โดดเด่นด้วยการลดลงในหน้าที่ทางสรีรวิทยาในระบบอวัยวะส่วนบุคคล

สนใจติดต่อสอบถามเพิ่มเติม

สรุป

ชาดำเป็นเครื่องดื่มชาที่บริโภคกันมากที่สุดในโลก และมีรายงานมาอย่างต่อเนื่องว่ามีประโยชน์ในการต่อต้านวัย อย่างไรก็ตาม ไม่ว่า theaflavins ซึ่งเป็นไฟโตเคมิคอลชนิดหนึ่งที่มีลักษณะเฉพาะในสารสกัดจากชาดำ จะมีส่วนเกี่ยวข้องกับการควบคุมความชราและอายุขัยของผู้บริโภคหรือไม่ก็ตาม ในการศึกษานี้ เราแสดงให้เห็นว่า theaflavins มีบทบาทที่เป็นประโยชน์ในการป้องกันการรั่วไหลของลำไส้ที่เริ่มมีอายุและ dysbiosis ซึ่งจะช่วยชะลอความชราในแมลงหวี่ ในทางกลไก ธีฟลาวินจะควบคุมการประกอบคอนเดนเสทของ Imd เพื่อควบคุมการทำงานของสัญญาณ Imd ที่มากเกินไปในลำไส้ของแมลงวันผลไม้ นอกจากนี้ ธีฟลาวินยังช่วยป้องกันอาการลำไส้ใหญ่บวมที่เกิดจาก DSS ในหนูทดลอง ซึ่งบ่งชี้ว่าธีฟลาวินมีบทบาทในการปรับความสมบูรณ์ของลำไส้ โดยรวมแล้ว การศึกษาของเราเผยให้เห็นกลไกระดับโมเลกุลโดยที่ theaflavins ควบคุมสภาวะสมดุลของลำไส้โดยการควบคุมการรวมตัวกันของ Imd

กรุณาคลิกที่นี่เพื่อทราบข้อมูลเพิ่มเติม

การแนะนำ

การแก่ชราซึ่งมีลักษณะเฉพาะโดยการทำงานทางสรีรวิทยาที่ลดลงในระบบอวัยวะแต่ละส่วนและความเสี่ยงที่เพิ่มขึ้นของโรคและความตาย เกี่ยวข้องกับการสะสมของความเสียหายต่อโมเลกุล เซลล์ และเนื้อเยื่อ(Alavez et al., 2011; Bartke et al.,2019; Engeet อัล.,2017). การระบุวัสดุที่ใช้งานได้หรือสารเคมีที่ป้องกันการเสื่อมสภาพทางชีวภาพเพื่อชะลอกระบวนการชราและยืดอายุการใช้งานเป็นสิ่งสำคัญอย่างไม่ต้องสงสัย (Bar-ardo et al., 2017; Kapahi et al.,2017) การศึกษาก่อนหน้านี้ได้รายงานว่าชาดำ ซึ่งเป็นชาที่บริโภคกันอย่างแพร่หลายมากที่สุดในโลก มีกิจกรรมสำคัญที่ชะลอความชรา (Cameron et al.,2008; Fei et al.,2017; Kumar and Rizvi, 2017; Naumovski et al.,2019 ; Peng et al.,2009; Xiao et al.,2020). ผลิตภัณฑ์เสริมอาหารด้วยสารสกัดจากชาดำช่วยยืดอายุของสัตว์ทดลองได้อย่างมีประสิทธิภาพ เช่น หนอน (Feet al.,2017), แมลงวันผลไม้(Peng et al.,2009; Site al.,2011), หนู (Site al.,2011) ; Xiao et al.,2020) และหนู (Kumar and Rizvi, 2017).

เป็นที่ทราบกันดีว่าสารสกัดจากชาดำส่วนใหญ่ประกอบด้วยไฟโตเคมิคัลสองประเภท ได้แก่ catechins และ theaflavins (TFs) (Cameron et al.,2008; Kondo et al.,2019; Li et al.,2013) ซึ่งอย่างหลัง ผลิตจากคาเทชินโดยโพลีฟีนอลออกซิเดสและเปอร์ออกซิเดสภายในระหว่างกระบวนการออกซิเดชันในการผลิตชาดำ (Li et al.,2013) ชุดของการศึกษาระบุบทบาทการต่อต้านวัยของ catechins ผ่านการปรับปรุงความเครียดออกซิเดชันและการอักเสบที่เกี่ยวข้องกับอายุ และลดความเสียหายของเนื้อเยื่อ (Cameron et al.,2008; Niu et al.,2013; Peng et al.,2009; Si et al. .2011; Waaner et al.,2015). อย่างไรก็ตาม การศึกษาเชิงหน้าที่เกี่ยวกับการมีส่วนร่วมของ TFs ในการสูงวัยนั้นล้าหลังอย่างมากกับสาร catechins เนื่องจากเป็นการยากที่จะสกัด TFs จากใบชาดำในปริมาณที่เพียงพอสำหรับการศึกษาทางการแพทย์(Takemoto and Takemoto, 2018) เมื่อเร็ว ๆ นี้ มีการพัฒนาวิธีการสังเคราะห์ทางชีวภาพหลายวิธีสำหรับการผลิต TFs จำนวนมาก (Takemoto และ Takemoto,2018) ทำให้สามารถสำรวจผลกระทบทางชีวภาพที่แน่นอนของ TFs และกลไกการกำกับดูแลที่อยู่ภายใต้

เมื่อเร็ว ๆ นี้ ชุดข้อมูลที่เพิ่มขึ้นได้เน้นถึงบทบาทสำคัญของลำไส้ในการปรับอายุและอายุขัย (Guo et al.,2014; Jji et al.,2019; Maynard and Weinkove,2018; Rothenberg and Zhang, 2019; Salazar et al. ,2018). เยื่อบุผิวในลำไส้ซึ่งทำหน้าที่เป็นเกราะป้องกันที่เลือกได้ ช่วยให้ดูดซึมสารอาหาร ไอออน และน้ำ และจำกัดการสัมผัสของโฮสต์กับสิ่งที่เป็นอันตราย รวมถึงจุลินทรีย์ แอนติเจนในอาหาร และสารพิษในสิ่งแวดล้อม(Capo et al.,2019; Nicholson et al. , 2012; Ryu และคณะ,2010). ในฐานะที่เป็นเนื้อเยื่อที่มีการหมุนเวียนสูงในแต่ละบุคคล ลำไส้ให้สภาพแวดล้อมการดำรงชีวิตที่ดีที่สุดสำหรับจุลินทรีย์ที่มีชีวิตร่วมกัน รวมถึงสภาวะที่ไม่ใช้ออกซิเจนตามธรรมชาติ สารอาหารมากมาย อุณหภูมิและ pH ที่เหมาะสม

รูปที่ 1 Theaflavins ยืดอายุของ Drosophila และเพิ่มความสามารถในการปีนเขา

(A และ B) แมลงวันผลไม้เพศเมียได้รับการเพาะเลี้ยงด้วยอาหารมาตรฐานที่เสริมด้วย 1 มก./มล. หรือ 2.5 มก./มล. (TFs) หรือไม่มี TFs เป็นเบส แมลงวันถูกส่งไปยังขวดใหม่ที่มีสื่อใหม่ทุกวัน ๆ และแมลงวันตายได้คะแนนตลอดอายุขัยของผู้ใหญ่ เส้นโค้งการเอาชีวิตรอด (A) และอายุขัยเฉลี่ย (B) ของแมลงวันเพศเมียได้รับการวิเคราะห์และแสดง

(Cand D) เพศเมีย w18 ถูกเลี้ยงด้วยอาหารแมลงหวี่มาตรฐาน (อ้างอิงพื้นฐาน) หรือด้วยอาหารที่เสริมด้วย 1 มก./มล. หรือ 2.5 มก./ETFs ตามลำดับ แมลงวันอิสระหกกลุ่มตามอายุที่ระบุ (10 วัน 30 วัน 40 วันและ 50 วันตามลำดับ) ถูกตรวจสอบในคาเฟ่ (C) และการให้อาหารด้วยฟลูออเรสซีน (D) มูลค่าสร้างช่องที่ถูกครอบครองโดยแบคทีเรียบางชนิดในร่างกาย (Bonfini et al.,2016; Buchon et al., 2013; Nicholson et al., 2012) ในขณะเดียวกันจุลินทรีย์ที่มีชีวิตทางชีวภาพและสารเมตาบอลิซึมของพวกมันก็ส่งผลโดยตรงหรือโดยอ้อมต่อกระบวนการแปรรูปสารอาหาร การย่อยอาหารและการดูดซึม ความสมดุลของพลังงาน ฟังก์ชั่นภูมิคุ้มกัน การพัฒนาและการเจริญเติบโตของระบบทางเดินอาหาร และกิจกรรมทางสรีรวิทยาที่สำคัญอื่น ๆ อีกมากมาย (Bonfini et al.,2016; Broderick,2016; Maynard and VVeinkove,2018; Nicholson et al., 2012) ความสัมพันธ์ที่เป็นประโยชน์ร่วมกันระหว่างสัญลักษณ์ทั้งสองสามารถรักษาเสถียรภาพและความสมดุลแบบไดนามิกของระบบนิเวศขนาดเล็กในลำไส้ (Bonfini et al.,2016; Brodeerick,2016; Broderick et al.,2014; Guo et.,2014; May-nard และ Weinkove,2018; Nicholson et al.,2012).

cistanche สามารถต่อต้านริ้วรอย

ชุดของการศึกษาแสดงให้เห็นว่าการตอบสนองของภูมิคุ้มกันโดยธรรมชาติมีความสำคัญต่อการรักษาสภาวะสมดุลของจุลินทรีย์ในลำไส้ และได้รับการอนุรักษ์ตั้งแต่สัตว์ไม่มีกระดูกสันหลังไปจนถึงสัตว์มีกระดูกสันหลัง (Guillouet al.,2016; Guo et al.,2014; Ryu et al., 2006, 2010; Vijay- Kumar et al., 2010). ในแมลงหวี่มีเส้นทางการส่งสัญญาณที่สำคัญสองทาง กล่าวคือ เส้นทางที่สูญเสียและภูมิคุ้มกันบกพร่อง (Imd) เกี่ยวข้องกับการตอบสนองทางภูมิคุ้มกันโดยธรรมชาติ (Lu et al., 2020; Myllymakiet al.,2014; Valanne et al.,2011) โดยเฉพาะอย่างยิ่ง เส้นทาง Drosophila Toll นั้นมีความคล้ายคลึงกันกับเส้นทางรับ interleukin-1 ของสัตว์เลี้ยงลูกด้วยนม (IL-1R) และ MyD88-dependent Toll-like receptor(TLR) ที่ขึ้นต่อกัน ในขณะที่เส้นทาง Imd นั้นคล้ายคลึงกัน ไปยังเส้นทางของตัวรับปัจจัยเนื้อร้ายเนื้องอก (TNFR) และเส้นทาง TLR ที่ขึ้นกับ TRIF ในสัตว์เลี้ยงลูกด้วยนม (Imler, 2014; Myllymaki et al., 2014; Valanne et al., 2011) เส้นทางทั้งสองนี้ควบคุมการแสดงออกของเปปไทด์ต้านจุลชีพ (AMPs) ผ่านการกระตุ้นปัจจัยการถอดรหัส NF-KB (Imler,2014; Myllymaki et al.,2014; Valanne et al.,2011)ไบโอฟลาโวนอยด์โดยปกติ เส้นทางการส่งสัญญาณ Imd จะเปิดใช้งานโดยการติดเชื้อแบคทีเรียแกรมลบ และส่งผลให้เกิดการแสดงออกของ AMP อีกชุดหนึ่ง เช่น Attacin, Cecropin และ Diptericin (Kleino and Silverman,2014; Myllymaki et al.,2014) การแสดงออกของ AMP เหล่านี้ต้องการตัวรับโปรตีน peptidoglycan Recognition (PGRP)-LC ในวิถีทาง Imd และการตัดแยกตามสัญญาณและการเคลื่อนย้ายนิวเคลียร์ของ Relish ซึ่งเป็นปัจจัยการถอดรหัสแฟมิลี NF-kB (Kleino และ Silverman, 2014; Myllymaki et al., 2557). การศึกษาเมื่อเร็ว ๆ นี้พบว่าการสร้าง amyloid จำเป็นสำหรับการกระตุ้นเส้นทาง Drosophila Imd เมื่อรับรู้ถึงแบคทีเรีย peptidoglycans (Kleino et al.,2017) อย่างไรก็ตาม ไม่ว่าคอนเดนเสท Imd นี้จะเกี่ยวข้องกับกระบวนการทางชีวภาพอื่นๆ เช่น การบำรุงรักษาสภาวะสมดุลของลำไส้และการควบคุมอายุหรือไม่ ส่วนใหญ่ยังไม่ทราบ

ในการศึกษานี้ เราใช้แมลงวันผลไม้และหนูทดลองเป็นแบบจำลองสัตว์เพื่อตรวจสอบบทบาทของ TFs ในการควบคุมความสมบูรณ์ของลำไส้และการแก่ชรา เราแสดงให้เห็นว่า TFs ชะลอการเพิ่มจำนวนเซลล์ต้นกำเนิดในลำไส้ที่เริ่มมีอาการมากเกินไป ป้องกัน dysbiosis ของ microbiome ในลำไส้ และป้องกันการกระตุ้นเส้นทางการส่งสัญญาณ Imd ซึ่งจะช่วยยืดอายุในแมลงหวี่ การศึกษากลไกเพิ่มเติมระบุว่า TFs ส่งผลในทางลบต่อการส่งสัญญาณ Imd อาจผ่านการปิดกั้นการรวมตัวของ Imd มากกว่าการแพร่หลาย นอกจากนี้ เราพบว่า TFs มีประสิทธิภาพสูงในการป้องกันโรคลำไส้ใหญ่อักเสบจาก DSS ในหนูทดลอง เมื่อนำมารวมกัน การค้นพบของเราเผยให้เห็นบทบาทที่เป็นไปได้ของ TFs ในการปรับพฤติกรรม Imd ซึ่งอาจเป็นปัจจัยสำคัญในการมีส่วนร่วมในเชิงบวกต่อสภาวะสมดุลในลำไส้และการยืดอายุขัย

ผลลัพธ์

อาหารเสริม theaflavins ช่วยยืดอายุของแมลงหวี่

เพื่อตรวจสอบว่า theaflavins (TFs) ส่งผลต่ออายุและอายุขัยของแมลงหวี่หรือไม่ เราเลี้ยงแมลงวันตัวเมีย w'118 ด้วยอาหารเลี้ยงมาตรฐานที่เสริมด้วย TFs 1 มก./มล. หรือ 2.5 มก./มล. และทำการทดสอบช่วงอายุขัยตามที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้ (Ji et al .,2019). แมลงวันที่เลี้ยงด้วยอาหารที่เสริมด้วยตัวทำละลาย TFs (H2O) ในปริมาณที่เท่ากันถือเป็นกลุ่มควบคุม ดังที่แสดงไว้ในรูปที่ 1A การเติมอาหารที่มีความเข้มข้นของ TFs ที่ค่อนข้างต่ำ (1 มก./มล.) จะช่วยยืดอายุแมลงวันผลไม้เล็กน้อย และความเข้มข้นสูงของ TFs (2.5 มก./มล.) มีผลในเชิงบวกอย่างมีนัยสำคัญต่อการยืดอายุขัย โดยเฉพาะอย่างยิ่ง การดูดซึม TFs ที่มีความเข้มข้นสูงในระยะยาว (2.5 มก./มล.) ส่งผลให้อายุขัยเฉลี่ยของแมลงวันเพศเมียสูงขึ้นประมาณ 8 วัน (รูปที่ 1B) ซึ่งชี้ให้เห็นถึงบทบาทที่เป็นประโยชน์ของ TFsin ในการควบคุมอายุขัยในแมลงหวี่ ได้ผลลัพธ์ที่คล้ายคลึงกันเมื่อเราทดสอบผลกระทบที่อาจเกิดขึ้นของ TFs เพิ่มเติมต่ออายุขัยของแมลงวันตัวผู้ 8 ตัว (รูปที่ S1A และ S1B)

รูปที่ 2 Theaflavins ป้องกันความผิดปกติของลำไส้ที่เริ่มมีอาการและ microbiota dysbiosis ใน Drosophila

(A และ B) การสูญเสียความสมบูรณ์ของลำไส้ได้รับการตรวจสอบโดย Smurftest เมื่ออายุ 10 วัน 30 วัน 40 วันและ 50 วันในเพศหญิงอายุ 18 วัน ตัวอย่างของ non-Smurf และ Smurf ถูกแสดงไว้ใน (A) เปอร์เซ็นต์ของสเมิร์ฟในกลุ่มที่ระบุที่ต่างกันถูกวิเคราะห์และแสดงใน (B)

(C) แบคทีเรียที่สำรองไว้โดย qPCR ของยีน 16S rRNA ในไฟล์ w18 ตัวเมียจากกลุ่มที่บ่งชี้ต่างกันถูกวิเคราะห์และแสดง

(DF) การหาลำดับของยีน 16S rRNA ของแบคทีเรียในกลุ่มคอมเมนซัลถูกดำเนินการ วิเคราะห์และนำเสนอสัดส่วนของแท็กซ่าแบคทีเรีย (D) แผนที่ความร้อนของแท็กซ่าจุลินทรีย์หลัก (F) และความอุดมสมบูรณ์สัมพัทธ์ของแบคทีเรียแกมมาโปรตีโอแบคทีเรีย (F)

รูปที่ 2 ต่อ

(G และ H) ความกล้าถูกผ่าจากแมลงวันเพศเมียที่ถูกบ่งชี้ที่เลี้ยงด้วย TF 2.5 มก./มล. หรือไม่มี TFs เป็นกลุ่มควบคุมที่อายุ 10 วันและ 40 วัน ภาพของสไลด์ midgut ถูกจับโดยกล้องจุลทรรศน์เรืองแสงสำหรับสัญญาณ GFP (G) การวิเคราะห์ทางสถิติแสดงเปอร์เซ็นต์ของเซลล์ที่เป็นบวก GFP แสดงเป็น (H)

(I) ความกล้าจากแมลงวันเพศเมียที่ถูกระบุถูกรวบรวมและอยู่ภายใต้การสอบวิเคราะห์การย้อมสีภูมิคุ้มกันโดยใช้แอนติบอดีที่ต้านฮิสโตน 3(pH3) ที่มีฟอสโฟรีเลต ผลลัพธ์ทางสถิติในเชิงปริมาณ3-เซลล์เชิงบวกต่อลำไส้ถูกวิเคราะห์และแสดง ใน B, C, H และข้อมูลจะถูกวิเคราะห์โดยการทดสอบของนักเรียนแบบสองด้านและแสดงเป็นค่าเฉลี่ย ± SEM.NS ไม่สำคัญ*p<><0.001. see="" also="" figure="">

เป็นที่ทราบกันดีว่าอีทีเอฟมีรสขม และผู้บริโภคทั้งสองมักจะหลีกเลี่ยงอาหารที่มีรสขม รวมทั้งแมลงวันผลไม้และสัตว์เลี้ยงลูกด้วยนม (Yamazaki et al., 2014; Yang et al., 2018) จากนั้น เราจึงพยายามอธิบายว่า TFs สามารถส่งผลกระทบต่อการบริโภคอาหารของแมลงหวี่หรือไม่ เพราะการศึกษาก่อนหน้านี้ได้พิสูจน์แล้วว่าการจำกัดอาหารนำไปสู่การยืดอายุขัยทั้งในสัตว์มีกระดูกสันหลังและสัตว์ไม่มีกระดูกสันหลัง (Hudry et al.,2019; Kapahi et al.,2017; Moger-Reischer et al. ., 2020). ในการทำเช่นนี้ ก่อนอื่น เราทำการทดสอบ cafe assay ซึ่งเป็นแนวทางที่ใช้กันอย่างแพร่หลายในการวัดอัตราการป้อนโดยตรงและแม่นยำโดยใช้เครื่องป้อน capillary feeder ที่มีตัวกลางที่เป็นของเหลว ดังที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้ (Ja et al., 2007) ดังที่แสดงไว้ในรูปที่ 1C และ S1C การเสริมอาหารของ TFs (1 มก./มล. และ 2.5 มก./มล. ตามลำดับ) แทบจะไม่เปลี่ยนแปลงการบริโภคอาหารของแมลงวันที่ทดสอบ เพื่อยืนยันสิ่งนี้เพิ่มเติม เราใช้ Fluorescein เป็นตัวติดตามอาหาร (Rera et al.,2012; Wang et al.,2005) และทำการทดสอบการให้อาหารตามธรรมชาติ (Danilov et al.,2015) ดังที่แสดงในรูปที่ 1D และ S1D เราไม่สามารถสังเกตความสัมพันธ์ใดๆ ระหว่างการเสริม TFs กับระดับของการบริโภคอาหาร เมื่อนำมารวมกัน ผลลัพธ์ของเราชี้ให้เห็นว่าบทบาทที่เป็นประโยชน์ของ TFs ในการยืดอายุขัยอาจไม่ได้เกิดจากการจำกัดอาหารในแมลงหวี่

TFs เพิ่มเติมสามารถจ่ายได้สำหรับส่งผลกระทบต่อสภาวะสมดุลพลังงานของแมลงหวี่

มีการแนะนำว่าโพลีฟีนอลจากชาดำมีผลดีต่อการป้องกันโรคอ้วนโดยการยับยั้งการย่อยอาหาร การดูดซึมและการบริโภคไขมันและแซ็กคาไรด์ ซึ่งจะช่วยลดปริมาณแคลอรี่ที่ได้รับ (Cameron et al.,2008) จากนั้นเราจึงพยายามที่จะอธิบายว่าการยืดอายุขัยของ LDrosophila ที่ควบคุมโดย TFs นั้นเกิดจากการเปลี่ยนแปลงการดูดซึมสารอาหารและการจัดเก็บพลังงานหรือไม่ ในการทำเช่นนี้ ก่อนอื่นเราได้ตรวจสอบระดับของไตรเอซิลกลีเซอไรด์ (TAG) ซึ่งเป็นหนึ่งในสารไขมันที่ตรวจพบบ่อยที่สุด (Tennessen et al., 2014) ในแมลงวันตัวเมียตลอดชีวิตตามที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้ (Fan et al., 2017)ซื้อ cistancheดังที่แสดงในรูปที่ 1E การรักษา TFs แทบจะไม่ส่งผลกระทบต่อความอุดมสมบูรณ์ของ TAG โดยรวมที่จุดอายุต่างกัน เมื่อเราตรวจพบปริมาณไกลโคเจนและคาร์โบไฮเดรตหมุนเวียนเชิงปริมาณ (กลูโคสและทรีฮาโลส) โดยชุด Hexokinase (Li et al.,2018; Ten-nessen et al., 2014) ผลการวิจัยพบว่าไม่มีการเปลี่ยนแปลงที่ชัดเจนระหว่างตัวอย่างที่มีหรือ โดยไม่มีการบำบัดด้วย TFs(รูปที่ 1F-1H) ข้อสังเกต ได้ผลลัพธ์ที่สอดคล้องกันเมื่อเราตรวจสอบฟีโนไทป์การเผาผลาญที่ใช้ w118 เพศผู้เป็นแบบจำลองสัตว์ (รูปที่ S1E-S1H) โดยรวมแล้ว ข้อมูลเหล่านี้ชี้ให้เห็นว่าการเสริมอาหารของ TFs สามารถจ่ายได้สำหรับการควบคุมคาร์โบไฮเดรตและสภาวะสมดุลของพลังงานตลอดอายุขัยของแมลงหวี่

เราทำการตรวจสอบจลนศาสตร์ของการชราภาพตามธรรมชาติของแมลงหวี่ด้วยการแทรกแซง TFs ในอาหารโดยทำการทดสอบ geotaxis เชิงลบแบบวนซ้ำอย่างรวดเร็วตามที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้ (Dilliane et al., 2017; Staats et al.,2018) ดังแสดงในรูปที่ 1l,1J, S1l และ S1J ดัชนีการปีนเขาของอายุ (40 วัน) w1118 (ทั้งตัวเมียและตัวผู้) ในกลุ่มอาหารเสริม TFs นั้นดีขึ้นอย่างเห็นได้ชัด (เพิ่มขึ้นเกือบ 12 เปอร์เซ็นต์ในเพศหญิงและเกือบ 18 เปอร์เซ็นต์สูงในเพศชาย ) เมื่อเปรียบเทียบกับกลุ่มควบคุม โดยแนะนำว่า TFs อาจปรับปรุงกิจกรรมการปีนและหัวรถจักรของแมลงหวี่

Theaflavins ป้องกันการรั่วไหลของลำไส้ที่เริ่มมีอาการตามวัยและ microbiota dysbiosis

การศึกษาก่อนหน้านี้แสดงให้เห็นว่ากิจกรรมและอายุขัยของแมลงวันผลไม้มีความสัมพันธ์อย่างมากกับสภาวะสุขภาพของโฮสต์ เช่น เพศ อาหาร อายุ และพันธุกรรม (Caruso et al.,2013; Heintz and Mair,2014) เมื่อเร็ว ๆ นี้ หลักฐานหลายบรรทัดได้พิสูจน์แล้วว่าการรักษาสภาวะสมดุลของการส่งสัญญาณ Imd ของลำไส้ช่วยปรับปรุงความสมบูรณ์ของลำไส้โดยป้องกันการแพร่กระจายมากเกินไปของเซลล์ ISC และสารตั้งต้น และโดยการชะลอการทำงานของเยื่อบุผิวในลำไส้ที่เสื่อมไปตามวัย ซึ่งจะส่งผลในทางบวกต่อสุขภาพของสิ่งมีชีวิต (Clark et al. , 2015; Guo และคณะ, 2014). ในแมลงหวี่แมลงวัน อายุขัยที่สั้นลงมีความสัมพันธ์อย่างใกล้ชิดกับความผิดปกติของเยื่อบุผิวในลำไส้ และการพัฒนาความสมบูรณ์ของสิ่งกีดขวางนี้ในช่วงอายุมากขึ้นส่งผลให้เกิดการยืดอายุขัย (Clark et al.,2015; Guoet al.,2014; Jet al., 2019). ดังนั้นเราจึงพยายามตรวจสอบว่า TFs เปลี่ยนแปลงความสมบูรณ์ของลำไส้โดยทำการทดสอบ Smurf ซึ่งเป็นวิธีการที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้หรือไม่ (Clark et al.,2015; Rera et al.,2011) ดังที่แสดงไว้ในรูปที่ 2A แมลงวันผลไม้ที่ทดสอบแล้วซึ่งสีย้อมสีน้ำเงินถูกจำกัดอยู่ในทางเดินอาหารถูกเรียกว่าไม่ใช่สเมิร์ฟ (แผงด้านซ้ายในรูปที่ 2A) ถ้าสังเกตสีย้อมสีฟ้า

รูปที่ 3 ต่อ

(EG) ความกล้าถูกแยกออกจากไฟล์ w1118 เพศเมียที่เลี้ยงด้วย TF 2.5 มก./มล. หรือไม่มี TFs เป็นเบสที่ 10 วัน, 30 วัน, 40 วัน และ 50 วันตามลำดับ RNA ทั้งหมดถูกสกัดและอยู่ภายใต้การวิเคราะห์ RT-PCR วิเคราะห์และแสดงระดับการแสดงออกของ mRNA ของดิพเทอริซิน (F), แอตตาซิน (F) และเซโครพิน A1(G) ใน EG ข้อมูลจะถูกวิเคราะห์โดยการทดสอบ t ของนักเรียนแบบสองด้านและแสดงเป็นค่าเฉลี่ย ± SEM.NS ไม่สำคัญ *p<><><0.001. see="" also="" figure="">

รั่วออกมาจากลำไส้เข้าไปในช่องท้อง นับเจ้าภาพเป็น Smurf (แผงขวาในรูปที่ 2A) สอดคล้องกับการค้นพบครั้งก่อน (Clark et al.,2015) สัดส่วนของ Smurf ค่อยๆ เพิ่มขึ้นในช่วงอายุมากขึ้น (รูปที่ 2B) ที่น่าสนใจคือสัดส่วนของผู้ใหญ่ Smurf ลดลงอย่างมากในกลุ่มที่ได้รับ TFs เมื่อเทียบกับกลุ่มควบคุมที่ตรงกับอายุในผู้หญิงทั้งสอง (จาก 8.2 เปอร์เซ็นต์เป็น 3.7 เปอร์เซ็นต์ จาก 19.4 เปอร์เซ็นต์ เป็น 15.6 เปอร์เซ็นต์ และจาก 35.4 เปอร์เซ็นต์ เป็น 27.1 เปอร์เซ็นต์ สำหรับกลุ่ม ที่อายุ 30 วัน 40 วัน และ 50 วัน ตามลำดับ รูปที่ 2B)และผู้ใหญ่เพศชาย (จาก 2.7 เปอร์เซ็นต์ ถึง 0.9 เปอร์เซ็นต์ จาก 6.9 เปอร์เซ็นต์ ถึง 0.9 เปอร์เซ็นต์ และจาก 8.3 เปอร์เซ็นต์ ถึง 2.7 เปอร์เซ็นต์ เมื่ออายุ 30 ปี วัน 40 วัน และ 50 วัน ตามลำดับ รูปที่ S2A) ซึ่งบ่งชี้ว่า TFs สามารถป้องกันความผิดปกติของลำไส้ในแมลงวันผลไม้ที่มีอายุมากได้ ข้อสังเกต เราสังเกตเห็นการลดลงอย่างมากของเปอร์เซ็นต์สเมิร์ฟในเพศชาย (ลดลงเกือบ 65.8 เปอร์เซ็นต์ , 86.9 เปอร์เซ็นต์ และ 67.4 เปอร์เซ็นต์ เมื่ออายุ 30 วัน 40 วัน และ 50 วัน ตามลำดับ) เมื่อเทียบกับอายุ - เพศเมียที่เข้าคู่กัน (ลดลงเกือบ 54.1 เปอร์เซ็นต์ 19.5 เปอร์เซ็นต์ และ 23.3 เปอร์เซ็นต์ ที่อายุ 30 วัน 40 วัน และ 50 วัน ตามลำดับ) หมายความว่า TFs อาจมีบทบาทที่ดีขึ้นในการลดการรั่วไหลของลำไส้ในแมลงวันตัวผู้

การศึกษาก่อนหน้านี้ชี้ให้เห็นว่าความผิดปกติของลำไส้ที่เริ่มมีอาการมักสัมพันธ์กับ dysbiosis ของ microbiota ในลำไส้ (Clark et al.,2015; Guo et al.,2014) ดังนั้นเราจึงตรวจสอบองค์ประกอบของแบคทีเรียในลำไส้หลังจากการเสริม TFs ก่อนอื่นเราใช้ไพรเมอร์สากลและทำการทดลอง PCR เชิงปริมาณเพื่อหาปริมาณระดับยีน 16S rRNA ของแบคทีเรีย ดังที่แสดงในรูปที่ 2C ในการตัดตอนอายุ ประชากรแบคทีเรียทั้งหมดจากกลุ่มแทรกแซง TFs มีการลดลงอย่างน่าทึ่ง (เกือบ 45 เปอร์เซ็นต์ -55 เปอร์เซ็นต์ ) เมื่อเทียบกับกลุ่มควบคุม ซึ่งแนะนำว่าการเสริม TFs อาจป้องกันการขยายตัวของจุลินทรีย์ในช่วงอายุมากขึ้น . จากนั้น เราทำ metagenomics เพื่อตรวจสอบรายละเอียดการเปลี่ยนแปลงในชุมชนจุลินทรีย์ในลำไส้ที่เกิดจากการเสริมอาหารด้วย TFs ดังแสดงในรูปที่ 2D-2F สัดส่วนของ Gammaproteobacteria ซึ่งพบว่ามีการขยายตัวมีความสัมพันธ์อย่างใกล้ชิดกับความผิดปกติของลำไส้ (Clark et al.,2015) ลดลงอย่างเห็นได้ชัดโดยการเสริม TFs ในลำไส้ที่มีอายุมากขึ้น ( ลดลงเกือบร้อยละ 7) หมายความว่า TFs มีส่วนทำให้เกิดสภาวะสมดุลของ microbiota ในลำไส้ในช่วงอายุมากขึ้นในแมลงหวี่

Theaflavins ปรับปรุงสภาวะสมดุลของลำไส้ในการเพิ่มจำนวนใน Drosophila

We further examined the intestinal integrity of flies that were treated with or without TFs. First, we employed the widely-used P{Esg-Gal4}/P{Uasp-GFP};{Tub-Gal80*s}strain(referred to as esgts>GFP) ซึ่งสเต็มเซลล์ในลำไส้ (ISC) และเซลล์ต้นกำเนิดถูกติดฉลากด้วย GFP ดังที่แสดงในรูปที่ 2G และ 2H จำนวนเซลล์ที่เป็นบวกของ GFP ในกลุ่มแทรกแซง TFs ที่อายุ 40 วัน (นับ 20 ความกล้า) น้อยกว่ามาก (เกือบ 29.7 เปอร์เซ็นต์) เมื่อเทียบกับกลุ่มควบคุมที่จับคู่อายุ (เกือบ 47.6 เปอร์เซ็นต์และ มีการนับความกล้า 19 ครั้ง) ซึ่งบ่งชี้ว่า TFs อาจยับยั้งการแพร่กระจายเกินอายุของ ISC ที่เริ่มมีอาการ นอกจากนี้ เรายังทำการทดลองสร้างภูมิคุ้มกันโดยใช้แอนติบอดีต่อสาร Phospho-Histone 3(pH3) ซึ่งเป็นเครื่องหมายเฉพาะสำหรับเซลล์ไมโทซิสในเนื้อเยื่อในลำไส้ เราสังเกตค่า pH3-เซลล์ที่เป็นบวกในลำไส้จากผู้ใหญ่ที่เสริมด้วย TFs ที่มีอายุมากขึ้น (จำนวนเฉลี่ยคือ 20.6) เมื่อเทียบกับเซลล์ที่มาจากกลุ่มควบคุม (จำนวนเฉลี่ยคือ 39.5 รูปที่ 2) เมื่อนำมารวมกัน ผลลัพธ์ของเราแนะนำว่าการเสริมอาหารด้วย TFs ช่วยทำให้สภาวะสมดุลของลำไส้มีการเพิ่มจำนวนขึ้น และป้องกัน microbiota dysplasia ที่เริ่มมีอาการตามวัย ซึ่งจะชะลอความชราในแมลงหวี่

Theaflavins เชิงลบปรับสัญญาณ Imd ลำไส้

เพื่อสำรวจกลไกระดับโมเลกุลพื้นฐานโดยที่ TFs มีส่วนทำให้เกิดภาวะธำรงดุลในลำไส้ของแมลงหวี่ เราทำการวิเคราะห์ RNA-seq โดยใช้ตัวอย่างลำไส้ที่จับคู่อายุจากผู้ใหญ่ w1118 เพศหญิงที่รับการรักษาด้วย TFs หรือไม่ใช้ การวิเคราะห์เศษส่วนต่อกิโลเบสต่อล้าน (FPKM) ชี้ให้เห็นว่ารูปแบบการแสดงออกของยีนโดยรวมมีความคล้ายคลึงกันระหว่างกลุ่มทดลองทั้งสองกลุ่ม (รูปที่ 3A) อย่างไรก็ตาม การวิเคราะห์การแสดงออกเชิงอนุพันธ์เพิ่มเติมระบุยีนที่แสดงออกเชิงอนุพันธ์ทั้งหมด 229 ยีน โดย 99 ตัวถูกปรับเพิ่มและ 126 ตัวถูกปรับลด (รูปที่ 3B) ที่น่าสนใจ การวิเคราะห์ยีน ontology ของยีนเหล่านี้เปิดเผยว่าวิถีการตอบสนองของภูมิคุ้มกันเปลี่ยนแปลงอย่างมากโดยการเสริมอาหารด้วย TFs (รูปที่ 3C)

ใน Drosophila เส้นทางการส่งสัญญาณภูมิคุ้มกันโดยธรรมชาติได้รับการพิสูจน์แล้วว่ามีบทบาทสำคัญในการควบคุมสภาวะสมดุลของลำไส้ที่เริ่มมีอาการและการมีอายุยืนยาว (Clark et al,2015; Guo et al,2014) จากนั้นเรามุ่งเน้นไปที่การตรวจสอบรูปแบบการแสดงออกของเปปไทด์ต้านจุลชีพ (AMP) ที่ปลายน้ำของสัญญาณภูมิคุ้มกันโดยกำเนิด ตามที่ปรากฏ

รูปที่ 4 ต่อ

(D) โปรตีน Imd บริสุทธิ์ถูกบ่มด้วยความเข้มข้นต่างๆ ของ TFs (50 uM, 100 uM และ 200 uM ตามลำดับ) ที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 5 นาที จากนั้นจึงนำตัวอย่างไปวิเคราะห์สเปกตรัมการแผ่รังสีการเรืองแสงโดยใช้ความยาวคลื่นที่ระบุ (การกระตุ้นที่ 430 นาโนเมตร การแผ่รังสีจาก 450 นาโนเมตรถึง 550 นาโนเมตรที่มีความกว้างของร่อง 5 นาโนเมตร) ตัวอย่างที่ไม่มี TF ถูกใช้เป็นตัวควบคุมพื้นฐาน

（E and F）Lysates of guts from NP11>แมลงวัน Myc-Imd ถูกเตรียมและฟักด้วย TFs (100μM) ที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 30 นาที การสอบวิเคราะห์ SDD-AGE (แผงด้านบนใน E) และ SDS-PAGE (แผงด้านล่างใน E) ถูกดำเนินการเพื่อวิเคราะห์การรวมกลุ่มของโปรตีน Imd Tubulin ถูกใช้เป็นตัวควบคุมการโหลดcistanchการวิเคราะห์ความหนาแน่นถูกดำเนินการเพื่อหาปริมาณคอนเดนเสทแบบ Imd ในตัวอย่างต่างๆ และผลลัพธ์ถูกแสดงไว้ใน (F) (G) โครมาโตแกรมที่เป็นตัวแทนของตัวอย่าง TFs

(H และ I) โปรตีน Flag-Imd ที่บริสุทธิ์ถูกบ่มด้วย TFs, TF1, TF2a, TF2b หรือ TF3 (100 ไมโครโมลาร์สำหรับแต่ละตัวอย่าง) หรือด้วยปริมาตรของบัฟเฟอร์เท่ากัน (ตัวควบคุม) ที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 30 นาทีตามที่ระบุไว้ จากนั้น ตัวอย่างถูกนำไปทดสอบ SDD-AGE (แผงด้านบนใน H) และ SDS-PAGE (แผงด้านล่างใน H) เพื่อกำหนดรูปแบบการรวมตัวของ Imd การวิเคราะห์ความหนาแน่นเพื่อหาปริมาณคอนเดนเสทแบบ Imd ในตัวอย่างต่างๆ ถูกดำเนินการและแสดงใน () ใน C, F และ I ข้อมูลจะถูกวิเคราะห์โดยการทดสอบของนักเรียนแบบสองด้านและแสดงเป็นค่าเฉลี่ย± SEM***p< 0.001.="" see="" also="" figure="">

ในรูปที่ 3D ยีน AMP ที่ควบคุมโดยวิถีทางภูมิคุ้มกันบกพร่อง (Imd) รวมถึงดิพเทอริซิน A (DptA), ดิพเทอริซิน B(DptB), แอตตาซิน A(AttA), cecropin A1 (CecA1), cecropin A2 (CecA2) และ cecropin C (Cece) ลดลงอย่างมีนัยสำคัญ (ร้อยละ 39.4 ,72.3 เปอร์เซ็นต์ ,10.5 เปอร์เซ็นต์ ,86.5 เปอร์เซ็นต์ ,99.8 เปอร์เซ็นต์ และ 36.1 เปอร์เซ็นต์ ตามลำดับ) ในกลุ่มที่ได้รับการรักษาด้วย TFs เมื่อเปรียบเทียบกับกลุ่มควบคุม เพื่อยืนยันผลลัพธ์ที่ได้จากการวิเคราะห์ RNA-seq เพิ่มเติม เราได้ดำเนินการปฏิกิริยาลูกโซ่การถอดรหัสแบบย้อนกลับเชิงปริมาณ (gRT-PCR) เพื่อหาปริมาณระดับการแสดงออกสัมพัทธ์ของยีน AMP ที่เกี่ยวข้องกับ Imd ในตัวอย่างลำไส้ของแมลงหวี่ที่ได้รับที่จุดอายุที่แตกต่างกันสี่จุด ได้แก่ 10 วัน 30 วัน 40 วัน และ 50 วัน ดังที่แสดงไว้ในรูปที่ 3E-3G ระดับการแสดงออกของ mRNA ของยีนบางตัว ซึ่งรวมถึงดิพเทอริซิน, แอตตาซิน และเซโครพิน A1 ลดลงอย่างมีนัยสำคัญ (โดยเกือบ 35.9 เปอร์เซ็นต์ -66.6 เปอร์เซ็นต์ ) ในที่บำบัดด้วย TFs ความกล้าในวัยชรา โดยรวมแล้ว ข้อมูลของเราเปิดเผยว่า TFs อาจเป็นปฏิปักษ์ต่อการกระตุ้นเส้นทางการส่งสัญญาณ Imd ในเซลล์ลำไส้ของแมลงหวี่ในช่วงอายุมากขึ้น

Theaflavins จ่ายได้สำหรับการควบคุมการถอดรหัสของเส้นทาง Imd หรือการแพร่หลายของ Imd

เราพยายามตรวจสอบความสัมพันธ์ระหว่าง TF และ Imd และทำการทดสอบ Surface plasmon resonance (SPR) ตามที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้ (Lan et al.,2020) ดังแสดงในรูปที่ 4A TFs แสดงสัมพรรคภาพการจับปานกลางกับโปรตีน Imd บริสุทธิ์ที่ค่าคงที่ Kp โดยประมาณที่ 8.078 uM จากนั้นเรามักจะตรวจสอบว่า TFs ควบคุมเส้นทางการส่งสัญญาณ Imd ในลำไส้อย่างไร จากผลการวิเคราะห์การถอดรหัสจากข้อมูล RNA-seq เราพบว่าระดับการแสดงออกของปัจจัยควบคุมหลักในเส้นทางการส่งสัญญาณ Imd เช่น PGRP-LC, Imd และ Relish แทบจะไม่เปลี่ยนแปลงโดยการบำบัดด้วย TFs (รูปที่ S3A ). เรายังเก็บตัวอย่างลำไส้จากแมลงวันที่ได้รับอาหารเสริมโดยมีหรือไม่มี TFs ในหลายช่วงอายุ และทำการทดลอง qRT-PCR เพื่อตรวจหารูปแบบการแสดงออกของยีนเหล่านี้โดยเฉพาะ ดังที่แสดงไว้ในรูปที่ S3B ระดับ mRNA ของยีนบางตัว รวมทั้ง effete, faded, tak1, pgrp-Ica, uev1a, bendless, relish, imd, pgrp-sc2, tab2, ird5 Kenny และ diap2 มีความคล้ายคลึงกันระหว่างกลุ่มควบคุม และกลุ่มแทรกแซง TFs โดยบอกว่า TFs ไม่เกี่ยวข้องกับการควบคุมสัญญาณ Imd ที่ระดับการถอดความ

ต่อไป เราตรวจสอบโปรไฟล์การแพร่หลายของ Imd เนื่องจากการศึกษาก่อนหน้านี้ชี้ให้เห็นว่า ubigui-tination ของ Imd เป็นสิ่งจำเป็นสำหรับการถ่ายโอนสัญญาณดาวน์สตรีมในเส้นทาง Imd (Myllymaki et al.,2014; Zhou et al.,2005) ขั้นแรก เราทำการทดสอบการเปลี่ยนแปลง E1 ในหลอดทดลอง และพบว่าการรักษาด้วย TFs ไม่มีอิทธิพลอย่างชัดเจนต่อปฏิกิริยาของเอนไซม์ของ E1 และ ubiquitin เพื่อสร้าง E1/Ub คอนจูเกต (รูปที่ S4A) ยิ่งไปกว่านั้น เราได้ถ่ายเซลล์ Drosophila S2 ด้วยพลาสมิดซึ่งแสดง Imd ที่ติดแท็กด้วยแฟล็กร่วมกับ Ub ที่ติดแท็ก HA แล้วทำการรักษาเซลล์ที่มีหรือไม่มี TFs การทดสอบการแพร่หลายเพิ่มเติมแนะนำว่าการเสริม TFs แทบจะไม่ส่งผลกระทบต่อระดับของ Imd ที่แพร่หลายในเซลล์ที่เพาะเลี้ยง (รูปที่ S4B และ S4C) เพื่อตรวจสอบความสัมพันธ์ระหว่าง TFs และ Imd ubiquitination ในร่างกาย เราใช้แมลงวันดัดแปลงพันธุกรรม P {NP1-Gal4}/P{Uasp-Myc-Imd};P{Tub-Gal80*} (เรียกว่า NP1* s > Myc-Imd) ซึ่งโปรตีน Imd ที่แท็กด้วย Myc ถูกแสดงออกอย่างมากในเซลล์ลำไส้ (รูปที่ S4D) การทดลองการแพร่หลายของเราแสดงให้เห็นว่าการเสริมอาหารด้วย TFs สามารถจ่ายได้สำหรับการปรับการแพร่หลายของ Imd ในเนื้อเยื่อลำไส้ (รูปที่ S4D และ S4E) เมื่อนำมารวมกัน ผลลัพธ์ของเราระบุว่า TFs ควบคุมสัญญาณ Drosophila Imd ในเชิงลบ โดยไม่ส่งผลกระทบต่อรูปแบบการแพร่หลายของ Imd

Theaflavins ป้องกันการประกอบคอนเดนเสท Imd

การศึกษาเมื่อเร็ว ๆ นี้ชี้ให้เห็นว่าการรวมตัวของ Imd เป็นสิ่งจำเป็นสำหรับการกระตุ้นยีนดาวน์สตรีมในเส้นทาง Imd (Kleino et al.,2017) จากนั้นเราจึงพยายามตรวจสอบว่า TFs ควบคุมกระบวนการของ .หรือไม่

รูปที่ 5. ต่อ

(F และ G) เพศเมีย w18 (เรียกว่า imd plus / plus ), imd' heterozygous และ homozygous mutants (เรียกว่า imd plus /- และ imd-/- ตามลำดับ) ได้รับการเลี้ยงแบบมาตรฐาน (เรียกว่า Basal) หรือการเสริมอาหารที่มี 2.5 มก./มล.(ที่อ้างอิงเป็น TFs) จากนั้นจึงถูกวิเคราะห์และแสดงเส้นโค้งการอยู่รอดของการสอบวิเคราะห์อายุขัย (F) และอายุขัยเฉลี่ย (G)

ในและ F การทดสอบ Log Rank ใช้สำหรับการวิเคราะห์ทางสถิติ ใน พ.ศ. และ t-test ของนักเรียนแบบสองด้านถูกใช้สำหรับการวิเคราะห์ทางสถิติ และข้อมูลเป็น sh เป็นค่าเฉลี่ย ± SEM NS, ไม่สำคัญ, *p<0.05, **p="" <="" 0.01,=""><0.001. see="" also="" figure="">

การสร้างมวลรวม Imd ขั้นแรก เราทำให้โปรตีน Imd ที่ติดแท็ก Myc บริสุทธิ์จากเซลล์ S2 ที่เพาะเลี้ยง และบ่มโปรตีนที่มีความเข้มข้นของ TF ต่างกัน (รูปที่ 4B) ที่น่าสนใจ เราพบว่า TFs ขัดขวางการรวมตัวของ Imd ได้อย่างชัดเจน (ลดลง 81.7 เปอร์เซ็นต์ -89.7 เปอร์เซ็นต์ รูปที่ 4B และ 4C) ตามที่แนะนำโดยการทดสอบแบบกึ่งเดเนอเรชันของผงซักฟอก agarose gel electrophoresis (SDD-AGE) เพื่อยืนยันการค้นพบนี้ เราทำการทดสอบการจับไธโอฟลาวิน-T เพิ่มเติมและได้ผลลัพธ์ที่สอดคล้องกัน (รูปที่ 4D) สุดท้าย เราเลี้ยง NP1ts > Myc-Imd แปลงพันธุ์แมลงวันที่ได้รับอาหารเสริมที่มีหรือไม่มี TFs และเก็บตัวอย่างลำไส้จากผู้ใหญ่สูงอายุ การทดลอง SDD-AGE ชี้ให้เห็นว่าการรวมตัวของ Imd ถูกควบคุมโดย TFs ในเซลล์ลำไส้อย่างมาก (ลดลง 16.7 เปอร์เซ็นต์ -22 เปอร์เซ็นต์ , รูปที่ 4E และ 4F)

ในการพิจารณาว่า TF มีส่วนช่วยในการควบคุมการประกอบ Imd condensate อย่างไร เราจึงทดสอบ TFLCanal-ysis และพบว่า TFLCanal-ysis ส่วนใหญ่ประกอบด้วยโมโนเมอร์สี่ชนิด (รูปที่ 4G) ได้แก่ theaflavin (TF1), theaflavin 3-O-gallate ( TF2a), theaflavin 3'-O-gallate (TF2b) และ theaflavin 3,3'-di-O-gallate (TF3) ซึ่งสอดคล้องกับรายงานก่อนหน้านี้ (Li et al.,2013; Takemoto and Takemoto,2018) . จากนั้น เราบ่มสารเคมีแต่ละชนิดด้วย Imdprotein บริสุทธิ์ และทำการทดลอง SDD-AGE ดังที่แสดงไว้ในรูปที่ 4H และ 4l การบำบัดของ TFmonomers เหล่านี้ทั้งหมดทำให้เกิดการลดลงอย่างชัดเจน (โดย 59.5 เปอร์เซ็นต์ ,60.9 เปอร์เซ็นต์ ,58.4 เปอร์เซ็นต์ .58.2 เปอร์เซ็นต์ . และ 55.8 เปอร์เซ็นต์สำหรับ TFs, TF1, TF2a, TF2b และ TF3 ตามลำดับ) ใน ระดับรวม Imd โดยรวมแล้ว ผลลัพธ์ของเราชี้ให้เห็นว่า TFs ควบคุมเส้นทางการส่งสัญญาณ Drosophila Imd ในเชิงลบ โดยอาจเกิดจากการควบคุมพฤติกรรมของ Imd condensates

Theaflavins ยืดอายุ Drosophila ในลักษณะที่ขึ้นกับ Imd

To examine whether TFs prolong Drosophila lifespan depending on their regulatory role in Imd, we specifically knocked down Imd in gut tissues using the transgenic flies P{NP1-gal4)PITub-gal80*}/P{Uasp-imd-IR(KK)} (referred to as Imd RNAi). As shown in Figures 5A and 5B, dietary supplementation of TFs extended the lifespan of controls (elevation of nearly 7.2 days in the mean lifespan), whereas prevention of Imd expression in guts apparently reversed the lifespan extension caused by TFs. Consistent results were obtained when we utilized male Imd RNAi and control flies to perform lifespan assays (Figures S5A and S5B). Further qRT-PCR assays showed that the mRNA expression levels of AMP genes at ages of 10 days, 30 days, 40 days, and 50 days, including diptericin, attacin, and cecropin A1.hardly changed in the gut tissues of Imd RNAi flies(Figures 5C-5E), whereas additional TFs caused reductions of 31%-72.3% in mRNA abundances of these genes in samples from control groups. To confirm these results from Imd RNAi flies, we first performed lifespan assays using w18(control, referred to as imd+/+), imd' heterozygous (referred to as imd+/-), and homozygous(referred as imd-/-)mutant flies. We found that TFs addition extended lifespan and increased mean life longevity of imd+/-flies (elevation of nearly 6.2 days, Figures 5F and 5G). However, this lifespan extension effect by TFs was almost abolished in imd-/-flies (Figures 5F and 5G). Next, we performed lifespan assays utilizing Relish RNAi(NP1's>Relish RNAi and control(NP1ts>บวก ) แมลงวัน เพราะ Relish เป็นปัจจัยสำคัญในการถอดรหัสซึ่งรับผิดชอบการแสดงออกของยีน Imd-downstream AMP (Myllymaki et al.,2014) ดังแสดงใน Fiqures S5C และ S5D การเพิ่มอาหารของ TFs ช่วยยืดอายุของแมลงวันควบคุมอย่างเห็นได้ชัด และการขยายอายุขัยนี้ได้รับการป้องกันอย่างมีนัยสำคัญในแมลงวัน Relish RNAi โดยรวมแล้ว ข้อมูลของเราระบุว่าการเสริมอาหารของ TFs ส่งผลในเชิงบวกต่ออายุขัยของแมลงหวี่ซึ่งน่าจะขึ้นอยู่กับสัญญาณ Imd ในลำไส้

เพื่อดูว่าการยืดอายุโดย TF ยังคงเกิดขึ้นในพื้นหลังแบบ axenic หรือไม่ เราทำการทดสอบอายุการใช้งานโดยใช้ตัวเมีย w1118 ภายใต้สภาวะ axenic ดังที่แสดงไว้ในรูปที่ S5E และ S5F การเพิ่มความเข้มข้นที่แตกต่างกันของ TFs (1 มก./มล. และ 2.5 มก./มล.) แทบจะไม่ส่งผลกระทบต่ออัตราส่วนของการตายและอายุขัยเฉลี่ยในผู้ใหญ่ ญ 18 เนื่องจากสภาพการเลี้ยงแบบ axenic สามารถป้องกันจุลินทรีย์จำนวนมากได้ ดังนั้นการจำกัดสัญญาณ Imd ในการตัด (Clarke al.,2015) ข้อมูลของเราแนะนำ TFs ยืดอายุ Drosophila อาจโดยการปรับสัญญาณภูมิคุ้มกันโดยกำเนิดที่ควบคุมโดยจุลินทรีย์ในลำไส้

รูปที่ 6. Theaflavins บรรเทาอาการลำไส้ใหญ่อักเสบจาก DSS ในหนู CD-1

(A) การบำบัดด้วย TFs ไม่ส่งผลกระทบต่อการใช้น้ำในกลุ่มต่างๆ ของหนู CD-1

(BD) การบริหารให้ความเข้มข้นต่างๆ ของ TFs (1 มก./มล.,2.5 มก./มล. และ5 มก./มล. ตามลำดับ) โดยวิธี Gavage ช่วยลดการหดตัวของลำไส้ใหญ่และการขยายตัวของม้ามที่เกิดจาก DSS ในหนู CD-1 รูปภาพที่แสดงแทน (B) และการวิเคราะห์ทางสถิติของทวิภาค (C) และม้าม (D) ถูกแสดง (E) การบริหารให้ความเข้มข้นต่างๆ ของ TFs (1 มก./มล., 2.5 มก./มล. และ 5 มก./มล. ตามลำดับ) ป้องกันการรั่วไหลของลำไส้ที่เกิดจาก DSS ในหนู CD-1 (F และ G) โคลอนถูกรวบรวมจากกลุ่มของหนูเมาส์ที่ระบุ RNA ทั้งหมดถูกสกัดและอยู่ภายใต้การสอบวิเคราะห์ qRT-PCR เพื่อตรวจหาระดับการแสดงออกของ mRNA ของ TNFa(F) และ IL-6 (G)

(HL) โคลอนจากกลุ่มของหนูเมาส์หลายกลุ่มถูกรวบรวมตามยาวและอยู่ภายใต้การสอบวิเคราะห์การย้อมสี HE ตัวอย่างถูกตรวจสอบโดยกล้องจุลทรรศน์ และได้รับภาพตัวแทนของตัวอย่างที่ระบุ （HL） และแสดง แท่งมาตราส่วน 40 μm. (MQ') ภาพ SEM ที่แสดงไมโครทริโคมของโคลอนจากตัวอย่างที่ระบุต่างกัน แท่งมาตราส่วน 50 um (MQ) และ 4 um (M'-Q')

ใน CG ข้อมูลจะถูกวิเคราะห์โดยการทดสอบของนักเรียนแบบสองด้านและแสดงเป็นค่าเฉลี่ย ± SEM.NS ไม่สำคัญ *p<><><0.001. see="" also="" figure="">

Theaflavins บรรเทาอาการลำไส้ใหญ่อักเสบจาก DSS ในหนู CD-1

เพื่อตรวจสอบเพิ่มเติมเกี่ยวกับบทบาทที่เป็นไปได้ของ TF ในการรักษาสภาวะสมดุลของลำไส้ในสัตว์เลี้ยงลูกด้วยนม หนู CD-1 ถูกใช้เพื่อชักนำให้เกิดอาการลำไส้ใหญ่บวมโดยเดกซ์แทรน ซัลเฟต โซเดียม (DSS) หนูเมาส์ถูกบริหารให้ความเข้มข้นที่แตกต่างกันของ TFs (1 กรัม/ลิตร, 2.5 กรัม/ลิตร หรือ 5 ลิตร/ลิตร) หรือน้ำเป็นตัวควบคุมเป็นเวลาสี่สัปดาห์ ตามด้วยการบำบัดด้วย DSS 2 เปอร์เซ็นต์ในน้ำดื่มเป็นเวลา 7 วัน เพื่อดูว่า TFs ส่งผลต่อปริมาณการดื่ม DSSa ข้ามกลุ่มหนูต่างๆ หรือไม่ เราจึงเฝ้าติดตามการดื่มของหนูทุกวัน ตามที่แสดงใน Fiqure6A การบำบัดด้วย TFs สามารถจ่ายได้เพื่อส่งผลกระทบต่อการบริโภคเครื่องดื่มในหนูที่มีอาการลำไส้ใหญ่บวมที่เหนี่ยวนำโดย DSS หนูที่ได้รับการรักษาด้วย DSS แสดงอาการลำไส้ใหญ่บวมที่มีอาการท้องร่วงและ/หรือภาวะโลหิตจาง ซึ่งป้องกันได้โดยการรักษาด้วย TFs ที่ขึ้นกับขนาดยา (รูปที่ S6A-S6E)cistanche ออสเตรเลียนอกจากนี้ การแทรกแซงด้วย TFs ยังช่วยให้ความยาวลำไส้ใหญ่ลดลงที่เกิดจาก DSS และทำให้การขยายตัวของม้ามดีขึ้น (รูปที่ 6B-6D)

จากนั้นเราใช้เดกซ์แทรน-4000-FITC (FITC-DX) เพื่อตรวจสอบการทำงานของสิ่งกีดขวางในลำไส้ของหนูเหล่านี้ ดังที่แสดงไว้ในรูปที่ 6E หนูเมาส์จากกลุ่มที่ได้รับการบำบัดด้วย DSS แสดงความเข้มข้นสูงของ FITC-DX ในตัวอย่างเลือด ซึ่งบ่งชี้ว่าลำไส้รั่วในสัตว์เหล่านี้ อย่างไรก็ตาม การแทรกแซงด้วย TFs ได้ขัดขวางการขนส่งของ FITC-DX จากอวัยวะย่อยอาหารเข้าสู่ ระบบไหลเวียนโลหิต (ลดลง 56.1 เปอร์เซ็นต์ -77.5 เปอร์เซ็นต์ , รูปที่ 6E) โดยเฉพาะอย่างยิ่ง การบริหารให้ TFs ไม่ได้เปลี่ยนการซึมผ่านของลำไส้ของหนูเมาส์ภายใต้สภาวะปกติ (รูปที่ S6F) เนื่องจากการอักเสบมีบทบาทสำคัญในการพัฒนาแบบจำลองลำไส้ใหญ่อักเสบของหนู เราจึงทำการทดลอง qRT-PCR เพิ่มเติม ซึ่งแสดงให้เห็นว่าการบำบัดด้วย TFs ปรับลดการแสดงออกของ IL-6 และ TNF ในลำไส้ของหนูเมาส์ที่ได้รับการรักษาด้วย DSS (รูปที่ 6F และ 6G) อย่างมีนัยสำคัญ

เพื่อวิเคราะห์การเปลี่ยนแปลงทางพยาธิวิทยาในลำไส้ใหญ่เพิ่มเติม เราทำการทดสอบการย้อมสีฮีมาทอกซิลิน-อีโอซิน (HE) ดังที่แสดงไว้ในรูปที่ 6H-6L และ S6G-S6J ความเสียหายของเยื่อบุผิวที่รุนแรงที่เหนี่ยวนำโดย DSS ถูกทำให้ดีขึ้นอย่างเห็นได้ชัดโดยการบำบัดด้วย TFs ในลักษณะที่ขึ้นกับขนาดยา การสแกนภาพด้วยกล้องจุลทรรศน์อิเล็กตรอนแบบส่องกราดของตัวอย่างลำไส้เหล่านี้ให้ผลลัพธ์ที่สม่ำเสมอเพิ่มเติม (รูปที่ 6M-6Q' และ S6K-S6N') เมื่อนำมารวมกัน การค้นพบของเราระบุว่า TFs มีบทบาทสำคัญในการปกป้องการทำงานของสิ่งกีดขวางในลำไส้ทั้งในแมลงและสัตว์เลี้ยงลูกด้วยนม

อภิปรายผล

ในการศึกษานี้ เราตรวจสอบการทำงานทางสรีรวิทยาของ TFs ในการปรับสภาวะสมดุลของลำไส้และอายุขัย และกลไกระดับโมเลกุลที่อยู่เบื้องล่าง เราแสดงให้เห็นว่าการเสริมอาหารด้วย TFs มีส่วนช่วยในการป้องกัน dysbiosis ที่เริ่มมีอายุของจุลินทรีย์ในลำไส้และความล่าช้าของความผิดปกติของเยื่อบุผิวในลำไส้ซึ่งจะช่วยยืดอายุของแมลงหวี่ การศึกษากลไกในหลอดทดลองและในร่างกายของเราเปิดเผยว่า TF อาจมีบทบาทเชิงลบในการควบคุมเส้นทางการส่งสัญญาณ Imd โดยการปิดกั้นการรวมตัวของ Imd นอกจากนี้ เราพบว่าอาการลำไส้ใหญ่บวมที่เกิดจาก DSS สามารถบรรเทาได้อย่างมีประสิทธิภาพโดยการเสริม TFs ในหนู CD-1 ผลลัพธ์ของเราสนับสนุนแนวคิดที่ว่า TFs มีส่วนทำให้เกิดสภาวะสมดุลในลำไส้ทั้งในสัตว์ไม่มีกระดูกสันหลังและสัตว์มีกระดูกสันหลัง

อาหารเสริมที่มี theaflavins ช่วยยืดอายุของแมลงหวี่

การบริโภคชาเป็นที่นิยมทั่วโลกและเป็นอันดับสองรองจากการบริโภคน้ำเท่านั้น (Rothenberg and Zhang, 2019) การศึกษาจำนวนมากมุ่งเน้นไปที่การทำงานทางสรีรวิทยาบ่อยครั้งผ่านทั้งแนวทางการทดลองและทางคลินิก (Cameron et al.,2008; Niu et al.,2013; Peng et al.,2009; Rothenberg and Zhang.2019; Spindleret al.,2013; Takemoto และ Takemoto,2018; Unno et al.,2020;Zhou et al.,2020 ได้รับการแสดงให้เห็นอย่างกว้างขวางว่าชามีประโยชน์ต่อสุขภาพโดยการลดระดับไขมันและผ่านการต่อต้านโรคอ้วน และสารประกอบที่ทำหน้าที่หลักในชาคือคาเทชินโดยเฉพาะ epigallocatechin gallate (EGCG)(Abbas and Wink,2009; Modernelli et al.,2015; Niu et al.,2013; Wagner et al.,2015; Xiong et al.,2018) การศึกษาก่อนหน้านี้ยังระบุด้วยว่าชาเขียวและ ชาดำสามารถเพิ่มอายุขัยและอายุขัยของแมลงวันผลไม้ (Site al.,2011; Wagner et al.,2015), เวิร์ม (Fei et al.,2017; Xiong et al.,2018) และหนู (Imran et al. .,2018; Niu etal.2013) และกลไกการกำกับดูแลหลักคือการป้องกันความเครียดจากปฏิกิริยาออกซิเดชันอย่างมีประสิทธิภาพโดย EGCG ผ่านการปรับสัญญาณ ROSsignalsประโยชน์ cistanche,อย่างไรก็ตาม ไม่ว่า TFs ซึ่งเป็นสารประกอบ "สีทอง" ที่มีลักษณะเฉพาะในชาดำจะมีบทบาทในการควบคุมการชราภาพและอายุขัยหรือไม่ก็ตาม การศึกษานี้ให้หลักฐานที่น่าสนใจซึ่งบ่งชี้ว่าการแทรกแซงของ TFs สามารถจ่ายได้สำหรับผลกระทบต่อการรับประทานอาหาร และการดูดซึม TFs ในระยะยาวผ่านทางอาหารจะช่วยยืดอายุขัยของแมลงวันผลไม้ทั้งตัวผู้และตัวเมียได้อย่างมีนัยสำคัญ การค้นพบนี้เป็นแนวทางสำหรับการศึกษาเพิ่มเติมเกี่ยวกับหน้าที่ของ TFs ในการมีอายุยืนยาวของสัตว์เลี้ยงลูกด้วยนม

Theaflavins ปรับปรุง microbiota dysbiosis ที่เริ่มมีอาการตามอายุและส่งเสริมสภาวะสมดุลในลำไส้ ความไม่สมดุลแบบก้าวหน้าของสภาวะสมดุลที่เพิ่มขึ้นและความสามารถในการสร้างใหม่เป็นจุดเด่นของความชราและโรคที่เริ่มมีอาการตามวัย (Clark et al.,2015; Heintz and Mair, 2014; Maynard and Weinkove, 2018; Rera et al. 2012). การอักเสบเรื้อรังเกี่ยวข้องกับการสูญเสียสภาวะสมดุลและเพิ่มอัตราการเกิดมะเร็งในสิ่งมีชีวิตที่มีอายุมากขึ้น (Bartke et al.,2019; Kapahi et al., 2017; Xiao et al.,2020) สิ่งนี้มีความสำคัญอย่างยิ่งในเยื่อบุผิวกั้น เช่น เยื่อบุผิวในลำไส้ (Guo et al.,2014; Maynard and Weinkove,2018) ด้วยแบบจำลองสำหรับการพัฒนา dysplasia ที่เกี่ยวข้องกับอายุในลำไส้ที่มีอายุมากขึ้น เราแสดงให้เห็นว่าการปรับปรุงปฏิสัมพันธ์ระหว่างเจ้าบ้านและส่วนรวมในเยื่อบุผิวที่เสื่อมสภาพตามวัยสามารถส่งเสริมสุขภาพและอายุขัยได้ เราใช้วิธีการที่ไม่รุกล้ำหลายวิธีในการทดสอบการทำงานของลำไส้และการเปลี่ยนแปลงของจุลินทรีย์ในช่วงอายุมากขึ้น ประการแรก การทดสอบ Smurf บ่งชี้ถึงบทบาทเชิงบวกของ TFs ในการควบคุมความผิดปกติของสิ่งกีดขวางเยื่อบุผิวระหว่างอายุ จากนั้น การทดสอบการสร้างภูมิคุ้มกันโดยใช้แมลงวันแปลงพันธุ์หลายตัวเปิดเผยว่า TFs ชะลอการเพิ่มจำนวนที่มากเกินไปของ ISC และการหมุนเวียนของเซลล์ที่แยกจากกัน ในที่สุด การจัดลำดับของไมโครไบโอมแนะนำว่า TFs ปรับลดการขยายตัวที่เริ่มมีอาการตามอายุของจุลินทรีย์ในลำไส้ ผลลัพธ์เหล่านี้ชี้ให้เห็นอย่างชัดเจนว่า TFs มีบทบาทสำคัญในการชะลอกระบวนการชราของโฮสต์โดยการรักษาสภาวะสมดุลของลำไส้

Theaflavins บรรเทาการตอบสนองของภูมิคุ้มกันที่มากเกินไปในลำไส้โดยการควบคุมการส่งสัญญาณ Imd ในทางลบ

ได้รับการแนะนำว่าต้องรักษาสมดุลที่ละเอียดอ่อนระหว่างการทำงานของภูมิคุ้มกันในลำไส้และจุลินทรีย์เพื่อให้แน่ใจว่าสภาวะสมดุลในระยะยาวของเยื่อบุผิวกั้น (Guo et al.,2014; Maynard and Weinkove, 2018) การศึกษาก่อนหน้านี้ยังแสดงให้เห็นว่าการอักเสบเรื้อรังมากเกินไปในลำไส้มีความเกี่ยวข้องกับความผิดปกติที่เกี่ยวข้องกับอายุในเยื่อบุผิวที่เป็นอุปสรรคและเป็นจุดเด่นของความชรา (Clark et al.,2015; Guo et al., 2014; Ji et al.,2019) . ดังนั้นการรักษาจำนวนประชากรที่มีสุขภาพดีโดยการรักษาสภาวะสมดุลภูมิคุ้มกันโดยธรรมชาติในเยื่อบุผิวดังกล่าวเป็นวิธีที่มีแนวโน้มในการส่งเสริมสุขภาพและอายุยืน (Bonfini et al.,2016; Broderick,2016; Clark et al.,2015) เพื่อสำรวจกลไกระดับโมเลกุลโดย ซึ่ง TFs ชะลอความชรา เราทำการวิเคราะห์ RNA-seq โดยใช้ลำไส้ที่ผ่าโดยมีหรือไม่มีการบำบัดด้วย TFs ข้อมูลของเราชี้ให้เห็นว่ากลุ่มยีนที่แสดงออกอย่างมากในลำไส้ของแมลงวันผลไม้กลุ่มควบคุม เมื่อเทียบกับกลุ่มของยีนที่ได้รับการรักษาด้วย TFs นั้นอุดมไปด้วยยีนที่จำแนกเป็นยีน "การตอบสนองทางภูมิคุ้มกัน" การวิเคราะห์ทางชีวสารสนเทศเพิ่มเติมและการทดสอบ get-PCR เปิดเผยว่าการแสดงออกของยีน AMP ที่เกี่ยวข้องกับ Imd ถูกยับยั้งอย่างมากโดยการเพิ่มอาหารของ TFs ผลลัพธ์จากการทดลองของเมาส์ CD-1 โดยใช้ DSS เพื่อกระตุ้นการตอบสนองของภูมิคุ้มกันที่ผิดปกติในลำไส้ได้ยืนยันแนวคิดที่ว่า TFs ทำหน้าที่เป็นตัวป้องกันการอักเสบในลำไส้

Theaflavins ยับยั้งสัญญาณโดยกำหนดชุด amyloid ของ Imd

TFs ควบคุมเส้นทางการส่งสัญญาณ Imd ในเชิงลบอย่างไร จากผลการวิเคราะห์การถอดรหัส เราพบว่า TF สามารถจ่ายได้สำหรับการควบคุมการถอดรหัสของปัจจัยสำคัญในเส้นทางการส่งสัญญาณ Imd สิ่งที่น่าสนใจ เราสังเกตความสัมพันธ์ที่มีผลผูกพันที่ชัดเจนของ TF กับโปรตีน Imd บริสุทธิ์โดยการทดสอบ SPR ซึ่งเสนอแนะความน่าจะเป็นที่ TF อาจมีบทบาทในการควบคุมพฤติกรรมโปรตีน Imd หรือกระบวนการดัดแปลงหลังการแปล การศึกษาก่อนหน้านี้ได้เน้นถึงบทบาทสำคัญของการแพร่หลายในการถ่ายโอนสัญญาณ Imd (Kleino และ Silverman,2014; Myllymaki et al.,2014) และการป้องกันการแพร่หลายของ Imd ส่งผลให้ปิดการส่งสัญญาณ Imd อย่างลึกซึ้ง (Myllymaki et al.,2014; Thevenon และคณะ, 2552). อย่างไรก็ตาม การทดสอบ ในหลอดทดลอง และ ในร่างกายของเรา แสดงให้เห็นว่า TF แทบจะไม่ส่งผลกระทบต่อรูปแบบการแพร่หลายของ Imd การศึกษาเมื่อเร็ว ๆ นี้แสดงให้เห็นว่าการก่อตัวของอะไมลอยด์เป็นสิ่งจำเป็นสำหรับการกระตุ้นเส้นทาง Drosophila Imd เมื่อรับรู้ถึงแบคทีเรีย peptidoglycans (Kleino et al.,2017) ที่น่าสนใจ การทดสอบ SDD-AGE และ ThTbinding ของเราแนะนำว่า TFs ป้องกันการรวมตัวกันของ Imd การป้องกันการรวมตัวของ Imd โดยการล้มลงหรือการกลายพันธุ์ของ Imd ในเซลล์ลำไส้ทำให้เกิดผลดีของ TF ในการยืดอายุ เพื่อยืนยันการค้นพบของเราเพิ่มเติม เป็นเรื่องที่น่าสนใจที่จะตรวจสอบว่า TFs ไม่ทำงานอีกต่อไปเพื่อยืดอายุในใบปลิวผลไม้เมื่อ RHIM เข้ารหัสลับที่อนุรักษ์ไว้ (cRHIM กรดอะมิโนจาก 118 ถึง 121 ชั่วโมง) ของ Imd ถูกทำลายโดยเฉพาะ ขึ้นอยู่กับการค้นพบว่าอาชญากรรมใน Imd นั้นจำเป็นสำหรับการรวมตัวและการก่อตัวของอะไมลอยด์ (Kleino et al.,2017) อย่างไรก็ตาม การศึกษาของเราชี้ให้เห็นถึงบทบาทสำคัญของ TFs ในการควบคุมสภาวะสมดุลของลำไส้และกระบวนการชราภาพ โดยอาจผ่านการปรับการประสานกันของ Imd การศึกษาในอนาคตควรมุ่งเน้นไปที่การสำรวจว่าสารตกค้างหรือบริเวณใดของ Imd ที่ถูกผูกมัดโดย TF และผลการจับนี้ส่งผลให้เกิดการป้องกันการควบแน่นของ Imd อย่างไร นอกจากนี้ การค้นพบของเราในระบบของสัตว์เลี้ยงลูกด้วยนมบ่งชี้ว่า TFs สามารถป้องกันลำไส้ใหญ่จากการอักเสบที่เกิดจาก DSS ของสารเคมีที่เป็นพิษจากภายนอกได้อย่างมีประสิทธิภาพ ซึ่งชี้ให้เห็นถึงบทบาทการกำกับดูแลของ TFs ในการรักษาสภาวะสมดุลในลำไส้ ควรตรวจสอบว่า TFs มีบทบาทในการควบคุมการประกอบโปรตีนในเนื้อเยื่อของสัตว์เลี้ยงลูกด้วยนมหรือไม่

บทความนี้คัดลอกมาจาก zhongwenxie@ahau.edu.cn