สารต้านอนุมูลอิสระและศักยภาพในการต่อต้านริ้วรอยของสูตรเปปไทด์ (Gal2–Pep) ร่วมกับกรดแกลลิก Ⅱ

3. ผลลัพธ์และการอภิปราย

3.1. การสังเคราะห์และการผันกรดแกลลิกด้วยเปปไทด์

เปปไทด์ที่สังเคราะห์ได้ TPPTTP, galloyl–TPPTTP (Gal–Pep) และ Gal2–Pep ได้รับและทำให้บริสุทธิ์โดยใช้ RP- แบบกึ่งเตรียมHPLC. รูปที่ 1a และ Scheme 1 แสดงกลยุทธ์การผันคำกริยาของกรดแกลลิกกับ KTPPTTP เป็น Gal2–Pep ในวิธี SPPS สิ่งเจือปนที่เกิดขึ้นระหว่างการสังเคราะห์เปปไทด์มักจะรวมถึงเปปไทด์ที่ทำปฏิกิริยาข้างเคียง กลุ่มปกป้องกรดอะมิโน และตัวทำละลายที่ใช้สำหรับการสังเคราะห์และการทำให้บริสุทธิ์ HOBt ที่ใช้ในการสังเคราะห์เปปไทด์เป็นที่ทราบกันดีว่ายับยั้ง racemization และปรับปรุงประสิทธิภาพของการสังเคราะห์เปปไทด์17–19 เพื่อกำจัดกลุ่มที่ปกป้องกรดอะมิโนและตัวทำละลายที่ใช้ในการสังเคราะห์ เราทำการล้างหลายครั้งโดยใช้ตัวทำละลายเช่น DMF และ DCM ในระหว่าง กระบวนการสังเคราะห์เปปไทด์ แม้หลังจากขั้นตอนการซักครั้งสุดท้าย สิ่งสกปรกรวมถึงกลุ่มปกป้องกรดอะมิโนยังคงอยู่ในปริมาณที่น้อย เพื่อให้ตรงกับความบริสุทธิ์ของเปปไทด์มากกว่า 90 เปอร์เซ็นต์ที่รายงานโดยนักวิจัยหลายคน HPLC แบบกึ่งเตรียม 20–22 ถูกดำเนินการเป็นขั้นตอนการขัดเพื่อให้ได้เปปไทด์ nal ที่มีความบริสุทธิ์ 99.2 เปอร์เซ็นต์อันเป็นผลมาจากการวิเคราะห์ HPLC (ดูรูปที่ S1†). ผลิตภัณฑ์เปปไทด์บริสุทธิ์ได้รับการวิเคราะห์โดยใช้ Q-TOF เพื่อยืนยันการสังเคราะห์ที่ประสบความสำเร็จอีกครั้ง (รูปที่ 1b–d)

KSL11

คลิกที่นี่เพื่อรับข้อมูลเพิ่มเติมเกี่ยวกับ Cistanche Treat Anti-Aging

3.2. การทดสอบความมีชีวิตของเซลล์

เพื่อตรวจสอบความเป็นพิษต่อเซลล์ของเปปไทด์ที่สังเคราะห์ขึ้น HaCaT และเซลล์ไฟโบรบลาสต์ผิวหนังของมนุษย์ได้รับการรักษาด้วยความเข้มข้นต่างๆ ของ GA, TPPTTP, Gal–Pep และ Gal2–Pepเป็นเวลา 24 ชั่วโมงและวิเคราะห์โดยใช้การทดสอบ CCK-8 มันเป็นความขัดแย้งไฟกำหนดว่าเปปไทด์ที่สังเคราะห์ขึ้นไม่มีพิษบนเซลล์ที่ผ่านการบำบัดแล้วที่มีความมีชีวิตของเซลล์อย่างน้อย 88 เปอร์เซ็นต์สำหรับตัวอย่างทั้งหมดและทั้งหมดความเข้มข้นที่ทดสอบ (รูปที่ 2a และ b) แสดงว่า TPPTTPกัล–เป๊ป และกัล2–Pep เหมาะสำหรับใช้ในเครื่องสำอางไอออนบวก นอกจากนี้ยังถูกต่อต้านไฟจัดทำโดย MTT, LDH และ Griessน้ำยาทดสอบว่าnal peptide ไม่ก่อให้เกิดความเป็นพิษใน HAและ F และในชั้นการตอบสนองทางกระสุนใน raw 264.7 (รูปที่ S2–S4†).

3.3. ฤทธิ์ต้านอนุมูลอิสระของเปปไทด์สังเคราะห์

กลไกที่เกี่ยวข้องในริ้วรอยแห่งวัยรวมกิจกรรม ROSการกลายพันธุ์ของไมโตคอนเดรียลดีเอ็นเอการลดลงของเทโลเมียร์ และการเปลี่ยนแปลงของฮอร์โมน โดยเฉพาะในผู้หญิง23 ROS ทำหน้าที่เป็นเซลล์โมเลกุลส่งสัญญาณสำหรับกระบวนการต่างๆ ของเซลล์ เช่น ความแตกต่างและการขยายพันธุ์.24 อย่างไรก็ตาม ROS ที่มากเกินไปอาจนำไปสู่ความแตกแยกและการจับตัวกันที่ผิดปกติของโซ่คอลลาเจนและอีลาสตินและเพิ่มการแสดงออกของ MMP-1 ซึ่งเป็นเอนไซม์ที่แตกตัวคอลลาเจนลดลงจึงเร่งอายุและการตายของเซลล์ ที่นั่นประการแรก สิ่งสำคัญคือต้องกำจัด ROS ออกจากเซลล์ผิวเพื่อส่งเสริมการต่อต้านริ้วรอยเอฟเฟกต์. ในการศึกษานี้ เรายืนยันกระตุ้นการทำงานของสารต้านอนุมูลอิสระเปปไทด์ที่สังเคราะห์ขึ้นผ่านการทดสอบ DPPH และ DCF-DAรูปที่ 3a นำเสนอผลลัพธ์ของกิจกรรมการขับออกอย่างรุนแรงของเปปไทด์ที่สังเคราะห์ขึ้นที่วัดโดยใช้การทดสอบ DPPH

TPPTTP ไม่มีกิจกรรมการกำจัดอนุมูลที่ความเข้มข้นใด ๆ ในขณะที่ GA, Gal–Pep และ Gal2–Pep แสดงกิจกรรมการกำจัดอนุมูลสูงกว่าในลักษณะที่ขึ้นกับความเข้มข้น

KSL02

ในโดยเฉพาะกัล2–เป๊ปแสดงให้เห็นถึงประสิทธิภาพสูงสุดสารต้านอนุมูลอิสระกิจกรรม; ที่ความเข้มข้น 10mเอ็ม, จอร์เจีย, แกลลอน–เป๊ป และกัล2–ห้าวหาญมีฤทธิ์กำจัดอนุมูล 13.6 เปอร์เซ็นต์ 24.23 เปอร์เซ็นต์ และ 26.0 เปอร์เซ็นต์ตามลำดับ สิ่งนี้บ่งชี้ว่าการรวม TPPTTP กับ GA มีผลไม่ยับยั้งการขับของเสียจากอนุมูลอิสระ รูปที่ 3b coเอ็นไฟrms ที่ความเสถียรของตัวอย่างเป็น conไฟrmed โดยการประเมินความรุนแรงของพวกเขาฤทธิ์กำจัดเมื่อเก็บไว้ที่อุณหภูมิห้อง GA ยังคงอยู่กิจกรรมการกำจัดอย่างรุนแรงเป็นเวลาถึงหนึ่งสัปดาห์ แต่ กฟุตเอ้อ สองสัปดาห์กิจกรรมนี้ลดลงมากกว่าร้อยละ 60 ในอีกด้านหนึ่งมือกัล–เป๊ปและกัล2–Pep ยังคงกิจกรรมการกำจัดของพวกเขาเป็นเวลากว่าสองสัปดาห์ โดยเฉพาะกัล2–เป๊บเป็นคนหัวรุนแรงกิจกรรมมีส่วนร่วม 50 เปอร์เซ็นต์แม้ในสัปดาห์ที่สี่ ผลลัพธ์เหล่านี้แนะนำว่าการรวม GA กับ TPPTTP ทำให้การไล่ออกอย่างรุนแรงมีความเสถียรกิจกรรม. การศึกษาบางชิ้นแสดงให้เห็นว่ากรดแอสคอร์บิกมีความเสถียรโดยจับกับเปปไทด์12,25 เราเชื่อว่า GA อาจมีเสถียรภาพถูกผูกมัดด้วยเปปไทด์ในลักษณะเดียวกัน

เดอะฤทธิ์ต้านอนุมูลอิสระของเปปไทด์ยังได้รับการทดสอบโดยใช้การทดสอบ DCF DA ต่อหน้าความเครียดออกซิเดชันภายในเซลล์ที่เกิดจาก H2O2 (รูปที่ 4) ในเวลา 24 ชั่วโมงของการบำบัดตัวอย่างบนเซลล์ที่ความเข้มข้น 100 มิลลิโมลาร์ DCF-DA ถูกโหลดลงบนเซลล์ จากนั้นเซลล์จะถูกบำบัดด้วย H2O2 เป็นเวลา 30 นาที และสังเกตความเข้มของการเรืองแสงของ DCF ที่การกระตุ้น ความยาวคลื่น 485 นาโนเมตร และความยาวคลื่นที่ปล่อยออกมา 535 นาโนเมตร เซลล์ที่ได้รับความเครียดจากปฏิกิริยาออกซิเดชันที่มี H2O2 1 mM แสดงความเข้มของฟลูออเรสเซนซ์ที่สูงกว่ากลุ่มควบคุมเชิงลบมากกว่าสามเท่า อย่างไรก็ตาม การรักษาด้วย Gal2–Pep ทำให้เกิดการเรืองแสงที่มีเพียง 67 เปอร์เซ็นต์ของเซลล์ที่ผลิตโดยเซลล์ที่รักษาด้วย H2O2 เท่านั้น เมื่อมี TPPTTP ซึ่งไม่แสดงกิจกรรมการกำจัดที่รุนแรง (รูปที่ 3a) ความเครียด ROS ที่เกิดจาก H2O2 ลดลงประมาณ 20 เปอร์เซ็นต์ ซึ่งสนับสนุนงานวิจัยก่อนหน้านี้ที่รายงานว่า TPPTTP ลดระดับ ROS ในเซลล์ 24 เมื่อเซลล์ ได้รับการปฏิบัติด้วย GA เท่านั้น ไม่มีการเปลี่ยนแปลงระดับ ROS ที่มีนัยสำคัญ เมื่อนำมารวมกัน ผลลัพธ์เหล่านี้บ่งชี้ว่า Gal2–Pep ซึ่งรวมโมเลกุล GA สองโมเลกุลเข้ากับเปปไทด์ เป็นสารต้านอนุมูลอิสระที่เสถียรและมีประสิทธิภาพ

3.4. ผลของเปปไทด์ที่สังเคราะห์ขึ้นต่อศักยภาพเยื่อหุ้มเซลล์ของไมโทคอนเดรีย

ในการศึกษานี้ ใช้สีย้อม JC-1 เพื่อตรวจสอบผลของเปปไทด์ที่สังเคราะห์ขึ้นต่อ MmP (DJm) MmP ทำหน้าที่เป็นพารามิเตอร์ที่สำคัญสำหรับการทำงานของไมโตคอนเดรีย และเป็นที่ทราบกันดีว่าเกี่ยวข้องกับโรคต่างๆ เช่น อัลไซเมอร์และโรคฮันติงตัน26 สีย้อม JC-1 ทำให้เกิดเสื้อแดงจากการปล่อยสีเขียวโดยสะสมในไมโตคอนเดรียและก่อตัวเป็น J-aggregates หลังจากบำบัดเซลล์ HaCaT และไฟโบรบลาสต์ด้วยเปปไทด์ที่สังเคราะห์ได้เป็นเวลา 24 ชั่วโมง เซลล์จะถูกสัมผัสกับสีย้อม JC-1 เป็นเวลา 10 นาที จากนั้นจึงวัดความเข้มของการเรืองแสงโดยใช้เครื่องอ่านไมโครเพลท (สีเขียว lEx ¼ 475 นาโนเมตร และ lEm ¼ 530 นาโนเมตร, สีแดง lEx ¼ 475 นาโนเมตร และ lEm ¼ 590 นาโนเมตร) อัตราส่วนของการเรืองแสงสีแดงต่อสีเขียวแสดงเป็นการเปลี่ยนแปลงแบบพับเมื่อเทียบกับกลุ่มควบคุมเชิงลบ (รูปที่ 5) เซลล์ HaCaT ที่บำบัดด้วย GA และเปปไทด์โดยอิสระต่อกันไม่แสดงการเปลี่ยนแปลงที่มีนัยสำคัญใดๆ เมื่อเทียบกับกลุ่มควบคุมเชิงลบ ในขณะที่ Gal2–Pep แสดงความแตกต่างที่มีนัยสำคัญ โดยเพิ่มขึ้น 1.45-เท่าเมื่อเทียบกับกลุ่มควบคุม เซลล์ไฟโบรบลาสต์ที่ได้รับการรักษาด้วย Gal2–Pep ก็มีนัยสำคัญเช่นกัน

เพิ่มขึ้น 1.12-เท่าเมื่อเทียบกับกลุ่มควบคุมเชิงลบ การเพิ่มขึ้นของ MmP ด้วยการรักษาด้วย Gal2–Pep บ่งชี้อย่างชัดเจนว่า Gal2–Pep เป็นสารชีวโมเลกุลที่สามารถใช้ในเครื่องสำอางต่อต้านริ้วรอยได้

cistanche anti-aging

รูปที่ 4 ตรวจสอบฤทธิ์ต้านอนุมูลอิสระภายในเซลล์โดยใช้ DCF-DA ที่กรดแกลลิกและเปปไทด์ความเข้มข้น 100 มิลลิโมลาร์ หลังการบำบัด 24 ชั่วโมง H2O2 ถูกเติมและบ่มเป็นเวลา 30 นาที ตามด้วยการวัดความเข้มของการเรืองแสง DCF เครื่องหมายดอกจันแสดงถึงความแตกต่างที่มีนัยสำคัญทางสถิติ (*p < 0.05, **p < 0.005, ***p < 0.001)

cistanche anti-aging

รูปที่ 5 การวัดศักยภาพของเยื่อไมโตคอนเดรียโดยใช้สีย้อม JC-1 ใน (a) เซลล์ HaCaT และ (b) ไฟโบรบลาสต์ผิวหนัง เครื่องหมายดอกจันแสดงถึงความแตกต่างที่มีนัยสำคัญทางสถิติ (*p < 0.05, **p < 0.005, ***p<0.001)

cistanche anti-aging

รูปที่ 6 การวัดกิจกรรมอีลาสเตสในไฟโบรบลาสต์ผิวหนังที่กรดแกลลิกและเปปไทด์เข้มข้น 100 มิลลิโมลาร์ เครื่องหมายดอกจันแสดงถึงความแตกต่างที่มีนัยสำคัญทางสถิติ (*p < 0.05, **p < 0.005, ***p < 0.001)

3.5. กิจกรรมยับยั้ง Elastase

Elastase ส่งเสริมการแก่ของผิวหนังโดยการสลายคอลลาเจนหรืออีลาสตินในผิวหนัง ดังนั้นจึงสามารถป้องกันการแก่ของผิวหนังโดยการยับยั้ง elastase27 รูปที่ 6 แสดงการทำงานของ elastase ใน CCD-1064Sk cellsปฏิบัติกับแต่ละตัวอย่าง TPPTTP มีเอฟเฟกต์ที่หายากบนอีลาสเตสการยับยั้ง อย่างไรก็ตาม การรักษาด้วยกรดแกลลิก,กัล–ห้าวหาญและกัล2–Pep แสดงกิจกรรม elastase ร้อยละ 69 ร้อยละ 84 และร้อยละ 76ตามลำดับ กัล2–Pep ยับยั้ง elastase น้อยกว่า 7 เปอร์เซ็นต์จอร์เจีย อย่างไรก็ตาม เมื่อพิจารณาผลการตรวจวัดของฤทธิ์ต้านอนุมูลอิสระเสถียรภาพในระยะยาวและยลศักย์เยื่อหุ้มเซลล์ Gal2–ห้าวหาญมีประสิทธิภาพมากขึ้นกว่า GA เป็น anสารต่อต้านริ้วรอย

cistanche anti-aging

3.6. การแสดงออกของคอลลาเจนประเภท I, MMP-1 และยีน PGC-1a

รูปที่ 7 แสดงข้อมูล RT-qPCR ของคอลลาเจนประเภท I, MMP-1 และ PGC-1การแสดงออกของยีน คอลลาเจนประเภทที่ 1 ซึ่งเป็นองค์ประกอบหลักของกลุ่มคอลลาเจนที่พบในผิวหนังจะลดลงเมื่ออายุมากขึ้นความคืบหน้า28 เมื่อกัล2–ห้าวหาญถูกนำมาใช้เพื่อรักษาไฟโบรบลาสต์สำหรับ8 ชั่วโมงและ 24 ชั่วโมง การแสดงออกของคอลลาเจนชนิดที่ 1 เพิ่มขึ้นประมาณ 1.19- และ 1.{3}}เท่า ตามลำดับ กับ GA และกัล–ห้าวหาญไม่มีนัยสำคัญเปลี่ยนฟุตเอ้อ 2 ชั่วโมงและ 8 ชั่วโมง แต่การแสดงออกของคอลลาเจน type I เพิ่มขึ้น 1.16- และ 1.26- เท่าหลังจาก 24h ตามลำดับ ด้วยการรักษา TTPTTP อย่างไรก็ตามการแสดงออกเพิ่มขึ้น 1.24-เท่าตัวในไฟ2 ชั่วโมงแรกแล้วค่อยๆลดลง กฟุตเอ้อ 24 ชั่วโมง ระดับการแสดงออกคล้ายกับของการควบคุมเชิงลบ (รูปที่ 7a) สำหรับ MMP-1 ระดับการแสดงออกของ{{0}}.43, 0.44 และ 0.68-เท่าที่สังเกตฟุตเอ้อ 24 ชม. กับ GA, Gal–เป๊ป และกัล2–การรักษาห้าวหาญตามลำดับ นอกจากนี้ระดับการแสดงออกด้วยการรักษา GA เพิ่มขึ้น 1.46-เท่าหลังจาก 2ชม. ด้วย TPPTTP นิพจน์ MMP{{0}} ลดลง 0.87-เท่าหลังจาก 2h แต่ต่อมากลายเป็นเหมือนของเชิงลบควบคุม. ฟื้นฟูระดับคอลลาเจนโดยรวมซึ่งอย่างอื่นลดลงตามวัยช่วยให้ริ้วรอยดีขึ้น28

cistanche anti-aging

รูปที่ 7 การวิเคราะห์การแสดงออกของยีนในไฟโบรบลาสต์ผิวหนังโดยใช้ RT-qPCR: (a) คอลลาเจนประเภท I, (b) MMP-1 และ (c) PGC-1a

การแสดงออกของ PGC-1a สูงสุดหลังจาก 8 ชั่วโมงสำหรับการรักษาทั้งหมด โดยอัตราการแสดงออกของ GA, TPPTTP, Gal–Pep และ Gal2–Pep เพิ่มขึ้น 2.06-, 1.{{6} }, 1.07- และ 2.05-เท่า ตามลำดับ อย่างไรก็ตาม ไม่เหมือนกับการรักษาอื่นๆ Gal2–Pep เพิ่ม PGC-1การแสดงออก 1.27-เท่าหลังจาก 24 ชั่วโมง PGC-1กควบคุมการสังเคราะห์และฤทธิ์ต้านอนุมูลอิสระของไมโทคอนเดรียและรายงานไปยังลดลงตามวัย.29–32 ดังนั้น Gal2–Pep จึงมีศักยภาพที่จะใช้เป็นสารต้านอนุมูลอิสระที่มีประสิทธิภาพซึ่งสามารถป้องกัน ROS ได้อย่างมีประสิทธิภาพ

เมื่อนำมารวมกัน Gal2–Pep จะเพิ่มการแสดงออกของ PGC-1a และคอลลาเจนเมื่อเทียบกับผลของ GA และ TPPTTP เพียงอย่างเดียว ในขณะที่การแสดงออกของ MMP-1 มีแนวโน้มลดลงจึงแสดงให้เห็นถึงศักยภาพในการใช้งานเครื่องสำอางต่อต้านริ้วรอย.

KSL26

4. บทสรุป

ในการศึกษานี้ Gal2–Pep ซึ่งได้รับการพัฒนาโดยการรวม GA และเปปไทด์ TPPTTP นั้นแสดงผลลัพธ์ที่ยอดเยี่ยมฤทธิ์ต้านอนุมูลอิสระและกระตุ้นการทำงานของไมโทคอนเดรียในเซลล์ผิว ผลการทดสอบความมีชีวิตของเซลล์แสดงให้เห็นอย่างชัดเจนว่า Gal2–Pep ไม่มีผลกระทบต่อเซลล์ผิวหนัง Gal2–Pep ยังแสดงให้เห็นถึงสารต้านอนุมูลอิสระที่ขึ้นกับขนาดยาและกิจกรรมการกำจัดอนุมูลอิสระด้วยกิจกรรมการไล่ ROS มากกว่า 50 เปอร์เซ็นต์แม้หลังจากนั้นr ที่เก็บข้อมูลสำหรับสี่สัปดาห์ที่อุณหภูมิห้อง นอกจากนี้ยังได้รับอิทธิพลในเชิงบวก MmP และเพิ่มการแสดงออกของ PGC-1a, ที่ควบคุมการสังเคราะห์ไมโทคอนเดรียและมีสารต้านอนุมูลอิสระอีเอฟฯลฯโดยการกำจัดอนุมูลอิสระภายในผิวหนัง กัล2–ห้าวหาญอีกด้วยเพิ่มการแสดงออกของคอลลาเจนชนิดที่ 1 และลดอีลาสเตสกิจกรรมและการแสดงออกของ MMP-1 ซึ่งพิสูจน์ว่ามีอยู่จริงสัญญาสำหรับใช้ในเครื่องสำอางต่อต้านริ้วรอย.

ผลประโยชน์ทับซ้อน

ไม่มีความขัดแย้งที่จะประกาศ

กิตติกรรมประกาศ

การศึกษานี้ได้รับการสนับสนุนโดยทุนจาก Korea Industrial Complex Corp. (KICOX, NTIS No. 1415165722) และ Inha University Research Grant

อ้างอิง

1 P. Brenneisen, H. Sies และ K. Scharffffetter-Kochanek, Ann นิวยอร์กอคาเดมี วิทย์, 2545, 973, 31–43.

2 A. Trifunovic, A. Wredenberg, M. Falkenberg, JN Spelbrink,AT Rovio, CE Bruder, M. Bohlooly-Y, S. Gldl ¨of, A. Oldfors,R. Wibom, J. T¨ornell, HT Jacobs และ NG Larsson

ธรรมชาติ, 2547, 429, 417–423.

3 SB Khan, CS Kong, JA Kim และ SK Kim, เทคโนโลยีชีวภาพ Bioprocess Eng., 2010, 15, 191–198.

4 เอช.-เจ. คิม, เค.-ดับเบิลยู. คิม, B.-P. ยูและฮ.-ย. Chung ฟรีแรดิคัลไบโอล พ., 2543, 28, 683–692.

5 M. Erden Inal, A. Kahraman และ T. Koken, Clin Exp.Dermatol., 2001, 26, 536–539.

6 HS Jin, SY Park, JY Kim, JE Lee, HS Lee, NJ Kang และ DW Lee, เทคโนโลยีชีวภาพ Bioprocess Eng., 2019, 24, 240–249.

7 เอช. มาซากิ, เจ. เดอร์มาทอล. วิทย์, 2553, 58, 85–90.

8 TSA Thring, P. Hili และ DP Naughton, BMC Complementary Altern พ., 2009, 9, 27.

9 L. Quiles-Carrillo, S. Montava-Jord a, T. Boronat, C. Sammon, R. Balart และ S. Torres-Giner, Polymers, 2019, 12, 31. 10 DH Park, DH Jung, SJ Kim, SH Kim และ KM Park

BMC Biochem., 2014, 15, 4–10. BMC Biochem., 2014, 15, 4–10.

11 YJ Cheng, GF Luo, JY Zhu, XD Xu, X. Zeng, DB Cheng, YM Li, Y. Wu, XZ Zhang, RX Zhuo และ F. He, ACS Appl แม่ อินเทอร์เฟซ, 2015, 7, 9078–9087

12 H. Lee, ATE Vilian, JY Kim, MH Chun, JS Suh,HH Seo, SH Cho, IS Shin, SJ Kim, SH Park,Y.-K. Han, JH Lee และ YS Huh, RSC Adv., 2017, (48), 30205–30213

13 Y. Kong, C. Xu, ZL He, QM Zhou, J. Bin Wang, ZY Li และ X. Ming, Peptides, 2014, 53, 70–78

14 H. Kim, JS Kim, YG Kim, Y. Jeong, JE Kim, NS Paek และ CH Kang, เทคโนโลยีชีวภาพ Bioprocess Eng., 2020, 25, 421–430.

15 MA Frezzini, F. Castellani, N. De Francesco, M. Ristorini และ S. Canepari, บรรยากาศ, 2019, 10(12), DOI: 10.3390/atmos10120816

16 A. Rengaraj, P. Puthiaraj, NS Heo, H. Lee, SK Hwang,S. Kwon, WS Ahn และ YS Huh, Colloids Surf., B, 2017,160, 1–10

17 T. Miyazawa, T. Otomatsu, Y. Fukui, T. Yamada และ S. Kuwata, J. Chem สค., เคมี. ชุมชน, 1988, 419–420.

18 SM Mali, M. Ganesh Kumar, MM Katariya และ HN Gopi, Org. ไบโอมอล เคมี, 2014, 12, 8462–8472 19 T. Michels, R. D ¨olling, U. Haberkorn และ W. Mier, Org. เลท., 2012, 14, 5218–5221.

20 P. Song, W. Du, W. Li, L. Zhu, W. Zhang, X. Gao, Y. Tao และ F. Ge, Nanomater นาโนเทคโนโลยี, 2020, 10, 1–10.

21 M. De Zotti, B. Biondi, Y. Park, K.-S. Hahm, M. Crisma, C. Toniolo และ F. Formaggio, Amino Acids, 2012, 43, 1761–1777

22 Z. Zhai, K. Xu, L. Mei, C. Wu, J. Liu, Z. Liu, L. Wan และ W. Zhong, So Matter, 2019, 15, 8603–{{4 }}.

23 DJ Tobin, J. Tissue Viability, 2017, 26, 37–46

24 M. Schieber และ NS Chandel, Curr. ไบโอล., 2014, 24, 453–462.