ฤทธิ์ต้านอนุมูลอิสระของการกระทำที่ซับซ้อนของวิตามินอีและเอทิลไธโอซัลฟานีเลตในตับและไตของหนูภายใต้สภาวะของความเครียดที่เกิดจากออกซิเดชันของโครเมียม (VI)
Mar 25, 2022
Bohdan Kotyk1,*, รุสลานา อิสครา1, วีร่า ลูบูเนตส์2
เชิงนามธรรม:จุดมุ่งหมายของการศึกษาของเราคือศึกษาประสิทธิภาพและประโยชน์ของผลเชิงซ้อนของวิตามินอีและเอทิลไธโอซัลฟานีเลต (ETS) ต่อสถานะของระบบโปร/สารต้านอนุมูลอิสระในตับและไตของหนูภายใต้สภาวะความเครียดออกซิเดชันที่เกิดจาก Cr(VI) หนูแบ่งออกเป็น 8 กลุ่ม
กลุ่มที่ได้รับ: I (กลุ่มควบคุม) - สารละลายทางสรีรวิทยา (150 ul) เป็นเวลา 7 วัน; II – สารละลายน้ำมัน (1 มล.) เป็นเวลา 14 วัน; III, IV, VII, VIII - K2Cr2O7 (2.5 mg Cr(VI)/kg ของน้ำหนักตัว (bw)) สำหรับ 7 (III, IV) และสำหรับ 14 (VII, VIII); วี - วิตามินอี (20 มก./กก. bw) เป็นเวลา 14 วัน; VI, VII, VIII - วิตามินอีที่ซับซ้อนด้วย ETS (100 มก./กก. bw) เป็นเวลา 14 วัน ผลลัพธ์รายงานว่า K2Cr2O7 ทำให้เกิดความเครียดออกซิเดชันที่เกิดจาก Cr(VI) อันเนื่องมาจากการกระตุ้นกระบวนการลิปิดเปอร์ออกซิเดชัน (LP) การทำงานของ Cr(VI) เป็นเวลา 7 วันทำให้เกิดการกระตุ้นระบบป้องกันสารต้านอนุมูลอิสระ (AOS) ชดเชยในเนื้อเยื่อทั้งสอง อย่างไรก็ตาม การกระทำที่นานขึ้นของ Cr(VI) มาพร้อมกับการลดลงของกิจกรรมของเอนไซม์ AOS และปริมาณ GSH ผลกระทบที่ซับซ้อนของวิตามินอีและ ETS ลดความเข้มของความเครียดออกซิเดชันที่เกิดจาก Cr(VI) ในเนื้อเยื่อของหนูทั้งสอง ผลลัพธ์ของเราบ่งชี้ถึงคุณสมบัติต้านอนุมูลอิสระในเชิงบวกของวิตามินอีและ ETS ภายใต้สภาวะความเป็นพิษของ Cr(VI)
คำสำคัญ:หนู; ระบบต้านอนุมูลอิสระ ความเครียดออกซิเดชัน วิตามินอี; เอทิลไธโอซัลฟานิเลต; โพแทสเซียมไบโครเมต; เปอร์ออกซิเดชัน
ติดต่อ:ali.ma@wecistanche.com
คลิกเพื่อทำความเข้าใจในภาษาอูรดูสำหรับไต
1. บทนำ
การใช้โครเมียมอย่างแข็งขันเพื่อวัตถุประสงค์ทางอุตสาหกรรมและการเกษตรทำให้เกิดการสะสมของสารประกอบที่มี Cr ในสิ่งแวดล้อมอย่างมีนัยสำคัญ [1-3] สารประกอบโครเมียมเป็นหนึ่งในมลพิษที่พบบ่อยที่สุดในระบบนิเวศทางน้ำและบนบก [4-6] อุตสาหกรรมหลักที่ต้องใช้สารประกอบที่มี Cr อย่างแข็งขัน ได้แก่ การฟอกหนัง สารกันบูดไม้ การเชื่อมโลหะทางอุตสาหกรรม การชุบโครเมียม โครเมต และการผลิตเฟอร์โรโครเมต [1] โครเมียมเป็นโลหะธรรมชาติ ส่วนใหญ่พบได้ในสองรูปแบบที่แตกต่างกัน: โครเมียมไตรวาเลนท์ (Cr(III)) และเฮกซะวาเลนท์โครเมียม (Cr(VI)) Cr(III) เป็นขั้นตอนสุดท้ายของการเกิดออกซิเดชันของโครเมียม โครเมียมรูปแบบไตรวาเลนต์พบได้ทั่วไปในระบบชีวภาพทั้งหมด มีความเสถียรทางอุณหพลศาสตร์ และแสดงคุณสมบัติที่แข็งแกร่งสำหรับการสร้างสารประกอบโคออร์ดิเนชัน รูปแบบเฮกซะวาเลนท์ (Cr(VI)) แสดงคุณสมบัติที่เป็นพิษและเป็นสารก่อมะเร็งอย่างรุนแรง และมักจะแสดงเป็นสารประกอบที่มีออกซิเจนของโครเมต (CrO42-) และไดโครเมต (Cr2O72-) [1,7] ความเป็นพิษสูงของสารประกอบ Cr(VI) สัมพันธ์กับความสามารถในการดูดซึมได้ง่ายและขนส่งเข้าสู่เซลล์อย่างรวดเร็วผ่านช่องซัลเฟต [8,9] จากนั้น Cr(VI) จะลดลงเป็น Cr(III) ในหลายขั้นตอนหลังจากเจาะเข้าไปในเซลล์ มีการสร้างสายพันธุ์ออกซิเจนปฏิกิริยา (ROS) จำนวนมากในระหว่างกระบวนการลด Cr(VI) [10,11] การกระตุ้นการก่อตัวของ ROS นำไปสู่การพัฒนาความเครียดจากปฏิกิริยาออกซิเดชันและความเสียหายของเนื้อเยื่อ กระบวนการลด Cr(VI) ยังมาพร้อมกับความเป็นพิษต่อเซลล์ ความเป็นพิษต่อพันธุกรรม การก่อมะเร็ง และการตายของเซลล์โดยผ่านการปรับยีนควบคุม p53 [12- 15] ระบบ AOS เป็นอุปสรรคหลักในการตอบโต้ความเครียดออกซิเดชันที่เกิดจาก Cr(VI) [9] ส่วนประกอบที่เป็นเอนไซม์และไม่ใช่เอนไซม์ของระบบ AOS เช่น ฟลาโวเอนไซม์ที่ขึ้นกับ GSH และ NADPH กระตุ้นและเร่งการลด Cr(VI) ที่เป็นพิษสูงเป็น Cr(III) ที่เป็นพิษน้อยกว่ามาก ในทางกลับกัน เอ็นไซม์เช่น SOD, CAT, GP และไตรเปปไทด์ GSH ที่ไม่ใช่เอนไซม์จะทำให้ ROS จำนวนมากเป็นกลาง ซึ่งเกิดขึ้นระหว่างการลด Cr(VI) [16,17] อย่างไรก็ตาม ความเครียดจากปฏิกิริยาออกซิเดชันที่เกิดจาก Cr(VI) ที่ยืดเยื้อทำให้ทรัพยากรระบบ AOS หมดลง และกระตุ้นเซลล์ เนื้อเยื่อ และความเสียหายของอวัยวะออกซิเดชันอันเนื่องมาจากกระบวนการโปรออกซิแดนท์ที่เพิ่มขึ้น [9,18] สารประกอบที่ประกอบด้วย Cr(VI) เช่น โพแทสเซียม ไดโครเมต (K2Cr2O7) ที่ขนาด 8 มก./กก. ของน้ำหนักตัวทำให้เกิดพิษต่อตับเฉียบพลันในหนูเนื่องจากกระบวนการเน่าเปื่อยและการอักเสบที่เพิ่มขึ้น และการสูญเสียทรัพยากรระบบ AOS ในเนื้อเยื่อตับของสัตว์ ]. การฉีด K2Cr2O7 เข้าใต้ผิวหนังครั้งเดียวในขนาด 10 มก./กก. ยังส่งผลให้เกิดความเครียดจากปฏิกิริยาออกซิเดชันที่เกิดจาก Cr(VI) และความเสียหายต่อเนื้อเยื่อตับของหนู ตามด้วยการเปลี่ยนแปลงทางสถาปัตยกรรมเนื้อเยื่อและการขยายตัวของไซนัสในตับ ปริมาณ Cr(VI) ที่ใกล้เคียงกันทำให้เกิดการเปลี่ยนแปลงที่เสื่อมในเซลล์เยื่อบุผิวท่อ การขยายตัวของซีสต์ของท่อทูบูล ความแออัดของหลอดเลือด การหล่อด้วยไฮยาลีน และการขยายตัวของช่องว่างของโบว์แมนในไตของหนู [14] ความเป็นพิษต่อตับและไตที่เกิดจาก K2Cr2O7 นั้นมาพร้อมกับความเครียดจากปฏิกิริยาออกซิเดชันที่เกิดจาก Cr(VI) เฉียบพลัน ความเป็นพิษที่เกิดจาก Cr(VI) กระตุ้น โดยเฉพาะอย่างยิ่ง การก่อตัวของ ROS, การกระตุ้นการทำงานมากเกินไปของกระบวนการเปอร์ออกซิเดชัน, การยับยั้งการทำงานของเอนไซม์ต้านอนุมูลอิสระ, การลดลงของ GSH ของเซลล์ เช่นเดียวกับการลดลงของกลุ่มซัลไฟด์ไฮดริลที่ไม่ใช่โปรตีนและการสะสมของ Cr(VI) ตับและไตของหนูและหนู [14,20,21] เป็นที่เชื่อกันว่าการรักษาสถานะของสารต้านอนุมูลอิสระเป็นปัจจัยสำคัญในการลดและป้องกันผลกระทบด้านลบของความเครียดออกซิเดชันที่เกิดจาก Cr(VI) [14,22,23] การทำให้เป็นกลางของ Cr(VI) ดำเนินการโดยการลดเอนไซม์เป็น Cr(V) และการเปลี่ยนแปลงที่ตามมาเป็นเกลือที่มี Cr ด้วยการมีส่วนร่วมของ GR และ NADPH สารต้านอนุมูลอิสระที่ไม่ใช่เอนไซม์ เช่น วิตามินอี กรดแอสคอร์บิก N-acetylcysteine ผงกระเทียม และ GSH มีความสามารถในการลดความเสียหายจากปฏิกิริยาออกซิเดชันที่เกิดจาก K2Cr2O7 [24,25] วิตามินอีถือเป็นสารต้านอนุมูลอิสระที่ไม่มีเอนไซม์ที่ละลายในไขมันได้อย่างมีประสิทธิภาพมากที่สุด ซึ่งช่วยปกป้องเยื่อหุ้มเซลล์จากการเกิดเปอร์ออกซิเดชันที่เกิดจากอนุมูลอิสระ กระตุ้นการทำงานของเอนไซม์ต้านอนุมูลอิสระ และลดความเข้มของความเครียดออกซิเดชันที่เกิดจากความเป็นพิษที่เกิดจากโลหะหนัก การทำงานของวิตามินอีในขนาด 100 และ 125 มก./กก. เป็นเวลา 2 และ 6 สัปดาห์ ตามลำดับ จะลดระดับของ K2Cr2O7- ที่เหนี่ยวนำให้เกิดกระบวนการเปอร์ออกซิเดชันและฟื้นฟูปริมาณ GSH และกิจกรรม SOD ในตับและไตของหนู [14,19,22]. วิตามินอีในขนาด 125 มก./กก. ของน้ำหนักตัวยังแสดงคุณสมบัติต้านอนุมูลอิสระและต้านการอักเสบ และลดความรุนแรงของความเป็นพิษที่เกิดจาก Cr(VI) ในตับและไตของหนู [22]
Ethylthiosulfanylate อยู่ในกลุ่มของสารประกอบไธโอซัลโฟเนต ไธโอซัลโฟเนตเป็นสารคล้ายคลึงสังเคราะห์ของสารประกอบออร์กาโนซัลเฟอร์ที่ออกฤทธิ์ทางชีวภาพตามธรรมชาติที่ได้จากกระเทียม หัวหอม บร็อคโคลี่ และกะหล่ำดอก ไธโอซัลโฟเนตมีความเสถียรมากกว่าสารคล้ายคลึงตามธรรมชาติ แสดงคุณสมบัติทางชีวภาพที่หลากหลาย และมีความเป็นพิษต่ำ นักวิจัยหลายคนศึกษาคุณสมบัติต้านมะเร็ง ต้านการอักเสบ ต้านเชื้อรา ต้านจุลชีพ และภูมิคุ้มกันของไธโอซัลโฟเนตในช่วงไม่กี่ปีที่ผ่านมา อย่างไรก็ตาม ยังมีการศึกษาเกี่ยวกับคุณสมบัติต้านอนุมูลอิสระของไธโอซัลโฟเนตไม่เพียงพอ เป็นที่ทราบกันดีว่าไธโอซัลโฟเนตสามารถปรับปัจจัยการถอดรหัสซึ่งเกี่ยวข้องกับการกระตุ้นยีนระบบ AOS [26,27] ฤทธิ์ต้านอนุมูลอิสระของสารเหล่านี้แสดงให้เห็นในความสามารถในการลดความเข้มของการสูญเสียสระว่ายน้ำ GSH และการก่อตัวของสารปฏิกิริยากรดไธโอบาร์บิทูริก (TBARS) ในตับของหนูภายใต้สภาวะความเครียดจากปฏิกิริยาออกซิเดชัน [28] ไม่ค่อยมีใครรู้จักเกี่ยวกับคุณสมบัติต้านอนุมูลอิสระของไธโอซัลโฟเนตภายใต้การกระทำที่เป็นพิษของโลหะหนัก อย่างไรก็ตาม สารประกอบออร์กาโนซัลเฟอร์ตามธรรมชาติแสดงผลสารต้านอนุมูลอิสระในเชิงบวกต่อความเครียดออกซิเดชันที่เกิดจาก Cr(VI) [23,29-31] การศึกษาก่อนหน้านี้ของเรายังระบุด้วยว่าเอทิลไธโอซัลฟานีเลตแสดงคุณสมบัติต้านอนุมูลอิสระและขจัดผลกระทบด้านลบของ K2Cr2O7- ที่เกิดจากความเครียดออกซิเดชันในเนื้อเยื่อตับของหนูได้บางส่วน [32]
ดังนั้น ด้วยคุณสมบัติต้านอนุมูลอิสระในเชิงบวกของวิตามินอี เช่นเดียวกับไธโอซัลโฟเนตและสารที่คล้ายคลึงกันตามธรรมชาติ การศึกษาของเราจึงมีวัตถุประสงค์เพื่อตรวจสอบประสิทธิภาพและประโยชน์ของผลที่ซับซ้อนของวิตามินอีและเอทิลไธโอซัลฟานีเลตต่อสถานะของโปร/สารต้านอนุมูลอิสระในตับ และไตของหนูภายใต้สภาวะความเครียดออกซิเดชันที่เกิดจาก Cr(VI)
2. วัสดุและวิธีการ
ส่วน «วัสดุและวิธีการ» จัดทำขึ้นโดยการเปรียบเทียบกับสิ่งพิมพ์ก่อนหน้าของเรา [32]
2.1. การออกแบบทดลอง
ในงานของเรา เราใช้หนู Wistar เพศผู้ 40 ตัวน้ำหนัก 130- 140ก. เราสร้างกลุ่มสัตว์ 8 กลุ่ม (หนูต่อกลุ่ม 5 ตัว): กลุ่มควบคุม 1 กลุ่มและกลุ่มทดลอง 7 กลุ่ม หนูทุกตัวถูกเลี้ยงในสภาพมาตรฐานและได้รับอาหารสัตว์และน้ำดื่มมาตรฐานตามจำนวนที่กำหนด
หนูควบคุมที่ไม่บุบสลายในกลุ่มที่ 1 ได้รับการฉีดน้ำเกลือทางสรีรวิทยา (150 ไมโครลิตร) ในช่องท้อง 1 ครั้งต่อวันเป็นเวลา 7 วัน สัตว์ในกลุ่มทดลอง III และ IV ได้รับการบำบัดในช่องท้องด้วย K2Cr2O7 ที่ละลายในน้ำเกลือทางสรีรวิทยา (Cr(VI)) 150 ไมโครลิตร 2.5 มก./กก. ของน้ำหนักตัว) เป็นเวลา 7 และ 14 วันตามลำดับ
กลุ่มที่ II ได้รับสารละลายน้ำมันดอกทานตะวันขนาด 1,000 ไมโครลิตรในกระเพาะ (เครื่องหมายการค้า «Oleina»; DSTU 4492: ISO 14024) วันละครั้งเป็นเวลา 14 วัน และทันทีหลังจากนั้น น้ำเกลือทางสรีรวิทยา (150 ไมโครลิตร) จะถูกฉีดเข้าช่องท้องวันละครั้งเป็นเวลา 7 วัน
กลุ่ม V: ถูกฉีดเข้าช่องท้องทุกวันด้วยสารละลายน้ำมันของวิตามินอีในขนาด 20 มก./กก. ของน้ำหนักตัวเป็นเวลา 14 วัน จากนั้นให้ฉีดน้ำเกลือทางสรีรวิทยา (150 ไมโครลิตร) เข้าช่องท้องวันละครั้งเป็นเวลา 7 วัน
กลุ่ม VI: ถูกฉีดทุกวันด้วยสารละลายน้ำมันที่ซับซ้อนของวิตามินอี [น้ำหนักตัว 20 มก./กก.] และเอทิลไธโอซัลฟานีเลต (ETS) [100 มก./กก. ของน้ำหนักตัว] เป็นเวลา 14 วัน จากนั้นให้ฉีดเข้าช่องท้องทุกวันทันทีด้วยปริมาณ 150 ไมโครลิตรของน้ำเกลือทางสรีรวิทยาเป็นเวลา 7 วัน
Group VII/Group VIII: ได้รับสารละลายน้ำมันเชิงซ้อนของวิตามินอี [20 มก./กก. ของน้ำหนักตัว] และ ETS [100 มก./กก. ของน้ำหนักตัว] เป็นเวลา 14 วัน และได้รับ K2Cr2O7 ในช่องท้องทุกวันในขนาด 2.5 มก. ทันที Cr(VI)/กก. น้ำหนักตัวต่อวัน เป็นเวลา 7 วัน/14 วัน
การจัดการกับสัตว์ในงานของเราทั้งหมดสอดคล้องกับบทบัญญัติของอนุสัญญายุโรปว่าด้วยการคุ้มครองสัตว์ที่มีกระดูกสันหลังที่ใช้สำหรับการทดลองและวัตถุประสงค์ทางวิทยาศาสตร์อื่น ๆ (Strasbourg, 1986) และ "Common Ethical Principles for Animal Experiments" (Ukraine, 2001) ได้รับอนุญาตให้ดำเนินการวิจัยจากคณะกรรมการจริยธรรมของสถาบันชีววิทยาสัตว์ NAAS แห่งลวิฟ (โปรโตคอลหมายเลข 80)
งานนี้ศึกษาผลกระทบของสารประกอบ ETS (เอทิล 4- อะมิโนเบนซิเนไทโอซัลโฟเนต) ที่สังเคราะห์ขึ้นใหม่ที่ซับซ้อนกับวิตามินอีต่อร่างกายของหนู ETS ถูกสังเคราะห์ขึ้นที่แผนกเทคโนโลยีของสารออกฤทธิ์ทางชีวภาพ ร้านขายยา และเทคโนโลยีชีวภาพของมหาวิทยาลัยแห่งชาติ "Lviv Polytechnic" ตามโปรโตคอลที่อธิบายไว้ในรายละเอียดในบทความ [33, 34]
หลังจากการตัดหัวสัตว์ซึ่งเกิดขึ้นภายใต้การดมยาสลบไตถูกรวบรวม ขั้นตอนทั้งหมดบนไตได้ดำเนินการที่ 4 องศา . วัสดุที่ใช้ในการวิจัยคือ homogenates ไตของหนู ซึ่งเตรียมบนบัฟเฟอร์ Tris-HCl 0.05 M ที่มี pH 7.4 ในอัตราส่วนของเนื้อเยื่อ 1 กรัม และบัฟเฟอร์ 9 มิลลิลิตร (1:9 น้ำหนัก/ปริมาตร ) แล้วปั่นเหวี่ยงเป็นเวลา 15 นาทีที่ 1,000 กรัม หลังจากการปั่นแยกใน supernatant ที่ได้รับ กำหนดเนื้อหาของ GSH ระดับผลิตภัณฑ์เปอร์ออกซิเดชัน และกิจกรรมของเอนไซม์ต้านอนุมูลอิสระ
2.1.1. กลุ่มของสัตว์
เปรียบเทียบกลุ่มสัตว์ตามรูปแบบต่อไปนี้ (รูปที่ 1) กลุ่มที่ 1 คือกลุ่มควบคุมที่สมบูรณ์ซึ่งสัมพันธ์กับกลุ่มทดลอง III และ IV ซึ่งไม่ได้รับสารละลายน้ำมัน กลุ่ม II ควบคุมที่เกี่ยวข้องกับกลุ่มทดลอง V, VI, VII และ VIII ซึ่งได้รับสารละลายน้ำมัน เราบันทึกเปอร์เซ็นต์ ( เปอร์เซ็นต์ ) การเปลี่ยนแปลงในตัวบ่งชี้สำหรับกลุ่มทดลอง III และ IV เทียบกับกลุ่ม I (กลุ่มควบคุมที่ไม่เสียหาย) นอกจากนี้เรายังบันทึกเปอร์เซ็นต์การเปลี่ยนแปลงในตัวบ่งชี้สำหรับกลุ่มทดลอง V, VI, VII และ VIII ที่สัมพันธ์กับกลุ่ม II (การควบคุมน้ำมัน) ในขั้นตอนสุดท้าย เราวิเคราะห์เปอร์เซ็นต์การเปลี่ยนแปลงในตัวบ่งชี้ของกลุ่มทดลอง III/IV ที่สัมพันธ์กับกลุ่ม I (กลุ่มควบคุมที่ไม่เสียหาย) และเปรียบเทียบกับเปอร์เซ็นต์การเปลี่ยนแปลงในตัวบ่งชี้ของกลุ่มทดลอง VII/VIII ที่สัมพันธ์กับกลุ่ม II (กลุ่มควบคุมน้ำมัน)
2.2. กำลังประมวลผล.
2.1.1. ความเข้มข้นของ LHP
การวัดระดับ LHP (ลิปิด ไฮโดรเปอร์ออกไซด์) ดำเนินการไม่สอดคล้องกับวิธีการตกตะกอนโปรตีนที่เกิดจากกรดไตรคลอโรอะซิติกและลิพิดที่เกิดจากเอทานอล
การสกัด [35]. แอมโมเนียมไธโอไซยาเนตทำปฏิกิริยากับสารสกัดลิพิดเอธานอลและเริ่มปฏิกิริยาสี การบันทึกค่าการดูดกลืนแสงของผลิตภัณฑ์สีถูกดำเนินการด้วยสเปกโตรโฟโตเมตริก (λ 480 นาโนเมตร) ระดับ LHP (เนื้อเยื่อ SU/g) คำนวณจากความแตกต่างระหว่างกลุ่มควบคุมและกลุ่มตัวอย่างในการทดลอง
2.2.2 ความเข้มข้นของ TBARS
การประเมินความเข้มข้นของ TBARS (สารทำปฏิกิริยากรด thiobarbituric) ขึ้นอยู่กับหลักการของปฏิกิริยาระหว่าง malondialdehyde และ thiobarbituric acid ภายใต้สภาวะความเป็นกรดและอุณหภูมิสูง [35] ผลของปฏิกิริยาระหว่างมาลอนไดอัลดีไฮด์และกรดไธโอบาร์บิทูริกคือปฏิกิริยาของสี การบันทึกการดูดกลืนแสงของผลิตภัณฑ์สีถูกดำเนินการด้วยสเปกโตรโฟโตเมตริก (λ 535 นาโนเมตร และ λ 580 นาโนเมตร) และระดับ TBARS ถูกคำนวณเป็น nmol MDA/g เนื้อเยื่อ
2.2.3. กิจกรรมของ GP.
การวัดฤทธิ์ของเอนไซม์ GP (กลูตาไธโอนเปอร์ออกซิเดส) ดำเนินการต่อหน้า GSH ก่อนและหลังการเติมตติอารีบิวทิลไฮโดรเปอร์ออกไซด์ [35] การประเมิน
กิจกรรมของ GP ขึ้นอยู่กับหลักการของอัตราการออกซิเดชันของ GSH หมู่ SH ของโมเลกุล GSH ถูกออกซิไดซ์ต่อหน้า2-กรดไนโตรเบนโซอิก ประจุลบไดไนโตรฟีนิลเกิดขึ้นจากการเกิดออกซิเดชันของ GSH การบันทึกการดูดกลืนแสงของผลิตภัณฑ์สีถูกดำเนินการด้วยสเปกโตรโฟโตเมตริก (λ 412 นาโนเมตร) และกิจกรรม GP ถูกคำนวณเป็น nmol GSH/นาที โปรตีน×มก.
2.2.4. กิจกรรมของ GR.
การวัดฤทธิ์ของเอนไซม์ GR (กลูตาไธโอนรีดักเตส) ดำเนินการต่อหน้ากลูตาไธโอนออกซิไดซ์และ NADPH [35] การประเมินกิจกรรม GR ขึ้นอยู่กับหลักการของอัตราการรีดิวซ์กลูตาไธโอนออกซิไดซ์ การบันทึกการดูดกลืนแสงถูกดำเนินการด้วยสเปกโตรโฟโตเมตริก (λ 340 นาโนเมตร) เป็นเวลา 1 นาทีที่ 37 องศา อัตราการสูญพันธุ์ที่ลดลงเป็นตัวบ่งชี้ความเข้มของปฏิกิริยา การออกฤทธิ์ของ GR ถูกคำนวณเป็น µmol NADPH/นาที โปรตีน×มก.
2.2.5. ความเข้มข้นของ GSH
การประเมินระดับ GSH (กลูตาไธโอนที่ลดลง) ขึ้นอยู่กับหลักการของการก่อรูปของไดไนโตรฟีนิลแอนไอออน (ผลิตภัณฑ์ที่มีสี) หลังจากจับ 2-กรดไนโตรเบนโซอิกกับกลุ่ม SH ของโมเลกุล GSH [36] ค่าความเข้มข้นของ GSH ขึ้นอยู่กับความเข้มของปฏิกิริยาสี การบันทึกการดูดกลืนแสงของผลิตภัณฑ์สีถูกดำเนินการด้วยสเปกโตรโฟโตเมตริก (λ 412 นาโนเมตร) และปริมาณ GSH ถูกคำนวณเป็นเนื้อเยื่อ GSH/g ของมิลลิโมล
2.2.6. กิจกรรมของ สอท.
การวัดฤทธิ์ของเอนไซม์ SOD (ซูเปอร์ออกไซด์ดิสมิวเตส) ดำเนินการต่อหน้า NADH และฟีนาซีนเมโธซัลเฟต [36] การประเมินกิจกรรม SOD ขึ้นอยู่กับหลักการของการลดไนโตรบลู เตตราโซเลียม ความเข้มข้นของการยับยั้งกระบวนการลดไนโตรบลู เตตราโซเลียม บ่งชี้ถึงความเข้มข้นของกิจกรรมของเอนไซม์ การบันทึกการดูดกลืนแสงถูกดำเนินการด้วยสเปกโตรโฟโตเมตริก (λ 540 นาโนเมตร) และกิจกรรม SOD ถูกคำนวณในหน่วยมาตรฐานต่อโปรตีน 1 มก.
2.2.7. กิจกรรมของ กสท.
การวัดกิจกรรมของเอนไซม์ CAT (catalase) ดำเนินการในที่ที่มีเกลือโมลิบดีนัมซึ่งมีปฏิกิริยากับไฮโดรเจนเปอร์ออกไซด์ [36] ผลิตภัณฑ์ที่มีสีเกิดขึ้นจากปฏิกิริยา การบันทึกการดูดกลืนแสงของผลิตภัณฑ์สีถูกดำเนินการด้วยสเปกโตรโฟโตเมตริก (λ 410 นาโนเมตร) และกิจกรรม CAT ถูกคำนวณเป็นมิลลิโมล/นาที × 1 มก. ของโปรตีน
2.2.8. ความเข้มข้นของโปรตีน
ความเข้มข้นของโปรตีนทั้งหมดในเนื้อเยื่อที่เป็นเนื้อเดียวกันวัดโดยวิธี Lowry [37] โดยใช้ชุดอุปกรณ์ "Simko LTD" (ยูเครน, ลวิฟ) การวัดค่าการดูดกลืนแสงทั้งหมดดำเนินการบนสเปกโตรโฟโตมิเตอร์ "Unico" 1205 (สหรัฐอเมริกา)
2.3. การวิเคราะห์ทางสถิติ.
ข้อมูลการทดลองทั้งหมดได้รับการวิเคราะห์ทางสถิติโดยซอฟต์แวร์ Microsoft Excel โดยใช้การวิเคราะห์ความแปรปรวนทางเดียว (ANOVA) และการทดสอบ Tukey-Kramer ค่าทดลองทั้งหมดคำนวณเป็นค่าเฉลี่ย (M) ± ข้อผิดพลาดมาตรฐาน (SEM) และถือว่ามีนัยสำคัญทางสถิติที่ P <>
3. ผลลัพธ์และการอภิปราย
ส่วน «ผลลัพธ์และการสนทนา» จัดทำขึ้นโดยเปรียบเทียบกับสิ่งพิมพ์ก่อนหน้าของเรา [32]
3.1. เครื่องหมายความเครียดออกซิเดชัน
เราพบว่าการให้โปแตสเซียมไดโครเมตในช่องท้องเป็นเวลา 7 และ 14 วันทำให้เนื้อหาของเครื่องหมายความเครียดออกซิเดชันในตับและไตของหนูเพศผู้เพิ่มขึ้น การได้รับ K2Cr2O7 ในขนาด 2.5 มก. Cr(VI)/กก. ของน้ำหนักตัวเป็นเวลา 7 (กลุ่ม III) และ 14 วัน (กลุ่ม IV) ทำให้เกิดเนื้อหา TBARS ในตับของสัตว์เพิ่มขึ้นอย่างมีนัยสำคัญเมื่อเปรียบเทียบกับกลุ่ม I (กลุ่มควบคุม) โดย ร้อยละ 69 และ 75 ตามลำดับ (ตารางที่ 1) ระดับ TBARS ยังเพิ่มขึ้นอย่างมีนัยสำคัญในเนื้อเยื่อไตของหนูกลุ่มทดลอง III และ IV เมื่อเทียบกับกลุ่มควบคุมโดย 41 และ 46 เปอร์เซ็นต์ตามลำดับ ปริมาณ Cr(VI) ที่ใกล้เคียงกันทำให้ความเข้มข้นของ LHP เพิ่มขึ้นอย่างมีนัยสำคัญในตับของหนูในกลุ่มทดลอง III และ IV เมื่อเทียบกับกลุ่ม I ที่ 112 และ 127 เปอร์เซ็นต์ตามลำดับ ระดับ LHP ยังเพิ่มขึ้นอย่างมีนัยสำคัญในเนื้อเยื่อไตของหนูหลังจาก 7 (กลุ่ม III) และ 14 วัน (กลุ่ม IV) ของการกระทำ Cr(VI) เมื่อเทียบกับกลุ่มควบคุม 39 และ 56 เปอร์เซ็นต์ตามลำดับ
สาเหตุของการเพิ่มขึ้นของความเข้มข้นของกระบวนการเปอร์ออกซิเดชันในตับและไตของหนูคือ Cr(VI) -กระตุ้นการเกิดปฏิกิริยาไฮเปอร์แอคทีฟของไฮดรอกซิลและซูเปอร์ออกไซด์ Cr (VI)- การเกิด ROS ที่เหนี่ยวนำทำให้เกิดความเสียหายต่อโครงสร้างของส่วนประกอบไขมันของเยื่อหุ้มเซลล์และเป็นผลให้กระตุ้นเนื้อหา TBARS เพิ่มขึ้น [19,20,38] ตัวกลางของการลด Cr(VI) จะเข้าสู่ปฏิกิริยาคล้ายเฟนตัน ทำปฏิกิริยากับไฮโดรเจนเปอร์ออกไซด์ และเริ่มไฮดรอกซิลเรดิคัล [19] ตามวรรณกรรม Cr(VI) ช่วยเพิ่มความเข้มของการสร้างอนุมูลซูเปอร์ออกไซด์โดยกระตุ้น NADPH-oxidase [39] และสารเชิงซ้อนของเอนไซม์ xanthine-xanthine oxidase [40]
การให้วิตามินอีในกระเพาะ (กลุ่ม V) และวิตามินอีร่วมกับ ETS (กลุ่ม VI) ในช่วง 14 วันทำให้ปริมาณ TBARS ในตับของสัตว์ลดลงอย่างมีนัยสำคัญเมื่อเทียบกับกลุ่ม II โดย 13 และ 16 เปอร์เซ็นต์ตามลำดับ (ตาราง 1). ระดับ TBARS ที่ลดลงเล็กน้อยยังถูกบันทึกในเนื้อเยื่อไตของหนูกลุ่มทดลอง V และ VI เมื่อเทียบกับกลุ่ม II ที่ 5 และ 3 เปอร์เซ็นต์ตามลำดับ ปริมาณ LHP ลดลงอย่างมีนัยสำคัญในกลุ่มทดลอง V และ VI ในตับของหนูเมื่อเปรียบเทียบกับกลุ่ม II โดย 12 และ 16 เปอร์เซ็นต์ตามลำดับ นอกจากนี้ยังมีการลดลงอย่างมีนัยสำคัญของระดับ LHP ในเนื้อเยื่อไตของหนูในกลุ่มทดลองที่คล้ายคลึงกันเมื่อเทียบกับกลุ่ม II โดย 10 และ 8 เปอร์เซ็นต์ตามลำดับ
ปริมาณ TBARS ในตับของหนูยังคงอยู่ที่ระดับตัวบ่งชี้ของกลุ่ม II หลังจาก 14 วันของการปรับสภาพที่ซับซ้อนด้วยวิตามินอีและ ETS โดยแอคตินถัดไปของ Cr(VI) เป็นเวลา 7 วัน (กลุ่ม VII) ผลกระทบที่ซับซ้อนก่อนหน้านี้ของวิตามินอีและ ETS โดยการกระทำต่อไปของ Cr(VI) เป็นเวลา 14 วันทำให้ระดับ TBARS ในเนื้อเยื่อตับของกลุ่ม VIII เพิ่มขึ้น เมื่อเทียบกับกลุ่ม II เพิ่มขึ้น 23 เปอร์เซ็นต์ อย่างไรก็ตาม ปริมาณ TBARS ในเนื้อเยื่อตับของสัตว์กลุ่ม VIII เพิ่มขึ้น (23 เปอร์เซ็นต์ ) เมื่อเทียบกับกลุ่ม II ต่ำกว่าร้อยละ 52 ของปริมาณ TBARS ที่เพิ่มขึ้นในตับของหนูในกลุ่ม IV (75 เปอร์เซ็นต์) เมื่อเทียบกับกลุ่ม I .
ความเข้มข้นของ TBARS เพิ่มขึ้นในเนื้อเยื่อไตของหนูหลังจาก 14 วันของการปรับสภาพที่ซับซ้อนด้วยวิตามินอีและ ETS โดยการกระทำต่อไปของ Cr(VI) เป็นเวลา 7 (กลุ่ม VII) และ 14 วัน (กลุ่ม VIII) เมื่อเทียบกับกลุ่ม II โดย 21 และ 31 เปอร์เซ็นต์ ตามลำดับ อย่างไรก็ตาม ความรุนแรงของการเพิ่มขึ้นของเนื้อหา TBARS ในไตของหนูในกลุ่ม VII (21 เปอร์เซ็นต์ ) และ VIII (31 เปอร์เซ็นต์ ) เทียบกับกลุ่ม II ลดลง 25 และ 21 เปอร์เซ็นต์ ต่ำกว่าเปอร์เซ็นต์ที่เพิ่มขึ้นของระดับ TBARS ในกลุ่มที่เป็นเนื้อเดียวกันของไต III (46 เปอร์เซ็นต์ ) และ IV (52 เปอร์เซ็นต์ ) เมื่อเทียบกับกลุ่ม I
การปรับสภาพที่ซับซ้อนด้วยวิตามินอีและ ETS โดยแอคตินถัดไปของ Cr(VI) เป็นเวลา 7 วัน (กลุ่ม VII) และ 14 วัน (กลุ่ม VIII) ทำให้ปริมาณ LHP ในเนื้อเยื่อตับของหนูเพิ่มขึ้นเมื่อเทียบกับกลุ่ม II 17 และ 52 เปอร์เซ็นต์ ตามลำดับ อย่างไรก็ตาม การเพิ่มขึ้นของระดับ LHP ในตับของหนูในกลุ่ม VII (17 เปอร์เซ็นต์ ) และ VIII (52 เปอร์เซ็นต์ ) เทียบกับกลุ่ม II ลดลง 97 และ 75 เปอร์เซ็นต์ต่ำกว่าเปอร์เซ็นต์ที่เพิ่มขึ้นของปริมาณ LHP ในกลุ่มที่ 3 ที่เป็นเนื้อเดียวกันของตับ (114 เปอร์เซ็นต์) ) และ IV (127 เปอร์เซ็นต์ ) เทียบกับกลุ่ม I
ความเข้มข้นของ LHP ในไตของสัตว์ในกลุ่ม VII และ VIII เพิ่มขึ้นเมื่อเทียบกับกลุ่ม II โดย 16 และ 31 เปอร์เซ็นต์ ตามลำดับ
อย่างไรก็ตาม ปริมาณ LHP ที่เพิ่มขึ้นในไตของหนูในกลุ่ม VII (16 เปอร์เซ็นต์ ) และ VIII (31 เปอร์เซ็นต์) เมื่อเทียบกับกลุ่ม II ลดลง 23 และ 25% เมื่อเทียบกับการเพิ่มขึ้นของระดับ LHP ในเนื้อเยื่อไตของกลุ่ม III (39 เปอร์เซ็นต์) ) และ IV (56 เปอร์เซ็นต์ ) เทียบกับกลุ่ม I
ข้อมูลวรรณกรรมรายงานว่าวิตามินอีมีคุณสมบัติต้านอนุมูลอิสระที่มีประสิทธิภาพ ยับยั้งกระบวนการลิพิดเปอร์ออกซิเดชัน และลดระดับ ROS ในหลอดทดลอง และในร่างกาย [22] การให้วิตามินอีในช่องปากช่วยลดความเป็นพิษต่อตับที่เกิดจาก Cr(VI) และลดปริมาณ TBARS ในตับของหนู [19] สาเหตุของการลดลงของความเข้มข้นของกระบวนการเปอร์ออกซิเดชันในเนื้อเยื่อตับของหนูอาจเป็นคุณสมบัติของสารต้านอนุมูลอิสระของกำมะถันอีกกลุ่มหนึ่งซึ่งเป็นส่วนประกอบโครงสร้างของโมเลกุล ETS [32,42,43] กลุ่มฟังก์ชันนี้มีคุณสมบัติในการลดเนื้อหา LHP [41] S-alkylthiosulfonates ซึ่งเป็นอะนาลอกโครงสร้างสังเคราะห์ของ ETS ยับยั้งการทำงานของระบบ xanthine-xanthine oxidase และ ROS generation [27] วิตามินอีเป็นส่วนประกอบสำคัญของไซโตพลาสซึมและเยื่อหุ้มเซลล์ ฤทธิ์ต้านอนุมูลอิสระของวิตามินอีช่วยป้องกันการกระตุ้นปฏิกิริยาลูกโซ่ของการออกซิเดชันของไขมันโดยอัตโนมัติเนื่องจากการทำให้เป็นกลางของเปอร์ออกซิลและอนุมูลอัลออกไซด์ อนุมูลเพอร์ออกซิลยังทำปฏิกิริยากับวิตามินอีได้เร็วกว่าไขมันจากเยื่อหุ้มเซลล์ [14]
ดังนั้น ผลกระทบที่เป็นพิษของ Cr(VI) นำไปสู่การเพิ่มขึ้นของเนื้อหา TBARS และ LHP ในตับและเนื้อเยื่อไตของสัตว์ อย่างไรก็ตาม ผลกระทบก่อนหน้านี้ของวิตามินอีกับ ETS ช่วยลดความเข้มของกระบวนการเปอร์ออกซิเดชันในตับและไตของหนูภายใต้การกระทำ Cr(VI) ความเครียดจากปฏิกิริยาออกซิเดชัน
3.2. ระบบต้านอนุมูลอิสระกลูตาไธโอน
กิจกรรมของ GP เพิ่มขึ้นในเนื้อเยื่อตับของหนูภายใต้การกระทำของ Cr(VI) เป็นเวลา 7 (กลุ่ม III) และ 14 วัน (กลุ่ม IV) เทียบกับกลุ่ม I 55 และ 15 เปอร์เซ็นต์ ตามลำดับ (ตาราง 2).
การให้โพแทสเซียมไดโครเมตในช่องท้องเป็นเวลา 7 วัน (กลุ่ม III) ทำให้ปริมาณ GSH ของเซลล์ในเนื้อเยื่อตับของหนูเพิ่มขึ้น 12 เปอร์เซ็นต์เมื่อเทียบกับกลุ่มควบคุม (กลุ่ม I) ระดับ GSH ไม่แตกต่างจากค่าควบคุมในไตของสัตว์กลุ่ม III (K2Cr2O7 14 วัน) อย่างไรก็ตาม มีการลดลงของ GSH pool ในตับและไตของหนูหลังจาก 14 วันของการกระทำ Cr(VI) (กลุ่ม IV) เทียบกับกลุ่ม I โดย 34 เปอร์เซ็นต์ และ 36 เปอร์เซ็นต์ ตามลำดับ ในทางกลับกัน ความไวสูงของเนื้อเยื่อไตต่อความเป็นพิษที่เกิดจาก Cr(VI) อาจเป็นสาเหตุของการหยุดการทำงานของ GP ในไตของสัตว์กลุ่ม IV [1, 16]
ผู้เขียนยังแนะนำว่ากลไกการยับยั้ง GP ภายใต้สภาวะของความเป็นพิษของ Cr(VI) ทำได้โดยการติด Cr(VI) กับบริเวณที่ทำงานของเอนไซม์และการกำจัดโคแฟกเตอร์-โลหะโดยตรงจากไซต์ที่ทำงานอยู่ [25]
กิจกรรมของ GR ไม่เปลี่ยนแปลงในตับของสัตว์กลุ่มที่ 3 เทียบกับกลุ่มควบคุม แต่การได้รับ Cr(VI) 14 วันทำให้กิจกรรม GR ในเนื้อเยื่อตับของหนูของสัตว์ลดลง 17 เปอร์เซ็นต์เมื่อเปรียบเทียบกับกลุ่ม I นอกจากนี้ยังสังเกตการยับยั้งการทำงานของ GR ในเนื้อเยื่อไตของสัตว์หลัง 7 (กลุ่ม III) และ 14 (กลุ่ม IV) วันของการฉีด K2Cr2O7 เทียบกับกลุ่ม I 45 และ 43 เปอร์เซ็นต์ตามลำดับ
เราคิดว่า Cr(VI) - การลดลงของเนื้อหา GSH ที่เหนี่ยวนำอาจเป็นสาเหตุของการปราบปราม GR ในเนื้อเยื่อของหนูทั้งสอง [44-46] โมเลกุล GSH ให้สารอนุมูลอิสระเป็นกลางโดยตรง มีบทบาทสำคัญในกลไกการป้องกันสารต้านอนุมูลอิสระของเซลล์ [47] และมีส่วนร่วมในกระบวนการลด Cr(VI) [19] ดังนั้น การลดลงของปริมาณ GSH ในตับของหนูที่ได้รับผลกระทบจาก Cr(VI) อาจเป็นผลมาจากการใช้โมเลกุล GSH อย่างเข้มข้นในกระบวนการของ ROS และการทำให้เป็นกลางของอนุมูลอิสระภายใต้สภาวะของ K2Cr2O7- ทำให้เกิดความเครียดออกซิเดชัน
ข้อมูลในวรรณคดียังอธิบายกลไกโดยตรงของการยับยั้งกิจกรรม GR เนื่องจากการจับเฉพาะของโลหะหนักกับคู่รีดอกซ์ไทออล/ไทโอเลตและสารตกค้างของฮิสทิดีนในศูนย์กลางตัวเร่งปฏิกิริยาของรูปแบบที่ลดลงของเอนไซม์ จากนั้นไอออนของโลหะที่ถูกผูกไว้จะทำให้เกิดการเปลี่ยนแปลงในการดัดงอของวงแหวน isoalloxazine ของ FAD และการไม่ชอบน้ำของสภาพแวดล้อมจุลภาค ส่งผลให้การทำงานของเอนไซม์ของ GR ถูกยับยั้ง [48]
การบริหารวิตามินอี (กลุ่ม V) และวิตามินอีร่วมกับ ETS (กลุ่ม VI) ทำให้ระดับ GSH ในตับของหนูเพิ่มขึ้นเมื่อเทียบกับกลุ่ม II 15 และ 21 เปอร์เซ็นต์ตามลำดับ ผลกระทบที่ซับซ้อนก่อนหน้านี้ของวิตามินอีและ ETS โดยการกระทำถัดไปของ Cr(VI) เป็นเวลา 7 (กลุ่ม VII) และ 14 วัน (กลุ่ม VIII) ทำให้ปริมาณ GSH ในเนื้อเยื่อตับสูงขึ้นเมื่อเทียบกับกลุ่ม II ที่ 21 และ 23 เปอร์เซ็นต์ ตามลำดับ
เราไม่พบความแตกต่างที่มีนัยสำคัญทางสถิติในการเปลี่ยนแปลงของปริมาณ GSH ในเนื้อเยื่อสัตว์หลังการให้วิตามินอีและวิตามินอีร่วมกับ ETS เราสังเกตเพียงแนวโน้มที่จะเพิ่มระดับ GSH ในไตของสัตว์หลังการรักษาเป็นเวลา 14 วันด้วยวิตามินอีและวิตามินอีที่ซับซ้อนด้วย ETS
ตามวรรณกรรม วิตามินอีแสดงคุณสมบัติป้องกันตับและไตต่อความเป็นพิษที่เกิดจาก Cr(VI) คืนค่าเนื้อหา GSH และสนับสนุนการทำงานของเอนไซม์ AOS [14, 19] ผู้เขียนยังรายงานด้วยว่าไธโอซัลโฟเนตมีหน้าที่ในการกระตุ้นองค์ประกอบที่ตอบสนองต่อสารต้านอนุมูลอิสระ (ARE) ที่ขึ้นกับ Nrf2- ซึ่งกระตุ้นการกระตุ้นของเอนไซม์ระบบป้องกันสารต้านอนุมูลอิสระและการกำจัดอนุมูลอิสระ การกระตุ้น ARE ที่อาศัยไธโอซัลโฟเนตช่วยกระตุ้นการทำงานของการเข้ารหัสยีน -GCS บางทีกลไกที่คล้ายกันอาจเกี่ยวข้องกับการเพิ่มเนื้อหา GSH ภายใต้การกระทำของ ETS [26] ข้อมูลวรรณกรรมยังระบุด้วยว่าการกระตุ้น ARE กระตุ้นการแสดงออกของยีน GR และ GS เอนไซม์เหล่านี้มีบทบาทสำคัญในการสังเคราะห์และลดโมเลกุล GSH [49]
โมเลกุลของไธโอซัลโฟเนตยังมีความสามารถในการเปลี่ยนเป็นโมโน- ได- และไตรซัลไฟด์ เป็นไปได้ว่าผลิตภัณฑ์เปลี่ยนรูปที่มีกำมะถันของไธโอซัลโฟเนตอาจเกี่ยวข้องกับการสังเคราะห์ทางชีวภาพของโมเลกุล GSH ใหม่ [29]
การปรับสภาพที่ซับซ้อนด้วยวิตามินอีและ ETS โดยแอคตินถัดไปของ Cr(VI) เป็นเวลา 7 วัน (กลุ่ม VII) และ 14 วัน (กลุ่ม VIII) แสดงให้เห็นเพียงแนวโน้มที่จะฟื้นฟูกิจกรรม GP และ GR ในตับของหนู อย่างไรก็ตาม เราไม่พบความแตกต่างที่มีนัยสำคัญทางสถิติในกรณีนี้
การทำงานของวิตามินอีโดยเฉพาะ (กลุ่ม V) และร่วมกับ ETS (กลุ่ม VI) เป็นเวลา 14 วันทำให้เกิดการกระตุ้น GP ในเนื้อเยื่อไตของสัตว์เมื่อเทียบกับกลุ่ม II 19 และ 22 เปอร์เซ็นต์ตามลำดับ ผลกระทบที่ซับซ้อนก่อนหน้านี้ของวิตามินอีและ ETS โดยการกระทำถัดไปของ Cr(VI) เป็นเวลา 7 วัน ทำให้กิจกรรมของ GP เพิ่มขึ้น 38 เปอร์เซ็นต์ในไตของหนูในกลุ่ม VII เมื่อเทียบกับกลุ่ม II (ตารางที่ 2) อย่างไรก็ตาม การเพิ่มขึ้นของกิจกรรม GP ในไตของหนูกลุ่ม VII (38 เปอร์เซ็นต์) เมื่อเทียบกับกลุ่ม II ต่ำกว่าร้อยละ 47 ของ hyperactivation ของ GP ในเนื้อเยื่อไตของหนูกลุ่ม III (85 เปอร์เซ็นต์) เทียบกับกลุ่ม I
ในทางกลับกัน กิจกรรม GP ถูกยับยั้งโดย 16 เปอร์เซ็นต์ในเนื้อเยื่อไตของหนูหลังจากผลกระทบของวิตามินอีในเชิงซ้อนกับ ETS ก่อนหน้านี้เป็นเวลา 14 วันโดยการกระทำถัดไปของ Cr(VI) เป็นเวลา 14 วัน (กลุ่ม VIII) เมื่อเทียบกับกลุ่ม II อย่างไรก็ตาม การลดลงของกิจกรรม GP ในเนื้อเยื่อไตของสัตว์กลุ่ม VIII (16 เปอร์เซ็นต์) เมื่อเทียบกับกลุ่ม II ต่ำกว่าร้อยละ 11 ของการใช้ GP ในไตของหนูกลุ่ม III (27 เปอร์เซ็นต์) เมื่อเทียบกับกลุ่ม I เล็กน้อย กิจกรรม GR เพิ่มขึ้น (ร้อยละ 8) สังเกตได้หลังจาก 14 วันของการได้รับวิตามินอีและ ETS ที่ซับซ้อนในเนื้อเยื่อไตของสัตว์ในกลุ่ม VI เทียบกับกลุ่ม II
ผลกระทบที่ซับซ้อนก่อนหน้านี้ของวิตามินอีและ ETS โดยการกระทำถัดไปของ Cr(VI) เป็นเวลา 7 (กลุ่ม VII) และ 14 วัน (กลุ่ม VIII) ทำให้กิจกรรม GR ในไตของหนูลดลงเมื่อเทียบกับกลุ่ม II 17 และ 36 เปอร์เซ็นต์ , ตามลำดับ
อย่างไรก็ตาม ความเข้มข้นของการลดลงของกิจกรรม GR ในเนื้อเยื่อไตของหนูในกลุ่ม VII (17 เปอร์เซ็นต์ ) และ VIII (36 เปอร์เซ็นต์ ) เทียบกับกลุ่ม II ลดลง 28 และ 7 เปอร์เซ็นต์ ต่ำกว่าเปอร์เซ็นต์การหยุดการทำงานของ GR ในไตที่เป็นเนื้อเดียวกันของกลุ่ม III (45 เปอร์เซ็นต์ ) และ IV (43 เปอร์เซ็นต์ ) เมื่อเทียบกับกลุ่ม I
เราตั้งสมมติฐานว่าการรักษาเสถียรภาพบางส่วนของกิจกรรม GP และการลดลงของความเข้มข้นของการปราบปราม GR ในไตของหนูภายใต้การกระทำของ Cr(VI) ได้รับการไกล่เกลี่ยโดยผลของสารต้านอนุมูลอิสระของวิตามินอีและ ETS คอมเพล็กซ์ ผลการศึกษาที่อธิบายข้างต้นบ่งชี้ว่าการได้รับวิตามินอีและ ETS ก่อนหน้านี้ทำให้ความเข้มข้นของกระบวนการ LP ที่เกิดจาก Cr(VI) ในไตของหนูลดลง ตามวรรณกรรม การเพิ่มขึ้นอย่างรวดเร็วของเนื้อหา TBARS, LHP และโปรตีนเปอร์ออกไซด์จะมาพร้อมกับการหยุดชะงักของกิจกรรมของเอนไซม์ AOS ที่เกี่ยวข้องกับ GSH [50] เป็นไปได้ว่าฤทธิ์ต้านอนุมูลอิสระที่ซับซ้อนของวิตามินอีและ ETS จะทำให้การทำงานของเอนไซม์ของ GP และ GR เสถียรโดยการลดปริมาณ LHP และ TBARS ในเนื้อเยื่อไตของสัตว์
ดังนั้นการฉีด K2Cr2O7 ในช่องท้องเป็นเวลา 7 วันจะนำไปสู่การกระตุ้นการชดเชยเล็กน้อยของ GP และเพิ่มปริมาณ GSH ในตับของหนู นอกจากนี้ยังสังเกตการกระตุ้น GP เล็กน้อยหลังจาก 14 วันของการกระทำ Cr(VI) อย่างไรก็ตาม 14 วันของการสัมผัส K2Cr2O7 ทำให้เกิดการลดลงของ GSH pool ของตับและการยับยั้งกิจกรรม GR การลดปริมาณ GSH ที่เกิดจาก Cr(VI) จะช่วยขจัดในเนื้อเยื่อตับโดยการปรับวิตามินอีและ ETS ก่อนในกระเพาะอาหารที่ซับซ้อน การทำงานของ Cr(VI) เป็นเวลา 7 วันนำไปสู่การกระตุ้นการชดเชยของ GP และการปราบปราม GR ในไตของหนูแรท ในทางกลับกัน 14 วันของการสัมผัส K2Cr2O7 จะทำให้ GP, GR และเนื้อหา GSH ของไตไม่ทำงาน ผลกระทบที่ซับซ้อนก่อนหน้านี้ของวิตามินอีและ ETS ช่วยลดความรุนแรงของการหยุดการทำงานของ GR และทำให้กิจกรรมของ GP ในเนื้อเยื่อไตของหนูเสถียรขึ้นภายใต้สภาวะของความเครียดจากปฏิกิริยาออกซิเดชันของ K2Cr2O7-
3.3. เอนไซม์ต้านอนุมูลอิสระ
การฉีดโพแทสเซียมไดโครเมตในช่องท้องเป็นเวลา 7 และ 14 วันทำให้กิจกรรมของ SOD ในเนื้อเยื่อตับของสัตว์ในกลุ่ม III และ IV ลดลงเมื่อเทียบกับกลุ่ม I 17 และ 33 เปอร์เซ็นต์ ตามลำดับ (ตารางที่ 3) พบการกระตุ้น SOD หลังจาก 7 วันของการรักษา Cr(VI) ในเนื้อเยื่อไตของหนูกลุ่ม III (21 เปอร์เซ็นต์) แต่ 14 วันของการกระทำของ Cr(VI) ทำให้เกิดการปราบปรามของกิจกรรมของเอนไซม์ SOD ในไตของสัตว์กลุ่ม IV (18 เปอร์เซ็นต์) ) เทียบกับกลุ่ม I.
กิจกรรมของ CAT เพิ่มขึ้น 11 เปอร์เซ็นต์หลังจาก 7 วันของการสัมผัส Cr(VI) แต่ 14 วันของการบริหาร K2Cr2O7 มาพร้อมกับกิจกรรม CAT ที่ลดลง 13 เปอร์เซ็นต์ในเนื้อเยื่อตับของหนูในกลุ่ม IV เมื่อเทียบกับกลุ่ม I Cr(VI ) ความเป็นพิษเป็นเวลา 7 วันทำให้เกิดการกระตุ้นของ CAT (ร้อยละ 15) แต่ความเป็นพิษของ K2Cr2O7 เป็นเวลา 14 วันทำให้กิจกรรมของเอนไซม์ CAT ในเนื้อเยื่อไตของสัตว์กลุ่ม IV ลดลงเมื่อเทียบกับกลุ่ม I
ผู้เขียนรายงานว่าสาเหตุของการกระตุ้น SOD (ตับและไต) และ CAT (ตับ) ในเนื้อเยื่อของหนูกลุ่ม III อาจเป็นการแสดงออกของยีนต้านอนุมูลอิสระมากเกินไปหรือกลไกการชดเชยของระบบ AOS ต่อความเครียดจากปฏิกิริยาออกซิเดชันที่เกิดจาก Cr(VI) [51 ,52].
การวิเคราะห์ข้อมูลวรรณกรรมยังระบุว่า Cr(VI) เป็นตัวยับยั้งการทำงานของเอนไซม์ SOD บางที ข้อมูลนี้อาจอธิบายการยับยั้งการทำงานของ SOD หลังจากแอคตินที่เป็นพิษของ Cr(VI) เป็นเวลานานในเนื้อเยื่อของหนูในกลุ่ม IV (Cr(VI) เป็นเวลา 14 วัน) การกระทำที่เป็นพิษของ Cr(VI) นำไปสู่การยับยั้งการทำงานของเอนไซม์ SOD และการด้อยค่าของโครงสร้างโมเลกุล SOD อันเนื่องมาจากการทำให้กระบวนการเปอร์ออกซิเดชันเข้มข้นขึ้น [53] โลหะหนัก รวมทั้ง Cr(VI) มีความสามารถในการยับยั้งการทำงานของเอ็นไซม์ AOS หลังจากจับโดยตรงกับบริเวณที่ทำงานของเอนไซม์ที่เกี่ยวข้อง [54] หลังจากที่ปิดใช้งาน SOD แล้ว การเปลี่ยนรูปจะประมวลผล O2- เป็น H2O2 ด้วยเหตุนี้ การกระตุ้นด้วย Cr(VI) ของการสร้าง O2- และการยับยั้งกระบวนการใช้ O2- อาจเป็นสาเหตุของการหยุดการทำงานของเอนไซม์ AOS รวมถึง CAT [55]
โดยเฉพาะวิตามินอี (กลุ่ม V) และร่วมกับ ETS (กลุ่ม VI) กระตุ้นการทำงานของ CAT ในเนื้อเยื่อตับของสัตว์เมื่อเทียบกับกลุ่ม I ร้อยละ 15 และ 33 ตามลำดับ นอกจากนี้ยังมีการกระตุ้นที่เป็นไปได้ของ CAT ในไตหนูของกลุ่มทดลอง V และ VI เมื่อเทียบกับกลุ่ม II ที่ 23 และ 28 เปอร์เซ็นต์ตามลำดับ (ตารางที่ 3)
การปรับสภาพที่ซับซ้อนด้วยวิตามินอีและ ETS โดยแอคตินถัดไปของ Cr(VI) เป็นเวลา 7 วัน (กลุ่ม VII) และ 14 วัน (กลุ่ม VIII) ทำให้เกิดกิจกรรม CAT ในเนื้อเยื่อตับของหนูเพิ่มขึ้นเมื่อเทียบกับกลุ่ม II 17 และ 9 เปอร์เซ็นต์ , ตามลำดับ นอกจากนี้ยังพบการกระตุ้น CAT ในไตของหนูกลุ่ม VII (13 เปอร์เซ็นต์) เทียบกับกลุ่ม II อย่างไรก็ตาม กิจกรรมของเอนไซม์ CAT ในเนื้อเยื่อไตของสัตว์กลุ่ม VIII ยังคงอยู่ที่ระดับตัวชี้วัดของกลุ่ม II
ข้อมูลวรรณคดีรายงานว่าวิตามินอีป้องกันการสูญเสียการทำงานของเอนไซม์ SOD, CAT และเอนไซม์ AOS อื่น ๆ ในเนื้อเยื่อของหนูและหนูภายใต้สภาวะความเครียดออกซิเดชัน [56,57] วิตามินอียังช่วยลดความเครียดที่เกิดจากออกซิเดชันที่เกิดจาก Cr(VI) ในอัณฑะของหนู เนื่องจากการคืนค่า SOD และการทำงานของ CAT และลดความเข้มของกระบวนการ LP [58]
ไธโอซัลโฟเนตมีส่วนเกี่ยวข้องในการกระตุ้นด้วย Nrf2-ขึ้นอยู่กับการกระตุ้นยีน AOS [26] การกระตุ้นของ Nrf2 นำไปสู่การเพิ่มการแสดงออกของยีนที่เข้ารหัส CAT [59] อัลลิซินซึ่งเป็นหนึ่งในสารคล้ายคลึงตามธรรมชาติของไธโอซัลโฟเนตมีส่วนเกี่ยวข้องในการกระตุ้นยีนที่รับผิดชอบในการแสดงออกของ SOD, CAT และ Nrf2 [60] เป็นไปได้ว่าคุณสมบัติต้านอนุมูลอิสระข้างต้นของวิตามินอี ไธโอซัลโฟเนต และสารที่คล้ายคลึงตามธรรมชาติของพวกมันอาจเป็นสาเหตุของการฟื้นฟูกิจกรรมของเอนไซม์ CAT ภายใต้การกระทำของความเครียดออกซิเดชันที่เกิดจาก Cr(VI)
4. บทสรุป
ไม่ค่อยมีใครรู้จักเกี่ยวกับคุณสมบัติต้านอนุมูลอิสระของไธโอซัลโฟเนต นอกจากนี้ยังมีข้อมูลเพียงพอที่อธิบายคุณสมบัติในการป้องกันของไทโอซัลโฟเนตต่อความเป็นพิษที่เกิดจากโลหะหนักในเนื้อเยื่อของสิ่งมีชีวิตในสัตว์ การศึกษาก่อนหน้านี้ของเราระบุว่าการปรับสภาพ ETS ก่อนอาจมีประสิทธิภาพในการแก้ไขความเป็นพิษต่อตับที่เกิดจาก Cr(VI) ในสิ่งมีชีวิตในหนูแรท เราคิดว่าการศึกษาเพิ่มเติมเกี่ยวกับคุณสมบัติของสารต้านอนุมูลอิสระของ ETS ร่วมกับสารต้านอนุมูลอิสระและสารลดขนาดเซลล์มีความสำคัญต่อความเข้าใจที่ดีขึ้นเกี่ยวกับบทบาทของไธโอซัลโฟเนตในกลไกของการป้องกันความเครียดจากปฏิกิริยาออกซิเดชันที่เกิดจากโลหะหนัก
ลักษณะทั่วไปของผลลัพธ์ที่ได้บ่งชี้ว่าการกระทำของ K2Cr2O7 ทำให้เกิดพิษต่อตับและไตที่เกิดจาก Cr(VI) อันเนื่องมาจากการเพิ่มความเข้มข้นของกระบวนการ LP และความสูงของการสร้าง LHP และ TBARS ในเนื้อเยื่อของสัตว์ทั้งสอง ระบบ AOS เกี่ยวข้องกับกลไกการชดเชยเพื่อต่อต้านความเครียดออกซิเดชันที่เกิดจาก Cr(VI) กลไกเหล่านี้มาพร้อมกับการกระตุ้น SOD, CAT และ GP ในเนื้อเยื่อไต เช่นเดียวกับการกระตุ้น CAT, GP และการสะสมของ GSH ในตับของหนูหลังจาก 7 วันของการสัมผัส Cr(VI) อย่างไรก็ตาม การทำงานของ Cr(VI) ที่นานขึ้นเป็นเวลา 14 วันจะทำให้ทรัพยากรระบบ AOS หมดไปเนื่องจากการหยุดการทำงานของเอนไซม์ต้านอนุมูลอิสระ (SOD, CAT, GR, GP) และการลดลงของ GSH Pool ในเนื้อเยื่อตับและไตของสัตว์ คอมเพล็กซ์ของวิตามินอีและ ETS แสดงฤทธิ์ต้านอนุมูลอิสระต่อความเป็นพิษที่เกิดจาก Cr(VI) การปรับสภาพทางเดินอาหารของคอมเพล็กซ์นี้เป็นเวลา 14 วันจะแสดงด้วยการลดลงของกระบวนการ LP ที่เกิดจาก Cr(VI) ในตับและไตของหนูแรท ผลกระทบของวิตามินอีและ ETS ก่อนหน้านี้ยังช่วยป้องกันการสูญเสีย CAT และ GSH ในตับ รวมทั้งขจัดความรุนแรงของการหยุดการทำงานของ CAT ทำให้กิจกรรม GP และ GR คงที่ในเนื้อเยื่อไตของสัตว์ภายใต้สภาวะของ K2Cr2O7-เกิดปฏิกิริยาออกซิเดชัน ความเครียด. วิตามินอีโดยเฉพาะอย่างยิ่งและซับซ้อนด้วย ETS ยับยั้งการยกระดับ LHP และกระตุ้น CAT ในเนื้อเยื่อของหนูทั้งสอง ฤทธิ์ต้านอนุมูลอิสระของสารเหล่านี้ยังนำไปสู่การสะสม GSH ของตับและการกระตุ้น GP ของไต
ผลที่ได้รับบ่งชี้ว่าการปรับสภาพวิตามินอีและ ETS บางส่วนทำให้เกิดการรบกวนที่เกิดจาก Cr(VI) ที่เสถียรบางส่วนในกลไกการทำงานของระบบป้องกันสารต้านอนุมูลอิสระในไตของหนู นอกจากนี้ ผลการศึกษาของเราอาจกลายเป็นส่วนหนึ่งของพื้นฐานสำหรับการสร้างวิธีการที่มีประสิทธิภาพในการป้องกันและแก้ไขสภาวะของสารต้านอนุมูลอิสระและโปรออกซิแดนท์ในไตที่ได้รับผลกระทบจากการกระทำของความเครียดออกซิเดชันที่เกิดจาก Сr(VI)
1 ภาควิชาการปรับตัวทางชีวเคมีและการสร้างเซลล์สืบพันธุ์ของสัตว์; สถาบันชีววิทยาสัตว์ของ NAAS; ลวีฟ; ยูเครน
2 ภาควิชาเทคโนโลยีสารออกฤทธิ์ทางชีวภาพ; เภสัชและเทคโนโลยีชีวภาพของ Lviv Polytechnic National University; ยูเครน
อ้างอิง
1. ซาฮาร์ โฮ; Sherif, MS สรรพคุณของน้ำมันเมล็ดองุ่นต่อความเป็นพิษต่อไตที่เกิดจากโครเมียมและความเครียดจากปฏิกิริยาออกซิเดชันในหนูแรท สโลวีเนียสัตวแพทย์ Zbornik วิจัย 2020, 57, 123- 131.
2. Husain, N.; Mahmood, R. Taurine ลดทอนความเสียหายของเซลล์และ DNA ที่เกิดจาก Cr(VI): การศึกษาในหลอดทดลองโดยใช้เม็ดเลือดแดงและลิมโฟไซต์ของมนุษย์ กรดอะมิโน2020, 52, 35-53
3. Tian-Guang, Z.; Ya-Li, Z.; เล่ย ลี่.; Dong-Hai, Z. ผลกระทบที่เป็นปฏิปักษ์ของนาโนซีลีเนียมต่อการบาดเจ็บที่ตับของไก่เนื้อที่เกิดจากพิษ Cr (VI) ในวิถี AMPK การวิจัยทางวิทยาศาสตร์สิ่งแวดล้อมและมลพิษระหว่างประเทศ 2020, 27, 41585-41595
4. Farag, AI; El-Sherry, ความเป็นพิษต่อตับที่เกิดจาก ES Chromium และผลในการป้องกันซีลีเนียมในหนูแรทตัวผู้ที่โตเต็มวัย: การศึกษาทางเนื้อเยื่อวิทยา อิมมูโนฮิสโตเคมี และโมเลกุล เมดิ. เจ. มหาวิทยาลัยไคโร 2020, 88, 187- 196.
5. Shih-Chang, F.; Jui-Ming, L.; Kuan-I, L.; เฟิงเฉิง ต.; ไค-มิน, เอฟ.; ชิงเหยา Y.; ชิน-ชวน, S.; Hsin-Hung, C.; Ren-Jun, H.; Ya-Wen, C.Cr(VI) กระตุ้นกระบวนการอะพอพโทซิสที่ขึ้นกับไมโตคอนเดรียที่อาศัย ROS ในเซลล์ประสาทผ่านการกระตุ้นเส้นทางการส่งสัญญาณ Akt/ERK/AMPK พิษวิทยา ในหลอดทดลอง 2020, 65, 1- 16.
6. Fedala, A.; Adjroud โอ.; อาบิด-เอสเซฟี, เอส.; Timoumi, R. ผลการป้องกันของซีลีเนียมและสังกะสีต่อการหยุดชะงักของต่อมไทรอยด์ที่เกิดจากโพแทสเซียมไดโครเมต ความเครียดจากปฏิกิริยาออกซิเดชัน และความเสียหายของดีเอ็นเอในหนู Wistar ที่ตั้งครรภ์ Environ Sci Pollut Res Int 2021
7. เขา X.; Li, P. มลพิษทางน้ำผิวดินในที่ราบสูง Loess ของจีนตอนกลางโดยเน้นที่ Hexavalent Chromium (Cr6 plus): การเกิดขึ้น แหล่งที่มา และความเสี่ยงด้านสุขภาพ Exposure and Health 2020, 12, 1- 17, https://doi.org/10.1007/s12403-020-00344-x.
8. เฉิน YQ; เมอร์ฟี่ เอ.; ซันเอช.; Costa M. กลไกระดับโมเลกุลและอีพีเจเนติกของการก่อมะเร็งที่เกิดจาก Cr(VI) พิษวิทยาและเภสัชวิทยาประยุกต์ 2019, 377, 1-9,
https://doi.org/10.1016/j.taap.2019.114636.
9. Machado, AB; คาปรารา เจเอฟ; Diehl de Franceschi, ฉัน.; ลินเดน, อาร์.; เบอร์ลิน, ฐานข้อมูล; Feksa, LR ผลของการสัมผัสเรื้อรังกับโครเมียมเฮกซะวาเลนท์ในน้ำต่อพารามิเตอร์ความเครียดออกซิเดชันในหนู Wistar Acta Scientiarum Biological Sciences 2019, 41, 1- 10.
10. ฟาตมา, ม.; Raghda, A.; Mohamed, M. Hepatoprotective ศักยภาพของน้ำมันหอมระเหย Rosmarinus officinalis ต่อการเปลี่ยนแปลงทางโลหิตวิทยาที่เกิดจากเฮกซะวาเลนท์โครเมียม การเปลี่ยนแปลงทางชีวเคมี การตรวจเนื้อเยื่อ และอิมมูโนฮิสโตเคมีในหนูเพศผู้ การวิจัยวิทยาศาสตร์สิ่งแวดล้อมและมลพิษ 2564, 28, 17445– 17456.
11. วัง Y.; วัง X .; วังแอล.; เฉิงจี .; จางม.; ซิง, ย.; จ้าว X.; หลิว วาย.; Liu, J. Mitophagy ที่เกิดจากความเสียหายของการทำงานของ Mitochondrial ในไตไก่ที่สัมผัสกับ Cr (VI) การวิจัยองค์ประกอบการติดตามทางชีวภาพ 2021, 199, 703-711
12. เจิ้ง X.; หลี่เอส.; หลี่ เจ.; Lv, Y.; วัง X .; วู, พี.; หยาง, คิว; ทัง, วาย.; หลิว วาย.; Zhang, Z. Hexavalent chromium ทำให้เกิด apoptosis ของไตและ autophagy ผ่านความไม่สมดุลของพลวัตของ mitochondrial ในหนู พิษวิทยาต่อระบบนิเวศและความปลอดภัยด้านสิ่งแวดล้อมปี 2020, 204, 1-9
13. หยาง ดี.; หยาง, คิว; สนุก.; หลี่เอส.; ฮัน บี.; หลิว วาย.; ทัง, วาย.; กัว, X.; ระดับ Z.; Zhang, Z. Hexavalent chromium ทำให้เกิดความผิดปกติของหัวใจผ่านทาง Sesn2-การด้อยค่าของไมโตคอนเดรียที่เป็นสื่อกลางและการจัดหาพลังงาน เคมีสเฟียร์ 2021, 264, 1- 10.
14. Balakrishnan, R.; Satish Kumar, CS; รานี มิวเซียม; ศรีกันต์, เอ็มเค; บูบาลัน, จี.; Reddy, AG การประเมินบทบาทการป้องกันของ -tocopherol ต่อความเป็นพิษต่อตับและความเป็นพิษต่อไตที่เกิดจากอนุมูลอิสระที่เกิดจากโครเมียมในหนูแรท วารสารเภสัชวิทยาอินเดีย 2013, 45, 490-495.
15. จาง วาย.; เบียน, เอช.; พฤษภาคม.; เสี่ยว วาย.; Xiao, F. Cr (VI) กระตุ้น mitophagy ที่โอ้อวดทำให้เกิดการสูญเสีย mitochondrial และความเป็นพิษต่อเซลล์ในเซลล์ตับ L02 วารสารชีวเคมี 2020, 477, 2607-2619.
16. Saidi, M.; Aouacheri, O.; สากะ ส.; Tebboub, I.; Ailene, L. Nephron-protective effects of Curcuma ต่อความเสียหายจากปฏิกิริยาออกซิเดชันและความเครียดจากปฏิกิริยาออกซิเดชันในหนูภายใต้พิษกึ่งเรื้อรังของโครเมียม อินเตอร์ เจ. ไบโอซี 2019, 15, 241-250.
17. หลี่ เจ.; เจิ้ง X .; แม่ X .; Xu, X .; ดู่, วาย.; Lv, Q.; หลี่ X .; หวู่ Y.; ซัน, เอช.; Yu, L.; Zhang, Z. เมลาโทนินป้องกันอาการบาดเจ็บที่หัวใจที่เกิดจากโครเมียม (VI) ผ่านการเปิดใช้งานเส้นทาง AMPK/Nrf2 วารสารของ
ชีวเคมีอนินทรีย์ 2019, 197, 1- 10.
18. วิทยาศาสตร์โดยตรง.
19. Shati, AA Ameliorative effect ของวิตามินอีต่อความเป็นพิษต่อตับที่เกิดจากโพแทสเซียมไดโครเมตในหนู วารสารมหาวิทยาลัย King Saud - Science2014, 6, 181- 189
20. Khalaf, AA; Hassanen, EI; Ibrahim, MA; Tohamy, AF; Aboseada, MA; Hassan, HM; Zaki, AR
กรด Rosmarinic ลดทอนความเสียหายที่เกิดจากออกซิเดชันของตับและไตที่เกิดจากโครเมียมและความเสียหายของ DNA ในหนูแรท วารสารชีวเคมีและอณูพิษวิทยา 2020, 34, 1- 12.