อาหารเสริมในโรคไตในฐานะผู้มีส่วนทำให้เกิดความดันโลหิตสูง
Mar 17, 2022
ติดต่อ:joanna.jia@wecistanche.com/ WhatsApp: 008618081934791
ลิซ่า-มาเรน ฟิชเชอร์ และคณะ
เชิงนามธรรม
วัตถุประสงค์:การสะสมของอาหารเสริมเป็นที่แพร่หลายในการตัดชิ้นเนื้อไตของผู้ป่วยที่มีความดันโลหิตสูงและโรคไตจากความดันโลหิตสูง แต่ความสัมพันธ์ของความดันโลหิตสูงและการสะสมของส่วนประกอบหรือการมีส่วนร่วมของส่วนประกอบในการเกิดโรคของภาวะไตจากความดันโลหิตสูงยังไม่ปรากฏให้เห็นจนถึงปัจจุบัน
วิธีการ:ในการศึกษานี้ เราวิเคราะห์การสะสม C1q และ C3c ในรูปแบบหนูที่มีภาวะน้ำหนักเกินและความดันโลหิตสูงโดยการผ่าตัดไตโดยวิธี subtotal nephrectomy (SNX) และในการตรวจชิ้นเนื้อไตในมนุษย์จากผู้ป่วย 217 รายที่รู้จักความดันโลหิตสูงและ 91 ผู้ป่วยกลุ่มควบคุมที่ไม่มีประวัติความดันโลหิตสูงโดยใช้การให้คะแนนแบบกึ่งเชิงปริมาณของ อิมมูโนฮิสโตเคมี C1q และ C3c และความสัมพันธ์กับพารามิเตอร์ของการทำงานของไต เพื่อระบุว่าคอมพลีเมนต์ถูกฝากไว้เฉยๆ หรือแสดงออกอย่างแข็งขันโดยเซลล์ไตหรือไม่ การแสดงออกของ C1q และ C3 mRNA ถูกวิเคราะห์เพิ่มเติม
ผลลัพธ์:การสะสมของ Glomerular C1q และ C3c ในไตนั้นสูงขึ้นอย่างมีนัยสำคัญในไตของหนู SNX ความดันโลหิตสูงและความดันโลหิตสูงเมื่อเทียบกับผู้ป่วยที่ไม่ความดันโลหิตสูง ความดันโลหิตเฉลี่ย (BP) ในหนู SNX มีความสัมพันธ์ที่ดีกับปริมาณของการสะสมของ C1q และ C3c ของไตและน้ำหนักของหัวใจห้องล่างซ้าย ซึ่งเป็นพารามิเตอร์ทางอ้อมของ BP สูง การวิเคราะห์ mRNA เชิงปริมาณแสดงให้เห็นว่า C3 ไม่เพียงสะสม แต่ยังผลิตโดยเซลล์ไตของหนู SNX ความดันโลหิตสูงและในการตรวจชิ้นเนื้อไตของมนุษย์ ข้อควรทราบ ในผู้ป่วยระยะ CKD มีความสัมพันธ์อย่างมีนัยสำคัญกับความเข้มของการย้อมสี C3c ของไต แต่ไม่มีความสัมพันธ์กับระดับ C1q
สรุป: การสะสมของสารเติมเต็มของไตมีความสัมพันธ์กับความดันโลหิตสูงในการทดลองเช่นเดียวกับการมีความดันโลหิตสูงในหลาย ๆไตโรค. เพื่อตอบคำถามว่าการเติมเต็มของไตเป็นสาเหตุของการเกิดโรคความดันโลหิตสูงในผู้ชายหรือไม่และอย่างไรจำเป็นต้องมีการศึกษาเพิ่มเติม
คำสำคัญ:ไต, การสะสมเสริม, ความดันโลหิตสูง,ไตโรค
บทนำ
The complement system and its regulatory proteins are components of the innate immune system consisting of >20 ปัจจัยที่ละลายน้ำได้ มีบทบาทสำคัญใน (i) opsonization (ii) การกระตุ้นของเส้นทางการอักเสบที่แตกต่างกัน และ (iii) osmotic lysis ของเชื้อโรคและเซลล์ที่เสียหายในหลายโรคโดยเฉพาะการอักเสบไตโรค[1]. ระบบเสริมประกอบด้วย 3 วิถี: (i) ทางเดินแบบคลาสสิก เปิดใช้งานโดยโครงสร้างใดๆ ที่ C1q รับรู้ [2], (ii) ทางเดินเลคติน เปิดใช้งานเมื่อรูปแบบแซ็กคาไรด์รับรู้โดยคอมเพล็กซ์การจดจำรูปแบบ [3] และ (iii) วิถีทางเลือก กระตุ้นผ่านการไฮโดรไลซิสที่เกิดขึ้นเองของ C3 [4]
2 ทศวรรษที่ผ่านมาได้เพิ่มพูนความรู้ของเราเกี่ยวกับระบบเสริมและบทบาทในการก่อโรคของระบบต่างๆ และไตโรคเช่น glomerulonephritis ภายหลังติดเชื้อ (GN), IgA nephropathy (IgAN), lupus nephritis (LN), membranoproliferative GN และ C3 glomerulopathies [1, 5] บทบาทที่สำคัญของระบบเสริมและความผิดปกติของระบบยังเป็นที่รู้จักในการเกิดโรคของลิ่มเลือดอุดตัน ซึ่งรวมถึงกลุ่มอาการ hemolytic uremic ผิดปกติ [6], IgA vasculitis (อดีต Henoch-Schönlein purpura) [7] และความดันโลหิตสูงที่เป็นมะเร็ง [8] แม้ว่ากลไกทางพยาธิวิทยาของการเกิดลิ่มเลือดอุดตันในหลอดเลือดเป็นที่ทราบกันดีอยู่แล้ว [6, 7] ความรู้ของเราเกี่ยวกับความสำคัญของระบบเสริมที่สัมพันธ์กับความดันโลหิตสูงนั้นยังคลุมเครืออยู่ ผู้ป่วย CKD ส่วนใหญ่มีความดันโลหิตสูง (BP) [9] แต่ไม่ทราบสาเหตุของโรคความดันโลหิตสูง มีงานวิจัยหลายชิ้นที่อธิบายถึงความสัมพันธ์ระหว่าง C3 ในพลาสมากับความดันโลหิตสูง [10, 11] ในขณะที่การศึกษาอื่นไม่สามารถยืนยันข้อสังเกตเหล่านี้ได้ [12] ในรูปแบบความดันโลหิตสูง DOCA-salt ของหนู การสะสมของ C3 ของไตเพิ่มขึ้นในหนูที่มีเกลือ DOCA และลดลงโดยการรักษาด้วยยาลดความดันโลหิต นั่นคือ spironolactone และการบำบัดแบบสามด้วย hydrochlorothiazide, reserpine และ hydralazine [13] การศึกษาล่าสุดโดยใช้แบบจำลองพรีคลินิกของความดันโลหิตสูงชี้ให้เห็นถึงบทบาทของการเติมเต็มในการเกิดโรคของความดันโลหิตสูง [14] โดยอาศัยเซลล์ภูมิคุ้มกันที่แตกต่างกัน เช่น มาโครฟาจและ T-cells ที่ควบคุม (Tregs) (15–17) และการกระตุ้นระบบ renin-angiotensin ที่นำไปสู่ การเปลี่ยนแปลงฟีโนไทป์ในเซลล์กล้ามเนื้อเรียบของหลอดเลือด [18]. บทบาทโดยละเอียดของการสะสมของไตในการพัฒนาความดันโลหิตสูงยังไม่ชัดเจน ดังนั้นในการศึกษานี้ เราจึงตรวจสอบ C1q ซึ่งเป็นผลิตภัณฑ์ที่มีความแตกแยกของคลาสสิก และ C3c เป็นเครื่องหมายทั่วไปของเส้นทางการกระตุ้นเสริมทั้ง 3 ทางในการตรวจชิ้นเนื้อไตจากผู้ป่วยความดันโลหิตสูงและความดันโลหิตปกติ ตลอดจนในแบบจำลองหนูที่มีน้ำหนักเกินและตามมา ความดันโลหิตสูงโดยการตัดไตโดยวิธี subtotal nephrectomy (SNX)
วิธีการ
โมเดลสัตว์
สำหรับการตรวจสอบการสะสมของสารเติมเต็มของไต การบาดเจ็บของไต และการเปลี่ยนแปลงของหัวใจในสัตว์ที่มีความดันโลหิตสูง เราใช้แบบจำลองของหนู ซึ่งมีลักษณะเฉพาะโดยการกรองมากเกินไปของไตและการทำงานหนักเกินไปเนื่องจากการลดของไต ภาวะไขมันในเลือดสูงที่บริเวณปล้องโฟกัสและระดับโลก การเกิดแผลเป็นจากเนื้อเยื่อท่อไต และภาวะไตวายเรื้อรังที่มีนัยสำคัญ ความดันโลหิตเพิ่มขึ้น หนูได้รับการบำรุงรักษาในสถานที่ปลอดเชื้อโรคเฉพาะในสภาพแวดล้อมที่มีการควบคุมอุณหภูมิและแสง และสามารถเข้าถึงอาหารมาตรฐานได้ (สูดอากาศ Spezialdiäten GmbH, Soest, เยอรมนี) และน้ำ หนูถูกเลี้ยงไว้บนเตียงไม้แอสเพนแบบคลาสสิก (ดมกลิ่น Spezialdiäten GmbH, Soest, เยอรมนี) ในกรง makrolon ชนิดที่ IV (Tecniplast Deutschland GmbH, Hohenpeißenberg, Germany) โดยมีประชากรสูงสุด 3 ตัว สำหรับการเหนี่ยวนำแบบจำลอง Dark Agouti เพศผู้ 12 ตัว (DA/ HanRj, Janvier, Le Genest-Saint-Isle, ฝรั่งเศส) หนูที่อายุ 12-14 สัปดาห์เป็น SNX ในโปรโตคอล 2 ขั้นตอนโดยเริ่มจากการผ่าตัดที่ไม่ได้รับแรงบันดาลใจ ตามด้วยการผ่าตัดน้ำหนักมาตรฐานของขั้ว er บนและล่างจากไตที่เหลือ 1 สัปดาห์ ภายหลัง. เพื่อจุดประสงค์นี้ สัตว์ถูกบริหารให้ Buprenovet (Bayer, Leverkusen, Germany) ในขนาดยา 005 มก./กก. ของน้ำหนักตัวก่อนการผ่าตัด หลังจากการดมยาสลบด้วยไอโซฟลูเรน ปีกข้างขวาก็ถูกโกน ฆ่าเชื้อด้วยทิงเจอร์ KO-DAN (Schülke & Mayr GmbH, Norderstedt ประเทศเยอรมนี) ปีกข้างถูกเปิดด้วยแผลขนาด 1.5 ซม. และไตได้รับการยกออกอย่างระมัดระวังและแก้ไขด้วยน้ำยาฆ่าเชื้อ 2 ชิ้น swabs ตามด้วย ligation ของการจัดหาเลือดของไตและท่อไตและการกำจัดของไต แผลที่หน้าท้องปิดด้วยไหมเย็บที่ดูดซับได้และตะเข็บต่อเนื่อง เช่นเดียวกับผิวหนังที่ปิดด้วยตะเข็บปุ่มเดียว หนึ่งสัปดาห์ต่อมา ไตซ้ายถูกดึงออกมาตรงตามที่อธิบายไว้สำหรับไตขวา จากนั้นหลอดเลือดแดงไตก็ถูกหนีบด้วยคลิป atraumatic และตัดขั้วไตบนและล่างด้วยมีดผ่าตัด และปิดผิวที่ตัดด้วยฟองน้ำคอลลาเจน (Resorba medical GmbH, Nürnberg, Germany) ในที่สุด ไตที่เหลือก็กลับสู่ตำแหน่งเดิมและปิดแผลในช่องท้องตามที่อธิบายไว้ข้างต้น กิจกรรมหลังการผ่าตัด ปริมาณของเหลว น้ำหนัก พื้นผิวของขน และพฤติกรรมของสัตว์ได้รับการประเมิน แต่ไม่แสดงอาการเจ็บปวดหลังผ่าตัด อย่างไรก็ตาม อาการปวดยังคงอยู่อย่างน้อย 3 วันหลังการผ่าตัด กลุ่มควบคุมได้รับการผ่าตัดหลอก (sham, n=11) ในตอนท้ายของการทดลอง สัตว์ถูกเลี้ยงเป็นเวลา 24 ชั่วโมงในกรงเมตาบอลิซึมเพื่อรวบรวมปัสสาวะเพื่อวัดปริมาณโปรตีนในปัสสาวะโดยใช้การทดสอบโปรตีน Bio-Rad (Bio-Rad Laboratories GmbH, มิวนิค, เยอรมนี) วัดการดูดซับในตัวอย่างปัสสาวะที่เจือจางด้วย PBS ที่ 595 นาโนเมตรในเครื่องอ่านไมโครเพลท และคำนวณโปรตีนในปัสสาวะโดยใช้เส้นโค้งมาตรฐานจากมาตรฐานอัลบูมินในซีรัมของวัวตั้งแต่ 0.15 ถึง 2 มก. (Thermo Scientific, Rockford, IL, USA) หลังจากผ่านไป 12 สัปดาห์ หนูจะถูกทำการุณยฆาตหลังจากการวัดความดันโลหิตภายในหลอดเลือดเป็นเวลา 30 นาทีโดยการใส่สายสวนเข้าไปใน A. carotid โดยใช้ระบบห้องปฏิบัติการกำลังเครื่องมือ AD (ADInstruments Ltd., Oxford, UK) ในที่สุด ไตและหัวใจถูกเก็บเกี่ยวและแบ่งออกเป็น 2 ส่วน ส่วนหนึ่งถูกแช่แข็งอย่างรวดเร็วสำหรับการวิเคราะห์อาร์เอ็นเอ และส่วนที่สองได้รับการประมวลผลสำหรับอิมมูโนฮิสโตเคมี เก็บเลือดเพื่อตรวจหาครีเอตินินในซีรัมโดยใช้เครื่องวิเคราะห์อัตโนมัติ (Beck man Instruments, Brea, CA, USA)
Cistanche รักษาได้ไต โรค
การวิเคราะห์ mRNA เชิงปริมาณ
แยก RNA ทั้งหมดจากไตของหนูโดยใช้คอลัมน์ RNeasy Mini (Qiagen, Hilden, Germany) ปฏิกิริยาการถอดรหัสย้อนกลับและ PCR แบบเรียลไทม์ดำเนินการโดยใช้ Power SYBR Green บนระบบ 7500 Fast Real-Time PCR (ทั้ง Applied Biosystems, Weiterstadt, Germany) ตามคำแนะนำของผู้ผลิต ข้อมูล PCR แบบเรียลไทม์ได้รับการวิเคราะห์โดยใช้ซอฟต์แวร์ SDS v1.3 (Applied Biosystems) และการแสดงออกสัมพัทธ์ของระดับ mRNA ของยีนเป้าหมายคำนวณโดยใช้วิธีเปรียบเทียบเดลต้า Ct [19] การทำให้เป็นมาตรฐานถูกดำเนินการเทียบกับระดับ 18S rRNA ภายนอกที่ใช้กับการเปลี่ยนแปลงการพับสัมพัทธ์ที่เป็นผลลัพธ์ ใช้ไพรเมอร์ต่อไปนี้: 18 วินาที (fw 5′TTGATTAAGTCCCTGC-CCTTTGT3′; rev 5′CGATCCGAGGGCCTCACTA3′); C3 (fw 5′ TGCGGCTGGAGAGTGAAG3′; รอบ 5′ TTACTGGCTGGAATC-TTGATGG3′) [20]; และ C1qB (fw 5′TCATAGAACACGAGGAT TCCATACA3′; rev 5′GACCCAGTACAGCTGCTTTGG3′) [20]
อิมมูโนฮิสโตเคมี
สำหรับการตรวจชิ้นเนื้อไตทางอิมมูโนฮิสโตเคมีหรือ SNX และไตหนูทดลอง ชิ้นงานทดสอบถูกตรึงในฟอร์มาลิน ฝังในพาราฟินและตัดเป็นชิ้นขนาด 1 ไมโครเมตร และย้อมด้วยน้ำยาย้อม Ventana Benchmark (Roche Diagnostics Deutschland GmbH, Mannheim, Ger-many) โดยใช้โปรโตคอลต่อไปนี้ : ดึงแอนติเจนโดยใช้การย่อย pronase E เป็นเวลา 40 นาที ที่ 37 องศา หลังจากการบล็อกด้วย Avidin-Biotin Block (Vector Laboratories, Burlingame, CA, USA) ส่วนซีรั่มแพะปกติและ blotto (1:5) ถูกบ่มเป็นเวลา 1 ชั่วโมงที่ 37 องศาโดยใช้แอนติบอดีต่อไปนี้เจือจาง BSA 1 เปอร์เซ็นต์ใน 50 mM Tris pH 7.4: C1q, โพลีโคลนอลแอนติบอดีสำหรับกระต่ายที่ต้าน C1q ของมนุษย์ (A0126; DAKO Deutschland, ฮัมบูร์ก, เยอรมนี) และ; C3c, โพลีโคลนอลแอนติบอดีสำหรับกระต่ายที่ต้าน C3c ของมนุษย์ (A0062; DAKO Deutschland) หลังจากล้างด้วย Tris pH 7.4 50 มิลลิโมลาร์ แอนติบอดีปฐมภูมิที่จับได้จะถูกตรวจพบโดยใช้ "ชุดตรวจจับ Universal DAB แบบ Ultra view" (Roche Diagnostics Deutschland GmbH, Mannheim, Germany) กลุ่มควบคุมเชิงลบรวมถึงการลบหรือการแทนที่ของแอนติบอดีปฐมภูมิที่มีความเข้มข้นที่เท่ากันของโมโนโคลนัลแอนติบอดีของหนูที่ไม่เกี่ยวข้องหรือ IgG ของกระต่ายก่อนภูมิคุ้มกัน
ตัวอย่างเนื้อเยื่อไตของมนุษย์
ในขั้นตอนแรก การตรวจชิ้นเนื้อไตที่เก็บถาวรของฟอร์มาลินที่ฝังโดยฟอร์มาลินคงที่ 308 ชิ้นต่อเนื่องกัน (Department of Nephropathology, Friedrich-Alexander-Universität Erlangen-Nürnberg [FAU]) ติดต่อกันโดยใช้อิมมูโนฮิสโตเคมีและเปรียบเทียบกรณีที่มีการมีอยู่ หรือไม่มีความดันโลหิตสูงตามแฟ้มข้อมูลทางคลินิกโดยไม่คำนึงถึงหลักไตโรค. รวมเฉพาะการตรวจชิ้นเนื้อจากผู้ป่วยโรคความดันโลหิตสูงและไม่ความดันโลหิตสูงที่มีความดันโลหิตที่ได้รับการบันทึกไว้อย่างดีทางคลินิก นอกจากนี้ การตรวจชิ้นเนื้อเป็นศูนย์ 46 ครั้งจากการปลูกถ่ายไต allografts ที่บริจาคจากผู้บริจาคที่ไม่เป็นโรคความดันโลหิตสูงทำหน้าที่เป็นตัวควบคุม
ในขั้นตอนที่สอง เราเน้นการเปรียบเทียบกลุ่มทั่วไปที่เลือกของไตโรคกล่าวคือการควบคุม (Zero-biopsies; n=46), IgAN (n=65), เยื่อหุ้ม GN (MGN, n=18), LN (n=10), โฟกัส ภาวะเกล็ดเลือดต่ำในปล้อง (FSGS, n=17) และโรคไตจากเบาหวาน (DN, n=28) ทำให้เกิดกลุ่มย่อยที่เป็นตัวแทนของการตรวจชิ้นเนื้อ 184 ชิ้น ในกลุ่มย่อยนี้ วิเคราะห์ความสัมพันธ์ของความดันโลหิตสูงในหลอดเลือดและการสะสมของสารเติมเต็มในบริบทของโรคไตทั่วไปที่แตกต่างกันในรายละเอียดเพิ่มเติม ลักษณะพื้นฐานของผู้ป่วยได้อธิบายไว้ในตารางที่ 1
การประเมินทางจุลพยาธิวิทยา
การตรวจชิ้นเนื้อไตดำเนินการโดยนักประสาทวิทยาที่เชี่ยวชาญและมีประสบการณ์มาก 3 คนในระหว่างการตรวจร่างกายตามปกติโดยมีการอภิปรายเป็นเอกฉันท์สำหรับกรณีที่คลุมเครือทั้งหมด (รวมถึง MBH และ KA) การประเมินลักษณะทางสัณฐานวิทยาโดยละเอียดของการตัดชิ้นเนื้อไตของมนุษย์ดำเนินการโดยนักวิทยาศาสตร์ผู้มากประสบการณ์ (CD) คนหนึ่งโดยใช้คะแนน glomerulosclerosis Interstitial fibrosis/tubular atrophy (IF/TA) ถูกจัดลำดับตามการจำแนก BANFF สำหรับการตัดชิ้นเนื้อไต [22]
การประเมินผลย้อนหลัง
ข้อมูลทางคลินิก พารามิเตอร์ทางคลินิกที่มีอยู่ ณ จุดเวลาของการตรวจชิ้นเนื้อไตถูกเก็บรวบรวม พารามิเตอร์ต่อไปนี้ถูกรวมไว้สำหรับการวิเคราะห์สหสัมพันธ์กับคะแนน C1q- และ C3c, การแปลเป็นภาษาท้องถิ่นและคะแนนการบาดเจ็บโดยใช้ซอฟต์แวร์ SPSS: อายุของผู้ป่วย, การมีหรือไม่มีความดันโลหิตสูงและโรคเบาหวาน, โปรตีนในปัสสาวะ, ครีเอตินินในซีรัม, ยูเรียในซีรัม, คอเลสเตอรอลในซีรัม, โปรตีนในซีรัม และซีรั่ม C3 และ C4 ปัจจัยเสริม ขออภัย ข้อมูลเกี่ยวกับระยะเวลาของไตโรคand current medication was not consistently available and could therefore not be systematically analyzed. In renal patients, BP is measured regularly and particularly before performing a kidney biopsy. BP measurements and grading was done according to the KDIGO guidelines for renal patients [23]. Proteinuria was measured by analysis of a 24 h urine collection and significant proteinuria was defined as urinary protein excretion >300 มก./วัน ใน 2/3 ของทุกกรณี ให้โปรตีนในปัสสาวะเป็นปัสสาวะ g/24 h มีเพียงผู้ป่วยบางรายเท่านั้นที่มีโปรตีนในปัสสาวะซึ่งบันทึกโดยการวัดปัสสาวะเฉพาะจุด และสำหรับผู้ป่วยเพียงไม่กี่ราย ไม่มีข้อมูลเกี่ยวกับโปรตีนในปัสสาวะ เนื่องจากค่าโปรตีนในปัสสาวะ 24 ชั่วโมงและเฉพาะจุดนั้นแทบจะไม่สามารถเปรียบเทียบได้ เราจึงรวมเฉพาะผู้ป่วยที่มีการเก็บปัสสาวะ 24 ชั่วโมงเพื่อดูความสัมพันธ์ของโปรตีนในปัสสาวะกับการสะสมของสารเติมเต็ม เรายังแบ่งผู้ป่วยตามคลาส CKD ต่างๆ โดยใช้สูตร CKD-EPI สำหรับการคำนวณ GFR [24] และคลาส CKD ตามการจัดหมวดหมู่ KDIGO 2012 [25]
Cistanche รักษาได้ไต โรค
การประเมินเชิงปริมาณของการสะสมของสารเติมเต็มในการตรวจชิ้นเนื้อไต
การย้อมสีเสริมด้วยอิมมูโนฮิสโตเคมีในการตรวจชิ้นเนื้อของไตถูกจัดลำดับแยกกันในโกลเมอรูไลและช่องระหว่างเนื้อเยื่อของท่อไต คะแนนกึ่งปริมาณ {0}}–4 อธิบายความเข้มของ C3c หรือ C1q ที่สังเกตได้ในการตัดชิ้นเนื้อไตด้วยกำลังขยาย ×200 คะแนน 0 บ่งชี้ว่าไม่มีเงินฝาก คะแนน 1: การย้อมสีที่อ่อนแอซึ่งส่งผลกระทบถึง 25 เปอร์เซ็นต์ของช่องที่ทำการตรวจสอบ คะแนน 2: การย้อมสีปานกลางส่งผลกระทบต่อได้ถึงร้อยละ 50 หรือการย้อมสีที่รุนแรงใน<25% of="" the="" compartment.="" score="" 3:="" substantial="" staining="" affecting="" up="" to="" 75%="" of="" the="" investigated="" compartment.="" score="" 4:="" highest="" staining="" intensity="" affecting="">ร้อยละ 75 ของส่วนที่ถูกสอบสวน
C1q และ C3 mRNA ในการตรวจชิ้นเนื้อไตของมนุษย์
ข้อมูลสำหรับ C1q และ C3 ใน glomeruli และ tubulointerstitium ของการตรวจชิ้นเนื้อไตของมนุษย์ที่มีโรคต่างๆ ได้รับการประเมินจากฐานข้อมูล Nephroseq โดยใช้ชุดข้อมูล Ju CKD [26]
การวิเคราะห์ทางสถิติ
หลังจากการทดสอบการแจกแจงค่าแบบปกติโดยใช้การทดสอบ Kolmogorov-Smirnov ข้อมูลถูกวิเคราะห์โดยใช้การทดสอบ Mann-Whitney เพื่อเปรียบเทียบ 2 กลุ่มและการทดสอบ Kruskal-Wallis ด้วยการทดสอบการเปรียบเทียบหลายรายการของ Dunn เป็นการทดสอบ post hoc สำหรับการเปรียบเทียบหลายกลุ่ม ในการทดสอบทั้งหมด p < 0.05="" ได้รับการยอมรับว่ามีนัยสำคัญทางสถิติ="" การทดสอบของ="" spearman="" ใช้เพื่อทดสอบความสัมพันธ์ของการสะสมคอมพลีเมนต์กับคะแนนการบาดเจ็บของไตและข้อมูลทางคลินิก="" การวิเคราะห์ทางสถิติดำเนินการโดยใช้ซอฟต์แวร์="" spss="" สำหรับ="" windows="" (เวอร์ชัน="" 19.0="" spss,="" ibm,="" มิวนิค,="" เยอรมนี)="" หรือ="" graphpad="" prism="" 8="" สำหรับซอฟต์แวร์="" windows="" (เวอร์ชัน="" 8.3,="" graphpad="" software="" inc.,="" ซานดิเอโก,="" แคลิฟอร์เนีย,="">
ผลลัพธ์
การสะสมของไต C3c และ C1q มีอยู่ในแบบจำลองหนูที่มีความดันโลหิตสูงของ CKD ที่เสถียรและสัมพันธ์กับการเปลี่ยนแปลงของไตและหัวใจ
การศึกษาการสะสมเสริมได้รับการตรวจสอบในแบบจำลองหนูที่มีความดันโลหิตสูงของ CKD นั่นคือหนูแรท Dark Agouti ที่ถูกไตโดยสมบูรณ์ (SNX) ซึ่งหมายถึงความดันโลหิตของหลอดเลือดแดง 12 สัปดาห์หลังจากการชักนำแบบจำลองอย่างมีนัยสำคัญ (p < 00="" 01)="" เพิ่มขึ้น="" (175.7="" ±="" 21.0="" มม.="" ปรอท)="" เมื่อเทียบกับการควบคุมแบบหลอก="" (135.8="" ±="" 2.8="" มม.="" ปรอท)="" (รูปที่="" 1a)="" โปรตีนในปัสสาวะยังสูงกว่าอย่างมีนัยสำคัญใน="" snx="" เมื่อเทียบกับกลุ่มควบคุมที่ดำเนินการโดยหลอก="" (78.5="" ±="" 16.6="" เทียบกับ="" 8.9="" ±="" 0.8="" มก./24="" ชั่วโมง)="" แบบจำลองหนูที่มีน้ำหนักเกินของความดันโลหิตสูงและความไม่เพียงพอของไตที่ก้าวหน้านี้ดูเหมือนจะเหมาะสมที่จะตรวจสอบการเปลี่ยนแปลงที่เกี่ยวข้องกับความดันโลหิตสูงในการสะสมและการแสดงออกของสารเติมเต็มของไต="" ไม่มีการสะสมของ="" glomerular="" c3c="" และ="" c1q="" ในหนูแรทที่ควบคุมโดยปกติและหลอก="" (รูปที่="" 1b,="" c)="" และเพิ่มขึ้นอย่างมีนัยสำคัญในหนู="" snx="" ที่มีความดันโลหิตสูง="" (รูปที่="" 1d,="" e,="" g,="" h)="" ในหนูแรท="" snx="" คอมพลีเมนต์แฟกเตอร์="" c3c="" ไม่เพียงสะสมในเนื้อเยื่อไตเท่านั้นแต่ยังเพิ่มการควบคุมอย่างมีนัยสำคัญที่ระดับ="" mrna="" (รูปที่="" 1f)="" การแสดงออกของ="" renal="" c1q="" mrna="" มีแนวโน้มที่ระดับที่สูงกว่าในหนู="" snx="" มากกว่ากลุ่มควบคุม="" แต่ความแตกต่างนี้ไม่มีนัยสำคัญ="" (รูปที่="" 1i)="" ที่น่าสนใจคือในหนูทั้งการสะสมของ="" c3c="" และ="" c1q="" ในไตมีความสัมพันธ์สูงกับ="" bp="" ของหลอดเลือดแดงเฉลี่ย="" (รูปที่="" 2a,="" d)="" และภาวะหัวใจโตเกินเมื่อประเมินโดยน้ำหนัก="" lv="" (รูปที่="" 2b,="" e)="" นอกจากนี้="" ในแบบจำลอง="" snx="" การสะสมของสารเติมเต็มของไตสัมพันธ์กับอาการบาดเจ็บที่ไตและการทำงานของไต="" glomerular="" c3c="" เช่นเดียวกับการสะสม="" c1q="" แสดงความสัมพันธ์ที่ชัดเจนกับซีรัมครีเอตินีน="" (รูปที่="" 2c,="" f)="" และโปรตีนในปัสสาวะ="" (รูปที่="" 2g,="" h)="" ความสัมพันธ์ของครีเอตินีนในซีรัมและโปรตีนในปัสสาวะกับคอมพลีเมนต์ไม่น่าแปลกใจ="" เนื่องจากพารามิเตอร์ทั้งสองยังแสดงความสัมพันธ์ที่แข็งแกร่งระหว่างกันในแบบจำลองหนูนี้="" (รูปที่="" 2i)="" ดังนั้น="" ข้อมูลของเราในรูปแบบหนูที่มีภาวะความดันโลหิตสูง="" ckd="" เนื่องจากการลดมวลของไตและการทำงานหนักเกินไป="" ชี้ให้เห็นถึงความเชื่อมโยงของการสะสมของไตและความดันโลหิตสูง="">
การสะสมเสริมไม่ขึ้นกับโรคไตที่เป็นสาเหตุ
ในที่นี้ เราใช้แนวทาง 2 ขั้นตอน: อันดับแรก เรารวมผู้ป่วยทุกรายที่มีค่า BP ที่รายงานโดยไม่ขึ้นกับค่าพื้นฐานไตโรค(n=308, ดูตารางที่ 1 สำหรับรายละเอียด) จากข้อมูลพบว่า ผู้ป่วย 217 จาก 308 ราย (ร้อยละ 70.5) มีความดันโลหิตสูง ประการที่สอง สำหรับการวิเคราะห์เพิ่มเติม เรามุ่งเน้นไปที่กลุ่มย่อยของรูปแบบ GN ที่แพร่หลายมากที่สุด นั่นคือ IgAN, MGN และ LN และ 2 nonimmune complex-mediatedไตโรคคือ DN และ glomerulosclerosis เฉพาะส่วนโฟกัส (FSGS) 46 การตรวจชิ้นเนื้อเป็นศูนย์จากการปลูกถ่ายไต allografts ที่บริจาคจากผู้บริจาคที่มีชีวิตปกติทำหน้าที่เป็นกลุ่มควบคุม (ดูตารางที่ 1)
เพื่อตรวจสอบความสัมพันธ์ที่อาจเกิดขึ้นระหว่างความดันโลหิตสูงและส่วนประกอบของไต การสะสมของ C1q และ C3c ในช่องไตและช่องคั่นระหว่างหน้าถูกวิเคราะห์โดยการให้คะแนนแบบกึ่งปริมาณของการย้อมสีอิมมูโนวิทยา ปริมาณและความเข้มของการย้อมสี C1q และ C3c แตกต่างกันอย่างมากในการตรวจชิ้นเนื้อที่ตรวจสอบแล้ว (ดูรายละเอียดในภาพที่ 3) ในช่อง interstitial tubulointerstitial C3c ถูกฝากไว้ตามเยื่อหุ้มชั้นใต้ดินของ tubular และภายใน interstitial matrix (รูปที่ 3G) ในขณะที่การย้อมสี C1q มักจะจางและจำกัดอยู่ที่ interstitium (รูปที่ 3H)
การสะสมของ Glomerular C3c เพิ่มขึ้นในหลาย ๆไตโรคซึ่งรวมถึง IgAN, MGN, LN และ FSGS เมื่อเปรียบเทียบกับการตรวจชิ้นเนื้อเป็นศูนย์ตามเกณฑ์ปกติ (รูปที่ 4A) โดยรวมแล้ว การสะสมของ C1q ของไตนั้นจางกว่า C3c ของไต มันเพิ่มขึ้นอย่างมีนัยสำคัญใน IgAN, MGN, LN และ DN แต่ไม่ใช่ FSGS เมื่อเทียบกับการควบคุมการตรวจชิ้นเนื้อเป็นศูนย์ (รูปที่ 4B) ที่น่าสนใจคือ คอมพลีเมนต์ C3 และ C1q ไม่เพียงสะสมในไตที่เป็นโรคเท่านั้น แต่การแสดงออกของ mRNA ของไตในท้องถิ่นก็เพิ่มขึ้นด้วย ข้อมูล Nephroseq แสดงให้เห็นว่าทั้งการแสดงออกของ C3 และ C1q mRNA ได้รับการควบคุมอย่างมีนัยสำคัญใน IgAN, LN, DN และ FSGS เมื่อเปรียบเทียบกับกลุ่มควบคุม นั่นคือ ผู้ให้ที่มีสุขภาพดี (รูปที่ 4C, D) การแสดงออกของ C1q mRNA ต่ำกว่าการแสดงออก C3 การสะสมของ Tubulointerstitial C3c ก็เพิ่มขึ้นเช่นกันเมื่อเทียบกับการตรวจชิ้นเนื้อเป็นศูนย์ในส่วนใหญ่ไตโรค(รูปที่ 4E) ในขณะที่ C1q ไม่แตกต่างจากกลุ่มควบคุมการตรวจชิ้นเนื้อเป็นศูนย์ (ไม่แสดงข้อมูล) โดยสรุปแล้ว การสะสมของสารเติมเต็มของไตที่ทำเครื่องหมายไว้นั้นพบได้ทั่วไปในหลาย ๆ อย่างไตโรค. ต่อไป เราตรวจสอบความเกี่ยวข้องที่อาจเกิดขึ้นของ BP สูงต่อการสะสมของไต
มะเดื่อ 3. การสะสม C3c และ C1q ในการตรวจชิ้นเนื้อไต การตรวจชิ้นเนื้อไตของมนุษย์ถูกย้อมสำหรับ C3c (A, C, E, G) และ C1q (B, D, F, H) โดยใช้อิมมูโนฮิสโตเคมี (การย้อมสีน้ำตาล) รูปภาพที่เป็นตัวแทนของการทับถมของไตและทูบูโลอินเทอร์สติเชียลของ C3c และ C1q แสดงตัวอย่างของคะแนนที่ต่างกันของการสะสมคอมพลีเมนต์ ไม่มีการย้อมสีสำหรับ C3c ในการตรวจชิ้นเนื้อเป็นศูนย์ (A) และ C1q ในเนื้อร้ายท่อเฉียบพลัน (B) ตัวอย่างสำหรับการสะสม C3c ในไตใน NP ความดันโลหิตสูง/ขาดเลือด, คะแนน 1 (C) และการสะสม C1q ในคลาส II LN, คะแนน 2 (D) การสะสม C3c ที่โดดเด่นกว่าใน IgAN, คะแนน 4 (E) และการสะสม C1q, คะแนน 4 ในกรณีอื่นของคลาส II LN (F) การสะสมในช่องระหว่างเนื้อเยื่อตับของ C3c ในโรคไตอักเสบคั่นระหว่างหน้า คะแนน 4 (G) และการสะสม C1q คะแนน 4 (H) ในกรณีของ GN หลังการติดเชื้อ แถบมาตราส่วนแสดงถึง 100 µm LN, โรคไตอักเสบลูปัส; GN, glomerulonephritis
มะเดื่อ 4. การสะสมของไตและการแสดงออกที่แตกต่างกันไตโรค. การวิเคราะห์เชิงกึ่งปริมาณของการย้อมสี C3c (A) และการย้อมสี C1q (B) ในไตที่เลือกไตโรค. IgAN, MGN, LN, DN, FSGS และการตรวจชิ้นเนื้อจากการปลูกถ่ายไต allografts ที่บริจาคจากผู้บริจาคที่ไม่ความดันโลหิตสูง (0-การตรวจชิ้นเนื้อ) ทำหน้าที่เป็นตัวควบคุม ข้อมูลจากฐานข้อมูล Nephroseq แสดงการแสดงออกของ glomerular C3c (C) และ C1q (D) mRNA ในรูปแบบต่างๆไตโรคและกลุ่มควบคุมที่เกี่ยวข้อง นั่นคือ HLD ในช่อง tubulointerstitial ตรวจพบ C3c (E) เป็นหลักในการตัดชิ้นเนื้อไตจากผู้ป่วยโรคต่างๆ ความแตกต่างที่มีนัยสำคัญจะถูกทำเครื่องหมายด้วยเครื่องหมายดอกจัน: *p < 0.05;="" **p="">< 0.01="" และ="" ***p="">< 0.001="" บ่งชี้ความแตกต่างที่มีนัยสำคัญเมื่อเทียบกับการตรวจชิ้นเนื้อเป็นศูนย์="" gn,="" glomerulonephritis;="" mgn,="" เมมเบรน="" gn;="" ln,="" โรคไตอักเสบลูปัส;="" fsgs,="" glomerulosclerosis="" ปล้องโฟกัส;="" dn,="" โรคไตจากเบาหวาน;="" hld="" ผู้บริจาคที่มีสุขภาพที่ดี;="" igan,="" โรคไต="">
การสะสมของ C3c และ C1q ของไตเพิ่มขึ้นอย่างมีนัยสำคัญในความดันโลหิตสูงเมื่อเทียบกับผู้ป่วยปกติ
เพื่อตรวจสอบว่าการมีความดันโลหิตสูงในผู้ป่วยมีความเกี่ยวข้องกับการสะสมของไตหรือไม่ เราได้วิเคราะห์การตรวจชิ้นเนื้อจากผู้ป่วยโรคความดันโลหิตสูงและความดันโลหิตปกติไตโรคและเปรียบเทียบกับการสะสมเสริมในการตรวจชิ้นเนื้อเป็นศูนย์จากการปลูกถ่ายไต allografts ที่บริจาคจากผู้บริจาคที่ไม่ความดันโลหิตสูง (zero-biopsies) ใน IgAN ซึ่งเป็น GN ที่แพร่หลายที่สุดในภูมิภาคของเรา [27] เฉพาะการตรวจชิ้นเนื้อจากผู้ป่วยโรคความดันโลหิตสูงเท่านั้นที่มีไต (รูปที่ 5A) และ tubulointerstitial C3c (รูปที่ 5C) รวมทั้งการสะสมของ C1q ของไต (รูปที่ 5E) เมื่อเทียบกับการตรวจชิ้นเนื้อเป็นศูนย์ เมื่อเราเปรียบเทียบ C3c (รูปที่ 5B, D) และการสะสม C1q (รูปที่ 5F) ในการตรวจชิ้นเนื้อไตของกลุ่มประชากรทั้งหมด ทั้งกลุ่มตัวอย่างที่มีภาวะปกติและความดันโลหิตสูงมีปฏิกิริยาเพิ่มขึ้นอย่างมีนัยสำคัญเมื่อเปรียบเทียบกับกลุ่มควบคุม นอกจากนี้ ในการตัดชิ้นเนื้อของผู้ป่วยโรคความดันโลหิตสูง glomerular และ tubulointerstitial C3c มีค่าสูงกว่าผู้ป่วยที่ควบคุมความดันโลหิตปกติ (รูปที่ 5B, D) เนื่องจากการสะสม C1q ในท่อมีค่าต่ำในการตรวจชิ้นเนื้อที่ตรวจสอบทั้งหมด เราจึงไม่สังเกตเห็นความแตกต่างใดๆ ระหว่างกลุ่มทั้งใน IgAN (รูปที่ 5G) หรือในการวิเคราะห์ของกรณีศึกษาทั้งหมด (รูปที่ 5H) ดังนั้น ข้อมูลของเราแนะนำว่าโดยเฉพาะอย่างยิ่งการสะสม C3c ดูเหมือนว่าจะเกี่ยวข้องกับความดันโลหิตสูงไตโรค.
มะเดื่อ 5. การสะสมของไตในการตรวจชิ้นเนื้อไตจากผู้ป่วยความดันโลหิตสูงและความดันโลหิตปกติ การวิเคราะห์การสะสมของ C3c ในการตรวจชิ้นเนื้อจากผู้ป่วยที่มี IgAN (A, C) และการตรวจชิ้นเนื้อทั้งหมดที่ทำการศึกษาด้วยไตโรค(B, D) แยกในผู้ป่วยที่มีความดันโลหิตปกติและความดันโลหิตสูงเมื่อเทียบกับการตัดชิ้นเนื้อจากการปลูกถ่ายไต allografts ที่บริจาคจากผู้บริจาคที่ไม่เป็นโรคความดันโลหิตสูง (zero-biopsies) เป็นตัวควบคุมในช่องไต (A, B) และ tubulointerstitial (C, D) ในทำนองเดียวกัน การสะสมของ C1q ก็ถูกวิเคราะห์ในชิ้นเนื้อจากผู้ป่วยที่มี IgAN (E, G) และการตรวจชิ้นเนื้อที่ตรวจสอบทั้งหมดด้วยไตโรค(F, H) ในช่องไต (E, F) และ tubulointerstitial (G, H) ความแตกต่างที่สำคัญมีเครื่องหมายดอกจัน: *p < {0}}.05;="" **p="">< 0.01="" และ="" ***p="">< 0.001="" แสดงถึงความแตกต่างที่มีนัยสำคัญ="">
การสะสมของอาหารเสริมไตเกี่ยวข้องกับการบาดเจ็บและการทำงานของไต
การประเมินการเปลี่ยนแปลงทางจุลพยาธิวิทยาที่ประเมินโดย glomerulosclerosis (รูปที่ 6A), คะแนนการบาดเจ็บของ tubulointerstitial (รูปที่ 6B) และ VSI (รูปที่ 6C) พบว่ามีอาการบาดเจ็บที่ไตในระดับสูงอย่างมีนัยสำคัญในการตัดชิ้นเนื้อจากผู้ป่วยที่มีความดันโลหิตสูงกว่าผู้ป่วยที่เป็นภาวะปกติ ขอบเขตของการสะสม C3c ของไตมีความสัมพันธ์ในทางบวกกับ glomerulosclerosis (รูปที่ 6D) และ tubulointerstitial C3c ที่มีอาการบาดเจ็บที่ tubulointerstitial (รูปที่ 6E) และ VSI (รูปที่ 6F) ซึ่งบ่งชี้ว่าการสะสมของส่วนเติมเต็มสัมพันธ์กับอาการบาดเจ็บที่ไตเรื้อรัง นอกจากนี้ การเกิดพังผืดคั่นระหว่างหน้า/การฝ่อของท่อ (IF/TA) สูงขึ้นอย่างมีนัยสำคัญในการตัดชิ้นเนื้อไตของผู้ป่วยความดันโลหิตสูง (รูปที่ 6G) และมีความสัมพันธ์ที่ดีกับขอบเขตของการสะสม C3c ในท่อ (รูปที่ 6J) การทำงานของไตที่ประเมินโดย creatinine ในซีรัม ก็ลดลงเช่นกันในผู้ป่วยความดันโลหิตสูง (รูปที่ 6H) และมีความสัมพันธ์กับการสะสม C3c ของไต (รูปที่ 6K) ไม่พบความแตกต่างอย่างมีนัยสำคัญระหว่างผู้ป่วยภาวะปกติและผู้ป่วยความดันโลหิตสูงเกี่ยวกับโปรตีนในปัสสาวะ (รูปที่ 6I) อย่างไรก็ตาม มีความสัมพันธ์ที่อ่อนแอระหว่างโปรตีนในปัสสาวะและไต C3c (r=0.238; p=0.008; รูปที่ 6L) ผลลัพธ์เหล่านี้ยืนยันความสัมพันธ์ของการบาดเจ็บที่ไต การทำงาน การสะสมของสารเติมเต็ม และความดันโลหิตสูง
สุดท้าย เราตรวจสอบขอบเขตที่การสะสมส่วนเติมเต็มขึ้นอยู่กับระยะ CKD ตามที่คาดไว้ อายุเฉลี่ยของผู้ป่วยเพิ่มขึ้นด้วยระยะ CKD ที่สูงขึ้น (รูปที่ 7A) ในทางตรงกันข้าม สัดส่วนของผู้ป่วยโรคความดันโลหิตสูงไม่ขึ้นกับระยะ CKD (รูปที่ 7B) ซึ่งยืนยันการค้นพบข้างต้นของเรา ไต (รูปที่ 7C) และท่อ C3c (รูปที่ 7D) ต่ำกว่าอย่างมีนัยสำคัญในระยะ CKD 1 และ 2 เมื่อเทียบกับระยะ CKD ที่สูงกว่า ในขณะที่ไม่พบการเชื่อมโยงดังกล่าวสำหรับ C1q (รูปที่ 7E, F)
มะเดื่อ 6. การสะสมของไตในการตรวจชิ้นเนื้อของมนุษย์สัมพันธ์กับความเสียหายและการทำงานของไต ความเสียหายของไตที่ประเมินโดย GSI (A), TSI (B) และ VSI (C) เพิ่มขึ้นอย่างมีนัยสำคัญในผู้ป่วยที่มี BP สูงและ GSI มีความสัมพันธ์กับการสะสม C3c ของไต (D), TSI สัมพันธ์กับ tubulointerstitial C3c (E) และ VSI สัมพันธ์กับ tubulointerstitial C3c (F) IF/TA (G) และ serum creatinine (H) เพิ่มขึ้นในผู้ป่วยความดันโลหิตสูง ในขณะที่โปรตีนในปัสสาวะมีความคล้ายคลึงกันในทั้งสองกลุ่ม (I) Tubular C3c มีความสัมพันธ์กับ IF/TA (J) และ C3c ของไตกับ serum creatinine (K) และ C3c ของไตที่มีโปรตีนในปัสสาวะในระดับที่อ่อนแอกว่า (L) ความแตกต่างที่มีนัยสำคัญจะถูกทำเครื่องหมายด้วยเครื่องหมายดอกจัน: **p < 0.01="" และ="" ***p="">< 0.001="" บ่งชี้ความแตกต่างที่มีนัยสำคัญระหว่างผู้ป่วยที่มีความดันโลหิตปกติและความดันโลหิตสูงหรือความสัมพันธ์ที่มีนัยสำคัญ="" ความดันโลหิต,="" ความดันโลหิต;="" gsi,="" glomerulosclerosis;="" tsi,="" การบาดเจ็บที่ท่อนำไข่;="" vsi,="" การบาดเจ็บของหลอดเลือด;="" if/ta,="">
รูปที่ 7 การสะสมของ C3 ของไตในการตรวจชิ้นเนื้อของมนุษย์ แต่ไม่ใช่ความดันโลหิตสูงที่มีความสัมพันธ์กับระยะ CKD อายุเฉลี่ยของผู้ป่วยที่มี CKD เพิ่มขึ้นเมื่อเพิ่มระยะ CKD (A) ในขณะที่เปอร์เซ็นต์ของผู้ป่วยความดันโลหิตสูงไม่เกี่ยวข้องกับระยะ CKD (B) C3c (C, D) แต่ไม่ใช่ C1q (E, F) มีความสัมพันธ์อย่างดีกับระยะ CKD ที่แตกต่างกัน Glomeru lar C3c (C), tubular C3c (D), glomerular C1q (E) และ tubular C1q (F) ความแตกต่างที่สำคัญมีเครื่องหมายดอกจัน: *p < 0.{{10}}5;="" **p="">< 0.01;="" และ="" ***p="">< 0.001="">
การอภิปราย
ความก้าวหน้าของไตโรคโดยเฉพาะอย่างยิ่งความเสียหายของ tubulointerstitial แสดงให้เห็นว่าเป็นสื่อกลาง อย่างน้อยก็ในบางส่วน โดยการกระตุ้นส่วนเติมเต็ม [28] แต่บทบาทของการสะสมส่วนเติมเต็มในความดันโลหิตสูงและความเสียหายของไตยังไม่ชัดเจน ในการศึกษาของเรา เราพบว่ามีการสะสมของปัจจัยเสริมในไตเพิ่มขึ้น โดยเฉพาะ C3c ซึ่งมีความสัมพันธ์อย่างมากกับการบาดเจ็บของไตที่เพิ่มขึ้นและการทำงานของไตที่ด้อยกว่า นอกจากนี้บ่อยมากไตโรคมีความเกี่ยวข้องกับการเกิดความดันโลหิตสูงซึ่งเชื่อมโยงกับความเสี่ยงที่เพิ่มขึ้นของโรคหัวใจและหลอดเลือดและการลุกลามของ CKD [9] ในที่นี้ เราแสดงให้เห็นการสะสมของไตที่สูงขึ้นของผลิตภัณฑ์เสริม C1q ซึ่งเป็นเครื่องหมายของเส้นทางการกระตุ้นแบบคลาสสิก และ C3c ซึ่งเป็นส่วนประกอบของเส้นทางการกระตุ้นทั้ง 3 ทาง ในไตจากผู้ป่วยโรคความดันโลหิตสูงที่มีความแตกต่างกันไตโรคมากกว่าผู้ป่วยภาวะปกติ มีหลักฐานบางอย่างที่แสดงว่าส่วนเสริมมีบทบาทสำคัญในการพัฒนาและการเลวลงของความดันโลหิตสูง แต่บทบาทของการสะสมของไตในกระบวนการนี้ไม่เป็นที่ทราบแน่ชัด ในการตรวจชิ้นเนื้อไตของมนุษย์และแบบจำลองหนูที่มีภาวะความดันโลหิตสูงเกิน เป็นที่ชัดเจนว่า C3c สามารถตรวจพบได้บ่อยกว่า C1q ซึ่งแนะนำว่าวิถีทางแบบคลาสสิกไม่ได้มีหน้าที่เฉพาะสำหรับการกระตุ้นส่วนเสริมในไต โรค. อย่างไรก็ตาม พบว่า C1q มีส่วนอย่างยิ่งในการปรับรูปแบบหลอดเลือดแดงความดันโลหิตสูงโดยการกระตุ้นการส่งสัญญาณ -catenin [29] คำถามที่ว่าการเติมเต็มทำให้เกิดความดันโลหิตสูงหรือความดันโลหิตสูงกระตุ้นการเติมเต็มหรือไม่ยังคงไม่ชัดเจน ในการศึกษานี้ เราสังเกตความสัมพันธ์ที่ชัดเจนของการสะสมของสารเติมเต็มของไต โดยเฉพาะอย่างยิ่งของปัจจัย C3c กับระดับของการบาดเจ็บและการทำงานของไต ความดันโลหิตสูงที่มีแนวโน้มมากที่สุดจะนำไปสู่การกระตุ้นระบบเสริมเพิ่มเติม แต่มีรายงานบางฉบับที่สนับสนุนสมมติฐานที่ว่าการเสริมไม่เพียงรองลงไปเท่านั้น แต่ยังเป็นสาเหตุของความดันโลหิตสูงอีกด้วย ในการศึกษาระยะยาวที่มีการติดตามผลเป็นเวลา 15 ปี อุบัติการณ์ของความดันโลหิตสูงเพิ่มขึ้นอย่างมีนัยสำคัญในผู้ป่วยที่มีระดับ C3 ในเลือดสูงในพลาสมาที่การตรวจวัดพื้นฐาน ซึ่งบ่งชี้ถึงบทบาทของพลาสมา C3 ในการเกิดโรคความดันโลหิตสูง [10] นอกจากนี้ ผู้ป่วยที่เป็นโรคความดันโลหิตสูงที่ดื้อต่อการรักษามีระดับ C3 ในพลาสมาที่สูงกว่าอย่างมีนัยสำคัญเมื่อเทียบกับผู้ป่วยที่มีความดันโลหิตสูงที่ควบคุมได้ [11] ในทางตรงกันข้าม ในการศึกษาตามกลุ่มประชากรที่มีระดับ C3 ในเลือดสูง มีความสัมพันธ์กับอุบัติการณ์ที่เพิ่มขึ้นของการเข้ารับการรักษาในโรงพยาบาลครั้งแรกเนื่องจาก CKD แต่ไม่ขึ้นกับ BP [12] อย่างไรก็ตาม การศึกษาหลังนี้จำกัดเฉพาะการศึกษาระดับ C3 ในพลาสมา ในขณะที่ไม่ได้ตรวจสอบการแสดงออกของปัจจัยเสริมและการกระตุ้นส่วนเสริมในท้องถิ่น ผลิตภัณฑ์สำหรับความแตกแยกของ C3 นั่นคือ C3c ไม่เพียงสะสมแบบพาสซีฟเท่านั้น แต่ C3 mRNA ยังแสดงออกเฉพาะที่ในไตที่เป็นโรคจากผู้ป่วยความดันโลหิตสูงและหนู SNX อย่างไรก็ตาม เราไม่ได้ระบุแหล่งที่มาของ C3 ของไต แต่มีรายงานว่านอกจากตับแล้ว C3 mRNA ส่วนใหญ่ยังแสดงออกในโมโนไซต์และมาโครฟาจ [30] นอกจากนี้ ไฟโบรบลาสต์ เซลล์เยื่อบุผิวและเซลล์บุผนังหลอดเลือดยังได้รับรายงานว่าเป็นแหล่ง C3- ภายนอกตับที่มีศักยภาพ [31] นอกจากนี้ยังพบการกระตุ้นเสริมในแบบจำลองความดันโลหิตสูงที่เกิดจาก angiotensin II ในหนูเมาส์ ในหนูที่มีความดันโลหิตสูงตามธรรมชาติ การขาด C3 สามารถยกเลิกความดันโลหิตสูงที่ไวต่อเกลือได้ [18] ซึ่งบ่งชี้ว่า C3 มีส่วนเกี่ยวข้องอย่างยิ่งในเส้นทางที่ทำให้เกิดความดันโลหิตสูง อย่างไรก็ตาม ผลกระทบเหล่านี้ยังสามารถเป็นสื่อกลางเพิ่มเติมในลำดับขั้นเพิ่มเติมได้อีกด้วย การใช้หนูที่ขาดตัวรับ C5a (C5aR) Zhang และคณะ [32] แสดงให้เห็นว่าการส่งสัญญาณ C5aR มีบทบาททางพยาธิวิทยาในการอักเสบของหัวใจและการสร้างใหม่ แม้ว่าการยับยั้ง C5aR จะไม่ส่งผลต่อความดันโลหิตที่เพิ่มขึ้นที่เกิดจาก angiotensin II แต่ความเสียหายของหัวใจเมื่อประเมินโดยภาวะหัวใจโตมากเกินไป การอักเสบ และการเกิดพังผืดในช่องท้องจะลดลง [33] ในแบบจำลองความดันโลหิตสูงในหนู SNX ของเรา เรายืนยันว่าการสะสมของสารเติมเต็มของไตมีความสัมพันธ์ที่ดีกับความเสียหายของไต แต่ยังมีภาวะหัวใจโตมากเกินไปและความดันโลหิตตกด้วย ความดันโลหิตสูงที่เหนี่ยวนำโดยเสริมถูกสื่อกลางผ่านทางตัวรับส่วนเติมเต็มสำหรับ C3a และ C5a กฎข้อบังคับ Tregs สามารถยับยั้งการทำงานของเอฟเฟกต์ Tregs และออกฤทธิ์ต้านการอักเสบได้ ในรูปแบบความดันโลหิตสูงที่เกิดจาก angiotensin II แสดงให้เห็นว่า Tregs เป็นตัวปรับความดันโลหิตที่สำคัญและป้องกันความเสียหายของอวัยวะส่วนปลาย [15, 34] การบำบัดด้วย Angiotensin II กระตุ้นการแสดงออกของตัวรับ C3a และ C5a บน Tregs ซึ่งนำไปสู่จำนวน Tregs ที่ลดลงในหนูประเภท wild-type แต่ไม่ใช่ในหนูทดลองคู่ที่น่าพิศวง C3a และ C5a รีเซพเตอร์ [35] นอกจากนี้ หนูที่น่าพิศวงคู่เหล่านี้พัฒนาความดันโลหิตสูงทื่อและพังผืดของไตน้อยลงและการบาดเจ็บของไต [35] การเชื่อมโยงของการกระตุ้นคอมพลีเมนต์และการบาดเจ็บของไตและการเกิดพังผืดของไต ที่ประเมินโดย glomerulosclerosis และ IF/TA ก็ได้รับการยืนยันในการศึกษาชิ้นเนื้อของเราเช่นกัน ในทางกลไก ความดันโลหิตเพิ่มขึ้นเกิดจากการกระตุ้น C3-สื่อกลางของระบบ renin-angiotensin ในเซลล์กล้ามเนื้อเรียบของหลอดเลือดที่มีโมเลกุลปลายน้ำ เช่น TGF-ß/PDGF-A และโดยการเปลี่ยนฟีโนไทป์ของเซลล์มีเซนไคม์และการเหนี่ยวนำของเยื่อบุผิว - การเปลี่ยนผ่านเป็น mesenchymal [31] การส่งสัญญาณเสริมมีเป้าหมายในโรคความดันโลหิตสูงอื่นๆ ด้วย ในการตั้งครรภ์ปกติ มีการกระตุ้นการเติมเต็มแต่มีมากเกินไปในโรคความดันโลหิตสูงของการตั้งครรภ์และความหลากหลายทางพันธุกรรมของโปรตีนเสริม ดูเหมือนจะจูงใจให้เกิดภาวะครรภ์เป็นพิษ [36] การยับยั้งการส่งสัญญาณคอมพลีเมนต์โดยการบำบัดด้วยคอมพลีเมนต์รีเซพเตอร์ 1 ที่ละลายได้ ส่งผลให้เกิดความดันโลหิตสูงที่ลดทอนลงในแบบจำลองรกของภาวะครรภ์เป็นพิษ
ข้อจำกัดของการศึกษา
แม้ว่าเราจะพยายามเสริมสร้างการค้นพบของเราในการตรวจชิ้นเนื้อไตของมนุษย์ต่างๆไตโรคที่มีและไม่มีภาวะความดันโลหิตสูงโดยการรวมเอาแบบจำลองสัตว์ที่เหมาะสมเพื่อพิสูจน์ความสัมพันธ์ระหว่างการสะสมส่วนประกอบในเนื้อเยื่อไตและความดันโลหิตสูง เราต้องยอมรับข้อจำกัดหลายประการและอคติในการคัดเลือก ในการศึกษาในมนุษย์ เราเผชิญกับข้อจำกัดของกลุ่มประชากรที่แปรผันกับตัวสร้างความสับสนต่างๆ มากมายที่ไม่สามารถระบุหรือแยกออกได้อย่างชัดเจน เพื่อที่จะกล่าวถึงประเด็นนี้และเพื่อให้กลุ่มศึกษามีความกลมกลืนกัน เรายังได้วิเคราะห์ความสัมพันธ์ของการเติมเต็มด้วยการเป็นพังผืดของไต (IF/TA) เป็นเครื่องหมายตัวแทนของการสูญเสียไตและความก้าวหน้าของต้นแบบไตโรคเช่นเดียวกับระยะ CKD ที่เราสามารถแสดงการค้นพบที่คล้ายกันได้ ยิ่งไปกว่านั้น ข้อมูลเกี่ยวกับระยะเวลาของโรคที่เกี่ยวข้องหรือการรักษาพยาบาลในปัจจุบันยังไม่มีข้อมูลอย่างเป็นระบบ ทำให้ประเด็นเหล่านี้กลายเป็นตัวก่อกวนอื่นที่เราต้องพูดถึง เนื่องจากเราคัดแยกผู้ป่วยไม่กี่รายอย่างเป็นทางการที่ไม่มีความดันโลหิตที่ได้รับการบันทึกไว้อย่างดีทางคลินิก จึงมีแนวโน้มว่าผู้ป่วยเหล่านั้นอาจไม่มีความดันโลหิตสูงหรือความดันโลหิตสูงที่ควบคุมได้จนถึงจุดที่พวกเขาอาจมีการติดตามอย่างสม่ำเสมอซึ่งอาจทำให้เกิดอคติในการเลือก ตรงกันข้ามกับการทดลองในสัตว์ทดลองในกลุ่มมนุษย์ที่มีโปรตีนในปัสสาวะในขณะที่ทำการตรวจชิ้นเนื้อไตไม่ได้รายงานอย่างสม่ำเสมอสำหรับผู้ป่วยทุกราย ดังนั้นเราจึงสามารถรวมผู้ป่วยทั้งหมดเพียง 2/3 เท่านั้นสำหรับการวิเคราะห์ที่เกี่ยวข้อง ซึ่งอาจส่งผลต่อผลลัพธ์บางส่วน ข้อสังเกต โปรตีนในปัสสาวะไม่สูงขึ้นอย่างมีนัยสำคัญในผู้ป่วยไตที่มีและไม่มี BP สูง ทำให้เกิดอคติที่มีนัยสำคัญของโปรตีนในปัสสาวะไม่น่าเป็นไปได้
บทสรุป
เมื่อนำมารวมกันแล้ว การศึกษาของเราเน้นย้ำถึงความสัมพันธ์ที่แน่นแฟ้นของการสะสมตัวกับความดันโลหิตสูง แต่ยังรวมถึงความเสียหายของไตในมนุษย์และในการทดลองไตโรค. แม้ว่าเราจะไม่สามารถตอบคำถามว่าการสะสมสารเติมเต็มเป็นสาเหตุของการเกิดความดันโลหิตสูงหรือไม่ แต่ข้อมูลสนับสนุนการมีส่วนร่วมของการกระตุ้นส่วนเสริมในการเกิดโรคหรือความก้าวหน้าของความดันโลหิตสูงในหลาย ๆไต โรคซึ่งแสดงถึงบทบาทที่เป็นไปได้สำหรับกลยุทธ์การยับยั้งการเสริมสำหรับการจัดการในอนาคตของกรณีการรักษาที่ทนไฟสำหรับความดันโลหิตสูงและไตโรค. อย่างไรก็ตาม จำเป็นต้องมีการศึกษาเพิ่มเติมเพื่อระบุบทบาทที่แท้จริงของการเติมเต็มในการเกิดโรคของโรคความดันโลหิตสูง
Cistanche รักษาได้โรคไต
จาก: 'เติมเต็มในไตโรคในฐานะผู้มีส่วนสนับสนุนต่อภาวะความดันโลหิตสูงในหลอดเลือด' โดยลิซ่า-มาเรน ฟิชเชอร์ และคณะ
---ไตความดันโลหิต Res 2021;46:362–376
อ้างอิง
1 คู่หู WG. แนวคิดพื้นฐานและการแปลความหมายของโรคไตที่อาศัยภูมิคุ้มกัน เจ แอม ซ็อก เนโฟรล 2012 มี.ค.;23(3):381–99.
2 Kojouharova M, Reid K, Gadjeva M. ข้อมูลเชิงลึกใหม่เกี่ยวกับกลไกระดับโมเลกุลของการกระตุ้นส่วนเติมเต็มแบบคลาสสิก โมล อิมมูนอล 2010 ส.ค.;47(13):2154–60.
3 Dobo J, Pal G, Cervenak L, Gal P. บทบาทที่เกิดขึ้นใหม่ของโปรตีเอสซีรีนที่เกี่ยวข้องกับเลคตินที่ผูกมัดกับแมนโนส (MASPs) ในเส้นทางเลคตินของคอมพลีเมนต์และอื่น ๆ Immunol Rev. 2016 พ.ย.;274(1):98–111.
4 Pangburn MK, Schreiber RD, Muller-Eber hard HJ. การก่อตัวของ C3 convertase เริ่มต้นของเส้นทางคอมพลีเมนต์ทางเลือก การได้มาซึ่งกิจกรรมที่คล้าย C3b โดยการไฮโดรไลซิสที่เกิดขึ้นเองของไทโอเอสเตอร์สมมุติใน C3 ดั้งเดิม เจ เอ็กซ์พี เมด 1981 ก.ย. 1;154(3):856–67.
5 Ricklin D, Hajishengallis G, Yang K, Lambris JD. เสริม: ระบบกุญแจสำหรับการเฝ้าระวังภูมิคุ้มกันและสภาวะสมดุล นัท อิมมูนอล. 2010 ก.ย.;11(9):785–97.
6 Nozal P, Lopez-Trascasa M. Autoantibodies ต่อต้านโปรตีนทางเดินเสริมทางเลือกในโรคไต เนโฟรโลเกีย 2016 ก.ย.-ต.ค.36(5):489–95. 7 เลา เคเค, ซูซูกิ เอช, วัค เจ, ไวแอตต์ อาร์เจ กำเนิด Patho ของ Henoch-Schönlein purpura ne phritis เพเดียท เนโฟรล. 2010 ม.ค. 25(1):19– 26.
8 Wenzel U, Turner JE, Krebs C, Kurts C, Har rison DG, Ehmke H. กลไกภูมิคุ้มกันในความดันโลหิตสูง เจ แอม ซ็อก เนโฟรล 2016 มี.ค.;27(3):677–86
9 Drawz PE, Beddhu S, Kramer HJ, Rakotz M, Rocco MV, Whelton PK. การวัดความดันโลหิต: มุมมอง KDOQI Am J ไต Dis. 2020 มี.ค.;75(3):426–34.
10 Engstrom G, Hedblad B, Berglund G, Janzon L, Lindgarde F. ระดับ C3 ในพลาสมาของคอมพลีเมนต์ C3 สัมพันธ์กับการพัฒนาของความดันโลหิตสูง: การศึกษาตามกลุ่มตามยาว เจ ฮุม ไฮเปอร์เทนส์. 2007 เม.ย.;21(4):276–82.
11 Magen E, Mishal J, Paskin J, Glick Z, Yosefy C, Kidon M และอื่น ๆ ความดันโลหิตสูงในหลอดเลือดแดงที่ต้านทานสัมพันธ์กับระดับเลือดที่สูงขึ้นของโปรตีน C3 และ C-reactive ที่เพิ่มขึ้น เจ คลิน ไฮเปอร์เทนส์ 2008 ก.ย.;10(9):677–83.
12 Bao X, Borne Y, Muhammad IF, Schulz CA, Persson M, Orho-Melander M, และคณะ เสริม C3 และการรักษาในโรงพยาบาลจากเหตุการณ์ที่เกิดขึ้นเนื่องจากเรื้อรังไตโรค: การศึกษาตามรุ่นประชากร บีเอ็มซี เนโฟรล 2019 21 ก.พ.; 20(1):61.
13 Klanke B, Cordasic N, Hartner A, Schmieder RE, Veelken R, Hilgers KF ความดันโลหิตเทียบกับผลกระทบจากแร่คอร์ติคอยด์โดยตรงต่อการอักเสบของไตและการเกิดพังผืดในความดันโลหิตสูง DOCA-salt การปลูกถ่าย Nephrol Dial 2008 พ.ย.;23(11):3456–63.
14 Chen L, Fukuda N, Shimizu S, Kobayashi H, Tanaka S, Nakamura Y, และคณะ บทบาทของคอมพลีเมนต์ที่ 3 ในการสร้างเรนินระหว่างการสร้างความแตกต่างของเซลล์ต้นกำเนิดจากเยื่อหุ้มเซลล์ (mesenchymal) ไปสู่เซลล์กล้ามเนื้อเรียบ Am J Physiol เซลล์ Physiol. 2020 พฤษภาคม 1;318(5): C981–C990
15 Kvakan H, Kleinewietfeld M, Qadri F, Park JK, Fischer R, Schwarz I, และคณะ เซลล์ T ที่มีกฎข้อบังคับช่วยปรับปรุงความเสียหายของไดแอกในรถยนต์ที่เกิดจาก angiotensin II การไหลเวียน 2552 มิ.ย. 9;119(22): 2904–12.
16 Ruan CC, Ge Q, Li Y, Li XD, Chen DR, Ji KD, และคณะ โพลาไรเซชันมาโครฟาจเสริมที่เป็นสื่อกลางในเนื้อเยื่อไขมันในช่องท้องมีส่วนทำให้เกิดการบาดเจ็บของหลอดเลือดในหนูที่มีเกลือ deoxycorticosterone acetate-salt หลอดเลือดแดง Thromb Vasc Biol 2015 มี.ค.;35(3):598–606.
17 คาร์นีย์ EF ความดันโลหิตสูง: บทบาทของ C3aR และ C5aR ในเซลล์ Treg แนท เรฟ เนโฟรล. 2018 เม.ย.; 14(4):214.
18 Negishi E, Fukuda N, Otsuki T, Katakawa M, Komatsu K, Chen L, และคณะ การมีส่วนร่วมของคอมพลีเมนต์ 3 ในความดันโลหิตสูงที่ไวต่อเกลือโดยการกระตุ้นระบบ renin-angiotensin ของไตในหนูที่มีความดันโลหิตสูงตามธรรมชาติ แอม เจ ฟิสิออล รีนัล ฟิสิออล 2018 1 ธันวาคม; 315(6):F1747–F1758.
19 Dimmler A, Haas CS, Cho S, Hattler M, Forster C, Peters H และอื่น ๆ microdissection การจับด้วยเลเซอร์และ PCR แบบเรียลไทม์สำหรับการวิเคราะห์การแสดงออกของยีน glomerular endothelin-1 ใน mesangiolysis ของหนู anti-Thy 1.1 และ murine Habu Snake Venom glomerulonephritis วินิจฉัย มลพธล. 2546 มิ.ย. 12(2):108–17.
20 Diez M, Abdelmagid N, Harnesk K, Strom M, Lidman O, Swanberg M, และคณะ การระบุบริเวณยีนที่ควบคุมการตอบสนองของ microglial อักเสบในระบบประสาทส่วนกลางของหนูหลังจากได้รับบาดเจ็บที่เส้นประสาท เจ นิวโรอิมมูนอล 2552 25 ก.ค. 212 (1– 2):82–92
21 Hainz N, Thomas S, Neubert K, Meister S, Benz K, Rauh M, และคณะ สารยับยั้งโปรตีอาโซมบอร์เทโซมิบช่วยป้องกันโรคไตอักเสบลูปัสในรูปแบบเมาส์ NZB/W F1 โดยคงไว้ซึ่งสถาปัตยกรรมของไตและท่อไต เนฟรอน เอ็กซ์พี เนฟรอล 2555; 120(2):e47–58.
22 โซเลซ เค, ราคูเซ่น LC. การจำแนกประเภทแบมฟ์กลับมาอีกครั้ง ไตอินเตอร์ 2013 ก.พ.;83(2):201–6.
23 KDIGO แนวปฏิบัติทางคลินิกสำหรับการจัดการความดันโลหิตในเรื้อรังไตโรค. ไต Int Suppl. 2555 ธ.ค.; 2(5):343.
24 Levey AS, Stevens LA, Schmid CH, Zhang YL, Castro AF 3rd, Feldman HI, และคณะ สมการใหม่ในการประมาณอัตราการกรองไต แอน อินเตอร์ เมดิ 2552 พฤษภาคม 5;150(9):604–12.
25 กลุ่ม เคซีดับบลิว. KDIGO 2012 แนวปฏิบัติทางคลินิกสำหรับการประเมินและการจัดการโรคเรื้อรังไตโรค. ไต Int Suppl. 2013;3:1–150.
26 Ju W, Greene CS, Eichinger F, Nair V, Hodgin JB, Bitzer M, และคณะ การกำหนดความจำเพาะชนิดเซลล์ที่ระดับการถอดรหัสในโรคของมนุษย์ ความละเอียดของจีโนม 2013 พ.ย.;23(11):1862–73.
27 บาร์รัต เจ, ฟีฮาลลี เจ, สมิธ เอซี การเกิดโรคของ IgA nephropathy เซมิน เนโฟรล. 2004 พฤษภาคม;24(3):197–217.
28 Hsu SI, Couser WG. ความก้าวหน้าเรื้อรังของความเสียหายของ tubulointerstitial ในโปรตีนยูริกไตโรคเป็นสื่อกลางโดยการกระตุ้นส่วนเติมเต็ม: บทบาทในการรักษาสำหรับสารยับยั้งการเติมเต็มหรือไม่? เจ แอม ซ็อก เนโฟรล 2546 ก.ค. 14(7 Suppl 2): S186–91
29 Sumida T, Naito AT, Nomura S, Nakagawa A, Higo T, Hashimoto A และอื่น ๆ การกระตุ้น C1q เสริมของการส่งสัญญาณ -catenin ทำให้เกิดการเปลี่ยนแปลงของหลอดเลือดแดงความดันโลหิตสูง แนท คอมมูน. 2015;6:6241.
30 de Bruijn MH, เฟย์ GH องค์ประกอบเสริมของมนุษย์ C3: ลำดับการเข้ารหัส cDNA และโครงสร้างหลักที่ได้รับ Proc Natl Acad Sci US A. 1985 ก.พ.;82(3):708–12.
31 Chen L, Fukuda N, Matsumoto T, Abe M. บทบาทของส่วนประกอบ 3 ในการเกิดโรคความดันโลหิตสูง Hypertens Res. 2020 เม.ย.; 43(4):255–62.
32 Zhang C, Li Y, Wang C, Wu Y, Cui W, Miwa T, และคณะ ตัวรับเสริม 5a เป็นสื่อกลางในการอักเสบและการเปลี่ยนแปลงของหัวใจที่เกิดจาก angiotensin II หลอดเลือดแดง Thromb Vasc Biol 2014 มิ.ย.;34(6):1240–8.
33 Zhang C, Li Y, Wang C, Wu Y, Du J. ศัตรูของ C5aR ป้องกันการเปลี่ยนแปลงของหัวใจในความดันโลหิตสูงที่เกิดจาก angiotensin II แอม เจ ไฮเปอร์เทนส์. 2014 มิ.ย.;27(6):857–64.
34 Barhoumi T, Kasal DA, Li MW, Shbat L, Lau rant P, Neves MF, และคณะ ลิมโฟไซต์ควบคุม T ป้องกันความดันโลหิตสูงที่เกิดจาก angiotensin II และการบาดเจ็บของหลอดเลือด ความดันโลหิตสูง 2011 มี.ค. 57(3):469–76.
35 Chen XH, Ruan CC, Ge Q, Ma Y, Xu JZ, Zhang ZB, และคณะ การขาดสารเสริม C3a และ C5a รีเซพเตอร์ช่วยป้องกันความดันโลหิตสูงที่เกิดจาก angiotensin II ผ่านทางเซลล์ T ที่ควบคุมได้ Circ Res. 2018 มี.ค. 30;122(7):970–83.
36 Regal JF, Burwick RM, เฟลมมิง เอสดี ระบบเสริมและภาวะครรภ์เป็นพิษ Curr Hypertens Rep. 2017 ต.ค. 18;19(11):87.
37 Regal JF, Lund JM, Wing CR, Root KM, Mc Cutcheon L, Bemis LT, และคณะ ปฏิกิริยาระหว่างระบบคอมพลีเมนต์และระบบเอ็นโดเทลินในการตั้งครรภ์ปกติและหลังขาดเลือดในรก โมล อิมมูนอล 2019 ต.ค. 114: 10–8