดี

การกำหนดคอลัมน์

YMC-Inertsil ODS-SP(4.6 mm × 150 mm,5 μ m; YMC Co Ltd, Japan).

การเตรียมสารละลายทดลอง

ของโซลูชั่นมาตรฐาน

ปริมาณมาตรฐานเอไคนีโอไซด์ที่เหมาะสมได้รับการชั่งน้ำหนักอย่างแม่นยำและถูกแทงด้วยกรดฟอร์มิกแบบเคลื่อนที่ได้-1 เปอร์เซ็นต์ (10:15:75) เพื่อสร้าง 00 6 มก. · มล. - 1, 0.05 มก. · มล. {{1{{20}}}}}, 0.04 มก. · มล. - 1 , 0.03 มก. · ML - 1, 0.02 มก. · ML - 1, 0.01 มก. · ML - 1 และ 0.005 มก. · ML - 1 สารละลายของเอ็กไคนาโคไซด์มาตรฐาน.

การเตรียมสารละลายทดสอบ

ปริมาณที่เหมาะสมของการปลูกสดเทียมCistanche(ไม่เกินหนึ่งปี) สดเทียมCistancheและป่าสดCistancheบดเป็นผงโดยใช้ครกภายใต้ไนโตรเจนเหลว นอกจากนี้ ปริมาณที่เหมาะสมของ 3 Cistanche ข้างต้นถูกตัดเป็นก้อน ตากให้แห้งตามธรรมชาติในที่ร่ม และหลังจากการทำให้แห้ง มันถูกบดและบดเป็นผง แห้งประดิษฐ์cistancheและแห้งแล้งนานกว่าสามปีCistancheถูกบดเป็นผงโดยตรง {0}}.5 ก. ของผง Cistanche ที่เตรียมไว้ด้านบนถูกนำและวางลงในหลอดสำหรับการปั่นแยก, เติมเฟสเคลื่อนที่ 25 มล., ชั่งน้ำหนักและแช่เป็นเวลา 30 นาที, โซนิเคตเป็นเวลา 40 นาที, เย็นลงแล้ว ชั่งน้ำหนักอีกครั้งเพื่อชดเชยน้ำหนักที่หายไปด้วยเฟสเคลื่อนที่ เขย่าและหมุนเหวี่ยง และนำส่วนลอยเหนือตะกอนไปกรองเมมเบรนกรองที่มีรูพรุนขนาด 0.45 μ M

แปลงของเส้นโค้งการถดถอยสำหรับตัวอย่างมาตรฐานของเอ็กไคนาโคไซด์

ตัวอย่างมาตรฐานที่เตรียมไว้ของเอ็กไคนาโคไซด์ถูกฉีดเข้าไปในเครื่องมือ LC แยกกัน และความเข้มข้นของสารควบคุม (มก. · L-1) ถูกใช้เป็น abscissa และพื้นที่พีคที่สอดคล้องกันถูกจัดวางเพื่อวางแผนเส้นโค้งมาตรฐาน ส่งผลให้เกิดสมการถดถอย: y=66 867 100x-46 360.83, R2=0.98637 ซึ่งแสดงเอ็กไคนาโคไซด์ที่ 0.1 ~ 1.2 ug ภายในความสัมพันธ์เชิงเส้นที่ดี

การสนทนา

เอ็กไคนาโคไซด์เป็นส่วนประกอบสำคัญของCistancheซึ่งสามารถเป็นตัวแทนพื้นฐานทางเคมีของผลทางเภสัชวิทยาของCistancheทำให้การประเมินคุณภาพของวัสดุยาและผลทางเภสัชวิทยาสอดคล้องและปรับปรุงความเกี่ยวข้องของCistancheการประเมินคุณภาพ

เงื่อนไขการรักษาที่แตกต่างกันมีผลชัดเจนต่อเอ็กไคนาโคไซด์เนื้อหา โดยมีระดับที่สูงกว่าโดยทั่วไปของเอ็กไคนาโคไซด์ในCistancheพื้นดินภายใต้ไนโตรเจนเหลวมากกว่าพื้นดินภายใต้สภาวะอากาศแห้งตามธรรมชาติ การทำให้แห้งด้วยอากาศทั่วไปลดปริมาณของเอ็กไคนาโคไซด์ซึ่งอาจถูกใช้ไปในระหว่างการทำให้แห้งหรือแปลงสภาพด้วยอากาศ เพื่อป้องกันการลดลงของสารออกฤทธิ์และรับประกันประสิทธิภาพของCistancheควรเลือกการรักษาที่เหมาะสม

ส่วนใหญ่เชื่อว่าสภาพแวดล้อมการเพาะปลูกเทียมของCistancheเช่นเดียวกับนิสัยการเจริญเติบโต แยกไม่ออกจากป่าที่มีคุณภาพไม่แตกต่างกัน มักจะเน้นที่ผลผลิตเท่านั้น และไม่ได้วิเคราะห์คุณภาพ จากการศึกษาปัจจุบันพบว่าปริมาณการปลูกฝังเทียมCistancheเอ็กไคนาโคไซด์ต่ำกว่าของป่าCistancheเอ็กไคนาโคไซด์. สูงสุดคือ 0.3360 เปอร์เซ็นต์ของ wildcistancheและต่ำสุดคือ 0.007 0 เปอร์เซ็นต์ของเทียมCistanche. ดังนั้นจึงยังต้องศึกษาเทคโนโลยีการเพาะปลูกเพื่อปรับปรุงเนื้อหาของสารออกฤทธิ์

คุณภาพของCistancheขึ้นอยู่กับปริมาณของสารออกฤทธิ์เอ็กไคนาโคไซด์ซึ่งมีความสัมพันธ์ที่แน่นแฟ้นกับฤดูกาล เวลา และวิธีการเก็บเกี่ยว ดังนั้นการเก็บเกี่ยวของCistancheควรคำนึงถึงสถานะการสะสมของสารออกฤทธิ์และระยะการเจริญเติบโตและการพัฒนา พิจารณาทั้งคุณภาพและผลผลิต

วิธีการที่กล่าวถึงในบทความนี้นั้นเรียบง่าย แม่นยำ ทำซ้ำได้ และแม่นยำในการหาอิชินาโคไซด์ มีประโยชน์สำหรับCistancheการกำหนด.