คอนจูเกตกรดโครโมน–ไลโปอิก: สารป้องกันระบบประสาทที่มีการยับยั้ง Butyrylcholinesterase ที่ยอมรับได้ ฤทธิ์ต้านอนุมูลอิสระและขับทองแดง

สำหรับข้อมูลเพิ่มเติม:ali.ma@wecistanche.com

เชิงนามธรรม

วัตถุประสงค์โรคอัลไซเมอร์(AD) เป็นโรคทางระบบประสาทหลายแง่มุม เพื่อกำหนดเป้าหมายกระบวนการทางพยาธิวิทยาหลายอย่างที่เกี่ยวข้องพร้อมกันในโรคอัลไซเมอร์,สารประกอบที่มีต้นกำเนิดจากธรรมชาติซึ่งมีลักษณะเฉพาะเป็นโครงสร้างที่มีแนวโน้มว่าจะพัฒนาสารประกอบหลายเป้าหมายแบบใหม่ในการรักษาโรคทางระบบประสาทที่แตกต่างกันโดยเฉพาะโรคอัลไซเมอร์. ในการศึกษานี้ ลูกผสมของกรดโครโมน-ไลโปอิกชนิดใหม่ถูกเตรียมเพื่อค้นหาโครงสร้างตะกั่วแบบมัลติฟังก์ชั่นใหม่สำหรับการรักษาโรค AD วิธีการ ลูกผสมของกรดโครโมน-ไลโปอิกถูกเตรียมขึ้นผ่านปฏิกิริยาคลิกและกิจกรรมการป้องกันระบบประสาทและแอนติโคลีนเอสเทอเรสของพวกมันถูกประเมินอย่างสมบูรณ์ การรวมกลุ่มต้านแอมีลอยด์ สารต้านอนุมูลอิสระ และฤทธิ์ขับโลหะของสารประกอบที่ดีที่สุดยังได้รับการตรวจสอบโดยวิธีมาตรฐานเพื่อค้นหาสารอเนกประสงค์ชนิดใหม่เพื่อต่อต้าน AD ผลลัพธ์ การตรวจคัดกรองทางชีววิทยาเบื้องต้นแสดงให้เห็นว่าสารประกอบทั้งหมดมีฤทธิ์ป้องกันระบบประสาทอย่างมีนัยสำคัญต่อความเสียหายของเซลล์ที่เกิดจาก H2O2- ในเซลล์ PC12 สารประกอบ 19 ในฐานะตัวยับยั้งบิวไทริลโคลินเอสเทอเรส (BuChE) ที่มีศักยภาพมากที่สุด (IC50=7.55 ไมโครโมลาร์) ซึ่งมีการออกฤทธิ์ในการป้องกันระบบประสาทที่มีนัยสำคัญเป็นระดับเป็นยาอ้างอิงถูกเลือกสำหรับการประเมินทางชีววิทยาเพิ่มเติม การศึกษาการเทียบท่าและจลนศาสตร์เปิดเผยว่าการยับยั้ง BuChE แบบผสมที่ไม่สามารถแข่งขันได้โดยใช้สารประกอบ 19 สามารถลดการก่อตัวของออกซิเจนในเซลล์รีแอคทีฟ (ROS) ได้อย่างมีนัยสำคัญ และแสดงพลังการลดที่ยอดเยี่ยม (85.57 mM Fe plus 2) เทียบได้กับ quercetin และ กรดไลโปอิก นอกจากนี้ยังสามารถยับยั้งการรวมกลุ่ม A ในระดับปานกลางและคัดเลือกคีเลตด้วยไอออนของทองแดงในอัตราส่วน 2:1 โมลาร์ได้อีกด้วย

ข้อสรุป สารประกอบ 19 สามารถพิจารณาได้ว่าเป็นสารมัลติฟังก์ชั่นที่มีความหวังสำหรับการพัฒนาต่อไปที่ได้รับ AD เนื่องจากการออกฤทธิ์ของการป้องกันระบบประสาทและการต่อต้าน BuChE ที่ยอมรับได้, การมีฤทธิ์การรวมกลุ่มต้าน A ในระดับปานกลาง, การมีฤทธิ์ต้านอนุมูลอิสระที่โดดเด่นเช่นเดียวกับความสามารถในการขับของทองแดงแบบเลือกเฟ้น

Leili Jalili-Baleh1 & Hamid Nadri2 & Hamid Forootanfar3 & Tuba Tüylü Küçükkılınç4 & Beyza Ayazgök4 & Mohammad Sharifzadeh5 & Mahban Rahimifard6 & Maryam Baeeri6 & Mohammad Abdollahi6 & Alireza Foroumadi1 &

Biomaterials Group, Pharmaceutical Research Center, The Institute of Pharmaceutical Sciences (TIPS), Tehran University of Medical Sciences, Tehran 1417614411, Iran 2 Faculty of Pharmacy and Pharmaceutical Sciences Research Center, Shahid Sadoughi University of Medical Sciences, Yazd, Iran 3 ภาควิชาเภสัชกรรม เทคโนโลยีชีวภาพ คณะเภสัชศาสตร์ Kerman University of Medical Sciences Kerman ประเทศอิหร่าน 4 คณะเภสัชศาสตร์ ภาควิชาชีวเคมี มหาวิทยาลัย Hacettepe อังการา ประเทศตุรกี 5 ภาควิชาเภสัชวิทยาและพิษวิทยา คณะเภสัชศาสตร์ ศูนย์วิจัยพิษวิทยาและพิษ มหาวิทยาลัยเตหะราน คณะวิทยาศาสตร์การแพทย์ เตหะราน ประเทศอิหร่าน 6 กลุ่มพิษวิทยาและโรค ศูนย์วิจัยเภสัชศาสตร์ (PSRC) สถาบันเภสัชศาสตร์ (TIPS) มหาวิทยาลัยวิทยาศาสตร์การแพทย์เตหะราน (TUMS) เตหะราน ประเทศอิหร่าน

บทนำ

โรคอัลไซเมอร์(AD) โรคที่เกิดจากความผิดปกติของระบบประสาทที่มีหลายแง่มุมและไม่สามารถย้อนกลับได้ เป็นสาเหตุสำคัญของภาวะสมองเสื่อม และเป็นหนึ่งในความท้าทายที่ใหญ่ที่สุดของการวิจัยทางเภสัชกรรมในปัจจุบัน [1] ในช่วงทศวรรษที่ผ่านมา แม้จะมีความพยายามอย่างมากในการค้นพบกลไกการก่อโรคของโรคอัลไซเมอร์สาเหตุที่แท้จริงของโรคนี้ยังคงซับซ้อน ปัจจัยทางพยาธิวิทยาที่มีบทบาทสำคัญในการพัฒนา AD คือการขาดระดับสารสื่อประสาท cholinergic ของสมอง, การสะสมของเนื้อเยื่อในวัยชราโดยเฉพาะอย่างยิ่งการสะสมนอกเซลล์ - อะไมลอยด์ (A ), การรวมตัวของโปรตีน τ ฟอสโฟรีเลตมากเกินไป [2], dyshomeostasis ของไบโอเมทัล, ความเครียดออกซิเดชัน, และการอักเสบของเส้นประสาท [3] แม้จะมีความพยายามทั้งหมดในการหาแนวทางแก้ไขที่เป็นนวัตกรรมเพื่อควบคุมลักษณะเด่นของโรค เช่น การบำบัดด้วยยีนและสเต็มเซลล์ การบำบัดแบบนี้ยังคงเป็นวิธีการที่เป็นไปได้สำหรับการรักษา AD และยังมีปัญหาที่ยังไม่ได้แก้ไขอีกมากมายก่อนที่จะนำไปใช้ในการประยุกต์ใช้ทางคลินิก [ 4, 5]. วิธีการรักษาที่มีอยู่ในปัจจุบันส่วนใหญ่ขึ้นอยู่กับสารสื่อประสาท cholinergic ที่เพิ่มขึ้น ผ่านทางสารยับยั้ง acetylcholinesterase (AChEI) เช่นเดียวกับ AChE, butyrylcholinesterase (BuChE) ในฐานะที่เป็นแกนหลักของการเสื่อมสภาพของ ACh เป็นเอนไซม์สำคัญที่เกี่ยวข้องกับสารสื่อประสาท [6] บทบาทของ BuChE ในพยาธิวิทยาของ AD ไม่เป็นที่รู้จัก แต่จากการศึกษาในร่างกายพบว่า BuChE ที่เกี่ยวข้องกับ A plaques มีบทบาทสำคัญในการสุกของคราบพลัค AD [7, 8] เพื่อให้แนวทางแสดงอาการสมบูรณ์ จำเป็นต้องกำหนดเป้าหมายกระบวนการทางพยาธิวิทยาหลายอย่างที่เกี่ยวข้องกับ AD [9, 10] พร้อมกัน

คลิกเพื่อ Cistanche DHT สำหรับโรคอัลไซเมอร์

ในปัจจุบัน กลยุทธ์ multi-target direct ligand (MTDL) ได้รับการยอมรับอย่างสมบูรณ์ว่าเป็นกลยุทธ์หลักสำหรับการออกแบบและค้นพบยาใน AD ซึ่งอยู่บนพื้นฐานของการรวมกันของกลุ่มเภสัชกรรมที่เหมาะสมในโมเลกุลเดียวที่ให้การตอบสนองทางเภสัชวิทยาที่มีประสิทธิภาพสำหรับตัวรับที่มีศักยภาพต่างๆ หรือเป้าหมายของเอนไซม์ [11] ในช่วงไม่กี่ปีที่ผ่านมา สารมัลติฟังก์ชั่นที่มีศักยภาพจำนวนมากได้รับการออกแบบตามกลยุทธ์ MTDLs เทียบกับ AD [12–16] นอกจากนี้ มีการใช้ผลิตภัณฑ์ที่มีต้นกำเนิดจากธรรมชาติเป็นจำนวนมาก ไม่ว่าจะเป็นยาที่วางตลาดหรือเป็นชิ้นส่วนโมเลกุลที่ออกฤทธิ์ทางชีวภาพในการพัฒนายาลูกผสมเพื่อต่อสู้กับปัจจัยเสี่ยงหลักที่กล่าวถึงข้างต้นซึ่งเกี่ยวข้องกับการเกิดโรคของ AD [17] โครโมนพบได้ทั่วไปในพืชและรู้จักกันในชื่อไฟโตเคมิคอลที่มีโครงสร้างเป็นเบนโซ- -ไพโรน ซึ่งมีผลทางเภสัชวิทยาหลายช่วง [18] การศึกษาเมื่อเร็ว ๆ นี้เปิดเผยว่าสารประกอบที่มีโครโมนเป็นส่วนประกอบหลักมีประสิทธิภาพในการต่อต้านภาวะสมองเสื่อมผ่านการขับอนุมูลอิสระและคีเลตไอออนของโลหะ [19–22] โครโมนยังแสดงให้เห็น anticholinesterase [23, 24], neuroprotective [25, 26], คุณสมบัติต้านการอักเสบ [27] และสามารถขัดขวางการรวมตัวของ amyloid- ได้อย่างมีประสิทธิภาพ [28, 29] Fernandez-Bachiller และเพื่อนร่วมงานแนะนำแทครีนโครโมนไฮบริดซึ่งมีการยับยั้ง ChE ที่ดีขึ้น เช่นเดียวกับสารต้านอนุมูลอิสระ การหยุดทำงานเมื่อเทียบกับแทครีน [30] กรดไลโปอิก (LA) เป็นสารต้านอนุมูลอิสระที่เกิดขึ้นตามธรรมชาติในสัตว์ มนุษย์ และพืชทำหน้าที่เป็นปัจจัยร่วมที่จำเป็นในวิถีทางชีวเคมีหลายอย่าง [31] มีรายงานคุณสมบัติทางเภสัชวิทยาที่หลากหลายเกี่ยวกับออร์กาโนซัลเฟอร์นี้ สามารถควบคุมการเกิดโรคหรือความก้าวหน้าของ AD โดยการเพิ่มระดับของ acetylcholine รวมทั้งลดความเครียดจากปฏิกิริยาออกซิเดชัน การอักเสบ และการก่อตัวของคราบพลัค [32–34] Apocrine เป็นลูกผสมของ LA และ tacrine ที่ Rosini เสนอให้เป็นยาที่มีประสิทธิภาพในการต่อต้าน AD เนื่องจากมีคุณสมบัติทางชีวภาพหลายอย่าง เช่น การยับยั้ง AChE และ BChE การยับยั้งการรวมตัวของ A ที่เกิดจาก AChE และการป้องกันเซลล์จาก ROS [35]

G. Nesi และคณะ รวม rivastigmine กับ LA และโครโมน พวกเขาพบว่าการรวมกันนี้นำไปสู่การเพิ่มสารต่อต้านอนุมูลอิสระและคุณสมบัติการรวมตัวของสารต้านอะไมลอยด์ของ LA และโครโมนนั่งร้านไปยังฤทธิ์ต้านโคลีนเอสเตอเรสของ rivastigmine เป็นยาที่ใช้อยู่ในปัจจุบัน และส่งผลให้เกิดการก่อตัวของสารประกอบมัลติฟังก์ชั่นในการรักษา AD [28 ]. จากการค้นพบข้างต้น โครงสร้างโครโมนเป็นเภสัชภัณฑ์ที่สำคัญซึ่งมีบทบาทสำคัญในการยับยั้ง ChEs ด้วยกิจกรรมต้านอนุมูลอิสระและขับโลหะ LA ยังเป็นโครงสร้างตะกั่วที่มีแนวโน้มว่าจะปรับปรุงกิจกรรมการยับยั้ง BuChE, ศักยภาพในการป้องกันระบบประสาท, การรวมตัวของสารต้านแอมีลอยด์, สารต้านอนุมูลอิสระ และกิจกรรมขับโลหะ (รูปที่ 1) ลักษณะเฉพาะของโครโมนและแอลเอเหล่านี้ทำให้พวกเขามีแนวโน้มที่จะสร้างโครงสร้างที่มีแนวโน้มว่าจะพัฒนาสารประกอบหลายเป้าหมายใหม่ซึ่งปรับปรุงประสิทธิภาพการรักษาในการรักษาความผิดปกติของระบบประสาทที่แตกต่างกันโดยเฉพาะ AD [36–42] เมื่อพิจารณาถึงผลกระทบทางชีววิทยาที่เป็นประโยชน์ของโครโมนและโครงนั่งร้านแอลเอ และประสิทธิภาพของนิวเคลียสไตรอะโซลในฐานะเภสัชที่น่าดึงดูดใจในการเชื่อมต่อกับสารออกฤทธิ์ทางการรักษาต่างๆ [43–45] ในงานนี้ เราสนับสนุนให้รวมเภสัชที่มีคุณค่าเหล่านี้เข้าด้วยกันและประเมินประสิทธิภาพของยาดังกล่าว ต่อต้านเป้าหมายต่างๆ อนุพันธ์ของโครโมนสองชุดที่คอนจูเกตกับ LA ถูกสังเคราะห์ผ่านปฏิกิริยาคลิก (รูปที่ 1 สารประกอบ 9–17 และ 18–20) และประเมินฤทธิ์ของระบบประสาทและฤทธิ์ยับยั้ง ChEs ของสารประกอบทั้งหมด นอกจากนี้ยังประเมินฤทธิ์ต้านอนุมูลอิสระ คีเลชั่นโลหะ และฤทธิ์ต้านแอมีลอยด์ของสารประกอบที่เลือก เท่าที่ทราบ นี่เป็นงานแรกที่รายงานการสังเคราะห์โครโมน-LA ลูกผสมและกิจกรรมทางชีวภาพของพวกมันต่อ AD

ผลลัพธ์และการอภิปราย

เคมี ตามที่แสดงไว้ในแผนงาน 1 สารประกอบ 3 ถูกสังเคราะห์ในขั้นต้นผ่านปฏิกิริยาของ 2′-ไฮดรอกซี อะซีโตฟีโนนที่ถูกแทนที่ด้วย4-เมทอกซี เบนซาลดีไฮด์ผ่านปฏิกิริยาโดมิโน อัลดอล-ไมเคิล-ออกซิเดชันที่เร่งปฏิกิริยาโดยไพร์โรลิดีนและไอโอดีนในไดเมทิล ซัลฟอกไซด์ (DMSO) สารประกอบ 3 ถูกแปลงไปเป็นอนุพันธ์ 2-(4-ไฮดรอกซีฟีนิล)-4H-chrome-4-อนุพันธ์ที่สอดคล้องกัน (4a-d) ที่สอดคล้องกันโดย BBr3 ในไดคลอโรมีเทน สารประกอบ 5 ยังถูกเตรียมในขั้นตอนเดียวจากปฏิกิริยาของ 2,4- ไดไฮดรอกซีอะซีโทฟีโนนและไตรเอทิล ออร์โธฟอร์เมตในการมีอยู่ของกรดเปอร์คลอริก 70 เปอร์เซ็นต์ที่นำไปสู่การก่อตัวของเกลือเปอร์คลอเรตซึ่งจากนั้นถูกไฮโดรไลซ์เพื่อไปถึงสารประกอบเป้าหมาย (5) . จากนั้นจึงเตรียมสารตัวกลางโบรโมอัลคอกซี 6a-i และ 8a-c ผ่านปฏิกิริยาของ 4a-d หรือ 5 กับปริมาณที่เหมาะสมของไดโบรโมอัลเคนในสารละลายอะซิโตนของ K2CO3 ที่ปราศจากน้ำภายใต้สภาวะการไหลย้อนเป็นเวลา 4 ชั่วโมง สารประกอบ 7 ถูกสังเคราะห์อย่างแยกจากกันผ่านทางปฏิกิริยาอะมิเดชันระหว่าง LA และโพรพาร์จิลามีนในการมีอยู่ของ 4- ไดเมทิล อะมิโนไพริดีน (DMAP) และ N, N ′ - ไดไซโคลเฮกซิลคาร์โบไดไมด์ (EDCI)

ในที่สุด สารประกอบเป้าหมาย 9–20 ถูกเตรียมผ่านปฏิกิริยาสามองค์ประกอบหนึ่งหม้อระหว่างสารประกอบ 6a-i หรือ 8a-c, โซเดียม เอไซด์และสารประกอบ 7 ที่เร่งปฏิกิริยาด้วยทองแดง (II) การทดสอบทางชีวภาพ ในเบื้องต้น กิจกรรมการป้องกันระบบประสาทและการยับยั้ง cholinesterase ของสารประกอบเป้าหมายทั้งหมด 9-20 ได้รับการประเมินเพื่อหาสารประกอบที่มีศักยภาพที่ดีที่สุดสำหรับการศึกษาต่อไป ศักยภาพในการป้องกันระบบประสาทต่อความเสียหายของเซลล์ PC12 ที่เกิดจาก H2O2 ความเสียหายที่เกิดจากออกซิเดชันและความเป็นพิษต่อระบบประสาทที่สร้างขึ้นโดย H2O2 ถือเป็นปัจจัยที่สำคัญที่สุดในการควบคุมความก้าวหน้าของความผิดปกติของระบบประสาท [60] ดังนั้น กิจกรรมการป้องกันระบบประสาทของคอนจูเกตของโครโมน–LA 9–20 ที่เตรียมไว้จึงถูกคัดกรองที่ความเข้มข้นต่างกันที่ 1, 5, 10, 20 และ 50 ไมโครโมลาร์โดยใช้การสอบวิเคราะห์ MTT สารประกอบทั้งหมด ในทุกความเข้มข้นสามารถเพิ่มความมีชีวิตของเซลล์ของเซลล์ PC12 ได้อย่างมีนัยสำคัญโดยขึ้นอยู่กับขนาดยา แม้ที่ความเข้มข้นต่ำที่ 1 ไมโครโมลาร์ (ตารางที่ 1, p <>

สิ่งที่น่าสนใจคือ สารประกอบ 15, 16 และ 17 ที่มีความยาวสายโซ่คาร์บอนห้าสาย (n=5) มีฤทธิ์ในการปกป้องระบบประสาทที่สูงกว่าของเควอซิตินในฐานะยาอ้างอิงในทุกความเข้มข้น โดยการเปรียบเทียบระหว่างสารประกอบ 9, 11 และ 15 ที่มีแบริ่งอย่างง่าย 2-ฟีนิล-4H-โครมีน-4-หนึ่งมอยอิตีและความยาวโซ่คาร์บอนต่างกัน (n=3, 4 และ 5 สำหรับสารประกอบ 9, 11 และ 15 ตามลำดับ) มันสามารถบอกเป็นนัยได้ว่าการเพิ่มขนาดของตัวเชื่อมโยงข้ามสามารถเพิ่มการออกฤทธิ์ในการป้องกันระบบประสาทของสารประกอบเป้าหมาย (ตารางที่ 1) พฤติกรรมแบบเดียวกันนี้ยังพบเห็นได้สำหรับสารประกอบ 18–20 เป็น 4H-โครมีน-4-อนุพันธ์หนึ่งตัวที่ถูกแทนที่ที่ 7 ตำแหน่ง โดยเฉพาะอย่างยิ่ง อนุพันธ์ของโครเมียมที่ไม่ถูกแทนที่มีฤทธิ์ป้องกันระบบประสาทน้อยกว่าในเซลล์ที่เหนี่ยวนำให้เกิดการตายของ H2O2- มากกว่าสารอะนาล็อกที่ถูกแทนที่ด้วยฮาโล (เปรียบเทียบสารประกอบ 9 กับสารประกอบ 10 สารประกอบ 11 กับสารประกอบ 12–14 และสารประกอบ 15 กับสารประกอบ 16 และแม้แต่ 17 ที่ความเข้มข้นสูงเป็นพิเศษ) กิจกรรมการยับยั้งโคลีนเอสเตอเรส AChE และฤทธิ์ยับยั้ง BuChE ของคอนจูเกตโครโมน–LA 9–20 ทั้งหมดถูกตรวจสอบ ตารางที่ 2 แสดงค่า IC50 ของสารประกอบที่เปรียบเทียบกับยาโดเนเปซิลมาตรฐาน ไม่มีการสังเกตผลกระทบที่มีนัยสำคัญต่อ AChE ที่ 100 ไมโครโมลาร์สำหรับสารประกอบส่วนใหญ่ ยกเว้น 7-อนุพันธ์ฟลูออโร (13) ที่มีฤทธิ์ปานกลาง (IC50=56.50 ไมโครโมลาร์) ผลการศึกษาพบว่ากิจกรรมของอนุพันธ์แทนที่ตำแหน่ง 7- (18–20) กับ BuChE ดีกว่าอนุพันธ์ที่แก้ไขตำแหน่ง 2- (9–17)

ในบรรดา7-อนุพันธ์ที่ถูกแทนที่ มีเพียงสารประกอบ 18 และ 19 ที่มีความยาวสายโซ่ 3 หรือ 4 อะตอมเท่านั้นที่แสดงฤทธิ์ต้าน BuChE ที่เหมาะสม (IC50=15.32 และ 7.55 μM ตามลำดับ) สารประกอบ 20 ที่มีตัวเว้นระยะคาร์บอน 5 ตัว (n=5) เปิดเผยว่าไม่มีฤทธิ์ต้าน BuChE ที่ยืนยันผลอันยิ่งใหญ่ของตัวเชื่อมโยงข้ามและขนาดของโมเลกุลในการครอบครองตำแหน่งแอคทีฟของเอนไซม์ ดังนั้น การยืดออกของตัวเชื่อมต่อจึงไม่มีผลในเชิงบวกต่อศักยภาพในการยับยั้ง BuChE เมื่อทาครินที่มีสารแทนที่ฮาโลเจนถูกคอนจูเกตกับ LA โดยตัวเว้นวรรคคาร์บอน 3 ตัว กิจกรรมการยับยั้ง AChE และ BuChE โดยเฉพาะอย่างยิ่งกิจกรรมของ AChEI ได้รับการปรับปรุงเมื่อเปรียบเทียบกับแทคริน [35] การศึกษายืนยันบทบาทที่สำคัญของความยาวของสารเชื่อมขวางต่อฤทธิ์การยับยั้ง ChEs ของสารประกอบเป้าหมาย การศึกษาก่อนหน้านี้ยังเปิดเผยว่าการผสมพันธุ์ของทาครินกับโครงโครโมนช่วยปรับปรุงการยับยั้ง BuChE ได้มากกว่าของ AChEI ซึ่งสอดคล้องกับความสำเร็จของผลลัพธ์ของเรา [30] ผลลัพธ์เดียวกันนี้ถูกสังเกตเช่นกันเมื่อรวมเภสัชที่เป็นที่รู้จักอื่นๆ เข้าด้วยกัน การยึดติดของ LA และ/หรือโครโมนกับ rivastigmine ส่งผลให้เกิดการยับยั้ง BuChE ที่สูงกว่าการยับยั้ง AChE [28] ดูเหมือนว่า LA สามารถปรับปรุงกิจกรรมการยับยั้ง BuChE ของโครงแม่ได้มากกว่ากิจกรรมการยับยั้ง AChE จากผลการวิจัย ดูเหมือนว่ากลุ่มที่บริจาคอิเล็กตรอนบนโครงโครโมนและการใช้ตัวเว้นวรรคที่เหมาะสมเพื่อป้องกันการพับของโมเลกุลอาจเอื้อให้เกิดปฏิสัมพันธ์ที่เหมาะสมกับเอนไซม์ที่เปลี่ยนสารประกอบเป้าหมายให้เป็นสารยับยั้งที่มีศักยภาพมากขึ้น