Cistanche Rb1 ลดความบกพร่องของหลอดเลือดที่เกี่ยวข้องกับอายุโดยการปรับเส้นทาง Gas6

ผลลัพธ์ Rb1 ช่วยลดความชราภาพในหลอดเลือดแดงใหญ่ของหนูที่มีอายุมาก

ในการระบุผลการต่อต้านการชราภาพของ Rb1 อันดับแรก เราตรวจสอบการชราภาพของเซลล์ ซึ่งเป็นลักษณะการแสดงออกของโปรตีนที่เกี่ยวข้องกับการยับยั้งวัฏจักรของเซลล์และการยับยั้งการเจริญเติบโตที่เปลี่ยนแปลงไม่ได้ (Yang et al. 2019) เนื่องจากผลลัพธ์ของอิมมูโนฮิสโตเคมีแสดงในรูปที่ 1 (A, B) เมื่อเปรียบเทียบกับกลุ่ม Young หนูกลุ่ม Old þ Vehicle แสดงให้เห็นว่าอายุที่เพิ่มขึ้นเร่งการควบคุม p21Cip1 และ p16INK4a ในเซลล์หลอดเลือดแดงใหญ่ทรวงอก อย่างไรก็ตาม การรักษาด้วย Rb1 ช่วยบรรเทาความแก่ของเซลล์ในหลอดเลือด โดยเฉพาะอย่างยิ่งในกลุ่ม Old þ Rb1-20 นอกจากนี้ผลการตรวจ Western blot ยังเป็นไปตามผลลัพธ์ทางอิมมูโนฮิสโตเคมี. ดังที่แสดงในรูปที่ 1(C) การแสดงออกของโปรตีนของ p21Cip1 และ p16INK4a เพิ่มขึ้นอย่างมีนัยสำคัญโดยประมาณ 2-เท่าในหลอดเลือดแดงใหญ่ทรวงอกของหนูอายุมากเมื่อเทียบกับหนูอายุน้อย หลังการรักษาด้วย Rb1 20 มก./กก. ระดับโปรตีนของ p21Cip1 และ p16INK4a เพิ่มขึ้นเพียง 41.92 เปอร์เซ็นต์ และ 37.52 เปอร์เซ็นต์ เมื่อเทียบกับกลุ่ม Young ซึ่งต่ำกว่ากลุ่ม Old บวกยานพาหนะอย่างมีนัยสำคัญ นอกจากนี้ ไม่มีความแตกต่างอย่างมีนัยสำคัญในการแสดงออกของ p21Cip1 หรือ p16INK4a ระหว่างหนูเล็กที่มีและไม่มีการรักษาด้วย Rb1

รูปที่ 1 ผลของ Rb1 ต่อการชราภาพของหลอดเลือดแดงใหญ่ในทรวงอก รูปภาพของการย้อมสีอิมมูโนฮิสโตเคมี (400 ) ของ p21Cip1 (A) และ p16INK4a (B) ในส่วนตัดขวางของหลอดเลือดแดงใหญ่ทรวงอกของหนูเมาส์ (C) การวิเคราะห์แบบ Western blot ของการแสดงออกของเมาส์ aortic aortic p21Cip1 และ p16INK4a ข้อมูลจะแสดงเป็นค่าเฉลี่ย ± SD p < 0.01 เทียบกับกลุ่ม Young; # p < 0.05 เทียบกับกลุ่ม Oldþ Vehicle

Rb1 ปรับปรุงปฏิกิริยาของหลอดเลือดในหนูอายุ

ใช้การทดลองวงแหวนหลอดเลือดเพื่อประเมินการขยายหลอดเลือดที่ขึ้นกับเอ็นโดทีเลียม ดังแสดงในรูปที่ 2 ในวงแหวนเอออร์ติคทรวงอกของหนูทั้งหมด การให้ Ach ส่งผลให้เกิดการคลายตัวของหลอดเลือด ที่ความเข้มข้นสูงสุด (10–5 โมล/ลิตร) Ach กระตุ้นการคลายตัวของหลอดเลือดประมาณ 88.84 เปอร์เซ็นต์ ± 1.20 เปอร์เซ็นต์ และ 58.35 เปอร์เซ็นต์ ± 2.50 เปอร์เซ็นต์ในกลุ่ม Young และกลุ่ม Old þ Vehicle ตามลำดับ ซึ่งแสดงให้เห็นว่าอายุที่มากขึ้นเกี่ยวข้องกับความบกพร่องของปฏิกิริยาของหลอดเลือด อย่างไรก็ตาม การรักษาด้วย Rb1 10 และ 20 มก./กก. ทำให้เกิดการคลายตัวประมาณ 70.48 เปอร์เซ็นต์ ± 2.20 เปอร์เซ็นต์ และ 80.90 เปอร์เซ็นต์ ± 3.24 เปอร์เซ็นต์ ตามลำดับ ในวงแหวนเอออร์ติกทรวงอกของหนูเมาส์ที่มีอายุมากขึ้นเพื่อตอบสนองต่อ Ach 10 5 โมล/ลิตร

คลิกที่นี่เพื่อรับ Cistanche สำหรับการต่อต้านริ้วรอย

Rb1 ลดการแสดงออกของโมเลกุลยึดเกาะของเซลล์ในหลอดเลือดแดงใหญ่ทรวงอกของหนูอายุมาก

เราตรวจสอบการแสดงออกของโปรตีนของโมเลกุลการยึดเกาะของเซลล์บางชนิดเพื่อกำหนดอักเสบและฤทธิ์ต้านการอักเสบของ Rb1 ในหนูอายุมาก ผลการวิจัยพบว่าการแสดงออกของโปรตีนของ ICAM-1, VCAM-1 และ PAI-1 เพิ่มขึ้นอย่างมีนัยสำคัญโดยประมาณ 2-4 เท่าในหลอดเลือดแดงใหญ่ทรวงอกของหนูอายุมากเมื่อเปรียบเทียบกับ ในกลุ่ม Young (รูปที่ 3) ในทางตรงกันข้าม การรักษาด้วย Rb1 ยับยั้งการเปลี่ยนแปลงเหล่านี้อย่างมีนัยสำคัญในหลอดเลือดแดงใหญ่ทรวงอกของหนูที่มีอายุมาก แต่ไม่มีผลกับกลุ่มหนูอายุน้อย การวิเคราะห์เชิงปริมาณระบุว่าการรักษาด้วย Rb1 20 มก./กก. ส่งผลให้การแสดงออกของโปรตีน ICAM-1, VCAM-1 และ PAI-1 ลดลงประมาณ 36.58 เปอร์เซ็นต์ 46.66 เปอร์เซ็นต์ และ 49.34 เปอร์เซ็นต์ ตามลำดับ ในเนื้อเยื่อหลอดเลือดทรวงอกที่มีอายุมากขึ้น เปรียบเทียบกับหนูกลุ่ม Old plus Vehicle

Rb1 ยับยั้งการกลายเป็นปูนของหลอดเลือดและการเกิดพังผืดที่เกี่ยวข้องกับอายุ

เราทำการย้อม HE และการย้อม alizarin red S เพื่อประเมินโครงสร้างเนื้อเยื่อหลอดเลือดและการกลายเป็นปูนในหลอดเลือดในหนูอายุมากตามลำดับ การย้อมสี HE แสดงให้เห็นว่าผนังหนาที่เกิดจากอายุของหลอดเลือดแดงใหญ่ทรวงอกและความระส่ำระสายของเมทริกซ์นอกเซลล์ของหลอดเลือดแดงใหญ่สามารถบรรเทาได้ด้วยการรักษาด้วย Rb1 (รูปที่ 4 (A)) ดังที่แสดงในรูปที่ 4(B) หนูที่มีอายุมากมีการพัฒนาการกลายเป็นปูนที่อยู่ตรงกลาง (บริเวณที่เปื้อนสีแดง) ที่รุนแรงกว่าหนูอายุน้อย ในขณะที่การแทรกแซงด้วย Rb1 ลดการเปลี่ยนแปลงทางพยาธิสภาพนี้ จากนั้นเราตรวจสอบส่วนตัดขวางของหลอดเลือดแดงใหญ่ในทรวงอกโดยการย้อมไตรโครมของ Masson เพื่อประเมินพังผืดในหลอดเลือดในหนูอายุ ผลลัพธ์แสดงให้เห็นว่ามีการเพิ่มขึ้นอย่างเห็นได้ชัดในการสะสมคอลลาเจน (บริเวณที่เป็นคราบสีน้ำเงิน) ในกลุ่มยานพาหนะ Old þ เมื่อเปรียบเทียบกับกลุ่ม Young (รูปที่ 4(C)) และผลกระทบนี้ถูกยับยั้งอย่างมีนัยสำคัญโดยการแทรกแซง Rb1 ยิ่งไปกว่านั้น Western blotting แสดงให้เห็นว่าการแสดงออกของคอลลาเจน I และคอลลาเจน III เพิ่มขึ้นอย่างมีนัยสำคัญ 4.{11}} และ 2.62-เท่าในหนูกลุ่ม Old þ กระสายยาเมื่อเปรียบเทียบกับหนูอายุน้อย อย่างไรก็ตาม การรักษาด้วย Rb1 ได้ลดการแสดงออกของคอลลาเจน I และคอลลาเจน III ในหนูที่มีอายุมาก (รูปที่ 4(D)) ยิ่งกว่านั้น การรักษาด้วย Rb1 ไม่มีอิทธิพลต่อระดับของการกลายเป็นปูนของหลอดเลือดแดงใหญ่ในทรวงอกและการเกิดพังผืดในหนูเล็ก (รูปที่ 4(A–D))

Rb1 ควบคุมเส้นทางการส่งสัญญาณ Gas6

เราตรวจสอบเพิ่มเติมว่า Rb1 ทำงานผ่านเส้นทางการส่งสัญญาณ Gas6 / Axl เพื่อปรับปรุงการด้อยค่าของหลอดเลือดแดงใหญ่ในทรวงอกที่เกี่ยวข้องกับอายุในหนูหรือไม่ การลดลงของการแสดงออกของโปรตีน Gas6 ร้อยละ 41.72 และการแสดงออกของ mRNA ร้อยละ 52.73 ในหนูอายุมากเมื่อเทียบกับหนูอายุน้อยถูกยกเลิกโดยการรักษาด้วย Rb1 (รูปที่ 5(A,B)) นอกจากนี้เรายังพิจารณาการแสดงออกของโปรตีนของ Axl โดยการซับแบบตะวันตก ที่น่าสนใจคือไม่มีความแตกต่างอย่างมีนัยสำคัญในการแสดงออกของโปรตีน Axl ในกลุ่มทดลองทั้งห้ากลุ่ม (รูปที่ 5(A)) นอกจากนี้ เรายังไม่พบความแตกต่างที่มีนัยสำคัญในระดับ mRNA ของ Axl ในกลุ่ม (รูปที่ 5(B))

รูปที่ 2 การรักษาด้วย Rb1 ช่วยลดความบกพร่องของ vasorelaxation endothelium ที่เกี่ยวข้องกับอายุในวงแหวนหลอดเลือดแดงใหญ่ทรวงอก ตัวเลขแสดงผลการวิเคราะห์ ข้อมูลจะแสดงเป็นค่าเฉลี่ย ± SD p < 0.05, p < 0.01 เทียบกับกลุ่ม Young; # p < 0.05, ##p < 0.01 เทียบกับกลุ่มยานพาหนะ þ เก่า

รูปที่ 3 Rb1 ลดการแสดงออกของโมเลกุลการยึดเกาะของเซลล์ในหลอดเลือดแดงใหญ่ทรวงอกของหนูอายุมาก การวิเคราะห์ Western blot ของการแสดงออกของ ICAM-1, VCAM-1 และ PAI-1 ในเนื้อเยื่อหลอดเลือดแดงใหญ่ทรวงอก ข้อมูลจะแสดงเป็นค่าเฉลี่ย ± SD p < 0.01 เทียบกับกลุ่ม Young; # p < 0.05, ##p < 0.01 เทียบกับกลุ่ม Oldþ Vehicle

การอภิปราย

ในการศึกษาปัจจุบัน เราแสดงให้เห็นว่า Rb1 ดีขึ้นการด้อยค่าของหลอดเลือดที่เกี่ยวข้องกับอายุโดยการยับยั้งการกลายเป็นปูนและพังผืดผ่านการควบคุมการแสดงออกของ Gas6 แต่ไม่ใช่การแสดงออกของ Axl ซึ่งให้กลยุทธ์การรักษาที่มีศักยภาพในการป้องกันโรคหลอดเลือดที่เกี่ยวข้องกับอายุ เป็นที่ยอมรับกันดีว่าการชราภาพของเซลล์หลอดเลือดซึ่งเป็นลักษณะของความผิดปกติของบุผนังหลอดเลือดและการเปลี่ยนแปลงฟีโนไทป์ของเซลล์กล้ามเนื้อเรียบ สามารถส่งผลให้หลอดเลือดแข็งขึ้นและเพิ่มความหนาของผนังหลอดเลือด (Liu et al. 2019) การชราภาพของเซลล์หลอดเลือดเป็นลักษณะทั่วไปของโรคที่เกี่ยวข้องกับอายุที่ซับซ้อนต่างๆ โดยเฉพาะโรคหัวใจและหลอดเลือด (O'Rourke et al. 2010) ด้วยการพัฒนาของการชราภาพของเซลล์หลอดเลือด การทำงานของหลอดเลือดจึงบกพร่อง (Gong et al. 2014) ความผิดปกติของหลอดเลือดที่เกี่ยวข้องกับอายุเป็นตัวอย่างโดยการเปลี่ยนแปลงทางพยาธิสรีรวิทยา รวมถึงการลดลงอย่างต่อเนื่องของการขยายตัวของหลอดเลือดที่ขึ้นอยู่กับ endothe lium (Herrera et al. 2010; Gong et al. 2014) ในการศึกษาของเรา เรายืนยันการชราภาพของเซลล์ในหลอดเลือดแดงใหญ่ทรวงอกของหนูอายุมาก ซึ่งบ่งชี้โดยการแสดงออกที่เพิ่มขึ้นของโปรตีนที่เกี่ยวข้องกับอายุ p21Cip1 และ p16INK4a รวมถึงการลดลงของการขยายตัวของหลอดเลือดที่ขึ้นอยู่กับ endothelium ความสอดคล้องของผลลัพธ์ของเรากับการศึกษาที่กล่าวถึงข้างต้นแสดงให้เห็นว่ามีกลไกระดับโมเลกุลที่สำคัญบางอย่างที่เกี่ยวข้องกับการเปลี่ยนแปลงของพยาธิสรีรวิทยาของเซลล์หลอดเลือดในช่วงอายุ สารที่ทำหน้าที่ในกลไกเหล่านี้อาจลดและชะลอการแก่ของเซลล์หลอดเลือดได้อย่างมาก

รูปที่ 4 การรักษาด้วย Rb1 ช่วยแก้ไขการกลายเป็นปูนของหลอดเลือดและการเกิดพังผืดตามอายุ (A) การย้อมสี Haematoxylin และ eosin (HE) (400 ), (B) การย้อมสี Alizarin red S (400 ) และ (C) การย้อมสี Trichrome ของ Masson (400 ) ของตัวแทนส่วนหลอดเลือดแดงใหญ่ทรวงอกในแต่ละกลุ่ม (D) การวิเคราะห์แบบ Western blot ของการแสดงออกของคอลลาเจน I และคอลลาเจน III ในเนื้อเยื่อหลอดเลือดแดงใหญ่ทรวงอก ข้อมูลจะแสดงเป็นค่าเฉลี่ย ± SD p < 0.01 เทียบกับกลุ่ม Young; # p < 0.05, ##p < 0.01 เทียบกับ Oldþ Vehicle Group

รูปที่ 5 อิทธิพลของ Rb1 บนเส้นทางการส่งสัญญาณ Gas6/Axl ( A ) ทำการทดสอบ Western blotting เพื่อตรวจสอบการแสดงออกของโปรตีนของ Gas6 และ Axl (B) ทำ qPCR เพื่อตรวจสอบการแสดงออกของ mRNA ของ Gas6 และ Axl ข้อมูลจะแสดงเป็นค่าเฉลี่ย ± SD p < 0.05, p < 0.01 เทียบกับกลุ่ม Young; # p < 0.05 เทียบกับกลุ่ม Old þ Vehicle

หลักฐานที่สะสมได้เผยให้เห็นว่า Rb1 ถือเป็นยาที่มีแนวโน้มในการป้องกันความเสียหายของหลอดเลือด (Zhou et al. 2017, 2019a, 2019b; Zheng et al. 2020) การศึกษาก่อนหน้านี้เปิดเผยว่า Rb1 ป้องกันการแก่ของเซลล์หลอดเลือดและยับยั้งการกลายเป็นปูนของหลอดเลือด (Nanao-Hamai et al. 2019; Zhou et al. 2019b; Zheng et al. 2020) อย่างไรก็ตาม ยังไม่แน่ใจว่า Rb1 สามารถปกป้องการทำงานของหลอดเลือดต่อต้านความชราและกลไกระดับโมเลกุลที่เกี่ยวข้องได้หรือไม่ ที่นี่ เราพบว่า Rb1 ช่วยลดและชะลอการแก่ชราของหลอดเลือดแดงในหนูอายุมาก ซึ่งแสดงให้เห็นโดยการแสดงออกของโปรตีนที่เกี่ยวข้องที่ลดลงและการขยายตัวของหลอดเลือดที่ดีขึ้น ซึ่งบ่งชี้ว่า Rb1 สามารถบล็อกการแก่ชราที่มากเกินไปในหลอดเลือดแดงใหญ่ในช่องอกของหนูที่มีอายุมากได้อย่างมีประสิทธิภาพ และอาจใช้เป็นตัวแทนที่มีประสิทธิภาพในการ รักษาหรือป้องกันการเสื่อมของหลอดเลือดที่เกี่ยวข้องกับอายุ

หลักฐานก่อนหน้านี้แสดงให้เห็นถึงการสะสมของการอักเสบของหลอดเลือดแดงเกรดต่ำเรื้อรังเมื่ออายุมากขึ้น ซึ่งก่อให้เกิดการเปลี่ยนแปลงโครงสร้างและการทำงานของหลอดเลือดที่เกี่ยวข้องกับอายุ (Wang et al. 2014) การศึกษาเพิ่มเติมระบุว่าสภาพแวดล้อมขนาดเล็กที่อุดมด้วยโปรไฟล์การอักเสบทำให้เกิดการเปลี่ยนแปลงฟีโนไทป์ใน VSMCs จากแบบหดตัวเป็นแบบสังเคราะห์ การเปลี่ยนแปลงทางฟีโนไทป์นี้แสดงลักษณะโดยการแสดงออกที่ลดลงของโปรตีนที่หดตัวอย่างเฉพาะเจาะจงของ SMC และการหลั่งของไซโตไคน์ที่มีการอักเสบเพิ่มเติม, เคโมไคน์, โปรตีน ECM และโมเลกุลยึดเกาะของเซลล์ เช่น คอลลาเจน, ICAM-1, VCAM-1 , และ PAI-1 (Wang et al. 2011; Lacolley et al. 2018) ยิ่งกว่านั้น โมเลกุลยึดเกาะมีส่วนทำให้เกิดการเปลี่ยนแปลงของหลอดเลือดแดงที่เกิดจากการอักเสบ โดยเฉพาะอย่างยิ่งโดยการจัดระเบียบปฏิสัมพันธ์ ECM-VSMC ใหม่ และมีอิทธิพลต่อการปรับฟีโนไทป์ของ VSMCs (Intengan et al. 1999) นอกจากนี้ การศึกษาพบว่า Rb1 มีฤทธิ์ต้านการอักเสบในร่างกายและในหลอดทดลอง (Miao et al. 2017; Zhou et al. 2017) ในการศึกษาปัจจุบัน เราพบว่าการรักษาด้วย Rb1 สามารถลดระดับการแสดงออกของโมเลกุลการยึดเกาะของเซลล์ที่เกี่ยวข้องกับกระบวนการอักเสบในหนูอายุมากได้อย่างมีนัยสำคัญ ซึ่งบ่งชี้ว่า Rb1 อาจทำหน้าที่เป็นยาต้านการอักเสบและปกป้องหลอดเลือดในช่วงอายุ

นอกเหนือจากความเสียหายจากการอักเสบการเปลี่ยนแปลงของผนังหลอดเลือดแดงที่มีลักษณะเป็นปูนขาวและพังผืดเป็นการเปลี่ยนแปลงทางพยาธิสรีรวิทยาหลักอื่น ๆ ในการปรับเปลี่ยนหลอดเลือดที่เกี่ยวข้องกับอายุและทำให้เกิดความแข็งของหลอดเลือดที่ก่อให้เกิดการลดลงของการขยายตัวของหลอดเลือด (McEniery et al. 2005; Iyemere et al. 2006; Kovacic et al. . 2554). การศึกษาขนาดใหญ่แสดงให้เห็นว่าการกลายเป็นปูนของหลอดเลือดหัวใจเพิ่มขึ้นตามอายุ (Tesauro et al. 2017) งานวิจัยอื่น ๆ ยังแสดงให้เห็นถึงการกลายเป็นปูนที่เพิ่มขึ้นตามอายุในบริเวณหลอดเลือดแดง (Wendorff et al. 2015) ในทำนองเดียวกัน ผลลัพธ์ของเราระบุว่าหนูที่มีอายุมากขึ้นมีการกลายเป็นปูนในหลอดเลือดที่รุนแรงกว่าหนูอายุน้อย การแทรกแซง Rb1 ยับยั้งการเปลี่ยนแปลงเหล่านี้อย่างมาก ผลลัพธ์นี้ชี้ให้เห็นว่าการบริหาร Rb1 ช่วยลดระดับของการกลายเป็นปูนในหลอดเลือดที่เกี่ยวข้องกับอายุ ในร่างกาย หลักฐานที่เพียงพอแสดงให้เห็นว่าการกลายเป็นปูนในหลอดเลือดเกี่ยวข้องกับกระบวนการทางพยาธิวิทยาที่หลากหลายมากกว่าการสะสมแคลเซียมแบบธรรมดา ซึ่ง VSMC ที่เปลี่ยนไปเป็นเซลล์ที่คล้ายเซลล์สร้างกระดูกมีบทบาทสำคัญ (Zhou et al. 2019b) ข้อจำกัดอย่างหนึ่งของการศึกษาของเราคือ แม้ว่าการแทรกแซง Rb1 จะยับยั้งการกลายเป็นปูนของหลอดเลือดอย่างมีนัยสำคัญในหลอดเลือดแดงใหญ่ทรวงอกของหนูอายุมาก เครื่องหมาย VSMC ที่หดตัว (เช่น แอกตินของกล้ามเนื้อเรียบ A และแคลโปนิน) และเครื่องหมาย VSMC ที่ทำให้เกิดกระดูก (เช่น ปัจจัยการถอดความที่เกี่ยวข้องกับรันต์ 2 ) ต้องการการสำรวจเพิ่มเติม

นอกจากนี้ ในการศึกษาปัจจุบัน เรายังสังเกตเห็นระดับคอลลาเจนคั่นระหว่างหน้าลดลงและการแสดงออกของโปรตีนที่เกี่ยวข้องลดลงในหนูสูงวัยที่ได้รับ Rb1-เทียบกับหนูสูงวัยที่ได้รับการรักษาด้วยกระสายยา ซึ่งบ่งชี้ว่า Rb1 อาจมีผลดีต่อการทำงานของหลอดเลือด ในหลอดเลือดแดงใหญ่ทรวงอกที่มีอายุมากขึ้นโดยการแก้ไขพังผืดของหลอดเลือดที่เกิดจากอายุ ฮาร์วีย์และคณะ (2016) รายงานว่าการแข็งตัวของหลอดเลือดแดงที่เกิดจากพังผืดมากเกินไปและการสะสมของคอลลาเจนที่เพิ่มขึ้นอาจส่งผลให้ vasomotor tone เพิ่มขึ้นและการไหลเวียนของเนื้อเยื่อเปลี่ยนแปลง สารที่ทำให้พังผืดลดลงได้รับการพิจารณาเพื่อป้องกันโรคหลอดเลือดที่เกี่ยวข้องกับอายุ (Kim et al. 2018)

สามารถอนุมานได้ว่าการด้อยค่าของหลอดเลือดที่เกี่ยวข้องกับอายุเป็นกระบวนการที่ซับซ้อนที่เกี่ยวข้องกับการเปลี่ยนแปลงที่ผิดปกติต่างๆ รวมถึงการอักเสบ การกลายเป็นปูน และพังผืด ที่สำคัญกว่านั้น เราพบว่า Rb1 สามารถยับยั้งการเปลี่ยนแปลงที่ผิดปกติเหล่านี้ในหลอดเลือดแดงใหญ่ทรวงอกของหนูที่มีอายุมาก อย่างไรก็ตาม ยังไม่ทราบกลไกพื้นฐาน Gas6 ถูกระบุว่าเป็น lig และสำหรับตระกูลตัวรับ TAM โดยเฉพาะตัวรับ Axl tyrosine kinase (Rothlin et al. 2015) การศึกษาก่อนหน้านี้แสดงให้เห็นถึงบทบาทของ Gas6/Axl ในการควบคุมการทำงานของเซลล์ต่างๆ (Chen et al. 2019) การศึกษาล่าสุดชี้ให้เห็นว่า Gas6/Axl มีบทบาทสำคัญในการกลายเป็นปูนในหลอดเลือด (Son et al. 2010; Kaesler et al. 2016; Nanao-Hamai et al. 2019) และอาจเกี่ยวข้องกับการลดการควบคุมการสังเคราะห์คอลลาเจนที่เกิดจากการรักษาใน VSMCs และเนื้อเยื่อหัวใจที่แก่ชรา (Chen et al. 2016; 2019) ยิ่งไปกว่านั้น การศึกษาก่อนหน้านี้เปิดเผยว่า Rb1 เปิดใช้งานการถอดรหัส Gas6 ที่ไซต์ ARE เฉพาะในภูมิภาคโปรโมเตอร์ (Son et al. 2010; Nanao-Hamai et al. 2019) ที่นี่ เราแสดงให้เห็นว่าการแสดงออกของโปรตีน Gas6 ถูกลดการควบคุมในหนูที่มีอายุมาก แต่ได้รับการเปลี่ยนกลับโดยการรักษาด้วย Rb1 ซึ่งบ่งชี้ว่า Gas6 อาจมีส่วนร่วมในการควบคุม Rb1-สื่อกลางของการด้อยค่าของหลอดเลือดแดงในหนูอายุมาก อย่างไรก็ตาม ผลลัพธ์ของเราแสดงให้เห็นว่าไม่มีการเปลี่ยนแปลงในการแสดงออกของโปรตีน Axl และ mRNA ซึ่งไม่สอดคล้องกับการศึกษาก่อนหน้านี้ (Chen et al. 2019) กลุ่มตัวรับ TAM ประกอบด้วย Tyro3, ​​Axl และ MerTK แม้ว่า Gas6 จะแสดงความสัมพันธ์ที่แข็งแกร่งที่สุดกับ Axl ในบรรดาสมาชิกทั้งสามคน (Rothlin et al. 2015) Sun และคณะ (2019) พบว่าการเปิดใช้งาน Gas6 ลดการบาดเจ็บจากการอักเสบและการตายของเซลล์ในหนู แต่ไม่มีการเปลี่ยนแปลงในการเปิดใช้งาน Axl เกิดขึ้นในกลุ่มทดลอง งานวิจัยอื่นๆ เสนอว่าการแสดงออกของ Axl ซึ่งยับยั้งการตายของเซลล์และทำให้กลายเป็นปูนในหลอดเลือด ก็ไม่เปลี่ยนแปลงในหนูทดลอง Gas6–/– (Kaesler et al. 2016) ผลลัพธ์ของเราระบุอย่างชัดเจนว่า Rb1 ลดทอนการควบคุม Gas6 ที่เกี่ยวข้องกับอายุโดยเฉพาะ แต่ไม่มีอิทธิพลต่อการแสดงออกของ Axl ซึ่งมีรายงานว่าเป็นเหตุการณ์หลักที่รับผิดชอบการกลายเป็นปูนของหลอดเลือดและการเกิดพังผืด เพื่อปรับปรุงการอักเสบของหลอดเลือดที่เกี่ยวข้องกับอายุและการขยายตัวของหลอดเลือดขึ้นอยู่กับ endothelium . การแสดงออกที่คงที่ของ Axl อาจเป็นผลมาจากปริมาณที่เพียงพอก่อนการเปิดใช้งาน Gas6 หรือบ่งชี้ว่า Gas6 ทำงานผ่านตัวรับอื่นๆ จำเป็นต้องมีการตรวจสอบเพิ่มเติมเพื่อสำรวจผลกระทบของ Rb1 ต่อ TAM อื่น ๆ ที่สามารถเปิดใช้งานโดย Gas6 เช่น Tyro3 และ MerTK

ข้อสรุป

ในการศึกษาปัจจุบัน เรายืนยันว่า Rb1 ยับยั้งการกลายเป็นปูนของหลอดเลือดและการเกิดพังผืด และลดการแสดงออกของโมเลกุลการยึดเกาะของเซลล์ ซึ่งทั้งหมดนี้ทำให้การขยายตัวของหลอดเลือดที่ขึ้นกับหลอดเลือดที่ขึ้นอยู่กับอายุเพิ่มขึ้นอย่างน้อยในบางส่วนโดยการควบคุมการแสดงออกของ Gas6 แต่ไม่ใช่การแสดงออกของ Axl ด้วยความชราที่ควบคุมไม่ได้ การค้นหาสารที่สามารถป้องกันหรือรักษาความเสื่อมของเซลล์หลอดเลือดที่เกี่ยวข้องกับอายุจึงมีความสำคัญอย่างยิ่ง การศึกษาของเราแสดงหลักฐานที่ตรวจสอบผลกระทบของ Rb1 ต่อการบาดเจ็บของหลอดเลือดในระดับอะมีลิโอในหนูอายุมาก

คำชี้แจงการเปิดเผยข้อมูล

ไม่มีรายงานความขัดแย้งทางผลประโยชน์ที่อาจเกิดขึ้นจากผู้เขียน

เงินทุน งานนี้ได้รับการสนับสนุนโดยทุนจากมูลนิธิวิทยาศาสตร์ธรรมชาติแห่งชาติของจีน [81370447] โครงการวางแผนวิทยาศาสตร์และเทคโนโลยีของมณฑลกวางตุ้งของจีน [2016A050502014] กองทุนก่อสร้างวินัยทางการแพทย์ที่สำคัญของเซินเจิ้น [SZXK002] และการวิจัยทางวิทยาศาสตร์การแพทย์ มูลนิธิมณฑลกวางตุ้งของจีน [A2019079].

คำชี้แจงความพร้อมใช้งานของข้อมูล

ข้อมูลและเนื้อหาสามารถขอได้จากผู้เขียนที่เกี่ยวข้อง

ผลงานของผู้เขียน

SYK, DHL และ XXQ มีส่วนร่วมในการคิดและออกแบบงานนี้ LW, GYS และ MW มีส่วนช่วยในการวิเคราะห์ข้อมูล SYK, LW และ JMZ เขียนต้นฉบับ ผู้เขียนทั้งหมดอ่านและอนุมัติเวอร์ชันสุดท้าย

อ้างอิง

Acosta JC, O'Loghlen A, Banito A, Guijarro MV, Augert A, Raguz S, Fumagalli M, Da Costa M, Brown C, Popov N และอื่นๆ พ.ศ. 2551 การส่งสัญญาณเคมีผ่านตัวรับ CXCR2 ช่วยเสริมความชราภาพ เซลล์ 133(6): 1006–1018.

Brandes RP, Fleming I, Busse R. 2005. อายุของบุผนังหลอดเลือด ความละเอียดของหัวใจและหลอดเลือด 66(2):286–294.

Chen FF, Song FQ, Chen YQ, Wang ZH, Li YH, Liu MH, Li Y, Song M, Zhang W, Zhao J และอื่นๆ 2019 เทสโทสเตอโรนจากภายนอกช่วยบรรเทาภาวะพังผืดของหัวใจและการตายของเซลล์ผ่านทางเดิน Gas6/Axl ในหนูชรา ประสบการณ์ Gerontol 119:128–137.

Chen YQ, Zhao J, Jin CW, Li YH, Tang MX, Wang ZH, Zhang W, Zhang Y, Li L, Zhong M. 2016. เทสโทสเตอโรนชะลอการชราภาพของเซลล์กล้ามเนื้อเรียบของหลอดเลือด และยับยั้งการสังเคราะห์คอลลาเจนผ่านเส้นทางการส่งสัญญาณ Gas6/Axl . อายุ. 38(3):60.

Fridell YW, Villa J, Attar EC, Liu ET พ.ศ. 2541 GAS6 กระตุ้น Axl-mediated chemotaxis ของเซลล์กล้ามเนื้อเรียบของหลอดเลือด เจ ไบโอล เคม. 273(12): 7123–7126.

Gong X, Ma Y, Ruan Y, Fu G, Wu S. 2014 atorvastatin ในระยะยาวช่วยปรับปรุงความผิดปกติของ endothelial ที่เกี่ยวข้องกับอายุโดยการแก้ไขความเครียดจากปฏิกิริยาออกซิเดชันและทำให้ eNOS/iNOS ที่ไม่สมดุลในหลอดเลือดแดงใหญ่ของหนูเป็นปกติ ประสบการณ์ Gerontol 52:9–17.

Harvey A, Montezano AC, Lopes RA, Rios F, Touyz RM 2559. การเกิดพังผืดของหลอดเลือดในวัยชราและความดันโลหิตสูง: กลไกระดับโมเลกุลและผลกระทบทางคลินิก. แคน เจ คาร์ดิโอล 32(5):659–668.

Herrera MD, Mingorance C, Rodriguez-Rodriguez R, Alvarez de Sotomayor M. 2010. ความผิดปกติของบุผนังหลอดเลือดและอายุ: การปรับปรุง ผู้สูงอายุ Res Rev. 9(2):142–152.

Hsu JJ, Lu J, Umar S, Lee JT, Kulkarni RP, Ding Y, Chang CC, Hsiai TK, Hokugo A, Gkouveris I, Tetradis S และอื่นๆ 2561. ผลของเทอร์ริพาราไทด์ต่อสัณฐานวิทยาของการกลายเป็นปูนในหลอดเลือดในหนูเมาส์สูงอายุที่มีภาวะไขมันในเลือดสูง. Am J Physiol หัวใจ Circ Physiol 314(6):H1203–H1213.

Hurtado B, Abasolo N, Munoz X, Garcia N, Benavente Y, Rubio F, Garcia de Frutos P, Krupinski J, Sala N. 2010 การศึกษาความสัมพันธ์ระหว่างโพลีมอร์ฟิมในยีน GAS6-TAM และหลอดเลือดแดงในหลอดเลือด Thromb Haemost 104(3):592–598.

Intengan HD, Thibault G, Li JS, Schiffrin EL. 2542. กลไก โครงสร้าง และส่วนประกอบภายนอกเซลล์ของหลอดเลือดต้านทานในหนูแรทที่มีความดันโลหิตสูงตามธรรมชาติ: ผลของการต่อต้านตัวรับ angiotensin และเปลี่ยนการยับยั้งเอนไซม์ ing การไหลเวียน 100(22):2267–2275.

รองประธาน Iyemere, Proudfoot D, Weissberg PL, Shanahan CM 2549. ฟีโนไทป์ของเซลล์กล้ามเนื้อเรียบของหลอดเลือดและการควบคุมการกลายเป็นปูนของหลอดเลือด เจ แพทย์ฝึกหัด 260(3):192–210.

Kaesler N, Immendorf S, Ouyang C, Herfs M, Drummen N, Carmeliet P, Vermeer C, Floege J, Kruger T, Schlieper G. 2016 โปรตีน Gas6: บทบาทในการกลายเป็นปูนของหัวใจและหลอดเลือด บีเอ็มซี เนฟรอล 17(1):52. Kim EN, Kim MY, Lim JH, Kim Y, Shin SJ, Park CW, Kim YS, Chang YS, Yoon HE, Choi BS 2561. ฤทธิ์ปกป้องของเรสเวอราทรอลต่อการแก่ของหลอดเลือดโดยการปรับระบบเรนิน-แองจิโอเทนซิน. หลอดเลือด. 270: 123–131. Korshunov VA, Mohan AM, Georger MA, Berk BC 2549 Axl ตัวรับ tyrosine kinase ไกล่เกลี่ยการเปลี่ยนแปลงของหลอดเลือดที่เกิดจากการไหล วงเวียน Res. 98(11):1446–1452.