ฤทธิ์ต้านเนื้องอกและฤทธิ์ต้านการอักเสบของโอลิโกแซ็กคาไรด์จากสารสกัด Cistanche Deserticola ต่อการบาดเจ็บของไขสันหลัง

ติดต่อ: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 อีเมล:audrey.hu@wecistanche.com

หง จาง และคณะ

เชิงนามธรรม

ในการศึกษานี้ผลทางเภสัชวิทยาของโอลิโกแซ็กคาไรด์จากCistancheทะเลทรายสารสกัดบนการอักเสบความเครียดออกซิเดชันและการตายของเซลล์ในหนูเผือกเพศผู้ที่มีอาการบาดเจ็บที่ไขสันหลังได้รับการศึกษา เปอร์ออกซิเดชันของไขมัน, GSH, catalase, superoxide dismutase, acetylcholine esterase, GPx, ROS และกรดไนตริกมีการเปลี่ยนแปลงอย่างมีนัยสำคัญในหนูที่มีอาการบาดเจ็บที่ไขสันหลัง ระดับการแสดงออกของ mRNA ของ IL-6, TNF- , cyclooxygenase-2, iNOS,p53, caspase-3, Bax และ pro-NGF ลดลง N20 เปอร์เซ็นต์หลังจากการเสริมสารสกัด ระดับการแสดงออกของโปรตีนของ caspase-3 และ pro-NGF ก็ลดลง N20 เปอร์เซ็นต์เช่นกัน จำนวนเซลล์บวก p53 คือ 1, 79, 54, 33 และ 19 ในกลุ่ม GI–GV ตามลำดับ และจำนวนเซลล์บวกของแคสเปส-3 ที่สอดคล้องกันคือ 2, 87, 51,23 และ 14 จากผลลัพท์ปัจจุบัน การใช้โอลิโกแซ็กคาไรด์จากCistancheทะเลทรายสารสกัดมีประสิทธิภาพในการต่อต้านการอักเสบความเครียดจากปฏิกิริยาออกซิเดชัน และการตายของเซลล์ในหนูเผือกตัวผู้ที่ได้รับบาดเจ็บที่ไขสันหลัง

คำสำคัญ:Cistanche deserticola, การอักเสบ ความเครียดออกซิเดชัน, ApoptosisRats

1. บทนำ

อาการบาดเจ็บที่ไขสันหลังเกี่ยวข้องกับความเสียหายต่อไขสันหลังซึ่งนำไปสู่การเปลี่ยนแปลงการทำงานโดยสูญเสียความรู้สึก กล้ามเนื้อ และการทำงานอัตโนมัติ [1] นอกจากนี้ อาจเกิดอะพอพโทซิสในเซลล์โอลิโกเดนโดรไซต์และเซลล์ประสาท ซึ่งนำไปสู่ความผิดปกติของไขสันหลังเนื่องจากขาดไมอีลิเนชันและการเสื่อมสภาพของแอกซอน [2,3] อาการบาดเจ็บที่ไขสันหลังทำให้เกิดความเครียดจากปฏิกิริยาออกซิเดชันและการอักเสบหลังจากเริ่มมีอะพอพโทซิสในโอลิโกเดนโดรไซต์และเซลล์ประสาท [2,4] ชนิดของออกซิเจนที่เกิดปฏิกิริยา (ROS) และไซโตไคน์ที่ก่อให้เกิดการอักเสบจะถูกปล่อยออกมาในระหว่างการเสื่อมสภาพของระบบประสาทและ microglia มีความสำคัญในระหว่างกระบวนการความเสื่อมของระบบประสาทและการอักเสบ [5–7] Interleukins (ILs) เป็น cytokines ที่สำคัญที่เกี่ยวข้องกับกระบวนการทางภูมิคุ้มกันที่ไม่ต่อเนื่อง [8] Yune et al., [9] รายงานว่า pro nerve growth factor (pro-NGF) ที่ปล่อยออกมาจาก microglia นำไปสู่การตายของเซลล์ apoptotic ดังนั้น สารบำบัดที่แปลกใหม่และมีศักยภาพในการต่อต้านความเครียดจากปฏิกิริยาออกซิเดชันและการอักเสบต้องการ.

พืชCistancheทะเลทรายเป็นที่รู้จักกันทั่วไปว่าเป็นไม้กวาดทะเลทรายและเป็นสมาชิกโฮโลปาราซิติกของตระกูล Orobanchaceae [10]Cistanche ทะเลทรายขาดคลอโรฟิลล์และได้รับน้ำและสารอาหารในรูปแบบกาฝากจากแซ็กซอลขาว (Haloxylon persicum) และแซ็กซอลดำ (Haloxylon ammodendron) ดิCistancheทะเลทรายไม้ยืนต้นที่รู้จักกันในชื่อ Rou Cong Rong สามารถเติบโตได้ขนาด 160 ซม. และมีดอกสีเหลือง มีมากในจีนและมองโกเลีย [11] และการแพทย์แผนจีนเป็นแหล่งข้อมูลที่ดีเยี่ยมสำหรับการรักษาโรคต่างๆ นอกจากนี้ยังทำหน้าที่เป็นสมุนไพรหลักในการเติมพลังให้หยางและบำรุงไต [11] Koo และคณะ [12] รายงานว่าไกลโคไซด์ของCistancheทะเลทรายทำหน้าที่เป็นสารออกฤทธิ์ในระบบประสาทส่วนกลาง (CNS) นักวิจัยหลายคนได้รายงานคุณสมบัติในการต้าน apoptotic ต้านการอักเสบ และต้านอนุมูลอิสระของCistancheทะเลทราย[13,14]. สารต้านอนุมูลอิสระจากอาหารและโมเลกุลต้านการอักเสบสามารถทำหน้าที่เป็นสารป้องกันทางเคมีกับโรคเรื้อรัง [15] จากประโยชน์การรักษาที่กล่าวข้างต้น ประสิทธิภาพการรักษาของโอลิโกแซ็กคาไรด์จากCistancheทะเลทรายสกัดต่อต้านการอักเสบ, ความเครียดจากปฏิกิริยาออกซิเดชัน และการตายของเซลล์ได้รับการศึกษาในการศึกษานี้โดยใช้แบบจำลองหนูเผือกเพศผู้ที่ได้รับบาดเจ็บที่ไขสันหลัง

2. วัสดุและวิธีการ

2.1. วัสดุ

ไพรเมอร์ของtumor necrosis factor-alpha (TNF- ), IL-6, cyclooxygenase, inducible nitric oxide synthase (iNOS), p53, Bax, caspase-3, BCL-2,pro-NGF และ glyceraldehyde 3-phosphate dehydrogenase (GAPDH) ซื้อมาจาก Thermo Fisher Scientific (ปักกิ่ง ประเทศจีน) แอนติบอดีปฐมภูมิสำหรับแคสเพส-3 (AV00021), p53 (P5813-100UL), โมโนโคลนัลต้านต้านแพะ/แกะ IgG–peroxidase (A9452) และ IgG ฟลูออเรสซีนไอโซไทโอไซยาเนตต้านหนู (FITC; F{{15} }ML) ซื้อมาจาก Sigma-Aldrich China, Inc. (Shanghai, PR China)

2.2. หนู

หนูสายพันธุ์ Wistar เผือกเพศผู้ (180–220 ก.) ถูกซื้อมาจากโรงเลี้ยงสัตว์ของโรงพยาบาลเวสต์ไชน่า มหาวิทยาลัยเสฉวน ประเทศจีน หนูได้รับอาหารและน้ำโดยอิสระ แสง 12-ชม.: 12-ชม. darkcycle ถูกคงไว้ในกรงหนูโพลีโพรพีลีนภายใต้ความชื้นสัมพัทธ์ การทดลองในหนูทั้งหมดได้รับการอนุมัติจากคณะกรรมการจริยธรรมของโรงพยาบาลเวสต์ไชน่า มหาวิทยาลัยเสฉวน ประเทศจีน ปฏิบัติตามแนวทางสากล ระดับชาติ และระดับสถาบันที่เกี่ยวข้องทั้งหมดสำหรับการดูแลและการใช้สัตว์

2.3. การชักนำให้เกิดการบาดเจ็บไขสันหลัง

อาการบาดเจ็บที่ไขสันหลังเกิดจากแผลผ่าตัดตามยาวหลังจากได้รับสารฮาโลเทน (1.5 เปอร์เซ็นต์) ขั้นตอนการผ่าตัดทั้งหมดดำเนินการที่อุณหภูมิห้อง การทำกรีดจากกระดูกสันหลังส่วนล่างถึงกลางทรวงอกที่ด้านหลังของสัตว์ วางน้ำหนัก A20–25 กรัมลงบนพื้นผิว Th12 ที่เปิดเผยเป็นเวลา 30 นาทีเพื่อกระตุ้นให้เกิดการบาดเจ็บ ผิวหนังและกล้ามเนื้อถูกเย็บหลังจากนำน้ำหนักออกจากพื้นผิว Th12 และทำให้เกิดอัมพาตที่ทำซ้ำได้ชั่วคราวที่ขาส่วนล่าง [16,17] หนูถูกเลี้ยงไว้ 24 ร้อยสภาวะที่เหมาะสมและการควบคุมทางสัตวแพทย์

2.4. การเตรียมสารสกัด Cistanche Deserticola และการวิเคราะห์เชิงปริมาณ

พืชCistancheทะเลทราย(1 กก.) ถูกรวบรวมจาก Gansuprovince ประเทศจีน อากาศแห้ง และผงโดยใช้เครื่องบดไฟฟ้า สกัดผงแป้งในเอทานอล (ร้อยละ 70 ) เป็นเวลา 60 นาที กรองและทำให้เข้มข้นที่ความดันลดลง สารเข้มข้นคือดินเผาที่ทำแห้งแบบสุญญากาศ [18] การวิเคราะห์เชิงปริมาณของCistancheทะเลทรายสกัดถูกดำเนินการโดยใช้โครมาโตกราฟีของเหลวที่มีประสิทธิภาพสูง (HPLC) ตามที่ได้อธิบายไว้ก่อนหน้านี้ [11]

2.5. การรักษา

กลุ่มทดลองมีดังนี้ กลุ่มที่ 1 (GI) หนูควบคุมปกติ กลุ่ม II (GII), หนูบาดเจ็บไขสันหลัง (การควบคุมหลอก); และกลุ่ม III–V (GIII–V) หนูที่บาดเจ็บไขสันหลังที่ได้รับโอลิโกแซ็กคาไรด์ 100, 200 หรือ 400 มก./กก. จากCistancheทะเลทรายสารสกัดตามลำดับ แต่ละกลุ่มมีหนูหกตัวและCistancheทะเลทรายสารสกัดถูกให้ทางปากแก่หนูเป็นเวลา 6 สัปดาห์ติดต่อกัน

2.6. การเก็บเลือด

เมื่อสิ้นสุดการรักษา เลือด (5–6 มล.) ถูกเก็บรวบรวมโดยเข็มฉีดยาขนาด 5 มล. ด้วยเข็ม 23G1 ผ่านการเจาะหัวใจ และหนูได้รับการดมยาสลบด้วยคีตามีน ไฮโดรคลอไรด์ (100 มก./กก. ของน้ำหนักตัว) และไซลาซีน (10 มก./กก. ตัว) น้ำหนัก) และเสียสละโดยการตัดหัว

2.7. การเตรียมเนื้อเยื่อโฮโมจีเนต

ในตอนท้ายของการรักษา หนูได้รับยาสลบด้วยคีตามีน ไฮโดรคลอไรด์ (100 มก./กก. ของน้ำหนักตัว) และไซลาซีน (10 มก./กก. ของน้ำหนักตัว) และเสียสละโดยการตัดหัว เก็บตัวอย่างไขสันหลัง (12 มม.) จากบริเวณที่ทำการผ่าตัด เนื้อเยื่อไขสันหลังถูกตัดเป็นชิ้นเล็กๆ และทำให้เป็นเนื้อเดียวกันในบัฟเฟอร์ Tris-HCl (pH 7.4, 50 มิลลิโมลาร์)ที่ 6000 รอบต่อนาที เป็นเวลา 5 นาที โฮโมจีเนตถูกหมุนเหวี่ยงและส่วนลอยเหนือตะกอนถูกรวบรวมสำหรับการทดลองเพิ่มเติม การเตรียม homogenate และ supernatant ทั้งหมดถูกดำเนินการที่ 4 องศา

2.8. ไบโอมาร์คเกอร์ของความเครียดออกซิเดชัน

ลิปิดเปอร์ออกซิเดชันถูกกำหนดตามปริมาณมาลอนไดอัลดีไฮด์ (MDA) โดยการวัดชนิดปฏิกิริยาของกรดไธโอบาร์บิทูริก (TBARS) ผลิตภัณฑ์สุดท้ายถูกวัดที่ 534 นาโนเมตร [19] ROS ถูกกำหนดหาโดยใช้การสอบวิเคราะห์ไดคลอโรฟลูออเรสซีน [20] ปริมาณกลูตาไธโอน (GSH) ที่ลดลงถูกกำหนดโดยการวัดผลิตภัณฑ์ขั้นสุดท้ายที่ 405 นาโนเมตร [21] กิจกรรมของเอนไซม์ซูเปอร์ออกไซด์ดิสมิวเตส (SOD), กลูตาไธโอนเปอร์ออกซิเดส (Gpx), คาตาเลสและอะซิติลโคลีนเอสเตอเรส (AChE) ถูกวัดโดยใช้สเปกโตรโฟโตเมตรี [19]

2.9. เครื่องหมายการอักเสบ

ระดับ TNF- และ IL-6 ในซีรัมถูกกำหนดหาสำหรับทุกกลุ่ม [22] ปริมาณไนไตรต์ถูกวัดเป็นดัชนีของระดับไนตริกออกไซด์ (NO) และแสดงเป็นมิลลิโมลาร์ [23,24] ระดับการแสดงออกของ mRNA ของTNF- , IL-6, iNOS, cyclooxygenase-2 และ GAPDH ถูกกำหนดหาตาม Moon และคณะ [25]. ไพรเมอร์ที่ใช้ในการศึกษานี้แสดงไว้ในตารางที่ 1

2.10. ไบโอมาร์คเกอร์ของอะพอพโทซิส

ระดับการแสดงออกของ mRNA ของ caspase-3, p53, bcl-2, bax, pro-NGF และ GAPDH ถูกกำหนดหาตาม Moon et al [25]. ระดับการแสดงออกของโปรตีนของแคสเปส-3, p53, bcl-2, แบ็กซ์, โปร-NGF และ GAPDH ถูกกำหนดหาตาม Lobos และคณะ [26]. TUNEL การย้อมสีแคสเปส-3 และ p53 ถูกดำเนินการในส่วนของเซลล์ประสาท [25] Theprimers ที่ใช้สำหรับ RT-PCR แสดงไว้ในตารางที่ 1

2.11. การวิเคราะห์ทางสถิติ

ค่าจะแสดงเป็นค่าเฉลี่ยโดยมีข้อผิดพลาดมาตรฐานของค่ากลาง (SEM) การควบคุมและCistancheทะเลทรายเปรียบเทียบกลุ่มที่ได้รับสารสกัดโดยใช้การทดสอบ t ของนักเรียนแบบ unpaired การวิเคราะห์ความแปรปรวนทางเดียว (ANOVA) ใช้สำหรับการเปรียบเทียบแบบพหุคูณ ค่า P ˂0.05 ได้รับการพิจารณาเพื่อบ่งชี้นัยสำคัญทางสถิติ

3. ผลลัพธ์

ในการศึกษาปัจจุบัน ประสิทธิภาพการรักษาของโอลิโกแซ็กคาไรด์จากCistanche ทะเลทรายสกัดต่อต้านการอักเสบ, ออกซิเดชันความเครียดและตรวจสอบการตายของเซลล์ apoptosis ในหนูเผือกที่ได้รับบาดเจ็บที่ไขสันหลัง การปรากฏตัวของ oligosaccharides (78.68 เปอร์เซ็นต์), acteoside (9.29 เปอร์เซ็นต์), echinacoside (6.34 เปอร์เซ็นต์) และ 8-epiloganic acid (5.75 เปอร์เซ็นต์) ถูกสังเกตในCistanche ทะเลทรายสารสกัด (รูปที่ 1). ปริมาณ MDA วัดเป็นผลิตภัณฑ์สุดท้ายของไขมันเปอร์ออกซิเดชัน เท่ากับ 22.58 นาโนโมล/กรัมในหนูควบคุมปกติ (GI) และเพิ่มขึ้นอย่างมาก 179.5 เปอร์เซ็นต์ในหนูทดลองหลอก (GII) การรักษาหนูด้วยโอลิโกแซ็กคาไรด์จากCistancheทะเลทรายสารสกัดลดเนื้อหา MDA ลง 50.1 เปอร์เซ็นต์ในกลุ่ม GV (ตารางที่ 2, P b 0.05) ปริมาณ GSH เท่ากับ 85.31 มก./กรัม ในกลุ่ม GI และลดลงอย่างมาก 61.1 เปอร์เซ็นต์ในกลุ่ม GII รักษาด้วยCistancheทะเลทรายสารสกัดในหนูที่บาดเจ็บไขสันหลังเพิ่มปริมาณ GSH อย่างมีนัยสำคัญถึง 121.6 เปอร์เซ็นต์ในกลุ่ม GV (ตารางที่ 2, P b0.05)

กิจกรรม SOD เท่ากับ 6.2 U/mg ในกลุ่ม GI และลดลงอย่างมาก 51.1 เปอร์เซ็นต์ในกลุ่ม GII หนูบาดเจ็บไขสันหลังเสริมด้วยโอลิโกแซ็กคาไรด์จากCistancheทะเลทรายสารสกัดแสดงกิจกรรม SOD เพิ่มขึ้นอย่างมีนัยสำคัญ ร้อยละ 91.4 ในกลุ่ม GV (ตารางที่ 2, P b0.05) กิจกรรม Catalase เท่ากับ 12.8 U/g ในกลุ่ม GI และลดลงอย่างมาก 59.3 เปอร์เซ็นต์ในกลุ่ม GII หนูบาดเจ็บไขสันหลังเสริมด้วยโอลิโกแซ็กคาไรด์จากCistanche ทะเลทรายสารสกัดแสดงกิจกรรม catalase ที่เพิ่มขึ้นอย่างมีนัยสำคัญ โดย 106.1 เปอร์เซ็นต์ในกลุ่ม GV (ตารางที่ 2, P b 0.05) กิจกรรม GPx คือ 0.87 (มก./โปรตีน) ในกลุ่ม GI และลดลง 55.2 เปอร์เซ็นต์ในกลุ่ม GII กิจกรรม GPx เพิ่มขึ้น 100 เปอร์เซ็นต์ในกลุ่ม GV (ตารางที่ 2, P b 0.05) กิจกรรมของ AChE คือ 9.3 (ไมโครโมล/นาที/มิลลิกรัมของโปรตีน) ในกลุ่ม GI และลดลง 54.8 เปอร์เซ็นต์ในกลุ่ม GII หนูบาดเจ็บไขสันหลังเสริมด้วยโอลิโกแซ็กคาไรด์จากCistancheทะเลทรายสารสกัดแสดงกิจกรรม AChE เพิ่มขึ้นอย่างมีนัยสำคัญ 26.2, 57.1 และ 107.1 เปอร์เซ็นต์ในกลุ่ม GIII, GIV และ GV ตามลำดับ (ตารางที่ 2, P b 0.05)

ROS ถูกวัดและแสดงออกในหน่วยการเรืองแสงสัมพัทธ์ (RFUs): ROS ภายในเซลล์เท่ากับ 44.23 ในกลุ่ม GI ซึ่งเพิ่มขึ้น 349 เปอร์เซ็นต์ในกลุ่ม GII เสริมด้วยโอลิโกแซ็กคาไรด์จากCistancheทะเลทรายสารสกัดลดระดับ ROS ภายในเซลล์ลง 61.9 เปอร์เซ็นต์ในกลุ่ม GV (รูปที่ 2A, P b 0.05) ปริมาณไนไตรต์ถูกวัดเป็นดัชนีของระดับ NO และแสดงเป็นหน่วยมิลลิเมตร ระดับ NO คือ 3.7 (mM) ในกลุ่ม GI ซึ่งเพิ่มขึ้น 349 เปอร์เซ็นต์ในกลุ่ม GII เสริมด้วยโอลิโกแซ็กคาไรด์จากCistancheทะเลทรายสารสกัดลดระดับ NO ลง 63.6 เปอร์เซ็นต์ในกลุ่ม GV (รูปที่ 2B, P b 0.05)

ระดับ IL-6 และ TNF- ถูกวัดและแสดงเป็น pg/mg ของโปรตีน ระดับ IL-6 และ TNF เพิ่มขึ้นอย่างมากโดย 912.7 และ 695.4 เปอร์เซ็นต์ ตามลำดับ ในกลุ่ม GII อย่างไรก็ตาม การเสริมด้วยโอลิโกแซ็กคาไรด์จากCistancheทะเลทรายสารสกัดลดระดับ IL{{0}} และ TNF- อย่างมีนัยสำคัญ N60 เปอร์เซ็นต์ในกลุ่ม GI เมื่อเทียบกับกลุ่ม GII (รูปที่ 3, P b 0{{16 }}5). การแสดงออกของ mRNA ของตัวทำเครื่องหมายการอักเสบ เช่น IL-6, TNF- , ไซโคลออกซีเจเนส-2 และ iNOS ถูกหาปริมาณและแสดงเป็นการเปลี่ยนแปลงแบบพับ ระดับการแสดงออกของ mRNA ของ IL 6, TNF- , cyclooxygenase-2 และ iNOS เพิ่มขึ้น 0.72-, 0.81-,0.54- และ 0.67-เท่าในกลุ่ม GII ตามลำดับ เสริมด้วยCistancheทะเลทรายสารสกัดลดระดับการแสดงออกของ mRNA ของ IL{{0}}, TNF- , cyclooxygenase-2 และ iNOS ลง N20 เปอร์เซ็นต์ในกลุ่ม GV เมื่อเปรียบเทียบกับกลุ่ม GII (รูปที่ 4, P b 0.05)

การแสดงออกของ mRNA ของเครื่องหมายอะพอพโทติกแคสเปส{{0}}, p53,bcl-2, bax และโปร-NGF ยังถูกกำหนดหาอีกด้วย ระดับการแสดงออกของ mRNA ของ p53, caspase-3, bax และ pro-NGF เพิ่มขึ้น 0.97-,1.{{10}}, 1.{ {12}} และ 0.76-เท่าในกลุ่ม GII ตามลำดับ และระดับการแสดงออกของ mRNA thebcl-2 ลดลง 0.67-เท่า . การบำบัดด้วยสารสกัดลดระดับการแสดงออกของ mRNA ของ p53, caspase-3, bax และ pro-NGF ลงอย่างมีนัยสำคัญโดย N30 เปอร์เซ็นต์ ในขณะที่ระดับการแสดงออกของ mRNA ของ bcl-2 เพิ่มขึ้น 178 เปอร์เซ็นต์ (รูปที่ . 5, หน้า ข 0.05). จากการตรวจเลือดแบบตะวันตกพบว่าระดับโปรตีน caspase-3 และ pro-NGF เพิ่มขึ้นอย่างมีนัยสำคัญ โดย 0.95-เท่าและ 0.68-เท่าในกลุ่ม GII ตามลำดับ การเสริมด้วยโอลิโกแซ็กคาไรด์ จากCistancheทะเลทรายสารสกัดจากแคสเปสลดลงอย่างมีนัยสำคัญ{{0}} และระดับการแสดงออกของโปรตีน pro-NGF โดย N20 เปอร์เซ็นต์ในกลุ่ม GI เมื่อเทียบกับกลุ่ม GII (รูปที่ 6, P b 0.05) การสอบวิเคราะห์การย้อมสี TUNEL ถูกใช้เพื่อตรวจหาจำนวนของ p53- และแคสเปส-3-เซลล์ที่เป็นบวก จำนวน p53-เซลล์บวกคือ 1, 79, 54, 33 และ 19 ในกลุ่ม GI–GV ตามลำดับ จากนั้นจำนวนแคสเปส-3-เซลล์บวกคือ 2, 87, 51, 23 และ 14 ในกลุ่ม GI–GV ตามลำดับ (รูปที่ 7-8, P b 0.05)

4. การอภิปราย

ในการศึกษาปัจจุบัน ประสิทธิภาพการรักษาของโอลิโกแซ็กคาไรด์จากCistancheทะเลทรายสกัดต่อต้านการอักเสบความเครียดออกซิเดชันและการตายของเซลล์ในหนูเผือกเพศผู้ที่ได้รับบาดเจ็บที่ไขสันหลัง Liuet อัล [27] รายงานว่าการเสริมด้วยสารต้านอนุมูลอิสระอาจมีผลต่อโรคทางระบบประสาทหลายชนิด มีรายงานการปรากฏตัวของ echinacoside (phenylethanoid glycoside) ในCistancheทะเลทรายสารสกัด [10] และนักวิจัยหลายคนได้แสดงให้เห็นถึงคุณสมบัติต้านการอักเสบและ antinociceptive ของCistanche ทะเลทราย[28,29]. ในการศึกษานี้ oligosaccharides,acteoside, echinacoside และ 8-epiloganic acid เป็นส่วนประกอบหลักของสารสกัด Cistanche deserticola

TNF- ข้อบกพร่องทางพฤติกรรมที่ดีขึ้นและการตายของเซลล์ได้รับการสังเกตในเซลล์ประสาท SH-SY5Y หลังการรักษาด้วยอิชินาโคไซด์ [30,31] น่านและคณะ [32] รายงานการลดลงของระดับ TNF-, T-tau และ IL-1 ในผู้ป่วยโรคอัลไซเมอร์ และการฟื้นตัวของการฝ่อของฮิปโปแคมปัสและความสามารถในการรับรู้ที่ดีขึ้นหลังจากเสริมด้วย Cistanche herba ผลการรักษาของCistancheทะเลทรายแยกออกการอักเสบ, ความเครียดจากปฏิกิริยาออกซิเดชัน และการตายของเซลล์ไม่เคยมีรายงานมาก่อน นี่เป็นรายงานฉบับแรกเกี่ยวกับผลทางเภสัชวิทยาของCistancheทะเลทรายสารสกัดในรูปแบบหนูบาดเจ็บไขสันหลัง

นักวิจัยหลายคนรายงานว่าการรักษาด้วยแอกทิโอไซด์ช่วยลดความเครียดจากปฏิกิริยาออกซิเดชันและลำไส้ได้อย่างมากการอักเสบหนูที่เกิดจากโรคลำไส้อักเสบ [33] น้ำและคณะ [34] ได้รายงานว่าฤทธิ์ต้านการอักเสบของ isoacteoside จาก Abeliophyllum distichum ในเซลล์แมสต์ของมนุษย์ มีรายงานเกี่ยวกับยาต้านอาการอักเสบฟีนิลโพรพานอยด์ไกลโคไซด์จากใบ Clerodendron trichotomum ในแบบจำลองหนูทดลอง [35] โจวและคณะ [36] ได้รายงานว่าฤทธิ์ต้านการอักเสบของ oligosaccharides ในเซลล์ macrophageRAW 264.7 มีการรายงานโมโนเมอร์โอลิโกแซ็กคาไรด์สำหรับการยับยั้งการอักเสบในมาโครฟาจที่กระตุ้นด้วย LPS ผ่านการปราบปรามของเส้นทาง MAPK และ NF-κB [37]

Fahnestock และคณะ [38] รายงานว่า pro-NGF เป็นรูปแบบเด่นในสมองและเพิ่มขึ้นในผู้ป่วยโรคอัลไซเมอร์ โปรตีนที่แยกออกมาหลายชนิด นอกเหนือจากโปร-NGF แล้ว ยังกระตุ้นการตอบสนองต่อเซลล์มะเร็งอีกด้วย [39] อัตราส่วนระหว่าง NGF- และ pro-NGF ที่โตเต็มที่มีบทบาทสำคัญในการปรับสมดุลการอยู่รอดของเซลล์และอัตราการตาย [40] Ke Zhang และคณะ [18] รายงานการก่อตัวของเนื้องอกที่ลดลงและหนูที่มีอายุขัยยืนยาวขึ้นที่เสริมด้วยCistancheทะเลทรายสารสกัด. ผลต่อระบบประสาทของCistancheทะเลทรายมีรายงานก่อนหน้านี้ว่าสารสกัดเกี่ยวกับการบาดเจ็บที่เกิดจากพิษต่อระบบประสาท [41] Xuan และ Liu และคณะ [42] รายงานการปรับปรุงในการทำงานของภูมิคุ้มกัน, หน่วยความจำ, การเรียนรู้, และสารต้านอนุมูลอิสระในหนูเสริมด้วยCistancheทะเลทรายสารสกัด. การเสริมด้วยสารสกัด Cistanche deserticola ช่วยลด MDA และระดับ GPxand SOD ที่สูงขึ้นในแบบจำลองหนูแรทขาดเลือดขาดเลือด นอกจากนี้ พบว่ามีการปรับลดของ caspase-3 โดยมีอัตราส่วน bax/BCL-2 เพิ่มขึ้นพร้อมกัน [43] ซึ่งสอดคล้องกับผลการวิจัยของเราที่แสดงระดับที่ลดลงของการเกิดออกซิเดชัน การอักเสบ และเครื่องหมาย apoptotic ในกระดูกสันหลัง หนูบาดเจ็บสายสะดือเสริมด้วยCistancheทะเลทรายสารสกัด.

5. สรุป

โดยสรุป การวิเคราะห์เชิงปริมาณเผยให้เห็นการมีอยู่ของโอลิโกแซ็กคาไรด์ แอกทิโอไซด์ อิไคนาโคไซด์ และกรดเอพิโลกานิกในCistancheทะเลทรายสารสกัด.การอักเสบความเครียดจากปฏิกิริยาออกซิเดชัน และเครื่องหมายอะพอพโทซิสลดลงอย่างมากในหนูที่มีอาการบาดเจ็บไขสันหลังที่เสริมด้วยโอลิโกแซ็กคาไรด์จากสารสกัด Cistanche deserticola

ข้อจำกัดของการศึกษา

การศึกษานี้ แม้ว่าจะเปิดเผยผลต้านเนื้องอกและฤทธิ์ต้านการอักเสบCistancheทะเลทรายสารสกัดมีข้อ จำกัด บางประการ เราไม่ได้ประเมินผลกระทบเฉียบพลันของCistancheทะเลทรายสารสกัดจากเนื้องอกและการอักเสบในการบาดเจ็บไขสันหลัง

เงินทุน

การศึกษานี้ได้รับการสนับสนุนโดยมูลนิธิวิทยาศาสตร์ธรรมชาติแห่งชาติของจีน (Grant No. 31370984, 81501879, 31870961, GZ1219) กรมวิทยาศาสตร์และเทคโนโลยีแห่งมณฑลเสฉวน (ฉบับที่ 2015HH004) โครงการวิจัยทางวิทยาศาสตร์โดยคณะกรรมการสุขภาพและการวางแผนครอบครัวของมณฑลเสฉวน (No. 2015HH004) . 100097).

การแข่งขันความสนใจ

ผู้เขียนทุกคนประกาศว่าพวกเขาไม่มีส่วนได้เสียในการแข่งขัน

ผลงานของผู้เขียน

Hong Zhang, Zhou Xiang, Xin Duan และ Juan li Jiang ได้ทำการทดลองและร่างต้นฉบับ Yi Ming Xing, Cheng Zhu และQiang Song รวบรวมบทวิจารณ์วรรณกรรม ดำเนินการวิเคราะห์ข้อมูลดิบ และการตีความข้อมูล Qin Rong Yu แก้ไขเนื้อหาทางปัญญาของต้นฉบับ

จาก: ' Antitumor และต่อต้าน-อักเสบผลของโอลิโกแซ็กคาไรด์จากCistancheทะเลทรายสารสกัดจากอาการบาดเจ็บไขสันหลัง' โดยหง จาง และคณะ

---H. จางและคณะ / วารสารนานาชาติชีวโมเลกุลขนาดใหญ่ 124 (2019) 360–367

อ้างอิง

[1] MO Krucoff, S. Rahimpour, MW Slutzky, VR Edgerton, DA Turner, การฟื้นฟูระบบประสาทผ่านระบบประสาท, การฝึกอบรมส่วนต่อประสานประสาทและการฟื้นฟูระบบประสาท, ด้านหน้า ประสาทวิทยา 10 (2016) 584.
[2] TY Yune, JY Lee, MH Jiang, DW Kim, SY Choi, TH Oh, การบริหาร PEP อย่างเป็นระบบ-1-โปรตีนฟิวชัน SOD1 ช่วยเพิ่มการฟื้นตัวของการทำงานโดยการยับยั้งการตายของเซลล์ประสาทหลังจากได้รับบาดเจ็บที่ไขสันหลัง, Free Radic ไบโอล. เมดิ. 45 (2008) 1190–1200.

[3] SM Lee, TY Yune, SJ Kim, DW Park, YK Lee, YC Kim, YJ Oh, GJ Markelonis, TH Oh, Minocycline ช่วยลดการตายของเซลล์และปรับปรุงการฟื้นตัวของการทำงานหลังจากได้รับบาดเจ็บที่ไขสันหลังในหนู J. Neurotrauma 20 (2003) 1017–1027.

[4] F. Bao, D. Liu, Peroxynitrite ที่สร้างขึ้นในไขสันหลังของหนูทำให้เกิดการตายของเซลล์ประสาทและการขาดดุลทางระบบประสาท ประสาท 115 (2002) 839–849

[5] L. Qin, Y. Liu, T. Wang, SJ Wei, ML Block, B. Wilson, B. Liu, JS Hong, NADPH oxidase ไกล่เกลี่ยความเป็นพิษต่อระบบประสาทที่เกิดจาก lipopolysaccharide และการแสดงออกของยีน proinflammatory ใน microglia ที่เปิดใช้งาน J. Biol . เคมี. 279 (2004) 1415–1421.
[6] ML Block, JS Hong, Microglia และการอักเสบ-สื่อกลางการเสื่อมสภาพของระบบประสาท: ทริกเกอร์หลายตัวที่มีกลไกร่วมกัน Prog. นิวโรไบโอล. 76 (2005) 77–98.
[7] KJ Min, HK Pyo, MS Yang, KA Ji, I. Jou, EH Joe, Gangliosides เปิดใช้งาน microglia ผ่านโปรตีน kinase C และ NADPH oxidase, Glia 48 (2004) 197–206
[8] J. Hussein, M. El-Banna, TA Razik, ME El-Naggar, nanocrystals ซิงค์ออกไซด์ที่เข้ากันได้ทางชีวภาพที่เสถียรผ่านไฮดรอกซีเอทิลเซลลูโลสสำหรับการบรรเทาภาวะแทรกซ้อนจากโรคเบาหวาน, Int. เจ. ไบโอล. แมคโครโมล 107 (Pt A) (2018) 748–754.
[9] TY Yune, JY Lee, GY Jung, SJ Kim, MH Jiang, YC Kim, YJ Oh, GJ Markelonis, TH Oh, Minocycline บรรเทาการตายของ oligodendrocytes โดยการยับยั้งการผลิตปัจจัยการเจริญเติบโตของเส้นประสาทใน microglia หลังจากได้รับบาดเจ็บที่ไขสันหลัง เจ. ประสาทวิทยา. 27 (2007) 7751–7761.
[10] GQ Sheng, JR Zhang, XP Pu, J. Ma, CL Li, ผลการป้องกันของ verbascoside ต่อ 1-methyl-4-ความเป็นพิษต่อระบบประสาทที่เกิดจากฟีนิลไพริดิเนียมไอออนในเซลล์ PC12, Eur. เจ.เภสัช. 451 (2545) 119–124.
[11] Y. Jiang, PF Tu, การวิเคราะห์องค์ประกอบทางเคมีในสายพันธุ์ Cistanche, J. Chromatogr 1216 (2552) 2513-2522
[12] KA Koo, SH Sung, JH Park, SH Kim, KY Lee, YC Kim, กิจกรรมป้องกันระบบประสาทในหลอดทดลองของ phenylethanoid glycosides จาก Callicarpa dichotoma, Planta Med 71 (2005) 778–780.
[13] Q. Dong, J. Yao, JN Fang, K. Ding, ลักษณะเฉพาะของโครงสร้างและฤทธิ์ทางภูมิคุ้มกันของพอลิแซ็กคาไรด์ที่สกัดได้ในน้ำเย็นสองชนิดจากCistancheทะเลทรายYC Ma, คาร์โบไฮเดรต. ความละเอียด 342 (2007) 1343–1349.
[14] LW Lin, HT Lin, FH Tsai, WH Wang, CR Wu, Antinociceptive และฤทธิ์ต้านการอักเสบที่เกิดจากCistancheทะเลทรายในหนู J. Ethnopharmacol. 83 (2002) 177–182.
[15] J. Hussein, M. El-Bana, E. Refaat, ME El-Naggar, การสังเคราะห์นาโนอิมัลชันที่ใช้ carvacrol สำหรับการรักษาความผิดปกติของระบบประสาทในผู้ป่วยเบาหวานทดลอง, J. Funct. อาหาร 37 (2017) 441–448
[16] M. Sakanaka, P. Zhu, B. Zhang, TC Wen, F. Cao, YJ Ma, K. Samukawa, N. Mitsuda, J. Tanaka, M. Kuramoto, H. Uno, R. Hata, ทางหลอดเลือดดำ การฉีดไดไฮโดร-จินเซโนไซด์ Rb1 ช่วยป้องกันการบาดเจ็บไขสันหลังกดทับและความเสียหายของสมองขาดเลือดผ่านการควบคุม VEGF และ Bcl-xL, J. Neurotrauma 24 (2007) 1037–1054
[17] S. Naruo, K. Okajima, Y. Taoka, M. Uchiba, T. Nakamura, H. Okabe, K. Takagi, Prostaglandin E1 ช่วยลดอาการบาดเจ็บที่ไขสันหลังจากการกดทับในหนูส่วนใหญ่โดยการยับยั้งการกระตุ้นนิวโทรฟิล, J . Neurotrauma 20 (2) (2003) 221–228.
[18] K. Zhang, X. Ma, W. He, H. Li, S. Han, Y. Jiang, H. Wu, L. Han, T. Ohno, N. Uotsu, K. Yamaguchi, Z. Ma , พี่ตู่, สารสกัดจากCistancheทะเลทรายสามารถต่อต้านภูมิคุ้มกันและยืดอายุขัยในหนูเมาส์ที่มีแนวโน้มชราภาพได้อย่างรวดเร็ว 8 (SAM-P8), Evid. อาหารเสริมตาม ทางเลือก เมดิ. 2014 (2014), 601383.
[19] T. Kaddour, K. Omar, AT Oussama, H. Nouria, B. Iméne, A. Abdelkader, ความเป็นพิษต่อระบบประสาทแบบเฉียบพลันที่เกิดจากอะลูมิเนียมในหนู: การรักษาด้วยสารสกัดจาก Arthrophytum (Hammada scoparia), J. Acute Dis. 5 (6) (2016) 470–482.
[20] TV Arutyunyan, AF Korystova, LN Kublik, MKh Levitman, VV Shaposhnikova, YN Korystov, Taxifolin และ fucoidan ยกเลิกการเพิ่มขึ้นที่เกิดจากการฉายรังสีในการผลิตออกซิเจนที่มีปฏิกิริยาในหลอดเลือดแดงใหญ่หนู Bull ประสบการณ์ ไบโอล. เมดิ. 160 (2016) 635–638.
[21] M. Erden Inal, A. Akgün, A. Kahraman, ผลของกลูตาไธโอนจากภายนอกต่อระดับกลูตาไธโอนที่ลดลง, กิจกรรมกลูตาไธโอนเปอร์ออกซิเดสและกลูตาไธโอนรีดักเตสของหนูที่มีอายุและเพศต่างกันหลังจากการฉายรังสีทั้งตัว Γ เจ. . รศ. 26 (2003) 55–58.
[22] J. Tavakkol Afshari, N. Ghomian, A. Shameli, MT Shakeri, MA Fahmidehkar, E. Mahler, R. Khoshnavaz, M. Emadzadeh, ความมุ่งมั่นของ Interleukin-6 และ Tumor Necrosis Factor-alpha ใน ผู้ป่วยชาวอิหร่าน-โคราซาเนียนที่มีภาวะครรภ์เป็นพิษ, BMC การตั้งครรภ์การคลอดบุตร 5 (2005) 14.
[23] D. Medhat, J. Hussein, ME El-Naggar, MF Attia, M. Anwar, YA Latif, HF Booles, S. Morsy, AR Farrag, WKB Khalil, Z. El-Khayat, ผลกระทบของ Au-dextran NPS เป็นสารต้านเนื้องอกต่อ EAC และก้อนเนื้องอกในหนูทดลองโดยการประเมินทางชีวเคมีและการตรวจทางจุลพยาธิวิทยา Biomed เภสัช. 91 (2017) 1006–1016.
[24] TI Shaheen, MI El-Naggar, JS Hussein, M. El-Bana, E. Emara, Z. El-Khayat, MMG Fouda, H. Ebaid, A. Hebeish, การประเมินโรคเบาหวาน; การศึกษาในร่างกายของอนุภาคนาโนทองคำและเปลือกเงิน-ทองในหนูที่เป็นเบาหวานที่เกิดจากสเตรปโตโซโตซิน Biomed เภสัช. 83 (2016) 865–875.
[25] YJ Moon, JY Lee, MS Oh, YK Pak, KS Park, TH Oh, TY Yune, การยับยั้งการอักเสบและความเครียดจากปฏิกิริยาออกซิเดชันโดยสารสกัด Angelica dahuricae radix ช่วยลดการตายของเซลล์ apoptotic และปรับปรุงการฟื้นตัวของการทำงานหลังจากได้รับบาดเจ็บที่ไขสันหลัง J. Neurosci ความละเอียด 90 (1) (2012) 243–256.
[26] E. Lobos, C. Gebhardt, A. Kluge, K. Spanel-Borowski, การแสดงออกของปัจจัยการเจริญเติบโตของเส้นประสาท (NGF) isoforms ในมดลูกของหนูในระหว่างตั้งครรภ์: การสะสมของสารตั้งต้น proNGF, ต่อมไร้ท่อ 146 (4) (2005) พ.ศ. 2465-2472
[27] J. Liu, E. Head, AM Gharib, W. Yuan, RT Ingersoll, TM Hagen, CW Cotman, BN Ames, การสูญเสียความทรงจำในหนูเก่ามีความสัมพันธ์กับการสลายตัวของไมโตคอนเดรียในสมองและการเกิดออกซิเดชันของ RNA/DNA: การกลับรายการบางส่วนโดย การให้อาหารอะเซทิล-แอล-คาร์นิทีนและ/หรือ R-_-กรดไลโปอิก, Proc. นัท อคาเด วิทย์. สหรัฐอเมริกา 99 (2002) 2356–2361
[28] ZD Nan, KW Zeng, SP Shi, MB Zhao, Y. Jiang, PF Tu, Phenylethanoid glycosides ที่มีฤทธิ์ต้านการอักเสบจากลำต้นของCistancheทะเลทรายเพาะเลี้ยงในทะเลทรายทาริม Fitoterapia 89 (2013) 167–174
[29] XM Wu, XM Gao, KWK Tsim, PF Tu, อะราบิโนกาแลคตันที่แยกได้จากลำต้นของCistancheทะเลทรายกระตุ้นการแพร่กระจายของลิมโฟไซต์ที่เพาะเลี้ยง, Int. เจ. ไบโอล. แมคโครโมล 37 (2005) 278–282.
[30] M. Deng, JY Zhao, PF Tu, Y. Jiang, ZB Li, YH Wang, Echinacoside ช่วยชีวิตเซลล์ประสาท SHSY5Y จากการตายของเซลล์ที่เกิดจาก TNF-alpha, Eur เจ. ฟาร์มาคอล. 505 (2004) 11–18.
[31] X. Geng, X. Tian, ​​P. Tu, X. Pu, ผลกระทบต่อระบบประสาทของ echinacoside ในรูปแบบ MPTP ของเมาส์ของโรคพาร์กินสัน, Eur. เจ. ฟาร์มาคอล. 564 (2007) 66–74.

[32] L. Nan, W. Jianping, M. Jun, G. Zhiqiang, J. Chao, Y. Lie, F. Xiaojie, ผลทางประสาทของการรักษาด้วย cistanches herba ในผู้ป่วยโรคอัลไซเมอร์ระดับปานกลาง, Evid อาหารเสริมตาม ทางเลือก เมดิ. (2015) 103985.

[33] M. Hausmann, F. Obermeier, DH Paper, K. Balan, N. Dunger, K. Menzel, K. Rogler, การรักษาในร่างกายด้วยสมุนไพร phenylethanoid acteoside ช่วยปรับปรุงลำไส้การอักเสบในเดกซ์ทราน ซัลเฟต อาการลำไส้ใหญ่บวมจากโซเดียม, คลินิก ประสบการณ์ อิมมูนอล 148 (2) (2007) 373–381.

[34] SY Nam, HY Kim, MS Yoou, AH Kim, BJ Park, HJ Jeong, HM Kim, ผลต้านการอักเสบของ isoacteoside จาก Abeliophyllum distichum, Immunopharmacol อิมมูโนท็อกซิคอล 37 (3) (2015) 258–264.
[35] KH Kim, S. Kim, MY Jung, IH Ham, WK Whang, phenylpropanoid glycosides ต้านการอักเสบจากใบ Clerodendron trichotomum, Arch เภสัช. ความละเอียด 32 (1) (2009) 7–13.
[36] R. Zhou, X. Shi, Y. Gao, N. Cai, Z. Jiang, X. Xu, กิจกรรมต้านการอักเสบของ gularonate oligosaccharides ที่ได้จากการย่อยสลายออกซิเดชันจากอัลจิเนตในเซลล์ RAW 264.7 ของมิวรีนที่เปิดใช้งานไลโปโพลีแซคคาไรด์, เจ. อากริก. เคมีอาหาร. 14;63 (1) (2015) 160–168.
[37] W. Wang, P. Liu, C. Hao, L. Wu, W. Wan, X. Mao, Neoagaro-oligosaccharide monomers ยับยั้งการอักเสบในมาโครฟาจที่กระตุ้นด้วย LPS ผ่านการปราบปรามของเส้นทาง MAPK และ NF-κB, Sci ตัวแทน 7 (7) (2017), 44252.
[38] M. Fahnestock, B. Michalski, B. Xu, MD Coughlin, สารตั้งต้นที่มีปัจจัยกระตุ้นการเจริญเติบโตของเส้นประสาทคือรูปแบบที่โดดเด่นของปัจจัยการเจริญเติบโตของเส้นประสาทในสมองและเพิ่มขึ้นในโรคอัลไซเมอร์, Mol เซลล์. ประสาทวิทยา 18 (2544) 210–220.
[39] R. Lee, P. Kermani, KK Teng, BL Hempstead, ระเบียบการอยู่รอดของเซลล์โดย proneurotrophins ที่หลั่งออกมา, วิทยาศาสตร์ 294 (2001) 1945–1948
[40] MV Chao, M. Bothwell, Neurotrophins: แยกหรือไม่แยก, เซลล์ประสาท 33 (2002) 9–12.
[41] Q. Xiong, K. Hase, Y. Tezuka, T. Tani, T. Namba, S. Kadota, กิจกรรม Hepatoprotective ของ phenylethanoids จากCistancheทะเลทราย, แพลนตา เมด. 64 (2) (1998) 120–125.
[42] GD Xuan, CQ Liu, งานวิจัยเกี่ยวกับผลกระทบของ phenylethanoid glycosides (PEG) ของCistancheทะเลทรายเรื่องการต่อต้านริ้วรอยในหนูสูงวัยที่เกิดจาก D-galactose, J. Chin. เมดิ. มาเตอร์ 31 (9) (2008) 1385–1388.
[43] Q. Yu, X. Li, X. Cao, ฤทธิ์ป้องกันโรคหัวใจของสารสกัดที่อุดมด้วย phenylethanoid glycoside จากCistancheทะเลทรายแอน วาส. เซอร์. 34 (2016) 234–242.