Cistanche Deserticola polysaccharides ลดทอนโรคไตเบาหวานในหนูโดยส่งผลกระทบต่อพืชในลำไส้และยับยั้งตัวรับสัญญาณที่มีลักษณะคล้าย 4/ปัจจัยนิวเคลียร์-κBเส้นทางการส่งสัญญาณⅱ

2.5 ผลของ CDPs ต่อพยาธิสภาพลำไส้ใหญ่ในหนู C57BL/6J

Cistanche Deserticola Extract Powder จากวัตถุดิบคุณภาพสูง

คลิกเพื่อรับรายละเอียดเพิ่มเติม

ดังที่แสดงในรูปที่ 2 การย้อมสี H&E เปิดเผยว่าโครงสร้างเนื้อเยื่อลำไส้ใหญ่ของหนูปกติเป็นเรื่องปกติ crypts ถูกจัดอย่างเรียบร้อยและจัดเรียงอย่างแน่นหนาจำนวนมีขนาดใหญ่และเซลล์เยื่อบุผิวไม่มีการเสื่อมสภาพที่ชัดเจนและการไหล ในทางตรงกันข้ามหนู DN แสดงให้เห็นว่าการไหลของเซลล์เยื่อบุผิวลำไส้ใหญ่อย่างชัดเจนการแทรกซึมของเซลล์อักเสบความเสียหายต่อเซลล์ร้องไห้การหายตัวไปของโครงสร้างต่อมลำไส้และการซึมผ่านที่เพิ่มขึ้น หลังจากการแทรกแซง CDPS 4 สัปดาห์เงื่อนไขทางพยาธิวิทยาข้างต้นจะหายไปในระดับที่แตกต่างกัน

ผลการย้อมสี AB-PAS แสดงให้เห็นว่าเมื่อเทียบกับกลุ่มควบคุมจำนวนเซลล์ถ้วยที่ไม่ได้รับการยกเว้นในลำไส้ใหญ่ของหนูกลุ่มแบบจำลองลดลงอย่างมีนัยสำคัญและการหลั่งโปรตีนเมือกที่เป็นกรดเพิ่มขึ้นอย่างมีนัยสำคัญ; จำนวนเซลล์ถ้วยที่ไม่ได้รับการยกเว้นในลำไส้ใหญ่ของกลุ่มควบคุมนั้นใหญ่ที่สุด เมื่อเทียบกับกลุ่มแบบจำลองการหลั่งโปรตีนเมือกที่เป็นกรด colonic ในกลุ่ม CDPS-H ลดลง

รูปที่ 2 ผลของ CDPs ต่อการเปลี่ยนแปลงทางจุลพยาธิวิทยาของ colonic ในหนู DN ตามที่ตรวจสอบโดย H&E และการย้อมสี AB-PAS

2.6 เอฟเฟกต์ของ CDPs ต่อพืชในลำไส้ของหนู C57BL/6J

ผลกระทบของ CDPs ต่อตัวชี้วัดทางชีวเคมีและผลลัพธ์ทางพยาธิวิทยาของหนู DN ได้รับการวิเคราะห์อย่างละเอียดและเนื้อหาของหนูในกลุ่ม CDPS-H ที่มีประสิทธิภาพโดยรวมที่ดีที่สุดถูกเลือกสำหรับการวิจัยพืชในลำไส้

2.6.1 ตัวแปรลำดับแอมพลิฟายเออร์ (ASV) การกระจายเวนน์ไดอะแกรมดังแสดงในรูปที่ 3 เมื่อเทียบกับกลุ่มควบคุมความอุดมสมบูรณ์สัมพัทธ์ของสายพันธุ์พืชในลำไส้ในกลุ่มหนูกลุ่มลดลงและความอุดมสมบูรณ์สัมพัทธ์ดีขึ้นหลังจากการรักษา CDPS

คิสแคร์

2.6.2 การวิเคราะห์ความหลากหลายของอัลฟ่าดังแสดงในตารางที่ 6 เมื่อเทียบกับกลุ่มควบคุมดัชนี chao1 ของพืชในลำไส้ของหนูกลุ่มโมเดลลดลง หลังจากการแทรกแซงของ CDPS ดัชนี chao1 เพิ่มขึ้น แต่ไม่มีนัยสำคัญทางสถิติแสดงให้เห็นว่า CDPs อาจเปลี่ยนโครงสร้างพืชในลำไส้โดยการเพิ่มจำนวนสปีชีส์ทั้งหมด ดัชนีความครอบคลุมอยู่ใกล้กับ 1 ซึ่งบ่งชี้ว่าผลการเรียงลำดับสามารถสะท้อนสถานการณ์ที่แท้จริงของตัวอย่างได้โดยทั่วไป ไม่มีความแตกต่างอย่างมีนัยสำคัญทางสถิติใน Shannon, Simpson, ความครอบคลุมและ Pielou _ E ดัชนีในกลุ่มซึ่งบ่งชี้ว่าความร่ำรวยของสปีชีส์และความหลากหลายของชุมชนสิ่งแวดล้อมในแต่ละกลุ่มนั้นดี

รูปที่ 3 ไดอะแกรม Venn ของการกระจาย ASV

ตารางที่ 6 ดัชนีอัลฟ่า-ความหลากหลายของ microbiota ในลำไส้ในหนูในกลุ่มควบคุมและกลุ่ม CDPS (n=6)

2.6.3 การวิเคราะห์ความหลากหลายของเบต้า

ดังที่แสดงในรูปที่ 4 ผ่านการวิเคราะห์ความหลากหลายของเบต้าการวิเคราะห์องค์ประกอบหลัก (PCA) สามารถแยกแยะตัวอย่างสามกลุ่มในพื้นที่สามมิติซึ่งบ่งชี้ว่ามีความแตกต่างอย่างมีนัยสำคัญในพืชในลำไส้ของกลุ่มตัวอย่างทั้งสามนี้ กลุ่มโมเดลและกลุ่มควบคุมจะถูกคั่นด้วยแกน PC2 และกลุ่ม CDPS-H อยู่ระหว่างกลุ่มโมเดลและกลุ่มควบคุมใกล้กับกลุ่มควบคุม

รูปที่ 4 เบต้าความหลากหลายของพืชในลำไส้ในหนูในกลุ่มควบคุมและกลุ่ม CDPS (n=6)

2.6.4 เอฟเฟกต์ของ CDPs ต่อพืชในลำไส้ของหนู C57BL/6J

2.6.4.1 ระดับไฟลัม

ดังที่แสดงในรูปที่ 5 เมื่อเทียบกับกลุ่มควบคุมความอุดมสมบูรณ์สัมพัทธ์ของ firmicutes ในกลุ่มโมเดลเพิ่มขึ้นอย่างมีนัยสำคัญความอุดมสมบูรณ์สัมพัทธ์ของ bacteroidota และ verrucomicrobia ลดลงอย่างมีนัยสำคัญและอัตราส่วนความอุดมสมบูรณ์สัมพัทธ์ (b/f) ของ bacteroidetes ลดลง เมื่อเทียบกับกลุ่มแบบจำลอง CDPs เพิ่มความอุดมสมบูรณ์ของ bacteroidetes และ verrucomicrobia อย่างมีนัยสำคัญลดความอุดมสมบูรณ์สัมพัทธ์ของ firmicutes และเพิ่มค่า B/F ซึ่งใกล้เคียงกับค่า B/F ของกลุ่มควบคุม

รูปที่ 5 แผนภูมิแท่งของความอุดมสมบูรณ์สัมพัทธ์ของพืชในลำไส้ที่ระดับไฟลัม (n=6)

2.6.4.2 ระดับสกุล

ฮิสโตแกรมขององค์ประกอบความอุดมสมบูรณ์ของสปีชีส์ที่ระดับ 30 อันดับแรก (รูปที่ 6) แสดงให้เห็นว่ามีความแตกต่างในพืชในลำไส้ของหนูในกลุ่มโมเดลและกลุ่ม CDPS-H มีจำพวกแบคทีเรีย 16 ชนิดระหว่างกลุ่มโมเดลและกลุ่มควบคุม มี 8 จำพวกแบคทีเรียที่แตกต่างกันระหว่างกลุ่ม CDPS-H และกลุ่มโมเดล 5 จำพวกแบคทีเรียในพื้นที่ที่ทับซ้อนกันอาจเป็นจำพวกแบคทีเรียที่ CDPs สามารถปรับปรุงโรคไตเบาหวาน (รูปที่ 7) ดังที่เห็นได้จากตารางที่ 7 ในระดับสกุลในพืชลำไส้ของเมาส์เมื่อเทียบกับกลุ่มควบคุมความอุดมสมบูรณ์สัมพัทธ์ของ allobaculum ในกลุ่มโมเดลลดลงอย่างมีนัยสำคัญและความอุดมสมบูรณ์สัมพัทธ์ของโรสบูบูเรีย, romboutsia, ruminococcus _ แรงบิด {10} กลุ่ม<0.05) was increased. ; Compared with the Model group, the relative abundance of Roseburia, Romboutsia, Ruminococcus_torques_group and RF39 (P＜0.05) decreased in the CDPs-H group; the relative abundance of Allobaculum increased (P＜0.05).

รูปที่ 6 แผนภูมิแท่งของความอุดมสมบูรณ์สัมพัทธ์ของพืชในลำไส้ที่ระดับสกุล (n=6)

รูปที่ 7 เวนน์ไดอะแกรมของพืชในลำไส้ที่ระดับสกุล (n=6)

ตารางที่ 7 เอฟเฟกต์ของ CDPs ต่อความอุดมสมบูรณ์สัมพัทธ์ของจุลินทรีย์ในลำไส้ที่แตกต่างกันระหว่างกลุ่มควบคุมและกลุ่ม CDPS (n=6)

2.6.4.3 เอฟเฟกต์ของ CDPs ต่อการแสดงออกของ colonic zo -1 และ occludin

ดังที่แสดงในรูปที่ 8 และตารางที่ 8 เมื่อเทียบกับกลุ่มควบคุมระดับการแสดงออกสัมพัทธ์ของ ZO -1 และโปรตีน occludin ในเนื้อเยื่อลำไส้ใหญ่ของหนูในกลุ่มโมเดลลดลงอย่างมีนัยสำคัญ (p <0. 01); เมื่อเทียบกับกลุ่มโมเดลการแทรกแซง CDPS ในแต่ละขนาดสามารถลดระดับการแสดงออกสัมพัทธ์ของ ZO -1 และโปรตีน occludin ในเนื้อเยื่อลำไส้ใหญ่เพิ่มขึ้นอย่างมีนัยสำคัญ (p<0.01).

รูปที่ 8 การแสดงออกของ ZO -1 และ occludin ในเนื้อเยื่อลำไส้ใหญ่ของหนูจากแต่ละกลุ่ม (n=3)

ตารางที่ 8 ระดับนิพจน์สัมพัทธ์ของ zo -1 และ occludin ในเนื้อเยื่อลำไส้ใหญ่ของหนูจากแต่ละกลุ่ม (n=3))

วัตถุดิบ cistanche

2.7 เอฟเฟกต์ของ CDPs ต่อการแสดงออกของโปรตีนในการส่งสัญญาณการส่งสัญญาณของการส่งสัญญาณ TLR4/NF-κB

ดังที่แสดงในรูปที่ 9 และตารางที่ 9 เมื่อเทียบกับกลุ่มควบคุมการแสดงออกสัมพัทธ์ของโปรตีน TLR4 ในเนื้อเยื่อไตของหนูในกลุ่มแบบจำลองและอัตราส่วนของ P-NF-κBP65/NF-κB p65 และ PI κBα/I κBαเพิ่มขึ้นอย่างมีนัยสำคัญ สูง (P<0.01); compared with the Model group, the relative expression of TLR4 protein and p-NF-κBp65/NF-κB p65 and p-I κBα/I κBα in the kidney tissue of mice in the CDPs-M and CDPs-H groups The ratios were significantly reduced (P＜0.01, P＜0.05).

รูปที่ 9 การวิเคราะห์การแสดงออกของโปรตีนตะวันตกที่เกี่ยวข้องกับเส้นทางการส่งสัญญาณ TLR4/ NF-κBในเนื้อเยื่อไตของหนูจากแต่ละกลุ่ม (n=3)

ตารางที่ 9 ระดับการแสดงออกสัมพัทธ์ของโปรตีนที่เกี่ยวข้องกับการส่งสัญญาณ TLR4/NF-κBในเนื้อเยื่อไตของหนูจากแต่ละกลุ่ม (n=3)