การเปรียบเทียบเนื้อหาของฟีนิลเอทานอลไกลโคไซด์ในถังเก็บน้ำเจ้าบ้านสองชนิดที่แตกต่างกัน หลังจากการอบแห้งที่แตกต่างกัน

พวกเขากำลังเปรียบเทียบเนื้อหาของฟีนิลเอทานอลไกลโคไซด์ในสองโฮสต์ที่แตกต่างกันซิสตันเชสเฮอร์บาหลังจากที่แตกต่างกันการบำบัดด้วยการอบแห้งGAO Peiwen1, GUO Yehong1 *, ZHAO Fafa1, ZHANG Dan2, ZHANG Fangming11 (วิทยาลัยพืชไร่, มหาวิทยาลัยเกษตรกรรมกานซู, หลานโจว 730070, จีน) 2 (ห้องปฏิบัติการหลักของรัฐวิทยาศาสตร์พืชแห้งแล้ง, หลานโจว 730070, จีน)

เชิงนามธรรมเพื่อเปรียบเทียบเนื้อหาของฟีนิลทานอยด์ไกลโคไซด์ 10 รายการใน Cistanches Herba ที่ผ่านการประมวลผลต่างๆ จากโฮสต์ต่างๆ โดยใช้โครมาโตกราฟีของเหลวสมรรถนะสูงเป็นพิเศษ-triple quadrupole Mass spectrometry (UPLC-QQQ-MS) Cistanches Herba แห้งถูกบด กรองผ่านตะแกรงตาข่าย 60- และสกัดด้วยอัลตราซาวนด์ด้วยเมทานอล 50% การแยกถูกดำเนินการบนคอลัมน์ Agilent Eclipse Plus C18 (2.1 มม.×150 มม., 1.8 ไมโครเมตร) โดยใช้การชะแบบเกรเดียนต์ด้วยเฟส A แบบเคลื่อนที่ (สารละลายในน้ำกรดฟอร์มิก 0.1%) และ B (อะซีโตไนไตรล์) การตรวจจับดำเนินการในโหมดการตรวจสอบปฏิกิริยาไดนามิกหลายปฏิกิริยาโดยใช้แหล่งกำเนิดไอออไนเซชันด้วยสเปรย์ด้วยไฟฟ้าใน UPLC-QQQ-MS

ผลลัพธ์แสดงให้เห็นว่ามีการสังเกตความแปรผันที่มีนัยสำคัญในองค์ประกอบของฟีนิลทานอยด์ไกลโคไซด์ 10 ชนิดท่ามกลางCistanches Herba ปลูกบนโฮสต์ต่างๆและอยู่ภายใต้การบำบัดการทำให้แห้งต่างๆ Cistanches Herba อบแห้งแบบแช่แข็งมีปริมาณสารประกอบเหล่านี้สูงสุดสำหรับพืชอาศัยทั้งสองชนิด รองลงมาคือทำให้แห้งที่อุณหภูมิ 80 องศา แม้ว่าการทำแห้งแบบแช่เยือกแข็งจะรักษาปริมาณฟีนิลทานอยด์ไกลโคไซด์ได้สูงสุด 10 รายการใน Cistanches Herba แต่การทำให้แห้งที่อุณหภูมิ 80 องศาจะคุ้มค่ากว่าสำหรับการผลิตขนาดใหญ่

คำสำคัญ:โครมาโตกราฟีของเหลวประสิทธิภาพสูงเป็นพิเศษ - สเปกโตรมิเตอร์มวลสี่เท่าสามเท่า; Cistanches Herba;Haloxylon ammodendron (CAMey.) Bunge; Atriplex canescens (Pursh) นัต; ฟีนิลธานอยด์ไกลโคไซด์; วิธีการอบแห้ง

Cistanche Raw material

คลิกที่นี่เพื่อรับสารสกัด TUBULOSA CISTANCHE ออร์แกนิกธรรมชาติที่มีเอไคนาโคไซด์ 30% และแอคทีโอไซด์ 12%

ซิแทนเชส เฮอร์บาคือลำต้นเนื้อแห้งมีใบเป็นสะเก็ดCistanche Deserticola YCMaหรือCistanche ทูบูโลซา(เชงค์) ไวท์. พบเห็นครั้งแรกใน "Materia Medica ของ Shen Nong" และติดอันดับหนึ่งในเกรดสูงสุด เป็นยาสมุนไพรจีนอันล้ำค่าที่สามารถใช้ได้ทั้งเป็นยาและอาหาร เนื่องจากส่วนใหญ่จะเติบโตในพื้นที่แห้งแล้ง เช่น มองโกเลียใน ซินเจียง กานซู และหนิงเซี่ย จึงถูกเรียกว่า "โสมทะเลทราย” Cistanche Deserticola มีรสหวาน เค็ม อุ่น กลับไปสู่เส้นลมปราณของไตและลำไส้ใหญ่ มีฤทธิ์บำรุงไตหยางเติมเอสเซ้นและเลือด ทำให้ลำไส้ชุ่มชื้น และเป็นยาระบาย เป็นต้น และมักใช้รักษาโรคต่างๆ เช่นไตหยางไม่เพียงพอ, ขาดสาระสำคัญและเลือด, ความอ่อนแอและภาวะมีบุตรยาก, และความอ่อนแอของกล้ามเนื้อและกระดูก [1 -4].ฟีนิลเอทานอลไกลโคไซด์เป็นสารออกฤทธิ์หลักในซิสตานเช่ เดซินิโคลาและยังเป็นสารที่ได้รับรายงานมากที่สุดในการวิจัยเกี่ยวกับ Cistanche Deserticola [5]

พืชอาศัยดั้งเดิมของซิสตานเช่ เดซินิโคลาคือ Haloxylon ammodendron (CAMey.) Bunge ในวงศ์ Chenopodiaceae อย่างไรก็ตาม Haloxylon ammodendron จะเติบโตช้าและมีมูลค่าทางเศรษฐกิจต่ำ พืช Haloxylon ammodendron ที่มีอายุน้อยกว่า 3 ปีเป็นเรื่องยากที่จะนำไปใช้ในการเพาะปลูก Cistanche Deserticola เพื่อบรรเทาความขัดแย้งระหว่างอุปสงค์และอุปทานในตลาดยา Cistanche Deserticola เพิ่มการผลิต Cistanche Deserticola และบรรลุการเพาะปลูก Cistanche Deserticola ขนาดใหญ่และเป็นมาตรฐาน นักวิจัยทางวิทยาศาสตร์ประสบความสำเร็จในการแนะนำ Atriplex canescens (Pursh) Nutt ในกานซู แต่ไม่ว่าต้นไม้ชนิดนี้สามารถใช้เป็นพืชอาศัยใหม่สำหรับ Cistanche Deserticola หรือไม่ และประสิทธิภาพการเจริญเติบโตของมันดีกว่า Haloxylon ammodendron หรือไม่ กลายเป็นประเด็นร้อนที่เป็นข้อกังวลอย่างกว้างขวาง [6] . การที่ Atriplex truncatula สามารถทดแทน Haloxylon ammodendron ในการปลูก Cistanche Deserticola ได้อย่างสมบูรณ์หรือไม่นั้น ยังคงต้องได้รับการสนับสนุนจากผลการวิจัยพื้นฐานที่กว้างกว่า ครอบคลุมกว่า และเจาะลึกมากขึ้น ในประเทศของฉัน แม้ว่าจะมีการวิจัยอย่างกว้างขวางเกี่ยวกับ Atriplex truncatula จากแง่มุมของการแนะนำ การปลูกต้นกล้า และการวิเคราะห์ส่วนประกอบ [7-10] แต่ก็มีรายงานน้อยมากเกี่ยวกับการปลูกเชื้อ Atriplex truncatula ด้วย Cistanche Deserticola ในอดีต การวิจัยมุ่งเน้นไปที่ลักษณะการพัฒนาและการใช้ประโยชน์ของ Cistanche Deserticola [11-14] เป็นหลัก อย่างไรก็ตาม ยังไม่มีรายงานการวิจัยเกี่ยวกับส่วนผสมออกฤทธิ์ของโฮสต์ Cistanche Deserticola สองตัว โดยเฉพาะอย่างยิ่ง Cistanche Deserticola โฮสต์สองตัวหลังจากใช้กระบวนการทำให้แห้งต่างกัน มีการศึกษาเพียงเล็กน้อยเกี่ยวกับความแตกต่างในการเก็บรักษาส่วนผสมออกฤทธิ์

โครมาโตกราฟีของเหลวประสิทธิภาพสูงพิเศษ - ทริปเปิลควอดรูโพลแมสสเปกโตรมิเตอร์ (UPLC-QQQ-MS) ใช้ UPLC เป็นระบบแยกโครมาโตกราฟีและทริปเปิลควอดรูโพล (QQQ) เป็นตัววิเคราะห์แบบอนุกรม เป็นเทคโนโลยีแมสสเปกโตรเมตรีของเหลวที่มีผลการแยกที่ดีในหลาย ๆ -องค์ประกอบระบบที่ซับซ้อนและสามารถวิเคราะห์เชิงปริมาณส่วนประกอบที่ซับซ้อนของการแพทย์แผนจีนได้อย่างรวดเร็วและแม่นยำ [15-16] ในการทดลองนี้ เทคโนโลยี UPLC-QQQ-MS ถูกนำมาใช้ในการวิเคราะห์เชิงปริมาณฟีนิลเอทานอลไกลโคไซด์ 10 ชนิด ซึ่งรวมถึงเอ็กไคนาซีไซด์ เวอร์บาสโคไซด์ ไอซอร์บาสโคไซด์ และแอนโธไซยาโนไซด์ A ในผลิตภัณฑ์แห้งของ Cistanche Deserticola สองสายพันธุ์ที่เป็นโฮสต์หลังการบำบัดแบบแห้งที่แตกต่างกัน การเปรียบเทียบส่วนประกอบเหล่านี้ใน Cistanche Deserticola ภายใต้วิธีการทำให้แห้งที่แตกต่างกันและโฮสต์ที่แตกต่างกัน ถือเป็นพื้นฐานทางทฤษฎีสำหรับการพัฒนาและการใช้ฟีนิลเอทานอลไกลโคไซด์ใน Cistanche Deserticola อย่างแม่นยำ

Cistanche extract can reduce Inflammatory hyperplasia (2)

1 วัสดุและเครื่องมือ

Haloxylon ammodendron Cistanches และ Cistanches tetrapterans ถูกรวบรวมจากฐานการปลูก Cistanche Deserticola ในเทศมณฑล Jingtai มณฑลกานซู เวลาเก็บเกี่ยวคือเดือนมีนาคม 2023 ศาสตราจารย์ Guo Yehong จาก Gansu Agricultural University ระบุลำต้นที่มีเนื้อของ Cistanche Deserticola ที่มีใบเป็นสะเก็ด สารอ้างอิง ฝั่งเอ็กไคนาเซีย (C35H46O20, หมายเลข CAS: 82854-37-3, ความบริสุทธิ์ 98.30%), เวอร์บาสโคไซด์ (C29H36O15, หมายเลข CAS: 61276-17-3, ความบริสุทธิ์ 99.35%), ซ่อนกลิ่น A (C37H48O21, หมายเลข CAS: 112516-05-9, ความบริสุทธิ์ 99.74%), ไอโซมูรัสโคไซด์ (C29H36O15, หมายเลข CAS: 61303-13-7, ความบริสุทธิ์ 97.77%), การ์เดนไอโพไซด์ (C17H24O10, หมายเลข CAS: 24512-63-8, ความบริสุทธิ์ 99.11 %), 2 '-อะซิติล เวอร์บาสโคไซด์ (C31H38O16, หมายเลข CAS: 94492-24-7, ความบริสุทธิ์ 97.12%), ซาลิโดรไซด์

(C14H20O7, หมายเลข CAS: 10338-51-9, ความบริสุทธิ์ 98.43%), Motherwort (C15H24O9, หมายเลข CAS: 52949-83-4, ความบริสุทธิ์ 97.64%), Cistancheside A (C36H48O20, หมายเลข CAS: {{15} }, ความบริสุทธิ์ 93.24%), แอนจิโอไซด์ B (C31H38O16, หมายเลข CAS: 112516-04-8, ความบริสุทธิ์ 98.57%), Chengdu Pufeide Biotechnology Co., Ltd.; เมทานอลและอะซิโตไนไตรล์มีความบริสุทธิ์ทางโครมาโตกราฟี Shanghai Anpu Testing Technology Co., Ltd. Co., Ltd.; กรดฟอร์มิก, Tianjin Comeo Chemical Reagent Co., Ltd.; น้ำเป็นน้ำบริสุทธิ์มาก

DESKTOP-T2G6S78\6460 โครมาโทกราฟีของเหลวประสิทธิภาพสูงพิเศษ-สเปกโตรมิเตอร์มวลสี่เท่าสามเท่า บริษัท Agilent แห่งสหรัฐอเมริกา; เครื่องชั่งเชิงวิเคราะห์อิเล็กทรอนิกส์ AL104, Mettler-Toledo Instruments Co., Ltd., สวิตเซอร์แลนด์; LyoQuest-85 เครื่องอบแช่แข็ง, Telstar, บริษัทในสเปน

2 วิธีการทดลอง

2.1 การเตรียมตัวอย่าง Cistanche Deserticola ด้วยกระบวนการทำให้แห้งต่างกัน

ตัดผลิตภัณฑ์ Cistanche Deserticola สดจากโฮสต์ต่างๆ เป็นชิ้นหนา 3 มม. แล้วแปรรูปดังต่อไปนี้

(1) ตากแดด: นึ่งชิ้นเป็นเวลา 5 นาที แล้ววางราบในที่ที่มีแสงแดดส่องถึงเพื่อให้แห้ง ตรวจสอบการเปลี่ยนแปลงของปริมาณความชื้น เมื่อมีความชื้นน้อยกว่า 10% ให้เก็บออกเพื่อใช้ในภายหลัง

(2) การอบแห้ง: นึ่งชิ้นเป็นเวลา 5 นาที จากนั้นนำไปอบในเตาอบที่อุณหภูมิ 40, 60 หรือ 80 องศาเพื่อให้แห้งจนกระทั่งความชื้นน้อยกว่า 10% แล้วจึงนำไปเก็บไว้เพื่อใช้ในภายหลัง

(3) การทำแห้งแบบแช่แข็งแบบสุญญากาศ: วางชิ้นไว้ในตู้เย็น -80 องศาเป็นเวลา 2 ชั่วโมงก่อนที่จะทำให้เย็นลง จากนั้นนำไปใส่ในเครื่องอบแห้งแบบแช่แข็งแบบสุญญากาศ (ระดับสุญญากาศ 650Pa อุณหภูมิแช่แข็ง -55 องศา ) , แห้งเป็นเวลา 48 ชั่วโมง และเก็บเพื่อใช้ในภายหลัง

Cistanche tubulosa (5)

2.2 เงื่อนไขโครมาโตกราฟี

คอลัมน์ Agilent Eclipse Plus C18 (2.1 มม. × 150 มม., 1.8 ไมโครเมตร); อัตราการไหล: 0.3 มล./นาที; ปริมาณการฉีด 1 μL; เฟสเคลื่อนที่: เฟส A คือ 0.1% สารละลายน้ำกรดฟอร์มิก และเฟส B คืออะซีโตไนไตรล์แบบโครมาโตกราฟี ความเร็วในการชะล้างของเฟส A และ B เคลื่อนที่คือ 0~1.5 นาที, 10%~15% B; 1.5~2 นิ้ว, 15%~20% บี; 2~3 นาที 20%~25% บี; 3~4 นาที , 25%~30% บี; 4~5 นาที 30%~32% บี; 5~6 นาที, 32%~34% บี; 6~7 นาที 34%~36% บี; 7~8 นาที, 36 %~38% บี; 8~9 นาที 38%~40% บี; 9~9.5 นาที, 0%~45% บี; 9.5~9.6 นาที 45%~10% บี; 9.6~10 นาที 10% บี

2.3 ปรับสภาวะแมสสเปกโตรมิเตอร์ให้เหมาะสม

ประเภทแหล่งกำเนิดไอออน: แหล่งกำเนิดไอออนแบบสเปรย์อิเล็กทรอนิกส์; วิธีการสแกน: การสแกนไอออนลบ; อุณหภูมิแหล่งกำเนิดไอออน: 350 องศา; เครื่องพ่นยา: 35 psi; โหมดตรวจสอบปฏิกิริยาหลายปฏิกิริยาและโหมดปฏิกิริยาหลายปฏิกิริยาแบบไดนามิกเพื่อตรวจสอบและวิเคราะห์สารประกอบแต่ละชนิด สภาวะที่เหมาะสมที่สุดสำหรับแมสสเปกโตรเมตรีของสาร 10 ชนิดแสดงอยู่ในตารางที่ 1

ORGANIC CISTANCHE TUBULOSA EXTRACT WITH 30% ECHINACOSIDE AND 12% ACTEOSIDE

2.4 การเตรียมสารละลายอ้างอิงและสารละลายเส้นโค้งมาตรฐาน

ชั่งน้ำหนักผงมาตรฐานของเอชินาโคไซด์,เวอร์บาสโคไซด์, อะออร์โทไซต์ A, ไอโซเลบาสโคไซด์, การ์เดนไอโพไซด์, 2'-อะซิติลเวอร์บาสโคไซด์, ซาลิโดรไซด์, ลีโอนีน, ระยะทาง A และอะออร์โทไซต์ B. เติมเมทานอล 50% เพื่อสร้างสารละลายอ้างอิงแบบผสมที่มี 0.2 มก. ต่อ 1 มล.; เจือจางด้วยเมทานอล 50% ในชุดสารละลายผสมมาตรฐาน 40.96, 102.4, 256, 640, 1 600, 4 000 ug/L กด " เงื่อนไขต่ำกว่า 2.2" และ 2.3" จะถูกฉีดตามลำดับจาก ความเข้มข้นต่ำถึงความเข้มข้นสูง จากนั้นจึงใช้ซอฟต์แวร์เชิงปริมาณ (นักล่ามวลแบบคล่องตัว) เพื่อประมวลผลผลการตรวจจับโดยใช้เส้นโค้งมาตรฐานที่ผ่านจุดเริ่มต้น ค่าตอบสนอง Y เป็นพิกัดและคำนวณสมการถดถอยและสัมประสิทธิ์สหสัมพันธ์ดังแสดงในตารางที่ 2 มีความสัมพันธ์เชิงเส้นที่ดีกับค่าการตอบสนองของไอออนภายในช่วง

ORGANIC CISTANCHE TUBULOSA EXTRACT WITH 30% ECHINACOSIDE AND 12% ACTEOSIDE